CN102614186B - 比索洛尔/氢氯噻嗪药物组合物脂质体固体制剂 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体固体制剂及其制法，通过将活性成分富马酸比索洛尔、氢氯噻嗪和特定的组合的氢化大豆磷脂、二月桂酰磷脂酰胆碱、胆固醇、吐温60制备成脂质体，极大提高了药物的稳定性、溶出度和生物利用度，而且作用平稳持久，疗效显著。本发明制剂提高了制剂的产品质量，减少了毒副作用。

Description

比索洛尔/氢氯噻嗪药物组合物脂质体固体制剂

技术领域

本发明涉及一种比索洛尔/氢氯噻嗪的药物组合物的新的固体制剂，具体涉及比索洛尔/氢氯噻嗪的脂质体固体制剂及其制法，属于医药技术领域。

背景技术

比索洛尔（Bisoprolo），化学名：1-[4-[[2-(1-甲基乙氧基)-乙氧基]-甲基]-苯氧基]-3-[(1-甲基乙基)胺基]-2-丙醇，分子式C₁₈H₃₁NO₄，分子量：323.25，结构式如下：

比索洛尔是新的长效高度选择性的β肾上腺素能受体阻滞剂，是疗效较好的抗高血压药物，常以富马酸盐的形式给药。作为第三代长效高选择性β肾上腺素能受体阻滞剂，比索洛尔无内在拟交感活性和膜稳定作用，对β1受体亲和力比β2受体强100倍，阻滞β1受体的作用是阿替洛尔的4倍。对血脂、血糖和尿酸无明显影响，疗效高，耐受性好。其绝对生物利用度高，吸收不受实物影响，既亲水又亲脂，通过肝脏和肾脏双重途径清除，消除量相等，大约50%以原尿形式排除，其余以无活性的代谢物排出，所以该药在体内不蓄积。

比索洛尔为心脏选择性极强的制剂，其减慢心率和降低血压的作用有剂量依赖关系。本药对肺功能无明显影响，对肾脏有保护作用，可以降低肾血管流量阻力，增加肾血流量，对肾小球滤过率无影响。总之，比索洛尔降压的优点是有效、安全和耐受性好。

氢氯噻嗪（Hydrochlorothiazide），化学名：6-氯-3.4-二氢-2H-1.2.4-苯并噻二嗪-7-磺酰胺-1，1-二氧化物。分子式：C₇H₈ClN₃O₄S₂，分子量：297.74.结构式

氢氯噻嗪是常用的利尿剂和降压药物，因为能对水、电解质排泄有一定的影响，故有利尿作用。作用机制主要抑制远端小管前段和近端小管（作用较轻）对氯化钠的重吸收，从而增加远端小管和集合管的Na+-K+交换，K+分泌增多。其作用机制尚未完全明了。而且本品都能不同程度地抑制碳酸酐酶活性，故能解释其对近端小管的作用。本类药还能抑制磷酸二酯酶活性，减少肾小管对脂肪酸的摄取和线粒体氧耗，从而抑制对肾小管对Na+、Cl-的主动重吸收。此外还有降压作用，除利尿排钠的作用外，可能还有肾外作用机制参与降压，可能是增加胃肠道对Na+的排泄。本品对肾血流动力学和肾小球滤过功能的影响。由于肾小管对水、Na+重吸收减少，肾小管内压力升高，以及流经远曲小管的水和Na+增加，刺激致密斑通过管-球反射，使肾内肾素、血管经张素分泌增加，引起肾血管收缩，肾血流量下降，肾小球入球和出球小动脉收缩，肾小球率过滤也下降。

将比索洛尔和氢氯噻嗪尤其是富马酸比索洛尔和氢氯噻嗪制成一种复方制剂，是一种小剂量联合应用不同种类的降压药物，其降压效果优于单用较大剂量的某一种药物的降压效果，并且可以消除单用某一种药物引起的不良反应，防止单药治疗时血压降低触发的代偿反应，增加患者的耐受性，提高顺从性。

目前国内上市药中只有比索洛尔/氢氯噻嗪片剂一种剂型，然而这种片剂却存在药品的溶出度和生物利用度低，且药品的长期稳定性不理想，不利于长期存放等缺点。

以现有技术制备而成的某些缓释滴丸制剂，虽然可获得释药充分，生物利用度高，成本低等特点，但经长期实验证明，如果载体和药物的配方或制备方法选择不甚合理，在长期贮存中就会产生一些不稳定的现象，即老化现象。

脂质体是指将药物包封于类脂质双分子形成的薄膜中间所制成的超微型球状定向药物载体制剂，属于靶向给药系统的一种新剂型。脂质体作为药物载体，具有诸多优点：如脂质体既能包封脂溶性药物，又能包封水溶性药物；减轻变态反应和免疫反应；延缓释放，降低体内消除速度；能有效地保护被包裹药物，提高生物利用度；改变药物在体内的分布，并能靶向性释药，能降低药物的毒副作用；适合多途径给药等。

普通脂质体主要作用机理是将药物粉末或溶液包裹在脂质体双层脂质膜所封闭的水相中或嵌入脂质体双层脂质膜中，这种微粒具有类细胞结构，进入人体内主药被网状内皮系统吞噬而激活机体的自身免疫功能，并改变被包封药物的体内分布，使药物主要在肝、脾、肺和骨髓等组织器官中积蓄，从而提高药物的治疗指数，减少药物的治疗剂量和降低药物的毒性。

如果能将比索洛尔/氢氯噻嗪复方制成脂质体，则有望克服现有的比索洛尔/氢氯噻嗪制剂存在的一系列问题，提高药物的溶解性和稳定性，延长药物在体内的保留时间，提高生物利用度，降低毒副作用，改进治疗速度和治疗效果。

不过，制备脂质体的挑战在于选择适当的脂质体组成成分和制法。由于脂质体的性质如稳定性、包封率、起效时间、在体内的循环时间、生物利用度和毒副作用等与脂质体的组成直接地密切相关，而脂质体的组成与所要包封的药物性质直接地密切相关，因此，选择什么样的成分形成具有良好品质的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体是亟待解决的课题。

申请人通过大量的实验发现，采用特定赋形剂和比索洛尔/氢氯噻嗪复方制成的脂质体固体制剂有效的克服了主药稳定性差的问题，同时提高了药物的溶出度，延缓释放，增加了药物在体内的保留时间。

发明内容

本发明的目的在于补充现有技术的不足，提供一种比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体片剂，有效的克服了现有技术的缺陷，保证药品在有效的贮存期内不会发生有关物质含量的明显改变，同时也具有释药充分，释药时间可控，生物利用度高的优点，适宜临床和家庭使用。

为了形成品质优良的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体固体制剂，重要的是寻找能与富马酸比索洛尔、氢氯噻嗪良好相容从而将其良好包封且不渗漏的成膜材料，以便形成品质优良的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体，使得该脂质体的溶出性优异且生物利用度高，以及寻找能与比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体形成固体制剂的药用辅料。

为了实现上述目的，本发明人进行的大量研究和实现，发现特定重量配比的富马酸比索洛尔、氢氯噻嗪、氢化大豆磷脂、二月桂酰磷脂酰胆碱、胆固醇和吐温60能制成本发明的比索洛尔/氢氯噻嗪复方的脂质体，其中，作为药物活性成分的富马酸比索洛尔和氢氯噻嗪包封率高，溶出性好，所得固体制剂中的药物活性成分在体循环中的保留时间显著延长，生物利用度明显提高，疗效明显提高。

在本文中，所用术语“比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体”或“比索洛尔/氢氯噻嗪的脂质体”是指本发明中所述的以“富马酸比索洛尔”和“氢氯噻嗪”为活性成分所制成的脂质体。

在本文中，所用术语“比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体固体制剂”或“比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体的固体制剂”是指本发明中所述的以“富马酸比索洛尔”和“氢氯噻嗪”为活性成分所制成的脂质体固体制剂。

一方面，本发明提供一种比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体，其主要由以下重量配比的成分制成：

优选地，氢化大豆磷脂与二月桂酰磷脂酰胆碱的重量比为4：1，氢化大豆磷脂和二月桂酰磷脂酰胆碱的重量和与胆固醇的重量比为1：1-2：1。

优选地，本发明提供一种比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体，主要由以下重量配比的成分制成：

优选地，氢化大豆磷脂与二月桂酰磷脂酰胆碱的重量比为4：1，氢化大豆磷脂和二月桂酰磷脂酰胆碱的重量和与胆固醇的重量比为1：1-2：1。

在某一具体实施例中，氢化大豆磷脂和二月桂酰磷脂酰胆碱的重量和与胆固醇的重量比为1：1。

在某一具体实施例中，在本发明的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体中，使用的磷脂材料为氢化大豆磷脂和二月桂酰磷脂酰胆碱以重量比4:1的组合物。

作为用于形成脂质体的磷脂，其种类繁多，常用的有天然磷脂和合成磷脂。

本发明人经过长期认真的研究，经过大量的筛选试验，发现采用一般的磷脂和附加剂为膜材制备的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体在高温40℃、相对湿度75%±5%的加速试验下，稳定性和包封率不佳。

本发明人经过锐意研究发现，在通常的磷脂材料中，适当量的作为天然磷脂的氢化大豆磷脂和作为合成磷脂的二月桂酰磷脂酰胆碱以重量比4：1的组合磷脂能用于形成品质优良的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体。通过本发明中提供的方法能形成适当大小、适当结构成分的包封率高的脂质体，而且这些成分，尤其是比索洛尔/氢氯噻嗪在所形成的脂质体中不渗漏，并且脂质体中富马酸比索洛尔、氢氯噻嗪的溶出性优异。如果使用用量比为除了4：1以外的氢化大豆磷脂与二月桂酰磷脂酰胆碱组合磷脂，或者选用其它磷脂材料如卵磷脂等，则所形成的脂质体的稳定性差、包封率低、溶出性差，不能实现本发明的目的。

在本发明的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体中，相对于5重量份的比索洛尔和6.25重量份的氢氯噻嗪而言，氢化大豆磷脂的用量为80-320重量份，二月桂酰磷脂酰胆碱的用量为20-80重量份，氢化大豆磷脂与二月桂酰磷脂酰胆碱的重量比为4：1。如果氢化大豆磷脂和二月桂酰磷脂酰胆碱的用量分别低于80重量份和20重量份，会有大量游离的比索洛尔、氢氯噻嗪未被包封，脂质体的载药量低，稳定性也会下降，溶出性也会受到不利影响；反之，氢化大豆磷脂和二月桂酰磷脂酰胆碱的用量分别高于320重量份和80重量份，则作为药物活性成分的比索洛尔/氢氯噻嗪的包封率下降。

在本发明的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体中，胆固醇和吐温60用于调节脂质体的膜稳定性和通透性。

胆固醇是一种双亲性分子，与氢化大豆磷脂和二月桂酰磷脂酰胆碱相结合，阻止其凝聚成晶体结构。胆固醇掺入氢化大豆磷脂和二月桂酰磷脂酰胆碱形成的双层膜中，类似于“缓冲剂”一样起到调节膜结构“流动性”的作用。当低于相变温度时，胆固醇可以使膜减少有序排列，增加流动性；当高于相变温度时，胆固醇可以增加膜的有序排列，从而降低膜的流动性。胆固醇能使脂质体双分子层膜固化，从而减少自由基的生成，降低氧化水平，使脂质体稳定性显著增强。

本发明人经过研究发现，当氢化大豆磷脂和二月桂酰磷脂酰胆碱的重量和与胆固醇的重量比为1：1-2：1时，能形成稳定的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体。当氢化大豆磷脂和二月桂酰磷脂酰胆碱的重量和与胆固醇的重量比高于2：1时，膜稳定性降低；当氢化大豆磷脂和二月桂酰磷脂酰胆碱的重量和与胆固醇的重量比低于1：1时，脂质体膜流动性过高，被包裹在脂质体内的比索洛尔/氢氯噻嗪易于释放。

此外，研究发现，当氢化大豆磷脂和二月桂酰磷脂酰胆碱的重量和与胆固醇的重量比为1：1-2：1时，所形成的脂质体溶出性优异。

研究表明，脂质体的稳定性和溶出性与生物利用度有密切的对应关系。稳定性越高，溶出性越好，生物利用度越高。因此，本发明的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体的稳定性高、溶出性优异，是导致药物生物利用度高的因素之一。

此外，本发明人研究发现，在本发明的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体中，相对于5重量份的比索洛尔和6.25重量份的氢氯噻嗪而言，氢化大豆磷脂的用量为80-320重量份，二月桂酰磷脂酰胆碱的用量为20-80重量份，氢化大豆磷脂与二月桂酰磷脂酰胆碱的重量比为4：1，所形成的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体的包封率高。

在本发明的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体中，使用吐温60来进一步改进脂质体膜的稳定性和包封率。吐温60是一种非离子表面活性剂，当用于氢化大豆磷脂和二月桂酰磷脂酰胆碱组合磷脂形成的双层膜中时，不仅能进一步提高比索洛尔/氢氯噻嗪的溶解性，从而提高包封率；而且能提高该双层膜之间的化学能，从而提高脂质体在水性液体中的化学稳定性，进而提高比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体的稳定性。

在本发明的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体中，相对于5重量份的比索洛尔和6.25重量份的氢氯噻嗪而言，吐温60的用量为60-120重量份。如果吐温60的用量低于60重量份，则由于其用量过低导致对脂质体的稳定性和包封率改进不够，反之，如果吐温60的用量高于120重量份，则由于其用量过高而导致脂质体膜易于破坏而泄露活性成分。

在本发明的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体中，通过适量配比的胆固醇和吐温60的对氢化大豆磷脂和二月桂酰磷脂酰胆碱组合磷脂膜结构的协同调节促进作用，能形成包封率高、稳定性高的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体，其溶出性优异，缓释效果好，生物利用度高。

另一方面，本发明提供了一种比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体的制备方法，该方法包括以下步骤：

（a）将富马酸比索洛尔、氢氯噻嗪、氢化大豆磷脂、二月桂酰磷脂酰胆碱、胆固醇、吐温60溶解于有机溶剂中，搅拌使其溶解；

（b）将上述溶液置于茄形瓶中，45℃水浴减压除去有机溶剂，在瓶壁上形成均匀透明薄膜；

（c）向茄形瓶中加入缓冲溶液，继续在45℃水浴常压旋转，使薄膜溶胀水合；

（d）将上述溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，将滤液置于-20℃冰箱中冷冻过夜，然后取出融化，反复冻融三次，喷雾干燥制得脂质体粉末。

在本发明比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体制备方法的一个优选的实施方案中，步骤（a）中所述的有机溶剂选自乙醇、氯仿、二氯甲烷、甲醇、正丁醇、异丙醇、丙酮、苯甲醇、叔丁醇、乙腈、正己烷中的一种或几种，优选体积比为2：1的为二氯甲烷和异丙醇体积比为2：1的混合溶剂。

在本发明比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体制备方法的一个优选的实施方案中，步骤（c）中所述的缓冲盐溶液选自磷酸盐缓冲液、枸橼酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液和碳酸盐缓冲液中的一种，优选pH值为7.0的磷酸盐缓冲溶液。

通过上述方法，能制备颗粒小且粒径分布均匀的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体，其包封率高，稳定性高，溶出性好，生物利用度高。

研究发现，脂质体的大小是影响脂质体在体内分布和停留时间的主要因素，脂质体的粒径越小，体内停留时间越长。通过本发明方法制备的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体颗粒小，粒径大小分布均匀，这是其在体内代谢率低、生物利用度高的因素之一。

再一方面，本发明提供一种比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体的固体制剂，其主要由本发明的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体和其他药用辅料制成，

在本文中，所用术语“其他药用辅料”或“药用辅料”的意思与赋形剂的意思相同，是指为了制备比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体固体制剂而使用的除了比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体以外的药用物料，包括稀释剂、崩解剂、粘合剂、润湿剂、润滑剂及其组合。

各种药用辅料的用量可以由本领域技术人员根据各辅料在固体制剂中的一般用量进行选择，这在本领域技术人员的能力范围内。

在本发明比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体固体制剂的一个优选的实施方案中，所述稀释剂选自淀粉、乳糖、糖粉、可压性淀粉、山梨醇、微晶纤维素、糊精中的一种或几种，优选为微晶纤维素。

在本发明比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体固体制剂的一个优选的实施方案中，所述崩解剂选自低取代羟丙纤维素、羧甲基淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、干淀粉中的一种或几种，优选羧甲基淀粉钠。

在本发明比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体固体制剂的一个优选的实施方案中，所述粘合剂选自聚维酮K30、淀粉浆、羟丙甲纤维素、羧甲基纤维素钠、乙基纤维素、阿拉伯胶、黄原胶中的一种，优选为羟丙甲纤维素。

在本发明比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体固体制剂的一个优选的实施方案中，所述润湿剂为10-80%的乙醇溶液，优选25%的乙醇溶液。

在本发明比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体固体制剂的一个优选的实施方案中，所述润滑剂选自硬脂酸镁、硬脂酸锌、月桂醇硫酸钠、滑石粉、微粉硅胶、聚乙二醇4000、硬脂酸中的一种或几种，优选为月桂醇硫酸钠。

本发明提供的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体固体制剂是口服制剂，包括片剂。

在实践中，考虑到药物的有效剂量和用药的便利性，在本发明的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体固体制剂的优选实施方案中，制剂的规格为每单位制剂中所含比索洛尔2.5mg/氢氯噻嗪6.25mg；比索洛尔5mg/氢氯噻嗪6.25mg。

再一方面，本发明提供上述比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体固体制剂的制备方法，该方法包括以下步骤：

（1）比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体的制备：将富马酸比索洛尔、氢氯噻嗪、氢化大豆磷脂、二月桂酰磷脂酰胆碱、胆固醇和吐温60一起制备成脂质体粉末；

（2）比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体固体制剂的制备：将步骤（2）制得的脂质体粉末和其他药用辅料混合制备比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体固体制剂。

其中，所述其他药用辅料选自稀释剂、崩解剂、粘合剂、润湿剂、润滑剂及其组合。

在比索洛尔/氢氯噻嗪质体固体制剂的制备方法的一个优选实施方式中，步骤（1）比索洛尔/氢氯噻嗪质体的制备包括以下子步骤：

（a）将富马酸比索洛尔、氢氯噻嗪、氢化大豆磷脂、二月桂酰磷脂酰胆碱、胆固醇、吐温60溶解于有机溶剂中，搅拌使其溶解；

（b）将上述溶液置于茄形瓶中，45℃水浴减压除去有机溶剂，在瓶壁上形成均匀透明薄膜；

（c）向茄形瓶中加入缓冲溶液，继续在45℃水浴常压旋转，使薄膜溶胀水合；

（d）将上述溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，将滤液置于-20℃冰箱中冷冻过夜，然后取出融化，反复冻融三次，喷雾干燥制得脂质体粉末。

在本发明比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体固体制剂制备方法的一个更优选的实施方案中，子步骤（a）中所述的有机溶剂选自乙醇、氯仿、二氯甲烷、甲醇、正丁醇、异丙醇、丙酮、苯甲醇、叔丁醇、乙腈、正己烷中的一种或几种，优选体积比为2：1的为二氯甲烷和异丙醇体积比为2：1的混合溶剂。

在本发明比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体固体制剂制备方法的一个更优选的实施方案中，子步骤（c）中所述的缓冲盐溶液选自磷酸盐缓冲液、枸橼酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液和碳酸盐缓冲液中的一种，优选pH值为7.0的磷酸盐缓冲溶液。

在本发明比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体固体制剂制备方法的一个优选的实施方案中，步骤（2）比索洛尔/氢氯噻嗪质体固体制剂的制备包括以下子步骤：

（e）将步骤（d）制得的脂质体粉末和稀释剂、崩解剂和粘合剂混合，过筛混合均匀，加入润湿剂制备软材，过筛制粒，干燥；

（f）将干颗粒和润滑剂混合均匀，过筛整粒；

（g）压片，制得比本发明的索洛尔/氢氯噻嗪脂质体固体制剂。

在本发明的方法中，还可以根据需要对脂质体和/或脂质体固体制剂进行灭菌。灭菌方法没有特殊要求，可以使用制药领域中常用的脂质体灭菌方法，如加热灭菌、过滤除菌、辐射灭菌或无菌操作等。

作为某一本发明的具体的实施方案，本发明所述的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体的固体制剂，主要由以下重量配比的成分制成：

本发明先通过活性成分比索洛尔/氢氯噻嗪与氢化大豆磷脂、二月桂酰磷脂酰胆碱、胆固醇、吐温60的特定重量的组合制备成脂质体，再和其它药用辅料混合制成固体制剂。所得固体制剂产品质量高，粒径均匀，稳定性高，包封率高，溶出性好，药物在血液循环中保留时间长，疗效显著，降低了毒副作用。

本发明提供的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体固体制剂的制备方法提高了产品质量，设备简单，易于操作，且方法简单，适合于工业化大生产。

在本文中，如果没有特别地说明，含量或用量都以重量计。

附图说明

以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案，其中：

图1是富马酸比索洛尔的释放曲线。

图2是氢氯噻嗪的释放曲线。

具体实施方式

以下实施例是对本发明的进一步说明，但绝不是对本发明范围的限制。下面参照实施例进一步详细阐述本发明，但是本领域技术人员应当理解，本发明并不限于这些实施例以及使用的制备方法。而且，本领域技术人员根据本发明的描述可以对本发明进行等同替换、组合、改良或修饰，但这些都将包括在本发明的范围内。

实施例1比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体片

采用以下生产工艺制备比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体片：

（1）精确称取2.5g富马酸比索洛尔、6.25g氢氯噻嗪、80g氢化大豆磷脂、20g二月桂酰磷脂酰胆碱、50g胆固醇、60g吐温60，溶解于1200ml体积比为2：1的二氯甲烷和异丙醇混合溶剂中，搅拌使其溶解；

（2）将上述溶液置于茄形瓶中，45℃水浴减压除去二氯甲烷和异丙醇，在瓶壁上形成均匀透明薄膜；

（3）向茄形瓶中加入1200ml pH值为7.0的磷酸盐缓冲溶液，继续在45℃水浴常压旋转，使薄膜溶胀水合；

（4）将上述溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，将滤液置于-20℃冰箱中冷冻过夜，然后取出融化，反复冻融三次，喷雾干燥制得脂质体粉末；

（5）将步骤（4）的脂质体粉末和300g微晶纤维素、10g羧甲基淀粉钠混合，过筛混合均匀，加入2%羟丙甲纤维素25%的乙醇溶液制备软材，过筛制粒，干燥；

（6）将干颗粒和5g月桂醇硫酸钠混合均匀，过筛整粒；

（7）压片，制得1000片的本发明的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体片。

实施例2比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体片剂

采用以下生产工艺制备比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体片剂：

（1）精确称取5g富马酸比索洛尔、6.25g氢氯噻嗪、80g氢化大豆磷脂、20g二月桂酰磷脂酰胆碱、50g胆固醇、120g吐温60，溶解于1500ml体积比为2：1的二氯甲烷和异丙醇混合溶剂中，搅拌使其溶解；

（2）将上述溶液置于茄形瓶中，45℃水浴减压除去二氯甲烷和异丙醇，在瓶壁上形成均匀透明薄膜；

（3）向茄形瓶中加入1500ml pH值为7.0的磷酸盐缓冲溶液，继续在45℃水浴常压旋转，使薄膜溶胀水合；

（4）将上述溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，将滤液置于-20℃冰箱中冷冻过夜，然后取出融化，反复冻融三次，喷雾干燥制得脂质体粉末；

（5）将步骤（4）的脂质体粉末和300g微晶纤维素、10g羧甲基淀粉钠和2g羟丙甲纤维素混合，过筛混合均匀，加入2%羟丙甲纤维素25%的乙醇溶液制备软材，过筛制粒，干燥；

（6）将干颗粒和10g月桂醇硫酸钠混合均匀，过筛整粒；

（7）压片，制得1000片的本发明的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体片

实施例3比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体片剂

所用原辅料如下：

采用以下生产工艺制备比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体片剂：

（1）精确称取5g富马酸比索洛尔、6.25g氢氯噻嗪、320g氢化大豆磷脂、80g二月桂酰磷脂酰胆碱、200g胆固醇、120g吐温60溶解于2000ml体积比为2：1的二氯甲烷和异丙醇混合溶剂中，搅拌使其溶解；

（2）将上述溶液置于茄形瓶中，45℃水浴减压除去二氯甲烷和异丙醇，在瓶壁上形成均匀透明薄膜；

（3）向茄形瓶中加入2000ml pH值为7.0的磷酸盐缓冲溶液，继续在45℃水浴常压旋转，使薄膜溶胀水合；

（4）将上述溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，将滤液置于-20℃冰箱中冷冻过夜，然后取出融化，反复冻融三次，喷雾干燥制得脂质体粉末；

（5）将步骤（4）的脂质体粉末和500g微晶纤维素、50g羧甲基淀粉钠混合，过筛混合均匀，加入2%羟丙甲纤维素25%的乙醇溶液制备软材，过筛制粒，干燥；

（6）将干颗粒和30g月桂醇硫酸钠混合均匀，过筛整粒；

（7）压片，制得1000片的本发明的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体片。

对比例1-3

采用与分别与实施例1-3中相同的生产工艺，将如下表1中所示的对比例1-3中的原辅料成分制成比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体片剂：

对比例4是采用实施例1的工艺制成，不同点在于，步骤（4）为将上述溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，将滤液置于-20℃冰箱中冷冻过夜，然后取出融化，直接喷雾干燥制得比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体粉末。

表1对比例1-3中所用原辅料成分

其中，“/”表示未使用。

试验例1包封率的测定

量取在实施例1-3和对比例1-4中的步骤（4）中所得的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体粉末10mg溶于10ml水中，得混悬液，取混悬液0.5mL，加于SephadexG-50凝胶柱顶部，以磷酸盐缓冲液洗脱，流速1ml/min，收集4～11mL洗脱液(含脂质体),用氮气吹至体积约0.5ml，加无水乙醇破乳并定容至10ml，摇匀。精密吸取10μl溶液，进样，测定峰面积，计算脂质体重包封的比索洛尔/氢氯噻嗪的含量；另精密量取比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体混悬液0.5ml，用无水乙醇定容至10mL，摇匀。精密吸取10ul溶液，测定脂质体混悬液中比索洛尔/氢氯噻嗪的总量。计算包封率，结果示于下表2中：

表2包封率的测定结果

由表2可知，与比较例中的脂质体相比，本发明的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体的包封率要高出很多。

通过比较实施例1-3与对比例1-3可知，本发明的脂质体具有更高的包封率。这表明，比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体的包封率与用于形成脂质体的成分种类、含量和工艺相关。当使用本发明所用成分以外的成分和工艺时，所得脂质体的包封率明显低于本发明。

通过比较实施例1-3与对比例4可知，本发明的另一个创新点“反复冻融三次”对于本发明的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体的包封率也有明显提高作用。

试验例2脂质体粒径的大小及粒度分布

为了了解比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体准确的粒径参数及粒度分布，取在实施例1-3和对比例1-4中的步骤（4）中所得的适量脂质体粉末，直接用激光粒度分析仪（Easysizer20，欧美克公司）观察其外光，并测定粒径，用动态光散射处理软件处理，测量其直径并计算粒子直径的分布，结果示于下表3中：

表3脂质体粒径

由表3可知，本发明实施例1-3中所得脂质体的平均粒径比对比例1-4中所得脂质体的平均粒径小很多，而且粒径大小均一，外观更好。

通过比较实施例1-3与对比例1-4可知，本发明的脂质体具有更小的平均粒径，粒径分布更均匀，外观更好。这表明，比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体的粒径与用于形成脂质体的成分种类和工艺相关。当使用本发明所用成分以外的成分和工艺时，所得比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体的平均粒径、粒径分布和外观等性质明显劣于本发明

现有研究表明，脂质体颗粒大小和分布均匀程度与其包封率和稳定性以及在人体内的停留时间有关，脂质体颗粒越小、粒径分布越均匀，其包封率和稳定性越高，在人体循环系统内的停留时间越长（参见药物新剂型，第一版，第十八章，408－468页，朱盛山主编，化学工业出版社）。将该文献全文引入此处作为参考。

因此，本发明的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体平均粒径小、粒径分布均匀是进一步促进其包封率、稳定性、在体内的保留时间时间长、生物利用度等性能优异的一个因素。

试验例3稳定性和溶出度考察

将以上实施例1-4及对比例1-4制备的样品与上市的比索洛尔/氢氯噻嗪片（北京华素制药股份有限公司，批号H20100731）在高温40℃，相对湿度75%±5%条件下6个月，进行加速试验考察，结果见表4。

表4稳定性和溶出度测定结果

由表4可知，上市和对比例1-4的比索洛尔/氢氯噻嗪片溶出度低，加速6月时含量降低明显，有关物质升高；而本发明实施例1-3中制备的样品溶出度高，加速6个月后含量和有关物质均无显著变化。充分说明了本发明在提高稳定性和溶出度方面的优越性。

试验例4体外释放研究

精密称取对比例1-4和实施例1的脂质体粉末各10mg溶于10ml水中，取混悬液各5ml置于透析袋中扎紧，释放介质为pH7.0的磷酸盐缓冲溶液（含0.25%的吐温20）100ml，水浴温度为37℃，搅拌转速为300rpm，分别于0.5、1、2、4、6、8、12、18、24h取样1ml，测定释放率，绘制释放曲线，结果如附图1、图2中所示。

结果表明，本发明实施例1中所得比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体固体制剂释药缓慢，达到了更好的缓释效果。对比例1-4中比索洛尔/氢氯噻嗪释药迅速，6小时达到95%以上，缓释效果差。

工业实用性

由上述实施例以及实验例的结果可知，本发明的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体固体制剂具有良好的外观，颗粒小，粒径均匀，包封率高，稳定性高，溶出性好，渗漏率低，在体内的停留时间长，生物利用度高，具有良好的工业应用价值。

以上通过具体实施方式和实施例对本发明进行了详细说明，不过应理解，这些说明并不对本发明的范围构成任何限制，在不偏离本发明的精神和保护范围的情况下，可以对本发明的技术方案及其实施方式进行多种修饰、改进和替换，这些均因落入本发明的保护范围内。

本申请中提及或引用的各个参考文献，在此全文引入作为参考。

Claims (4)

1.一种比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体，其特征在于主要由以下重量配比的成分制成：

其中，氢化大豆磷脂与二月桂酰磷脂酰胆碱的重量比为4：1，氢化大豆磷脂和二月桂酰磷脂酰胆碱的重量和与胆固醇的重量比为1：1-2：1；

其制备方法，包括以下步骤：

（a）将富马酸比索洛尔、氢氯噻嗪、氢化大豆磷脂、二月桂酰磷脂酰胆碱、胆固醇、吐温60溶解于有机溶剂中，搅拌使其溶解；其中，所述的有机溶剂选自体积比为2：1的二氯甲烷和异丙醇的混合溶剂；

（b）将上述溶液置于茄形瓶中，45℃水浴减压除去有机溶剂，在瓶壁上形成均匀透明薄膜；

（c）向茄形瓶中加入pH值为7.0的磷酸盐缓冲溶液，继续在45℃水浴常压旋转，使薄膜溶胀水合；

（d）将上述溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，将滤液置于-20℃冰箱中冷冻过夜，然后取出融化，反复冻融三次，喷雾干燥制得比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体粉末。

2.一种比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体固体制剂，其特征在于由权利要求1所述的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体和其他药用辅料制成。

3.根据权利要求2所述的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体固体制剂，其特征在于为片剂。

4.一种比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体固体制剂的制备方法，该方法包括以下步骤：

（1）将权利要求1的比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体粉末和稀释剂、崩解剂和粘合剂混合，过筛混合均匀，加入润湿剂制备软材，过筛制粒，干燥；

（2）将干颗粒和润滑剂混合均匀，过筛整粒；

（3）压片，制得比索洛尔/氢氯噻嗪脂质体固体制剂。

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