CN109394740A - 异甘草素、药物组合物及其在制备治疗糖尿病心肌病药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种改善炎症和氧化应激反应的药物组合物，所述组合物包含异甘草素；还提供了甘草素在制备治疗糖尿病心肌病药物中的用途。甘草素单独地或作为药物组合物中的活性成分可以通过缓解和治疗心肌炎症和氧化应激反应改善心脏组织的病理损伤，从而对糖尿病心肌病起到治疗作用。异甘草素使用安全、无毒副作用，可操作性强，有助于延缓病情进展恶化和提高患者生存质量。

Description

异甘草素、药物组合物及其在制备治疗糖尿病心肌病药物中 的应用

技术领域

本发明涉及一种治疗糖尿病或高糖所导致的器官损害的药物，特别是涉及异甘草素或含有异甘草素的药物组合物在制备治疗糖尿病或高糖诱导的心肌损伤的药物中的用途。

背景技术

随着社会的发展，糖尿病(Diabetes Mellitus,DM)患病率显著增加，已成为影响人类健康的流行性疾病。糖尿病心肌病(Diabetic cardiomyopathy,DCM)是糖尿病患者的主要心脏并发症之一，最终导致糖尿病的高致死率和高致残率。该病在代谢紊乱及微血管病变的基础上引发心肌广泛灶性坏死，影响心脏的收缩和舒张功能，最终发展为充血性心力衰竭、心律失常及心源性休克，预后不良。

DCM是多因素综合作用引起的疾病，其病因可能由于心肌细胞代谢紊乱、心肌细胞钙转运缺陷、冠状动脉的微血管病变、心肌间质纤维化、心脏自主神经病变等，更涉及多元醇代谢亢进、蛋白激酶C(PKC)激活、蛋白质非酶糖化及其终产物(AGEs)形成增加等多种因素。

近年，越来越多的研究认为，高血糖激活了组织或胞内的损伤和应激相关信号通路，使得炎症反应和氧化应激损伤与DCM的发生发展密切相关；而慢性炎症反应更成为糖尿病并发症的重要病理因素之一。

然而，目前临床上针对糖尿病心肌病的治疗手段非常有限，主要依靠控制血糖、降血压、降血脂、抗心衰等手段控制病程，诊疗费用高，预后效果不理想，也无法阻止糖尿病心肌病逐渐发展为心脏功能衰竭。

甘草植物种G.uralensis(乌拉尔草)是日本最常用的植物之一，其中已经分离出各种成分，包括三萜皂苷，类黄酮，异黄酮和查耳酮。异甘草素(Isoliquiritigenin，ISL)是乌拉尔草根中的另一种成分，是具有查尔酮结构的类黄酮。异甘草素的分子量为256.25，结构式如下：

异甘草素目前常用于化妆品和食品添加剂中，对于开发和应用还很不成熟。它具有多种生物学特性，包括护肝、保护心血管和抗肿瘤生长活性等，目前对其生物学活性、药理活性和临床用途对于开发异甘草素的应用、发现新的医药化合物和适应症具有重要意义。

因此，本发明提供了异甘草素和含有异甘草素的药物组合物及其在制备治疗糖尿病心肌病药物中的应用。

发明内容

为了解决上述问题，本发明人进行了锐意研究，结果发现：异甘草素(Isoliquiritigenin，ISL)具有包括抗炎和抗氧化等药理功效作用。异甘草素能通过抑制炎症反应和氧化应激反应缓解和治疗糖尿病心肌病，可以单独地或者作为药物组合物中的有效活性成分进行使用，从而完成了本发明。

本发明的目的在于提供以下方面：

改善炎症和氧化应激反应的药物组合物，所述组合物含有异甘草素。

所述炎症为慢性炎症性疾病，所述氧化应激反应为与氧化应激性损伤相关的疾病，优选高糖介导的慢性炎症性疾病，更优选糖尿病心肌病。

异甘草素单独使用，或作为活性成分与其他辅料共同使用；异甘草素的使用剂量为10-300mg/kg/d，优选为20-150mg/kg/d。

异甘草素以溶于溶剂的溶液形式使用；

异甘草素在溶液中的浓度为0.01-5g/ml，优选为0.05-4g/ml，更优选为0.1-3.5g/ml。

异甘草素以固体形式使用，优选作为活性成分与辅料固态混合，所述辅料优选为填充剂、粘合剂、崩解剂和润滑剂中的一种或多种，异甘草素相对辅料的用量为1％-50％，优选为1％-40％，更优选为1％-35％，以重量计。

本发明提供了异甘草素在制备治疗心肌炎症疾病和氧化应激性损伤疾病的药物中的用途。

特别是异甘草素在制备治疗高糖引起的心肌炎症疾病和氧化应激性损伤疾病的药物中的用途。

本发明提供了异甘草素在制备治疗糖尿病心肌病药物中的用途。

优选异甘草素在制备治疗炎症和氧化应激反应引起的糖尿病心肌病药物中的用途；和/或，

异甘草素在制备治疗糖尿病或高血糖引起的糖尿病心肌病药物中的用途。

根据本发明提供的改善炎症和氧化应激反应的药物组合物或异甘草素在制备治疗糖尿病心肌病药物的用途，具有以下有益效果：

(1)本发明旨在提供异甘草素单独地或作为活性成分用于制备治疗糖尿病心肌病药物的用途，异甘草素使用安全、无毒副作用，可操作性强，费用低，能显著降低患者及医疗机构的诊疗费用；

(2)ISL可以通过同时改善炎症和氧化应激反应发挥治疗糖尿病心肌病的作用，疗效好，性价比高；

(3)ISL治疗糖尿病心肌病时有助于延缓病情进展恶化，显著减少病死率和病残率，提高患者生存质量。

附图说明

图1示出本发明实验例2小鼠心脏形态和心肌细胞的检测结果图：D为心脏结缔组织天狼星红染色效果图；F为心脏结缔组织Masson染色效果图；H为TUNEL技术检测的小鼠心肌细胞凋亡图；

图2示出实验例2中各检测统计结果：E为图1中D的统计图；G为图1中F的统计图；I为图1中H细胞图的统计图；

图3示出实验例3中小鼠心脏组织炎症和氧化应激反应检测结果图：A、C、E分别是免疫组化检测心脏组织中巨噬细胞标志物(F4/80)、炎症因子TNF-α、活性氧的效果图；G为免疫组化检测心脏组织的氧化应激代谢产物3-NT的效果图，G’是G中方框部分的放大图；

图4示出实验例3中各检测统计结果：B为图3中A的统计图；D为图3中C的统计图；F为图3中E的统计图；H为图3中G的统计图；

图5示出实验例4中各检测结果：A、B、C分别为RT-qPCR法检测心肌细胞中炎症因子TNF-α、IL-6和黏附因子(ICAM-1)在mRNA水平的表达量；D是NF-κB的IκB蛋白的Westernblot检测结果；E、F分别是胞核和胞浆中p65蛋白的Western blot结果图；G和H分别为RT-qPCR法测定氧化应激通路中Nrf-2和HO-1分子在mRNA水平的表达量；I为Nrf-2和HO-1分子的Western blot测定结果。

具体实施方式

下面通过对本发明进行详细说明，本发明的特点和优点将随着这些说明而变得更为清楚、明确。

在这里专用的词“示例性”意为“用作例子、实施例或说明性”。这里作为“示例性”所说明的任何实施例不必解释为优于或好于其它实施例。尽管在附图中示出了实施例的各种方面，但是除非特别指出，不必按比例绘制附图。

以下详述本发明。

研究发现，糖尿病或高血糖介导的炎症及氧化应激可能是引起糖尿病心肌病的病理因素之一，针对炎症和氧化应激反应的信号转导，我们发现，在炎症中，转录因子NF-κB是TLRs介导炎症信号转导通路中关键的核转录因子，是信号向下游转导的关键靶分子。

其中，TLR1，2，6，4及5的信号传导均可作用于转录因子NF-κB途径完成信号传导：TLRs激活后，其TIR结构域与Myd88的羧基末端相互作用，从而激活MyD88依赖性信号通路，随后IRAK1/4激活，NF-κB信号通路也被激活，共同开启下游的炎症因子的转录和表达13。

在氧化应激反应中，Nrf2(NF-E2-related factor 2)是细胞氧化应激反应中的关键因子，受Keap1的调控，通过与抗氧化反应元件ARE(antioxidant response element)相互作用，调节抗氧化蛋白和II相解毒酶的表达。

既往研究发现，NF-κB和Nrf2在高糖诱导的炎症信号转导和氧化应激过程中发挥了重要的调控作用。

通过细胞试验(体外试验)发现，高糖刺激H9c2心肌细胞后炎症因子水平显著增高，炎症通路重要信号分子NF-κB激活；氧化应激通路的重要信号分子Nrf2及HO-1活化；给与ISL治疗后能改善细胞中炎症与氧化应激信号通路。

因此，ISL能够用于治疗心肌炎症性疾病和氧化应激性损伤疾病；特别是高糖介导的心肌炎症性疾病和氧化应激性损伤疾病。

通过体内试验进一步研究发现，采用STZ(链脲佐菌素)诱导的1型糖尿病小鼠通过病理学检查发现，显著可见心肌组织的损伤性病理改变。当单独给予异甘草素或给予含有异甘草素作为活性成分的组合物进行治疗后，能显著抑制糖尿病所诱发的心肌组织病理损伤性改变，也可以缓解和治疗由此导致的心脏细胞纤维化、细胞凋亡以及心功能不全。。

另外，治疗后，异甘草素能显著抑制STZ诱导的1型糖尿病小鼠心肌组织中的炎症反应及巨噬细胞浸润。同时，异甘草素还显著抑制了小鼠心肌组织中的氧化应激反应。

不受任何理论的束缚，本发明人认为，异甘草素具有多种生物学特性，其中具有酚羟基官能团，可能具有抗炎抗氧化的作用。而引起糖尿病心肌病的慢性炎症，以异甘草素单独地或以其为活性成分的组合物能够在治疗糖尿病心肌病中发挥作用，并带来明显的治疗效果。

因而，ISL在体内和体外都可以用于治疗心肌炎症疾病和氧化应激性损伤疾病，特别是高糖介导的心肌炎症疾病和氧化应激性损伤疾病，其在治疗糖尿病心肌病中具有潜在价值。

因此，本发明提供了一种改善炎症和氧化应激反应的药物组合物，所述组合物含有异甘草素。

其中，所述炎症为慢性炎症性疾病，所述氧化应激反应为与氧化应激性损伤相关的疾病，优选高糖介导的慢性炎症性疾病，更优选糖尿病心肌病。

在使用组合物治疗时，异甘草素单独使用，或作为活性成分与其他辅料共同使用。异甘草素使用的剂量为10-300mg/kg/d，优选为20-150mg/kg/d，更优选为20-100mg/kg/d。

所述辅料为药学可接受的用于辅助或改善异甘草素使用或制备的非活性物质，包括但不限于溶剂、增溶剂和赋形剂中的一种或多种。

所述溶剂为水，优选为注射用水或去离子水；

所述增溶剂包括乙醇、异丙醇、羧甲基纤维素钠、十二烷基硫酸钠、聚乙二醇、吐温、丙二醇、甘油、泊洛沙姆中的一种或组合。

异甘草素可以以溶于溶剂的溶液形式使用，优选所述溶剂为去离子水，在增溶剂的作用下，异甘草素的浓度为0.01-5g/ml，优选为0.05-4g/ml，更优选为0.1-3.5g/ml，进一步优选为0.1-3g/ml。

在一种优选的实施方式中，所述异甘草素溶解于含有羧甲基纤维素钠的水中使用。

所述增溶剂的用量可以为溶剂质量的1％-50％，优选为1％-40％，最优选为1％-35％，进一步还可以为1％-30％。

所述组合物中，异甘草素单独地，或作为活性成分与其他辅料共同地，以溶液形式使用时，可以制备为溶液剂、混悬剂、泡腾剂或冲剂后使用；按照本领域常规方法制备。

异甘草素可以以固体形式使用，优选作为活性成分与固态辅料混合，所述固态辅料优选为赋形剂，所述赋形剂包括填充剂、粘合剂、崩解剂和润滑剂中的一种或多种。

其中，所述填充剂包括淀粉、微晶纤维素、蔗糖、乳糖、磷酸二氢钙中的一种或组合；所述粘合剂包括淀粉浆、羧甲基纤维素、聚维酮、羟丙基纤维素、乙基纤维素中的一种或组合；所述崩解剂包括羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素、交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮和海藻酸钠中的一种或组合；所述润滑剂包括微粉硅胶、气态硅胶、滑石粉、硬脂酸镁、聚乙二醇、月桂醇硫酸镁中的一种或组合。

当异甘草素作为活性成分与固态辅料混合使用时，填充剂在总物料中的质量分数为0-80％，优选为5％-80％；粘合剂在总物料中的质量分数为0-50％，优选为1％-40％；崩解剂在总物料中的质量分数为0-80％，优选为1％-70％；润滑剂在总物料中的质量分数为0-30％，优选为1％-20％。

进一步地，异甘草素相对辅料的用量为1％-50％，优选为1％-40％，更优选为1％-30％，以重量计。

所述组合物中，异甘草素单独地，或作为活性成分与其他辅料共同地，以固体形式使用时，可以制备为片剂、胶囊剂、固体分散体或颗粒剂后使用；按照本领域常规方法制备。

所述组合物中，异甘草素单独地或作为活性成分与其他辅料共同地，口服使用，或者注射使用，优选口服使用。

基于此，本发明提供了一种ISL在制备治疗心肌炎症疾病和氧化应激性损伤疾病的药物中的用途；特别是ISL在制备治疗高糖引起的心肌炎症疾病和氧化应激性损伤疾病的药物中的用途。

另外，本发明还提供了ISL在制备治疗糖尿病心肌病药物中的用途；特别是在制备治疗炎症和氧化应激反应引起的糖尿病心肌病药物中的用途，以及，ISL在制备治疗糖尿病或高血糖引起的糖尿病心肌病药物中的用途。

使用异甘草素治疗糖尿病心肌病同时改善炎症和氧化应激反应发挥治疗糖尿病心肌病的作用，有助于延缓病情进展恶化，疗效好，性价比高，有助于提高患者的生存质量。

特别地，ISL可以显著降低糖尿病机体的心脏组织中氧化应激代谢产物3-NT的含量和降低心脏细胞的细胞凋亡，对心脏具有保护作用。

其中，ISL在治疗糖尿病心肌病时可以降低心脏组织的炎症因子TNF-α、IL-6和黏附因子(ICAM-1)在mRNA水平的表达量；以及巨噬细胞标志物(F4/80)的释放，还可以降低心脏组织中活性氧(ROS)含量。

ISL在治疗糖尿病心肌病时可以提高氧化应激通路中Nrf2和HO-1分子在mRNA水平的表达量，并显著降低心脏组织中氧化应激代谢产物3-NT(免疫组化检测氧化应激相关因子)的含量。

通过治疗，可以显著改善心脏组织的形态和脏器功能，ISL对于糖尿病心肌病患者具有明显的保护心脏的作用。

ISL通过抑制炎症和氧化应激改善糖尿病心肌病，单独地或作为药物组合物中的活性成分是一种非常具有开发前景的抗炎抗氧化药物，同时也是一种非常有价值的治疗糖尿病心肌病的药物。

其安全性高，可以单独使用或者与传统治疗药物联合用药治疗DCM。

实验例

实验例1

ISL对STZ诱导的1型糖尿病小鼠脏器并发症的影响

雄性C57BL/6小鼠从温州医科大学动物实验中心获得。小鼠用标准啮齿类动物食物和水饲养在恒温昼夜12-12h节律的动物房内。动物在实验开始前经过大于一周时间的环境适应性生长。

8-10周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为4组：正常对照组、糖尿病组(STZ)、糖尿病组联合ISL处理组(10、20mg/kg/d两个剂量，分别表示为STZ+ISL10、STZ+ISL20，灌胃给药)；每组8只。

其中，糖尿病小鼠模型制备方法如下：

低剂量50mg/kg/d链脲佐菌素(STZ,sigma)腹腔注射，连续注射5天造模1型糖尿病模型，72小时后，血糖仪测定空腹血糖(禁食4-6小时)，血糖值≥12mmol/L时认为1型糖尿病小鼠模型已建立。

每周监测各组小鼠血糖和体重，连续喂养4个月，处死前，利用多普勒超声检测仪记录心功能指标。Control表示正常对照组，STZ表示糖尿病组，STZ+ISL10表示糖尿病组联合ISL处理组(10mg/kg/d)，STZ+ISL20表示糖尿病组联合ISL处理组(20mg/kg/d).

检测结果如下表所示：

*表示相对于Control组，p<0.05；**表示相对于Control组，p<0.01；#表示相对于STZ组，p<0.05；##表示相对于STZ组，p<0.01。

表格上方为分组，下方为各项指标，指标后面为对应的单位。Heart rate表示心率，bpm为单位；LVEF为左室射血分数，指每搏输出量占心室舒张末期容积量的百分比，反映心肌的收缩功能；Fractional shortening为左心室短轴缩短率，反映心肌的收缩功能；IVsd为室间隔厚度，单位为mm，反映心肌肥厚的指标之一；LVPWd为舒张期左室后壁厚度，单位为mm，反应心肌肥大指标之一；Heart weight为心脏重量，单位为mg，；Tibial length为胫骨长度，单位为mm；；HW/TL为心脏重量与胫骨长度之比，单位为mg/mm，反映心肌肥大的指标之一。

该结果表明ISL可以显著降低STZ诱导的1型糖尿病小鼠心脏的功能损伤。

根据上述心超数据，从影像学方面反应出ISL对STZ诱导的1型糖尿病小鼠的心脏具有保护作用，并且，剂量越高保护效果越好。

实验例2

ISL对STZ诱导的1型糖尿病小鼠心脏并发症的影响

将实验例1中的的各组小鼠处死后，取心脏组织，石蜡包埋心脏组织，通过马松(Masson)和天狼星红(Sirus red)染色检测心脏形态学改变，通过TUNEL(TdT-mediateddUTP Nick-End Labeling)技术检测心肌细胞凋亡改变。正常对照组以Veh表示，糖尿病组以STZ-DM1表示，用药组以STZ-DM1+ISL表示，结果如图1和图2所示，其中：

图1中D为小鼠心脏结缔组织通过天狼星红染色得到的效果图，图2中E为图1中D的统计图，由图1D和图2E可知，ISL可以显著降低STZ诱导的1型糖尿病小鼠心脏结缔组织的比例。

图1中F为小鼠心脏结缔组织通过Masson染色得到的效果图，图2中G为图1中F的统计图，纵坐标为结缔组织的比例，由图1F和图2G可知，ISL可以显著降低STZ诱导的1型糖尿病小鼠心脏结缔组织的比例。

图1中H为通过TUNEL技术检测到小鼠心肌细胞凋亡图，图2中I为图1中H的细胞统计图。其中，横坐标为各个测试组，纵坐标为凋亡细胞数，由图1H和图2I可知，ISL可以显著降低STZ诱导的1型糖尿病小鼠心脏细胞凋亡数，并且随着剂量加大，效果更明显。

**表示相对于Vehicle(Veh)组，p<0.01；***表示相对于Veh组，p<0.001；#表示相对于STZ组，p<0.05；##表示相对于STZ组，p<0.01###表示相对于STZ组，p<0.001。

结果发现，ISL可以显著缓解STZ诱导的糖尿病小鼠心脏组织细胞凋亡、纤维化以及心功能不全。

实验例3

ISL对心脏炎症和氧化应激反应影响

将实验例1中的的各组小鼠处死后，取心脏组织，通过免疫组化检测心脏组织的炎症因子(TNF-α)以及巨噬细胞标志物(F4/80)，通过DHE荧光染料(二氢乙锭超氧化物阴离子荧光)检测心脏中活性氧(ROS)的产生，通过免疫组化检测氧化应激相关因子(3-NT)。

正常对照组以Veh表示，糖尿病组以STZ-DM1表示，用药组以STZ-DM1+ISL表示，实验结果见图3和图4。其中，

图3中A是通过免疫组化检测心脏组织中巨噬细胞标志物(F4/80)的效果图，图4中B为图3中A的统计图。由图3A和图4B可知，ISL可以显著降低STZ诱导的1型糖尿病小鼠心脏组织中巨噬细胞标志物(F4/80)的含量。

图3中C是通过免疫组化检测心脏组织的炎症因子TNF-α的效果图，图4中D为图3中C的统计图。由图3C和图4D可知，ISL可以显著降低STZ诱导的1型糖尿病小鼠心脏组织的炎症因子TNF-α含量。

图3中E是通过免疫组化检测心脏中活性氧(ROS)的效果图(DHE组)，图4中F为图3中E的统计图。由图3E和图4F可知，ISL可以显著降低STZ诱导的1型糖尿病小鼠心脏中活性氧(ROS)含量。

图3中G是通过免疫组化检测心脏组织的氧化应激代谢产物3-NT的效果图，G’是G中方框部分的放大图，图4中H为图3G的统计图。由图3G和图4H可知，ISL可以显著降低STZ诱导的1型糖尿病小鼠心脏组织中氧化应激代谢产物3-NT的含量。

综合可知，ISL显著缓解STZ诱导的糖尿病小鼠心脏组织中炎症和氧化应激，因而也可以缓解和治疗由此导致的纤维化、细胞凋亡以及心功能不全。

***表示相对于Veh组，p<0.001；#表示相对于STZ组，p<0.05；##表示相对于STZ组，p<0.01；###表示相对于STZ组，p<0.001。

实验例4

ISL对HG诱导的心肌细胞炎症反应的影响

采用ISL对高糖(HG)刺激H9c2心肌细胞中释放炎症因子(TNF-α和IL-6)与黏附因子(ICAM-1)抑制的方法测试了体外抗炎活性，具体方法如下：

1.2×10^6个H9c2心肌细胞用DMEM培养液培养于37℃，24小时后更新培养液，并加入ISL(终浓度为10及20μM)预处理1小时，再用高糖(HG 33mM葡萄糖)继续处理6小时，收集培养液，使用RT-qPCR法检测炎症因子TNF-α、IL-6和ICAM-1的mRNA表达量，每个化合物重复测试3次，计算平均值和误差值。

同时，采用ISL对HG刺激H9c2心肌细胞中炎症信号通路(NF-κB)激活抑制以及Nrf2信号通路激活的方法测试了ISL的体外抗炎抗氧化活性，具体方法如下：

分别用1.2×10^6个H9c2心肌细胞用DMEM培养液培养于37℃，24小时后更新培养液，并加入ISL(终浓度为10及20μM)预处理1小时，再用高糖(HG 33mM葡萄糖)继续处理1小时，收集培养液用Western blot法检测NF-κB的IκB和p65核转移活性，每个化合物重复测试3次，计算平均值和误差值；

分别用1.2×10^6和5×10^5个H9c2心肌细胞用DMEM培养液培养于37℃，24小时后更新培养液，并加入ISL(终浓度为10及20μM)预处理1小时，再用高糖(HG 33mM葡萄糖)继续处理12小时，收集培养液用Western blot法(1.2×10^6细胞)和RT-qPCR法(5×10^5个细胞)检测Nrf2蛋白及其下游抗氧化蛋白HO-1蛋白mRNA水平的表达量，每个化合物重复测试3次，计算平均值和误差值。

DMSO表示空白对照组，结果如图5所示，其中：

图5中A～C为RT-qPCR法检测心肌细胞中炎症因子TNF-α、IL-6和黏附因子(ICAM-1)在mRNA水平的表达量。可知，ISL可以显著降低高糖诱导的H9c2心肌细胞中炎症因子TNF-α、IL-6和黏附因子(ICAM-1)在mRNA水平的表达量。

图5中D是NF-κB的IκB蛋白的Western blot检测结果，ISL可以显著抑制高糖诱导的H9c2心肌细胞中IκB蛋白的降解；E、F分别是胞核和胞浆p65蛋白的Western blot结果图，ISL可以显著抑制高糖诱导的H9c2心肌细胞中p65由胞浆进入胞核的过程。

由图5中A～F总结来说：ISL可以有效抑制HG诱导的心肌细胞炎症信号转录因子NF-κB的转录活性，并抑制因此导致的炎症因子TNF-α和IL-6以及黏附因子ICAM-1的释放。

图5中G和H分别为RT-qPCR法测定氧化应激通路中Nrf-2和HO-1分子在mRNA水平的表达量。ISL可以显著激活高糖诱导的H9c2心肌细胞Nrf-2及下游抗氧化因子HO-1的表达。

图5中I为Nrf2和HO-1分子的Western blot测定结果。可见ISL可以有效激活Nrf-2信号通路，并激活其下游的抗氧化蛋白的表达。

**表示相对于DMSO组，p<0.01；***表示相对于DMSO组，p<0.001；#表示相对于HG组，p<0.05；##表示相对于HG组，p<0.01；###表示相对于HG组，p<0.001。

综上可知，ISL可以有效缓解HG诱导的心肌细胞炎症和氧化应激反应。

以上结合具体实施方式和范例性实例对本发明进行了详细说明，不过这些说明并不能理解为对本发明的限制。本领域技术人员理解，在不偏离本发明精神和范围的情况下，可以对本发明技术方案及其实施方式进行多种等价替换、修饰或改进，这些均落入本发明的范围内。本发明的保护范围以所附权利要求为准。

Claims (10)

1.改善炎症和氧化应激反应的药物组合物，所述组合物含有异甘草素。

2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述炎症为慢性炎症性疾病，所述氧化应激反应为与氧化应激性损伤相关的疾病，优选高糖介导的慢性炎症性疾病，更优选糖尿病心肌病。

3.根据权利要求1或2所述的组合物，其特征在于，异甘草素单独使用，或作为活性成分与其他辅料共同使用；

异甘草素的使用剂量为10-300mg/kg/d，优选为20-150mg/kg/d。

4.根据权利要求3所述的组合物，其特征在于，异甘草素以溶于溶剂的溶液形式使用；

异甘草素在溶液中的浓度为0.01-5g/ml，优选为0.05-4g/ml，更优选为0.1-3.5g/ml。

5.根据权利要求3所述的组合物，其特征在于，异甘草素以固体形式使用，优选作为活性成分与辅料固态混合，所述辅料优选为填充剂、粘合剂、崩解剂和润滑剂中的一种或多种；

异甘草素相对辅料的用量为1％-50％，优选为1％-40％，更优选为1％-35％，以重量计。

6.异甘草素在制备治疗心肌炎症疾病和氧化应激性损伤疾病的药物中的用途。

7.根据权利要求6所述的用途，其特征在于，异甘草素在制备治疗高糖引起的心肌炎症疾病和氧化应激性损伤疾病的药物中的用途。

8.异甘草素在制备治疗糖尿病心肌病药物中的用途。

9.根据权利要求8所述的用途，其特征在于，异甘草素在制备治疗炎症和氧化应激反应引起的糖尿病心肌病药物中的用途。

10.根据权利要求8所述的用途，其特征在于，异甘草素在制备治疗糖尿病或高血糖引起的糖尿病心肌病药物中的用途。