CN104255496B - 一种快速繁殖白芨试管苗的方法 - Google Patents

一种快速繁殖白芨试管苗的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN104255496B
CN104255496B CN201410489589.6A CN201410489589A CN104255496B CN 104255496 B CN104255496 B CN 104255496B CN 201410489589 A CN201410489589 A CN 201410489589A CN 104255496 B CN104255496 B CN 104255496B
Authority
CN
China
Prior art keywords
bletilla striata
medium
fast
test
propagation
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201410489589.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN104255496A (zh
Inventor
史俊
席刚俊
徐超
蒋新宇
杨鹤同
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Jiangsu Polytechnic College of Agriculture and Forestry
Original Assignee
Jiangsu Polytechnic College of Agriculture and Forestry
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jiangsu Polytechnic College of Agriculture and Forestry filed Critical Jiangsu Polytechnic College of Agriculture and Forestry
Priority to CN201410489589.6A priority Critical patent/CN104255496B/zh
Publication of CN104255496A publication Critical patent/CN104255496A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN104255496B publication Critical patent/CN104255496B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)

Abstract

本发明公开了一种快速繁殖白芨试管苗的方法，它是将白芨的种子经萌发培养、原球茎分化培养、鳞茎诱导培养和驯化后，得到白芨幼苗的方法。与现有技术相比，本发明方法具有萌发率高、培养时间短、整齐性好和变异率小的优点，具有良好的市场前景。

Description

一种快速繁殖白芨试管苗的方法
技术领域
本发明属于植物栽培技术领域，具体涉及一种快速繁殖白芨试管苗的方法。
背景技术
白芨，(学名：Bletillastriata)又名连及草、甘根、白给、箬兰、朱兰、紫兰、紫蕙、百笠，多年生草本球根植物(块根)，植株高18～60厘米。主要分布在中国、日本以及缅甸北部。主要花期在春季，但依各地气候之不同，晚冬至夏初都可能开花。白芨有广泛的药用价值及园林价值。主要用于收敛止血，消肿生肌。花有紫红、白、蓝、黄和粉等色，可盆栽室内观赏，亦可点缀于较为荫蔽的花台、花境或庭院一角。
白芨喜温暖、阴湿的环境，如野生山谷林下处。稍耐寒，长江中下游地区能露地栽培。耐阴性强，忌强光直射，夏季高温干旱时叶片容易枯黄。宜排水良好含腐殖质多的沙壤土。白芨常生长于较湿润的石壁、苔藓层中，常与灌木相结合，或者生长于林缘、草丛、有山泉的地方，亦生于海拔100～3200米的常绿阔叶林下，栋树林或针叶林下，在北京和天津有栽培。白芨生长的石头均是砂岩类，这样白芨才能吸收到毛管水、从而牢牢地吸在上面。
长期以来，白芨市场主要依靠野生资源。由于用途的广泛、需求量的增加以及价格的高涨，导致资源被掠夺式采挖，加上生态环境的破坏，野生资源日渐枯竭，白芨已成为我国二级保护植物。因此，在快速繁殖白芨方面，有着的良好的市场前景。
发明内容
本发明所要解决的技术问题，是提供一种快速繁殖白芨试管苗的方法。
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：
一种快速繁殖白芨试管苗的方法，它包括以下步骤：
(1)选取白芨人工授粉后120d的塑果，依次用去污剂和水清洗后移入接种室内，在超净工作台上用75v/v％酒精水溶液浸泡45～60s后，放置于氯化汞水溶液中浸泡10～15min，得到白芨无菌塑果；
(2)将步骤(1)中所得的白芨无菌塑果在超净台上用解剖刀剖开，取出种子，接种于液体培养基上，在22～25℃、80～120转/min的条件下，培养45d，过滤得到白芨原球茎；
(3)将步骤(2)中所得的白芨原球茎接种于原球茎分化培养基上，在25～28℃、光照强度1000～1500lux、光照时间11～13h/d的条件下培养75d，得到白芨小苗；
(4)将步骤(3)中所得的白芨小苗接种到鳞茎诱导培养基中，在25～28℃、光照度1000～1500lux、光照时间11～13h/d的条件下培养70d，选取基部形成直径4～7mm鳞茎的白芨；
(5)将步骤(4)中选取的白芨用水清洗后，移置到铺有驯化栽培基质的苗床上，遮阴80％，驯化6个月后，即可进行大田移栽。
其中，步骤(1)中，所述的去污剂为普通家用洗衣液；所述的氯化汞水溶液中，氯化汞的质量分数为0.1％～0.15％。
其中，步骤(2)中，所述的液体培养基为的组分为：N6培养基+萘乙酸0.5～1.0mg/L+蔗糖25～30g/L，pH5.6～5.8。
其中，步骤(2)中的培养条件为：在22～25℃条件下，前7d给予暗培养，之后光照强度为1000～1500lux，光照时间11～13h/d。
其中，步骤(3)中，所述的原球茎分化培养基的组分为：N6培养基+萘乙酸0.5～1.5mg/L+蔗糖25～30g/L+香蕉泥60～80g/L+琼脂4.5～6g/L，pH5.6～5.8。
其中，步骤(4)中，所述的鳞茎诱导培养基的组分为：1/2MS培养基+萘乙酸1～2mg/L+蔗糖25～30g/L+香蕉泥60～80g/L+琼脂4.5～6g/L，pH5.6～5.8；
其中，步骤(5)中，所述的的驯化栽培基质由田园土、泥炭土和蛭石以重量比1：1：0.5组成。
有益效果：与现有技术相比，本发明具有如下优点：
1、白芨塑果消毒后，置于超净工作台上用解剖刀剖开塑果，取出种子，接种到步骤(2)中液体培养基上，采用N6培养基并配以生长素NAA0.5～1.0mg/L，在转速为80～120转/min条件下进行培养，与现有的白芨种子萌发培养基相比，该方法腋芽萌发时间缩短了一倍，且萌发率高(80％以上)，整齐性好，变异率小于1％。
2、步骤(4)所述的鳞茎诱导培养基中，采用1/2MS(大量元素减半)并配以生长素NAA1～2mg/L，与传统的培养技术相比，该方法能更好更快的促进白芨小苗基部膨大，形成鳞茎，70d内即可使白芨组培苗的鳞茎膨大到直径4～7mm。
具体实施方式
根据下述实施例，可以更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实施例所描述的内容仅用于说明本发明，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本发明。
实施例1：一种高效快速繁殖白芨试管苗的方法，该方法包括以下步骤：
(1)9月，剪取白芨人工授粉后120d的塑果，用去污剂清洗10min，再用流水冲洗10min，带入接种室，在超净工作台上用75v/v％酒精浸泡45～60s，再放置于氯化汞水溶液中浸泡；
(2)将步骤(1)得到的白芨无菌塑果在超净工作台上用解剖刀剖开，取出种子，接种于液体培养基上，在22～25℃、120转/min的条件下，培养20d，种子开始萌发，45d后，通过显微镜观察，约85％的种子形成直茎0.7～1mm的原球茎，变异率约为0.8％，滤出原球茎备用；其中，光照条件为：前7d给予暗培养，以后光照度为1000～1500lux、光照时间12h/d；所述的液体培养基组成为：萘乙酸0.5mg/L+蔗糖30g/L+N6培养基+pH5.8；
(3)将步骤(2)得到的白芨原球茎置于原球茎分化培养基中，在25～28℃、光照度1000～1500lux、光照时间12h/d的条件下培养75d，白芨长至5cm高左右；其中，所述的原球茎分化培养基组成为：萘乙酸1.0mg/L+蔗糖30g/L+N6培养基+香蕉泥80g/L+琼脂6g/L+pH5.8；
(4)将步骤(3)中得到的白芨小苗接种到鳞茎诱导培养基中，在25～28℃、光照度1000～1500lux、光照时间12h/d的条件下培养70d，白芨的基部膨大形成鳞茎，经过测量，形成的鳞茎大多直径为4～7mm，平均直径为5.81mm，这时可进行驯化移栽，其中，所述的鳞茎诱导培养基组成为：萘乙酸2mg/L+蔗糖230g/L+香蕉泥80g/L+1/2MS培养基+琼脂6g/L+pH5.8；
(5)将步骤(4)得到的成苗从瓶内取出用清水冲洗去除培养基后，移置铺有驯化栽培基质的苗床上，并遮阴保湿，驯化6个月后，即可进行大田移栽。
实施例2：
与实施例1基本相同，步骤(2)、步骤(3)、步骤(4)中种子萌发，原球茎分化培养、鳞茎诱导培养三个阶段分别以表1所列培养基组合进行筛选，以优选最适培养基组合配方。表1说明如下：
①培养基配方优化主要是设计不同的基础培养基、激素浓度、天然附加物等对培养基进行了优化设计，培养环境为温度25℃、光照度1000～1500lux、光照时间12h/d培养室内。
②针对生产，不同的培养阶段设计了三组培养基配方，种子萌发阶段主要观察种子萌发的快慢、长势、颜色(翠绿为佳)等指标判断配方是否合理；原球茎分化阶段主要观察白芨原球茎的分化率及分化后小苗高度(越高越好)、粗度(越粗越好)、玻璃化程度(越低越好)等指标判断配方是否合理；鳞茎诱导培养阶段，主要通关观察白芨苗基部的膨大程度(越大越好)、玻璃化程度(越低越好)、颜色等指标来判断配方的好坏。通过观察和各项指标的测定，并用“★”和“☆”的多少代表配方的好坏，★越多表示越好，☆比★要低一个等次。
表1培养基配方筛选
试验表明，种子萌发阶段(步骤2)27种配方组合中，基础培养基和激素组合范围为萘乙酸0.5～1.0mg/L+蔗糖25～30g/L+N6培养基，在22～25℃条件下，液体震荡培养(120转/min)时，种子萌发率高、生长快且整齐性好，是较适宜的组合配方组合，培养20d种子开始萌发，45d时，超过80％的种子萌发并形成0.7～1.2mm大小的原球茎；原球茎分化培养阶段(步骤3)36种配方组合中，基础培养基、激素组合范围为萘乙酸1.0～2.0mg/L+香蕉汁60～80g/L+蔗糖25～30g/L+N6培养基+琼脂4.5～6g/L培养基范围内，原球茎分化率高，分化后，苗的生长势良好、生长速度快、玻璃化程度低，75d左右，苗的高度可达5cm左右且较为健壮；鳞茎诱导阶段(步骤4)，结果表明，萘乙酸1.0～3.0mg/L+香蕉汁60～80g/L+蔗糖25～30g/L+1/2MS培养基+琼脂4.5～6g/L为优选培养基配方组合，培养70d后，白芨苗基部膨大，形成4mm～7mm的鳞茎，大大提高了移栽成活率。

Claims (4)

1.一种快速繁殖白芨试管苗的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)选取白芨人工授粉后120d的塑果，依次用去污剂和水清洗后移入接种室内，在超净工作台上用75v/v％酒精水溶液浸泡45～60s后，放置于氯化汞水溶液中浸泡10～15min，得到白芨无菌塑果；
(2)将步骤(1)中所得的白芨无菌塑果在超净台上用解剖刀剖开，取出种子，接种于液体培养基上，在22～25℃、80～120转/min的条件下，培养45d，过滤得到白芨原球茎；
(3)将步骤(2)中所得的白芨原球茎接种于原球茎分化培养基上，在25～28℃、光照强度1000～1500lux、光照时间11～13h/d的条件下培养75d，得到白芨小苗；
(4)将步骤(3)中所得的白芨小苗接种到鳞茎诱导培养基中，在25～28℃、光照度1000～1500lux、光照时间11～13h/d的条件下培养70d，选取基部形成直径4～7mm鳞茎的白芨；
(5)将步骤(4)中选取的白芨用水清洗后，移植到铺有驯化栽培基质的苗床上，遮阴80％，驯化6个月后，进行大田移栽；
步骤(2)中，所述的液体培养基的组分为：N6培养基+萘乙酸0.5～1.0mg/L+蔗糖25～30g/L，pH5.6～5.8；
步骤(3)中，所述的原球茎分化培养基的组分为：N6培养基+萘乙酸1～2mg/L+蔗糖25～30g/L+香蕉泥60～80g/L+琼脂4.5～6g/L，pH5.6～5.8；
步骤(4)中，所述的鳞茎诱导培养基的组分为：1/2MS培养基+萘乙酸1～3mg/L+蔗糖25～30g/L+香蕉泥60～80g/L+琼脂4.5～6g/L，pH5.6～5.8。
2.根据权利要求1所述的快速繁殖白芨试管苗的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的去污剂为普通家用洗衣液；所述的氯化汞水溶液中，氯化汞的质量分数为0.1％～0.15％。
3.根据权利要求1所述的快速繁殖白芨试管苗的方法，其特征在于，步骤(2)中的培养条件为：在22～25℃条件下，前7d给予暗培养，之后光照强度为1000～1500lux，光照时间11～13h/d。
4.根据权利要求1所述的快速繁殖白芨试管苗的方法，其特征在于，步骤(5)中，所述的的驯化栽培基质由田园土、泥炭土和蛭石以重量比1：1：0.5组成。
CN201410489589.6A 2014-09-23 2014-09-23 一种快速繁殖白芨试管苗的方法 Active CN104255496B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410489589.6A CN104255496B (zh) 2014-09-23 2014-09-23 一种快速繁殖白芨试管苗的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410489589.6A CN104255496B (zh) 2014-09-23 2014-09-23 一种快速繁殖白芨试管苗的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN104255496A CN104255496A (zh) 2015-01-07
CN104255496B true CN104255496B (zh) 2016-03-16

Family

ID=52147184

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201410489589.6A Active CN104255496B (zh) 2014-09-23 2014-09-23 一种快速繁殖白芨试管苗的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN104255496B (zh)

Families Citing this family (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104770293A (zh) * 2015-04-01 2015-07-15 张子国 白芨开放式组培育苗方法
CN104782485A (zh) * 2015-04-08 2015-07-22 安徽春之蔚农业科技有限公司 一种白芨的种子组织快繁育苗方法
CN104920208B (zh) * 2015-05-15 2017-07-21 浙江虹越花卉股份有限公司 一种白芨组培快繁培养基
CN104904597A (zh) * 2015-05-28 2015-09-16 云南省农业科学院农业环境资源研究所 一种白及的快速繁殖及阳光壮苗方法
CN105075858B (zh) * 2015-05-29 2017-12-26 浙江中医药大学 一种白及种子的液体快速繁殖方法
CN104871977B (zh) * 2015-05-29 2017-06-16 江苏农林职业技术学院 一种白芨组织培养基及其制备方法
CN104957019B (zh) * 2015-07-29 2018-02-27 四川农业大学 白芨组培苗营养液及壮苗方法
CN105145352B (zh) * 2015-08-03 2017-06-06 河南科技大学 一种白芨种苗高效组培快繁技术
CN105123529A (zh) * 2015-09-22 2015-12-09 宜昌市农业科学研究院 白芨快繁和高效栽培方法
CN105815222B (zh) * 2016-04-15 2019-06-07 成都大学 一种以白及根状茎为外植体的白及植株快速繁殖方法
CN106106155B (zh) * 2016-06-28 2017-11-28 汉中市农业科学研究所（陕西省水稻研究所） 一种利用组培技术诱导微鳞茎繁育白芨种苗的方法
CN106258903A (zh) * 2016-08-29 2017-01-04 浙江金石生物科技有限公司 一种规模化生产白芨种苗的方法
CN106416972A (zh) * 2016-08-29 2017-02-22 浙江金石生物科技有限公司 一种快速培养白芨种苗的方法
CN106416690A (zh) * 2016-09-19 2017-02-22 湖南新杰农业开发有限公司 一种提高白芨幼苗成活率的方法
CN107646591A (zh) * 2017-09-30 2018-02-02 江苏农林职业技术学院 一种白芨直播育苗基质及采用该基质进行培育的方法
CN108064646A (zh) * 2017-12-06 2018-05-25 昆明学院 一种细胞分裂素促发白芨种球繁殖的方法
CN109511549B (zh) * 2018-11-25 2021-03-16 福建省亚热带植物研究所 一种在白芨种子培养过程中抑制原球茎分化及逆转的方法
CN110447539B (zh) * 2019-09-10 2023-03-28 普安县欣新生物科技有限责任公司 一种紫花白及种苗的组培方法
CN111990254A (zh) * 2020-08-31 2020-11-27 南京农业大学 一种石斛培养基及其应用

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102246695A (zh) * 2011-05-10 2011-11-23 云南植物药业有限公司 一种培养器皿内制备白及假鳞茎的方法及其专用培养基
CN102283115A (zh) * 2011-06-28 2011-12-21 陕西科技大学 一种快速繁殖白芨苗的方法
CN103314855A (zh) * 2013-07-08 2013-09-25 重庆市秀山红星中药材开发有限公司 白芨的种子组培繁殖方法
CN103583365A (zh) * 2013-11-19 2014-02-19 贵州省生物技术研究所 白芨种茎的生产方法
CN103814821A (zh) * 2014-01-03 2014-05-28 中华全国供销合作总社南京野生植物综合利用研究所 一种高效快速生产白芨种苗的方法

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101153436B1 (ko) * 2010-03-24 2012-06-05 경희대학교 산학협력단 가미계격탕 추출물을 포함하는 혈구감소증 예방 또는 치료용 조성물

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102246695A (zh) * 2011-05-10 2011-11-23 云南植物药业有限公司 一种培养器皿内制备白及假鳞茎的方法及其专用培养基
CN102283115A (zh) * 2011-06-28 2011-12-21 陕西科技大学 一种快速繁殖白芨苗的方法
CN103314855A (zh) * 2013-07-08 2013-09-25 重庆市秀山红星中药材开发有限公司 白芨的种子组培繁殖方法
CN103583365A (zh) * 2013-11-19 2014-02-19 贵州省生物技术研究所 白芨种茎的生产方法
CN103814821A (zh) * 2014-01-03 2014-05-28 中华全国供销合作总社南京野生植物综合利用研究所 一种高效快速生产白芨种苗的方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
利用组织培养法繁殖白芨;杨俊慧等;《山东科学》;20020330;第15卷(第1期);第13-16页。 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN104255496A (zh) 2015-01-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104255496B (zh) 一种快速繁殖白芨试管苗的方法
CN101036446B (zh) 石榴快速繁殖方法
CN103598023A (zh) 利用无刺野蔷薇无根嫁接快速繁殖月季或玫瑰的方法
CN103636502B (zh) 一种促进兰州百合组培鳞茎膨大发育的方法
CN103190343B (zh) 一种有机添加物对金线莲产业化快速繁殖关键技术
CN102763599B (zh) 桃儿七组培苗炼苗及移栽驯化的方法
CN104904597A (zh) 一种白及的快速繁殖及阳光壮苗方法
CN104641827A (zh) 一种地被菊的扦插繁殖技术
CN103004604B (zh) 一种万代兰品种的繁育方法
CN104396673A (zh) 一种金叶榆乔木的快繁、速生方法
CN109349105A (zh) 一种蝴蝶兰组培苗繁育方法
CN104145814A (zh) 一种高盆樱桃（原变种）茎段组织培养获得再生植株的方法
CN106069106B (zh) 一种百子莲促芽分株的繁殖方法
CN102845238A (zh) 一种英红九号胚芽砧嫁接繁殖方法
CN102907325B (zh) 利用薄片培养技术生产所罗门姜黄和红艳郁金花卉苗的方法
CN105660391A (zh) 一种苹果树苗组织培养繁育方法
CN105532398B (zh) 一种玉簪组培苗轻基质可降解无纺布瓶外生根育苗法
CN104303993A (zh) 一种尾巨桉无性系dh33-27品种的选育方法
CN103858763B (zh) 一种大岩桐组培繁殖和块茎保存及其再繁殖的方法
CN102884980B (zh) 巨瓣兜兰组培快繁方法
CN103444529B (zh) 一种鄂西红豆树植株再生及大量繁殖方法
CN104067943A (zh) 蝴蝶兰无菌根扩繁的方法
CN103931499A (zh) 一种红千层的组织培养快速繁殖方法
CN108307825A (zh) 四照花属植物扦插快繁的方法
CN105993565A (zh) 金叶欧洲山梅花扦插繁殖方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant