CN102626388B - 盐酸奥扎格雷脂质体固体制剂 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种盐酸奥扎格雷脂质体固体制剂及其制法，通过将活性成分盐酸奥扎格雷和特定组合的氢化蛋黄卵磷脂、二油酰磷脂酰乙醇胺、胆固醇琥珀酸酯、司盘20制备成脂质体，极大提高了药物的稳定性、溶出度和生物利用度，而且作用平稳持久，疗效显著。本发明制剂提高了制剂的产品质量，减少了毒副作用。

Description

盐酸奥扎格雷脂质体固体制剂

技术领域

本发明涉及一种盐酸奥扎格雷的新制剂，具体涉及盐酸奥扎格雷脂质体及其固体制剂和制法，属于医药技术领域。

背景技术

近年来，脑血栓、心肌梗死、周围动脉血栓、深静脉血栓、肺栓塞等一系列血栓栓塞疾病严重威胁着人类健康。据统计，其导致的死亡已达全球总死亡人数的51％。因此，血栓，这个血管中的幽灵，为专科医生共同的对手，已成为人类健康最大的敌人。血栓栓塞性疾病的表现从头到足都有。脑血管血栓可使患者出现一侧肢体功能障碍，即偏瘫、失语、视觉和感觉障碍、昏迷，可致残、致死。心脏血管的血栓形成，即冠状动脉血栓形成，可导致严重的心绞痛，甚至心肌梗死，每个血栓病人都需要进行抗血栓治疗治疗，抗血栓药物市场巨大。

盐酸奥扎格雷(Ozagrel)由日本小野药品公司和奇塞药品公司开发和上市的，它的化学名称为：反式-3-[4-(1H-咪唑-1-甲基)苯基]-2-丙烯酸盐酸盐，分子式：C₁₃H₁₂N₂O₂·HCl，分子量：264.71，结构式如下：

本品为血栓素合成酶抑制剂，能抑制TXA₂生成，因而具有抗血小板聚积和扩张血管作用。动物实验表现，静脉给药能降低血浆TXB₂水平，Keto-PGF12/TXB₂比值下降，对不同诱导剂所致血小板聚集均有抑制作用，对大鼠中脑动脉引起的脑梗塞有预防作用。TXA₂能参与许多循环系统疾病，如不稳定型心绞痛、冠脉痉挛和心肌梗塞等。TXA₂是连锁性的、即血小板和血管壁产生TXA₂，然后激活或其它血小板，并刺激血管壁产生更多的TXA₂。TXA₂能提高血小板膜的通透性，使其易于进入细胞，从而造成急性心肌缺血，所以TXA₂是许多缺血、缺氧和血栓性疾病的一个重要的潜在性病理介质。抑制TXA₂合成酶的生成，在治疗心血管系统疾病方面具有一定的价值，特别对一些循环性休克(失血性休克、内毒素性休克和创伤性休克)、急性心肌缺血和心脏猝死等地治疗尤为独特，因此人们十分关注。盐酸奥扎格雷是一种高选择性的TXA₂合成酶抑制剂，能降低体内TXA₂浓度，促进PG12的生成，从而抑制血小板聚集及血栓形成。能迅速改变脑梗死患者的血液流变指标，降低血粘度，使已聚集的血小板解聚，促进血栓溶解，以达到改善微循环，减轻神经功能的损害程度。大量的临床研究表明盐酸奥扎格雷确实是一个治疗急性血栓性脑梗塞和脑梗塞所伴随的运动障碍，及改善蛛网膜下腔出血手术后的脑血管痉挛收缩和并发脑缺血症状方面的有效药物。因此，盐酸奥扎格雷的研制开发，将为我国提供一个新的特色的治疗急性血栓性脑梗塞和脑梗塞所伴随的运动障碍，及改善蛛网膜下腔出血手术后的脑血管痉挛收缩和并发脑缺血症状的优良药物。目前国内外上市药中有盐酸奥扎格雷普通压制片，然而这种剂型却存在以下问题：由于制备技术等原因，大多数药物的口服制剂服用后均存在着溶散时间长、溶出度低、吸收较差、服药次数多、释药不可控，生物利用度较低等问题，从而影响药效的发挥，也直接影响着治疗效果，所以其生物利用度较低。

奥扎格雷在水中的溶解度较小，因此，本领域通常将其制成钠盐(即奥扎格雷钠，英文名：sodium ozagrel)，以提高其水溶性，但是，当将其制成钠盐后，其在水溶液中的稳定性下降(参见JP2001316265)。目前，奥扎格雷在市场上销售的主要是奥扎格雷钠的注射液，但由于钠盐的稳定性问题及注射剂本身的特征，这种钠盐制剂在贮存过程中可部分异构化，转为顺式咪唑甲基肉桂酸，或者出现奥扎格雷二聚体以及其他不溶性物质，不仅贮存时间较短，运输上很不方便，还有可能给临床用药带来其它潜在的问题。由于奥扎格雷钠口服给药时生物利用度较低，另外本品水溶液不稳定，遇光易分解，使其临床应用进一步受到限制。

现有技术中还有一些关于盐酸奥扎格雷制剂技术的报道。例如，专利文献US006028094A公开了一种与盐酸奥扎格雷结合使用的药物，用于治疗高渗病人由于使用血栓素受体拮抗剂引起的干咳抑制剂。专利文献JP2000355551A公开了一种盐酸奥扎格雷和其他白三烯转换酶抑制剂组合药物及其制备方法，其由盐酸奥扎格雷和别的抗血栓药物组成，虽然提高了协同作用，但是常规制法使其使用不方便，生物利用度低。专利文献JP2002162275A公开了一种制备盐酸奥扎格雷的精制方法，其通过特定的装置来制备纯度较高的盐酸奥扎格雷。

然而，上述方法制备的盐酸奥扎格雷制剂，虽然筛选了特定的辅料进行制备，具有一定得优点；但药品的溶出度和生物利用度仍有待提高，且药品的长期稳定性不理想，不利于长期存放。

脂质体是指将药物包封于类脂质双分子形成的薄膜中间所制成的超微型球状定向药物载体制剂，属于靶向给药系统的一种新剂型。脂质体作为药物载体，具有诸多优点：如脂质体既能包封脂溶性药物，又能包封水溶性药物；减轻变态反应和免疫反应；延缓释放，降低体内消除速度；能有效地保护被包裹药物，提高生物利用度；改变药物在体内的分布，并能靶向性释药，能降低药物的毒副作用；适合多途径给药等。

脂质体主要作用机理是将药物粉末或溶液包裹在脂质体双层脂质膜所封闭的水相中或嵌入脂质体双层脂质膜中，这种微粒具有类细胞结构，进入人体内主药被网状内皮系统吞噬而激活机体的自身免疫功能，并改变被包封药物的体内分布，使药物主要在肝、脾、肺和骨髓等组织器官中积蓄，从而提高药物的治疗指数，减少药物的治疗剂量和降低药物的毒性。

不过，制备脂质体的挑战在于选择适当的脂质体组成成分和制法。由于脂质体的性质如稳定性、包封率、起效时间、在体内的循环时间、生物利用度和毒副作用等与脂质体的组成直接地密切相关，而脂质体的组成与所要包封的药物性质直接地密切相关，因此，选择什么样的成分形成具有良好品质的盐酸奥扎格雷脂质体是亟待解决的课题。

现有技术中WO2005070465A2公开了脂质体分散体，其中活性成分可以是奥扎格雷，还含有磷脂和氢氧化钠。CN101416943A公开了一种奥扎格雷脂质体及其制备方法，其由活性物质奥扎格雷、制备脂质体用脂质、缓冲液及支撑剂组成，例如采用硫酸铵剃度法由奥扎格雷、磷脂、胆固醇、和磷酸缓冲盐调节pH至4.0～9制得，其制得的奥扎格雷脂质体稳定性较差，有关物质含量较高。CN101642431A公开了奥扎格雷钠脂质体注射剂，其包括奥扎格雷、氢氧化钠、磷脂、胆固醇和脱氧胆酸钠，以及任选药学上可接受的载体，其制得的奥扎格雷脂钠质体释放较快。这些文献涉及的奥扎格雷(钠)脂质体制剂均是注射用的制剂，或者稳定性较差或者释放较快，且磷脂和胆固醇的用量较高，导致成本高和药物相对含量低，不利于给药。

现有技术中没有公开为了口服应用而设计的盐酸奥扎格雷脂质体及其固体制剂。因此，存在进一步的需要，以提供稳定性更好的使用更方便的奥扎格雷制剂。本发明人经过长期认真的研究，意想不到地发现了将靶向给药系统的一种新剂型脂质体应用于奥扎格雷固体制剂中，采用特定赋形剂和盐酸奥扎格雷制成的脂质体固体制剂有效的克服了主药稳定性差的问题，同时提高了药物的溶出度，延缓释放，增加了药物在体内的保留时间，从而完成了本发明。

发明内容

为了形成品质优良的盐酸奥扎格雷脂质体固体制剂，重要的是寻找能与盐酸奥扎格雷相容性好从而将其良好包封且不渗漏的成膜材料，以便形成品质优良的盐酸奥扎格雷脂质体，使得该脂质体的溶出性优异，释放时间合适且生物利用度高，以及筛选能与盐酸奥扎格雷脂质体形成优异固体制剂的合适药用辅料。

作为用于形成脂质体的磷脂，可以使用天然磷脂和合成磷脂。所述磷脂包括磷脂酰乙醇胺、磷脂酰甘油、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇、磷脂酰胆碱、蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂、蛋黄磷脂酰甘油、蛋黄磷脂酰丝氨酸、蛋黄磷脂酰肌醇、大豆卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、氢化卵磷脂、卵磷脂酰甘油、卵磷脂酰丝氨酸、卵磷脂酰肌醇、二油酰磷脂酰胆碱、二硬脂酸磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二豆蔻酰磷脂酰胆碱、二月桂酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰甘油、二硬脂酰磷脂酰甘油、二棕榈酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油、二月桂酰磷脂酰甘油、二油酰磷脂酰乙醇胺(DOPE)、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(DSPE)、二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺(DMPE)、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺(DPPE)和聚乙二醇衍生化磷脂例如二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000；二软酯酰胆磷脂-聚乙二醇2000；氢化大豆磷脂酰胆碱-聚乙二醇2000；二油酰磷脂酰胆碱-聚乙二醇2000等。附加剂一般选用胆固醇、维生素E、十八胺、磷酸二鲸蜡酯。

为了实现上述目的，本发明人经过长期认真的研究，经过大量的筛选试验，发现采用一般磷脂和或附加剂组合的膜材制备的盐酸奥扎格雷脂质体在高温40℃、相对湿度75％±5％的加速试验下，稳定性和包封率不佳，因而膜材与盐酸奥扎格雷相容性非常重要。

本发明人在进行的大量研究和实验中，意外地发现特定重量配比的盐酸奥扎格雷、氢化蛋黄卵磷脂、二油酰磷脂酰乙醇胺、胆固醇琥珀酸酯和司盘20能制成质量优异的盐酸奥扎格雷脂质体，其中，作为药物活性成分的盐酸奥扎格雷稳定性好、包封率高、溶出性好、释放完全，所得固体制剂中的药物活性成分在体循环中的保留时间显著延长，生物利用度明显提高，疗效明显提高。

本发明的目的之一是提供一种盐酸奥扎格雷脂质体，其主要由以下重量配比的成分制成：

优选地，氢化蛋黄卵磷脂与二油酰磷脂酰乙醇胺的重量比为2∶1，氢化蛋黄卵磷脂和二油酰磷脂酰乙醇胺的重量和与胆固醇琥珀酸酯的重量比为1∶1-3∶1。本发明的具体实施方式之一，优选氢化蛋黄卵磷脂和二油酰磷脂酰乙醇胺的重量和与胆固醇琥珀酸酯的重量比为2∶1。

本发明的具体实施方式之一，本发明提供的盐酸奥扎格雷脂质体，主要由以下重量配比的成分制成：

优选地，氢化蛋黄卵磷脂与二油酰磷脂酰乙醇胺的重量比为2∶1，氢化蛋黄卵磷脂和二油酰磷脂酰乙醇胺的重量和与胆固醇琥珀酸酯的重量比为2∶1。

在本发明的盐酸奥扎格雷脂质体中，使用的磷脂材料为氢化蛋黄卵磷脂和二油酰磷脂酰乙醇胺以重量比2∶1的组合物，其中氢化蛋黄卵磷脂是一种氢化的天然磷脂，二油酰磷脂酰乙醇胺是一种合成磷脂。

本发明人经过锐意研究发现，在通常的磷脂材料中，适当量的作为天然磷脂的氢化蛋黄卵磷脂和作为合成磷脂的二油酰磷脂酰乙醇胺以重量比2∶1的组合磷脂能用于形成品质优良的盐酸奥扎格雷脂质体。通过本发明中提供的方法能形成适当大小、适当结构成分的包封率高的脂质体，而且这些成分，尤其是盐酸奥扎格雷在所形成的脂质体中不渗漏，并且脂质体中盐酸奥扎格雷的溶出性优异。如果使用用量比为除了2∶1以外的氢化蛋黄卵磷脂与二油酰磷脂酰乙醇胺组合磷脂，或者选用其它磷脂材料如蛋黄卵磷脂等，则所形成的脂质体的稳定性差、包封率低、溶出性差，不能实现本发明的目的。

在本发明的盐酸奥扎格雷脂质体中，相对于1重量份的盐酸奥扎格雷而言，氢化蛋黄卵磷脂的用量为0.8-4重量份，二油酰磷脂酰乙醇胺的用量为0.4-2重量份，氢化蛋黄卵磷脂与二油酰磷脂酰乙醇胺的重量比为2∶1。如果氢化蛋黄卵磷脂和二油酰磷脂酰乙醇胺的用量分别低于0.8重量份和0.4重量份，会有大量游离的盐酸奥扎格雷未被包封，脂质体的载药量低，稳定性也会下降，溶出性也会受到不利影响；反之，氢化蛋黄卵磷脂和二油酰磷脂酰乙醇胺的用量分别高于4重量份和2重量份，则作为药物活性成分的盐酸奥扎格雷的包封率下降。

在本发明的盐酸奥扎格雷脂质体中，胆固醇琥珀酸酯和司盘20用于调节脂质体的膜稳定性和通透性。胆固醇琥珀酸酯(cholesterol hemisuccinate，CHS)是胆固醇的琥珀酯衍生物，又名胆固醇半琥珀酸酯，胆固醇半丁二酸酯，是一种抗动脉硬化的原料药。胆固醇琥珀酸酯除了荷负电荷外，还具有较好的脂质体膜稳定作用。这种胆固醇的琥珀酸衍生物，体内可生物降解，不存在安全性风险，可以安全的作为负电性材料使用。

胆固醇琥珀酸酯与氢化蛋黄卵磷脂和二油酰磷脂酰乙醇胺相结合，阻止其凝聚成晶体结构。胆固醇琥珀酸酯掺入氢化蛋黄卵磷脂和二油酰磷脂酰乙醇胺形成的双层膜中，类似于“缓冲剂”一样起到调节膜结构“流动性”的作用。当低于相变温度时，胆固醇琥珀酸酯可以使膜减少有序排列，增加流动性；当高于相变温度时，胆固醇琥珀酸酯可以增加膜的有序排列，从而降低膜的流动性。胆固醇琥珀酸酯能使脂质体双分子层膜固化，从而减少自由基的生成，降低氧化水平，使脂质体稳定性显著增强。

本发明人经过研究发现，当氢化蛋黄卵磷脂和二油酰磷脂酰乙醇胺的重量和与胆固醇琥珀酸酯的重量比为1∶1-3∶1时，能形成稳定的盐酸奥扎格雷脂质体。当氢化蛋黄卵磷脂和二油酰磷脂酰乙醇胺的重量和与胆固醇琥珀酸酯的重量比高于3∶1时，膜稳定性降低；当氢化蛋黄卵磷脂和二油酰磷脂酰乙醇胺的重量和与胆固醇琥珀酸酯的重量比低于1∶1时，脂质体膜流动性过高，被包裹在脂质体内的盐酸奥扎格雷易于释放。在本发明的盐酸奥扎格雷脂质体中，相对于1重量份的盐酸奥扎格雷而言，胆固醇琥珀酸酯的用量为1.2-2重量份，优选为0.9-1.2重量份。在对比实验中发现，本发明盐酸奥扎格雷脂质体中的胆固醇琥珀酸酯显著优于胆固醇。

此外，研究发现，当氢化蛋黄卵磷脂和二油酰磷脂酰乙醇胺的重量和与胆固醇琥珀酸酯的重量比为1∶1-3∶1时，所形成的脂质体溶出性优异。作为本发明具体的优选实施方式，氢化蛋黄卵磷脂和二油酰磷脂酰乙醇胺的重量和与胆固醇琥珀酸酯的重量比为2∶1。

研究表明，脂质体的稳定性和溶出性与生物利用度有密切的对应关系。稳定性越高，溶出性越好，生物利用度越高。因此，本发明的盐酸奥扎格雷脂质体的稳定性高、溶出性优异，是导致药物生物利用度高的因素之一。

此外，本发明人研究发现，在本发明的盐酸奥扎格雷脂质体中，相对于1重量份的盐酸奥扎格雷而言，氢化蛋黄卵磷脂的用量为0.8-4重量份，二油酰磷脂酰乙醇胺的用量为0.4-2重量份，氢化蛋黄卵磷脂与二油酰磷脂酰乙醇胺的重量比为2∶1，所形成的盐酸奥扎格雷脂质体的包封率高。

在本发明的盐酸奥扎格雷脂质体中，使用司盘20来进一步改进脂质体膜的稳定性和包封率。司盘20是一种非离子表面活性剂，当用于氢化蛋黄卵磷脂和二油酰磷脂酰乙醇胺组合磷脂形成的双层膜中时，不仅能进一步提高盐酸奥扎格雷的溶解性，从而提高包封率；而且能提高该双层膜之间的化学能，从而提高脂质体在水性液体中的化学稳定性，进而提高盐酸奥扎格雷脂质体的稳定性。

在本发明的盐酸奥扎格雷脂质体中，相对于1重量份的盐酸奥扎格雷而言，司盘20的用量为0.1-0.5重量份。如果司盘20的用量低于0.1重量份，则由于其用量过低导致对脂质体的稳定性和包封率改进不够，反之，如果司盘20的用量高于0.5重量份，则用于其用量过高而导致脂质体膜易于破坏而泄露活性成分。在对比实验中，本发明盐酸奥扎格雷脂质体中的司盘20显著优于其它非离子表面活性剂，也显著优于其它司盘类表面活性剂。

在本发明的盐酸奥扎格雷脂质体中，通过适量配比的胆固醇琥珀酸酯和司盘20对氢化蛋黄卵磷脂和二油酰磷脂酰乙醇胺组合磷脂膜结构的协同调节促进作用，能形成包封率高、稳定性高的盐酸奥扎格雷脂质体，其溶出性优异，缓释效果好，生物利用度高。

本发明的另一个目的，本发明提供一种盐酸奥扎格雷脂质体的制备方法，该方法包括以下步骤：

(a)将盐酸奥扎格雷、氢化蛋黄卵磷脂、二油酰磷脂酰乙醇胺、胆固醇琥珀酸酯、司盘20溶解于有机溶剂中，搅拌使其溶解；

(b)将上述溶液置于茄形瓶中，45℃水浴减压除去有机溶剂，在瓶壁上形成均匀透明薄膜；

(c)向茄形瓶中加入缓冲溶液，继续在45℃水浴常压旋转，使薄膜溶胀水合；

(d)将上述溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，将滤液置于-20℃冰箱中冷冻过夜，然后取出融化，反复冻融三次，喷雾干燥制得盐酸奥扎格雷脂质体粉末。

在本发明盐酸奥扎格雷脂质体制备方法的一个优选的实施方案中，步骤(a)中所述的有机溶剂选自乙醇、氯仿、二氯甲烷、甲醇、正丁醇、异丙醇、丙酮、苯甲醇、叔丁醇、乙腈、正己烷中的一种或几种，优选体积比为2∶1的为甲醇和叔丁醇的混合溶剂。

在本发明盐酸奥扎格雷脂质体制备方法的一个优选的实施方案中，步骤(c)中所述的缓冲盐溶液选自磷酸盐缓冲液、枸橼酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液和碳酸盐缓冲液中的一种，优选pH值为6.8的磷酸盐缓冲溶液。

通过上述方法，能制备颗粒小且粒径分布均匀的盐酸奥扎格雷脂质体，其包封率高，稳定性高，溶出性好，生物利用度高。

研究发现，脂质体的大小是影响脂质体在体内分布和停留时间的主要因素，脂质体的粒径越小，体内停留时间越长。通过本发明方法制备的盐酸奥扎格雷脂质体颗粒小，粒径大小分布均匀，这是其在体内代谢率低、生物利用度高的因素之一。

本发明的另一个目的，提供一种盐酸奥扎格雷脂质体固体制剂，其主要由盐酸奥扎格雷脂质体和其他药用辅料制成，

在本文中，所用术语“其他药用辅料”或“药用辅料”的意思与赋形剂的意思相同，是指为了制备盐酸奥扎格雷脂质体固体制剂而使用的除了盐酸奥扎格雷脂质体以外的药用物料，包括稀释剂、崩解剂、粘合剂、润湿剂、润滑剂及其组合。

在本文中，所用术语“其他药用辅料的量”是指上述药用辅料的重量之和，即基于1重量份的盐酸奥扎格雷而言，其他药用辅料的总量为1-10份。

各种药用辅料的用量可以由本领域技术人员根据各辅料在固体制剂中的一般用量进行选择，这在本领域技术人员的能力范围内。

在本发明盐酸奥扎格雷脂质体固体制剂的一个优选的实施方案中，所述稀释剂选自淀粉、乳糖、糖粉、可压性淀粉、山梨醇、微晶纤维素、糊精中的一种或几种，优选为微晶纤维素。

在本发明盐酸奥扎格雷脂质体固体制剂的一个优选的实施方案中，所述崩解剂选自低取代羟丙纤维素、羧甲基淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、干淀粉中的一种或几种，优选羧甲基淀粉钠。

在本发明盐酸奥扎格雷脂质体固体制剂的一个优选的实施方案中，所述粘合剂选自聚维酮K30、淀粉浆、羟丙甲纤维素、羧甲基纤维素钠、乙基纤维素、阿拉伯胶、黄原胶中的一种，优选为聚维酮K30。

在本发明盐酸奥扎格雷脂质体固体制剂的一个优选的实施方案中，所述润湿剂为10-80％的乙醇溶液，优选30％的乙醇溶液。

在本发明盐酸奥扎格雷脂质体固体制剂的一个优选的实施方案中，所述润滑剂选自硬脂酸镁、硬脂酸锌、月桂醇硫酸钠、滑石粉、微粉硅胶、聚乙二醇4000、硬脂酸中的一种或几种，优选为月桂醇硫酸钠。

作为具体的实施方式之一，本发明所述的盐酸奥扎格雷脂质体固体制剂，主要由按重量份的下列组分制成：

基于1重量份盐酸奥扎格雷，包括微晶纤维素1-5份、羧甲基淀粉钠0.5-1份、0.1-1份聚维酮K30、月桂醇硫酸钠0.05-0.1份及30％的乙醇溶液适量。

作为本发明具体实施方式，本发明提供的盐酸奥扎格雷脂质体固体制剂是口服制剂，为片剂。

在本发明的具体实施方式中，考虑到药物的有效剂量和用药的便利性，在本发明的盐酸奥扎格雷脂质体固体制剂的优选实施方案中，制剂的规格为每单位制剂盐酸奥扎格雷为100mg、200mg。

本发明的另一个目的之一，本发明提供上述盐酸奥扎格雷脂质体固体制剂的制备方法，该方法包括以下步骤：

(e)将盐酸奥扎格雷脂质体粉末和稀释剂、崩解剂和粘合剂混合，过筛混合均匀，加入润湿剂制备软材，过筛制粒，干燥；

(f)将干颗粒和润滑剂混合均匀，过筛整粒；

(g)压片，制得盐酸奥扎格雷脂质体固体制剂。

在本发明的方法中，还可以根据需要对脂质体和/或脂质体固体制剂进行灭菌。灭菌方法没有特殊要求，可以使用制药领域中常用的脂质体灭菌方法，如加热灭菌、过滤除菌、辐射灭菌或无菌操作等。

本发明的优点：

本发明先通过活性成分盐酸奥扎格雷与氢化蛋黄卵磷脂、二油酰磷脂酰乙醇胺、胆固醇琥珀酸酯、司盘20的特定重量的组合制备成脂质体，再和其它药用辅料混合制成固体制剂。所得固体制剂产品质量高，粒径均匀，稳定性高，包封率高，溶出性好，药物在血液循环中保留时间长，疗效显著，降低了毒副作用，取得了意外的令人惊奇的协同效果。

本发明提供的盐酸奥扎格雷脂质体固体制剂的制备方法提高了产品质量，设备简单，易于操作，且方法简单，适合于工业化大生产。本申请盐酸奥扎格雷脂质体的粒径范围为120～230nm，优选为150～20nm。

在本文中，如果没有特别地说明，含量或用量都以重量计。

附图说明

以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案，其中：

图1是实施例1-3、对比例1-3的盐酸奥扎格雷脂质体粉末的体外释放曲线。

其中：

具体实施方式

以下通过具体优选的实施例和对比例对本发明进行进一步说明。这些实施例和对比例仅是说明性的，并不应理解为对本发明的限制。

实施例1  盐酸奥扎格雷脂质体片

所用原辅料如下：

采用以下生产工艺制备盐酸奥扎格雷脂质体片：

(1)精确称取100g盐酸奥扎格雷、160g氢化蛋黄卵磷脂、80g二油酰磷脂酰乙醇胺、120g胆固醇琥珀酸酯、40g司盘20，溶解于3000ml体积比为2∶1的甲醇和叔丁醇混合溶剂中，搅拌使其溶解；

(2)将上述溶液置于茄形瓶中，45℃水浴减压除去甲醇和叔丁醇，在瓶壁上形成均匀透明薄膜；

(3)向茄形瓶中加入10000ml pH值为6.8的磷酸盐缓冲溶液，继续在45℃水浴常压旋转，使薄膜溶胀水合；

(4)将上述溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，将滤液置于-20℃冰箱中冷冻过夜，然后取出融化，反复冻融三次，喷雾干燥制得盐酸奥扎格雷脂质体粉末；

(5)将盐酸奥扎格雷脂质体固体粉末和300g微晶纤维素、60g羧甲基淀粉钠和30g聚维酮K30混合，过筛混合均匀，加入80ml 30％的乙醇溶液制备软材，过筛制粒，干燥；

(6)将干颗粒和5g月桂醇硫酸钠混合均匀，过筛整粒；

(7)压片，制得1000片盐酸奥扎格雷脂质体片。

实施例2  盐酸奥扎格雷脂质体片

所用原辅料如下：

采用以下生产工艺制备盐酸奥扎格雷脂质体片：

(1)精确称取200g盐酸奥扎格雷、280g氢化蛋黄卵磷脂、140g二油酰磷脂酰乙醇胺、210g胆固醇琥珀酸酯、40g司盘20，溶解于5000ml体积比为2∶1的甲醇和叔丁醇混合溶剂中，搅拌使其溶解；

(2)将上述溶液置于茄形瓶中，45℃水浴减压除去甲醇和叔丁醇，在瓶壁上形成均匀透明薄膜；

(3)向茄形瓶中加入15000ml pH值为6.8的磷酸盐缓冲溶液，继续在45℃水浴常压旋转，使薄膜溶胀水合；

(4)将上述溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，将滤液置于-20℃冰箱中冷冻过夜，然后取出融化，反复冻融三次，喷雾干燥制得盐酸奥扎格雷脂质体粉末；

(5)将盐酸奥扎格雷脂质体固体粉末和600g微晶纤维素、100g羧甲基淀粉钠和70g聚维酮K30混合，过筛混合均匀，加入120ml 30％的乙醇溶液制备软材，过筛制粒，干燥；

(6)将干颗粒和20g月桂醇硫酸钠混合均匀，过筛整粒；

(7)压片，制得1000片盐酸奥扎格雷脂质体片。

实施例3  盐酸奥扎格雷脂质体片

所用原辅料如下：

采用以下生产工艺制备盐酸奥扎格雷脂质体片剂：

(1)精确称取200g盐酸奥扎格雷、240g氢化蛋黄卵磷脂、120g二油酰磷脂酰乙醇胺、180g胆固醇琥珀酸酯、80g司盘20溶解于4000ml体积比为2∶1的甲醇和叔丁醇混合溶剂中，搅拌使其溶解；

(2)将上述溶液置于茄形瓶中，45℃水浴减压除去甲醇和叔丁醇，在瓶壁上形成均匀透明薄膜；

(3)向茄形瓶中加入12000ml pH值为6.8的磷酸盐缓冲溶液，继续在45℃水浴常压旋转，使薄膜溶胀水合；

(4)将上述溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，将滤液置于-20℃冰箱中冷冻过夜，然后取出融化，反复冻融三次，喷雾干燥制得盐酸奥扎格雷脂质体粉末；

(5)将盐酸奥扎格雷脂质体固体粉末和700g微晶纤维素、120g羧甲基淀粉钠和80g聚维酮K30混合，过筛混合均匀，加入150ml 30％的乙醇溶液制备软材，过筛制粒，干燥；

(6)将干颗粒和10g月桂醇硫酸钠混合均匀，过筛整粒；

(7)压片，制得1000片盐酸奥扎格雷脂质体片。

对比例1-3

采用与分别与实施例1-3中相同的生产工艺，将如下表1中所示的对比例1-3中的原辅料成分分别制成盐酸奥扎格雷脂质体片，

表1 对比例1-3中所用原辅料成分

其中，“/”表示未使用。

试验例1 包封率的测定

量取在实施例1-3和对比例1-3中的步骤(4)中所得的盐酸奥扎格雷脂质体粉末0.5g溶于10ml水中，得混悬液，取混悬液0.5mL，加于SephadexG-50凝胶柱顶部，以磷酸盐缓冲液洗脱，流速1ml/min，收集4～1lmL洗脱液(含脂质体)，用氮气吹至体积约0.5ml，加无水乙醇破乳并定容至10ml，摇匀。精密吸取10μl溶液，进样，测定峰面积，计算脂质体重包封的盐酸奥扎格雷的含量；另精密量取盐酸奥扎格雷脂质体混悬液0.5ml，用无水乙醇定容至10ml，摇匀。精密吸取10μl溶液，测定脂质体混悬液中盐酸奥扎格雷的总量。计算包封率，结果示于下表2中：

表2 包封率的测定结果

由表2可知，与比较例中的脂质体相比，本发明的盐酸奥扎格雷脂质体的包封率要高出很多。

通过比较实施例1-3与对比例1-3可知，本发明的脂质体具有更高的包封率。这表明，盐酸奥扎格雷脂质体的包封率与用于形成脂质体的成分种类直接相关。另外的实验也表明，当使用本发明所用成分范围以外的配比时，所得盐酸奥扎格雷脂质体的包封率明显低于本发明。这表明，盐酸奥扎格雷脂质体的包封率不仅与用于形成脂质体的成分有关，还与各成分的用量直接相关。当成分用量在本发明限定的成分用量范围外时，所得盐酸奥扎格雷脂质体的包封率明显低于本发明。本申请实施例1-3的磷脂和胆固醇类的用量远远小于CN101416943A和CN101642431A中的用量，本申请的包封率与CN101416943A和CN101642431A相当(事实上，申请人在重复CN101416943A和CN101642431A的实施例时发现它们的包封率均低于90％)，取得较高的包封率。

试验例2  脂质体粒径的大小及粒度分布

为了了解盐酸奥扎格雷脂质体准确的粒径参数及粒度分布，取在实施例1-3和对比例1-3中的步骤(4)中所得的适量脂质体粉末，直接用激光粒度分析仪(Easysizer20，欧美克公司)观察其外光，并测定粒径，用动态光散射处理软件处理，测量其直径并计算粒子直径的分布，结果示于下表3中：

表3 脂质体粒径

由表3可知，本发明实施例1-3中所得脂质体的平均粒径比对比例1-3中所得脂质体的平均粒径小很多，而且粒径大小均一，外观更好。

通过比较实施例1-3与对比例1-3可知，本发明的脂质体具有更小的平均粒径，粒径分布更均匀，外观更好。这表明，盐酸奥扎格雷脂质体的粒径与用于形成脂质体的成分种类直接相关。当使用本发明所用成分以外的成分时，所得盐酸奥扎格雷脂质体的平均粒径、粒径分布和外观等性质明显劣于本发明。另外与重量配比不在本发明范围内的其它对比例相比可知，本发明的脂质体具有更小的平均粒径，粒径分布更均匀，外观更好。这表明，盐酸奥扎格雷脂质体的粒径不仅与用于形成脂质体的成分有关，还与各成分的用量直接相关。当成分用量在本发明限定的成分用量范围外时，所得盐酸奥扎格雷脂质体的平均粒径、粒径分布和外观等性质明显劣于本发明。

现有研究表明，脂质体颗粒大小和分布均匀程度与其包封率和稳定性以及在人体内的停留时间有关，脂质体颗粒越小、粒径分布越均匀，其包封率和稳定性越高，在人体循环系统内的停留时间越长(参见药物新剂型，第一版，第十八章，408-468页，朱盛山主编，化学工业出版社)。将该文献全文引入此处作为参考。

因此，本发明的盐酸奥扎格雷脂质体平均粒径小、粒径分布均匀是进一步促进其包封率、稳定性、在体内的保留时间时间长、生物利用度等性能优异的一个因素，本申请的较CN101416943A公开粒径分布更均匀，并略微大于CN101416943A公开的粒径，本申请的粒径范围为120～230nm，优选为150～20nm。

试验例3  稳定性和溶出度考察

将以上实施例1-3和对比例1-3制备的样品与上市的盐酸奥扎格雷片(日本橘生药品株式会社，批号100731)在高温40℃，相对湿度75％±5％条件下6个月，进行加速试验考察，结果见表4。

表4 稳定性和溶出度测定结果

由表4可知，上市和对比例1-3的盐酸奥扎格雷片溶出度低，加速6月时含量降低明显，有关物质升高；而本发明实施例1-3中制备的样品溶出度高，加速6个月后含量和有关物质均无显著变化。充分说明了本发明在提高稳定性和溶出度方面的优越性。

试验例4  体外释放研究

精密吸取实施例1-3、对比例1-3的脂质体粉末各100mg(以盐酸奥扎格雷的量为准)溶于10ml水中，取混悬液各5ml置于透析袋中扎紧，释放介质为pH6.8的磷酸盐缓冲溶液(含0.25％的吐温20)100ml，水浴温度为37℃，搅拌转速为300rpm，分别于0.5、1、2、4、6、8、12、18、24h取样1ml，测定释放率，绘制释放曲线，结果如附图1中所示。

结果表明，本发明实施例1-3中所得盐酸奥扎格雷脂质体释药缓慢，达到了很好缓释的效果且比CN101416943A释放更加完全从而具有更高的生物利用度，而对比例1-3中所得盐酸奥扎格雷脂质体缓释效果较差。

类似地，对实施例1-3、对比例1-3的脂质体固体制剂进行体外释放实验，发现了类似的结果本发明实施例1-3中所得盐酸奥扎格雷脂质体固体制剂释药缓慢，24小时基本释放完全，达到了很好缓释的效果，且比CN101416943A释放更加完全从而具有更高的生物利用度，而对比例1-3中所得盐酸奥扎格雷脂质体固体制剂在10小时基本释放完全，释放较快，缓释效果较差。

工业实用性

由上述实施例以及实验例的结果可知，本发明的盐酸奥扎格雷脂质体固体制剂具有良好的外观，颗粒小，粒径均匀，包封率高，稳定性高，溶出性好，渗漏率低，在体内的停留时间长，生物利用度高，具有良好的工业应用价值。

以上通过具体实施方式和实施例对本发明进行了详细说明，不过应理解，这些说明并不对本发明的范围构成任何限制，在不偏离本发明的精神和保护范围的情况下，可以对本发明的技术方案及其实施方式进行多种修饰、改进和替换，这些均因落入本发明的保护范围内。

本申请中提及或引用的各个参考文献，在此全文引入作为参考。

Claims (7)

1.一种盐酸奥扎格雷脂质体，其由以下重量配比的原料成分制成：

2.根据权利要求1所述的盐酸奥扎格雷脂质体，其由以下重量配比的原料成分制成：

3.根据权利要求1或2任一项所述的盐酸奥扎格雷脂质体，其特征在于所述氢化蛋黄卵磷脂与二油酰磷脂酰乙醇胺的重量比为2∶1，氢化蛋黄卵磷脂和二油酰磷脂酰乙醇胺的重量和与胆固醇琥珀酸酯的重量比为2∶1。

4.一种权利要求1所述的盐酸奥扎格雷脂质体的制备方法，该方法包括以下步骤：

(a)将盐酸奥扎格雷、氢化蛋黄卵磷脂、二油酰磷脂酰乙醇胺、胆固醇琥珀酸酯、司盘20溶解于有机溶剂中，搅拌使其溶解；

(b)将上述溶液置于茄形瓶中，45℃水浴减压除去有机溶剂，在瓶壁上形成均匀透明薄膜；

(c)向茄形瓶中加入缓冲溶液，继续在45℃水浴常压旋转，使薄膜溶胀水合；

(d)将上述溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，将滤液置于-20℃冰箱中冷冻过夜，然后取出融化，反复冻融三次，喷雾干燥制得盐酸奥扎格雷脂质体粉末。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其中，步骤(a)中所述的有机溶剂为体积比为2∶1的甲醇和叔丁醇的混合溶剂；步骤(c)中所述的缓冲溶液为pH值为6.8的磷酸盐缓冲溶液。

6.一种盐酸奥扎格雷脂质体固体制剂，其由根据权利要求1-3任一所述的盐酸奥扎格雷脂质体和其他药用辅料制成，其中基于1重量份的盐酸奥扎格雷而言，其他药用辅料的量为1-10份。

7.根据权利要求6所述的盐酸奥扎格雷脂质体固体制剂，其为片剂。

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