CN102590371A - 一种检测烤烟根系分泌物中有机酸种类和含量的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种检测烤烟根系分泌物中有机酸种类和含量的方法。包括波长选择、色谱条件选择、标准工作液制作、工作曲线绘制、样品前处理和样品测定，最后以不同有机酸保留时间定性，定量采用峰面积外标法，得到烤烟根系分泌物中有机酸的种类和含量。本发明填补了烤烟根系分泌物中有机酸种类和含量检测的空白。该方法可同时检测9种有机酸，10min即可完成分析，操作简单，检测速度快，重现性好，准确度高。使用常用检测设备，无需配置专门仪器，由一人即可独立完成。
Description
技术领域
本发明属于农业生产技术领域，具体涉及一种检测烤烟根系分泌物中有机酸种类和含量的方法。
背景技术
有机酸是植物根系分泌物中的典型物质，其对植物生长发育和根系微生态具有重要的修饰限制作用。根系分泌物中常见的低分子量有机酸包括：柠檬酸、草酸、琥珀酸、酒石酸、苹果酸、乙酸和丙二酸等。有机酸具有调节植物细胞新陈代谢、固定植物养分、活化植物细胞的作用，而且可以降低根际土壤的pH值，同时可与铝、铁、钙等金属元素形成螯合物，提高磷化物的溶解度，有效提高磷的利用率，从而促进植物生长。
现有根系分泌物有机酸检测技术主要有高效液相色谱、气相色谱、液-质和气-质联用等，其中高效液相色谱法具有不受试样挥发性和热稳定性限制，应用范围广，可选择流动相较多等特点，较适宜于根系分泌物中有机酸的分析。采用反相色谱法分析根系分泌物有机酸已在水稻、大豆和番茄等作物上得到应用，但分析手段存在差异，主要原因是作物种类不同而导致根系分泌物提取方法和检测手段存在差异。目前，对烤烟根系分泌物中低分子量有机酸的检测尚未见有成功的报道。因此，制定一种烤烟根系分泌物有机酸分析方法对较好开展烤烟根系研究具有重要意义。
发明内容
本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种操作简便、准确性高、重现性好的烤烟根系分泌物中低分子量有机酸的检测方法。
本发明的目的通过以下技术方案予以实现。
除非另有说明，本发明所才采用的百分数均为质量百分数。
一种检测烤烟根系分泌物中有机酸种类和含量的方法，包括以下步骤：
1、波长选择：选择210nm作为草酸、酒石酸、苹果酸、乳酸、乙酸、马来酸、柠檬酸、丁二酸和富马酸的检测波长；
2、色谱条件选择：采用磷酸二氢钾水溶液为流动相，磷酸二氢钾浓度为10mmol/L；用磷酸调节pH值，pH＝2.5；柱温为35℃；流速为1.0mL/mim，进样量为10μL，检测时间10min；
3、标准工作液制作：分别准确称取草酸、酒石酸、苹果酸、乳酸、乙酸、马来酸、柠檬酸、丁二酸和富马酸各0.1000g，用超纯水定容至1000mL，制成质量浓度为100μg/mL的有机酸混合储备液，将储备液分别稀释2倍、4倍、8倍、20倍、40倍和80倍作为标准工作液；
4、对各有机酸标准工作液浓度与其相应峰面积进行回归，并计算线性回归方程、线性范围、回收率、标准偏差、检测限和工作曲线；
5、样品前处理：采用水培法收集烤烟根系分泌物，体积为500mL，用二氯甲烷100mL萃取3次，收集有机相并用旋转蒸发仪浓缩至干，超纯水溶解定容至2mL，过0.45μm有机相滤膜，备用；
6、样品测定：采用自动进样器进样，以不同有机酸保留时间定性，定量采用峰面积外标法，得到烤烟根系分泌物中有机酸的种类和含量。
步骤(6)中所述的不同有机酸保留时间具体为：草酸，2.604min；酒石酸，4.000min；苹果酸，4.925min；乳酸，4.998min；乙酸，5.627min；马来酸，6.454min；柠檬酸，7.049min；富马酸，8.303min；丁二酸，8.984min。
同现有技术相比，本发明具有以下优点：
1、本发明填补了烤烟根系分泌物中有机酸种类和含量检测的空白。烤烟根系分泌物研究尚属起步阶段，目前并无与烤烟根系分泌物质相关的检测技术，本发明首创利用高效液相色谱法对烤烟根系分泌物中有机酸物质的定性和定量检测，为今后开展烤烟根系分泌物研究提供了可靠保证。
2、本发明可同时检测9种有机酸，10min即可完成分析，操作简单，检测速度快，重现性好，准确度高。
3、检测成本较低，所需高效液相色谱仪和旋转蒸发仪等仪器均为实验室常用检测设备，无需配置专门仪器即可完成。
4、操作方法简单易行，可由一人独立完成且对操作人员无特殊技术要求。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步地说明，但本发明的保护范围并不限于此。
实施例1
实施例中根系分泌物样品均系烤烟根系分泌物。
1、分别准确称取草酸、酒石酸、苹果酸、乳酸、乙酸、马来酸、柠檬酸、丁二酸和富马酸各0.1000g，用超纯水定容至1000mL，制成质量浓度为100μg/mL的有机酸混合储备液，将储备液分别稀释2倍、4倍、8倍、20倍、40倍和80倍作为标准工作液。
2、对各种有机酸标准工作液浓度与其相应峰面积进行回归，回归方程、线性范围及检出限见下表。
表1不同有机酸回归分析和检出限
Table 1 Regression analysis and detection limit of organic acid
注(Note)：检出限按3倍信噪比计算(S/N＝3)。：The detection limit by three times to the ratio of signal noise(S/N＝3).
3、加标回收率：将已知有机酸浓度的样品中加入标准品混合溶液，重复6次，计算回收率和相对标准偏差(见下表2)。
表2各种有机酸加标回收率测定(n＝6)
Table 2 Recovery of the nine organic acids
4、样品测定：先将收集的根系分泌物原液用分液漏斗进行萃取，萃取剂为二氯甲烷，萃取3次，收集有机相；再用旋转蒸发仪将收集的有机相浓缩至干，再用2mL超纯水洗瓶并收集作为根系分泌物样品，并按步骤2进行样品有机酸检测，下表3是4个样品的检测结果。
表3样品中有机酸种类和含量测定(μg/mL)
Table 3 Content and species of organic acid in sample
注(Note)：表中数据为3次重复平均值，“-”表示未检测到。Date are means of three replicates-indicate no detected
结果分析：由上述结果可知本法建立的检测烤烟根系分泌物中有机酸种类和含量的方法具有工作曲线线性良好、检出限低、回收率和精密度较高、样品处理简单易行、检出有机酸种类多、分析时间短等特点，适用于烤烟根系分泌物中有机酸种类和含量的检测和研究工作。
Claims (2)
1.一种检测烤烟根系分泌物中有机酸种类和含量的方法，包括以下步骤：
(1)波长选择：选择210nm作为草酸、酒石酸、苹果酸、乳酸、乙酸、马来酸、柠檬酸、丁二酸和富马酸的检测波长；
(2)色谱条件选择：采用磷酸二氢钾水溶液为流动相，磷酸二氢钾浓度为10mmol/L；用磷酸调节pH值，pH＝2.5；柱温为35℃；流速为1.0mL/mim，进样量为10μL，检测时间10min；
(3)标准工作液制作：分别准确称取草酸、酒石酸、苹果酸、乳酸、乙酸、马来酸、柠檬酸、丁二酸和富马酸各0.1000g，用超纯水定容至1000mL，制成质量浓度为100μg/mL的有机酸混合储备液，将储备液分别稀释2倍、4倍、8倍、20倍、40倍和80倍作为标准工作液；
(4)对各有机酸标准工作液浓度与其相应峰面积进行回归，并计算线性回归方程、线性范围、回收率、标准偏差、检测限和工作曲线；
(5)样品前处理：采用水培法收集烤烟根系分泌物，体积为500mL，用二氯甲烷100mL萃取3次，收集有机相并用旋转蒸发仪浓缩至干，超纯水溶解定容至2mL，过0.45μm有机相滤膜，备用；
(6)样品测定：采用自动进样器进样，以不同有机酸保留时间定性，定量采用峰面积外标法，得到烤烟根系分泌物中有机酸的种类和含量。
2.根据权利要求1所述的检测烤烟根系分泌物中有机酸种类和含量的方法，其特征在于：步骤(6)中所述的不同有机酸保留时间具体为：草酸，2.604min；酒石酸，4.000min；苹果酸，4.925min；乳酸，4.998min；乙酸，5.627min；马来酸，6.454min；柠檬酸，7.049min；富马酸，8.303min；丁二酸，8.984min。
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|---|---|
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Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104634886A (zh) * | 2013-11-15 | 2015-05-20 | 中国石油天然气股份有限公司 | 一种测定有机羧酸绝对含量的方法 |
| CN106248847A (zh) * | 2016-07-08 | 2016-12-21 | 江苏今世缘酒业股份有限公司 | 一种同时测定酿酒物料中七种有机酸含量的方法 |
| CN110243970A (zh) * | 2019-06-28 | 2019-09-17 | 成都中医药大学 | 一种同时测定半夏中7种有机酸的hplc方法 |
| CN110967432A (zh) * | 2019-12-25 | 2020-04-07 | 江南大学 | 一种测定根系分泌物中有机酸含量的方法 |
| CN111175409A (zh) * | 2020-02-12 | 2020-05-19 | 深圳大学 | 一种测定番茄有机酸和酸性氨基酸混合物的高效液相色谱方法 |
| CN114854420A (zh) * | 2022-04-13 | 2022-08-05 | 贵州省烟草科学研究院 | 烟草根系分泌物1,6-己二醇作为生物硝化抑制剂的应用及定量分析方法 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101566607A (zh) * | 2009-06-03 | 2009-10-28 | 川渝中烟工业公司 | 卷烟纸中有机酸根的测量方法 |
-
2012
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Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101566607A (zh) * | 2009-06-03 | 2009-10-28 | 川渝中烟工业公司 | 卷烟纸中有机酸根的测量方法 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| CHUNG-SHIH TANG ET: "Collection and Identification of Alielopathic Compounds from the Undisturbed Root System of Bigalta Limpograss (Hemarthria altissima)", 《PLANT PHYSIOL》, vol. 69, 31 January 1982 (1982-01-31), pages 155 - 160 * |
| 关秀杰 等: "反相高效液相色谱法测定火龙果有机酸", 《中国农学通报》, vol. 25, no. 23, 31 December 2009 (2009-12-31), pages 114 - 117 * |
| 张俊英 等: "氮素对不同大豆品种根系分泌物中有机酸的影响", 《植物营养与肥料学报》, vol. 13, no. 3, 31 March 2007 (2007-03-31), pages 398 - 403 * |
| 徐婉明 等: "气质联用方法测定香蕉根系分泌物", 《热带作物学报》, vol. 31, no. 8, 31 August 2010 (2010-08-31), pages 1403 - 1407 * |
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104634886A (zh) * | 2013-11-15 | 2015-05-20 | 中国石油天然气股份有限公司 | 一种测定有机羧酸绝对含量的方法 |
| CN104634886B (zh) * | 2013-11-15 | 2016-11-16 | 中国石油天然气股份有限公司 | 一种测定有机羧酸绝对含量的方法 |
| CN106248847A (zh) * | 2016-07-08 | 2016-12-21 | 江苏今世缘酒业股份有限公司 | 一种同时测定酿酒物料中七种有机酸含量的方法 |
| CN110243970A (zh) * | 2019-06-28 | 2019-09-17 | 成都中医药大学 | 一种同时测定半夏中7种有机酸的hplc方法 |
| CN110243970B (zh) * | 2019-06-28 | 2021-09-03 | 成都中医药大学 | 一种同时测定半夏中7种有机酸的hplc方法 |
| CN110967432A (zh) * | 2019-12-25 | 2020-04-07 | 江南大学 | 一种测定根系分泌物中有机酸含量的方法 |
| CN111175409A (zh) * | 2020-02-12 | 2020-05-19 | 深圳大学 | 一种测定番茄有机酸和酸性氨基酸混合物的高效液相色谱方法 |
| CN111175409B (zh) * | 2020-02-12 | 2022-09-30 | 深圳大学 | 一种测定番茄有机酸和酸性氨基酸混合物的高效液相色谱方法 |
| CN114854420A (zh) * | 2022-04-13 | 2022-08-05 | 贵州省烟草科学研究院 | 烟草根系分泌物1,6-己二醇作为生物硝化抑制剂的应用及定量分析方法 |
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