CN102274268A - 一种具有戒酒作用的中药活性提取物、其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种具有戒酒作用的中药活性提取物、及其制备方法和应用，本发明的提供的具有戒酒作用的中药活性提取物，其活性提取物的主要活性成分为葫芦素类化合物，特别是葫芦素B及葫芦素D，本发明还公开了制备所述的活性提取物的方法，及该活性提取物在制备治疗酒精性精神病药物或戒酒药物中的应用。应用时可将此活性提取物按常规中药制剂方法加入制备不同剂型时所需的各种辅料和载体后，制备成任何一种适宜临床使用的制剂。本发明提供的活性提取物是一种低毒、能够用于有效的治疗酒精依赖及制备戒酒药物的一种中药提取物。

Description

一种具有戒酒作用的中药活性提取物、其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及一种来源于中药甜瓜蒂的提取物，具体来说是葫芦素类化合物，其具有催吐、泻下作用，可用于治疗酒精性精神病、酒精依赖，可作为戒酒药物，本发明还涉及具有上述用途提取物的制备方法，属于中药领域。

背景技术

酒是在世界上应用最为广泛的成瘾物质之一，饮酒过量不仅会对身体和心理造成损害，无节制饮酒甚至可发展为一种成瘾行为，称之为酒依赖。酒依赖已成为严重的社会问题和医学问题，是世界上前十种致残疾病之一，引起了全世界的普遍关注。长期饮酒不仅能造成全身各系统的损害，还会带来工作能力下降、人际关系障碍等问题，而且情绪控制力降低，易引发不顾后果的行为，引发了诸多严重的社会问题，如离婚、交通事故、犯罪、自杀等。全世界酒依赖患者约有1.5亿人，仅次于心血管疾病和肿瘤，已成为位居第三位的公共卫生问题。西方发达国家酒消耗量在80年代达到高峰后即相对稳定或略有下降，而我国近年来随着经济的发展和人们物质生活水平的提高，酒生产量及消耗量也随之增加，酒消耗量以每年13％的惊人速度在增长。随着酒类消费的显著上升，酒依赖患病率而随之升高，在某些地区及某些特殊人群中酒依赖发病率更为突出。1993年由湖南医科大学精神卫生研究所带头，国内5家单位对国内5大城市饮酒情况进行了调查，流行学调查结果表明：18岁以上普通人群男、女及总饮酒率分别为87.3％、31.5％和61.1％，人均年饮酒量为3.62L纯酒精，男性饮酒量为女性的17.7倍，男性、女性和总酒依赖时点患病率分别为6.197％、0.044％和3.183％。据保守估计，我国目前至少有1300万-3700万酒依赖者，随着我国经济的发展，酒依赖患病率还有逐渐增加的趋势，由此而引起的社会问题愈发严重。因此，积极开展酒依赖的防治研究具有重要的现实意义和紧迫性。使嗜酒者自愿戒酒至今仍多采用中世纪即有的专科医生个别辅导和心理疗法的方法，而药物疗法则发展异常缓慢。

酒依赖的神经递质基础及各种递质之间存在极其复杂的相互作用，递质的作用又受到合成、释放、酶解、再摄取、转运以及细胞第二信号系统等因素的影响，因此酒依赖的治疗方面逐步形成以药物为主、多方面着手的治疗方法。研究显示中枢5-HT能神经递质与多巴胺密切相关，在导致酒依赖的“奖赏机制”中发挥重要作用，长期酒中毒能显著损害5-HT能神经元。基于此发现，近来人们将SSRIs应用于酒依赖的治疗，尽管目前的研究结论尚不完全一致，但初步结果支持SSRIs对迟发性(25岁后发病)和合并重性抑郁的酒依赖有良好疗效。资料表明这类药物可以直接改善酒依赖伴发的抑郁而改善临床症状，并影响饮酒的行为、改善饮酒情况、减少复发率和严重程度。SSRIs可能通过减轻患者对酒的渴求而在初期起效，长期疗效和戒断可能与其他的机制和因素有关。另外，这些药物还可以很快地缓解抑郁和焦虑症状。研究显示SSRIs如氟西汀、西酞普兰和氟伏沙明等能减少酒依赖患者的饮酒量，但个体间的差异很大，饮酒量的减少从10％到70％不等。性别、亚型和饮酒程度等几个因素影响SSRIs的治疗效果。酒依赖分型可从相对单纯的亚型(例如，合并抑郁)到较复杂的亚型(例如，可能存在5-HT神经递质的异常)。已经完成的一些研究结果显示，酒依赖不同亚型对SSRIs反应不同，各种SSRIs对酒依赖的疗效也不尽相同。

阿片受体拮抗剂盐酸纳曲酮是一种常用的治疗药物。纳曲酮是一种阿片受体拮抗剂，Mannelli等通过资料分析认为纳曲酮具有预防和治疗酒依赖的作用，且长期肌注治疗要较口服效果更佳。黄雄等进行了一项有关纳曲酮治疗酒依赖的前瞻性随机对照研究，结果显示纳曲酮显著降低患者对酒精的心理渴求程度。苯二氮卓受体药物与酒精作用的相似性，并且苯二氮卓药物可缓解酒精戒断症状，所以GABA-BZ(γ氨基丁酸/苯二氮草)受体一直是研究焦点。酒依赖患者大脑皮质GABA-BZ减少，酒精可增强GABA-BZ功能，戒酒者GABA-BZ功能的下降，可以通过饮酒来抵消，这就有可能导致戒断后的复饮。因而使用GABA-BZ受体激动剂理论上可起到戒酒作用。乙酰高牛黄酸钙是GABA-BZ受体激动剂，在结构上与GABA-BZ相似。该药对治疗酒依赖有效，且副作用较少，是一种安全、有效的戒酒巩固治疗药物。

呋喃唑酮为硝基呋喃类药物，其治疗酒依赖的机制为通过直接应用后，给戒酒者饮酒时产生强烈胃肠道反应，对患者造成一种惩罚性体验，逐渐建立厌恶性条件反射，使戒酒者产生对酒的厌恶感，从而清除对酒的依赖。治疗期间主要不良反应为不同程度的末梢神经炎。同时具有的心肌缺血、抑郁、焦虑心境等不良反应，也会影响戒酒成功率。如果在治疗过程中联合应用维生素B族及叶酸预防，治疗结束后，神经损伤基本可逐渐恢复。依据呋喃唑酮的厌恶疗法机制及认知行为理论，采用呋喃唑酮合并结合认知行为疗法与单用呋喃唑酮治疗酒依赖进行疗效对比，发现2种方法治疗均有效，但合并治疗显著好于单用呋喃唑酮治疗，尤其是对情感性戒断症状方面疗效更为显著。除了呋喃唑酮外，还常用戒酒硫、阿朴吗啡、中药瓜蒂散等治疗酒依赖，其机制都是通过厌恶疗法来脱瘾治疗。但戒酒硫、阿扑吗啡的毒副作用过大，尤其是阿扑吗啡引起的成瘾性，其危害甚至甚于酒精依赖，多数患者无法应用。

中药瓜蒂散，《伤寒论》中记载“瓜蒂一分(熬黄)，赤小豆一分。上二味，各别捣筛，为散已，合治之。取一钱匕，以香豉一合，用热汤七合，煮作稀糜，去滓，取汁合散，温，顿服之。不吐者，少少加，得快吐，乃止”。传统应用即为涌吐法之首要方剂。近代药理学研究表明，瓜蒂散具有和阿扑吗啡、戒酒硫类似的功效，即都能够降低酒精依赖患者的摄酒量，起到治疗作用。将瓜蒂0.3～0.7g浸泡于500ml白酒中，7～15d后饮用。103例饮酒者中，总有效率97.3％。饮用期间个别饮酒者可出现轻度恶心、呕吐。瓜蒂散的具有催吐、泻下作用，患者引用混有瓜蒂散的酒精性饮品时，产生恶心、呕吐、腹泻等反应，使患者建立厌恶酒的条件反射，达到了戒酒目的。目前对于瓜蒂散的研究仅停留在其药效层面，对于其引起呕吐的药理学作用机制、药效学作用的物质基础的研究尚未有文献报道，本发明利用天然药物化学和药理学结合的手段，获得了瓜蒂中具有泻下、催吐的活性提取物，确定了活性提取物中主要的成分及比例，提高了药物的选择性，戒酒效果明显优于传统复方瓜蒂散。药物的毒副作用也明显优于目前常用的呋喃唑酮、戒酒硫、阿扑吗啡等。

发明内容

中药复方瓜蒂散在治疗酒精依赖方面已有相关文献报道，单味药材甜瓜蒂在治疗酒精依赖性及戒酒治疗未见文献报道，因此本发明提供了中药甜瓜蒂(Cucumis melo)具有治疗酒精性依赖作用的药用活性成分的提取方法、活性部位中指标成分的鉴定、活性部位中指标成分的含量测定。

本发明所要解决的技术问题之一是提供一种具有戒酒作用的中药活性提取物，其特征在于所述的中药活性提取物提取自中药甜瓜蒂中，经各种波谱学方法鉴定发现所述中药活性提取物的主要活性成分为葫芦素类化合物；

所述的中药活性提取物，提取自中药甜瓜蒂中，其特征在于通过NMR技术作进一步鉴定发现所述的葫芦素类化合物主要为葫芦素B及/或葫芦素D；其中葫芦素B的质量分数含量为49％(w/w)。

本发明所要解决技术问题之二是提供一种制备以上所述中药甜瓜蒂中活性提取物的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)甜瓜蒂粉碎成粗粉，过10目筛；

(2)得到的粗粉加入粗粉质量10倍的质量分数为80％乙醇提取，2小时/次，提取两次，合并提取液，滤过；

(3)滤液收干浓缩，滤过，加乙醇或水调至乙醇的质量分数浓度为50～60％，灌装灭菌得粗品；

(4)粗品上硅胶柱，以石油醚溶液，氯仿溶液，氯仿与乙酸乙酯的体积比为1∶1的混合溶液，氯仿与乙酸乙酯的体积比为1∶3的混合溶液，乙酸乙酯溶液，质量分数为95％乙醇溶液以及水作为流动相分级洗脱，收集各流分，分别收干；所述的活性提取物位于乙酸乙酯洗脱相中。

以上所述的制备方法，其特征在于可进一步包括以下步骤：乙酸乙酯洗脱相浓缩收干制成浸膏，经常规硅胶柱色谱分离，以氯仿∶甲醇体积比为10∶1～100∶1的洗脱剂进行梯度洗脱，得到洗脱部分，经ODS柱色谱分离，以质量分数为50％～100％的甲醇溶液为洗脱剂进行梯度洗脱，分别得到纯化的活性提取物。

通过药理药性实验发现该类化合物发挥戒酒作用与刺激肠道渗出，增加肠道内容物推进速度，引起呕吐相关，主要是通过建立不良情绪的条件反射发挥戒除酒精依赖的作用。

因此，本发明所要解决技术问题之三是提供所述的活性提取物在制备治疗酒精性精神病药物或戒酒药物中的应用。

所述的活性提取物加入制剂成型所需的辅料，按照药物制剂常规方法做成临床上适宜的各种制剂，可用于治疗或辅助治疗酒精依赖及相关并发症。

附图说明

图1为活性洗脱相HPLC色谱图；

图2为葫芦素B HPLC色谱图。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做进一步说明，应该理解的是，这些实施例仅用于例证的目的，决不限制本发明的保护范围。

实施例1、提取工艺

甜瓜蒂100g粉碎成粗粉，过10目筛，加入1000g 80％乙醇提取，2小时/次，提取两次，合并提取液，滤过，收干至800ml，滤过，加乙醇或水调至乙醇浓度为50～60％，成1000ml，灌装灭菌得粗品。粗品上硅胶柱，以石油醚溶液，氯仿溶液，氯仿与乙酸乙酯体积比为1∶1的混合溶液，氯仿与乙酸乙酯体积比为1∶3的混合溶液，乙酸乙酯，95％乙醇，水为流动相分级洗脱，收集各流分，收干。分别获得水部洗脱相、氯仿洗脱相部、醇洗脱相部、乙酸乙酯洗脱相部、氯仿∶乙酸乙酯1∶1洗脱相部和氯仿∶乙酸乙酯1∶3洗脱相部分。活性物质位于乙酸乙酯洗脱相中。

乙酸乙酯洗脱相部分浓缩收干成浸膏，经常规硅胶柱色谱分离，以氯仿与甲醇体积比为50∶1(v/v)的洗脱剂进行梯度洗脱，得到洗脱部分，经ODS柱色谱分离，以质量分数为75％(w/w)的甲醇溶液为洗脱剂进行梯度洗脱，得到两个单体化合物，即葫芦素B、D。

实验例1、甜瓜蒂成分提取

甜瓜蒂100g粉碎成粗粉，过10目筛，加入1000g 80％乙醇提取两次，2小时/次，提取两次，合并提取液，滤过，收干至800ml，滤过，加乙醇或水调至乙醇浓度为50～60％，成1000ml，灌装灭菌得粗品。粗品上硅胶柱，以石油醚溶液，氯仿溶液，氯仿与乙酸乙酯体积比为1∶1的混合溶液，氯仿与乙酸乙酯体积比为1∶3的混合溶液，乙酸乙酯溶液，95％乙醇溶液，水为流动相分级洗脱，收集各流分，收干。分别获得水洗脱相、氯仿洗脱相、醇洗脱相、乙酸乙酯洗脱相、氯仿∶乙酸乙酯1∶1洗脱相和氯仿∶乙酸乙酯1∶3洗脱相。

实验例2、泻下活性洗脱相的筛选

取小鼠70只，雌雄各半，体质量18～22g，编号、称重，按体重排序，随机数字表法随机分为7组，每组10只。实验时，第1组灌胃给蒸馏水，第2～7组分别灌胃给予水洗脱相、醇洗脱相、乙酸乙酯洗脱相、氯仿洗脱相、氯仿∶乙酸乙酯1∶1洗脱相、氯仿∶乙酸乙酯1∶3洗脱相；30min后，各组均灌胃给0.2ml墨汁，然后小鼠单个放在垫有滤纸的鼠笼内，每隔1h换滤纸。连续观察6h，记录小鼠首次出现含墨汁粪便时间，第一次稀便时间，6h内小鼠排出黑便粒数、稀便粒数及总便数，比较各组动物上述各项指标的差异，结果如表1所示。

表1、各洗脱相对小鼠大肠蠕动的影响(X±S，n＝10)

与对照组相比*P＜0.05，**P＜0.01

说明活性提取物位于乙酸乙酯洗脱相中。

实验例3、活性洗脱相(乙酸乙酯洗脱相)的泻下作用。

3.1小鼠肠蠕动推进试验。

小鼠40只，雌雄各半，体重18～22g，随机分为4组，每组10只。分别灌胃给予蒸馏水、乙酸乙酯洗脱相8mg/kg，16mg/kg和32mg/kg。30min后，均灌胃给0.2ml墨汁，将小鼠放入垫有滤纸的鼠笼，连续观察6h，每隔1h更换滤纸。记录小鼠首次出现含墨汁粪便时间及各组发生腹泻的动物数，见表2。

3.2乙酸乙酯洗脱相对小鼠小肠蠕动的影响

小鼠40只，雌雄各半，体重18～22g，随机分为4组，每组10只。分别灌胃给予含10％墨汁的蒸馏水、乙酸乙酯洗脱相8mg/kg，16mg/kg和32mg/kg。20min后脱颈椎处死，取除幽门至回盲部的小肠，轻轻将小肠拉成直线，测量小肠总长度，从幽门至墨汁前沿的距离作为墨汁在肠内推动距离。用下列公式计算墨汁推进百分率，见表2。

墨汁推进百分率＝墨汁肠内推进距离/小肠总长度*100％

3.3乙酸乙酯洗脱相对肠容积的影响

小鼠40只，雌雄各半，体重18～22g，随机分为4组，每组10只。分别灌胃给予蒸馏水、乙酸乙酯洗脱相8mg/kg，16mg/kg和32mg/kg。2小时后脱颈处死，打开腹腔，结扎并取出幽门下端至直肠末端的肠管。称取肠道的湿重，然后放入干燥箱里烘干，称干重，见表2。以下公式计算水分含量。

水分含量(％)＝(湿重-干重)/干重*100％

3.4乙酸乙酯洗脱相对小鼠胃排空的影响

小鼠40只，雌雄各半，体重18～22g，随机分为4组，每组10只。小鼠禁食18h后，分别灌胃给予蒸馏水、乙酸乙酯洗脱相8mg/kg，16mg/kg和32mg/kg；30min后各组均灌胃营养半固体糊0.8ml/只。20min后脱颈椎处死动物，打开腹腔，结扎胃贲门和幽门，取胃，用滤纸拭干后称全重，然后沿胃大弯剪开胃体，洗去胃内容物后拭干，称净重。以胃全重和胃净重的差值为胃内残留物重，计算胃内残留物占所灌半固体糊的重量百分比为胃内残留率，见表2。

表2、乙酸乙酯洗脱相对大肠蠕动、小肠蠕动、肠容积、胃内残留率的影响

*：与对照组比较，P＜0.05；**：与对照组比较，P＜0.01。

实验例4、活性洗脱相对离体肠张力的影响

Wistar大鼠体重250～300g。切取十二指肠(距幽门2～3cm)、近端空肠(Treiz’S韧带下1cm)、远端空肠(小肠中部)、回肠(距回盲瓣3～4cm)纵行肌各一条，近端结肠(距盲肠一结肠交界处0.5cm)、远端结肠(距肛门4cm)纵、环行肌各一条，肌条长8mm、宽4mm。将肌条置于盛有37℃ Krebs液恒温灌流肌槽，并持续供给95％O₂和5％CO₂混合气体。给予肌条1g前负荷，待肌条自发收缩活动稳定时，累积加入不同浓度乙酸乙酯洗脱相提取液，加药时间间隔为2min，连续加药后乙酸乙酯洗脱相的累积浓度为1％、2％、4％、8％、16％、32％、64％、128％、256％。观察给药前后肠平滑肌的收缩幅度、频率、张力的变化。

结果显示乙酸乙酯洗脱相从10μmol/L、20μmol/L到1280μmol/L离体肠道频率、张力、振幅没有显著增加。比较给药前，不同浓度的乙酸乙酯洗脱相对小肠各部位肌条，近端结肠环行肌和远端结肠纵、环行肌的张力、收缩波平均振幅及收缩频率均无明显影响(P＞0.05)。

实验例5、活性洗脱相对犬催吐作用

普通级杂种犬12只15～20kg，实验前适应观察1～2周。将犬随机分成3组：阴性对照组(蒸馏水组)、乙酸乙酯洗脱相组和阳性对照组(硫酸铜)，每组4只。试验前12h禁食(不禁水)，分别灌胃给予蒸馏水、乙酸乙酯洗脱相和硫酸铜溶液，主要观察记录犬的呕吐及恶心样反应症状、症状出现和消失的时间、呕吐次数等情况进行评分。所观察的症状包括：舔舌、闭眼、嗳气、呻吟、哈欠、急促呼吸、走动。根据其发生的严重程度和频率进行记分(0分：无症状；1分：症状较少发生；2分：症状经常发生；3分：症状持续发生或不能继续实验)。由于呕吐、干呕和排便是较严重的症状，这3项症状被单独记分，分别为3分(发生1次)、4分(2次)和5分(3次或以上)。结果如下：

空白组给予蒸馏水后，犬状态无明显变化。

灌胃给予硫酸铜后，犬出现舔舌、哈欠、闭眼、急促呼吸等症状，并有呕吐症状。呕吐开始的平均时间为6.4±0.8min，次数为5.29±0.87次。其中给药后15min时段动物均多次出现恶心样症状及呕吐，其症状评分为30.0±2.0(VS空白，P＜0.01)；呕吐停止后动物仍有轻微恶心样症状，未再出现呕吐，其舔舌等症状均明显减轻，并逐渐恢复正常。

给予乙酸乙酯洗脱相后，动物开始出现舔舌、哈欠、闭眼、急促呼吸等恶心样症状，部分犬出现呕吐症状，平均次数为2.0±1.0次，呕吐期间各组症状评分14.0±9.3(VS空白，P＜0.05)；呕吐停止后，动物症状逐渐恢复。

表3、给药后各组动物评分结果：

*：和空白组比P＜0.05

实验例6、活性洗脱相的戒酒作用实验

普通级杂种犬，15～20kg/只，实验前适应观察1～2周。将酒精混入每日食物，第一阶段以4ml/kg体重的剂量，逐步提高酒精的浓度(10％、20％、30％、40％、50％)，每个浓度给三到五天，根据具体耐受情况调整。第二阶段当浓度达到50％后，逐步提高给酒剂量到8ml/kg，维持给药120天后对动物进行酒精成瘾测试，以动物每日摄食中，含酒精食物占总摄食量的百分比表示酒精成瘾程度。将酒精成瘾的动物分为空白对照组，活性洗脱相低、中、高剂量组和硫酸铜组，每组5只，分别灌胃生理盐水(0.5ml/kg)、活性洗脱相2.5mg/kg、5mg/kg、10mg/kg和硫酸铜30mg/kg，连续灌胃14天，记录灌胃后犬的呕吐出现的情况，并定期检测摄食量。

表4.偏好测定结果：含酒食物/食物(％)

*：和空白组比较P＜0.05

实验例7、活性洗脱相指标成分的分离、鉴定及HPLC含量测定

7.1活性洗脱相指标成分的分离、鉴定

甜瓜蒂活性洗脱相(乙酸乙酯洗脱部分)浸膏7g，经常规硅胶柱色谱分离，以氯仿-甲醇(10∶1～100∶1)为洗脱剂进行梯度洗脱，得到3部分洗脱部分：Fr.1，Fr.2，Fr.3，Fr.3经ODS柱色谱分离，以水-甲醇(50％～100％)为洗脱剂进行梯度洗脱，得到两个单体化合物，经NMR技术鉴定为葫芦素B、D。其NMR数据归属如下：

葫芦素B结构及其NMR数据：

葫芦素B的碳、氢信号归属(600MHz，DMSO-d₆)

葫芦素D结构及其NMR数据

葫芦素D的碳、氢信号归属(600MHz，pyridine-d₅)

7.2活性洗脱相的HPLC分析

色谱条件：仪器：Agilent 2000HPLC，二极管阵列、自动进样器；UV检测器；

色谱柱：5μm COSMOSIL C18column(250×4.6mm)。

流动相：以甲醇/水(C为甲醇)为流动相进行梯度洗脱，紫外吸收波长为234nm。

样品溶液及对照品溶液的配置：

样品液配置：精密称取干燥的活性洗脱相提取物50.000mg，置于10ml容量瓶中，用色谱甲醇溶解后定容至10ml，0.5μm微孔滤膜滤过，弃去初滤液，滤液待用。

对照品溶液配制：精密称取获得的葫芦素B 21.000mg，置于10ml容量瓶中，用色谱甲醇溶解后定容至10ml，0.5μm微孔滤膜滤过，弃去初滤液，滤液待用。

梯度洗脱条件：(注C为甲醇，B为水)

活性洗脱相HPLC色谱图，如图1所示，样品浓度为5.0mg/ml。

葫芦素B HPLC色谱图，如图2所示，浓度为2.1mg/ml。

以外表一点法计算，活性洗脱相中葫芦素B的含量为49％。

以上所述仅为本发明的优选实施例，对本发明而言仅是说明性的，而非限制性的；本领域普通技术人员理解，在本发明权利要求所限定的精神和范围内可对其进行许多改变，修改，甚至等效变更，但都将落入本发明的保护范围内。

Claims (6)

1.一种具有戒酒作用的中药活性提取物，其特征在于所述的中药活性提取物提取自中药甜瓜蒂中，所述中药活性提取物的主要活性成分为葫芦素类化合物。

2.如权利要求1所述的中药活性提取物，提取自中药甜瓜蒂中，其特征在于所述的葫芦素类化合物包括葫芦素B及葫芦素D。

3.制备权利要求1或2所述的中药活性提取物的方法，其特征在于进一步包括以下步骤：

(1)甜瓜蒂粉碎成粗粉，过10目筛；

(2)得到的粗粉加入粗粉质量10倍的质量分数为80％乙醇提取，2小时/次，提取两次，合并提取液，滤过；

(3)滤液收干浓缩，滤过，加乙醇或水调至乙醇的质量分数浓度为50～60％，灌装灭菌得粗品；

(4)粗品上硅胶柱，以石油醚溶液，氯仿溶液，氯仿与乙酸乙酯的体积比为1∶1的混合溶液，氯仿与乙酸乙酯的体积比为1∶3的混合溶液，乙酸乙酯溶液，质量分数为95％乙醇溶液以及水作为流动相分级洗脱，收集各流分，分别收干；乙酸乙酯洗脱相，即为活性提取物。

4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于进一步包括以下步骤：乙酸乙酯洗脱相浓缩收干制成浸膏，经常规硅胶柱色谱分离，以氯仿∶甲醇体积比为10∶1～100∶1的洗脱剂进行梯度洗脱，再经ODS柱色谱分离，以质量分数为50％～100％的甲醇溶液为洗脱剂进行梯度洗脱，分别得到活性化合物葫芦素B和葫芦素D。将权利要求3中的活性提取物经HPLC分析，其特征在于葫芦素B的质量含量为49％。

5.权利要求1或2任一项所述的活性提取物在制备治疗酒精性精神病药物或戒酒药物中的应用。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于所述的活性提取物加入制剂成型所需的辅料，按照药物制剂常规方法做成临床上适宜的各种制剂。

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