CN102590436B - 一种藿香正气口服液中甘草的鉴别方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及藿香正气口服液中甘草的鉴别方法,包含供试品溶液的配制、对照药材溶液的配制、对照品溶液的配制和薄层色谱分析,供试品的取样量为5ml,用5ml水稀释;对照药材取样量为0.5g;供试品溶液制备和对照药材溶液制备过程中,在用正丁醇萃取前,加盐酸0.2ml酸化。现有鉴别方法无对应斑点或者斑点很微弱以至于无法看清,重现性较差,相同质量的产品不同人员不同实验室检验结果差异较大。与现有鉴别方法相比,本发明提供的鉴别方法有鉴别斑点清晰,重现性好,专属性强。

Description

一种藿香正气口服液中甘草的鉴别方法
技术领域
本发明涉及中成药中有效成分的质量控制方法,具体来说,是藿香正气口服液中甘草的鉴别方法。
背景技术
藿香正气散,是千古名方之一,功用:解表化湿,理气和中。主治:夏季和秋季外感风寒,内伤湿滞证,表现为发冷、头疼、呕吐、拉肚子,腹胀,舌苔很厚,为夏季感冒良方。
由传统中药藿香正气水改进而成的藿香正气口服液,是根据中医学理论制成的纯中药制剂,解表化湿,理气和中。用于外感风寒、内伤湿滞或夏伤暑湿所致的感冒,症见头痛昏重、胸膈痞闷、脘腹胀痛、呕吐泄泻;胃肠型感冒见上述证候者,口服,一次5~10ml,一日2次,现收载于《中国药典》2010年版一部。
藿香正气口服液的制备方法包括以下步骤:苍术80g、陈皮80g、厚朴(姜制)80g、白芷120g、茯苓120g、大腹皮120g、生半夏80g、甘草浸膏10g、广藿香油0.8ml、紫苏叶油0.4ml;制备方法是:取厚朴加60%乙醇加热回流1小时,取乙醇液备用;苍术、陈皮、白芷加水蒸馏,收集蒸馏液,蒸馏后的水溶液滤过,备用;大腹皮加水煎煮二次,滤过;茯苓加水煮沸后于80℃温浸二次,滤过;生半夏用水泡至透心后,另加干姜6.8g,加水煎煮二次,滤过。合并上述各滤液,浓缩至相对密度1.10~1.20,(50℃测),加入甘草浸膏,混匀,加入2倍量乙醇使沉淀,滤过,滤液与厚朴乙醇提取液合并,回收乙醇,加入广藿香油、紫苏叶油及上述蒸馏液,混匀,加水使全量成1025ml,用氢氧化钠溶液调节PH值至5.8~6.2,静置,滤过,灌装,灭菌,即得棕色的澄清液体;味辛、微甜。
目前藿香正气口服液甘草的鉴别方法是:取本品30ml,用乙醚振摇提取2次,每次10ml,弃去乙醚液,用水饱和的正丁醇振摇提取3次,每次10ml,合并正丁醇液,用水洗涤2次,每次10ml,弃去水液,正丁醇液蒸干,残渣加甲醇2ml使溶解,作为供试品溶液。另取甘草对照药材1g,加乙醚20ml,加热回流15分钟,滤过,弃去乙醚液,药渣挥干溶剂,加甲醇20ml,超声处理30分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加水20ml使溶解,用正丁醇振摇提取3次,同法制成对照药材溶液。再取甘草酸铵对照品,加甲醇制成每1ml含2mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验,吸取上述三种溶液,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以正丁醇-甲醇-氨溶液(8→10)(5∶1.5∶2)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(254nm)下检视。
执行该标准时发现,其方法重现性较差,相同质量的产品不同人员不同实验室检验结果差异较大,在与对照品色谱相应的位置上,无相同颜色的斑点或者斑点很微弱以至于无法看清。
甘草的鉴别方法有很多,举例如下:
中国专利申请200910168454.9(公开号为CN101991785A)公开了一种银翘解毒软胶囊药物及其制备方法与质量检测方法。其中甘草的鉴别方法为:取银翘解毒软胶囊内容物2-4g,加10-30%的盐酸10-30ml及三氯甲烷20-30ml,置水浴上回流0.5-1.5小时,放冷,分取三氯甲烷层,水浴蒸干,残渣加甲醇溶解并定容至5ml,作为供试品溶液;另取甘草次酸对照品,加甲醇制成每10ml含0.0mg的溶液,作为对照品溶液;照高效液相色谱法,用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,乙腈-0.1%磷酸溶液比例为60-80∶30为流动相,检测波长为240-260nm,理论板数按甘草次酸计算应不低于1000,分别取上述两种溶液各5-20μl进行测定,供试品色谱中应呈现与对照品保留时间相同的色谱峰。
中国专利申请200910211268.9(公开号为CN101897942A)公开了一种温脾益肾,泄浊祛瘀的药物组合物的检测方法,该发明中提供了甘草的检测方法:取相当于原药材5-15的温脾益肾、泄浊祛痰的药物组合物,加3ml盐酸和20ml氯仿,加热回流0.5-2小时,放冷,滤过,蒸干,残渣加无水乙醇溶解使其成1ml,作为供试品溶液,另取甘草对照药材0.5g,加3ml盐酸和20ml氯仿,加热回流0.5-2小时,放冷,滤过,蒸干,残渣加无水乙醇溶解使成1ml,作为对照药材溶液;再取甘草次酸对照品,加无水乙醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液;照薄层色谱法试验,吸取上述三种溶液各5μl,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上,以3-7∶8-15∶2-6∶0.4-0.8的石油醚-苯-醋酸乙酯-冰醋酸为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%磷钼酸乙醇溶液,在110℃加热至斑点显色清洗,置日光下检视,供试品色谱中,分别在对照药材和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色斑点。上述两种方法中,甘草使用了氯仿(即三氯甲烷)做溶剂进行的鉴别,用氯仿提取有阴性干扰,鉴别方法专属性差。
本发明就是为了克服上述缺陷,建立一种专属性强、重现性好的甘草的鉴别方法。
发明内容
本发明的目的是提供一种藿香正气口服液中甘草的鉴别方法。
本发明提供的藿香正气口服液中甘草的鉴别方法,包含供试品溶液的配制、对照药材溶液的配制、对照品溶液的配制和薄层色谱分析,其中供试品的取样量为5ml,用5ml水稀释;对照药材的取样量为0.5g;供试品溶液的制备和对照药材溶液的制备过程中,在用正丁醇萃取前,加盐酸0.2ml酸化。
本发明提供的藿香正气口服液中甘草的鉴别方法包括以下步骤:
1)取藿香正气口服液5ml,加水5ml,摇匀,用乙醚振摇提取2次,每次10ml,弃去乙醚液,加盐酸0.2ml,摇匀,用水饱和的正丁醇振摇提取3次,每次10ml,合并正丁醇液,用水洗涤2次,每次10ml,弃去水液,正丁醇液蒸干,残渣加甲醇2ml使溶解,作为供试品溶液;
2)另取甘草对照药材0.5g,加乙醚20ml,加热回流15分钟,滤过,弃去乙醚液,药渣挥干溶剂,加甲醇20ml,超声处理30分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加水10ml使溶解,加盐酸0.2ml,摇匀,用水饱和的正丁醇振摇提取3次,同法制成对照药材溶液;
3)再取甘草酸铵对照品,加甲醇制成每1ml含2mg的溶液,作为对照品溶液;
4)照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验,吸取上述三种溶液各4μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以正丁醇-甲醇-氨溶液(8→10)(5∶1.5∶2)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(254nm)下检视;
供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
本发明提供藿香正气口服液中的甘草的鉴别方法具有以下优点:
1、中国药典2010年版一部中公开的标准中:
1)取样量30ml,斑点严重拖尾;
2)因样品取样量减少至5ml,不利于萃取充分;
3)因为甘草对照药材用量由1g减少到0.5g点样量4μl,所以相当取对照药材0.5g点样量2μl。以对照药材(1g)溶液2μl及供试品溶液4μl点样分离效果比较好。故确定甘草对照药材(1g→2ml)溶液2μl,供试品(5ml→2ml)溶液4μl。为保持对照药材溶液和供试品溶液点样量一致,确定将甘草对照药材用量减少至0.5g,制成对照药材溶液2ml,点样4μl。
4)在用正丁醇萃取后的水溶液中,仍可检出甘草酸,说明正丁醇提取的不充分,会影响鉴别效果。
与中国药典2010年版一部中公开的标准相比,本发明提供的鉴别方法具有以下区别:
(1)将样品取样量由30ml减少至5ml,可明显减少斑点拖尾,说明原标准的取样量过大;
(2)增加了将样品溶液“加水5ml”稀释的步骤,加水后药液与氯仿接触面较大,可以充分萃取有效成分;
(3)将对照药材取样量由1g减少至0.5g;
(4)供试品溶液制备和对照药材溶液制备过程中,在用正丁醇萃取前,增加了“加盐酸0.2ml”酸化的步骤,在按照现行《中国药典》2010年版一部规定的方法基础上,仅在制备供试品溶液和对照药材溶液过程中,正丁醇萃取之前,将溶液加盐酸1ml使之酸化。结果表明:萃取后的水溶液中,甘草酸含量显著减少。
2、现有鉴别方法无对应斑点或者斑点很微弱以至于无法看清,重现性较差,相同质量的产品不同人员不同实验室检验结果差异较大。与现有鉴别方法相比,本发明提供的鉴别方法有鉴别斑点清晰,重现性好,专属性强。
附图说明
图1:藿香正气口服液中甘草的鉴别色谱,从左至右依次为:1、甘草酸铵对照品溶液4μl;2、甘草对照药材溶液①1μl;3、甘草对照药材溶液①2μl;4、甘草对照药材溶液①4μl;5、供试品溶液(太极11020087批)4μl;6、供试品溶液(亚东1107003批)①2μl;7、供试品溶液(亚东1107003批)①4μl;
图2:藿香正气口服液中甘草的鉴别色谱,从左至右依次为:1、甘草酸铵对照品溶液4μl;2、甘草对照药材溶液①2μl;3、甘草对照药材溶液②2μl;4、甘草对照药材溶液②4μl;5、供试品溶液(亚东1107003批)②1μl;6、供试品溶液(亚东1107003批)②2μl;7、供试品溶液(亚东1107003批)②4μl;
图3:藿香正气口服液中甘草的鉴别色谱,从左至右依次为:1、甘草酸铵对照品溶液4μl;2、甘草对照药材溶液③2μl;3、甘草对照药材溶液②2μl;4、供试品溶液(亚东1107003批)③2μl;5、供试品溶液(亚东1107003批)④2μl;
图4:藿香正气口服液中甘草的鉴别色谱,从左至右依次为:1、甘草酸铵对照品溶液4μl;2、甘草对照药材溶液③1μl;3、甘草对照药材溶液③2μl;4、甘草对照药材溶液③4μl;5、供试品溶液(亚东1107003批)③1μl;6、供试品溶液(亚东1107003批)③2μl;7、供试品溶液(亚东1107003批)③4μ;
图5:藿香正气口服液中甘草的鉴别色谱,从左向右依次为:1、甘草酸铵对照品溶液4μl;2、甘草对照药材溶液④4μl;3、供试品溶液(亚东1107003批)③4μl;4、供试品溶液(亚东1107003批)③4μl;5、供试品溶液(亚东1107003批)③4μl;6、藿香正气口服液阴性溶液4μl;
图6:藿香正气口服液中甘草的鉴别色谱,从左至右依次为:1、甘草酸铵对照品溶液4μl;2、甘草对照药材溶液④4μl;3、供试品溶液(亚东1107003批)③4μl;4、供试品溶液(亚东1107003批)③4μl;5、供试品溶液(亚东1107003批)③4μl;6、藿香正气口服液阴性溶液4μl;
图7:藿香正气口服液中甘草的鉴别色谱,从左至右依次为:1、甘草酸铵对照品溶液4μl;2、甘草对照药材溶液④4μl;3、藿香正气口服液(亚东1107003批)4μl;4、藿香正气口服液(亚东1107004批)4μl;5、藿香正气口服液(亚东1107005批)4μl;
图8:藿香正气口服液中甘草的鉴别色谱,从左至右依次为:1、甘草酸铵对照品溶液4μl;2、甘草对照药材溶液④4μl;3、藿香正气口服液(太极10121254批)4μl;4、藿香正气口服液(太极11020087批)4μl;5、藿香正气口服液(太极11050113)4μl。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明,但不用来限制本发明的范围。
实施例1:《中国人民共和国药典》2010年版一部1231页鉴别的(4)
1、试剂与试药
藿香正气口服液:北京亚东生物制药有限公司,批号为:1107003、1107004、1107005。太极集团重庆涪陵制药厂有限公司,批号:10121254、11020087、11050113。
对照品及对照药材:甘草酸铵对照品(供含量测定用,中国药品生物制品检定所提供)批号:110731-200615;甘草对照药材(供鉴别测定用,中国药品生物制品检定所提供),批号:120904-200914。
2、原鉴别方法:
1)取藿香正气口服液30ml,用乙醚振摇提取2次,每次10ml,弃去乙醚液,用水饱和的正丁醇振摇提取3次,每次10ml,合并正丁醇液,用水洗涤2次,每次10ml,弃去水液,正丁醇液蒸干,残渣加甲醇2ml使溶解,作为供试品溶液。
2)另取甘草对照药材1g,加乙醚20ml,加热回流15分钟,滤过,弃去乙醚液,药渣挥干溶剂,加甲醇20ml,超声处理30分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加水20ml使溶解,用正丁醇振摇提取3次,同法制成对照药材溶液。
3)再取甘草酸铵对照品,加甲醇制成每1ml含2mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验,吸取上述三种溶液,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以正丁醇-甲醇-氨溶液(8→10)(5∶1.5∶2)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(254nm)下检视。
结果:见附图1,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,无相同颜色的斑点或者斑点很微弱以至于无法看清。
(注:为便于与以下修改方法制成的供试品溶液、对照药材溶液相区别,用本方法制备的供试品溶液分别标示为供试品溶液(亚东1107003批)①、供试品溶液(太极11020087批);对照药材溶液标示为甘草对照药材溶液①,下同)。
在申请人执行实施例1的方法时发现:在用正丁醇萃取后的水溶液中,仍可检出甘草酸。因此,在按照现行《中国药典》2010年版一部规定的方法基础上,仅在制备供试品溶液和对照药材溶液过程中,正丁醇萃取之前,将溶液加盐酸1ml使之酸化。结果表明:萃取后的水溶液中,甘草酸含量显著减少。
实施例2:改进标准
1、正丁醇萃取前盐酸酸化
1.1酸化:
1)取藿香正气口服液30ml,用乙醚振摇提取2次,每次10ml,弃去乙醚液,加盐酸1ml,摇匀,用水饱和的正丁醇振摇提取3次,每次10ml,合并正丁醇液,用水洗涤2次,每次10ml,弃去水液,正丁醇液蒸干,残渣加甲醇2ml使溶解,作为供试品溶液②。
2)另取甘草对照药材1g,加乙醚20ml,加热回流15分钟,滤过,弃去乙醚液,药渣挥干溶剂,加甲醇20ml,超声处理30分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加水20ml使溶解,加盐酸1ml,摇匀,用正丁醇振摇提取3次,同法制成对照药材溶液②。
3)照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验,吸取上述各溶液(甘草酸铵对照品溶液4μl,对照药材溶液①2μl,对照药材溶液②2μl、4μl,供试品溶液②(亚东1107003批)1μl、2μl、4μl),分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以正丁醇-甲醇-氨溶液(8→10)(5∶1.5∶2)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(254nm)下检视。
结果:见附图2,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,但是点样4μl斑点严重拖尾,说明点样量或者取样量过大,以1μl点样量最好。甘草对照药材(1g)溶液在相同点样量(2μl)情况下,修改后方法明显好于原标准方法。本方法可以鉴别出藿香正气口服液中的甘草,但是薄层分离效果不够理想,尤其是供试品溶液的制备方法需要继续优化,具体见附图2。
1.2盐酸加入量的考察
1)取藿香正气口服液5ml,加水5ml,摇匀,用乙醚振摇提取2次,每次10ml,弃去乙醚液,加盐酸0.2ml,摇匀,用水饱和的正丁醇振摇提取3次,每次10ml,合并正丁醇液,用水洗涤2次,每次10ml,弃去水液,正丁醇液蒸干,残渣加甲醇2ml使溶解,作为供试品溶液③。
2)取藿香正气口服液5ml,加水5ml,摇匀,用乙醚振摇提取2次,每次10ml,弃去乙醚液,加盐酸0.4ml,摇匀,用水饱和的正丁醇振摇提取3次,每次10ml,合并正丁醇液,用水洗涤2次,每次10ml,弃去水液,正丁醇液蒸干,残渣加甲醇2ml使溶解,作为供试品溶液④。
3)另取甘草对照药材1g,加乙醚20ml,加热回流15分钟,滤过,弃去乙醚液,药渣挥干溶剂,加甲醇20ml,超声处理30分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加水20ml使溶解,盐酸加0.4ml,摇匀,用正丁醇振摇提取3次,同法制成对照药材溶液③。
照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验,吸取上述各溶液(甘草酸铵对照品溶液4μl,对照药材溶液③2μl,对照药材溶液②2μl,供试品溶液③和④各2μl),分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以正丁醇-甲醇-氨溶液(8→10)(5∶1.5∶2)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(254nm)下检视。
结果:见附图3,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,均显相同颜色的斑点,方法选择的两个加盐酸量对结果的判定无明显差异。故选择较小的加盐酸量即可(每20ml溶液或水加盐酸0.4ml)。
2、取样量及点样量的选择
照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验,吸取上述各溶液(甘草酸铵对照品溶液4μl,对照药材溶液③1μl、2μl、4μl,供试品溶液③1μl、2μl、4μl),分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以正丁醇-甲醇-氨溶液(8→10)(5∶1.5∶2)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(254nm)下检视。
结果:供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。以对照药材(1g)溶液2μl点样及供试品溶液4μl点样分离效果比较好。故确定点样量为甘草酸铵对照品溶液(2mg/ml)4μl,甘草对照药材(1g→2ml)溶液2μl,供试品(5ml→2ml)溶液4μl。见附图4,如果点样量小则斑点不清晰,点样量大容易拖尾,合适的点样量斑点清晰、不拖尾,易于鉴别。为保持对照品溶液、对照药材溶液和供试品溶液点样量一致,确定将甘草对照药材用量减少至0.5g,制成对照药材溶液2ml,点样4μl。
3、专属性实验及不同厂家薄层板的选择
另取甘草对照药材0.5g,加乙醚20ml,加热回流15分钟,滤过,弃去乙醚液,药渣挥干溶剂,加甲醇20ml,超声处理30分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加水10ml使溶解,加0.2ml盐酸,摇匀,用水饱和的正丁醇振摇提取3次,同法制成对照药材溶液④。
另取按藿香正气口服液处方制备的甘草阴性样品5ml,同法制成阴性供试品溶液。
取上述供试品溶液、甘草酸铵对照品溶液及甘草对照药材溶液,照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验,吸取上述溶液(甘草酸铵对照品溶液4μl、对照药材溶液④4μl、供试品溶液③4μl、4μl、4μl,阴性供试品溶液4μl,分别点于不同厂家生产的同一硅胶GF254薄层板上,以正丁醇-甲醇-氨溶液(8→10)(5∶1.5∶2)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(254nm)下检视。
结果:供试品色谱中,在与对照色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,分离效果比较好,阴性无干扰,不同厂家生产的薄层板对检验结果无影响。
最终确定藿香正气口服液中甘草的鉴别方法如实施例3所示。
实施例3:藿香正气口服液中甘草的鉴别方法
1、鉴别方法:
1)取藿香正气口服液5ml,加水5ml,摇匀,用乙醚振摇提取2次,每次10ml,弃去乙醚液,加盐酸0.2ml,摇匀,用水饱和的正丁醇振摇提取3次,每次10ml,合并正丁醇液,用水洗涤2次,每次10ml,弃去水液,正丁醇液蒸干,残渣加甲醇2ml使溶解,作为供试品溶液。
2)另取甘草对照药材0.5g,加乙醚20ml,加热回流15分钟,滤过,弃去乙醚液,药渣挥干溶剂,加甲醇20ml,超声处理30分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加水10ml使溶解,加盐酸0.2ml,摇匀,用水饱和的正丁醇振摇提取3次,同法制成对照药材溶液。
3)再取甘草酸铵对照品,加甲醇制成每1ml含2mg的溶液,作为对照品溶液。
照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验,吸取上述三种溶液各4μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以正丁醇-甲醇-氨溶液(8→10)(5∶1.5∶∶2)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(254nm)下检视。
2、色谱见附图5、6,均显示色谱清晰、无斑点拖尾等不良现象,且重现性强,其中附图5使用的薄层板是由青岛海洋化工分厂生产,附图6使用的薄层板是由青岛渔民硅胶试剂厂生产。
3、样品的重现性检验
按照确定的方法对本公司三批藿香正气口服液样品(北京亚东生物制药有限公司,批号:1107003、1107004、1107005)及市售三批太极藿香正气口服液样品(太极集团重庆涪陵制药厂有限公司,批号:10121254、11020087、11050113)进行检验,结果供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,均显相同颜色的斑点,具体见附图7、8。
虽然,上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验,对本发明作了详尽的描述,但在本发明基础上,可以对之作一些修改或改进,这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此,在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进,均属于本发明要求保护的范围。

Claims (1)

1.藿香正气口服液中甘草的鉴别方法,该方法包括以下步骤:
1)取藿香正气口服液5ml,加水5ml,摇匀,用乙醚振摇提取2次,每次10ml,弃去乙醚液,加盐酸0.2ml,摇匀,用水饱和的正丁醇振摇提取3次,每次10ml,合并正丁醇液,用水洗涤2次,每次10ml,弃去水液,正丁醇液蒸干,残渣加甲醇2ml使溶解,作为供试品溶液;
2)另取甘草对照药材0.5g,加乙醚20ml,加热回流15分钟,滤过,弃去乙醚液,药渣挥干溶剂,加甲醇20ml,超声处理30分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加水10ml使溶解,加盐酸0.2ml,摇匀,用水饱和的正丁醇振摇提取3次,同法制成对照药材溶液;
3)再取甘草酸铵对照品,加甲醇制成每1ml含2mg的溶液,作为对照品溶液;
4)照薄层色谱法试验,吸取上述三种溶液各4μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以正丁醇-甲醇-氨溶液(8→10)(5:1.5:2)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯下检视;
供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
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