一种含大豆肽和食用真菌多糖饮料及其制备方法
技术领域
本发明涉及具有抗疲劳作用的一种含大豆肽和食用真菌多糖饮料及其制备方法,属于微生物工程技术领域和保健品技术领域。
背景技术
食用功能真菌是指对人体有保健作用的一类真菌,其药用部位有子实体、菌核菌丝体和发酵液等。灵芝(Ganoderma lucidum)是传统中药食用功能真菌,能够增强体质,抵御疾病。灵芝中含有的灵芝多糖和灵芝酸类物质能够抑制肿瘤、抗病毒、保肝和抗衰老等。冬虫夏草(Cordyceps sinesis),别名虫草,为麦角菌科虫草属的食用功能真菌。主产于青海、西藏、四川、云南、贵州等海拔4000m一5000m的山中、草甸土中。它是由冬虫夏草菌(Cordyceps sinensis sail)寄生在蝙蝠科昆虫蝙蝠蛾(Hepfalus atmorlcanus oberthur)幼虫上的子座及幼虫尸体产生的复合体。为较常用的名贵中药材之一。猪苓[Polyporus umbellatus(Pets.)Fr.]属真菌门、担子菌纲、多孔菌目、多孔菌科。猪苓作为我国传统的真菌类药材,具有抗肿瘤、增强免疫力等多种医疗功效,在医药行业易用前景很广阔。由于目前中药无序开发,资源枯竭,生物多样性锐减,多数食用功能真菌的天然资源稀缺;人工栽培由于生长期长,受外界环境因素影响大,难以满足社会需求。而液体发酵技术简易可行,在发酵过程中除菌丝或孢子大量增殖外,还会产生多糖、多肽、萜类化合物、酶、核酸、氨基酸、维生素、植物激素等多种具有生理活性的物质,具有抗癌、抗衰老、等功效。
运动性疲劳是运动本身引起的机体工作能力暂时降低,经过适当时间休息和调整可以恢复的生理现象,是一个极其复杂的身体变化综合反应过程。它是是一种生理现象,也是一种人体保护性机制。但是,如果人经常处于疲劳状态,前一次运动产生的疲劳还没来得及消除,而新的疲劳又产生了,疲劳就可能积累,久之就会产生过度疲劳,影响人类的身体健康和运动能力。
大豆肽是一种生物活性肽,它是大豆蛋白质经蛋白酶水解而成的一种深加工产品。其具有易消化吸收、能迅速供给机体能量、低豆腥味等特性,特别是具有降低血清胆固醇、降血压和促进脂肪代谢、抗疲劳、抗氧化等独特的生理功能。体育运动中消耗热量的4%-10%是由蛋白质来提供的,由于体内不能合成必需氨基酸,当外界补充蛋白及氨基酸不足时,会造成肌肉蛋白的负平衡使肌肉疲劳。大豆肽不但具有人体所需的氨基酸,而且相对其它蛋白更易吸收,能迅速提供能量,加速肌肉疲劳恢复。
虽然已经有很多关于大豆肽生产和食用真菌产品及生产工艺的专利,但同时含有食用真菌多糖和大豆肽的功能产品或饮料的专利未见报道。
发明内容
本发明的一个目的是:通本发明方法提供一种具有抗疲劳作用的同时含大豆肽和食用真菌多糖饮料。
本发明的另一个目的是:提供具有抗疲劳作用的一种含大豆肽和食用真菌多糖饮料的制备方法,实现简易、稳定、高效地获得高质量的同时含大豆肽和食用真菌多糖饮料。
本发明所述的含大豆肽和食用真菌多糖饮料的技术方案是:
一种含大豆肽和食用真菌多糖饮料,原料包括大豆粉,和/或大豆粕粉,和/或大豆分离蛋白,还有食用真菌;是通过在液体发酵过程中用食用真菌在生长过程中产生的蛋白酶水解大豆蛋白后,获得含有大豆肽和食用真菌多糖的发酵液,最后用发酵液直接获得、或以能饮用的液体稀释、配制成含大豆肽和食用真菌多糖饮料;所述食用真菌选自于灵芝[Ganoderma lucidum],和/或冬虫夏草 [Cordyceps sinensis sail] ,和/或猪苓[Polyporus umbellatus(Pets.)Fr.]。
在上述含大豆肽和食用真菌多糖饮料的技术方案基础上具有附加特征的进一步技术方案是:
所述含大豆肽和食用真菌多糖饮料,该饮料中按重量份计:真菌多糖含量为0.2%-2%,大豆肽含量为0.1%-4.6%。
所述含大豆肽和食用真菌多糖饮料,该饮料中按重量份计:真菌多糖含量为0.2%,大豆肽含量为0.1%。
所述含大豆肽和食用真菌多糖饮料,该饮料中按重量份计:真菌多糖含量为1%,大豆肽含量为2.4%。
所述含大豆肽和食用真菌多糖饮料,该饮料中按重量份计:真菌多糖含量为2%,大豆肽含量为4.6%。
本发明含大豆肽和食用真菌多糖饮料优点是:1、材料来源不受外界环境影响,产品能很好地满足社会需求;2、用液体发酵技术,在发酵过程中除菌丝或孢子大量增殖外,产生多糖、多肽、萜类化合物、酶、核酸、氨基酸、维生素、植物激素等多种具有生理活性的物质,具有抗癌、抗衰老、等功效;3、用本发明制备方法得到同时含有食用真菌多糖和大豆肽,该大豆肽不但具有人体所需的氨基酸,而且相对其它蛋白更易吸收,能迅速提供能量,加速肌肉疲劳恢复。
本发明所述的含大豆肽和食用真菌多糖饮料的制备方法,包括下述步骤:先将食用真菌菌种接种到斜面培养基上活化,然后对活化得到的菌种其中一部分在液体种子培养基中培养,获得真菌种子培养物,再对真菌种子培养物经过发酵培养基进行深层液体发酵,然后对发酵后得到的发酵培养物进行包括分离过滤处理,获得含有大豆肽和食用真菌多糖的发酵液;最后用发酵液直接获得、或以能饮用的液体稀释、配制成含大豆肽和食用真菌多糖饮料。
本发明所述的含大豆肽和食用真菌多糖饮料的制备方法之二,包括下述步骤:
A、培养基的制备:制备PDA斜面培养基,液体种子培养基,及发酵培养基;
B、菌种的活化:将灵芝菌种、冬虫夏草菌种、猪苓菌种三种菌种中的一种,或两种,或三种分别接种到PDA斜面培养基上活化,然后取一小块活化菌种在液体种子培养基中培养,获得真菌种子培养物;
C、发酵培养:将上述获得的真菌种子培养物中的一种,或两种,或三种分别接种于经灭菌处理的发酵培养基上进行深层液体发酵;获得发酵培养物;
D、分离过滤:将发酵好的发酵培养物分别进行固液分离,分别得到真菌的菌丝体和发酵液;
E、干燥、粉碎、灭菌:将过滤得到的真菌的菌丝体干燥、粉碎、灭菌,最后装瓶;
F、消毒,配制成产品:对过滤后的三种真菌发酵液分别进行消毒;最后用发酵液直接获得、或以能饮用的液体稀释、配制成含大豆肽和食用真菌多糖饮料。
在上述含大豆肽和食用真菌多糖饮料的制备方法技术方案基础上具有附加特征的进一步技术方案是:
所述的含大豆肽和食用真菌多糖饮料的制备方法,所述步骤中:
A、培养基的制备:
PDA斜面培养基:按常规组分和条件制备,成分包括PDA固体马铃薯提取液,蔗糖,KH2PO4,MgSO4·7H2O,蛋白胨,琼脂;
液体种子培养基:每1升PDA固体马铃薯提取液中加入:蔗糖10-20g,KH2PO4 1-3 g,MgSO4·7H21-3g,蛋白胨 1-5g;pH6-8;灭菌条件为:温度118-125℃,时间26-32min;
发酵培养基:每1升培养基中含有:葡萄糖20-100g,大豆粉、或大豆粕粉、或大豆分离蛋白20-100g,KaH2PO4 1-1.5g,MgSO4·7H2O 1-1.5g,VB1 微量,其余为蒸馏水;pH 6-8;灭菌条件为:温度110-120℃,时间18-22min;
B、菌种的活化:将灵芝菌种、冬虫夏草菌种、猪苓菌种三种菌种中的一种、或两种、或三种分别在PDA斜面培养基上在25-30℃条件下培养3-4天活化;活化好的菌种取1-2小块到液体种子培养基中,在25-30℃,150r/min条件下培养3-4天,获得种子培养物;
C、发酵培养:将真菌种子培养物分别接种于经灭菌处理的发酵培养基上,在20-30℃条件下培养3-4天进行深层液体发酵:在发酵过程中, 控制Ph值在6.0-8.0,溶氧控制在20%-40%,发酵结束时菌丝生长达到饱和状态;
D、分离过滤:分别通过纤维素滤膜分离过滤;
E、干燥、粉碎、灭菌:粉碎后过75-85目;
F、消毒,配制成产品:按巴氏消毒法对过滤后的真菌发酵液进行消毒。
所述的含大豆肽和食用真菌多糖饮料的制备方法,所述步骤中:
A、培养基的制备:
PDA斜面培养基:按常规组分和条件制备:每1升PDA固体马铃薯提取液中加入:蔗糖20g,KH2PO4 3g,MgSO4·7H2O 1.5g,蛋白胨1g,琼脂15g;pH7;灭菌条件均为:121℃,30min;
液体种子培养基:每1升PDA固体马铃薯提取液中加入:蔗糖15g,KH2PO42g,MgSO4·7H2O2g,蛋白胨 3g;pH 7.0;灭菌条件均为:121℃,30min;
发酵培养基:每1升培养基中含有:葡萄糖100g,大豆粉或大豆粕粉或大豆分离蛋白100g,KaH2PO4 1.5g,MgSO4·7H2O 1.5g,VB140mg,其余为蒸馏水;pH 6-8;灭菌条件均为:115℃,20min;
B、菌种的活化:将灵芝菌种、冬虫夏草菌种、猪苓菌种三种菌种分别在PDA斜面培养基上在25-30℃条件下培养3-4天活化;活化好的菌种取1-2小块到液体种子培养基中,在25-30℃,150r/min条件下培养3-4天,获得种子培养物。
10、根据权利要求8所述的含大豆肽和食用真菌多糖饮料的制备方法,其特征在于,所述步骤中:
A、培养基的制备:
PDA斜面培养基:按常规组分和条件制备;
液体种子培养基:每1升PDA固体马铃薯提取液中加入:蔗糖10g,KH2PO41g,MgSO4·7H2O1g,蛋白胨 1g;pH 6.0;灭菌条件均为:118℃,26min;
发酵培养基:每1升培养基中含有:葡萄糖20g,大豆粉或大豆粕粉或大豆分离蛋白20g,KaH2PO4 1g,MgSO4·7H2O 1g,VB145mg,其余为蒸馏水;pH 6;灭菌条件均为:110℃,18min;
B、菌种的活化:将灵芝菌种在PDA斜面培养基上在25-30℃条件下培养3-4天活化。活化好的菌种取1-2小块到液体种子培养基中,在25-30℃,150r/min条件下培养3-4天,获得种子培养物;
C、发酵培养:将灵芝菌种子培养物接种于经灭菌处理的发酵培养基上,在20-30℃条件下培养3-4天进行深层液体发酵:在发酵过程中, 控制Ph值在6.0-8.0,溶氧控制在20%-40%,发酵结束时菌丝生长达到饱和状态。
所述的含大豆肽和食用真菌多糖饮料的制备方法,所述步骤中:
A、培养基的制备:
PDA斜面培养基:按常规组分和条件制备;
液体种子培养基:每1升PDA固体马铃薯提取液中加入:蔗糖20g,KH2PO43g,MgSO4·7H2O3g,蛋白胨 5g;pH 8.0;灭菌条件均为:125℃,32min;
发酵培养基:每1升培养基中含有:葡萄糖50g,大豆粉或大豆粕粉或大豆分离蛋白50g,KaH2PO4 1.5g,MgSO4·7H2O1.5g,VB155mg,其余为蒸馏水;pH 8;灭菌条件均为: 120℃,22min;
B、菌种的活化:将灵芝菌种和冬虫夏草菌种分别在PDA斜面培养基上在25-30℃条件下培养3-4天活化。活化好的菌种取1-2小块到液体种子培养基中,在25-30℃,150r/min条件下培养3-4天,获得种子培养物;
C、发酵培养:将灵芝菌种子和冬虫夏草菌种培养物接种于经灭菌处理的发酵培养基上,在20-30℃条件下培养3-4天进行深层液体发酵:在发酵过程中, 控制pH值在6.0-8.0,溶氧控制在20%-40%,发酵结束时菌丝生长达到饱和状态。
本发明含大豆肽和食用真菌多糖饮料制备方法的优点是:方法简易、稳定、高效,所制得的是高质量的、且是同时含大豆肽和食用真菌多糖饮料。
具体实施方式
本发明的含大豆肽和食用真菌多糖饮料产品实施例如下:
实施例1:是基本实施例,一种含大豆肽和食用真菌多糖饮料,其原料包括大豆粉,和/或大豆粕粉,和/或大豆分离蛋白,还有食用真菌;是通过在液体发酵过程中用食用真菌在生长过程中产生的蛋白酶水解大豆蛋白后,获得含有大豆肽和食用真菌多糖的发酵液,最后用发酵液直接获得、或以能饮用的液体稀释、配制成含大豆肽和食用真菌多糖饮料;所述食用真菌选自于灵芝[Ganoderma lucidum],和/或冬虫夏草 [Cordyceps sinensis sail] ,和/或猪苓[Polyporus umbellatus(Pets.)Fr.];所述含大豆肽和食用真菌多糖饮料中按重量份计,真菌多糖含量为0.2%-2%,大豆肽含量为0.1%-4.6%。
实施例2:与上述实施例1不同的是:所述含大豆肽和食用真菌多糖饮料中按重量份计,真菌多糖含量为0.2%,大豆肽含量为0.1%。
实施例3:与上述实施例1不同的是:所述含大豆肽和食用真菌多糖饮料中按重量份计,真菌多糖含量为1%,大豆肽含量为2.4%。
实施例4:与上述实施例1不同的是:所述含大豆肽和食用真菌多糖饮料中按重量份计,真菌多糖含量为2%,大豆肽含量为4.6%。
本发明的含大豆肽和食用真菌多糖饮料制备方法实施例如下:
实施例5:本发明的一种含大豆肽和食用真菌多糖饮料的制备方法,其基本方法步骤为:先将食用真菌菌种接种到斜面培养基上活化,然后对活化得到的菌种其中一部分在液体种子培养基中培养,获得真菌种子培养物,再对真菌种子培养物经过发酵培养基进行深层液体发酵,然后对发酵后得到的发酵培养物进行包括分离过滤处理,获得含有大豆肽和食用真菌多糖的发酵液;最后用发酵液直接获得、或以能饮用的液体稀释、配制成含大豆肽和食用真菌多糖饮料。
实施例6:本发明的一种含大豆肽和食用真菌多糖饮料的制备方法,其进一步的方法步骤为:
A、培养基的制备:制备PDA斜面培养基,液体种子培养基,及发酵培养基;
B、菌种的活化:将灵芝菌种、冬虫夏草菌种、猪苓菌种三种菌种中的一种,或两种,或三种分别接种到PDA斜面培养基上活化,然后取一小块活化菌种在液体种子培养基中培养,获得真菌种子培养物;
C、发酵培养:将上述获得的真菌种子培养物中的一种,或两种,或三种分别接种于经灭菌处理的发酵培养基上进行深层液体发酵;获得发酵培养物;
D、分离过滤:将发酵好的发酵培养物分别进行固液分离,分别得到真菌的菌丝体和发酵液;
E、干燥、粉碎、灭菌:将过滤得到的真菌的菌丝体干燥、粉碎、灭菌,最后装瓶;
F、消毒,配制成产品:对过滤后的三种真菌发酵液分别进行消毒;最后用发酵液直接获得、或以能饮用的液体稀释、配制成含大豆肽和食用真菌多糖饮料。
实施例7:与上述实施例6不同的是,本实施例具体步骤和参数为:
A、培养基的制备:
PDA斜面培养基:按常规组分和条件制备,成分包括PDA固体马铃薯提取液,蔗糖,KH2PO4,MgSO4·7H2O,蛋白胨,琼脂;
液体种子培养基:每1升PDA固体马铃薯提取液中加入:蔗糖10-20g,KH2PO4 1-3 g,MgSO4·7H21-3g,蛋白胨 1-5g;pH6-8;灭菌条件为:温度118-125℃,时间26-32min;
发酵培养基:每1升培养基中含有:葡萄糖20-100g,大豆粉、或大豆粕粉、或大豆分离蛋白20-100g,KaH2PO4 1-1.5g,MgSO4·7H2O 1-1.5g,VB1 微量,其余为蒸馏水;pH 6-8;灭菌条件为:温度110-120℃,时间18-22min;
B、菌种的活化:将灵芝菌种、冬虫夏草菌种、猪苓菌种三种菌种中的一种、或两种、或三种分别在PDA斜面培养基上在25-30℃条件下培养3-4天活化;活化好的菌种取1-2小块到液体种子培养基中,在25-30℃,150r/min条件下培养3-4天,获得种子培养物;
C、发酵培养:将真菌种子培养物分别接种于经灭菌处理的发酵培养基上,在20-30℃条件下培养3-4天进行深层液体发酵:在发酵过程中, 控制Ph值在6.0-8.0,溶氧控制在20%-40%,发酵结束时菌丝生长达到饱和状态;
D、分离过滤:分别通过纤维素滤膜分离过滤;
E、干燥、粉碎、灭菌:粉碎后过75-85目;
F、消毒,配制成产品:按巴氏消毒法对过滤后的真菌发酵液进行消毒。
实施例8:与上述实施例7不同的是:所述的含大豆肽和食用真菌多糖饮料,其中含有三种食用真菌多糖,制备方法步骤不同点在于:
A、培养基的制备:
PDA斜面培养基:按常规组分和条件制备:每1升PDA固体马铃薯提取液中加入:蔗糖20g,KH2PO4 3g,MgSO4·7H2O 1.5g,蛋白胨1g,琼脂15g;pH7;灭菌条件均为:121℃,30min;
液体种子培养基:每1升PDA固体马铃薯提取液中加入:蔗糖15g,KH2PO42g,MgSO4·7H2O2g,蛋白胨 3g;pH 7.0;灭菌条件均为:121℃,30min;
发酵培养基:每1升培养基中含有:葡萄糖100g,大豆粉或大豆粕粉或大豆分离蛋白100g,KaH2PO4 1.5g,MgSO4·7H2O 1.5g,VB140mg,其余为蒸馏水;pH 6-8;灭菌条件均为:115℃,20min;
B、菌种的活化:将灵芝菌种、冬虫夏草菌种、猪苓菌种三种菌种分别在PDA斜面培养基上在25-30℃条件下培养3-4天活化;活化好的菌种取1-2小块到液体种子培养基中,在25-30℃,150r/min条件下培养3-4天,获得种子培养物。
实施例9:与上述实施例7不同的是:所述的含大豆肽和食用真菌多糖饮料,其中含有一种食用真菌多糖,制备方法步骤不同点在于:
A、培养基的制备:
PDA斜面培养基:按常规组分和条件制备;
液体种子培养基:每1升PDA固体马铃薯提取液中加入:蔗糖10g,KH2PO41g,MgSO4·7H2O1g,蛋白胨 1g;pH 6.0;灭菌条件均为:118℃,26min;
发酵培养基:每1升培养基中含有:葡萄糖20g,大豆粉或大豆粕粉或大豆分离蛋白20g,KaH2PO4 1g,MgSO4·7H2O 1g,VB145mg,其余为蒸馏水;pH 6;灭菌条件均为:110℃,18min;
B、菌种的活化:将灵芝菌种在PDA斜面培养基上在25-30℃条件下培养3-4天活化。活化好的菌种取1-2小块到液体种子培养基中,在25-30℃,150r/min条件下培养3-4天,获得种子培养物;
C、发酵培养:将灵芝菌种子培养物接种于经灭菌处理的发酵培养基上,在20-30℃条件下培养3-4天进行深层液体发酵:在发酵过程中, 控制Ph值在6.0-8.0,溶氧控制在20%-40%,发酵结束时菌丝生长达到饱和状态。
实施例10:与上述实施例7不同的是:所述的含大豆肽和食用真菌多糖饮料,其中含有两种食用真菌多糖,制备方法步骤不同点在于:
A、培养基的制备:
PDA斜面培养基:按常规组分和条件制备;
液体种子培养基:每1升PDA固体马铃薯提取液中加入:蔗糖20g,KH2PO43g,MgSO4·7H2O3g,蛋白胨 5g;pH 8.0;灭菌条件均为:125℃,32min;
发酵培养基:每1升培养基中含有:葡萄糖50g,大豆粉或大豆粕粉或大豆分离蛋白50g,KaH2PO4 1.5g,MgSO4·7H2O1.5g,VB155mg,其余为蒸馏水;pH 8;灭菌条件均为: 120℃,22min;
B、菌种的活化:将灵芝菌种和冬虫夏草菌种分别在PDA斜面培养基上在25-30℃条件下培养3-4天活化。活化好的菌种取1-2小块到液体种子培养基中,在25-30℃,150r/min条件下培养3-4天,获得种子培养物;
C、发酵培养:将灵芝菌种子和冬虫夏草菌种培养物接种于经灭菌处理的发酵培养基上,在20-30℃条件下培养3-4天进行深层液体发酵:在发酵过程中, 控制pH值在6.0-8.0,溶氧控制在20%-40%,发酵结束时菌丝生长达到饱和状态。
对本发明显著技术效果进一步说明如下:
采用运动耐力实验(负重游泳和爬杆)和血乳酸(B1ood Lactic Acid)、血清尿素氮(Blood Urea Nitrogen,BUN)及肌/肝糖原(Muscle/Liver Glycogen)等三项生化检测项目来作为评判某种物质抗疲劳效果的指标。以上指标若有两项符合试验预期即可认为该物质具有抗疲劳功能。
抗疲劳试验:对40只小白鼠进行随机分组,每组10只,每组平均体重控制在34g左右,四组分别为对照组,灵芝组,猪苓组,虫草组。对照组每天饲喂一定量的生理盐水,灵芝组每天饲喂相同量的灵芝发酵饮料,猪苓组每天饲喂相同量的猪苓发酵饮料,虫草组每天饲喂相同量的冬虫夏草发酵饮料。每隔一天对每组小鼠进行体重称量,统一饲喂通用饲料,每隔一天更换垫料保持小鼠生长环境的一致,以消除偶然误差。连续饲喂一个月,对试验小鼠尿素氮含量、肝糖原含量、两项指标和运动耐力实验进行考查。
试验结果:灵芝、虫草、猪苓发酵组负重游泳时间(越长越好)分别比对照组提高294%,45.7%,62.5%;肝糖元含量分别比对照组高42%,35.2%,31.9%;尿素氮(越低越好)含量分别比对照组低15%,33.7%,7.9%。说明灵芝、虫草、猪苓发酵的饮料具有明显的抗疲劳效果。
本发明权利要求保护范围不限于上述实施例。