CN102406608B - 尼索地平脂质体固体制剂 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种尼索地平脂质体固体制剂及其制法，通过将活性成分尼索地平和特定的组合的磷脂酰乙醇胺、二硬脂酸磷脂酰胆碱、胆固醇乙酰脂、吐温80制备成脂质体，极大提高了药物的稳定性、溶出度和生物利用度，而且作用平稳持久，疗效显著。本发明制剂提高了制剂的产品质量，减少了毒副作用。

Description

尼索地平脂质体固体制剂

技术领域

本发明涉及一种尼索地平的新制剂，具体涉及尼索地平脂质体及其固体制剂和制法，属于医药技术领域。

背景技术

心脑血管疾病是当今世界发病率和死亡率最高的疾病之一，是死亡的首要原因，是健康的头号杀手，我国心血管系统疾病的发病率基本与世界范围大体相同，呈逐年上升趋势，由六十年代的死亡病因第7位上升到第1位，每年因为心脑血管疾病死亡有300万人，1000万人因心脑血管疾病致残。几乎每个心脑血管病人都有血压升高的临床症状，需要进行降压治疗，降血压药物市场巨大。

尼索地平由德国Bayer公司首创，它的化学名称为：(±)-2，6二甲基-4-(2-硝基苯基)-1，4-二氢-3，5-吡啶二甲酸甲酯异丁酯，分子式：C₂₀H₂₄N₂O₆，分子量：388.41，结构式如下：

尼索地平是一种二氢吡啶类钙拮抗剂，能阻止心肌和血管平滑肌对钙离子的摄取，具有选择性扩张冠状动脉和外周血管的作用改善心肌供血，降低外周阻力，从而降低心肌消耗，增强心肌对缺氧的耐受性，降低高血压病人血压。该药对冠心病、高血压及慢性充血性心力衰竭均有疗效。临床研究表明，概要在引起血压下降的同时，对呼吸和中枢神经系统无明显影响，长期治疗并不产生耐受性。

自1971年硝苯吡啶问世至今，先后已有20多个新药研制成功，这些药物的作用机制相同(抑制Ca进入组织细胞内)。由于每个化合物与受体结合性质有差异，组织选择性有差异，表现出的药理活性也不一样。因此每个药物可选择性治疗某些组织疾病，使副作用的产生可能性大大减少。尼索地平和尼卡地平选择性作用于脑血管，用于治疗各种脑血管疾病，后者对外围血管也有较强的作用，因此还可以治疗高血压。

药理学研究表明尼索地平作用机理是直接阻滞钙离子进入血管平滑肌质膜中电压敏感的慢钙通道，减少流入细胞内的钙离子浓度，抑制ATP酶活性。其对心血管作用较其他钙拮抗剂具有更高的选择性，对心率及心脏收缩影响极小，而对扩张冠状血管有一定的选择性，并比硝苯吡啶强4至10倍，可明显地降低外周血管的阻力，增加冠脉血流量，改善缺血区灌流，解除冠脉痉挛，预防致命性心室颤动，也具有明显持久的降压效果。不同动物的药动学研究表明在其体内吸收快且完全，持续时间最长的一个，血浆清除半衰期长达42至54小时。

大量的临床研究表明尼索地平确实是一个预防心肌缺血、稳定型和变异型心绞痛、高血压以及长期高血压引起的慢性充血性心率衰竭方面的有效药物。因此，尼索地平的研制开发，将为我国提供一个新的特色的防治心绞痛、高血压等心血管疾病的优良药物。

目前国内上市药中有尼索地平普通压制片、缓释片、胶囊和缓冲胶囊，然而这几种剂型却存在以下问题：由于制备技术等原因，大多数药物的口服制剂服用后均存在着溶散时间长、溶出度低、吸收较差、服药次数多、释药不可控，肝肠首过效应和生物利用度较低等问题，从而影响药效的发挥，也直接影响着治疗效果，所以其生物利用度较低。

现有技术中还有一些关于尼索地平制剂技术的报道。例如，专利文献CN1695616A公开而来一种尼索地平的分散片及其制法，其通过改变制粒方法和压片方法来制备固体制剂，但并不解决生物利用度低的问题。

专利文献CN101269046A公开了一种尼索地平颗缓释滴丸及其制备方法，其由尼索地平和稳定剂维生素E及疏水性骨架材料组成，但服用不方便，生物利用度低。

专利文献CN1562013A公开了一种尼索地平口腔崩解片及其制备方法，由尼索地平、填充剂、崩解剂、酸味剂、赋形剂组成，其生物利用度低。

然而，上述方法制备的尼索地平制剂，虽然筛选了特定的辅料进行制备，具有一定得优点；但药品的溶出度和生物利用度仍有待提高，且药品的长期稳定性不理想，不利于长期存放。

脂质体是指将药物包封于类脂质双分子形成的薄膜中间所制成的超微型球状定向药物载体制剂，属于靶向给药系统的一种新剂型。脂质体作为药物载体，具有诸多优点：如脂质体既能包封脂溶性药物，又能包封水溶性药物；减轻变态反应和免疫反应；延缓释放，降低体内消除速度；能有效地保护被包裹药物，提高生物利用度；改变药物在体内的分布，并能靶向性释药，能降低药物的毒副作用；适合多途径给药等。

尽管现有技术中披露了有关二氢吡啶类钙拮抗剂的脂质体，如专利文献CN101912372A公开了一种尼伐地平脂质体片剂及其制备方法，由尼伐地平、氢化大豆卵磷脂、胆固醇、吐温80和药学上可接受的其他赋形剂组成；专利文献CN1554340A公开了一种尼莫地平纳米脂质体，其处方是尼莫地平10mg，豆磷脂150mg，吐温80 200mg，胆固醇30mg，去氧胆酸钠15mg，甘露醇600mg，亮氨酸150mg。

不过，制备脂质体的挑战在于选择适当的脂质体组成成分和制法。由于脂质体的性质如稳定性、包封率、起效时间、在体内的循环时间、生物利用度和毒副作用等与脂质体的组成直接地密切相关，而脂质体的组成与所要包封的药物性质直接地密切相关，因此，选择什么样的成分形成具有良好品质的尼索地平脂质体是亟待解决的课题。

普通脂质体主要作用机理是将药物粉末或溶液包裹在脂质体双层脂质膜所封闭的水相中或嵌入脂质体双层脂质膜中，这种微粒具有类细胞结构，进入人体内主药被网状内皮系统吞噬而激活机体的自身免疫功能，并改变被包封药物的体内分布，使药物主要在肝、脾、肺和骨髓等组织器官中积蓄，从而提高药物的治疗指数，减少药物的治疗剂量和降低药物的毒性。

申请人通过大量的实验发现，采用特定赋形剂和尼索地平制成的脂质体固体制剂有效的克服了主药稳定性差的问题，同时提高了药物的溶出度，延缓释放，增加了药物在体内的保留时间。

发明内容

为了形成品质优良的尼索地平脂质体固体制剂，重要的是寻找能与尼索地平良好相容从而将其良好包封且不渗漏的成膜材料，以便形成品质优良的尼索地平脂质体，使得该脂质体的溶出性优异且生物利用度高，以及寻找能与尼索地平脂质体形成固体制剂的药用辅料。

为了实现上述目的，本发明人进行的大量研究和实现，发现特定重量配比的尼索地平、磷脂酰乙醇胺、二硬脂酸磷脂酰胆碱、胆固醇乙酰脂和吐温80能制成尼索地平脂质体，其中，作为药物活性成分的尼索地平包封率高，溶出性好，所得固体制剂中的药物活性成分在体循环中的保留时间显著延长，生物利用度明显提高，疗效明显提高。

本发明的目的之一是提供一种尼索地平脂质体，其主要由以下重量配比的成分制成：

优选地，磷脂酰乙醇胺与二硬脂酸磷脂酰胆碱的重量比为2∶1，磷脂酰乙醇胺和二硬脂酸磷脂酰胆碱的重量和与胆固醇乙酰脂的重量比为1∶1-2∶1。

本发明的具体实施方式之一，本发明提供的尼索地平脂质体，主要由以下重量配比的成分制成：

优选地，磷脂酰乙醇胺与二硬脂酸磷脂酰胆碱的重量比为2∶1，磷脂酰乙醇胺和二硬脂酸磷脂酰胆碱的重量和与胆固醇乙酰脂的重量比为1∶1-2∶1。

本发明的具体实施方式之一，磷脂酰乙醇胺和二硬脂酸磷脂酰胆碱的重量和与胆固醇乙酰脂的重量比为1∶1。

在本发明的尼索地平脂质体中，使用的磷脂材料为磷脂酰乙醇胺和二硬脂酸磷脂酰胆碱以重量比2∶1的组合物，其中磷脂酰乙醇胺是一种天然磷脂，二硬脂酸磷脂酰胆碱是一种合成磷脂。

作为用于形成脂质体的磷脂，其种类繁多，常用的有天然磷脂和合成磷脂。天然磷脂包括磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄磷脂、蛋黄磷脂酰甘油、蛋黄磷脂酰丝氨酸、蛋黄磷脂酰肌醇、大豆卵磷脂、氢化大豆磷脂、大豆磷脂酰甘油、大豆磷脂酰丝氨酸、和大豆磷脂酰肌醇等。合成磷脂包括硬脂酰胺、二油酰磷脂酰胆碱、二硬脂酸磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二豆蔻酰磷脂酰胆碱、二月桂酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰甘油、二硬脂酰磷脂酰甘油、二棕榈酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油、二月桂酰磷脂酰甘油等。

本发明人经过长期认真的研究，经过大量的筛选试验，发现采用一般的磷脂和附加剂为膜材制备的尼索地平脂质体在高温40℃、相对湿度75％±5％的加速试验下，稳定性和包封率不佳。

本发明人经过锐意研究发现，在通常的磷脂材料中，适当量的作为天然磷脂的磷脂酰乙醇胺和作为合成磷脂的二硬脂酸磷脂酰胆碱以重量比2∶1的组合磷脂能用于形成品质优良的尼索地平脂质体。通过本发明中提供的方法能形成适当大小、适当结构成分的包封率高的脂质体，而且这些成分，尤其是尼索地平在所形成的脂质体中不渗漏，并且脂质体中尼索地平的溶出性优异。如果使用用量比为除了2∶1以外的磷脂酰乙醇胺与二硬脂酸磷脂酰胆碱组合磷脂，或者选用其它磷脂材料如卵磷脂等，则所形成的脂质体的稳定性差、包封率低、溶出性差，不能实现本发明的目的。

在本发明的尼索地平脂质体中，相对于1重量份的尼索地平而言，磷脂酰乙醇胺的用量为30-80重量份，二硬脂酸磷脂酰胆碱的用量为15-40重量份，磷脂酰乙醇胺与二硬脂酸磷脂酰胆碱的重量比为2∶1。如果磷脂酰乙醇胺和二硬脂酸磷脂酰胆碱的用量分别低于30重量份和15重量份，会有大量游离的尼索地平未被包封，脂质体的载药量低，稳定性也会下降，溶出性也会受到不利影响；反之，磷脂酰乙醇胺和二硬脂酸磷脂酰胆碱的用量分别高于80重量份和40重量份，则作为药物活性成分的尼索地平的包封率下降。

在本发明的尼索地平脂质体中，胆固醇乙酰脂和吐温80用于调节脂质体的膜稳定性和通透性。

本发明人经过研究发现，当磷脂酰乙醇胺和二硬脂酸磷脂酰胆碱的重量和与胆固醇乙酰脂的重量比为1∶1-2∶1时，能形成稳定的尼索地平脂质体。当磷脂酰乙醇胺和二硬脂酸磷脂酰胆碱的重量和与胆固醇乙酰脂的重量比高于2∶1时，膜稳定性降低；当磷脂酰乙醇胺和二硬脂酸磷脂酰胆碱的重量和与胆固醇乙酰脂的重量比低于1∶1时，脂质体膜流动性过高，被包裹在脂质体内的尼索地平易于释放。

此外，研究发现，当磷脂酰乙醇胺和二硬脂酸磷脂酰胆碱的重量和与胆固醇乙酰脂的重量比为1∶1-2∶1时，所形成的脂质体溶出性优异。

研究表明，脂质体的稳定性和溶出性与生物利用度有密切的对应关系。稳定性越高，溶出性越好，生物利用度越高。因此，本发明的尼索地平脂质体的稳定性高、溶出性优异，是导致药物生物利用度高的因素之一。

此外，本发明人研究发现，在本发明的尼索地平脂质体中，相对于1重量份的尼索地平而言，磷脂酰乙醇胺的用量为30-80重量份，二硬脂酸磷脂酰胆碱的用量为15-40重量份，磷脂酰乙醇胺与二硬脂酸磷脂酰胆碱的重量比为2∶1，所形成的尼索地平脂质体的包封率高。

在本发明的尼索地平脂质体中，使用吐温80来进一步改进脂质体膜的稳定性和包封率。吐温80是一种非离子表面活性剂，当用于磷脂酰乙醇胺和二硬脂酸磷脂酰胆碱组合磷脂形成的双层膜中时，不仅能进一步提高尼索地平的溶解性，从而提高包封率；而且能提高该双层膜之间的化学能，从而提高脂质体在水性液体中的化学稳定性，进而提高尼索地平脂质体的稳定性。

在本发明的尼索地平脂质体中，相对于1重量份的尼索地平而言，吐温80的用量为6-20重量份。如果吐温80的用量低于6重量份，则由于其用量过低导致对脂质体的稳定性和包封率改进不够，反之，如果吐温80的用量高于20重量份，则用于其用量过高而导致脂质体膜易于破坏而泄露活性成分。

在本发明的尼索地平脂质体中，通过适量配比的胆固醇乙酰脂和吐温80的对磷脂酰乙醇胺和二硬脂酸磷脂酰胆碱组合磷脂膜结构的协同调节促进作用，能形成包封率高、稳定性高的尼索地平脂质体，其溶出性优异，缓释效果好，生物利用度高。

本发明的另一个目的，本发明提供一种尼索地平脂质体的制备方法，该方法包括以下步骤：

(a)将尼索地平、磷脂酰乙醇胺、二硬脂酸磷脂酰胆碱、胆固醇乙酰脂、吐温80溶解于有机溶剂中，搅拌使其溶解；

(b)将上述溶液置于茄形瓶中，45℃水浴减压除去有机溶剂，在瓶壁上形成均匀透明薄膜；

(c)向茄形瓶中加入缓冲溶液，继续在45℃水浴常压旋转，使薄膜溶胀水合；

(d)将上述溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，将滤液置于-20℃冰箱中冷冻过夜，然后取出融化，反复冻融三次，喷雾干燥制得尼索地平脂质体粉末。

在本发明尼索地平脂质体制备方法的一个优选的实施方案中，步骤(a)中所述的有机溶剂选自乙醇、氯仿、二氯甲烷、甲醇、正丁醇、异丙醇、丙酮、苯甲醇、叔丁醇、乙腈、正己烷中的一种或几种，优选体积比为2∶1的为二氯甲烷和异丙醇体积比为2∶1的混合溶剂。

在本发明尼索地平脂质体制备方法的一个优选的实施方案中，步骤(c)中所述的缓冲盐溶液选自磷酸盐缓冲液、枸橼酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液和碳酸盐缓冲液中的一种，优选pH值为7.0的磷酸盐缓冲溶液。

通过上述方法，能制备颗粒小且粒径分布均匀的尼索地平脂质体，其包封率高，稳定性高，溶出性好，生物利用度高。

研究发现，脂质体的大小是影响脂质体在体内分布和停留时间的主要因素，脂质体的粒径越小，体内停留时间越长。通过本发明方法制备的尼索地平脂质体颗粒小，粒径大小分布均匀，这是其在体内代谢率低、生物利用度高的因素之一。

本发明的另一个目的，提供一种尼索地平脂质体固体制剂，其主要由尼索地平脂质体和其他药用辅料制成，

在本文中，所用术语“其他药用辅料”或“药用辅料”的意思与赋形剂的意思相同，是指为了制备尼索地平脂质体固体制剂而使用的除了尼索地平脂质体以外的药用物料，包括稀释剂、崩解剂、粘合剂、润湿剂、润滑剂及其组合。

在本文中，所用术语“其他药用辅料的量”是指上述药用辅料的重量之和。

各种药用辅料的用量可以由本领域技术人员根据各辅料在固体制剂中的一般用量进行选择，这在本领域技术人员的能力范围内。

作为具体的实施方式之一，本发明所述的尼索地平脂质体固体制剂，主要由按重量份的下列组分制成：

尼索地平脂质体1份、稀释剂20-50份、崩解剂1-2份、粘合剂1-2份、润滑剂0.5-1份及润湿剂适量。

在本发明尼索地平脂质体固体制剂的一个优选的实施方案中，所述稀释剂选自淀粉、乳糖、糖粉、可压性淀粉、山梨醇、微晶纤维素、糊精中的一种或几种，优选为微晶纤维素。

在本发明尼索地平脂质体固体制剂的一个优选的实施方案中，所述崩解剂选自低取代羟丙纤维素、羧甲基淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、干淀粉中的一种或几种，优选干淀粉。

在本发明尼索地平脂质体固体制剂的一个优选的实施方案中，所述粘合剂选自聚维酮K30、淀粉浆、羟丙甲纤维素、羧甲基纤维素钠、乙基纤维素、阿拉伯胶、黄原胶中的一种，优选为聚维酮K30。

在本发明尼索地平脂质体固体制剂的一个优选的实施方案中，所述润湿剂为10-80％的乙醇溶液，优选40％的乙醇溶液。

在本发明尼索地平脂质体固体制剂的一个优选的实施方案中，所述润滑剂选自硬脂酸镁、硬脂酸锌、月桂醇硫酸钠、滑石粉、微粉硅胶、聚乙二醇4000、硬脂酸中的一种或几种，优选为月桂醇硫酸钠。

作为具体的实施方式之一，本发明所述的尼索地平脂质体固体制剂，主要由按重量份的下列组分制成：

尼索地平脂质体1份、微晶纤维素20-50份、干淀粉1-2份、聚维酮K301-2份、月桂醇硫酸钠0.5-1份及40％的乙醇溶液适量。

作为本发明具体实施方式，本发明提供的尼索地平脂质体固体制剂是口服制剂，包括片剂和胶囊剂。

在本发明的具体实施方式中，考虑到药物的有效剂量和用药的便利性，在本发明的尼索地平脂质体固体制剂的优选实施方案中，制剂的规格为每单位制剂尼索地平为5mg、10mg。

本发明的另一个目的之一，本发明提供上述尼索地平脂质体固体制剂的制备方法，该方法包括以下步骤：

(e)将尼索地平脂质体粉末和稀释剂、崩解剂和粘合剂混合，过筛混合均匀，加入润湿剂制备软材，过筛制粒，干燥；

(f)将干颗粒和润滑剂混合均匀，过筛整粒；

(g)压片或填充胶囊，制得尼索地平脂质体固体制剂。

在本发明的方法中，还可以根据需要对脂质体和/或脂质体固体制剂进行灭菌。灭菌方法没有特殊要求，可以使用制药领域中常用的脂质体灭菌方法，如加热灭菌、过滤除菌、辐射灭菌或无菌操作等。

本发明的优点：

本发明先通过活性成分尼索地平与磷脂酰乙醇胺、二硬脂酸磷脂酰胆碱、胆固醇乙酰脂、吐温80的特定重量的组合制备成脂质体，再和其它药用辅料混合制成固体制剂。所得固体制剂产品质量高，粒径均匀，稳定性高，包封率高，溶出性好，药物在血液循环中保留时间长，疗效显著，降低了毒副作用。

本发明提供的尼索地平脂质体固体制剂的制备方法提高了产品质量，设备简单，易于操作，且方法简单，适合于工业化大生产。

在本文中，如果没有特别地说明，含量或用量都以重量计。

附图说明

以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案，其中：

图1是尼索地平脂质体固体制剂的释放曲线。

具体实施方式

以下通过具体优选的实施例对本发明进行进一步说明。这些实施例仅是说明性的，并不应理解为对本发明的限制。

实施例1尼索地平脂质体片

所用原辅料如下：

采用以下生产工艺制备尼索地平脂质体片：

(1)精确称取5g尼索地平、200g磷脂酰乙醇胺、100g二硬脂酸磷脂酰胆碱、230g胆固醇乙酰脂、50g吐温80，溶解于1200ml体积比为2∶1的二氯甲烷和异丙醇混合溶剂中，搅拌使其溶解；

(2)将上述溶液置于茄形瓶中，45℃水浴减压除去二氯甲烷和异丙醇，在瓶壁上形成均匀透明薄膜；

(3)向茄形瓶中加入1200ml pH值为7.0的磷酸盐缓冲溶液，继续在45℃水浴常压旋转，使薄膜溶胀水合；

(4)将上述溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，将滤液置于-20℃冰箱中冷冻过夜，然后取出融化，反复冻融三次，喷雾干燥制得尼索地平脂质体粉末；

(5)将尼索地平脂质体固体粉末和245g微晶纤维素、10g干淀粉和10g聚维酮K30混合，过筛混合均匀，加入80ml 40％的乙醇溶液制备软材，过筛制粒，干燥；

(6)将干颗粒和5g月桂醇硫酸钠混合均匀，过筛整粒；

(7)压片，制得1000片尼索地平脂质体片。

实施例2尼索地平脂质体片

所用原辅料如下：

采用以下生产工艺制备尼索地平脂质体片：

(1)精确称取10g尼索地平、300g磷脂酰乙醇胺、150g二硬脂酸磷脂酰胆碱、225g胆固醇乙酰脂、80g吐温80，溶解于1500ml体积比为2∶1的二氯甲烷和异丙醇混合溶剂中，搅拌使其溶解；

(2)将上述溶液置于茄形瓶中，45℃水浴减压除去二氯甲烷和异丙醇，在瓶壁上形成均匀透明薄膜；

(3)向茄形瓶中加入1500ml pH值为7.0的磷酸盐缓冲溶液，继续在45℃水浴常压旋转，使薄膜溶胀水合；

(4)将上述溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，将滤液置于-20℃冰箱中冷冻过夜，然后取出融化，反复冻融三次，喷雾干燥制得尼索地平脂质体粉末；

(5)将尼索地平脂质体固体粉末和280g微晶纤维素、15g干淀粉和10g聚维酮K30混合，过筛混合均匀，加入80ml 40％的乙醇溶液制备软材，过筛制粒，干燥；

(6)将干颗粒和5g月桂醇硫酸钠混合均匀，过筛整粒；

(7)压片，制得1000片尼索地平脂质体片。

实施例3尼索地平脂质体胶囊剂

所用原辅料如下：

采用以下生产工艺制备尼索地平脂质体胶囊剂：

(1)精确称取10g尼索地平、300g磷脂酰乙醇胺、150g二硬脂酸磷脂酰胆碱、250g胆固醇乙酰脂、120g吐温80溶解于2000ml体积比为2∶1的二氯甲烷和异丙醇混合溶剂中，搅拌使其溶解；

(2)将上述溶液置于茄形瓶中，45℃水浴减压除去二氯甲烷和异丙醇，在瓶壁上形成均匀透明薄膜；

(3)向茄形瓶中加入2000ml pH值为7.0的磷酸盐缓冲溶液，继续在45℃水浴常压旋转，使薄膜溶胀水合；

(4)将上述溶液用0.45微孔滤膜过滤，将滤液置于-20℃冰箱中冷冻过夜，然后取出融化，反复冻融三次，喷雾干燥制得尼索地平脂质体粉末；

(5)将尼索地平脂质体固体粉末和400g微晶纤维素、20g干淀粉和20g聚维酮K30混合，过筛混合均匀，加入120ml 40％的乙醇溶液制备软材，过筛制粒，干燥；

(6)将干颗粒和10g月桂醇硫酸钠混合均匀，过筛整粒；

(7)填充胶囊，制得1000粒尼索地平脂质体胶囊。

对比例1-3

将如下表1中所示的对比例1-3中的原料成分分别制成尼索地平脂质体片，其中对比例2的赋形剂选自CN 101912372A，对比例3的赋形剂成分选自CN 1554340A；其中对比例2和对比例3的生产工艺与实施例1一致，对比例1的工艺为将实施例1的步骤(4)中取消“反复冻融三次”的工序。

表1对比例1-3中所用原料成分

其中，“/”表示未使用。

试验例1包封率的测定

量取在实施例1-3和对比例1-3中的步骤(4)中所得的尼索地平脂质体粉末0.5g溶于10ml水中，得混悬液，取混悬液0.5mL，加于SephadexG-50凝胶柱顶部，以磷酸盐缓冲液洗脱，流速1ml/min，收集4～11mL洗脱液(含脂质体)，用氮气吹至体积约0.5ml，加无水乙醇破乳并定容至10ml，摇匀。精密吸取10μl溶液，进样，测定峰面积，计算脂质体重包封的尼索地平的含量；另精密量取尼索地平脂质体混悬液0.5ml，用无水乙醇定容至10mL，摇匀。精密吸取10μl溶液，测定脂质体混悬液中尼索地平的总量。计算包封率，结果示于下表2中：

表2包封率的测定结果

由表2可知，与比较例中的脂质体相比，本发明的尼索地平脂质体的包封率要高出很多。

通过比较实施例1与对比例2和3可知，本发明的脂质体具有更高的包封率。这表明，尼索地平脂质体的包封率与用于形成脂质体的成分种类直接相关，当使用本发明所用成分以外的成分时，所得尼索地平脂质体的包封率明显低于本发明。

通过比较实施例1与对比例1可知，当未使用本发明制备工艺时，所得尼索地平脂质体的包封率明显低于本发明。

试验例2脂质体粒径的大小及粒度分布

为了了解尼索地平脂质体准确的粒径参数及粒度分布，取在实施例1-3和对比例1-3中的步骤(4)中所得的适量脂质体粉末，直接用激光粒度分析仪(Easysizer20，欧美克公司)观察其外光，并测定粒径，用动态光散射处理软件处理，测量其直径并计算粒子直径的分布，结果示于下表3中：

表3脂质体粒径

由表3可知，本发明实施例1-3中所得脂质体的平均粒径比对比例1-3中所得脂质体的平均粒径小很多，而且粒径大小均一，外观更好。

通过比较实施例1与对比例2和3可知，，本发明的脂质体具有更小的平均粒径，粒径分布更均匀，外观更好。这表明，尼索地平脂质体的粒径与用于形成脂质体的成分种类直接相关。当使用本发明所用成分以外的成分时，所得尼索地平脂质体的平均粒径、粒径分布和外观等性质明显劣于本发明。

通过比较实施例1与对比例1可知，当未使用本发明制备工艺时，所得尼索地平脂质体的平均粒径、粒径分布和外观等性质明显劣于本发明。

现有研究表明，脂质体颗粒大小和分布均匀程度与其包封率和稳定性以及在人体内的停留时间有关，脂质体颗粒越小、粒径分布越均匀，其包封率和稳定性越高，在人体循环系统内的停留时间越长(参见药物新剂型，第一版，第十八章，408-468页，朱盛山主编，化学工业出版社)。将该文献全文引入此处作为参考。

因此，本发明的尼索地平脂质体平均粒径小、粒径分布均匀是进一步促进其包封率、稳定性、在体内的保留时间时间长、生物利用度等性能优异的一个因素。

试验例3稳定性和溶出度考察

将以上实施例和对比例1-3制备的样品与上市的尼索地平片(山东鲁抗辰欣药业股份有限公司，批号20100731)在高温40℃，相对湿度75％±5％条件下6个月，进行加速试验考察，结果见表4。

表4稳定性和溶出度测定结果

由表4可知，上市和对比例1-3的尼索地平片溶出度低，加速6月时含量降低明显，有关物质升高；而本发明实施例1-3中制备的样品溶出度高，加速6个月后含量和有关物质均无显著变化。充分说明了本发明在提高稳定性和溶出度方面的优越性。

试验例4体外释放研究

精密吸取实施例1-3、对比例1-3的脂质体粉末各100mg(以尼索地平的量为准)溶于10ml水中，取混悬液各5ml置于透析袋中扎紧，释放介质为pH7.0的磷酸盐缓冲溶液(含0.25％的吐温20)100ml，水浴温度为37℃，搅拌转速为300rpm，分别于0.5、1、2、4、6、8、12、18、24h取样1ml，测定释放率，绘制释放曲线，结果如附图1中所示。

结果表明，而本发明实施例1-3中所得尼索地平脂质体固体制剂释药缓慢，达到了很好缓释的效果，对比例1-3中所得尼索地平脂质体固体制剂缓释效果较差。

工业实用性

由上述实施例以及实验例的结果可知，本发明的尼索地平脂质体固体制剂具有良好的外观，颗粒小，粒径均匀，包封率高，稳定性高，溶出性好，渗漏率低，在体内的停留时间长，生物利用度高，具有良好的工业应用价值。

以上通过具体实施方式和实施例对本发明进行了详细说明，不过应理解，这些说明并不对本发明的范围构成任何限制，在不偏离本发明的精神和保护范围的情况下，可以对本发明的技术方案及其实施方式进行多种修饰、改进和替换，这些均因落入本发明的保护范围内。

本申请中提及或引用的各个参考文献，在此全文引入作为参考。

Claims (8)

1.一种尼索地平脂质体，其特征在于主要由以下重量配比的成分制成：

磷脂酰乙醇胺与二硬脂酸磷脂酰胆碱的重量比为2∶1，磷脂酰乙醇胺和二硬脂酸磷脂酰胆碱的重量和与胆固醇乙酰脂的重量比为1∶1-2∶1。

2.根据权利要求1所述的尼索地平脂质体，其特征在于主要由以下重量配比的成分制成：

磷脂酰乙醇胺与二硬脂酸磷脂酰胆碱的重量比为2∶1，磷脂酰乙醇胺和二硬脂酸磷脂酰胆碱的重量和与胆固醇乙酰脂的重量比为1∶1-2∶1。

3.一种权利要求1或2所述的尼索地平脂质体的制备方法，特征在于包括以下步骤：

(a)将尼索地平、磷脂酰乙醇胺、二硬脂酸磷脂酰胆碱、胆固醇乙酰脂、吐温80溶解于有机溶剂中，搅拌使其溶解；

(b)将上述溶液置于茄形瓶中，45℃水浴减压除去有机溶剂，在瓶壁上形成均匀透明薄膜；

(c)向茄形瓶中加入缓冲溶液，继续在45℃水浴常压旋转，使薄膜溶胀水合；

(d)将上述溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，将滤液置于-20℃冰箱中冷冻过夜，然后取出融化，喷雾干燥制得尼索地平脂质体粉末。

4.根据权利要求3所述的方法，其中，步骤(a)中所述的有机溶剂选自体积比为2∶1的二氯甲烷和异丙醇的混合溶剂；

步骤(c)中所述的缓冲盐溶液选自pH值为7.0的磷酸盐缓冲溶液；

步骤(d)中将上述溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，将滤液置于-20℃冰箱中冷冻过夜，然后取出融化，反复冻融三次，喷雾干燥制得尼索地平脂质体粉末。

5.一种尼索地平脂质体固体制剂，其特征在于主要由按重量份的下列组分制成：权利要求1所述尼索地平脂质体1份、稀释剂20-50份、崩解剂1-2份、粘合剂1-2份、润滑剂0.5-1份及润湿剂适量。

6.权利要求5所述的尼索地平脂质体固体制剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

(e)将尼索地平脂质体粉末和稀释剂、崩解剂和粘合剂混合，过筛混合均匀，加入润湿剂制备软材，过筛制粒，干燥；

(f)将干颗粒和润滑剂混合均匀，过筛整粒；

(g)压片或填充胶囊，制得尼索地平脂质体固体制剂。

7.权利要求1或2所述的尼索地平脂质体在制备治疗冠心病、高血压及慢性充血性心力衰竭的药物中的用途。

8.权利要求5所述的尼索地平脂质体固体制剂在制备治疗冠心病、高血压及慢性充血性心力衰竭的药物中的用途。

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