CN102488674A - 一种异甘草素滴眼液及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种滴眼液及其制备方法，即以异甘草素为原料的异甘草素滴眼液及其制备方法。本发明的异甘草素滴眼液各原料的最佳配比为：异甘草素浓度为40μg/ml、8mg/ml NaCl、1.44mg/ml NaH₂PO₄·H₂O、0.2mg/ml KCl、0.24mg/ml KH₂PO₄和5mg/ml的羧甲基纤维素钠。本发明的滴眼液制备方法简单，对于眼新生血管的防治效果显著，具有广阔的应用开发前景。研究证实，以异甘草素制成的滴眼液，能有效抑制小鼠碱烧伤后角膜新生血管的生长，减少角膜炎症细胞的浸润，改善角膜水肿。因此，异甘草素在防治角膜碱烧伤造成的角膜新生血管中有显著的疗效，能够有效地抑制眼新生血管的发生发展过程。

Description

一种异甘草素滴眼液及其制备方法

技术领域

本发明属于预防和治疗眼新生血管性疾病的中药药物技术领域，具体涉及一种以异甘草素为原料的异甘草素滴眼液及其制备方法。

背景技术

眼新生血管疾病现已成为我国致盲性眼病的首要原因，但尚未对其发病机制完全弄清，临床上也缺少有效的治疗方法。目前常用的治疗新生血管方法是激光光凝和光凝联合光动力学的方法，但其长期疗效不佳且费用高，更重要的是新生血管一旦形成，对眼部造成的损害和破坏不可逆转，使大多数患者最终失明。目前针对眼新生血管的药物主要是血管内皮生长因子(vascular endothelialgrowth factor，VEGF)抑制剂，VEGF是促成新生血管形成的重要诱生物。这类药物包括Macugen，Lucentis，Avastin以及VEGF trap，其中Macugen和Lucentis已经美国FDA批准用于眼科临床。VEGF拮抗类药物在抑制眼内新生血管形成方面具有较好的作用，但对于其安全性、远期并发症方面还存有争议，尚需要长期的临床研究来验证。此外，VEGF拮抗类药物价格昂贵，不利于临床的广泛应用。

因此，寻找安全有效的具有抗新生血管活性的生物活性物质对于预防和治疗眼新生血管相关疾病非常必要，近年来开始受到各国学者的重视。而中药物质具有广泛而有效的生物活性作用，并且价格适中，开发中药活性物质用于眼新生血管性疾病的治疗及预防是非常必要和重要的，但目前还没有有效的药物。

发明内容

本发明的目的是提供一种滴眼液及其制备方法，能够弥补现有眼用新生血管治疗及预防药物的缺乏。

作为发明人为试图达到上述提及的目的而进行的长期研究的结果，发现异甘草素(isoliquiritigenin)能有效的抑制碱烧伤后角膜新生血管的生长，减少角膜炎症细胞的浸润，从而促成本发明的完成。

本发明一方面是异甘草素在制备治疗眼新生血管性疾病的药物中的用途。

上述的治疗眼新生血管性疾病的药物为滴眼液，所述的滴眼液为含有异甘草素的、临床上应用的溶液。

上述溶液中异甘草素浓度为10～60μg/ml，优选为40μg/ml。

上述的溶液为碱性磷酸盐缓冲液，pH值为7.2-7.4。

碱性磷酸盐缓冲液的组成为：6～10mg/ml NaCl，1.0～2.0mg/mlNaH₂PO₄·H₂O，0.1～0.3mg/ml KCl，0.1～0.4mg/ml KH₂PO₄。

上述的碱性磷酸盐缓冲液中加入增稠剂，所述的增稠剂为羧甲基纤维素钠，浓度为1～10mg/ml。

本发明的异甘草素滴眼液各原料的最佳配比为：异甘草素浓度为40μg/ml、8mg/ml NaCl、1.44mg/ml NaH₂PO₄·H₂O、0.2mg/ml KCl、0.24mg/ml KH₂PO₄和5mg/ml的羧甲基纤维素钠。

本发明的另一个目的是提供异甘草素滴眼液的制备方法，包括有1)异甘草素浓缩液的配制；2)配制磷酸盐缓冲液和3)使用磷酸盐缓冲液稀释异甘草素浓缩液步骤，其特征在于，使用乙醇溶解异甘草素，按1g异甘草素干粉加10ml乙醇的量溶解。

本发明首次将异甘草素制成滴眼液应用于防治眼部新生血管性疾病。本发明的滴眼液制备方法简单，便于实施，对于眼新生血管的防治效果显著，具有广阔的应用开发前景。研究发现并证实，以异甘草素制成滴眼液点眼，能有效抑制小鼠碱烧伤后角膜新生血管的生长，减少角膜炎症细胞的浸润，改善角膜水肿。因此，异甘草素在防治角膜碱烧伤造成的角膜新生血管中有显著的疗效，能够有效地抑制眼新生血管的发生发展过程。此外，观察发现异甘草素滴眼液作用于眼部无明显刺激作用及致敏作用，具有较低的毒性。

具体实施方式

异甘草素(isoliquiritigenin)为甘草中异黄酮类化合物，已有研究表明它具有抗肿瘤、抗氧化、抗炎、扩张动脉、保护心脏和脑等作用，说明异甘草素具有广泛的药理活性。进一步开发利用异甘草素，拓展其应用具有深远意义。

本发明应用异甘草素来制备治疗眼新生血管性疾病的药物，所述的药物可以是缓释药物或其它可以临床应用的模式，优选为溶液类型的滴眼液。

本发明的滴眼液可以采用眼科临床上常用的溶剂来溶解异甘草素，异甘草素的浓度选用药理学上可接受的浓度。

所述的溶剂中可以加入增稠剂、清香剂、灭菌剂等辅助材质。

作为优选，本发明的溶液选用碱性磷酸盐缓冲液，pH值为7.2-7.4，并加入增稠剂羧甲基纤维素钠。

滴眼液中异甘草素浓度为10～60μg/ml，优选为40μg/ml。

本发明的制备方法如下：

步骤一、配制异甘草素浓缩液：

称取异甘草素干粉，按1g异甘草素干粉加10ml乙醇的量，使用乙醇使其充分溶解。

步骤二、配制磷酸盐缓冲液：

按照氯化钠(NaCl)6.0-10.0份，磷酸氢二钠(NaH₂PO₄·H₂O)1.0-2.0份，氯化钾(KCl)0.1-0.3份，磷酸二氢钾(KH₂PO₄)0.1-0.4份的重量比，配制磷酸盐缓冲液；并加入1-10份的增稠剂羧甲基纤维素钠。调节pH值为7.2-7.4。120℃灭菌15分钟，放冷备用。

步骤三、使用磷酸盐缓冲液稀释异甘草素浓缩液得本发明的眼液：

使用上述步骤二配制的磷酸盐缓冲液稀释步骤一配制的异甘草素浓缩液为10～60μg/ml，得本发明的异甘草素滴眼液。

以下结合实施例对本发明进行详细描述

按下表所例原料重量(以1ml滴眼液的量计算)配制异甘草素滴眼液。

制备方法如下(以实施例3为例，实施例1、2、4制备方法相同)

1、取异甘草素100mg溶解于1ml乙醇中，制备成100mg/ml的异甘草素浓缩液。

2、称取氯化钠(NaCl)8g，磷酸氢二钠(NaH₂PO₄·H₂O)1.44g，氯化钾(KCl)0.2g，磷酸二氢钾(KH₂PO₄)0.24g，羧甲基纤维素钠5g，溶解于1000ml蒸馏水中，溶解的磷酸盐缓冲液。调节pH值为7.2-7.4。120℃灭菌15分钟，放冷备用。

3、取40μl上述1得到的异甘草素浓缩液，使用100ml上述2得到的磷酸盐缓冲液充分稀释，即得100ml异甘草素滴眼液。

本发明滴眼液的效果检测

建立C57BL/6小鼠碱烧伤动物模型：模型动物选用C57BL/66-8周龄，雌性小鼠，小鼠全身麻醉，盐酸丙美卡因滴眼液点眼，2μl 1N NaOH直接滴到小鼠角膜表面，进行碱烧伤40秒，随后立即用大于20ml生理盐水冲洗。

对上述建立的小鼠碱烧伤动物模型，分为对照组和治疗组两组烧伤后即进行点眼治疗，每眼每次点滴眼液5μl，每天点眼4次，点眼治疗7天。具体分组如下：

对照组：采用磷酸盐缓冲液点眼治疗。

治疗组：采用上述实施例1-4所制异甘草素滴眼液点眼治疗。

治疗7天后，观察治疗效果，进行对比。结果发现，与对照组相比，各异甘草素滴眼液治疗组能够不同程度地抑制碱烧伤后角膜新生血管的生长，减少角膜炎症细胞的浸润，改善角膜水肿。其中，综合评价新生血管的生长情况、角膜炎症、角膜水肿及上皮损伤程度，以实施例3所得滴眼液的治疗效果最好。

Claims (6)

1.异甘草素的用途，是在制备治疗眼新生血管性疾病的药物中的应用。

2.如权利要求1所述的治疗眼新生血管性疾病的药物为滴眼液，所述的滴眼液为含有药理有效浓度异甘草素的眼用缓冲液。

3.如权利要求2所述的滴眼液，其特征在于上述眼用缓冲液中异甘草素浓度为10～60μg/ml。

4.如权利要求3所述的滴眼液，其特征在于上述眼用缓冲液中异甘草素浓度优选为40μg/ml。

5.权利要求2所述的滴眼液，其配比为：异甘草素40μg/ml、NaCl8mg/ml、NaH₂PO₄·H₂O 1.44mg/ml、KCl0.2mg/ml、KH₂PO₄0.24mg/ml和5mg/ml的羧甲基纤维素钠。

6.权利要求2所述的滴眼液的制备方法，包括有1)异甘草素浓缩液的配制；2)配制磷酸盐缓冲液和3)使用磷酸盐缓冲液稀释异甘草素浓缩液步骤，其特征在于，上述步骤1)异甘草素浓缩液的配制步骤是使用乙醇溶解异甘草素。