CN102428966A

CN102428966A - 一种作物病害防治复合生物制剂及其应用

Info

Publication number: CN102428966A
Application number: CN2011102921163A
Authority: CN
Inventors: 耿小青; 王立华; 陈靠山
Original assignee: KAOSHAN BIOLOGICAL SCIENCE AND TECHNOLOGY Co Ltd SHANDONG
Current assignee: Shandong kuaishan Supply Chain Management Co., Ltd
Priority date: 2011-09-29
Filing date: 2011-09-29
Publication date: 2012-05-02
Anticipated expiration: 2031-09-29
Also published as: CN102428966B

Abstract

本发明公开了一种作物病害防治复合生物制剂。其原料组成为：拟康氏木霉发酵液、枯草芽孢杆菌发酵液、水溶性甲壳糖、味精残液、黄腐酸钾。其中，拟康氏木霉和枯草芽孢杆菌是经过筛选和诱变处理获得的高效菌株，并通过液体深层发酵技术获得拟康氏木霉和枯草芽孢杆菌发酵液，再组合制成作物病害防治复合生物制剂。本发明作物病害防治复合生物制剂，对枯萎病、黄萎病、灰霉病、辣椒疫霉病、霜霉病、白粉病、灰霉病、叶霉病等病害都有明显防治效果，特别是用于农业中常见的危害性极大的枯萎病和黄萎病的防治。适用于番茄、辣椒、茄子、黄瓜、西瓜、苹果、韭菜、棉花等多种蔬菜、瓜果及农作物的病害防治和增产。

Description

一种作物病害防治复合生物制剂及其应用

技术领域

本发明是一种作物病害防治复合生物制剂，具体地说是一种生物农药和肥料集一体的无公害复合生物制剂，既可防治农作物常见的土传病害，又能提供农作物生长所必需的营养物质。

背景技术

目前，世界范围内公认的五大难防治的病害为土传病害、维管束病害、病毒病害、细菌病害和线虫病害。其中，土传病害是指土壤中的土传病原体从农作物的根部侵染，导致植物大量死亡，造成减产，影响经济效益的提高，属于毁灭性的病害。由于其危害广泛、严重，被列为这五大难防治的病害之首，而在我国每年因土传病害造成的损失就高达240亿。土传病害的防治走过了漫长的历程，从杀生性的土壤消毒剂如氯化苦、溴甲烷以及多种杀菌剂的应用发展到生物防治，但土传病害的传播与危害依然倡獗。究其原因在于耕作面积小，种植品种单一，土传病原菌在土壤中大量积累，而土传病原菌对土壤环境适应力强，合适的条件下就会大规模爆发，因此，解决好农作物土传病害防治问题越来越紧迫。严重危害农作物的土传病害主要包括：枯萎病，黄萎病，灰霉病，辣椒疫霉病，立枯病，猝倒病等等。其中，枯萎病和黄萎病是我国北方地区两种危害性极大的病害。

枯萎病，是由真菌或细菌引致的植物病害，发病突然，症状包括严重的点斑、凋萎，叶、花、果、茎或整株植物的死亡。疫病可影响花、叶、芽包、幼苗、小枝、茎(藤)及顶梢。大多数重要经济作物均受一种或多种疫病感染。例如，西瓜枯萎病是由半知菌亚门真菌西瓜尖镰孢菌侵染所致。病菌在土壤中和未腐熟的带菌肥料中越冬，在离开寄主的情况下，能存活5－6年，部分病菌可存活10年以上。西瓜枯萎病菌主要通过根部伤口或根毛顶端细胞间隙侵入，先在寄主管壁细胞间和细胞内生长，然后进入维管束，在导管内发育，病菌分泌果胶酶和纤维素酶，分解破坏细胞，使导管内积累果胶类物质，堵塞导管，影响水分运输，引起植株萎蔫，病株率可达70%左右，病残体及病粪，种子亦可传病。西瓜枯萎病各个时期均可发生，以结果期发病最重。其病菌适宜温度在25－30℃，土温低于23℃或高于34℃，发病较轻，土壤含水量高，湿度大时发病重。

黄萎病，由半知菌亚门、淡色孢科、轮枝菌属侵染所致。其病原菌主要为大丽轮枝菌(Verticillium dahliae Kleb)和黑白轮枝菌(Verticillium alboatrum)。黑白轮枝菌主要侵染茄科植物及首稽等植物；而大丽轮枝菌由于寄主极其广泛，对高温和剧烈温度变化的适应能力较强，所以主要感染在棉花，茄子、番茄、青椒、甜瓜、黄豆、菊、蔷薇等植物。最初，下部叶片局部萎蔫，叶边上卷，2—3天后，病部由黄白色转为黄色。叶片边缘变色较多，以小叶脉为中心呈楔形。随后，变色部位逐渐扩大，整片小叶黄变，慢慢褐变枯死。病害加重时，上部叶片也依次发病枯死，并导致下部叶片慢性枯萎。因此，病株株高降低、果实的坐果及生长明显受影响。有些年份发病率可达70～80％，产量损失达50～80％，重则绝收。

面对如此严峻的形势，以往的利用化学农药处理严重污染土壤，并且由于化学性质稳定，长期的积累又造成了对土壤的重复污染。同时，造成的病原体抗性增强，杀灭有益菌株，已经难以取得很好的防治效果。化学农药在防治病害同时，无选择地大量伤害了有益生物，破坏了自然界生物种群复杂的结构，导致生态系统平衡失调。针对现有技术的不足，我们采取了微生物防治技术。由于其通过微生物间或代谢产物与微生物间相互拮抗起作用，具有选择性强，对人、畜、农作物和自然环境安全，不易产生抗性等特点，而越来越受到人们的关注。

枯草芽孢杆菌和木霉作为可选用的生防菌株，早在二十世纪初就开始探讨和用于土传病原体的防治。枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BACI是一种嗜温的好氧性产芽孢杆状细菌，具有广泛的抗菌活性和极强的抗逆能力，因此一直是植病生物防治领域的研究热点。同时，研究发现木霉(Trichoderma spp.)是一种非常具有生防潜力的拮抗菌，其拮抗机制多种多样，包括产生抗生素、重寄生作用、溶菌作用、竞争作用等机制，对土壤中其他菌株都具有较好的抑菌效果，并且具有延长防效的作用。

当前我国的生物防治剂尽管种类繁多，但总体来说，品种及有效成分杂乱，所选用的菌种防治效果偏低和配方无针对性，生物防治制品的质量和实际应用效果不理想，生产成本高，大规模推广应用范例较少。具有针对性的高效菌种的分离筛选、纯化培养以及配方实现和生产成本问题，制约了生物防治制剂的发展。

发明内容

面对现在缺乏有效抑制土传病害的不足，本发明的目的在于，提供一种作物病害防治复合生物制剂，主要用于防治作物土传病害，特别是防治黄萎病和枯萎病为主的、高效的、无公害的生物防治、增产复合制剂。

本发明所述的作物病害防治复合生物制剂的组分包括拟康氏木霉发酵液和枯草芽孢杆菌发酵液。

本发明所述的作物病害防治复合生物制剂，包括以下主要组分：

拟康氏木霉发酵液、

枯草芽孢杆菌发酵液、

水溶性甲壳素、

味精残液、

黄腐酸钾。

本发明所述的作物病害防治复合生物制剂中所使用的枯草芽孢杆菌发酵液，是由枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BACI发酵制得的。

本发明中枯草芽孢杆菌枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BACI是从植株根际土壤中分离、然后经诱变、筛选的新型菌株，命名为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis BACI)-。该菌株已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC进行保藏，保藏号为CGMCC NO.1442，保藏时间为2005年8月22日，保藏地址为北京市海淀区中关村北一条13号，中国科学院微生物研究所。

本发明人将从试验田植物病害发生严重的田块中无明显发病症状的植株根际土壤中分离出的枯草芽孢杆菌原始菌株，经过紫外线二次复合诱变（1×10⁷个/ml的菌悬液放于直径9 cm的培养皿内，紫外灯预热20 min，将培养皿至于磁力搅拌器上并使培养皿在20 W紫外灯垂直距离30 cm左右，照射150S）筛选出具有较高生长速度、β-甘露聚糖酶、β葡聚糖酶、蛋白酶和抑菌活性的菌株，即为本发明所提供的保藏号为CGMCC NO.1442的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BACI。

本发明中枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BACI的培养方法为：

采用液体深层发酵培养的方式进行发酵培养获得枯草芽孢杆菌芽孢：

①将保藏的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BACI菌种，接种于牛肉膏蛋白胨培养基（牛肉膏0.3g、蛋白胨1g、氯化钠0.5g、　琼脂2g、蒸馏水100ml、pH7.0～7.2）活化24h；②接种环挑取菌体接种于LB培养基（胰化蛋白胨 10g 、酵母提取物 5g、NaCl 10g、蒸馏水1000ml），扩大培养24h；③以1%接种量接种于PDB培养基中（马铃薯200g，葡萄糖20g，蒸馏水1000ml），发酵条件为：温度37℃，pH=7，溶解氧气浓度维持在20-30％饱和度，220rpm，培养时间为2～3天，有效菌体浓度为1-3×10⁹个/ml。

将筛选出的该菌株连续转接10代，其优良性状遗传稳定。

表1 枯草芽孢杆菌诱变结果

出发菌株和突变菌株摇瓶培养24h后，发酵液(8000r/min，离心20min)β-甘露聚糖酶、β-葡聚糖酶、蛋白酶活性和盆栽实验中对黄瓜黄萎病菌（Fusarium oxysporum f.sp. cucumerinum）、西瓜枯萎病菌（Fusarium oxysporum f.sp. niveum）的防治效果。

Figure 2011102921163100002DEST_PATH_IMAGE002

。

本发明所述的作物病害防治复合生物制剂中所使用的拟康氏木霉发酵液，是由拟康氏木霉（Trichoderma pseudokiningii）TRIPI发酵制得的。

本发明所选用的拟康氏木霉（Trichoderma pseudokiningii）是从秸秆中分离、然后经诱变、筛选的新型菌株，命名为拟康氏木霉（Trichoderma pseudokiningii）TRIPI。该菌株已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC进行保藏，保藏号为CGMCC NO.1443，保藏时间为2005年 8月22日，保藏地址为北京市海淀区中关村北一条13号，中国科学院微生物研究所。

本发明人将从试验田秸秆中按常规方式分离出的拟康氏木霉原始菌株，经过紫外线二次复合诱变处理（1×10⁶个/ml的菌悬液放于直径9 cm的培养皿内，紫外灯预热20 min，将培养皿至于磁力搅拌器上并使培养皿在10W紫外灯垂直距离25 cm左右，照射90S），筛选出具有较高菌丝生长速率、纤维素酶活性和抑菌活性的菌株，即为本发明所提供的保藏号为CGMCC NO.1443的拟康氏木霉（Trichoderma pseudokiningii）TRIPI。

本发明拟康氏木霉（Trichoderma pseudokiningii）TRIPI的培养方法为：

① 用接种环将冷藏保存的拟康氏木霉TRIPI菌种接种于平板PDA培养基（马铃薯200g，蔗糖20g，琼脂20g，蒸馏水1000mL），转接2代；② 接种环挑取边缘菌丝转接于PDB培养基（马铃薯200g，蔗糖20g，蒸馏水1000mL）中，培养温度25℃～30℃，最适温度为28℃，150rpm，时间为7～10天，发酵液100μm筛过滤得到孢子悬浮液，活孢子浓度为3-9×10⁸个/ml。

将筛选出的该菌株连续转接10代，其优良性状遗传稳定。

表2拟康氏木霉诱变结果

出发菌株和突变菌株摇瓶培养5天后菌丝干重和发酵液（1000r/min，离心10min）滤纸酶（FPA）、内切型-β-葡聚糖酶（C1酶）、外切型-β-葡聚糖酶（CBH酶）活性和盆栽实验中对黄瓜黄萎病菌（Fusarium oxysporum f.sp. cucumerinum）、西瓜枯萎病菌（Fusarium oxysporum f.sp. niveum）的防治效果。

Figure 2011102921163100002DEST_PATH_IMAGE004

。

枯草芽孢杆菌是一种嗜温的好氧性产芽孢杆状细菌，具有广泛的抗菌活性和极强的抗逆能力，一直是植病生物防治领域的研究热点。枯草芽孢杆菌能够产生丰富的具有植物病害防治的抗菌物质，包括脂肽类、肽类、磷脂类、氨基酸类、核酸类、脂肽类抗生素表面活性素和多烯类物质（bacillaene、difficidin、oxydifficidin）等多种化合物，它们具有抑制真菌、细菌、病毒和菌原体等作用，其中表面活性素对多种植物病原真菌有抑制活性，尤其对稻瘟病菌和小麦纹枯病菌的效果明显，多烯类化合物具有抑制细菌活性，机理是其能够抑制原核生物的蛋白合成。其代谢产物抗逆性强，既可防病，又能促进植株生长。

拟康氏木霉能够高效表达β- 1, 4- 葡聚糖水解酶、胞外几丁质酶和抗菌物质等。通过这些物质之间的协同作用，β- 1, 4- 葡聚糖水解酶和几丁质酶植物病原真菌的胞壁具有强烈的水解作用，从而抑制病原菌孢子萌发并引起菌丝和孢子崩溃；而抗菌物质如绿木霉素、抗菌肽等，能够抑制病原菌生长和产孢，从而抑制其生长；还分泌了一些其他物质，能够使木霉趋向寄主真菌生长，一旦寄主被木霉寄生物所识别，就会建立寄生关系，从而穿透菌丝吸收其营养。

拟康氏木霉与枯草芽孢杆菌复配后，能够有效的释放土壤中难溶性的磷钾元素，减少土壤病原菌，为作物提供良好的生长环境。木霉是一种非常具有生防潜力的拮抗菌，其拮抗机制多种多样，包括产生抗生素、重寄生作用、溶菌作用、竞争作用等机制，对土壤中其他菌株都具有较好的抑菌效果，并且具有延长防效的作用。

本发明作物病害防治复合生物制剂中，使用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BACI发酵液与拟康氏木霉（Trichoderma pseudokiningii）TRIPI发酵液进行复配，对作物病害的防治具有明显的增效作用。

具有“植物疫苗”之称的甲壳素，提前和连续使用可诱导农作物自身产生对真菌、细菌、病毒、线虫等病害的抗性因子，降低病害发生率，有效趋避蚜虫、白粉虱等害虫，显著减少农药使用量。此外它还有极强叶面附着性能，可促根壮苗，促进果实成熟。

黄腐酸钾具有高负载量及生理活性，其螯合常量及微量营养物质使其更好地为植物利用，防治植物病害，增强抗涝性，激发植物微观生物活性，缓释肥料，改善化肥及农药利用，提高营养吸收，促进植物发芽生长。

味精残液为通过谷氨酸发酵生产味精后留下的废母液，虽所占比例小但COD_Cr高达40000mg／L以上，pH=3.2，是味精行业急待解决的高浓度有机废水。味精废水里含有氨基酸、残糖、氮、磷、钾和多种植物生长所需的微量元素，是有机复合肥的重要成分。

本专利综合利用拟康氏木霉、枯草芽孢杆菌、甲壳素、味精残液、黄腐酸钾的特异功效和相互间的增效作用，筛选最佳复合配比，本发明人采用正交设计实验，对所述作物病害防治复合生物制剂中各组分的质量配比份数进行优化。

供试作物为黄瓜，实验田位于泰安市，实验设计和实验结果见表3、表4。

表3 实验因子及水平 L₁₆（3⁵）

表4实验因子及正交实验结果L₁₂（3⁵）

实验号	拟康氏木霉发酵液	枯草芽孢杆菌发酵液	水溶性甲壳素	味精残液	黄腐酸钾	黄萎病抑制率（%）
							1	3	1	2	3	1	85
2	1	2	3	1	1	77
							3	1	1	1	1	1	75
4	1	2	1	3	3	78
							5	1	3	2	1	1	83
6	1	1	1	1	1	70
							7	2	1	3	3	1	83
8	1	1	2	2	3	75
							9	3	3	2	1	2	93
10	3	2	1	2	1	88
							11	2	3	1	2	1	89
12	3	1	1	1	2	85
							13	2	2	2	1	2	85
14	2	1	1	1	3	82
							15	1	1	3	2	2	79
16	1	3	1	3	2	82
							k1	78.83	81.33	83.83	84.00	84.00
k2	86.21	84.08	84.71	85.50	85.50
							k3	89.21	88.83	85.71	84.75	84.75
R	10.38	7.50	1.88	1.50	1.50

由以上大田正交实验结果可以看出，五种组分对植物抗病性均产生增强影响。由极差分析可知各因子对黄萎病抑制率影响作用顺序依次是：拟康氏木霉发酵液＞枯草芽孢杆菌发酵液＞水溶性甲壳素＞味精残液=黄腐酸钾。可见复配制剂中拟康氏木霉和枯草芽孢杆菌对植物抗病性起着决定性作用。

在此基础上我们通过抑菌率探究了拟康氏木霉与枯草芽孢杆菌最佳比，当拟康氏木霉与枯草芽孢杆菌比例为1:1时，抑菌率有显著提高。如表5

表5 不同拟康氏木霉与枯草芽孢杆菌组分比对尖镰孢菌的抑菌率

	拟康氏木霉：枯草芽孢杆菌	抑菌直径（mm）	抑菌率（%）
				1	0.8:1	12.0（11.6～14.0）	53
2	1:1	25.5（24.5～27.0）	92
				3	1.2:1	19.9（18.5～22.0）	81

综合以上结果，以植株抗病性为筛选目标，9号因素水平即枯草芽孢杆菌发酵液40份、拟康氏木霉发酵液40份、水溶性甲壳素1份、味精残液9份、黄腐酸钾10份，为该实验条件下的最优配比。

依据正交试验的结果，并同时兼顾加工和使用中的多种因素，本发明人确定，本发明所述复合生物土壤改良剂中各主要组分的重量份数如下：

枯草芽孢杆菌发酵液38-42份、拟康氏木霉发酵液38-42份、水溶性甲壳素0.5-1.5份、味精残液8-10份、黄腐酸钾8-12份。

其中，拟康氏木霉发酵液中有效孢子浓度≥3×10⁸个/ml；枯草芽孢杆菌发酵液活菌数≥1×10⁹个/ml；水溶性甲壳素：分子量M约为1.5×10⁵，黏度约100mPa，脱乙酯度DAC≥90%，纯度≥90%；味精残液：氨基酸≥17.5%、

B≥1.2mg/g、Zn≥0.5mg/g、Fe≥1.8mg/g、有机质≥32.4%；黄腐酸钾规格为：细度＜120目，水可溶物＞99.7%，水溶性黄腐酸＞50%，氧化钾9.7%，氮2.8%，磷0.6%，有机质55%。（其中百分含量为重量%）

在上述重量用量比例范围内，本发明作物病害防治复合生物制剂均能获得较理想的防治作物土传病害，特别是防治黄萎病和枯萎病效果。

本发明所述的作物病害防治复合生物制剂的制备方法如下：

按所需重量份数将拟康氏木霉发酵液和枯草芽孢杆菌发酵液混合均匀，然后将水溶性甲壳素均匀加入菌液中溶解，再将味精残液、黄腐酸钾加入混合液中，搅拌混合，加工成为稳定的液体状作物病害防治复合生物制剂。同时也可加入海洋细菌代谢产物和从盐生植物中提取的绿原酸等活性物质，以及钙、锌、硼、铁等微量元素。

具体应用方式为：将液体作物病害防治复合生物制剂加水稀释100-200倍，:先灌根一次，之后每隔10－15天喷施一次，灌根和喷施交替使用效果较佳。如播种，播种前可用100倍液浸种4-6小时。

本发明作物病害防治复合生物制剂，适用于番茄、辣椒、茄子、黄瓜、西瓜、苹果、韭菜、棉花等多种蔬菜、瓜果及农作物的病害防治和增产。

本发明作物病害防治复合生物制剂，对枯萎病、黄萎病、灰霉病、辣椒疫霉病、霜霉病、白粉病、灰霉病、叶霉病等病害都有明显防治效果，特别是对枯萎病和黄萎病效果极佳，抗病率高达80%，促进无公害绿色农产品的发展。

具体实施方式

一.本发明作物病害防治复合生物制剂组分用量实施例如下：

制剂实施例1

枯草芽孢杆菌发酵液38%、拟康氏木霉发酵液42% 、水溶性甲壳糖1.5% 、味精残液8% 、黄腐酸钾8% 、绿原酸等活性剂0.25%。。

按前述制备方法加工为液体制剂。

制剂实施例2

枯草芽孢杆菌发酵液40%、拟康氏木霉发酵液40%、水溶性甲壳糖1%、味精残液9% 、黄腐酸钾10%。

按前述制备方法加工为液体制剂。

制剂实施例3

枯草芽孢杆菌发酵液42% 、拟康氏木霉发酵液38%、水溶性甲壳糖0.5% 味精残液10% 黄腐酸钾12%

按前述制备方法加工为液体制剂。

二.本发明作物病害防治复合生物制剂应用对比试验实施例如下：

应用实施例1：

本发明复合制剂与枯草芽孢杆菌制剂对番茄枯萎病防治实验综合数据挑选160棵大小相同、长势一致的番茄植株，分为四组同时接种枯萎病原菌。三天后，分别用稀释100倍、200倍的本发明制剂实施例1进行喷施（即处理1和2），对照组喷施含相同有效菌体数量的枯草芽孢杆菌单一菌种的制剂，其中本发明制剂的防治效果显著，100倍液防治效果最佳，其次为200倍的。见表1所示

表1 本发明复合制剂与枯草芽孢杆菌制剂对番茄枯萎病防治实验综合数据

	稀释倍数	发病株数	发病率%	病指%	防治效果%
						处理1	100倍	2	2	4	92.6
处理2	200倍	4	10	10	81.5
						对照组	100倍	7	17.5	17	68.5

应用实施例2：本发明复合制剂与常用农药对番茄枯萎病防治实验

用稀释100倍的制剂实施例1与常用杀菌剂百菌清1000倍处理染枯萎病植株。结果如表2所示，本产品与常用农药相比，能有效提高植株对番茄枯萎病的防治效果。

表二本发明与普通农药对番茄枯萎病防治实验数据

	稀释倍数	发病率%	病指%	防治效果%
					处理1	100	5	5	91.1
百菌清	1000	12.5	13	76.7
					清水	0	57.5	56	0

应用实施例3：本发明与普通农药喷施番茄枯萎病不同时间的防病效果

采用制剂实施例2稀释100倍，普通农药选用了常见的以多粘类芽孢杆菌为主要成分的金灭枯，施药前调查发病指数，施药后每隔七天调查一次，连续调查三次，观察其防效及残效期，结果如表3所示。本发明的防效期和残效期都高于其他产品，且效果持久稳定。

表3 本发明与普通农药喷施番茄枯萎病不同时间的防病效果

应用实施例4：本发明与普通杀菌剂对辣椒黄萎病防治实验

由表四可以看出，本制剂实施例2对茄子黄萎病的防治效果明显，比同类杀菌剂多27.5%的生防效果，效果显著。对比杀菌剂使用的是噁霉灵为主要成分的绿亨一号。

表四本发明与绿亨一号对茄子黄萎病防治实验数据

	稀释倍数	病指%	防治效果%
				处理1	100	10	80.4
绿亨一号	800	24	52.9
				清水	0	51	0

应用实施例5本发明对棉花枯萎病+黄萎病并发的防治效果。

采用制剂实施例2先进行一次灌根，5天后调查病指，枯萎病和黄萎病发病率(%)分别由对照水处理的69，75处理减为6和11。而其它农药效果不明显。

应用实施例6：本发明对辣椒其它病害发病率的抑制效果

由表5可以看出，经制剂实施例2稀释100倍处理，辣椒抗病力增强，根腐病、白绢病、茎腐病、炭疽病发病率降低，达到抑制病害发生的作用。

表5 本发明对辣椒其它病害发病率的影响实验统计

病害	根腐病（%）	白绢病（%）	茎腐病（%）	炭疽病（%）
					处理1	0.2	0.1	0	0.2
清水	12.2	13.4	6.1	5.7

应用实施例7：对小麦产量的影响（济南章丘）

采用制剂实施例3稀释100倍叶面喷施和200倍叶面喷施并对照清水处理。各处理在拔节期、孕穗期各喷一次，小区面积20㎡。

表6 制剂实施例3对小麦产量的影响实验统计

	稀释倍数	小区平均产量（kg）	实际产量（kg/hm²）
				处理1	100倍	12.7	6350
处理2	200倍	12.2	6050
				清水	0	9.4	4700

Claims

1.一种作物病害防治复合生物制剂，其组分包括枯草芽孢杆菌发酵液和拟康氏木霉发酵液。

2.如权利要求1 所述的作物病害防治复合生物制剂，其特征在于包括以下主要组分：

枯草芽孢杆菌发酵液、

拟康氏木霉发酵液、

水溶性甲壳素、

味精残液、

黄腐酸钾。

3.如权利要求1或2所述作物病害防治复合生物制剂，其特征在于其中枯草芽孢杆菌发酵液是由枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BACI发酵制得的，该菌种已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心进行保藏，保藏号为CGMCC NO.1442。

4.如权利要求1或2所述作物病害防治复合生物制剂，其特征在于其中拟康氏木霉发酵液是由拟康氏木霉（Trichoderma pseudokiningii）TRIPI菌种发酵制得的，该菌种已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心进行保藏，保藏号为CGMCC NO.1443。

5.如权利要求1或2所述作物病害防治复合生物制剂，其特征在于各主要组分的重量份数如下：

6.如权利要求1或2所述作物病害防治复合生物制剂，其特征在于各主要组分的重量份数如下：

枯草芽孢杆菌发酵液40份、拟康氏木霉发酵液40份、水溶性甲壳素1份、味精残液9份、黄腐酸钾10份。

7.如权利要求1或2所述作物病害防治复合生物制剂的应用，其特征在于适用于番茄、辣椒、茄子、黄瓜、西瓜、苹果、韭菜、棉花等多种蔬菜、瓜果及农作物的病害防治和增产。

8.如权利要求1或2所述作物病害防治复合生物制剂的应用，其特征在于用于对枯萎病、黄萎病、灰霉病、辣椒疫霉病、霜霉病、白粉病、灰霉病、叶霉病等病害防治。

9.如权利要求1或2所述作物病害防治复合生物制剂的应用方法，其特征在于将液体作物病害防治复合生物制剂加水稀释100-200倍，先进行一次灌根，之后每隔10－15天喷施一次，灌根与喷施交替使用。