CN102246695B - 一种培养器皿内制备白及假鳞茎的方法及其专用培养基 - Google Patents
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Abstract
本发明是一种培养器皿内制备白及假鳞茎的方法及其专用培养基，属植物的组织培养及繁殖技术领域。以白及种子为外植体的专用培养基由种子萌发培养基，假鳞茎诱导培养基，假鳞茎增殖培养基和假鳞茎生根培养基组成。以白及茎尖和或白及侧芽为外植体的专用培养基中除去种子萌发培养基外，其假鳞茎诱导至假鳞茎生根的培养基与上述相同，另有茎尖、侧芽诱导培养基和丛芽增殖培养基。本发明成功培育出白及假鳞茎，克服了现有技术只能直接培育出白及组培苗的技术难题，解决了直接培育的白及组培苗细弱、炼苗时成活率低的缺陷。所培育的白及假鳞茎直径达0.45～0.80cm，增殖率达255～300%，其假鳞茎炼苗出苗的成活率达82～95%。
Description
技术领域
本发明涉及植物的组织培养及繁殖技术领域，具体涉及培养器皿内制备白及假鳞茎的方法及其专用培养基。
背景技术
白及（Bletilla striata(Thunb.)Reichb.f），属兰科，多年生草本。原产中国，广布我国西南、东南及华北大部分地区，生于海拔110m-3200m的林下、沟谷岩石缝中，耐阴性强。块茎入药、性微寒，味苦、甘、涩，具有收敛止血，消肿生肌之功效，是我国药典品种“白及颗粒”的重要原料。
我国白及原料年需求量在4500-5000吨左右，由于白及的自然繁殖、生长较慢，采挖后几乎不可再生，而对白及的开发利用范围逐步扩大，原料需求剧增，白及的自然产出与利用之间的矛盾凸现，价格连年攀升，由2000～2002年的13～14元/kg上升到2007年的75-80元/kg、2011年200元/kg，而且价格还在继续上走。人工种植白及是缓解资源矛盾，培植新型生物产业的有效途径。目前，报道的白及人工种植方法多为块茎繁育。
现有技术在培养器皿内通过白及种子或侧芽已能成功制备出白及组培苗，但白及组培苗细弱、炼苗时易于死亡，成活率低。本发明研究发现，白及原球茎与白及假鳞茎存在较大差别，白及假鳞茎为白及组培丛生苗诱导出的绿色圆球状假鳞茎，该圆球侧边有多个芽点，能在基质中萌发生成幼苗，所生成的幼苗健壮，成活率高，或诱导出新的假鳞茎。而白及原球茎是种子在培养器皿内自然萌发生成的愈伤组织，丛状，能萌发丛状细弱的组培苗。如果能培养出白及假鳞茎，则可克服白及种子或侧芽直接培育出的白及组培苗细弱、炼苗时易于死亡，成活率低等劣势。据查，现有技术中没有在培养器皿内通过白及种子、茎尖或侧芽培育出白及假鳞茎的报道。
发明内容
本发明要解决的技术问题是克服现有技术培育出的白及组培苗细弱导致炼苗时成活率低以及还不能培育出白及假鳞茎的技术缺陷和不足，其目的是提供一种培养器皿内制备白及假鳞茎的方法及其专用培养基。
由于现有技术直接培育的白及组培苗细弱在移栽时成活率低，本发明从植物生理学角度研究入手，经过大量实验研究，以白及种子、白及茎尖或白及侧芽为外植体，成功地研究出在培养器皿内能制备出白及假鳞茎的适宜条件及其专用培养基，本发明技术方案能达到大量培育优质的白及假鳞茎的技术效果，所培育出的白及假鳞茎较直接培育的白及组培苗能适应外部环境，其假鳞茎在基质中能长芽、生根，萌发生成健壮的白及种苗，使白及种苗的成活率高，克服了现有技术的上述缺陷，可以形成大规模化生产白及的种苗繁殖关键技术。
本发明的技术方案是：
1、一种以白及种子为外植体在培养器皿内制备白及假鳞茎的专用培养基，所述的专用培养基是由种子萌发培养基，假鳞茎诱导培养基，假鳞茎增殖培养基和假鳞茎生根培养基组成，其中：
所述的种子萌发培养基的配方为：1/2MS，6-BA1.0～3.0mg/L，NAA1.0～2.0 mg/L ，
琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎诱导培养基的配方为：1/2MS，6-BA0.5～6.5mg/L，NAA0.5～2.5mg/L，
香蕉泥70～80g/L ，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎增殖培养基的配方为：1/2MS，6-BA0.5～4.0 mg/L，NAA0.2～1.0 mg/L，
香蕉泥60～80g/L，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎生根培养基的配方为：1/2MS，6-BA0.1～0.5 mg/L，NAA0.5～4.5 mg/L，
琼脂7g/L , pH 5.8。
2、所述的一种以白及种子为外植体在培养器皿内制备白及假鳞茎的专用培养基优选的是：
所述的种子萌发培养基的配方为：1/2MS，6-BA1.8～2.4mg/L，NAA1.4～1.8 mg/L ，
琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎诱导培养基的配方为：1/2MS，6-BA2.8～5.1mg/L，NAA1.3～1.9mg/L，
香蕉泥74～78g/L ，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎增殖培养基的配方为：1/2MS，6-BA1.9～2.8 mg/L，NAA0.4～0.7 mg/L，
香蕉泥68～72g/L，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎生根培养基的配方为：1/2MS，6-BA0.2～0.4 mg/L，NAA1.9～3.1 mg/L，
琼脂7g/L , pH 5.8。
3、所述的一种以白及种子为外植体在培养器皿内制备白及假鳞茎的专用培养基最佳的是：
所述的种子萌发培养基的配方为：1/2MS，6-BA2.1mg/L，NAA1.5 mg/L ，琼脂7g/L ,
pH 5.8；
所述的假鳞茎诱导培养基的配方为：1/2MS，6-BA3.8mg/L，NAA1.5mg/L，香蕉泥75/L ，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎增殖培养基的配方为：1/2MS，6-BA2.2 mg/L，NAA0.5mg/L，香蕉泥70g/L，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎生根培养基的配方为：1/2MS，6-BA0.3 mg/L，NAA2.6 mg/L，琼脂7g/L ,
pH 5.8。
4、一种以白及茎尖和或白及侧芽为外植体在培养器皿内制备白及假鳞茎的专用培养基，所述的专用培养基是由茎尖、侧芽诱导培养基，丛芽增殖培养基，假鳞茎诱导培养基，假鳞茎增殖培养基和假鳞茎生根培养基组成，其中：
所述的茎尖、侧芽诱导培养基的配方为：MS，6-BA1.0～3.0 mg/L，NAA0.5～2.0 mg/L，
琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的丛芽增殖培养基的配方为:MS，6-BA1.0～5.0 mg/L，NAA0.5～2.0 mg/L，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎诱导培养基的配方为：1/2MS，6-BA0.5～6.5mg/L，NAA0.5～2.5mg/L，
香蕉泥70～80g/L，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎增殖培养基的配方为:1/2MS，6-BA0.5～4.0 mg/L，NAA0.2～1.0 mg/L，
香蕉泥60～80g/L，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎生根培养基的配方为：1/2MS，6-BA0.1～0.5 mg/L，NAA0.5～4.5 mg/L，
琼脂7g/L , pH 5.8。
5、所述的一种以白及茎尖和或侧芽为外植体在培养器皿内制备白及假鳞茎的专用培养基优选的是：
所述的茎尖、侧芽诱导培养基的配方为：MS，6-BA1.6～2.2 mg/L，NAA1.1～1.6 mg/L，
琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的丛芽增殖培养基的配方为：MS，6-BA2.3～3.8 mg/L，NAA0.9～1.5mg/L，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎诱导培养基的配方为：1/2MS，6-BA2.8～5.1mg/L，NAA1.3～1.9mg/L，
香蕉泥74～78g/L ，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎增殖培养基的配方为：1/2MS，6-BA1.9～2.8 mg/L，NAA0.4～0.7 mg/L，
香蕉泥68～72g/L，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎生根培养基的配方为: 1/2MS，6-BA0.2～0.4 mg/L，NAA1.9～3.1 mg/L，
琼脂7g/L , pH 5.8。
6、所述的一种以白及茎尖和或侧芽为外植体在培养器皿内制备白及假鳞茎的专用培养基最佳的是：
所述的茎尖、侧芽诱导培养基为：MS，6-BA1.9 mg/L，NAA1.3 mg/L，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的丛芽增殖培养基的配方为：MS，6-BA3.0 mg/L，NAA1.2mg/L，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎诱导培养基的配方为：1/2MS，6-BA3.8mg/L，NAA1.5mg/L，香蕉泥75/L ，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎增殖培养基的配方为：1/2MS，6-BA2.2 mg/L，NAA0.5mg/L，香蕉泥70g/L，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎生根培养基的配方为：1/2MS，6-BA0.3 mg/L，NAA2.6 mg/L，琼脂7g/L ,
pH 5.8。
7、一种培养器皿内制备白及假鳞茎的方法，按以下步骤进行：
（1）以白及种子作为外植体进行消毒灭菌：将白及种子用质量分数为75%酒精消毒40～50s，用质量分数为1% HgCl2溶液对白及种子进行表面消毒8～12min，用无菌水冲洗3～4次，在无菌工作条件下取出种子并用纱布包好种子后，用无菌水润洗3～5次，用0.1mol/L KOH溶液预处理8～10min，用无菌水冲洗2～3次，在饱和漂白粉上清液中消毒10～20min，用无菌水冲洗3～5次；
（2）在无菌工作条件下，将步骤（1）消毒灭菌的白及种子接种到上述技术方案1中所述的种子萌发培养基中暗箱培养；
（3）当步骤（2）的种子萌发长出芽和幼根时，将其接种到上述技术方案1中所述的假鳞茎诱导培养基中诱导培养假鳞茎；
（4）将步骤（3）获得的假鳞茎转接到上述技术方案1中所述的假鳞茎增殖培养基中增殖培养假鳞茎；
（5）将步骤（4）获得的假鳞茎转接到上述技术方案1中所述的假鳞茎生根培养基中培养，假鳞茎长出根后移出培养器皿进行炼苗；
上述步骤（3）～（5）的培养条件为：温度25±2℃，光照强度1800～2500lx，光照12～15h/d。
8、技术方案7所述的一种培养器皿内制备白及假鳞茎的方法，最佳的是:步骤（2）所述的种子萌发培养基是上述技术方案3中所述的种子萌发培养基；步骤（3）所述的假鳞茎诱导培养基是上述技术方案3中所述的假鳞茎诱导培养基；步骤（4）所述的假鳞茎增殖培养基是上述技术方案3中所述的假鳞茎增殖培养基；步骤（5）所述的假鳞茎生根培养基是上述技术方案3中所述的假鳞茎生根培养基。
9、一种培养器皿内制备白及假鳞茎的方法，按以下步骤进行：
（1）以白及茎尖或白及侧芽为外植体，用流水冲洗白及茎尖、白及侧芽，用质量分数为75%的酒精消毒40～60s后，转入质量分数为1%的HgCl2溶液对白及茎尖、白及侧芽进行表面消毒8～12min，用无菌水冲洗3～4次；
（2）在无菌工作条件下，将步骤（1）消毒灭菌后的白及茎尖、白及侧芽接种到上述技术方案4所述的茎尖、侧芽诱导培养基,培养出再生芽；
（3）将步骤（2）培养的再生芽转接到上述技术方案4所述的丛芽增殖培养基中培养出丛生芽；
(4) 将步骤（3）培养的丛生芽转接到上述技术方案4所述的假鳞茎诱导培养基中诱导培养假鳞茎；
（5）将步骤（4）培养的假鳞茎转接到上述技术方案4所述的假鳞茎增殖培养基中增殖培养；
（6）步骤（5）获得的假鳞茎转接到上述技术方案4所述的假鳞茎生根培养基中培养，假鳞茎长出根后移出培养器皿进行炼苗；
上述步骤（2）～（6）的培养条件为：温度25±2℃，光照强度1800～2500lx，光照12～15h/d。
10、技术方案9所述的一种培养器皿内制备白及假鳞茎的方法，最佳的是:步骤（2）所述的茎尖、侧芽诱导培养基是上述技术方案6中所述的茎尖、侧芽诱导培养基；步骤（3）所述的丛芽增殖培养基是上述技术方案6中所述的丛芽增殖培养基；步骤（4）所述的假鳞茎诱导培养基是上述技术方案6中所述的假鳞茎诱导培养基；步骤（5）所述的假鳞茎增殖培养基是上述技术方案6中所述的假鳞茎增殖培养基；步骤（6）所述的所述的假鳞茎生根培养基是上述技术方案6中所述的假鳞茎生根培养基。
所述的培养器皿是广义地指试管，培养瓶，三角瓶等培养器皿，以使所述的制备白及假鳞茎是在封闭的环境中进行。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
1、 本发明方法用白及种子，白及茎尖或白及侧芽均能成功培育出白及
假鳞茎，克服了现有技术用这些外植体只能直接培育出白及组培苗的技术难题，解决了用这些外植体直接培育的白及组培苗细弱、炼苗时易于死亡，成活率低等技术缺陷和不足。
2、本发明方法所培育的白及假鳞茎质量好，增殖率高，用白及假鳞茎直接炼苗出苗的成活率高，由于白及假鳞茎又直接是营养体，生长出的白及种苗健壮，克服了白及组培苗细弱的缺陷。以白及种子为外植体，所产生的白及假鳞茎大小直径可达到0.45～0.80cm，最高可达到0.80cm，白及假鳞茎的增殖率达到260～300%，白及假鳞茎直接炼苗出苗的成活率高达到82～95%；以白及茎尖或白及侧芽为外植体，所产生的白及假鳞茎大小直径可达到0.51～0.78cm，白及假鳞茎的增殖率达到255%～290%，白及假鳞茎直接炼苗出苗的成活率高达到83～93%。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明作更详细的说明，以便进一步理解本发明，但不构成对本发明的限制。以下实施例中所用的试剂均为市售产品， MS培养基及各培养基的配制方法均按植物组织培养的常规方法配置。
实施例1 以白及种子为外植体在培养瓶内制备白及假鳞茎的方法及其专用培养基
本实施例作5个处理，各处理的专用培养基的配方见表1，5个处理在培养瓶内制备白及假鳞茎的方法，除所用的专用培养基（见表1）不同外，其余方法均与如下处理1的方法相同：
（1）在资源圃内培育白及开花，当果皮略显黄色时摘取种子，以该白及种子作为外植体进行如下消毒灭菌：将白及种子用质量分数为75%酒精消毒50s，用质量分数为1% HgCl2溶液对白及种子进行表面消毒10min，用无菌水冲洗4次，在无菌工作条件下取出种子并用纱布包好种子后，用无菌水润洗5次，用0.1mol/L KOH溶液预处理10min，用无菌水冲洗3次，在饱和漂白粉（漂白粉是次氯酸钙和氯化钙的混合物，其有效成分是次氯酸钙）上清液中消毒15min，用无菌水冲洗5次；
（2）在无菌工作条件下将步骤（1）消毒灭菌的白及种子接种到实施例1处理1专用培养基中的种子萌发培养基中暗箱培养；
（3）当步骤（2）的种子萌发长出芽和幼根时，将其接种到实施例1处理1专用培养基中的假鳞茎诱导培养基中诱导培养假鳞茎；
（4）将步骤（3）获得的假鳞茎转接到实施例1处理1专用培养基中的假鳞茎增殖培养基中增殖培养假鳞茎；
（5）将步骤（4）获得的假鳞茎转接到实施例1处理1专用培养基中的假鳞茎生根培养基中培养，假鳞茎长出根后移出培养瓶进行炼苗；
上述步骤（3）～（5）的培养条件为：温度25±2℃，光照强度2000lx，光照12h/d。
表1 以白及种子为外植体在培养瓶内制备白及假鳞茎的专用培养基的配方
处理1-处理5产生白及假鳞茎及其炼苗效果详见表2：
1、处理1诱导出的假鳞茎直径大小为0.45cm,增殖率达265%，在基质中炼苗的成活率为83%。
2、处理2诱导出的假鳞茎直径大小为0.50cm,增殖率达260%，在基质中炼苗的成活率为82%。
3、处理3诱导出的假鳞茎直径大小为0.60cm,增殖率达275%，在基质中炼苗的成活率为92%。
4、处理4诱导出的假鳞茎直径大小为0.65cm,增殖率达280%，在基质中炼苗的成活率为90%。
5、处理5诱导出的假鳞茎直径大小为0.80cm,增殖率达300%，在基质中炼苗的成活率为95%。处理5采用的培养基诱导出的假鳞茎直径最大，增值率最快，炼苗的成活率最高。
表2 处理1-处理5产生白及假鳞茎及其炼苗效果
实施例2 以白及茎尖和或白及侧芽为外植体在培养瓶内制备白及假鳞茎的方法及其专用培养基
本实施例作5个处理，各处理的编号以实施例1的编号续编，5个处理的编号分别是处理6、处理7、处理8、处理9、处理10，各处理的专用培养基的配方见表4，处理6的外植体是白及茎尖，处理7的外植体是白及侧芽，处理8的外植体是白及茎尖，处理9的外植体是白及侧芽，处理10的外植体是白及侧芽，5个处理在培养瓶内制备白及假鳞茎的方法，除所用的专用培养基（见表3）不同外，其余方法均与如下处理6的方法相同：
（1）以白及茎尖为外植体，用流水冲洗白及茎尖，用质量分数为75%的酒精消毒60s后，转入质量分数为1%的HgCl2溶液对白及茎尖进行表面消毒12min，用无菌水冲洗4次；
（2）在无菌工作条件下，将步骤（1）消毒灭菌后的白及茎尖接种到实施例2处理1的专用培养基所述的茎尖、侧芽再生诱导培养基中培养出再生芽；
（3）将步骤（2）培养的再生芽转接到实施例2处理1的专用培养基中的丛芽增殖培养基中培养出丛生芽；
（4）将步骤（3）培养的丛生芽转接到实施例2处理1的专用培养基中的假鳞茎诱导培养基中导培养基假鳞茎；
（5）将步骤（4）培养的假鳞茎转接到实施例2处理1的专用培养基中的假鳞茎增殖培养基中增殖培养；
（6）将步骤（5）获得的假鳞茎转接到实施例2处理1的专用培养基中的假鳞茎生根培养基中培养，假鳞茎长出根后移出培养瓶进行炼苗；
上述步骤（2）～（6）的培养条件为：温度25±2℃，光照2000lx，光照12h/d。
实施例2 以白及茎尖和或白及侧芽为外植体在培养瓶内制备白及假鳞茎的方法及其专用培养基
本实施例作5个处理，各处理的编号以实施例1的编号续编，5个处理的编号分别是处理6、处理7、处理8、处理9、处理10，各处理的专用培养基的配方见表4，处理6的外植体是白及茎尖，处理7的外植体是白及侧芽，处理8的外植体是白及茎尖，处理9的外植体是白及侧芽，处理10的外植体是白及侧芽，5个处理在培养瓶内制备白及假鳞茎的方法，除所用的专用培养基（见表3）不同外，其余方法均与如下处理6的方法相同：
（1）以白及茎尖为外植体，用流水冲洗白及茎尖，用质量分数为75%的酒精消毒60s后，转入质量分数为1%的HgCl2溶液对白及茎尖进行表面消毒12min，用无菌水冲洗4次；
（2）在无菌工作条件下，将步骤（1）消毒灭菌后的白及茎尖接种到实施例2处理1的专用培养基所述的茎尖、侧芽再生诱导培养基中培养出再生芽；
（3）将步骤（2）培养的再生芽转接到实施例2处理1的专用培养基中的丛芽增殖培养基中培养出丛生芽；
（4）将步骤（3）培养的丛生芽转接到实施例2处理1的专用培养基中的假鳞茎诱导培养基中导培养基假鳞茎；
（5）将步骤（4）培养的假鳞茎转接到实施例2处理1的专用培养基中的假鳞茎增殖培养基中增殖培养；
（6）将步骤（5）获得的假鳞茎转接到实施例2处理1的专用培养基中的假鳞茎生根培养基中培养，假鳞茎长出根后移出培养瓶进行炼苗；
上述步骤（2）～（6）的培养条件为：温度25±2℃，光照2000lx，光照12h/d。
表3 以白及茎尖或白及侧芽为外植体在培养瓶内制备白及假鳞茎的专用培养基的配方
处理6-处理10产生白及假鳞茎及其炼苗效果详见表4：
1、处理6诱导出的假鳞茎直径大小为0.51cm,增殖率达260%，在基质中炼苗的成活率为85%。
2、处理7诱导出的假鳞茎直径大小为0.53cm,增殖率达255%，在基质中炼苗的成活率为83%。
3、处理8诱导出的假鳞茎直径大小为0.65cm,增殖率达270%，在基质中炼苗的成活率为90%。
4、处理9诱导出的假鳞茎直径大小为0.63cm,增殖率达275%，在基质中炼苗的成活率为91%。
5、处理10诱导出的假鳞茎直径大小为0.78cm,增殖率达290%，在基质中炼苗的成活率为93%。处理10采用的培养基诱导出的假鳞茎直径为5个处理中最大的，增值率最快的，炼苗的成活率最高的。
表4 处理6-处理10产生白及假鳞茎及其炼苗效果
上述各实施例，由于白及假鳞茎又直接是营养体，生长出的白及种苗健壮，克服了白及组培苗细弱的缺陷。
Claims (1)
1.一种以白及种子为外植体在培养器皿内制备白及假鳞茎的专用培养基，其特征在于：所述的专用培养基是由种子萌发培养基，假鳞茎诱导培养基，假鳞茎增殖培养基和假鳞茎生根培养基组成，其中：
所述的种子萌发培养基的配方为：1/2MS，6-BA1.0～3.0mg/L，NAA1.0～2.0 mg/L ，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎诱导培养基的配方为：1/2MS，6-BA0.5～6.5mg/L，NAA0.5～2.5mg/L，香蕉泥70～80g/L ，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎增殖培养基的配方为：1/2MS，6-BA0.5～4.0 mg/L，NAA0.2～1.0 mg/L，香蕉泥60～80g/L，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎生根培养基的配方为：1/2MS，6-BA0.1～0.5 mg/L，NAA0.5～4.5 mg/L，琼脂7g/L , pH 5.8。
2.根据权利要求1所述的一种以白及种子为外植体在培养器皿内制备白及假鳞茎的专用培养基，其特征在于：
所述的种子萌发培养基的配方为：1/2MS，6-BA1.8～2.4mg/L，NAA1.4～1.8 mg/L ，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎诱导培养基的配方为：1/2MS，6-BA2.8～5.1mg/L，NAA1.3～1.9mg/L，香蕉泥74～78g/L ，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎增殖培养基的配方为：1/2MS，6-BA1.9～2.8 mg/L，NAA0.4～0.7 mg/L，香蕉泥68～72g/L，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎生根培养基的配方为：1/2MS，6-BA0.2～0.4 mg/L，NAA1.9～3.1 mg/L，琼脂7g/L , pH 5.8。
3.根据权利要求2所述的一种以白及种子为外植体在培养器皿内制备白及假鳞茎的专用培养基，其特征在于：
所述的种子萌发培养基的配方为：1/2MS，6-BA2.1mg/L，NAA1.5 mg/L ，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎诱导培养基的配方为：1/2MS，6-BA3.8mg/L，NAA1.5mg/L，香蕉泥75g/L ，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎增殖培养基的配方为：1/2MS，6-BA2.2 mg/L，NAA0.5mg/L，香蕉泥70g/L，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎生根培养基的配方为：1/2MS，6-BA0.3 mg/L，NAA2.6 mg/L，琼脂7g/L , pH 5.8。
4.一种以白及茎尖和或白及侧芽为外植体在培养器皿内制备白及假鳞茎的专用培养基，其特征在于：所述的专用培养基是由茎尖、侧芽诱导培养基，丛芽增殖培养基，假鳞茎诱导培养基，假鳞茎增殖培养基和假鳞茎生根培养基组成，其中：
所述的茎尖、侧芽诱导培养基的配方为：MS，6-BA1.0～3.0 mg/L，NAA0.5～2.0 mg/L，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的丛芽增殖培养基的配方为:MS，6-BA1.0～5.0 mg/L，NAA0.5～2.0 mg/L，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎诱导培养基的配方为：1/2MS，6-BA0.5～6.5mg/L，NAA0.5～2.5mg/L，香蕉泥70～80g/L，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎增殖培养基的配方为:1/2MS，6-BA0.5～4.0 mg/L，NAA0.2～1.0 mg/L，香蕉泥60～80g/L，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎生根培养基的配方为：1/2MS，6-BA0.1～0.5 mg/L，NAA0.5～4.5 mg/L，琼脂7g/L , pH 5.8。
5.根据权利要求4所述的一种以白及茎尖和或侧芽为外植体在培养器皿内制备白及假鳞茎的专用培养基，其特征在于：
所述的茎尖、侧芽诱导培养基的配方为：MS，6-BA1.6～2.2 mg/L，NAA1.1～1.6 mg/L，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的丛芽增殖培养基的配方为：MS，6-BA2.3～3.8 mg/L，NAA0.9～1.5mg/L，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎诱导培养基的配方为：1/2MS，6-BA2.8～5.1mg/L，NAA1.3～1.9mg/L，香蕉泥74～78g/L ，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎增殖培养基的配方为：1/2MS，6-BA1.9～2.8 mg/L，NAA0.4～0.7 mg/L，香蕉泥68～72g/L，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎生根培养基的配方为: 1/2MS，6-BA0.2～0.4 mg/L，NAA1.9～3.1 mg/L，琼脂7g/L , pH 5.8。
6.根据权利要求5所述的一种以白及茎尖和或侧芽为外植体在培养器皿内制备白及假鳞茎的专用培养基，其特征在于：
所述的茎尖、侧芽诱导培养基为：MS，6-BA1.9 mg/L，NAA1.3 mg/L，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的丛芽增殖培养基的配方为：MS，6-BA3.0 mg/L，NAA1.2mg/L，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎诱导培养基的配方为：1/2MS，6-BA3.8mg/L，NAA1.5mg/L，香蕉泥75g/L ，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎增殖培养基的配方为：1/2MS，6-BA2.2 mg/L，NAA0.5mg/L，香蕉泥70g/L，琼脂7g/L , pH 5.8；
所述的假鳞茎生根培养基的配方为：1/2MS，6-BA0.3 mg/L，NAA2.6 mg/L，琼脂7g/L , pH 5.8。
7.一种培养器皿内制备白及假鳞茎的方法，其特征在于，按以下步骤进行：
（1）以白及种子作为外植体进行消毒灭菌：将白及种子用质量分数为75%酒精消毒40～50s，用质量分数为1% HgCl2溶液对白及种子进行表面消毒8～12min，用无菌水冲洗3～4次，在无菌工作条件下取出种子并用纱布包好种子后，用无菌水润洗3～5次，用0.1mol/L KOH溶液预处理8～10min，用无菌水冲洗2～3次，在饱和漂白粉上清液中消毒10～20min，用无菌水冲洗3～5次；
（2）在无菌工作条件下，将步骤（1）消毒灭菌的白及种子接种到权利要求1所述的种子萌发培养基中暗箱培养；
（3）当步骤（2）的种子萌发长出芽和幼根时，将其接种到权利要求1所述的假鳞茎诱导培养基中诱导培养假鳞茎；
（4）将步骤（3）获得的假鳞茎转接到权利要求1所述的假鳞茎增殖培养基中增殖培养假鳞茎；
（5）将步骤（4）获得的假鳞茎转接到权利要求1所述的假鳞茎生根培养基中培养，假鳞茎长出根后移出培养器皿进行炼苗；
上述步骤（3）～（5）的培养条件为：温度25±2℃，光照强度1800～2500lx，光照12～15h/d。
8.根据权利要求7所述的一种培养器皿内制备白及假鳞茎的方法，其特征在于：步骤（2）所述的种子萌发培养基是权利要求3所述的种子萌发培养基；步骤（3）所述的假鳞茎诱导培养基是权利要求3所述的假鳞茎诱导培养基；步骤（4）所述的假鳞茎增殖培养基是权利要求3所述的假鳞茎增殖培养基；步骤（5）所述的假鳞茎生根培养基是权利要求3所述的假鳞茎生根培养基。
9.一种培养器皿内制备白及假鳞茎的方法，其特征在于，按以下步骤进行：
（1）以白及茎尖或白及侧芽为外植体，用流水冲洗白及茎尖、白及侧芽，用质量分数为75%的酒精消毒40～60s后，转入质量分数为1%的HgCl2溶液对白及茎尖、白及侧芽进行表面消毒8～12min，用无菌水冲洗3～4次；
（2）在无菌工作条件下，将步骤（1）消毒灭菌后的白及茎尖、白及侧芽接种到权利要求4所述的茎尖、侧芽诱导培养基,培养出再生芽；
（3）将步骤（2）培养的再生芽转接到权利要求4所述的丛芽增殖培养基中培养出丛生芽；
(4) 将步骤（3）培养的丛生芽转接到权利要求4所述的假鳞茎诱导培养基中诱导培养假鳞茎；
（5）将步骤（4）培养的假鳞茎转接到权利要求4所述的假鳞茎增殖培养基中增殖培养；
（6）步骤（5）获得的假鳞茎转接到权利要求4所述的假鳞茎生根培养基中培养，假鳞茎长出根后移出培养器皿进行炼苗；
上述步骤（2）～（6）的培养条件为：温度25±2℃，光照强度1800～2500lx，光照12～15h/d。
10.根据权利要求9所述的一种培养器皿内制备白及假鳞茎的方法，其特征在于：步骤（2）所述的茎尖、侧芽诱导培养基是权利要求6所述的茎尖、侧芽诱导培养基；步骤（3）所述的丛芽增殖培养基是权利要求6所述的丛芽增殖培养基；步骤（4）所述的假鳞茎诱导培养基是权利要求6所述的假鳞茎诱导培养基；步骤（5）所述的假鳞茎增殖培养基是权利要求6所述的假鳞茎增殖培养基；步骤（6）所述的假鳞茎生根培养基是权利要求6所述的假鳞茎生根培养基。
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