CN102716098B - 一种头孢妥仑匹酯脂质体固体制剂 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种头孢妥仑匹酯脂质体固体制剂及其制法，通过将活性成分头孢妥仑匹酯和特定的组合的大豆磷脂酰丝氨酸、胆固醇、聚氧乙烯烷基胺制备成脂质体，极大提高了药物的稳定性、溶出性和生物利用度，而且作用平稳持久，副作用小，疗效显著。

Description

一种头孢妥仑匹酯脂质体固体制剂

技术领域

本发明涉及一种头孢妥仑匹酯脂质体固体制剂及其制法，属于医药技术领域。

背景技术

头孢妥仑匹酯(cefditoren pivoxil)是日本研制的第3代头孢菌素，后来划归为第4代，其化学名称为：（-）-（6R，7R）-2，2-二甲基丙酰氧甲基7-[（Z）-2-（2-氨基-4-噻唑基）-2-甲氧基亚氨乙酰氨基]-3-[（Z）-2-（4-甲基-5-噻唑基）乙烯基]-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂二环[4，2，0]辛-2-烯-2-羧酸酯，分子式C₂₅H₂₈N₆O₇S₃，分子量620.73，结构式：

头孢妥仑匹酯于2001年9月获得美国FDA的批准。头孢妥仑匹酯具有强大的抗革兰阳性(GP)和革兰阴性(GN)菌活性，现已被划归为第4代口服头孢菌素。头孢妥仑匹酯本身并无抗菌活性，作为前体药物，口服后本品在被动扩散通过肠膜时被酯酶水解生成活性代谢物头孢妥仑和新戊酸。

头孢妥仑匹酯的活性代谢产物头孢妥仑对革兰染色阳性菌及革兰染色阴性菌具有广泛抗菌作用，对B-内酰胺酶产生株也显示很强抗菌力，其作用机制为抑制细菌细胞壁合成。临床上主要用于治疗各种感染症如呼吸道、皮肤感染、尿路感染等。

为了满足头孢妥仑匹酯在临床上的广泛应用，研究开发头孢妥仑匹酯的新剂型，提高患者顺应性，减少甚至杜绝不良反应，提高临床使用安全性，是头孢妥仑匹酯临床应用迫切解决的问题。

专利文献CN1846702A公开了一种头孢妥仑匹酯分散片及其制备方法。由头孢妥仑匹酯、微晶纤维素、交联聚维酮、蛋白糖、羟丙甲纤维素硬、脂酸镁组成；其制备方法为：原辅料经过目筛，称取羟丙甲纤维素，加水制成溶液，备用，成取处方量的头孢妥仑匹酯、微晶纤维素、交联聚维酮、蛋白糖混合均匀，经制粒，干燥，整粒，总混，压片制得。专利文献CN1843361A公开了一种头孢妥仑匹酯干混悬剂及其制备方法，由头孢妥仑匹酯、蔗糖、蛋白糖、羟丙甲纤维素、橘子香精组成；头孢妥仑匹酯经过目筛，称取羟丙甲纤维素，用50%的乙醇溶液制成3%的溶液，备用，称取处方量的蔗糖、蛋白糖及剩余量的羟丙甲纤维素，混合均匀，加入粘合剂及橘子香精制软材，制粒，鼓风干燥，整粒制得头孢妥仑匹酯干混悬剂。

目前也有头孢妥仑匹酯片上市销售，其也是利用片剂常用辅料通过传统的片剂的制备工艺制备而成。然而上述传统的方法制备的头孢妥仑匹酯制剂生物利用度低，长期稳定性不理想。

专利文献CN101940575A公开了一种头孢妥仑匹酯固体制剂及其制备方法，该制剂中含有头孢妥仑匹酯纳米微囊和药用辅料，所述的纳米微囊由头孢妥仑匹酯与载体材料制成，所述的载体材料为黄原胶、丝素蛋白和微粉硅胶。然而该头孢妥仑匹酯纳米微囊制剂存在包封率不高、稳定性差等问题。

脂质体是指将药物包封于类脂质双分子形成的薄膜中间所制成的超微型球状定向药物载体制剂，属于靶向给药系统的一种新剂型。脂质体作为药物载体，具有诸多优点：如脂质体既能包封脂溶性药物，又能包封水溶性药物；减轻变态反应和免疫反应；延缓释放，降低体内消除速度；能有效地保护被包裹药物，提高生物利用度；改变药物在体内的分布，并能靶向性释药，能降低药物的毒副作用；适合多途径给药等。

普通脂质体主要作用机理是将药物粉末或溶液包裹在脂质体双层脂质膜所封闭的水相中或嵌入脂质体双层脂质膜中，这种微粒具有类细胞结构，进入人体内主药被网状内皮系统吞噬而激活机体的自身免疫功能，并改变被包封药物的体内分布，使药物主要在肝、脾、肺和骨髓等组织器官中积蓄，从而提高药物的治疗指数，减少药物的治疗剂量和降低药物的毒性。

如果能将头孢妥仑匹酯制成脂质体，则有望克服现有的头孢妥仑匹酯制剂存在的一系列问题，提高药物的溶解性和稳定性，延长药物在体内的保留时间，提高生物利用度，降低毒副作用，改进治疗速度和治疗效果。

不过，制备脂质体的挑战在于选择适当的脂质体组成成分和制法。由于脂质体的性质如稳定性、包封率、起效时间、在体内的循环时间、生物利用度和毒副作用等与脂质体的组成直接地密切相关，而脂质体的组成与所要包封的药物性质直接地密切相关，因此，选择什么样的成分形成具有良好品质的头孢妥仑匹酯脂质体是亟待解决的课题。

通过大量的实验，本发明人对头孢妥仑匹酯脂质体固体制剂进行深入地研究发现，采用本发明特定赋形剂和头孢妥仑匹酯，按照特定比例含量制成的脂质体固体制剂有效的克服了主药稳定性差、包封率不高的问题，同时提高了药物的溶出度，增加了药物在体内的保留时间，从而解决了现有技术中对于头孢妥仑匹酯固体制剂存在的难题。

发明内容

为了形成品质优良的头孢妥仑匹酯脂质体固体制剂，重要的是寻找能与头孢妥仑匹酯良好相容从而将其良好包封且不渗漏的成膜材料，以便形成品质优良的头孢妥仑匹酯脂质体，使得该脂质体的溶出性优异且生物利用度高，以及寻找能与头孢妥仑匹酯脂质体形成固体制剂的药用辅料。

为了实现上述目的，本发明人进行的大量研究和实现，发现特定重量配比的头孢妥仑匹酯、大豆磷脂酰丝氨酸、胆固醇和聚氧乙烯烷基胺能制成头孢妥仑匹酯脂质体，其中，作为药物活性成分的头孢妥仑匹酯包封率高，溶出性好，所得固体制剂中的药物活性成分在体循环中的保留时间显著延长，生物利用度明显提高，疗效明显提高。

一方面，本发明提供一种头孢妥仑匹酯脂质体，其由包括以下重量配比的原料成分制成：

条件是：大豆磷脂酰丝氨酸与胆固醇的重量比为1∶1-2：1。

优选地，本发明提供的头孢妥仑匹酯脂质体由包括以下重量配比的原料成分制成：

条件是：大豆磷脂酰丝氨酸与胆固醇的重量比为1:1-2：1。

作为用于形成脂质体的磷脂，其种类繁多，常用的有天然磷脂和合成磷脂。天然磷脂包括β-谷固醇、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰乙醇胺、蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄磷脂、蛋黄磷脂酰甘油、蛋黄磷脂酰丝氨酸、蛋黄磷脂酰肌醇、大豆卵磷脂、氢化大豆磷脂、大豆磷脂酰甘油、大豆磷脂酰丝氨酸、和大豆磷脂酰肌醇等。合成磷脂包括硬脂酰胺、二油酰磷脂酰胆碱、二硬脂酸磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二豆蔻酰磷脂酰胆碱、二月桂酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰甘油、二硬脂酰磷脂酰甘油、二棕榈酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油、二月桂酰磷脂酰甘油等。

本发明人经过长期认真的研究，经过大量的筛选试验，发现采用一般的磷脂和附加剂为膜材制备的头孢妥仑匹酯脂质体在高温40℃、相对湿度75%±5%的加速试验下，稳定性和包封率不佳。

在本发明的头孢妥仑匹酯脂质体中，相对于1重量份的头孢妥仑匹酯而言，大豆磷脂酰丝氨酸的用量为0.5-2重量份，如果大豆磷脂酰丝氨酸低于0.5重量份，会有大量游离的头孢妥仑匹酯未被包封，脂质体的载药量低，稳定性也会下降，溶出性也会受到不利影响；反之，大豆磷脂酰丝氨酸的用量高于2重量份，则作为药物活性成分的头孢妥仑匹酯的包封率下降。

在本发明的头孢妥仑匹酯脂质体中，胆固醇和聚氧乙烯烷基胺用于调节脂质体的膜稳定性和通透性。

胆固醇是一种双亲性分子，与大豆磷脂酰丝氨酸相结合，阻止其凝聚成晶体结构。胆固醇掺入大豆磷脂酰丝氨酸形成的双层膜中，类似于“缓冲剂”一样起到调节膜结构“流动性”的作用。当低于相变温度时，胆固醇可以使膜减少有序排列，增加流动性；当高于相变温度时，胆固醇可以增加膜的有序排列，从而降低膜的流动性。胆固醇能使脂质体双分子层膜固化，从而减少自由基的生成，降低氧化水平，使脂质体稳定性显著增强。

本发明人经过研究发现，当大豆磷脂酰丝氨酸和胆固醇的重量比为1:1-2：1时，能形成稳定的头孢妥仑匹酯脂质体。当大豆磷脂酰丝氨酸和胆固醇的重量比高于2：1时，膜稳定性降低；当大豆磷脂酰丝氨酸和胆固醇的重量比低于1：1时，脂质体膜流动性过高，被包裹在脂质体内的头孢妥仑匹酯易于释放。

研究表明，脂质体的稳定性和溶出性与生物利用度有密切的对应关系。稳定性越高，溶出性越好，生物利用度越高。因此，本发明的头孢妥仑匹酯脂质体的稳定性高、溶出性优异，是导致药物生物利用度高的因素之一。

此外，本发明人研究发现，在本发明的头孢妥仑匹酯脂质体中，相对于1重量份的头孢妥仑匹酯而言，大豆磷脂酰丝氨酸的用量为0.5-2重量份，大豆磷脂酰丝氨酸和胆固醇的重量比为1:1-2：1时，所形成的头孢妥仑匹酯脂质体的包封率高。

在本发明的头孢妥仑匹酯脂质体中，使用聚氧乙烯烷基胺来进一步改进脂质体膜的稳定性和包封率。聚氧乙烯烷基胺是一种非离子表面活性剂，当用于大豆磷脂酰丝氨酸形成的双层膜中时，不仅能进一步提高头孢妥仑匹酯的溶解性，从而提高包封率；而且能提高该双层膜之间的化学能，从而提高脂质体在水性液体中的化学稳定性，进而提高头孢妥仑匹酯脂质体的稳定性。

在本发明的头孢妥仑匹酯脂质体中，相对于1重量份的头孢妥仑匹酯而言，聚氧乙烯烷基胺的用量为0.2-1重量份。如果聚氧乙烯烷基胺的用量低于0.2重量份，则由于其用量过低导致对脂质体的稳定性和包封率改进不够，反之，如果聚氧乙烯烷基胺的用量高于1重量份，则用于其用量过高而导致脂质体膜易于破坏而泄露活性成分。

在本发明的头孢妥仑匹酯脂质体中，通过适量配比的胆固醇和聚氧乙烯烷基胺对大豆磷脂酰丝氨酸脂膜结构的协同调节促进作用，能形成包封率高、稳定性高的头孢妥仑匹酯脂质体，其溶出性优异，缓释效果好，生物利用度高。

另一方面，本发明提供头孢妥仑匹酯脂质体的制备方法，该方法包括以下步骤：

（a）将头孢妥仑匹酯、大豆磷脂酰丝氨酸、胆固醇、聚氧乙烯烷基胺溶解于有机溶剂中，搅拌使其溶解；

（b）将上述溶液置于茄形瓶中，50℃水浴减压除去有机溶剂，在瓶壁上形成均匀透明薄膜；

（c）向茄形瓶中加入缓冲溶液，继续在50℃水浴常压旋转，使薄膜溶胀水合；

（d）将上述溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，将滤液置于-20℃冰箱中冷冻过夜，然后取出融化，反复冻融三次，喷雾干燥制得头孢妥仑匹酯脂质体粉末。

在本发明头孢妥仑匹酯脂质体制备方法的一个优选的实施方案中，步骤（a）中所述的有机溶剂选自乙醇、氯仿、二氯甲烷、甲醇、正丁醇、异丙醇、丙酮、苯甲醇、叔丁醇、乙腈、正己烷中的一种或几种，优选体积比为2：1的乙醇和三氯甲烷的混合溶剂。

在本发明头孢妥仑匹酯脂质体制备方法的一个优选的实施方案中，步骤（c）中所述的缓冲盐溶液选自磷酸盐缓冲液、枸橼酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液和碳酸盐缓冲液中的一种，优选pH值为6.6的磷酸盐缓冲溶液。

通过上述方法，能制备颗粒小且粒径分布均匀的头孢妥仑匹酯脂质体，其包封率高，稳定性高，溶出性好，生物利用度高。

研究发现，脂质体的大小是影响脂质体在体内分布和停留时间的主要因素，脂质体的粒径越小，体内停留时间越长。通过本发明方法制备的头孢妥仑匹酯脂质体颗粒小，粒径大小分布均匀，这是其在体内代谢率低、生物利用度高的因素之一。

再一方面，本发明提供头孢妥仑匹酯脂质体固体制剂，其由头孢妥仑匹酯脂质体和其他药用辅料制成，

在本文中，所用术语“其他药用辅料”或“药用辅料”的意思与赋形剂的意思相同，是指为了制备头孢妥仑匹酯脂质体固体制剂而使用的除了头孢妥仑匹酯脂质体以外的药用物料，包括稀释剂、崩解剂、粘合剂、润湿剂、润滑剂及其组合。

在本文中，所用术语“其他药用辅料的量”是指上述药用辅料的重量之和。

各种药用辅料的用量可以由本领域技术人员根据各辅料在固体制剂中的一般用量进行选择，这在本领域技术人员的能力范围内。

在本发明头孢妥仑匹酯脂质体固体制剂的一个优选的实施方案中，所述稀释剂选自淀粉、乳糖、糖粉、可压性淀粉、山梨醇、微晶纤维素、糊精中的一种或几种，优选为糖粉和微晶纤维素。

在本发明头孢妥仑匹酯脂质体固体制剂的一个优选的实施方案中，所述崩解剂选自低取代羟丙纤维素、羧甲基淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、干淀粉中的一种或几种，优选低取代羟丙纤维素。

在本发明头孢妥仑匹酯脂质体固体制剂的一个优选的实施方案中，所述粘合剂选自聚维酮K30、淀粉浆、羟丙甲纤维素、羧甲基纤维素钠、乙基纤维素、阿拉伯胶、黄原胶中的一种，优选为聚维酮K30。

在本发明头孢妥仑匹酯脂质体固体制剂的一个优选的实施方案中，所述润湿剂为20-80%的乙醇溶液，优选50%的乙醇溶液。

在本发明头孢妥仑匹酯脂质体固体制剂的一个优选的实施方案中，所述润滑剂选自硬脂酸镁、硬脂酸锌、月桂醇硫酸钠、滑石粉、微粉硅胶、聚乙二醇4000、硬脂酸中的一种或几种，优选为硬脂酸镁。

本发明提供的头孢妥仑匹酯脂质体固体制剂是口服制剂，为片剂。

在实践中，考虑到药物的有效剂量和用药的便利性，在本发明的头孢妥仑匹酯脂质体固体制剂的优选实施方案中，制剂的规格为每单位制剂头孢妥仑匹酯为100mg。

再一方面，本发明提供上述头孢妥仑匹酯脂质体固体制剂的制备方法，该方法包括以下步骤：

（1）头孢妥仑匹酯脂质体的制备：将头孢妥仑匹酯、大豆磷脂酰丝氨酸、胆固醇和聚氧乙烯烷基胺一起制备成脂质体粉末；

（2）头孢妥仑匹酯脂质体固体制剂的制备：将脂质体粉末和其他药用辅料混合制备头孢妥仑匹酯脂质体固体制剂。

其中，所述药用辅料选自稀释剂、崩解剂、粘合剂、润湿剂、润滑剂及其组合。

在头孢妥仑匹酯质体固体制剂的制备方法的一个优选实施方式中，步骤（1）头孢妥仑匹酯质体的制备包括以下子步骤：

（a）将头孢妥仑匹酯、大豆磷脂酰丝氨酸、胆固醇、聚氧乙烯烷基胺溶解于有机溶剂中，搅拌使其溶解；

（b）将上述溶液置于茄形瓶中，50℃水浴减压除去有机溶剂，在瓶壁上形成均匀透明薄膜；

（c）向茄形瓶中加入缓冲溶液，继续在50℃水浴常压旋转，使薄膜溶胀水合；

（d）将上述溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，将滤液置于-20℃冰箱中冷冻过夜，然后取出融化，反复冻融三次，喷雾干燥制得头孢妥仑匹酯脂质体粉末。

在本发明头孢妥仑匹酯脂质体制备方法的一个优选的实施方案中，步骤（a）中所述的有机溶剂选自乙醇、氯仿、二氯甲烷、甲醇、正丁醇、异丙醇、丙酮、苯甲醇、叔丁醇、乙腈、正己烷中的一种或几种，优选体积比为2：1的乙醇和三氯甲烷的混合溶剂。

在本发明头孢妥仑匹酯脂质体制备方法的一个优选的实施方案中，步骤（c）中所述的缓冲盐溶液选自磷酸盐缓冲液、枸橼酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液和碳酸盐缓冲液中的一种，优选pH值为6.6的磷酸盐缓冲溶液。

在本发明头孢妥仑匹酯脂质体固体制剂制备方法的一个优选的实施方案中，步骤（2）头孢妥仑匹酯质体固体制剂的制备包括以下子步骤：

（e）将头孢妥仑匹酯脂质体粉末和稀释剂、崩解剂和粘合剂混合，过筛混合均匀，加入润湿剂制备软材，过筛制剂，干燥；

（f）将干颗粒和润滑剂混合均匀，过筛整粒；

（g）压片，制得头孢妥仑匹酯脂质体固体制剂。

在本发明的方法中，还可以根据需要对脂质体和/或脂质体固体制剂进行灭菌。灭菌方法没有特殊要求，可以使用制药领域中常用的脂质体灭菌方法，如加热灭菌、过滤除菌、辐射灭菌或无菌操作等。

本发明先通过活性成分头孢妥仑匹酯与大豆磷脂酰丝氨酸、胆固醇、聚氧乙烯烷基胺的特定重量的组合制备成脂质体，再和其它药用辅料混合制成固体制剂。所得固体制剂产品质量高，粒径均匀，稳定性高，包封率高，溶出性好，药物在血液循环中保留时间长，疗效显著，降低了毒副作用。

本发明提供的头孢妥仑匹酯脂质体固体制剂的制备方法提高了产品质量，设备简单，易于操作，且方法简单，适合于工业化大生产。

在本文中，如果没有特别地说明，含量或用量都以重量计。

附图说明

图1是制剂的释放曲线。

其中：

具体实施方式

以下通过具体实施方式本发明进行进一步说明，本发明的特点和优点将随着这些说明而变得更为清楚。

实施例

以下通过具体优选的实施例对本发明进行进一步说明。这些实施例仅是说明性的，并不应理解为对本发明的限制。

实施例1头孢妥仑匹酯脂质体片

所用成分如下：

采用以下生产工艺制备头孢妥仑匹酯脂质体片：

（1）精确称取100g头孢妥仑匹酯、100g大豆磷脂酰丝氨酸、50g胆固醇、50g聚氧乙烯烷基胺，溶解于1000ml体积比为2：1的乙醇和三氯甲烷的混合溶剂中，搅拌使其溶解；

（2）将上述溶液置于茄形瓶中，50℃水浴减压除去乙醇和三氯甲烷，在瓶壁上形成均匀透明薄膜；

（3）向茄形瓶中加入1000ml pH值为6.6的磷酸盐缓冲溶液，继续在50℃水浴常压旋转，使薄膜溶胀水合；

（4）将上述溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，将滤液置于-20℃冰箱中冷冻过夜，然后取出融化，反复冻融三次，喷雾干燥制得头孢妥仑匹酯脂质体粉末；

（5）将头孢妥仑匹酯脂质体固体粉末和100g糖粉、100g微晶纤维素、10g低取代羟丙纤维素和10g聚维酮K30混合，过筛混合均匀，加入适量40%的乙醇溶液制备软材，过筛制剂，干燥；

（6）将干颗粒和5g硬脂酸镁混合均匀，过筛整粒；

（7）压片，制得1000片头孢妥仑匹酯脂质体片。

实施例2头孢妥仑匹酯脂质体片

所用成分如下：

采用以下生产工艺制备头孢妥仑匹酯脂质体胶囊：

（1）精确称取100g头孢妥仑匹酯、50g大豆磷脂酰丝氨酸、50g胆固醇、80g聚氧乙烯烷基胺，溶解于1000ml体积比为2：1的乙醇和三氯甲烷的混合溶剂中，搅拌使其溶解；

（2）将上述溶液置于茄形瓶中，50℃水浴减压除去乙醇和三氯甲烷，在瓶壁上形成均匀透明薄膜；

（3）向茄形瓶中加入1000ml pH值为6.6的磷酸盐缓冲溶液，继续在50℃水浴常压旋转，使薄膜溶胀水合；

（4）将上述溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，将滤液置于-20℃冰箱中冷冻过夜，然后取出融化，反复冻融三次，喷雾干燥制得头孢妥仑匹酯脂质体粉末；

（5）将头孢妥仑匹酯脂质体固体粉末和150g糖粉、80g微晶纤维素、8g低取代羟丙纤维素和10g聚维酮K30混合，过筛混合均匀，加入适量40%的乙醇溶液制备软材，过筛制剂，干燥；

（6）将干颗粒和5g硬脂酸镁混合均匀，过筛整粒；

（7）压片，制得1000片头孢妥仑匹酯脂质体片。

实施例3头孢妥仑匹酯脂质体片

所用成分如下：

采用以下生产工艺制备头孢妥仑匹酯脂质体干混悬剂：

（1）精确称取100g头孢妥仑匹酯、150g大豆磷脂酰丝氨酸、100g胆固醇、100g聚氧乙烯烷基胺，溶解于1000ml体积比为2：1的乙醇和三氯甲烷的混合溶剂中，搅拌使其溶解；

（2）将上述溶液置于茄形瓶中，50℃水浴减压除去乙醇和三氯甲烷，在瓶壁上形成均匀透明薄膜；

（3）向茄形瓶中加入1000ml pH值为6.6的磷酸盐缓冲溶液，继续在50℃水浴常压旋转，使薄膜溶胀水合；

（4）将上述溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，将滤液置于-20℃冰箱中冷冻过夜，然后取出融化，反复冻融三次，喷雾干燥制得头孢妥仑匹酯脂质体粉末；

（5）将头孢妥仑匹酯脂质体固体粉末和120g糖粉、120g微晶纤维素、10g低取代羟丙纤维素和5g聚维酮K30混合，过筛混合均匀，加入适量40%的乙醇溶液制备软材，过筛制剂，干燥；

（6）将干颗粒和5g硬脂酸镁混合均匀，过筛整粒；

（7）压片，制得1000片头孢妥仑匹酯脂质体片。

对比例1-3

采用与分别与实施例1相同的生产工艺，将如下表1中所示的对比例1-4中的成分分别制成头孢妥仑匹酯脂质体片：

表1对比例1-4中所用成分

其中，“/”表示未使用。

试验例1包封率的测定

量取在实施例1-3和对比例1-4中的步骤（4）中所得的头孢妥仑匹酯脂质体粉末1g溶于10ml水中，得混悬液，取混悬液0.5mL，加于SephadexG-50凝胶柱顶部，以磷酸盐缓冲液洗脱，流速1ml/min，收集4～11ml洗脱液(含脂质体),用氮气吹至体积约0.5ml，加无水乙醇破乳并定容至10ml，摇匀。精密吸取10μl溶液，进样，测定峰面积，计算脂质体重包封的头孢妥仑匹酯的含量；另精密量取头孢妥仑匹酯脂质体混悬液0.5ml，用无水乙醇定容至10ml，摇匀。精密吸取10μl溶液，测定脂质体混悬液中头孢妥仑匹酯的总量。计算包封率，结果示于下表2中：

表2包封率的测定结果

由表2可知，与比较例中的脂质体相比，本发明的头孢妥仑匹酯脂质体的包封率要高出很多。

通过比较实施例1-3与对比例1-4可知，本发明的脂质体具有更高的包封率。这表明，头孢妥仑匹酯脂质体的包封率与用于形成脂质体的成分种类及含量直接相关。当使用本发明所用成分以外的成分时或不同含量的相同成分时，所得头孢妥仑匹酯脂质体的包封率明显低于本发明。

试验例2脂质体粒径的大小及粒度分布

为了了解头孢妥仑匹酯脂质体准确的粒径参数及粒度分布，取在实施例1-3和对比例1-4中的步骤（4）中所得的适量脂质体粉末，直接用激光粒度分析仪（Easysizer20，欧美克公司）观察其外光，并测定粒径，用动态光散射处理软件处理，测量其直径并计算粒子直径的分布，结果示于下表3中：

表3脂质体粒径

由表3可知，本发明实施例1-3中所得脂质体的平均粒径比对比例1-4中所得脂质体的平均粒径小很多，而且粒径大小均一，外观更好。

通过比较实施例1-3与对比例1-4可知，本发明的脂质体具有更小的平均粒径，粒径分布更均匀，外观更好。这表明，头孢妥仑匹酯脂质体的粒径与用于形成脂质体的成分种类或含量均相关。当使用本发明所用成分以外的成分时或不同含量的相同成分时，所得头孢妥仑匹酯脂质体的平均粒径、粒径分布和外观等性质明显劣于本发明。

现有研究表明，脂质体颗粒大小和分布均匀程度与其包封率和稳定性以及在人体内的停留时间有关，脂质体颗粒越小、粒径分布越均匀，其包封率和稳定性越高，在人体循环系统内的停留时间越长（参见药物新剂型，第一版，第十八章，408－468页，朱盛山主编，化学工业出版社）。将该文献全文引入此处作为参考。

因此，本发明的头孢妥仑匹酯脂质体平均粒径小、粒径分布均匀是进一步促进其包封率、稳定性、在体内的保留时间时间长、生物利用度等性能优异的一个因素。

试验例3稳定性考察

将以上实施例1-3及对比例1-4制备的样品与上市的头孢妥仑匹酯片（MeijiSeika Pharma Co.,Ltd.Odawara Plant，批号110701）在高温40℃，相对湿度75%±5%条件下6个月，进行加速试验考察，结果见表4。

表4稳定性和溶出度测定结果

由表4可知，上市及其对比例的头孢妥仑匹酯片溶出度低，加速6月时含量降低明显，有关物质升高；而本发明实施例1-3中制备的样品溶出度高，加速6个月后含量和有关物质均无显著变化。充分说明了本发明在提高稳定性和溶出度方面的优越性。

试验例4体外释放研究

精密吸取头孢妥仑匹酯游离药和实施例1-3和对比例1-4的脂质体固体制剂的粉末各1g(以头孢妥仑匹酯的量为准)溶于10ml水中，取混悬液各5ml置于透析袋中扎紧，释放介质为PH 6.8的磷酸盐缓冲溶液（含0.25%的吐温20）100ml，水浴温度为37℃，搅拌转速为300rpm，分别于1、2、4、6、8、12h取样1ml，测定释放率，绘制释放曲线，结果如附图1中所示。

其中，曲线1表示游离药，曲线2表示实施例1，曲线3表示实施例2，曲线4表示实施例3，曲线5表示对比例1，曲线6表示对比例2，曲线7表示对比例3，曲线8表示对比例4。

结果表明，头孢妥仑匹酯游离药释放速度快，6小时达到95%以上；而本发明实施例1-3中所得头孢妥仑匹酯脂质体固体制剂释药缓慢，达到了缓释的效果。对比例1-4的样品释放速度比较快，不符合缓释的要求。

工业实用性

由上述实施例以及实验例的结果可知，本发明的头孢妥仑匹酯脂质体固体制剂具有良好的外观，颗粒小，粒径均匀，包封率高，稳定性高，溶出性好，渗漏率低，在体内的停留时间长，生物利用度高，具有良好的工业应用价值。

以上通过具体实施方式和实施例对本发明进行了详细说明，不过应理解，这些说明并不对本发明的范围构成任何限制，在不偏离本发明的精神和保护范围的情况下，可以对本发明的技术方案及其实施方式进行多种修饰、改进和替换，这些均因落入本发明的保护范围内。

本申请中提及或引用的各个参考文献，在此全文引入作为参考。

Claims (12)

1.一种头孢妥仑匹酯脂质体，其由包括以下重量配比的成分制成：

条件是：大豆磷脂酰丝氨酸与胆固醇的重量比为1:1-2：1。

2.根据权利要求1所述的头孢妥仑匹酯脂质体，其由包括以下重量配比的成分制成：

条件是：大豆磷脂酰丝氨酸与胆固醇的重量比为1:1-2：1。

3.一种根据权利要求1的头孢妥仑匹酯脂质体的制备方法，该方法包括以下步骤：

（a）将头孢妥仑匹酯、大豆磷脂酰丝氨酸、胆固醇、聚氧乙烯烷基胺溶解于有机溶剂中，搅拌使其溶解；

（b）将上述溶液置于茄形瓶中，50℃水浴减压除去有机溶剂，在瓶壁上形成均匀透明薄膜；

（c）向茄形瓶中加入缓冲溶液，继续在50℃水浴常压旋转，使薄膜溶胀水合；

（d）将上述溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，将滤液置于-20℃冰箱中冷冻过夜，然后取出融化，反复冻融三次，喷雾干燥制得头孢妥仑匹酯脂质体粉末。

4.根据权利要求3所述的方法，其中，

步骤（a）中所述的有机溶剂选自乙醇、氯仿、二氯甲烷、甲醇、正丁醇、异丙醇、丙酮、苯甲醇、叔丁醇、乙腈、正己烷中的一种或几种；

步骤（c）中所述的缓冲盐溶液选自磷酸盐缓冲液、枸橼酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液和碳酸盐缓冲液中的一种。

5.一种头孢妥仑匹酯脂质体固体制剂，其由头孢妥仑匹酯脂质体和其他药用辅料制成，其中所述头孢妥仑匹酯脂质体由包括以下重量配比的成分制成：

条件是：大豆磷脂酰丝氨酸与胆固醇的重量比为1:1-2：1；

基于1重量份的头孢妥仑匹酯脂质体而言，其他药用辅料的量为0.5-1重量份。

6.根据权利要求5所述的头孢妥仑匹酯脂质体固体制剂，其中头孢妥仑匹酯脂质体由包括以下重量配比的成分制成：

条件是：大豆磷脂酰丝氨酸与胆固醇的重量比为1:1-2：1。

7.根据权利要求5所述的头孢妥仑匹酯脂质体固体制剂，其为片剂。

8.一种根据权利要求5的头孢妥仑匹酯脂质体固体制剂的制备方法，该方法包括以下步骤：

（1）头孢妥仑匹酯脂质体的制备：将头孢妥仑匹酯、大豆磷脂酰丝氨酸、胆固醇和聚氧乙烯烷基胺一起制备成脂质体粉末；

（2）头孢妥仑匹酯脂质体固体制剂的制备：将脂质体粉末和其他药用辅料混合制备头孢妥仑匹酯脂质体固体制剂。

9.根据权利要求8所述的方法，其中步骤（1）头孢妥仑匹酯脂质体的制备包括以下子步骤：

（a）将头孢妥仑匹酯、大豆磷脂酰丝氨酸、胆固醇、聚氧乙烯烷基胺溶解于有机溶剂中，搅拌使其溶解；

（b）将上述溶液置于茄形瓶中，50℃水浴减压除去有机溶剂，在瓶壁上形成均匀透明薄膜；

（c）向茄形瓶中加入缓冲溶液，继续在50℃水浴常压旋转，使薄膜溶胀水合；

（d）将上述溶液用0.45μm微孔滤膜过滤，将滤液置于-20℃冰箱中冷冻过夜，然后取出融化，反复冻融三次，喷雾干燥制得头孢妥仑匹酯脂质体粉末；

其中，子步骤（a）中所述的有机溶剂选自乙醇、氯仿、二氯甲烷、甲醇、正丁醇、异丙醇、丙酮、苯甲醇、叔丁醇、乙腈、正己烷中的一种或几种；

子步骤（c）中所述的缓冲盐溶液选自磷酸盐缓冲液、枸橼酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液和碳酸盐缓冲液中的一种。

10.根据权利要求8所述的方法，其中，步骤（2）头孢妥仑匹酯质体固体制剂的制备包括以下子步骤：

（e）将头孢妥仑匹酯脂质体粉末和稀释剂、崩解剂和粘合剂混合，过筛混合均匀，加入润湿剂制备软材，过筛制粒，干燥；

（f）将干颗粒和润滑剂混合均匀，过筛整粒；

（g）压片，制得头孢妥仑匹酯脂质体固体制剂。

11.根据权利要求3所述的方法，其中，

步骤（a）中所述的有机溶剂选自体积比为2：1的乙醇和三氯甲烷的混合溶剂；

步骤（c）中所述的缓冲盐溶液选自pH值为6.6的磷酸盐缓冲溶液。

12.根据权利要求9所述的方法，其中，子步骤（a）中所述的有机溶剂选自体积比为2：1的乙醇和三氯甲烷的混合溶剂；

子步骤（c）中所述的缓冲盐溶液选自pH值为6.6的磷酸盐缓冲溶液。

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