CN102487830A - 天门冬的组培繁殖方法 - Google Patents

天门冬的组培繁殖方法 Download PDF

Info

Publication number
CN102487830A
CN102487830A CN2011104494083A CN201110449408A CN102487830A CN 102487830 A CN102487830 A CN 102487830A CN 2011104494083 A CN2011104494083 A CN 2011104494083A CN 201110449408 A CN201110449408 A CN 201110449408A CN 102487830 A CN102487830 A CN 102487830A
Authority
CN
China
Prior art keywords
culture
days
asparagus
callus
tissue
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN2011104494083A
Other languages
English (en)
Other versions
CN102487830B (zh
Inventor
何全慧
万联新
杨再江
祝利
赵勇彪
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
CHONGQING XIUSHAN RED STAR TCM DEVELOPMENT Co Ltd
Original Assignee
CHONGQING XIUSHAN RED STAR TCM DEVELOPMENT Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by CHONGQING XIUSHAN RED STAR TCM DEVELOPMENT Co Ltd filed Critical CHONGQING XIUSHAN RED STAR TCM DEVELOPMENT Co Ltd
Priority to CN201110449408.3A priority Critical patent/CN102487830B/zh
Priority claimed from CN201110449408.3A external-priority patent/CN102487830B/zh
Publication of CN102487830A publication Critical patent/CN102487830A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN102487830B publication Critical patent/CN102487830B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Landscapes

  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)

Abstract

天门冬的组培繁殖方法，包括引种灭菌、组织诱导、继代培养、分化培养、壮苗培养和生根培养，通过组织培养，可以大量生产种苗，从嫩枝到培养成生根苗，只需3-4个月，大大缩短了种苗的生产时间和成本，提高了扩繁速度，可以实现天门冬栽培的规范化和规模化发展。

Description

天门冬的组培繁殖方法
技术领域
本发明涉及一种植物的繁殖方法，特别是天门冬的组培繁殖方法。
背景技术
天门冬Asparagus cochinchinensis (Lour.) Merr. 又名天冬，为百合科常绿藤本植物，以块根入药。主产于贵州、广西、云南、甘肃、安徽、河南、湖南、湖北、四川和江西等地。天冬始载于《神农本草经》，历代本草均有记载。其味甘、苦，性寒，归肺肾经,能养阴润燥，清肺生津；主治肺燥干咳、虚劳咳嗽、津伤口渴、心繁失眠、内热消渴、肠燥便秘等症。还可以治疗咽干口渴，燥咳痰粘，咯血，百日咳，咽白喉，干燥性鼻炎等。天冬含有天门冬氨酸、天冬酰氨、β-谷甾醇、甾体皂甙、天冬多糖、粘液质、豆甾醇、5-甲氧基甲基糠醛、糖醛、内脂、黄酮、蒽醌、强心甙、鼠李糖、木糖和葡萄糖等成分。另外还含有丰富的维生素、无机元素等。自古以来，人们把天门冬作为延年益寿的佳品，因而对天门冬的需求量很大。
长期以来，天门冬药材来源主要以野生采集为主，天门冬的栽培技术没有引起更多的关注。随着市场对药材天门冬需求量的增加和野生资源的急剧减少，采集野生天门冬不但不能满足市场需求，反而破坏了生态环境和天门冬野生资源。由此人们逐渐开始对天门冬的野生变家种栽培技术、高产栽培技术等加以实践。目前天门冬的繁殖技术主要为种子繁殖、分根繁殖和组培繁殖等，这些繁殖方法都是刚刚起步，几乎还没有有效的成功实践应用的经验，因而无法大量提供种源，扩大面积种植受到抑制。
发明内容
本发明的目的在于提供一种天门冬的组培繁殖方法，提高天门冬的扩大繁殖速度，实现天门冬栽培的规范化和规模化发展。为实现这一目的，发明人经过试验，成功研究了繁殖天门冬的各种组织培养基质配方和培养方法，对组织培养基质配方和生产工艺，以及天门冬的特殊生长习性进行了大量研究和多重试验，获得了独创的培养基配方和培养方法。
为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是天门冬的组培繁殖方法，包括引种灭菌、组织诱导、继代培养、分化培养、壮苗培养和生根培养，具体方法如下。
Figure 979772DEST_PATH_IMAGE001
引种灭菌：取天门冬春季嫩枝，放入洗洁精水溶液中浸泡5 分钟，然后用自来水冲洗干净；在超净工作台上再用75％酒精消毒10秒后，再用自来水冲洗干净，然后切成l～2cm长茎段(含2个腋芽)，再用0.1％升汞消毒3-5分钟，最后用无菌水冲洗5次；然后取出，用无菌滤纸吸干水份，用刀切去伤口坏死部分。
Figure 184489DEST_PATH_IMAGE002
组织诱导：将消毒处理后的嫩枝接种在诱导培养基上，每瓶接种3枝，进行愈伤组织诱导培养，5-7天后嫩枝切口处有少量愈伤组织开始萌动，再过5-7天后出现淡黄色致密的愈伤组织。
Figure 383389DEST_PATH_IMAGE003
继代培养：将诱导产生的生长状态良好的淡黄色颗粒状的愈伤组织接种于继代培养基中，每瓶接种3枝，进行继代培养，第7-10天后可观察到继代培养基中又有新的愈伤组织产生。
分化培养：将继代增殖产生的淡黄色颗粒状愈伤组织转接到分化培养基上，每瓶接种3枝，进行分化培养，7-10天可观察到愈伤组织开始生长分化，颜色变绿，5-7天后能观察到淡黄绿色不定芽，5-7天后出现丛生芽，平均每枝愈伤组织分化5个芽。
Figure 983315DEST_PATH_IMAGE005
壮苗培养：将分化培养的丛生芽转接到壮苗培养基中进行壮苗培养，20-25天可观察到丛生芽发育成了2.5-3.5cm的丛生苗。
Figure 737644DEST_PATH_IMAGE006
生根培养：将壮苗培养的丛生苗转接到生根培养基上进行诱导生根，10-15天可观察到苗根开始萌发，再过10-15天可观察到81%的苗均生根，根须平均长度3.1cm，每株苗平均生根3-4条；然后可出瓶炼苗，移栽。
上述天门冬组培繁殖方法中，所提到的各发育生长阶段的培养条件是：人工气候培养箱，光照周期起止时间是8:00-20:00，培养温度是日温25℃，夜温18℃，培养湿度是50-60%，光照强度在组织诱导、继代培养和分化培养阶段是1000Lx-1600Lx，在壮苗培养和生根培养阶段是1600Lx-2000Lx。
上述天门冬组培繁殖方法中，所提到的各发育生长阶段的基本培养基是：MS+3g/L蔗糖+7g/L琼脂粉，PH值为5.8。
上述天门冬组培繁殖方法中，所提到的各发育生长阶段培养基的具体配方是。
Figure 412339DEST_PATH_IMAGE001
诱导培养基：MS+6-BA2.0mg/L+IBA1.0mg/L。
Figure 935724DEST_PATH_IMAGE002
继代培养基：MS+6-BA1.0mg/L+IBA2.0mg/L。
Figure 801787DEST_PATH_IMAGE003
分化培养基：½MS+6-BA3.0mg/L+IAA4.5mg/L。
Figure 43412DEST_PATH_IMAGE004
壮苗培养基：½MS+6-BA1.5mg/L+IAA0.5mg/L。
Figure 256219DEST_PATH_IMAGE005
生根培养基：½MS+NAA1.0mg/L+IBA1.0mg/L。
本发明的有益效果是：通过组织培养，可以大量生产种苗，从嫩枝到培养成生根苗，只需3-4个月，大大缩短了种苗的生产时间和成本，提高了扩繁速度。
附图说明
附图为天门冬组培繁殖方法流程图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明。
首先预备如下材料。
1. 人工气候培养箱：调整光照周期起止时间8:00-20:00，日温25℃，夜温18℃，湿度是50-60%，光照强度在组织诱导、继代培养和分化培养阶段调整为1000Lx-1600Lx，在壮苗培养和生根培养阶段调整为1600Lx-2000Lx。
2. 基本培养基：MS+3g/L蔗糖+7g/L琼脂粉，调整PH值为5.8。
3.诱导培养基：MS+6-BA2.0mg/L+IBA1.0mg/L。
4.继代培养基：MS+6-BA1.0mg/L+IBA2.0mg/L。
5.分化培养基：½MS+6-BA3.0mg/L+IAA4.5mg/L。
6.壮苗培养基：½MS+6-BA1.5mg/L+IAA0.5mg/L。
7.生根培养基：½MS+NAA1.0mg/L+IBA1.0mg/L。
实施例1。
剪取天门冬春季嫩枝100枝，放入洗洁精水溶液中浸泡5 分钟，然后用自来水冲洗干净；在超净工作台上再用75％酒精消毒10秒后，用自来水冲洗干净，然后切成含2个腋芽的l～2cm长的茎段500枝，再用0.1％升汞消毒15分钟，最后用无菌水冲洗5次；然后取出，用无菌滤纸吸干水份，用刀切去伤口坏死部分。然后将嫩枝茎段接种在诱导培养基上，每瓶接种3枝，5天后发现嫩枝切口处有少量愈伤组织开始萌动，再过5天后出现淡黄色致密的愈伤组织。接着将诱导产生的生长状态良好的淡黄色颗粒状的愈伤组织接种于继代培养基中，每瓶接种3枝，进行继代培养，8天后可观察到继代培养基中又有新的愈伤组织产生。然后将继代增殖产生的淡黄色颗粒状愈伤组织转接到分化培养基上，每瓶接种3枝，进行分化培养，8天可观察到愈伤组织开始生长分化，颜色变绿，7天后能观察到淡黄绿色不定芽，5天后出现丛生芽共计2502株，平均每枝愈伤组织分化5个芽。
然后将分化培养的丛生芽转接到壮苗培养基中进行壮苗培养，20天后观察到丛生芽发育成了2.5-3.5cm的丛生苗，接着将丛生苗转接到生根培养基上进行诱导生根，10天后观察到苗根开始萌发，再过10天后观察到2019株苗已生根，生根率达80.7%，根须平均长度3.1cm，每株苗平均生根3-4条。
实施例2。
剪取天门冬春季嫩枝50枝，放入洗洁精水溶液中浸泡5 分钟，然后用自来水冲洗干净；在超净工作台上再用75％酒精消毒10秒后，用自来水冲洗干净，然后切成含2个腋芽的l～2cm长的茎段300枝，再用0.1％升汞消毒15分钟，最后用无菌水冲洗5次；然后取出，用无菌滤纸吸干水份，用刀切去伤口坏死部分。然后将嫩枝茎段接种在诱导培养基上，每瓶接种3枝，7天后观察发现嫩枝切口处有少量愈伤组织开始萌动，再过5天后出现淡黄色致密的愈伤组织。接着将诱导产生的生长状态良好的淡黄色颗粒状的愈伤组织接种于继代培养基中，每瓶接种3枝，进行继代培养，7天后观察到继代培养基中又有新的愈伤组织产生。然后将继代增殖产生的淡黄色颗粒状愈伤组织转接到分化培养基上，每瓶接种3枝，进行分化培养，7天后观察到愈伤组织开始生长分化，颜色变绿，5天后能观察到淡黄绿色不定芽，6天后出现丛生芽1489枝，平均每枝愈伤组织分化近5个芽。
然后将分化培养的丛生芽转接到壮苗培养基中进行壮苗培养，25天观察到丛生芽发育成了3-3.5cm的丛生苗，接着将丛生苗转接到生根培养基上进行诱导生根，12天后观察到苗根开始萌发，再过15天观察到1211株苗已生根，生根率达81.3%，根须平均长度3.01cm，每株苗平均生根3-4条。

Claims (4)

1.天门冬的组培繁殖方法，包括引种灭菌、组织诱导、继代培养、分化培养、壮苗培养和生根培养，其特征在于具体步骤如下：
⑴引种灭菌：剪取天门冬春季嫩枝，放入洗洁精水溶液中浸泡5 分钟，然后用自来水冲洗干净；在超净工作台上再用75％酒精消毒10秒后，再用自来水冲洗干净，然后切成含2个腋芽的l～2cm长的茎段，再用0.1％升汞消毒3-5分钟，最后用无菌水冲洗5次；然后取出，用无菌滤纸吸干水份，用刀切去伤口坏死部分；
⑵组织诱导：将消毒处理后的嫩枝接种在诱导培养基上，每瓶接种3枝，进行愈伤组织诱导培养，5-7天后可观察到嫩枝切口处有少量愈伤组织开始萌动，再过5-7天后可观察到淡黄色致密的愈伤组织；
⑶继代培养：将诱导产生的生长状态良好的淡黄色颗粒状的愈伤组织接种于继代培养基中，每瓶接种3枝，进行继代培养，第7-10天后可观察到继代培养基中又有新的愈伤组织产生；
⑷分化培养：将继代增殖产生的淡黄色颗粒状愈伤组织转接到分化培养基上，每瓶接种3枝，进行分化培养，7-10天后可观察到愈伤组织开始生长分化，颜色变绿，5-7天后能观察到淡黄绿色不定芽，5-7天后出现丛生芽，平均每枝愈伤组织分化5个芽；
⑸壮苗培养：将分化培养的丛生芽转接到壮苗培养基中进行壮苗培养，20-25天可观察到丛生芽发育成了2.5-3.5cm的丛生苗；
⑹生根培养：将壮苗培养的丛生苗转接到生根培养基上进行诱导生根，10-15天可观察到苗根开始萌发，再过10-15天可观察到81%的苗均生根，根须平均长度3.1cm，每株苗平均生根3-4条；然后可出瓶炼苗，移栽。
2.根据权利要求1所述的天门冬的组培繁殖方法，其特征在于各发育生长阶段的培养条件是：人工气候培养箱，光照周期起止时间是8:00-20:00，培养温度是日温25℃，夜温18℃，培养湿度是50-60%，光照强度在组织诱导、继代培养和分化培养阶段是1000Lx-1600Lx，在壮苗培养和生根培养阶段是1600Lx-2000Lx。
3.根据权利要求1所述的天门冬的组培繁殖方法，其特征在于各发育生长阶段的基本培养基是：MS+3g/L蔗糖+7g/L琼脂粉，PH值为5.8。
4.根据权利要求1所述的天门冬的组培繁殖方法，其特征在于各发育生长阶段培养基的具体配方如下：
⑴诱导培养基：MS+6-BA2.0mg/L+IBA1.0mg/L；
⑵继代培养基：MS+6-BA1.0mg/L+IBA2.0mg/L；
⑶分化培养基：½MS+6-BA3.0mg/L+IAA4.5mg/L；
⑷壮苗培养基：½MS+6-BA1.5mg/L+IAA0.5mg/L；
⑸生根培养基：½MS +NAA1.0mg/L+IBA1.0mg/L。
CN201110449408.3A 2011-12-29 天门冬的组培繁殖方法 Expired - Fee Related CN102487830B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201110449408.3A CN102487830B (zh) 2011-12-29 天门冬的组培繁殖方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201110449408.3A CN102487830B (zh) 2011-12-29 天门冬的组培繁殖方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN102487830A true CN102487830A (zh) 2012-06-13
CN102487830B CN102487830B (zh) 2016-12-14

Family

ID=

Cited By (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105145359A (zh) * 2015-09-15 2015-12-16 广西壮族自治区药用植物园 一种羊齿天冬组织培养快速繁殖方法
CN105850482A (zh) * 2016-05-18 2016-08-17 高文靓 一种苍术的育苗方法
CN106212290A (zh) * 2016-10-09 2016-12-14 韦波 一种天冬培养基
CN106359087A (zh) * 2016-08-25 2017-02-01 广西中科群源农林科技有限公司 一种天门冬组培快繁育苗方法
CN106376466A (zh) * 2016-10-09 2017-02-08 韦波 一种天冬组培苗培养基
CN106431677A (zh) * 2016-10-09 2017-02-22 韦波 一种新型天冬组培苗培养基
CN106417024A (zh) * 2016-10-09 2017-02-22 韦波 一种提高天门冬素的新型天冬组培苗培养基
CN106431676A (zh) * 2016-10-09 2017-02-22 韦波 一种新型天冬培养基
CN106472309A (zh) * 2016-10-09 2017-03-08 韦波 一种提高天门冬素的天冬组培苗培养基
CN111616048A (zh) * 2020-04-27 2020-09-04 云南省农业科学院药用植物研究所 一种天冬组培快繁新方法
CN115968781A (zh) * 2022-12-14 2023-04-18 贵州省农作物品种资源研究所 一种西南天门冬嫩芽组培快繁方法
CN116746486A (zh) * 2022-12-29 2023-09-15 福建省中科生物股份有限公司 一种提高天门冬肉质块根诱导率的诱导方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101946705A (zh) * 2010-08-18 2011-01-19 怀化学院 一种简单高效的天门冬快繁方法

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101946705A (zh) * 2010-08-18 2011-01-19 怀化学院 一种简单高效的天门冬快繁方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
SAURABH R. MEHTA ETAL: "Direct In vitro Propagation of Asparagus adscendens Roxb.", 《PLANT TISSUE CULT.》, vol. 15, no. 1, 31 December 2005 (2005-12-31), pages 25 - 32 *
杨尧军等: "羊齿天门冬组培快繁体系的研究", 《育苗技术》, no. 12, 31 December 2008 (2008-12-31), pages 16 - 18 *
葛锦华等: "天冬愈伤诱导培养基的筛选", 《贵州农业科学》, vol. 38, no. 2, 31 December 2010 (2010-12-31), pages 16 - 18 *
赵明: "我国天门冬研究的概况及展望", 《内江师范学院学报》, vol. 20, no. 6, 31 December 2005 (2005-12-31), pages 52 - 55 *

Cited By (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105145359A (zh) * 2015-09-15 2015-12-16 广西壮族自治区药用植物园 一种羊齿天冬组织培养快速繁殖方法
CN105850482A (zh) * 2016-05-18 2016-08-17 高文靓 一种苍术的育苗方法
CN106359087B (zh) * 2016-08-25 2019-05-03 广西中科群源农林科技有限公司 一种天门冬组培快繁育苗方法
CN106359087A (zh) * 2016-08-25 2017-02-01 广西中科群源农林科技有限公司 一种天门冬组培快繁育苗方法
CN106472309A (zh) * 2016-10-09 2017-03-08 韦波 一种提高天门冬素的天冬组培苗培养基
CN106431677A (zh) * 2016-10-09 2017-02-22 韦波 一种新型天冬组培苗培养基
CN106417024A (zh) * 2016-10-09 2017-02-22 韦波 一种提高天门冬素的新型天冬组培苗培养基
CN106431676A (zh) * 2016-10-09 2017-02-22 韦波 一种新型天冬培养基
CN106376466A (zh) * 2016-10-09 2017-02-08 韦波 一种天冬组培苗培养基
CN106472309B (zh) * 2016-10-09 2018-05-08 新昌县鸿吉电子科技有限公司 一种提高天门冬素的天冬组培苗培养基
CN106376466B (zh) * 2016-10-09 2018-12-21 嵊州市林美生物科技有限公司 一种天冬组培苗培养基
CN106212290A (zh) * 2016-10-09 2016-12-14 韦波 一种天冬培养基
CN111616048A (zh) * 2020-04-27 2020-09-04 云南省农业科学院药用植物研究所 一种天冬组培快繁新方法
CN115968781A (zh) * 2022-12-14 2023-04-18 贵州省农作物品种资源研究所 一种西南天门冬嫩芽组培快繁方法
CN116746486A (zh) * 2022-12-29 2023-09-15 福建省中科生物股份有限公司 一种提高天门冬肉质块根诱导率的诱导方法
CN116746486B (zh) * 2022-12-29 2024-07-19 福建省中科生物股份有限公司 一种提高天门冬肉质块根诱导率的诱导方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104335903B (zh) 一种促进白及快速繁殖的方法
CN100998311B (zh) 山慈姑独蒜兰人工繁殖方法
CN101946705B (zh) 一种天门冬快繁方法
CN102499080B (zh) 一种以苦荞麦叶柄为外植体的植株快速繁殖方法
CN105052737A (zh) 一种滇黄精种子一步成苗的组培方法
CN102499088B (zh) 一种利用广西金线莲蒴果快速繁育其种苗的方法
CN102550242A (zh) 天门冬的分株繁殖方法
CN113179951B (zh) 一种香露兜组培种苗快速繁育方法
CN102907323A (zh) 一种白及种子无菌生产微型种茎的方法
CN102246694A (zh) 一种白背三七的组织培养方法
CN109220790B (zh) 一种红果参离体外繁方法
CN106718926B (zh) 一种梅叶冬青组织培养快速繁殖方法
CN103004595A (zh) 一种人参果的嫩枝扦插繁育方法
CN101983557A (zh) 檀香种胚苗茎段的离体快速繁殖方法
CN106538387B (zh) 一种苦蘵的组织培养方法
CN105766654A (zh) 一种南川木菠萝组织培养方法
CN102144569B (zh) 一种白背三七的快繁方法
CN102150620B (zh) 金果榄组培繁殖方法及其诱导培养基
CN1930952A (zh) 明日叶的组织培养和快速繁殖方法
CN105794639B (zh) 一种薄荷叶片不定芽诱导及植株再生的方法
CN101194593A (zh) 草珊瑚的组培快繁方法
CN109874676A (zh) 一种百香果脱毒苗的快速繁育方法
CN104604691B (zh) 一种香花崖豆藤组培快繁方法
CN102283124B (zh) 菘蓝根外植体器官发生方法
CN103535276A (zh) 一种蘘荷组织培养快速繁殖的方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20161214

Termination date: 20161229