CN102631662B - 一种保肝、缓解疲劳的组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种对化学性肝损伤有辅助保护功能、缓解体力疲劳的组合物及其制备方法质量控制方法,基础组方为牡蛎提取物8~12g、大豆肽粉10~20g、左旋肉碱1~2g、牛磺酸0.3~0.5g、葡萄糖酸锌0.078~0.085g、维生素B60.002~0.005g、维生素C 1~2g、果葡糖浆80~121.5g、蜂蜜50~100g、可溶性膳食纤维20~30g、β-环糊精1~3g、薄荷香精0.6~0.8ml。并首创植物蛋白酶提取技术,使牡蛎中富含的活性成分得以有效释放。该组合物以多肽、牛磺酸及左旋肉碱作为其功效成分,即质量控制指标。有效的去除了氨基酸类成分的干扰,保证了结果的准确性。
Description
技术领域
本发明涉及一种对化学性肝损伤有辅助保护功能、缓解体力疲劳的组合物及其制备方法和质量控制方法,尤其是涉及一种牡蛎大豆肽肉碱口服液。
背景技术
随着科技的飞速发展和营养知识的普及,以及人均收入水平的增加和消费水平的提高,人类对于食品的要求已经从温饱过渡到了营养水平,天然、健康、营养、安全已经成为21世纪食品工业发展的主要议题。
牡蛎又称蚝、海蛎子等,是一种常见的海洋贝类动物,属软体动物门,瓣鳃纲(Lamellibranchia),牡蛎科(Ostreidae),牡蛎属。世界沿海各国几乎都产。目前已发现该属约有100多种,我国沿海已定名的有20余种,主要有近江牡蛎(Ostrea rivulars Gould),密鳞牡蛎(Ostrea dense lamosa Lischke),长牡蛎(Ostreagigas Tharm-berg),褶牡蛎(Osrera plicatula Gmelin),花缘牡蛎(Ostreacircumpicta Pilsbry),大连湾牡蛎(Ostrea talientoharmensis Crosse)等。牡蛎肉质鲜嫩,营养丰富,是一种营养价值极高的食品。目前,全世界年产牡蛎100万吨左右,年总贸易额9000万美元,是沿海国家的一种重要的海洋经济贝类。
现代研究表明,牡蛎肉中含有丰富的糖原、蛋白质、氨基酸、牛磺酸、人体必需的微量元素、维生素、EPA、DHA和较多的具有重要生理活性的不饱和脂肪酸。牡蛎功能活性物质、微量元素、有毒重金属的研究一直以来都是国际海洋功能物质研究的重点。近年来,美国、欧洲、日本等国家采用现代生物技术、食品加工高新技术、新型化学化工等技术手段,对牡蛎中功能活性成分进行研究开发,研制成功了以牡蛎为主要成分的保健食品或第三代功能性食品,已经生产出了胶囊型、液体型、片剂型等各种类型的产品。这些产品不仅具有相当的营养或治疗价值,而且也具有极高的经济和社会效益。美国的牡蛎功能食品和疗效品等营养辅助食品已经形成了一个巨大的产业,而欧洲也出现了以牡蛎中的牛磺酸、谷胱甘肽等物质为强化的功能性食品。日本的牡蛎制品的研究走在世界的前列,自20世纪60年代中叶就开始研究牡蛎的营养和疗效功能;70年代,日本临床有限公司率先开发出具有显著医疗保健效用的牡蛎提取物产品,带动了日本相关企业的迅速崛起。目前日本市场上的牡蛎功能食品和疗效品的品种达70多种,年产值在200亿日元以上,产生了显著的经济和社会效益。此外,美国的FOX Chase癌中心及迈阿密大学、法国的巴黎大学、日本庆应大学等研究机构一直致力于牡蛎肉提取物的深入研究。
我国古代《神农本草经》、《名医别录》、《本草纲目》、《海药本草》等医疗史籍中已经有对于牡蛎药用价值的记载。运用现代科技手段,牡蛎资源在普通食品、保健食品、功能食品、医药、化学化工等领域得到了广泛的应用。综合生物学、营养学、食品科学的研究进展,新型牡蛎食品和医药品的研究,是未来牡蛎制品开发的方向。
左旋肉碱是一种广泛存在于机体组织内类似维生素的物质,其结构近似于氨基酸。王京钟等研究了左旋肉碱对人体运动时的无氧阈、呼吸商、每博耗氧量等的影响,间接证明有抗疲劳作用。何来英等从运动耐力、能源物质和代谢产物方面研究证明左旋肉碱能提高机体耐力、延缓疲劳的产生,是一种新型的营养保健食品,解放军后勤部军需装备研究所研制的添加大豆低聚肽和左旋肉碱的功能性饮料,其中大豆低聚肽易于消化,能提供全面高效的蛋白营养,而左旋肉碱迅速分解脂肪、释放能量,恢复体力,获得较好的实验效果,并在部队军事活动中得到推广应用。
牛磺酸是人体内的一种特殊氨基酸,虽不参与蛋白质的合成,但具有多种生理功能,牛磺酸是细胞内含量最丰富的含磺酸基的β自由氨基酸,具有维持组织渗透压、抗脂质过氧化、保护胰岛β细胞等生物学效应,从而发挥护肝脏作用;研究表明,牛磺酸可促进胆酸的合成、分泌和排泄,通过加速或对肝细胞极低密度脂蛋白分泌的保护作用,防止肝细胞发生脂肪性变。
目前,尚没有以牡蛎提取物、左旋肉碱、牛磺酸为主要成分的产品。
发明内容
本发明的目的是提供一种保肝、缓解疲劳的组合物及其制备方法,该组合物以牡蛎提取物、大豆肽粉、左旋肉碱、牛磺酸、葡萄糖酸锌、维生素B6、维生素C、果葡糖浆、蜂蜜、可溶性膳食纤维、β-环糊精、薄荷香精为原料,经混合、配制、过滤、灌装、湿热灭菌、包装等主要加工工序制得,以多肽、牛磺酸及左旋肉碱作为其功效成分及质量控制指标。
本发明的护肝、缓解疲劳组合物,其基础组方为:牡蛎提取物8~12g、大豆肽粉10~20g、左旋肉碱1~2g、牛磺酸0.3~0.5g、葡萄糖酸锌0.078~0.085g、维生素B60.002~0.005g、维生素C1~2g、果葡糖浆80~121.5g、蜂蜜50~100g、可溶性膳食纤维20~30g、β-环糊精1~3g、薄荷香精0.6~0.8ml。
优选的基础组方为:牡蛎提取物10g、大豆肽粉10g、左旋肉碱1g、牛磺酸0.5g、葡萄糖酸锌0.078g、维生素B60.005g、维生素C 1g、果葡糖浆121.5g、蜂蜜50g、可溶性膳食纤维30g、β-环糊精3g、薄荷香精0.8ml。
上述组方为基础组方,在生产时,可按照相应的重量比例增大或减少,如基础组方的1倍、2倍、10倍等。
本发明的护肝、缓解疲劳组合物是通过以下方法制备的,具体步骤如下:
1)称取牡蛎提取物粉末,加入60℃的6倍重量的蒸馏水,完全溶解。称取重量为牡蛎提取物12%的木瓜蛋白酶加入牡蛎溶液中,搅拌均匀,用酸度计测定pH值,并用醋酸调节pH值至5.9;将上述溶液放于60℃的水浴锅中加热,恒温酶解80min,最后,加入重量均为牡蛎提取物0.001倍的苹果酸和牛磺酸各等份;取出酶解液,放到另一水浴锅中加热到90℃~100℃,灭酶30分钟;
2)将上述牡蛎提取物酶解液与所述原料(除牡蛎提取物外)按比例混合,补水至1000ml,配制、过滤、灌装、湿热灭菌、包装,即得。
本发明的护肝、缓解疲劳组合物是以多肽、牛磺酸及左旋肉碱作为其功效成分及质量控制指标。该产品特征为多肽≥900mg/100ml左旋肉碱≥60mg/100ml牛磺酸≥50mg/100ml。
本发明的护肝、缓解疲劳组合物优选口服液剂型。因为,牡蛎酶解液、大豆肽粉等为蛋白质类物质,极易吸潮,做成胶囊、片剂、粉剂都不利于产品的贮藏;而且该产品的功能是缓解体力疲劳、对化学性肝损伤有辅助保护作用,主要是以小分子肽直接吸收,达到迅速缓解疲劳、护肝作用。因此,制成口服液是一种最直接吸收、作用最迅速的剂型。
本发明组合物及其制备方法和质量控制方法具有以下优点:
1)由牡蛎、大豆多肽、左旋肉碱组成的新型复合营养组合,能有效的保护化学肝损伤,同时并能缓解体力疲劳。
2)首创植物蛋白酶提取技术,使牡蛎中富含的活性成分得以有效释放,制备方法操作简单,成本低廉;安全可靠,不会造成环境污染。
3)多肽的含量测定,有效的去除了氨基酸类成分的干扰,保证了结果的准确性。可为多肽、蛋白、氨基酸类成分的含量研究提供参考。
具体实施方式
以下所述是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也视为本发明的保护范围。
实施例一牡蛎大豆肽肉碱口服液的制备
称取牡蛎提取物(牡蛎提取物粉末按照中国专利94101124.0公开的方法制备)12g,加60℃的蒸馏水72ml,完全溶解。称取木瓜蛋白酶1.44g加入牡蛎溶液中,搅拌均匀,用酸度计测定pH值,并用醋酸调节pH值至5.9,将上述溶液放于60℃的水浴锅中加热,恒温酶解80min,最后,加入苹果酸和牛磺酸各0.012克。取出酶解液,放到另一水浴锅中加热到90℃100℃,灭酶30分钟
将上述牡蛎提取物酶解液与大豆肽粉10g、左旋肉碱2g、牛磺酸0.3g、葡萄糖酸锌0.085g、维生素B60.002g、维生素C2g、果葡糖浆80g、蜂蜜100g、可溶性膳食纤维30g、β-环糊精2g、薄荷香精0.6ml按比例混合,补水至1000ml,配制、过滤、灌装、湿热灭菌、包装,即得。
实施例二牡蛎大豆肽肉碱口服液的制备
称取牡蛎提取物8g,加60℃的蒸馏水48ml,完全溶解。称取木瓜蛋白酶0.96g加入牡蛎溶液中,搅拌均匀,用酸度计测定pH值,并用醋酸调节pH值至5.9,将上述溶液放于60℃的水浴锅中加热,恒温酶解80min。最后,加入苹果酸和牛磺酸各0.008克。取出酶解液,放到另一水浴锅中加热到90℃~100℃,灭酶30分钟。
将上述牡蛎提取物酶解液与大豆肽粉10g、左旋肉碱1g、牛磺酸0.4g、葡萄糖酸锌0.08g、维生素B60.004g、维生素C2g、果葡糖浆100g、蜂蜜70g、可溶性膳食纤维20g、β-环糊精3g、薄荷香精0.8ml按比例混合,补水至1000ml,配制、过滤、灌装、湿热灭菌、包装,即得。
实施例三牡蛎大豆肽肉碱口服液的制备
称取牡蛎提取物10g,加60℃的蒸馏水60ml,完全溶解。称取木瓜蛋白酶1.2g加入牡蛎溶液中,搅拌均匀,用酸度计测定pH值,调节pH为5.9,将上述溶液放于60℃的水浴锅中加热,恒温酶解80min,最后,加入苹果酸和牛磺酸各0.01克。取出酶解液,放到另一水浴锅中加热到90℃~100℃,灭酶30分钟。将上述牡蛎提取物酶解液与大豆肽粉20g、左旋肉碱2g、牛磺酸0.5g、葡萄糖酸锌0.08g、维生素B60.005g、维生素C1g、果葡糖浆110g、蜂蜜60g、可溶性膳食纤维20g、β-环糊精1g、薄荷香精0.6ml按比例混合,补水至1000ml,配制、过滤、灌装、湿热灭菌、包装,即得。
实施例四牡蛎大豆肽肉碱口服液的制备
称取牡蛎提取物10g,加60℃的蒸馏水60ml,完全溶解。称取木瓜蛋白酶1.2g加入牡蛎溶液中,搅拌均匀,用酸度计测定pH值,并用醋酸调节pH值至5.9;将上述溶液放于60℃的水浴锅中加热,恒温酶解80min,最后,加入苹果酸和牛磺酸各0.01克。取出酶解液,放到另一水浴锅中加热到90℃~100℃,灭酶30分钟。将上述牡蛎提取物酶解液与大豆肽粉10g、左旋肉碱1g、牛磺酸0.5g、葡萄糖酸锌0.078g、维生素B60.005g、维生素C1g、果葡糖浆121.5g、蜂蜜50g、可溶性膳食纤维30g、β-环糊精3g、薄荷香精0.8ml按比例混合,补水至1000ml,配制、过滤、灌装、湿热灭菌、包装,即得。
实施例五牡蛎大豆肽肉碱口服液的制备
称取牡蛎提取物5000g,加60℃的蒸馏水30000ml,完全溶解。称取木瓜蛋白酶600g加入牡蛎溶液中,搅拌均匀,用酸度计测定pH值,并用醋酸调节pH值至5.9;将上述溶液放于60℃的水浴锅中加热,恒温酶解80min,最后,加入苹果酸和牛磺酸各5克。取出酶解液,放到另一水浴锅中加热到90℃~100℃,灭酶30分钟。将上述牡蛎提取物酶解液与大豆肽粉5000g、左旋肉碱500g、牛磺酸250g、葡萄糖酸锌39g、维生素B62.5g、维生素C500g、果葡糖浆60750g、蜂蜜25000g、可溶性膳食纤维15000g、β-环糊精1500g、薄荷香精400ml按比例混合,补水至500000ml,配制、过滤、灌装、湿热灭菌、包装,即得。
实施例六牡蛎大豆肽肉碱口服液的制备
称取牡蛎提取物40000g,加60℃的蒸馏水24000ml,完全溶解。称取木瓜蛋白酶480g加入牡蛎溶液中,搅拌均匀,用酸度计测定pH值,并用醋酸调节pH值至5.9;将上述溶液放于60℃的水浴锅中加热,恒温酶解80min,最后,加入苹果酸和牛磺酸各4克。取出酶解液,放到另一水浴锅中加热到90℃~100℃,灭酶30分钟。将上述牡蛎提取物酶解液与大豆肽粉4000g、左旋肉碱400g、牛磺酸200g、葡萄糖酸锌31.2g、维生素B62g、维生素C400g、果葡糖浆48600g、蜂蜜20000g、可溶性膳食纤维12000g、β-环糊精1200g、薄荷香精320ml按比例混合,补水至1000ml,配制、过滤、灌装、湿热灭菌、包装,即得。
实施例七牡蛎大豆肽肉碱口服液中多肽、牛磺酸及左旋肉碱含量测定
分别取实施例一、二、三、四中制备的牡蛎大豆肽肉碱口服液,采用凯式定氮法测定样品中的酸溶蛋白质,甲醛法测定游离性氨基酸态氮含量,计算粗多肽含量,并测定其中左旋肉碱及牛磺酸的含量。
多肽的含量测定方法,具体步骤如下:
1)酸溶蛋白质的测定方法(凯式定氮法):
量取样品10.0ml,加入10.0ml 30%的三氯乙酸溶液,混合均匀,静置5min。用移液管取10.0ml于离心管中,在4000r/min下离心10分钟,取全部上清液,加入消化管中,往消化管中滴加催化剂(硫酸钾∶硒粉=99∶1)适量,摇匀,再加入浓硫酸20ml,消化2小时。取出定容,取20ml消化液于蒸馏管中蒸馏,用2%硼酸溶液吸收,吸收液用0.1mol/L的盐酸滴定。
空白对照实验:不加样品消化,其他操作与样品相同。
计算公式:
X1-酸溶蛋白质含量g/100g
V1-样液定氮所耗盐酸标准溶液的量,ml;
V2-空白对照定氮所耗盐酸标准溶液的量,ml;
C-盐酸标准溶液的浓度,mol/L;
M-酶解时所称样品的质量,g。
2)游离性氨基酸态氮含量测定方法:将样品摇匀后过水性滤膜,取滤液于氨基酸自动分析仪上测试,以外标法测定样品的游离氨基酸含量。
3)多肽含量计算:
样品中多肽的含量=酸溶蛋白质含量-游离氨基酸含量
左旋肉碱的测定:按《保健食品检验与评价技术规范》中“保健食品中肉碱的测定”规定的方法测定。
牛磺酸的测定:按GB/T 5009.169《食品中牛磺酸的测定》规定的方法测定。
测定结果:
可见,该产品特征为多肽≥900mg/100ml左旋肉碱≥60mg/100ml牛磺酸≥50mg/100ml。
实施例八牡蛎大豆肽肉碱口服液对化学性肝损伤有辅助保护作用
1试验条件
1.1受试样品:实施例四制得样品牡蛎大豆肽肉碱口服液,淡黄色液体,50ml/瓶,玻璃瓶装,推荐日服量为每次50ml,每日2次,按60公斤成人体重计算人体推荐日服量为1.6667ml/kg BW。本实验使用由厂家提供的8.35倍浓缩液。
1.2剂量:设1.0ml、2.0ml、6.0ml/kg BW三个剂量组(8.35倍浓缩液),为人体推荐日服量的5、10、30倍,相当于原液的8.3ml、16.7ml、50.0ml。另设空白对照组、乙醇对照组。剂量如下:
空白对照组0.0ml/kg BW
乙醇对照组0.0ml/kg BW
低剂量组1.0ml/kg BW,相当于推荐日服量的5倍。
中剂量组2.0ml/kg BW,相当于推荐日服量的10倍。
高剂量组6.0ml/kg BW,相当于推荐日服量的30倍。
1.3受试物制备:每日量取12ml受试样品的8.35倍浓缩液用纯净水调配至40.0ml制成为高剂量组受试物,然后量取5.0、10.0ml高剂量组受试物,用纯净水调配至30.0ml制成为低、中剂量组受试物。
1.4给受试物途径:各剂量组按每日给一次,每次0.20ml/10g BW灌胃给予受试物,空白对照组和乙醇对照组按同等剂量灌胃给予纯净水。
1.5动物:SPF级昆明种小白鼠,雄性,6~8周龄,体重:18~22g,由广东省医学实验动物中心提供,合格证号SYXK(粤)2003-0002。颗粒饲料亦由广东省医学实验动物中心提供。
1.6动物实验室:SPF级,实验动物使用许可证号:SYXK(粤)2003-0011。室温22+2℃,湿度60~80%。
1.7仪器及试剂:日立7060全自动生化仪。MDA、GSH检测试剂盒由南京建成提供。TG试剂盒由中生北控生物技术股份有限公司提供。
2试验方法
2.1试验动物在实验室条件下适应三天后,随机分成空白对照组、乙醇对照组及低、中、高三个剂量组,每组10只小鼠。三个剂量组每天分别按不同剂量灌胃给予受试物,空白对照组和乙醇对照组按同等剂量灌胃给予纯净水,每周称重动物,以调整给受试样品量,共30天。试验结束时各剂量组和乙醇对照组以12ml/10g BW剂量一次灌胃给予50%乙醇,空白对照组灌胃给予同等容量纯净水,各组动物禁食16小时后处死,取肝组织制成肝匀浆,测定丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、甘油三酯(TG),并取肝脏左叶冰冻切片,苏丹III染色,光镜下观察病理变化。
2.2统计:统计资料采用SPSS 11.0统计软件包进行统计分析,统计方法采用方差分析和秩和检验。
3实验结果
3.1牡蛎大豆肽肉碱口服液对受试动物体重的影响:由表1可见,各剂量组与空白对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05),表明本受试样品对动物体重无影响。
3.2牡蛎大豆肽肉碱口服液对受试动物肝组织MDA、TG含量的影响:由表2可见,乙醇对照组MDA、TG含量与空白对照组比较升高,差异有显著性意义(P<0.05),表明乙醇肝损伤模型成立;各剂量组TG含量与乙醇对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05),表明TG结果阴性;中、高剂量组MDA含量与乙醇对照组比较降低,差异有显著性意义(P<0.01),表明MDA结果阳性。
注:1.△表示乙醇对照组与空白对照组比较P<0.05,△△表示P>0.05(T检验)
2.**表示剂量组与乙醇对照组比较P<0.01(方差分析)
3.3牡蛎大豆肽肉碱口服液对受试动物肝组织GSH含量的影响:由表3可见,乙醇对照组GSH含量与空白对照组比较降低,差异有显著性意义(P<0.05),表明乙醇肝损伤模型成立;中、高剂量组GSH含量与乙醇对照组比较升高,差异有显著性意义(P<0.05),表明GSH结果阳性。
注:1.△表示乙醇对照组与空白对照组比较P<0.05(T检验)
2.*表示剂量组与乙醇对照组比较P<0.05(方差分析)
3.4牡蛎大豆肽肉碱口服液对受试动物肝脏病理变化的影响:由表4可见,乙醇对照组和各剂量组动物的肝脏病理改变以肝细胞脂肪变性为主,病变部位主要在肝小叶周围。乙醇对照组与空白对照组比较,有明显的肝脏损伤(肝细胞脂肪变性),经统计学检验,差异有显著性意义(P<0.05),表明乙醇肝损伤模型成立。低、中、高剂量组的肝细胞变性较乙醇对照组减轻,差异有显著性意义(P<0.05),实验动物肝脏病理结果阳性。
表4牡蛎大豆肽肉碱口服液对受试动物肝脏病理变化的影响
注:肝细胞内脂滴散在,稀少为0分;含脂滴的肝细胞不超过整个组织切片的1/4为1分;含脂滴的肝细胞不超过整个组织切片的1/2为2分;含脂滴的肝细胞不超过整个组织切片的为3分;肝组织几乎被脂滴代替为4分。
1.肝脏脂肪变性病理评分采用秩和检验。
2.△表示乙醇对照组与空白对照组比较P<0.05(Manna-Whitney Test)
3.*表示剂量组与乙醇对照组比较P<0.05,**表示P<0.01(Manna-Whitney Test)
4.小结:
对SPF级昆明种小鼠分别给予牡蛎大豆肽肉碱口服液8.35倍浓缩液,剂量为1.0、2.0、6.0ml/kg BW,相当于8.3、16.7、50.0ml/kg BW原液,相当于人体日服推荐量的5、10、30倍,另设空白对照组及乙醇对照组,共30天,试验结束时各剂量组和乙醇对照组以12ml/kg BW剂量一次灌胃给予50%乙醇,空白对照组灌胃给予相同剂量纯净水,各组动物禁食16小时后处死进行生化及肝脏病理学检验。结果与乙醇对照组比较显示:
4.1受试样品可降低中、高剂量组肝组织MDA含量,实验结果阳性。
4.2受试样品可增加中、高剂量组肝组织GSH含量,实验结果阳性。
4.3受试样品未能降低肝组织TG含量,实验结果阴性。
4.4受试样品各剂量组的肝细胞脂肪变性减轻,动物实验肝脏病理结果阳性。
根据上述生化与病理检验结果,依据卫生部《保健食品检验与评价技术规范(2003版)》的判定标准判断,牡蛎大豆肽肉碱口服液对化学性肝损伤具有辅助保护作用。
实施例九牡蛎大豆肽肉碱口服液对缓解体力疲劳作用
1材料
1.1受试样品:实施例四制得样品牡蛎大豆肽肉碱口服液,淡黄色液体,50ml/瓶,玻璃瓶装,推荐日服量为每次50ml,每日2次,按60公斤成人体重计算人体推荐日服量为1.6667ml/kg BW。
1.2剂量:本实验设低、中、高三个剂量组,采用由厂家提供的8.35倍浓缩液。设1.0ml、2.0ml、6.0ml/kg BW三个剂量组,为人体推荐日服量的5、10、30倍。另设纯水对照组。剂量如下:
纯水对照组纯净水
低剂量组1.0ml/kg BW,相当于原液8.3ml。
中剂量组2.0ml/kg BW,相当于原液16.7ml。
高剂量组6.0ml/kg BW,相当于原液50.0ml。
1.3受试物制备:每日量取24.0ml受试样品的8.35倍浓缩液,用纯净水调配至40.0ml制成高剂量组受试物,然后量取5.0、10.0ml高剂量组受试物,用纯净水调配至30.0ml制成为低、中剂量组受试物。
1.4给受试物途径:各剂量组按每日给一次,每次0.10ml/10g BW灌胃给予受试物,纯水对照组按同等容量灌胃给予纯净水。
1.5动物:SPF级昆明种雄性小白鼠,6~8周龄,体重:18~22g,由广东省医学实验动物中心提供(动物生产许可证号:SYXK(粤)2003-0002,合格证编号:N.O.0034400)。颗粒饲料由广东省医学实验动物中心提供。
1.6动物实验室条件:动物实验室为SPF级,实验动物使用许可证号:SYXK(粤)2003-0011。室温22±2℃,湿度60~80%。
1.7仪器:游泳箱(50cm×50cm×40cm),上海7230分光光度计,美国IKA生产的T25高速剪切分散器,日立7060全自动生化仪。
1.8试剂:测定尿素氮用酶法试剂盒,由中生北控生物科技股份公司提供;测定乳酸用LACTATE~PAP酶法试剂盒,由北京利德曼生化技术公司提供。其他所用试剂为AR级,从市场上购买。
2试验方法
2.1试验方法
试验动物在实验室条件下免疫三天后,随机分成4批,每批按剂量设计分成4组,每组12只动物。每日经口灌胃给予牡蛎大豆肽肉碱口服液受试样品,给样量根据动物每周体重变化调整,共30天。试验结束时测定小鼠负重游泳时间、尿氮素含量、血乳酸曲线下面积和肝糖原含量。
2.1.1负重游泳试验
给予牡蛎大豆肽肉碱口服液受试样品30天,末次给予受试物30min后,将尾根部负重5%体重铅皮的小鼠置于水深30cm、水温25±0.5℃的游泳箱中游泳,记录小鼠自游泳开始至死亡的时间,即小鼠负重游泳时间。
2.1.2尿素氮、血乳糖及肝糖原测定:
尿素氮测定:给予牡蛎大豆肽肉碱口服液受试样品30天,末次给予受试物30min后,各组无负重的小鼠分别在水温30℃水中游泳90min,休息60min后采眼球血。4℃冰箱放置3小时后分离血清,用酶法试剂盒测定尿素氮。
肝糖原测定:采用蒽酮法。末次给予受试物30min后,准确称取100mg肝,加入8mlTCA夜,每管匀浆1min,以3000转/min离心15min,取上清液1ml,加入95%乙醇4ml,充分混匀,37℃水浴3h,用2ml蒸馏水溶解糖原,振荡直至糖原完全溶解后将10ml蒽酮试剂加入各管,浸入废水15min,冷却后用上海7230分光光度计(波长620nm)比色测定。按公式计算肝糖原含量。
血乳酸含量测定:给予牡蛎大豆肽肉碱口服液受试样品30天,末次给予受试物30min后,第一次采眼球血后即放于水温30℃游泳30min,第二次采眼球血,然后停止安静20min,第三次采眼球血,用LACTATE~PAP试剂盒分别测定游泳前乳酸和游泳后0min,20min的乳酸,根据公式计算三时点乳酸曲线下面积。
血乳酸曲线下面积=5×(游泳前血乳酸值+3×游泳后0min的血乳酸值+2×游泳后休息20min的血乳酸值)
2.2统计:统计资料采用SPSS 11.0统计软件包进行方差分析。
3实验结果
3.1牡蛎大豆肽肉碱口服液对小鼠负重游泳时间的影响:由表5可见,各剂量组的小鼠负重游泳时间延长,其中中、低剂量组与纯水对照组比较,差异有极显著性意义(P<0.01),试验结果阳性。
注:各剂量组与纯水对照组比较,**为P<0.01(q检验)
3.2牡蛎大豆肽肉碱口服液对小鼠运动后血清尿素氮含量的影响:由表6可见,各剂量组的血清尿素氮水平降低,其中中剂量组与纯水对照组比较,差异有显著性意义(P<0.01),试验结果阳性。
注:各剂量组与纯水对照组比较,**为P<0.01(q检验)
3.3牡蛎大豆肽肉碱口服液对小鼠运动前、后乳酸含量的影响:由表7、8可见,各剂量组的血乳酸曲线下面积减少,其中中、低剂量组与纯水对照组比较,差异有显著性意义(P<0.05),高剂量组与纯水对照组比较,差异有极显著性意义(P<0.01),试验结果阳性。
注:各剂量组与纯水对照组比较,*为P<0.05,**为P<0.01(q检验)
3.4牡蛎大豆肽肉碱口服液对小鼠肝糖原的影响:由表9,各剂量组的肝糖原含量明显增加,其中中剂量组与纯水对照组比较,差异有极显著性意义(P<0.01),试验结果阳性。
表9牡蛎大豆肽肉碱口服液对小鼠肝糖原的影响
注:各剂量组与纯水对照组比较,**为P<0.01(q检验)
3.5牡蛎大豆肽肉碱口服液对小鼠体重的影响:由以上可见,各剂量组与纯水对照组比较,始重、终重的差异均为显著性意义(P>0.05),表明受试样品对试验小鼠体重增长无明显影响。
4小结:
对SPF级昆明种小鼠经口每日分别给予1.0、2.0、6.0ml/kg BW牡蛎大豆肽肉碱口服液8.35倍浓缩液,相当于原液8.3、16.7、50.0ml/kg BW,为人体日服推荐量的5、10、30倍,另纯水对照组。试验时间共30天。结果显示:
4.1受试样品可延长小鼠负重游泳时间,试验结果为阳性。
4.2受试样品可降低小鼠运动后血清尿素氮水平,试验结果为阳性。
4.3受试样品可降低小鼠运动前后三时点乳酸曲线下面积,试验结果为阳性。
4.4受试样品可增加小鼠肝糖原的贮量,试验结果为阳性。
依据卫生部《保健食品检验与评价技术规范》(2003版)缓解体力疲劳的判定标准判断,牡蛎大豆肽肉碱口服液具有缓解体力疲劳功能。
Claims (4)
1.一种保肝、缓解疲劳的组合物,含有以下成分及用量:
牡蛎提取物 8~12g、大豆肽粉 10~20g、左旋肉碱 1~2g 、牛磺酸 0.3~0.5g、葡萄糖酸锌 0.078~0.085g、维生素B6 0.002~0.005g、维生素C 1~2g、果葡糖浆 80~121.5g、蜂蜜50~100g、可溶性膳食纤维 20~30g、β-环糊精 1~3g、薄荷香精 0.6~0.8ml;
所述组合物的制备方法包括以下步骤:
1)称取牡蛎提取物粉末,加入60℃的6倍重量的蒸馏水,完全溶解得牡蛎溶液;称取重量为牡蛎提取物12%的木瓜蛋白酶加入牡蛎溶液中,搅拌均匀,用酸度计测定pH值,并用醋酸调节pH值至5.9;将上述溶液放于60℃的水浴锅中加热,恒温酶解80min,最后,加入重量均为牡蛎提取物0.001倍的苹果酸和牛磺酸各等份;取出酶解液,放到另一水浴锅中加热到90℃~100℃,灭酶30分钟;
2)将上述牡蛎提取物酶解液与除牡蛎提取物外其他原料按比例混合,补水至1000ml,配制、过滤、灌装、湿热灭菌、包装。
2.如权利要求1所述的组合物,其特征在于:所述的组合物成分及用量是,牡蛎提取物 10g、大豆肽粉 10g、左旋肉碱 1g 、牛磺酸 0.5g、葡萄糖酸锌 0.078g、维生素B6 0.005g、维生素C 1g、果葡糖浆 121.5g、蜂蜜50g、可溶性膳食纤维 30g、β-环糊精3g、薄荷香精0.8ml。
3.如权利要求1或2所述的组合物在制备辅助保护化学性肝损伤药物中的用途。
4.如权利要求1或2所述的组合物在制备缓解体力疲劳药物中的用途。
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Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
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---|---|---|---|---|
CN1113765A (zh) * | 1994-06-23 | 1995-12-27 | 深圳海王药业有限公司 | 护肝解酒制剂的配制方法 |
CN101810336A (zh) * | 2010-04-30 | 2010-08-25 | 广东仙乐制药有限公司 | 一种咀嚼性软胶囊及其制备方法 |
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