CN102438757B - 离心分离试剂盒以及使用该试剂盒进行离心分离的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种用于离心分离全血或体液的试剂盒以及使用该试剂盒的离心分离方法。更详细地，本发明涉及一种用于离心分离的试剂盒以及使用该试剂盒的离心分离方法，所述方法包括提取全血或体液，以及在离心分离管中安装注射器，使得通过离心分离而分离的靶物质(富含血小板的血浆或干细胞)可直接在注射器中收集，因此容易提取靶物质。

Description

离心分离试剂盒以及使用该试剂盒进行离心分离的方法
相关申请的交叉引用
本申请在35 USC 119(a)下，要求于2009年10月28日在韩国共和国提交的韩国专利申请10-2009-0102762的优先权，该专利申请全文并入作为参考。
技术领域
本发明涉及用于离心分离血液和体液的离心分离试剂盒，以及使用该离心分离试剂盒进行离心分离的方法。更具体地，本发明涉及离心分离试剂盒，以及使用该离心分离试剂盒进行离心分离的方法，该试剂盒能够通过向离心分离管安装注射器并使用该注射器收集已离心分离的靶物质，从而容易地提取靶物质。
背景技术
随着医疗技术的发展，存在于身体组织中的有益组分，比如干细胞或血小板，被用于治疗疾病或应用于外科手术。
如本领域公知的，将干细胞分类为胚胎干细胞和成人干细胞，并且已知成人干细胞分布在骨髓、脐带血或脂肪组织中。
这种干细胞定义为具有通过细胞重复分裂的自我更新性能、通过细胞分裂成各种组织的多能性以及通过细胞分裂成所有类型的细胞的全能性。
此外，当出现伤口时，在试图停止出血的同时，血小板通过一系列级联过程分泌生长因子。更详细地，血小板为包括在全血中的富含血小板血浆(PRP)，其可通过离心分离全血而得到。PRP包括血小板衍生的生长因子(PDGF)、转化生长因子(TGF)、表皮生长因子(EGF)，等。已知这些生长因子作为涉及控制对于组织的再生、细胞的趋化促进和成熟促进、干细胞的刺激和增长、有机合成，等必要的新生血管促进的因子。
出于该原因，在临床上利用干细胞和富含血小板血浆(PRP)的趋势增加。
目前，进行各种方法来从干细胞提取靶细胞或从全血有效地得到血小板或PRP。
当临床上提取靶细胞(成人干细胞)时，从脂肪组织和骨髓提取靶细胞，并且从骨髓提取干细胞的过程与从全血提取富含血小板血浆(PRP)的过程基本上类似。出于该原因，以下将描述从全血提取PRP的过程。
首先，制备用于收集血液的注射器和用于离心分离的离心分离管。此时，注射器使用配备有注射针和常用注射器的圆筒，使得常用注射器的功能像一个活塞，并且离心分离管为在其中接受预定的物质并具有被盖密封的上部的常见的容器。
血液收集注射器用于收集全血。此处，注射器采用10cc血液-收集注射器。例如，通过使用装有1.5cc酸性柠檬酸盐葡萄糖(ACD)溶液(为一种抗凝血剂)的10cc注射器收集8.5cc的血液，随后放置在10cc离心分离管中，并且然后在离心分离器中离心分离。
如果将血液离心分离，如图1所示，由于比重，从离心分离管2的底部开始，能将血液分离为三层：红血细胞(RBC)层、含有许多血小板的富含血小板血浆(PRP)层、贫血小板血浆(PPP)层。此时，富含血小板血浆(PRP)也称为白细胞层。换言之，可将血液能分离成包括RBC层的血液细胞组分和包括富含血小板血浆(PRP)和PPP的血液细胞血浆组分。此时，通过使用新的安装有尖晶石长针的5cc注射器，从中间层(PRP层)而不是RBC层和PPP层收集富含血小板血浆(PRP)。
同时，为了富集血小板，再次重复离心分离过程和收集已富集的富含血小板血浆(PRP)的过程。
在该过程中，需要注意当收集富含血小板血浆(PRP)时不能同时收集红血细胞(RBC)。换言之，重要的是，仅收集富含血小板血浆(PRP)(血浆组分)。出于该原因，为了分离富含血小板血浆(PRP)层和RBC层，使用通过放入细胞隔离凝胶进行离心分离的方法。
细胞隔离凝胶为其浓度在红血细胞的比重和血小板的比重之间的隔离溶液，并且使用聚蔗糖TM(FicollTM)、PercollTM或蔗糖衍生物。换言之，如图2所示，如果将血液放在包括细胞隔离凝胶Vf的离心分离管2中并通过离心分离器(未示出)处理，则管2中的血液能分离成上血浆组分和下血液细胞组分，带有细胞隔离凝胶Vf作为边界层。
因此，当通过细胞隔离凝胶Vf分离红血细胞(RBC)和富含血小板血浆(PRP)时，通过使用新的安装有尖晶石长针的5cc注射器1，可安全地仅收集富含血小板血浆(PRP)，使得红血细胞(RBC)不会从富含血小板血浆(PRP)层中一起被提取(参见图3)。
如上所述，已提出用于从全血提取富含血小板血浆(PRP)的各种类型的离心分离管和注射器。例如，韩国专利登记号10-0430893公开了一种血清分离注射器，其被设置为通过使用注射器并随后使用注射器作为离心分离管收集血液，并且韩国实用新型登记号20-0269465公开了含有血清分离凝胶的离心分离管和血液收集注射器，血清分离凝胶在血液收集管中形成凝胶容器，在其中收集血液，接着切割容器棒，并通过密封盖来密封并进行离心分离。
然而，上述方法太耗时并且收集血小板层(细胞血浆组分)不一致，并且具有一起收集红血细胞层的风险。因此，对于临床应用，不容易给出精确性。此外，用于收集全血和提取血浆组分的注射器和离心分离管的消耗比增加。
为了解决这种问题，已开发了自动分类技术、富含血小板血浆(PRP)分离试剂盒和细胞隔离凝胶。
然而，考虑价格和效率，在一般的民营医院中可能不容易使用用于自动分类的自动化设备。
此外，尽管提供了适宜个体民营医院的具有各种价格和性能的各种试剂盒，但是，由于高昂的价格和消耗品的增加，使用这些试剂盒仍存在负担。
此外，由于在外科手术中所需的富含血小板血浆(PRP)需要提取并随后立即使用，当提取富含血小板血浆(PRP)时，增加了等待时间，这样劣化了工作效率。
发明内容
设计本发明来解决现有技术的问题，因此，本公开的一个目的是提供能采用方便和稳定的方式通过离心分离来提取靶物质的离心分离试剂盒，以及使用该试剂盒进行离心分离的方法。
本公开的另一个目的是提供一种离心分离试剂盒以及使用该试剂盒进行离心分离的方法，该试剂盒能允许使用便宜的消耗品、降低所用的消耗品的量、并且通过降低进行或接受外科手术的人的等待时间来提高工作效率。
在一方面，提供了一种离心分离试剂盒，该离心分离试剂盒向离心分离器安装，以按从底部开始的顺序，将全血分离成为由红血细胞(RBC)层组成的血液细胞组分和由富含血小板血浆(PRP)层和贫血小板血浆(PPP)层组成的血浆组分，其中，所述离心分离试剂盒包括：离心分离管，所述离心分离管具有密闭的下部和敞开的上部以及用于打开或关闭上部的盖，所述离心分离管包括安装在离心分离管中并且具有收集管的收集单元，所述离心分离管填充有预定量的细胞隔离凝胶，并且其中，所述收集单元安装成使得在离心分离管的下部形成空间，该空间相应于已离心分离的全血的红血细胞(RBC)和细胞隔离凝胶的体积总和。
在另一方面，还提供了一种离心分离试剂盒，该离心分离试剂盒向离心分离器安装，以按从底部开始的顺序，将全血分离成为由红血细胞(RBC)层组成的血液细胞组分和由富含血小板的血浆(PRP)层和贫血小板血浆(PPP)层组成的血浆组分，所述离心分离试剂盒包括：离心分离管，所述离心分离管包括安装在其中并且具有收集管的收集单元，所述离心分离管具有安装在其下部的连接单元(coupling unit)并且具有与连接单元的内部连通的管插入部分，所述离心分离管具有敞开的上部；和安装在所述离心分离管的连接单元的并填充有预定量的细胞隔离凝胶的下盖，所述下盖具有向上突出以密封所述管插入部分的紧固单元，其中，所述收集单元安装成使得在其下部形成空间，该空间相应于已离心分离的全血的红血细胞(RBC)和细胞隔离凝胶的体积总和。
优选地，所述离心分离试剂盒还包括注射器，所述注射器在其上部具有开口，使得向该处安装的具有橡胶填充物的活塞可移动地插入到敞开的上部中，所述注射器在其下部具有插入部分，向该处安装注射器针，使得在注射器中收集全血。
优选地，从注射器中移除活塞和注射器针，使得橡胶填充物存在于注射器中，将该注射器插入具有敞开的上部的离心分离管中并安装在离心分离器上负载的收集单元的上部。
优选地，所述离心分离管的内径大于所述注射器的外径，并且所述注射器的外圆周紧密粘附于所述离心分离管的内圆周。
优选地，使所述收集单元的上部成型为相应于所述注射器的接触面，使得所述注射器的插入部分插入收集管中并紧密粘附于收集管。
优选地，所述收集单元的长度大于所述注射器插入部分的长度。
优选地，为了基于收集单元收集通过离心分离器分离全血而得到的血浆组分，在产生血浆组分的收集单元的下部空间的容量(A)、从注射器收集的全血Wb、红血细胞(RBC)的体积Vb、已离心分离的红血细胞(RBC)的体积比(α)以及细胞隔离凝胶的体积Vf应满足以下关系：
A＝(α×Wb)+Vf＝Vb+Vf；和
0≤Vf≤Wb。
优选地，在收集单元中形成有通风孔，使得当全血流进离心分离管时，离心分离管中的空气排出，并且当注射器安装并紧密粘附于收集单元时，所述通风孔关闭。
优选地，沿着离心分离管的长度方向，在离心分离管的内侧上以规则的间隔形成倾斜的突出，并且由于由注射器施加的压力，收集单元向下移动突出的间隔那么多，因此不能向上移动。
优选地，所述离心分离管由透明的材料制成，并且在离心分离管的外圆周上标记代表位于突出的间隔中的空间体积的刻度，使得根据在已收集的全血中的红血细胞(RBC)的体积和填充的细胞隔离凝胶的体积的总和来调节收集单元的位置。
优选地，所述下盖紧密粘附于离心分离管的下部，并且根据连接的程度来调节产生血浆组分的位置的高度。
优选地，所述下盖被设置为在密封注射器的插入部分的同时安装在注射器上。
在另一方面，还提供了使用上述离心分离试剂盒进行离心分离的方法，所述方法包括：(a1)制备离心分离管和注射器；(b1)通过使用所述注射器收集全血；(c1)向所述离心分离管安装收集全血的注射器；(d1)在所述离心分离器上负载离心分离管，该离心分离管安装有注射器；和(e1)操作所述离心分离器，以向注射器中收集血浆组分。
优选地，在步骤(c1)中，将活塞和注射器针从收集全血的注射器中移除，使得橡胶填充物存在于注射器中，并且将注射器插入移除盖的所述离心分离管中并放置在收集单元上。
优选地，沿着离心分离管的长度方向，在离心分离管的内侧上以规则的间隔形成倾斜的突出，并且由于由注射器施加的压力，收集单元向下移动突出的间隔那么多，因此不能向上移动。
优选地，在离心分离管的外圆周上标记代表位于突出的间隔中的空间体积的刻度，并且在步骤(a1)或步骤(b1)之前，根据在已收集的全血中的红血细胞(RBC)的体积和填充的细胞隔离凝胶的体积的总和来调节收集单元的位置，使得在注射器中收集血浆组分。
在另一方面，还提供了使用另一种离心分离试剂盒进行离心分离的方法，所述方法包括：(a2)制备离心分离管和注射器；(b2)通过使用所述注射器收集全血；(c2)向所述离心分离管的下侧安装下盖；(d2)向所述离心分离管安装收集全血的注射器；(e2)在离心分离器上负载安装有注射器的所述离心分离管；和(f2)操作所述离心分离器，以在注射器中收集血浆组分。
优选地，在步骤(d2)中，将活塞和注射器针从收集全血的注射器中移除，使得橡胶填充物存在于注射器中，并且将注射器插入移除盖的所述离心分离管中并放置在收集单元上。
优选地，使所述收集单元的上部成型为相应于所述注射器的接触面，使得注射器的插入部分插入收集管中并紧密粘附于收集管。
优选地，所述离心分离管的内径大于所述注射器的外径，并且所述注射器的外圆周紧密粘附于所述离心分离管的内圆周。
优选地，所述收集单元的长度大于所述注射器插入部分的长度。
附图说明
参考附图，由以下实施方式的描述，本发明的其他目的和方面将显而易见，在附图中：
图1为说明用于离心分离全血的常规离心分离管的截面图；
图2说明用于离心分离全血的其中接受细胞隔离凝胶的常规离心分离管；
图3说明由图2的已离心分离的血液提取富含血小板血浆(PRP)；
图4为说明向根据本公开的一种优选的实施方式的离心分离试剂盒提供的注射器的分解的透视图；
图5为说明向根据本公开的一种优选的实施方式的离心分离试剂盒提供的离心分离管的分解的透视图；
图6为说明通过使用图4的注射器收集血液的截面图；
图7为说明图5的离心分离管填充细胞隔离凝胶的截面图；
图8为说明根据本公开的一种优选的实施方式的离心分离试剂盒的分解的剖面图；
图9为说明在已组装的状态下的离心分离试剂盒的截面图；
图10为用于举例说明使用根据本公开的一种优选的实施方式的离心分离试剂盒进行离心分离的方法的流程图；
图11为说明通过使用根据本公开的优选的实施方式的离心分离试剂盒的已离心分离状态的截面图；
图12说明根据本公开的假定，在离心分离的状态下，图11的离心分离试剂盒的给定数量；
图13为说明向根据本公开的优选的实施方式的离心分离试剂盒提供另一种离心分离管的截面图；
图14为说明向图13的离心分离管安装注射器的截面图；
图15为说明向根据本公开的优选的实施方式的离心分离试剂盒提供另一种离心分离管的截面图；
图16为说明图15的离心分离管的透视图；
图17为说明根据本公开的一种优选的实施方式的另一种离心分离试剂盒的分解的剖面图；
图18为图17的已组装的剖面图；
图19为用于举例说明使用根据本公开的优选的实施方式的另一种离心分离试剂盒进行离心分离的方法的流程图；和
图20为说明向注射器安装下盖的截面图，该下盖为向根据本公开的优选的实施方式的另一种离心分离试剂盒提供的下盖。
具体实施方式
下文中，参考附图来详细描述本发明的优选的实施方式。在描述前，应理解的是，用于说明书和所附权利要求书的术语不应解释为局限于通常的和字典的含义，而是基于本发明人能适于最佳解释来定义术语的原则，基于相应于本发明的技术方面的含义和观念进行解释。因此，本文提出的描述仅为用于举例说明目的的一个优选的实例，而不意图限制本发明的范围，因此，应理解的是，在不偏离本发明的精神和范围的情况下，可以对本发明进行其他等同替换和修改。
图4为说明向根据本公开的一种优选的实施方式的离心分离试剂盒提供的注射器的分解的透视图，并且图5为说明向根据本公开的一种优选的实施方式的离心分离试剂盒提供的离心分离管的分解的透视图。
参考图4和图5，离心分离试剂盒100(参见图8)包括注射器110和离心分离管120，向离心分离管120安装注射器110。
注射器110包括圆筒111、活塞115和注射针114，其中，圆筒111具有下部并且在下部上形成插入部分112，和上部并且在上部中形成开口113，活塞115从圆筒111的敞开的上部插入并可在圆筒111的长度方向移动，注射针114安装在圆筒111的下部。
如上所述的注射器110为常见的一种，并且将其设置为在圆筒111中收集血液。此时，向活塞115安装的橡胶填充物116可与活塞115分离。换言之，当橡胶填充物116与活塞115分离时，将活塞115移除，同时橡胶填充物116存在于注射器110中。
通过使用注射器110，收集全血Wb(参见图6)。
离心分离管120包括管主体121、收集单元125和盖126，其中，管主体121具有上部，在上部形成敞开的部分123以接收预定的物质，在管主体121中提供收集单元125，而盖126用于打开或关闭上部。
管主体121优选由透明的材料制成，并且在上部形成螺纹121’，用于与盖126连接并与盖126拧紧。此时，与盖126连接的上部，即基于收集单元125的上部，为支架122。当注射器110插入离心分离管120中时，支架122起到支撑注射器110的作用。后面将描述支架122。
在收集单元125的中心部分，基于收集单元125，形成连通上侧和下侧的收集管124。收集管124相应于注射器110的插入部分112成型和定尺寸。换言之，收集单元125的上部成型为优选相应于注射器110的接触面，使得注射器110的插入部分112在其上放置，并且注射器110准确地紧密粘附于离心分离管120。因此，当将注射器110放置在收集单元125上时，注射器110的插入部分112插入收集管124中。此处，优选收集管124的长度大于注射器的插入部分112的长度。收集管124可容易地收集靶物质并能精确收集。
同时，离心分离管120的内径等于或大于注射器110，即，圆筒111的外径。例如，设定离心分离管120的内径，使得注射器110的外圆周紧密粘附于离心分离管120的内圆周。
如上所述的离心分离管120可填充有细胞隔离凝胶Vf(参见图7)。细胞隔离凝胶Vf用于在离心分离时将全血Wb分离成为血液细胞组分Vb和血浆组分Vp，如图11所示。根据靶物质收集器，可将细胞隔离凝胶Vf与全血Wb以最高1∶1的最大体积比混合，或者，根据情况，可根本就不使用细胞隔离凝胶Vf。
在本公开的实施方式中，假定当全血Wb进行离心分离时使用细胞隔离凝胶Vf。
同时，在本公开中，在离心分离期间，在向收集单元125安装的注射器110中收集血浆组分Vp。因此，重要的是，设定收集单元125对于离心分离管120的安装位置。将在以下描述设定收集单元125的位置的实施方式和用于离心分离的方法。
图8为说明根据本公开的一种优选的实施方式的离心分离试剂盒的分解的剖面图，图9为说明在已组装的状态下的离心分离试剂盒的截面图，并且图10为用于举例说明使用根据本公开的一种优选的实施方式的离心分离试剂盒进行离心分离的方法的流程图。
参考图8至图10，首先，制备离心分离管120和注射器110(S11)。此时，如图7所示，离心分离管120填充有细胞隔离凝胶Vf。
接着，如图6所示，通过使用注射器110收集全血Wb(S12)。
随后，向离心分离管120安装收集全血Wb的注射器(S13)。此时，如图8和图9所示，注射器针114和活塞115已从注射器110中移除。此处，当活塞115移除时，应将活塞115移除，使得橡胶填充物116保留。根据情况，分离的橡胶填充物(未示出)可用于填充注射器110的上部。将移除注射器针114和活塞115的注射器110通过移除盖126的离心分离管120的敞开的上部插入并在此安装。此处，为了容易地便于将注射器110向离心分离管120安装，将注射针114移除，并且将除了橡胶填充物116以外的活塞115移除，使得后来可容易地在离心分离器(未示出)上负载离心分离试剂盒100。
通过在离心分离管120的上部形成的支架122，将注射器110牢固安装。换言之，注射器110的外圆周紧密粘附于离心分离管120的内圆周，并且支撑注射器110如支架122的长度那么多。此处，将注射器110的插入部分112插入收集管124中。
随后，在离心分离器上负载安装有注射器110的离心分离管120(S14)。
之后，如图11所示，操作离心分离器，将全血Wb分离成为血液细胞组分Vb和血浆组分Vp(S15)。通过离心分离，具有高比重的材料位于较低的位置，而具有低比重的材料位于高的位置。换言之，基于收集单元125的下端，在下侧形成血液细胞组分Vb，而在上侧形成血浆组分Vp。由于设置收集单元125，使得在离心分离管120的下部形成空间，该空间相应于在已离心分离的全血Wb中的红血细胞(RBC)Vb和细胞隔离凝胶Vf的体积总和。
如果通过上述程序，与离心分离一起，在注射器110中收集血浆组分Vp，则可立即使用血浆组分Vp。因此，使用血浆组分Vp的外科手术和生物工程利用所耗的工作时间降低，这提高了工作效率。此外，由于不必使用分离的注射器来提取血浆组分Vp，可防止浪费消耗品。
图11为说明根据图10的方法的已离心分离状态的截面图，并且图12说明根据本公开的假定，在已离心分离状态下，图11的离心分离试剂盒的给定数量。参考图11和图12，将描述调节收集单元的位置的方法。
下文中，将更详细地设定使用离心分离器、注射器和离心分离管的限制条件，以及所考虑的和使用的材料的体积和根据体积的高度。
通常考虑可在离心分离器(未示出)上负载的高度来确定离心分离管和注射器的高度。例如，由于具有10cc体积的常规离心分离管的长度通常为13cm，并且由于可安装最大14cm的长度，在该考虑下来确定离心分离管和注射器的高度。
因此，作为一个实例，本公开的实施方式提出，可向可用于离心分离器的离心分离管和注射器负载具有14cm长度的制品。根据种类，离心分离器具有不同的长度限制。因此，对于本领域普通技术人员来说显而易见的是，根据离心分离器的种类，可适宜地选择根据本公开的离心分离管和注射器的设计条件。
在本公开的实施方式中，将注射器110描述为10cc注射器，常用作一个实例。注射器110填充有1.5cc用作抗凝剂的ACD溶液，以防止血液凝结，随后在注射器100中收集8.5cc患者的血液，并向离心分离管120安装。
细胞隔离凝胶Vf用于离心分离管120，以便排除红血细胞(RBC)并精确地得到PRP(富含血小板血浆)。细胞隔离凝胶Vf可以1∶1的最大比率与全血Wb混合，或者可以根本不使用细胞隔离凝胶Vf。此处，细胞隔离凝胶Vf设定为体积为2.5cc并且长度为2cm。换言之，如果在离心分离管120中填充2.5cc细胞隔离凝胶Vf，则细胞隔离凝胶Vf的高度为2cm。
同时，当将全血Wb离心分离时，血浆组分用Vp表示，而血液细胞组分用Vb表示。此处，由于血液细胞组分Vb的比重大于血浆组分Vp的比重，在离心分离期间，在下侧收集血液细胞组分Vb。
通常，当将全血Wb离心分离时，血液细胞组分(即红血细胞(RBC))Vb的体积比α为约45％，但是这取决于被收集血液的人。因此，相对于全血Wb为10cc，红血细胞(RBC)的体积Vb的容量为4.5cc，并且在3cm高度内在离心分离管120的下侧收集。
换言之，可理解为，Wb＝Vp+Vb，并且10cc＝5.5cc+4.5cc。此外，由于细胞隔离凝胶Vf的体积(2.5cc)和红血细胞(RBC)的体积Vb(4.5cc)的总和为7cc，可发现，在7cc的体积高度处形成白细胞层(即PRP层)。换言之，在7cc的体积高度的上侧中形成血浆组分Vp。
因此，在采用标准方式制备离心分离管120的情况下，如果细胞隔离凝胶的体积高度为2cm并且血液细胞体积的体积高度为3cm，则安装收集单元125的高度h为5cm。换言之，收集单元125的下侧应位于5cm高度处。
由以上，可得到以下方程式1。
方程式1
A＝(α×Wb)+Vf＝Vb+Vf
其中，0≤Vf≤Wb；
A为血液细胞组分和细胞隔离凝胶的体积总和；
Wb为全血的体积；
Vb为红血细胞(RBC)的体积；
α为已离心分离的红血细胞(RBC)的体积比；和
Vf为细胞隔离凝胶的体积。
如在方程式1中，可理解为，形成收集单元125的下空间的容量为将血液细胞组分Vb和细胞隔离凝胶Vf的体积相加而得到的容量。换言之，优选调解收集单元125的下侧的位置，使得在收集单元125的下侧中接收容量A。
此外，通过使用方程式1，假定安装收集单元125的高度为h，则红血细胞(RBC)Vb的体积高度为h Vb，并且细胞隔离凝胶Vf的体积高度为h Vf，可得到以下方程式。
方程式2
h＝h(Vf)+h(Vb)
其中，h为安装收集单元的高度。
换言之，安装收集单元125的高度h为h Vf+0.45×h Wb。因此，可基于方程式2设定收集单元125的高度。
同时，假定收集单元125的长度为d，并且其中安装注射器110的收集单元125的最上面的高度为h1，h1＝h+d，为安装注射器的高度。
此外，假定安装的注射器110的长度为l1，并且其中安装注射器110的离心分离管120的总长度(即试剂盒100的长度)为l。此时，如果考虑可向离心分离器安装的高度和特定的范围，收集单元125的长度d设定为1.5cm，并且如果l1设定为7cm，则试剂盒100的总长度变为l＝l1+d+h。换言之，试剂盒100的总长度l为13.5cm。因此，试剂盒100的长度小于14cm，14cm为可在离心分离器中安装的最大长度，因此可将试剂盒100向离心分离器安装。
此外，假定支撑注射器110的离心分离管120的支架122为s，并且注射器110的插入部分112的长度为l2。
此处，假定离心分离管120的长度为H，则H＝h+d+s＝h1+s。
支架s用于支撑注射器110，并优选为1cm-2cm。显然，支架s的长度不包括在总长度l中。
收集单元125的长度d大于插入部分112的长度l2。此处，如果插入部分112的长度l2设定为1.2cm，则l2＝1.2cm＜d。
此外，由于收集单元125的收集管124的长度d和注射器110的插入部分112的长度l2之间的差异，在收集管124中存在剩余的空间。可将血浆组分Vp与剩余的空间一起收集到收集管124和注射器110。作为一种供选，通过调节细胞隔离凝胶Vf的体积，可由注射器110的插入部分112收集血浆组分Vp。这可通过进一步使用与剩余的空间相同体积的细胞隔离凝胶Vf实现。
同时，在图12中所示的数字为由本公开的假定确定的任意的数字，并且显然，这些数字可根据所用的注射器和离心分离管的种类和体积而变。
结果是，根据如上所述的设定条件和方程式，通过设定安装收集单元125的位置，可将血浆组分Vp收集到注射器110。因此，由于在注射器110中收集期望的血浆组分Vp，它们可立即二次使用，并且进行或接受外科手术的人的等待时间下降，从而提高了工作效率。
图13为说明向根据本公开的优选的实施方式的离心分离试剂盒提供另一种离心分离管的截面图，并且图14为说明向图13的离心分离管安装注射器的截面图。
参考图13和图14，离心分离试剂盒200包括注射器110和离心分离管120，在离心分离管120中形成具有通风孔227的收集单元225。此时，在离心分离试剂盒200的各部件中，注射器110等同于图9所示的注射器110，在此不详细描述。此外，与图9等同的图13和图14的任何附图标记指定与图9中相同的部件。换言之，该实施方式基本上等同于前面的实施方式，不同之处在于在收集单元225中形成有通风孔227。
在收集单元225中形成有通风孔227。形成通风孔227，使得容易向离心分离管120安装注射器110。换言之，当全血从注射器110滴落时，离心分离管120中的空气排出，从而允许全血Wb容易地滴落。当注射器110紧密粘附于收集单元225的上部并放置在其上时，通风孔227关闭，使得全血Wb不能通过通风孔227逸出。
同时，作为通风孔227的一种供选，可在注射器110中形成孔(未示出)。换言之，当在注射器110的上侧中形成孔时，全血Wb可容易地流动进入离心分离管120。
可在前面指定的位置提供具有通风孔227的收集单元225，使得可通过上述离心分离的方法在注射器110中收集血浆组分Vp，这点对于本领域普通技术人员来说是显而易见的。
同时，即使已举例说明和描述了收集单元125和225的高度由设定条件决定，但是可调节收集单元125和225的高度，不局限于所决定的高度。
例如，如图15所示，在离心分离管320中形成突出328。此时，示于图15中的离心分离试剂盒300为具有改进的离心分离管320的另一种实施方式，并且在图15中与图9中相同的附图标记指定与图9中相同的部件。
在离心分离管320的长度方向，以规则的间隔，在离心分离管320中形成具有斜面的突出328。换言之，收集单元325被注射器110压迫，以向下移动突出328的间隔那么多。此时，已向下移动的收集单元325不能向上移动。因此，由于收集单元325的移动，当以卸料方向拉动注射器110时，在与收集管324连接的注射器110的插入部分112中收集的富含血小板血浆(PRP)不与另一层混合，而是保持平稳。
更详细地，具有突出328的离心分离管320由透明的材料制成，并且在其外圆周上标记刻度P(参见图16)。根据全血的红血细胞(RBC)层的体积Vb和填充的细胞隔离凝胶的体积Vf的总和，标记刻度p来调节位置。换言之，在突出328的每一个间隔处标记刻度p，使得可根据红血细胞(RBC)的体积Vb和细胞隔离凝胶的体积Vf的总和，调节收集单元325的位置。
例如，如上所述，当基本上使用10cc的全血和2.5cc(2cm)的细胞隔离凝胶时，如果收集9cc的全血，使得红血细胞(RBC)的体积变为4cc并且所得到的体积高度为2.5cm，则标记‘9(未示出)’作为距离管的下侧4.5cm的位置的刻度p。换言之，标记为‘9’的刻度p是指收集9cc血液的相应的高度。因此，进行外科手术的人推动和安装收集单元325如已收集的血液和细胞隔离凝胶的体积总和那么多，随后进行离心分离的方法。
图17为说明根据本公开的一种优选的实施方式的另一种离心分离试剂盒的分解的剖面图，并且图18为图17的已组装的剖面图。
参考图17和图18，离心分离试剂盒400包括注射器110、离心分离管420和下盖430，其中，可向离心分离管420安装注射器110，并向离心分离管420的下侧安装下盖430。此时，在离心分离试剂盒400的各部件中，注射器110等同于示于图9中的注射器110，并且此处不详细描述。此外，在图17和图18的各附图标记中，与图9中相同的附图标记指定相同的部件。
离心分离管420包括管主体421和收集单元425，所述管主体421具有其中形成开口的上部和其中形成管插入部分429’的下部，并且在管主体421中提供收集单元425。
将注射器110通过管主体421的敞开的上部插入收集单元425并放置在收集单元425上。此时，当注射器110的外圆周紧密粘附于管主体421的内圆周时，注射器110牢固安装。
向管主体421的下部提供具有管插入部分429’的连接单元429。管插入部分429’被设置为连通管主体421的内部和外部。
下盖430包括紧固部分439’和管连接部分439，其中，紧固部分439’向上突出以密封管插入部分429’，向连接单元429安装管连接部分439。此时，下盖430可填充有预定量的细胞隔离凝胶。此时，细胞隔离凝胶可能不通过管主体421的上部填充，管插入孔429’通过下盖430密封。换言之，通过向管主体421安装下盖430，可使用具有密闭的下部的离心分离管。
参考图19来描述使用如上所述设置的离心分离试剂盒400进行离心分离的方法。
根据本公开进行离心分离的方法包括六步。换言之，所述方法可包括制备离心分离管420和注射器110(S21)，通过使用注射器110收集全血(S22)，向离心分离管420的下侧安装下盖430(S23)，向离心分离管420安装收集全血的注射器110(S24)，在离心分离器(未示出)上负载安装有注射器110的离心分离管420(S25)，并且操作离心分离器，以在注射器中收集血浆组分(S26)。
在该方法中，除了步骤S23以外的所有步骤等同于上述步骤S11至S15。换言之，包括步骤S23的离心分离方法可容易地由前面的离心分离方法来理解，因此在此不详细描述。
关于步骤S23，向离心分离管420安装下盖430。此时，下盖430填充有预定量的细胞隔离凝胶。此处，优选填充2cc-2.5cc的细胞隔离凝胶。
设置下盖430使得可调节富含血小板血浆(PRP)的可变高度。例如，如果富含血小板血浆(PRP)位于收集单元425的下侧，则下盖430更紧密地粘附于管主体421并与之连接。在相反的情况下，下盖430与管主体421连接但不紧密粘附于管主体421。
此外，下盖430可与注射器110连接，以密封注射器110的插入部分112。换言之，如图20所示，下盖430与注射器110连接。换言之，注射器110的插入部分112与下盖430的紧固部分439’连接，并且连接下盖430，以围绕注射器的下部。
下盖430和注射器110之间的连接用于二次富集血小板。换言之，当二次富集富含血小板血浆(PRP)时，向注射器110安装下盖430，在注射器110中已提取富含血小板血浆(PRP)，从而进行离心分离。如果进行二次离心分离，则富含血小板血浆(PRP)在下盖430中积聚，并且PPP(贫血小板血浆)在注射器110中积聚。
结果是，通过使用如上的离心分离试剂盒100、200、300、400，可容易和稳定地提取血浆组分。同时，上述实施方式可独立地使用，或者可以选择性地组合和使用，这点对于本领域普通技术人员来说是显而易见的。
已详细描述了本发明。然而，应理解的是，当说明本发明的优选的实施方式时，仅通过举例说明的方式给出了详细描述和具体实例，由该详细描述，在本发明的精神和范围内的各种变化和修改对于本领域技术人员来说是显而易见的。
根据本公开的离心分离试剂盒和使用该试剂盒进行离心分离的方法具有以下效果。
首先，可简化用于由血液提取富含血小板血浆(PRP)或由骨髓提取干细胞的离心分离方法和收集方法，这样减少了工作耗时。因此，可减少进行或接受外科手术的人的等待时间。
第二，由于可在注射器中稳定地收集期望的靶物质，可确保可靠性和外科安全性。换言之，由于不使用用于提取靶物质的分离器注射器，可降低消耗品的成本。

Claims (22)

1.一种离心分离试剂盒，该离心分离试剂盒向离心分离器安装，以按从底部开始的顺序，将全血分离成为由红血细胞层组成的血细胞组分和由富含血小板血浆层和贫血小板血浆层组成的血浆组分，
其中，所述离心分离试剂盒包括离心分离管，所述离心分离管具有密闭的下部和敞开的上部以及用于打开或关闭上部的盖，所述离心分离管包括安装在该离心分离管中并且具有收集管的收集单元，所述离心分离管填充有预定量的细胞隔离凝胶，以及
其中，所述收集单元安装成使得在离心分离管的下部形成空间，该空间相应于已离心分离的全血的红血细胞和细胞隔离凝胶的体积总和。
2.一种离心分离试剂盒，该离心分离试剂盒向离心分离器安装，以按从底部开始的顺序，将全血分离成为由红血细胞层组成的血液细胞组分和由富含血小板血浆层和贫血小板血浆层组成的血浆组分，所述离心分离试剂盒包括：
离心分离管，所述离心分离管包括安装在该离心分离管中并且具有收集管的收集单元，所述离心分离管具有向离心分离管的下部安装的连接单元并且具有与该离心分离管内部连通的管插入部分，所述离心分离管具有敞开的上部；和
下盖，所述下盖向所述离心分离管的连接单元安装并填充有预定量的细胞隔离凝胶，所述下盖具有向上突出以密封所述管插入部分的紧固单元，
其中，收集单元和下盖安装成使得在离心分离管的下部形成空间，该空间相应于已离心分离的全血的红血细胞和细胞隔离凝胶的体积总和。
3.根据权利要求1或2所述的离心分离试剂盒，该离心分离试剂盒还包括上部具有开口的注射器，使得向所述注射器安装的具有橡胶填充物的活塞可移动地插入到敞开的上部中，所述注射器的下部具有插入部分，注射器针安装在该插入部分，使得在所述注射器中收集全血。
4.根据权利要求3所述的离心分离试剂盒，其中，将活塞和注射器针从注射器中移除，使得橡胶填充物存在于注射器中，将注射器插入具有敞开的上部的离心分离管中并向待负载在离心分离器上的收集单元的上部安装。
5.根据权利要求3所述的离心分离试剂盒，其中，所述离心分离管的内径大于所述注射器的外径，和
其中，所述注射器的外圆周紧密粘附于所述离心分离管的内圆周。
6.根据权利要求3所述的离心分离试剂盒，其中，所述收集单元的上部成型为相应于所述注射器的接触面，使得所述注射器的插入部分插入所述收集管中并紧密粘附于所述收集管。
7.根据权利要求6所述的离心分离试剂盒，其中，所述收集单元的长度大于所述注射器插入部分的长度。
8.根据权利要求3所述的离心分离试剂盒，其中，为了基于所述收集单元收集通过离心分离器分离全血而得到的血浆组分，在产生血浆组分的收集单元的下部中的空间的容量A、从所述注射器收集的全血Wb、红血细胞的体积Vb、已离心分离的红血细胞的体积比α以及细胞隔离凝胶的体积Vf满足以下关系：
A=(α×Wb)+Vf=Vb+Vf；和
0≤Vf≤Wb。
9.根据权利要求3所述的离心分离试剂盒，其中，在所述收集单元中形成有通风孔，使得当全血流进所述离心分离管时，所述离心分离管中的空气排出，并且
其中，当所述注射器安装并且紧密粘附于所述收集单元时，所述通风孔关闭。
10.根据权利要求3所述的离心分离试剂盒，其中，沿着所述离心分离管的长度方向，在所述离心分离管的内侧上以规则的间隔形成倾斜的突出，并且由于由所述注射器施加的压力，所述收集单元向下移动所述突出的间隔那么多，因此不能向上移动。
11.根据权利要求10所述的离心分离试剂盒，其中，所述离心分离管由透明的材料制成，并且在所述离心分离管的外圆周上标记代表位于所述突出的间隔中的空间的体积的刻度，使得根据在已收集的全血中的红血细胞的体积和填充的细胞隔离凝胶的体积的总和来调节所述收集单元的位置。
12.根据权利要求2所述的离心分离试剂盒，其中，所述下盖紧密粘附于所述离心分离管的下部，并且根据连接的程度来调节产生血浆组分的位置的高度。
13.根据权利要求2所述的离心分离试剂盒，其中，所述下盖被设置为在密封注射器的插入部分的同时向注射器安装。
14.使用根据权利要求1所述的离心分离试剂盒进行离心分离的方法，
(a1)制备离心分离管和注射器；
(b1)通过使用所述注射器收集全血；
(c1)向所述离心分离管安装收集全血的所述注射器；
(d1)在离心分离器上负载安装有所述注射器的所述离心分离管；和
(e1)操作所述离心分离器，以向所述注射器中收集血浆组分。
15.根据权利要求14所述的使用所述离心分离试剂盒进行离心分离的方法，其中，在步骤(c1)中，将活塞和注射器针从收集全血的所述注射器中移除，使得橡胶填充物存在于所述注射器中，并且将所述注射器插入移除盖的所述离心分离管中，并放置在收集单元上。
16.根据权利要求14所述的使用所述离心分离试剂盒进行离心分离的方法，其中，沿着所述离心分离管的长度方向，在所述离心分离管的内侧上以规则的间隔形成倾斜的突出，并且由于由所述注射器施加的压力，所述收集单元向下移动所述突出的间隔那么多，因此不能向上移动。
17.根据权利要求16所述的使用所述离心分离试剂盒进行离心分离的方法，
其中，在所述离心分离管的外圆周上标记代表位于所述突出的间隔中的空间的体积的刻度，并且
其中，在步骤(a1)或步骤(b1)之前，根据在已收集的全血中的红血细胞的体积和填充的细胞隔离凝胶的体积的总和来调节所述收集单元的位置，使得在所述注射器中收集血浆组分。
18.使用根据权利要求2所述的离心分离试剂盒进行离心分离的方法，所述方法包括：
(a2)制备离心分离管和注射器；
(b2)通过使用所述注射器收集全血；
(c2)向所述离心分离管的下侧安装下盖；
(d2)向所述离心分离管安装收集全血的所述注射器；
(e2)在离心分离器上负载安装有所述注射器的所述离心分离管；和
(f2)操作所述离心分离器，以在所述注射器中收集血浆组分。
19.根据权利要求18所述的使用所述离心分离试剂盒进行离心分离的方法，其中，在步骤(d2)中，将活塞和注射器针从收集全血的所述注射器中移除，使得橡胶填充物存在于所述注射器中，并且将所述注射器插入移除盖的所述离心分离管中，并放置在收集单元上。
20.根据权利要求14或18所述的使用所述离心分离试剂盒进行离心分离的方法，其中，使所述收集单元的上部成型为相应于所述注射器的接触面，使得所述注射器的插入部分插入收集管中并紧密粘附于收集管。
21.根据权利要求14或18所述的使用所述离心分离试剂盒进行离心分离的方法，
其中，所述离心分离管的内径大于所述注射器的外径，并且
其中，所述注射器的外圆周紧密粘附于所述离心分离管的内圆周。
22.根据权利要求21所述的使用所述离心分离试剂盒进行离心分离的方法，其中，所述收集单元的长度大于所述注射器插入部分的长度。
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