CN106258903A - 一种规模化生产白芨种苗的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种规模化生产白芨种苗的方法，它是将白芨的种子经萌发培养、原球茎增值培养、丛芽诱导和增值培养、生根培养和驯化后，得到白芨幼苗的方法。与现有技术相比，本发明方法具有萌发率高、培养时间短、整齐性好和变异率小的优点，具有良好的市场前景。

Description

一种规模化生产白芨种苗的方法
技术领域
本发明属于植物栽培技术领域，具体涉及一种规模化生产白芨种苗的方法。
背景技术
白芨为兰科草本球根植物，又名紫兰、连及草、甘根、白给，植株高18-60厘米。白芨的初生假鳞茎是圆球形，生长到一定程度才形成V字形块状假鳞茎。叶4-6枚，狭长圆形或披针形，长8-29厘米，宽1.5-4厘米，先端渐尖，基部收狭成鞘并抱茎。白芨喜凉爽气候及腐殖质丰富而排水良好的砂壤土，半阳地也可栽培，但干旱、高温，会使叶片枯萎黄。3月下旬萌芽，霜后地上枝叶枯萎，白芨的花粉呈块状不易散开，所以在授粉上也不是很有利。白芨的种子极细小，似粉末，状没有胚乳，只有几个细胞构成的发育不完全的胚，种子萌发率极低，且自然繁殖困难，所以野生资源较稀少，是我国的一种珍稀濒危的保护植物。
白芨属有九个种类，产于中国的就有四种，白芨在我国长江流域及以南地区均有分布，生长区域较广。由于多年的掠夺式采挖，加上生境日恶化，使得野生白芨的数量急剧减少，濒临灭绝边缘。
白芨的主要化学成分是联苄类、菲类及其衍生物，此外，还含有少量挥发油，粘液质，白及甘露聚糖以及淀粉(30.5％)，葡萄糖(1.5％)等。最近几年，对白及的化学成分研究主要集中在联苄类、二氢菲类和联菲类化合物上，并从中分离鉴定出一系列新的联苄、二氢菲和联菲化合物。
白芨具有收敛止血、清热解毒、消肿生肌之功效。随着我国中医药事业的发展，白芨在临床上的应用范围不断扩大，白芨的用药需求急剧增加。但白芨种子在自然条件下很难萌发和生长，实生苗的栽培较为困难，仅靠分株繁殖，周期长，繁殖效率低，而且耗种量大，很难满足大量栽培的需要。白芨正面临着资源难以满足市场的严峻现实。
发明内容
本发明所要解决的技术问题，是提供一种规模化生产白芨种苗的方法。
为解决上述技术问题，本发明选取白芨种子为原料，采用MS基质或1/2MS基质培养方法进行悬浮播种的方式，促进白芨种子的萌发和生根，具体的技术方案如下：
一种规模化生产白芨种苗的方法，它包括以下步骤：
(1)白芨蒴果用清水洗净，去污剂溶液浸泡10min，再用清水冲刷洗净，在超净工作台上采用75％乙醇消毒30s，再用氯化汞溶液消毒10～15min，用无菌水冲洗3～4次，得到白芨无菌塑果。
(2)步骤(1)所得的白芨无菌塑果在超净台上用解剖刀剖开，取出种子，接种于液体培养基上，在22～25℃、80～120转/min的条件下，培养20d，过滤得到白芨原球茎；将步骤所得的白芨原球茎接种于原球茎增值培养基上，在25～28℃、光照强度1000～4000lux、光照时间11～14h/d的条件下，7d后得到大量的白芨原球茎；
(3)将步骤(2)中所得白芨原球茎接种到丛芽诱导及增值培养基中，在25～28℃、光照强度1000～4000lux、光照时间11～14h/d的条件下培养60d繁殖出大量的5cm高白芨小苗；
(4)将步骤(3)中所得的白芨小苗接种到生根壮苗培养基中，在25～28℃、光照度1000～4000lux、光照时间11～14h/d的条件下培养60d，选取基部形成直径4～7mm的白芨；
(5)将步骤(4)中选取的白芨用水清洗后，移置到铺有驯化栽培基质的苗床上，遮阴80％，驯化6个月后，所得白芨种苗即可进行大田移栽。
其中，步骤(1)中，所述的去污剂为普通家用洗衣液或洗衣粉；所述的氯化汞水溶液中，氯化汞的质量分数为0.1％～0.15％。
其中，步骤(2)中，液体培养基为的组分为：1/2 MS+1.0mg/L 6-BA(或称“6-苄基氨基嘌呤”，是一种“细胞分裂素”)+6.8-7.5g/L琼脂，Ph 5.6-5.8；原球茎增值培养基的组分为：MS+0.1mg/L NAA(或称萘乙酸)+1.0mg/L 6-BA+7.5％wt香蕉汁+6.8-7.5g/L琼脂，Ph5.6-5.8，光照强度优选1500-2500lux，特别优选2000lux，光照时间优选11-12h/d。
其中，步骤(2)中在获得白芨原球茎前的培养条件为：在22～25℃条件下，前7d给予暗培养，之后光照强度为1000～4000lux，优选1500-2500lux，特别优选2000lux，光照时间11～14h/d，优选11-12h/d。
其中，步骤(3)中，所述的丛芽诱导及增值培养基的组分为：MS+0.1mg/L NAA+1.0mg/L6-BA+6.8-7.5g/L琼脂，Ph 5.6-5.8，光照强度优选1500-2500lux，特别优选2000lux，光照时间优选11-12h/d。
其中，步骤(4)中，所述的生根壮苗培养基的组分为：1/2MS培养基+1.0mg/L NAA+7.5％wt香蕉汁+6.8～7.5g/L琼脂，pH 5.6～5.8，光照强度优选1500-2500lux，特别优选2000lux，光照时间优选11-12h/d；
其中，步骤(5)中，所述的驯化栽培基质由田园土、泥炭土和蛭石以重量比1∶1∶0.5组成。
有益效果：与现有技术相比，本发明具有如下优点：
1、白芨塑果消毒后，置于超净工作台上用解剖刀剖开塑果，取出种子，接种到步骤(2)中液体培养基上，采用1/2MS基本培养基并配以生长素6-BA 1.0mg/L，在转速为80～120转/min条件下，先暗培养，再光照进行培养，与现有的白芨种子萌发培养基相比，接种速度提高了2-3倍，且萌发率高(85％以上)，整齐性好，变异率小于0.8％。
2、步骤(2)采用原球茎增值培养基，迅速培育得到大量原球茎，然后步骤(3)中采用丛芽增值培养基接种，更好更快的获得白芨小苗，与传统方法相比，缩短了周期，更利于规模化的生长运用。
3、步骤(4)所述的生根壮苗培养基中，采用1/2MS(大量元素减半)并配以生长素NAA1.0mg/L以及7.5％香蕉汁，与传统的培养技术相比，该方法能更好更快的促进白芨小苗基部膨大，60d内即可使白芨组培苗的根茎膨大到直径4～7mm，生根率达90％。
具体实施方式
根据下述实施例，可以更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实施例所描述的内容仅用于说明本发明，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本发明。
实施例1：一种规模化生产白芨种苗的方法，该方法包括以下步骤：
(1)9月，剪取白芨人工授粉后120d的塑果，用去污剂清洗10min，再用流水冲洗10min，带入接种室，在超净工作台上用75v/v％酒精浸泡45～60s，再放置于0.1％的氯化汞水溶液中浸泡；
(2)将步骤(1)得到的白芨无菌塑果在超净工作台上用解剖刀剖开，取出种子，接种于液体培养基上，在22℃、120转/min的条件下，培养15d，种子开始萌发，5d后，通过显微镜观察，约60％的种子形成直茎0.5～0.7mm的原球茎，变异率约为0.75％，滤出原球茎备用；其中，光照条件为：前7d给予暗培养，以后光照度为1500lux、光照时间12h/d；所述的液体培养基组成为：1/2 MS+1.0mg/L 6-BA+6.8 g/L琼脂，Ph 5.6；
将上述所得的白芨原球茎接种于原球茎增值培养基上，在25℃、光照强度2000lux、光照时间12h/d的条件下，7d后，得到大量的直茎0.7～1mm的原球茎，变异率约为0.6％；所述原球茎增值培养基的组分为：MS+0.1mg/L NAA+1.0mg/L 6-BA+7.5％wt香蕉汁+6.8g/L琼脂，Ph 5.6。
(3)将步骤(2)得到的白芨原球茎置于丛芽诱导及增值培养基中，在25℃、光照强度2000lux、光照时间12h/d的条件下培养60d繁殖出大量的5cm高白芨小苗；其中，所述的丛芽诱导及增值培养基的组分为：MS+0.1mg/L NAA+1.0mg/L 6-BA+6.8g/L琼脂，Ph 5.6；
(4)将步骤(3)中得到的白芨小苗接种到生根壮苗培养基中，在25℃、光照度2000lux、光照时间12h/d的条件下培养60d，白芨的基部膨大到直径为4～7mm，平均直径为5.88mm，生根率大90％，这时可进行驯化移栽，其中，所述的生根壮苗培养基的组分为：1/2MS培养基+1.0mg/L NAA+7.5％wt香蕉汁+6.8g/L琼脂，pH 5.6；
(5)将步骤(4)得到的成苗从瓶内取出用清水冲洗去除培养基后，移置铺有驯化栽培基质的苗床上，并遮阴保湿，驯化6个月后，所得白芨种苗即可进行大田移栽。
实施例2：
(1)9月，剪取白芨人工授粉后120d的塑果，用去污剂清洗10min，再用流水冲洗10min，带入接种室，在超净工作台上用75v/v％酒精浸泡45～60s，再放置于0.15％的氯化汞水溶液中浸泡；
(2)将步骤(1)得到的白芨无菌塑果在超净工作台上用解剖刀剖开，取出种子，接种于液体培养基上，在25℃、120转/min的条件下，培养15d，种子开始萌发，5d后，通过显微镜观察，约60％的种子形成直茎0.5～0.7mm的原球茎，变异率约为0.75％，滤出原球茎备用；其中，光照条件为：前7d给予暗培养，以后光照度为3000lux、光照时间11h/d；所述的液体培养基组成为：1/2 MS+1.0mg/L 6-BA+7.5g/L琼脂，Ph 5.8；
将上述所得的白芨原球茎接种于原球茎增值培养基上，在28℃、光照强度4000lux、光照时间11h/d的条件下，7d后，得到大量的直茎0.7～1mm的原球茎，变异率约为0.6％；所述原球茎增值培养基的组分为：MS+0.1mg/L NAA+1.0mg/L 6-BA+7.5％wt香蕉汁+7.5g/L琼脂，Ph 5.8。
(3)将步骤(2)得到的白芨原球茎置于丛芽诱导及增值培养基中，在28℃、光照强度4000lux、光照时间11h/d的条件下培养60d繁殖出大量的5cm高白芨小苗；其中，所述的丛芽诱导及增值培养基的组分为：MS+0.1mg/L NAA+1.0mg/L 6-BA+7.5g/L琼脂，Ph 5.8；
(4)将步骤(3)中得到的白芨小苗接种到生根壮苗培养基中，在28℃、光照度4000lux、光照时间11h/d的条件下培养60d，白芨的基部膨大到直径为4～7mm，平均直径为5.82mm，生根率大88％，这时可进行驯化移栽，其中，所述的生根壮苗培养基的组分为：1/2MS培养基+1.0mg/L NAA+7.5％wt香蕉汁+7.5g/L琼脂，pH 5.8；
(5)将步骤(4)得到的成苗从瓶内取出用清水冲洗去除培养基后，移置铺有驯化栽培基质的苗床上，并遮阴保湿，驯化6个月后，所得白芨种苗即可进行大田移栽。
通过实施例，表面本发明在白芨种子萌发、接种、增值、生根阶段使用不同的培养基，取得了良好的效果，适用于白芨种苗规模生产的推广应用。

Claims (7)

1.一种规模化生产白芨种苗的方法，它包括以下步骤：
(1)白芨蒴果用清水洗净，去污剂溶液浸泡10min，再用清水冲刷洗净，在超净工作台上采用75％乙醇消毒30s，再用氯化汞消毒10～15min，用无菌水冲洗3～4次，得到白芨无菌塑果。
(2)步骤(1)所得的白芨无菌塑果在超净台上用解剖刀剖开，取出种子，接种于液体培养基上，在22～25℃、80～120转/min的条件下，培养20d，过滤得到白芨原球茎；将步骤所得的白芨原球茎接种于原球茎增值培养基上，在25～28℃、光照强度1000～4000lux、光照时间11～14h/d的条件下，7d后得到大量的白芨原球茎；
(3)将步骤(2)中所得白芨原球茎接种到丛芽诱导及增值培养基中，在25～28℃、光照强度1000～4000lux、光照时间11～14h/d的条件下培养60d繁殖出大量的5cm高白芨小苗；
(4)将步骤(3)中所得的白芨小苗接种到生根壮苗培养基中，在25～28℃、光照度1000～4000lux、光照时间11～13h/d的条件下培养60d，选取基部形成直径4～7mm的白芨；
(5)将步骤(4)中选取的白芨用水清洗后，移置到铺有驯化栽培基质的苗床上，遮阴80％，驯化6个月后，所得白芨种苗即可进行大田移栽。
2.根据权利要求1所述的规模化生产白芨种苗的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的去污剂为普通家用洗衣液；所述的氯化汞水溶液中，氯化汞的质量分数为0.1％～0.15％。
3.根据权利要求1所述的规模化生产白芨种苗的方法，其特征在于，步骤(2)中，液体培养基为的组分为：1/2 MS+1.0mg/L 6-BA+6.8-7.5g/L琼脂粉，Ph 5.6-5.8；原球茎增值培养基的组分为：MS+0.1mg/L NAA+1.0mg/L 6-BA+7.5％wt香蕉汁+6.8-7.5g/L琼脂，Ph5.6-5.8。
4.根据权利要求1所述的规模化生产白芨种苗的方法，其特征在于，步骤(2)中在获得白芨原球茎前的培养条件为：在22～25℃条件下，前7d给予暗培养，之后光照强度为1000～4000lux，光照时间11～14h/d。
5.根据权利要求1所述的规模化生产白芨种苗的方法，其特征在于，步骤(3)中，所述的丛芽诱导及增值培养基的组分为：MS+0.1mg/L NAA+1.0mg/L 6-BA+6.8-7.5g/L琼脂，Ph5.6-5.8。
6.根据权利要求1所述的规模化生产白芨种苗的方法，其特征在于，步骤(4)中，所述的生根壮苗培养基的组分为：1/2MS培养基+1.0mg/L NAA+7.5％wt香蕉汁+6.8～7.5g/L琼脂，pH 5.6～5.8。
7.根据权利要求1所述的规模化生产白芨种苗的方法，其特征在于，步骤(5)中，所述的驯化栽培基质由田园土、泥炭土和蛭石以重量比1∶1∶0.5组成。
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106857250A (zh) * 2017-01-22 2017-06-20 安徽振扬农林生态开发有限公司 一种促进白芨种子萌发的方法
CN106879471A (zh) * 2017-04-10 2017-06-23 云南天泉生物科技股份有限公司 一种改良的白及组培苗生产方法
CN106900560A (zh) * 2017-04-10 2017-06-30 云南天泉生物科技股份有限公司 一组改良的白及组培培养基

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103168590A (zh) * 2013-03-15 2013-06-26 浙江中医药大学 一种白及种子的繁殖方法
CN104255496A (zh) * 2014-09-23 2015-01-07 江苏农林职业技术学院 一种快速繁殖白芨试管苗的方法
CN104719152A (zh) * 2015-02-16 2015-06-24 贵州省农作物品种资源研究所 白及工厂化育苗方法
CN104782485A (zh) * 2015-04-08 2015-07-22 安徽春之蔚农业科技有限公司 一种白芨的种子组织快繁育苗方法
CN104885936A (zh) * 2015-05-12 2015-09-09 陕西理工学院 基于种子液体培养的快速繁殖白及种苗的方法
KR20150103879A (ko) * 2014-03-04 2015-09-14 고려대학교 산학협력단 난 유묘의 생산방법

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103168590A (zh) * 2013-03-15 2013-06-26 浙江中医药大学 一种白及种子的繁殖方法
KR20150103879A (ko) * 2014-03-04 2015-09-14 고려대학교 산학협력단 난 유묘의 생산방법
CN104255496A (zh) * 2014-09-23 2015-01-07 江苏农林职业技术学院 一种快速繁殖白芨试管苗的方法
CN104719152A (zh) * 2015-02-16 2015-06-24 贵州省农作物品种资源研究所 白及工厂化育苗方法
CN104782485A (zh) * 2015-04-08 2015-07-22 安徽春之蔚农业科技有限公司 一种白芨的种子组织快繁育苗方法
CN104885936A (zh) * 2015-05-12 2015-09-09 陕西理工学院 基于种子液体培养的快速繁殖白及种苗的方法

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106857250A (zh) * 2017-01-22 2017-06-20 安徽振扬农林生态开发有限公司 一种促进白芨种子萌发的方法
CN106879471A (zh) * 2017-04-10 2017-06-23 云南天泉生物科技股份有限公司 一种改良的白及组培苗生产方法
CN106900560A (zh) * 2017-04-10 2017-06-30 云南天泉生物科技股份有限公司 一组改良的白及组培培养基

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