CN102227222A - 抗肿瘤药物,生产该药物的方法和稳定该药物的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及药物，特别是基于铂化合物水溶液的抗肿瘤药物，涉及生产上述药物的方法及稳定该药物的方法。稳定基于铂化合物水溶液的抗肿瘤药物的方法，是通过使用氟尿嘧啶碱和尿素及一种低质子浓度溶液混合物来实现。

Description

抗肿瘤药物,生产该药物的方法和稳定该药物的方法
本发明涉及药物，即涉及基于铂化合物水溶液的抗肿瘤药物，该药物可以用于恶性肿瘤治疗，同时涉及它们的生产和稳定的方法。
在医学实践中被广泛应用的抗肿瘤药物中，一种最有效的药物是基于顺铂单体复合物的水溶液。铂离子在这些药物中作为活性剂起作用，与这样的配体-载体配位，其被肿瘤细胞吸收，实际上也几乎以同样的强度被正常细胞吸收。那就是为什么含有顺铂的药物不仅特征在于具有高抗肿瘤活性，还在于具有高毒性。
不是具有较少活性，但具有更少毒性的抗肿瘤药物是基于一种铂和脱氧核糖核酸(Pt-DNA)聚合复合物的水溶液，代表一种顺铂和DNA反应的产物，在此情况下其中一个铂离子的配体-载体是构建DNA高分子的双丝状螺旋结构的核苷酸，只有被快速增殖的肿瘤细胞充分吸收，从而含有Pt-DNA结合体的抗肿瘤药物高选择性地影响肿瘤组织，而对正常组织产生低微的损伤(腹腔内器官不可切除肿瘤的治疗.S.A.Shalimov，etc.1998，p.103)。
顺铂单体复合物和Pt-DNA聚合复合物，作为药物中的基本物质，可溶性不够而且在水中化学上不稳定。因此，药物添加剂被加入基于它们水溶液的药物中。作为添加剂人们使用药理学上可接受的盐类，pH-调节剂和其它稳定剂，优选的是那些以它们自身的生物学活性为代价同时显示出提高基本物质的可溶性和化学稳定性的能力，允许在更好的可耐受性下提供治疗的有效性。
一种已知的抗肿瘤药物是根据铂衍生物和原位脱氧核糖核酸的聚阴离子(Pt-DNA)(活性物质)的水溶液，其包含最大测量时大小为0.05-0.15微米的Pt-DNA非缔合的高分子，氯化钠，柠檬酸钠，氯化铵和钠盐形式的氟尿嘧啶(辅助性物质)，在水溶液中各成分的重量％为：
Figure BPA00001374745700011
Figure BPA00001374745700021
[见乌克兰专利号70456中的专利声明，公开于2004年10月15日，申请人为Shalimov S.O.，Voltchenskova I.I.，Maidanevitch N.M.].
研究者们已经显示，一种已知药物的水溶液具有6.5-7.5的pH和1.0012-1.0016g/sm3的密度，在此Pt-DNA化合物的非缔合分子具有最高的抗肿瘤活性，以及如果被接收物质被存放在高于35℃的温度范围，氟尿嘧啶具有加强这种活性和减少铂衍生物毒性的能力。降低温度能促进Pt-DNA分子碱进入协同特性的分子内相互作用，比与钠盐形式的氟尿嘧啶的相关阴离子的分子间的相互作用更充分。因而Pt-DNA分子的空间结构不可逆地被缩合。分子内结构缩合，其包含密度为21.45g/sm3的非常小的铂原子，导致Pt-DNA空间结构减小到如此的大小以致它们的流体密度超过溶液密度，在重力下凝结成一种疏松的沉积物形式。
所以氟尿嘧啶阴离子，和Pt-DNA碱相比，更倾向于与溶液中的质子相互作用，从而进入一种它们自身的中性分子的状态，其溶解性在水中是有限的，其以结晶形式沉淀，并随温度提高而溶解。活性的和辅助性物质的沉淀引起它们在介质溶液中浓度的减少，从而减小它们的抗肿瘤活性和治疗强度，限制了它们只能在局部应用和腹腔内输注，排除了静脉内、动脉内注射和一种间隙内方法的施用。
氟尿嘧啶碱已知被用来作为替加氟(有机体中的氟尿嘧啶前体)的结构片段，用于含有以1∶4摩尔比的替加氟和尿嘧啶的抗肿瘤混合物的制备[美国专利5534513，IPC 7 A61K 31/505，申请人TAIHO PHARMACEUTICAL_COLTD(JP)，公布于1996-07-09]。
尿素已知被用来作为利尿剂，溶角蛋白剂，减少脑内和眼球内压力的药物[M.M.Turkevich.Pharmaceutical chemistry，1973，p.45]，也作为赋形剂，加入到经口施用的固体剂型中。
已知使用高浓度尿素和提高pH值超过11来解开天然双链DNA的缩合链[A.Lenindzher.Biochemistry，1976，p.737]。
已知氢氧化钠用于制药来控制治疗药物溶液的pH值。此外，已知在高浓度尿素和pH＞11.0的影响下，天然DNA的缩合双链解开[Lenindzher.Biochemistry，1976，p.737]。
然而，在指定来源内，没有报导过关于尿嘧啶、尿素和氢氧化钠作为药物防止DNA金属化合物的缩合链的分子内缩合的应用。也未知关于尿素在肠胃外给药的药物剂型中的应用。活性物质、氟尿嘧啶和盐类在要求保护的药物水溶液中的有效的浓度范围和比例，与开发经腹腔内、静脉内和动脉内注射并被保持在35-40℃的公知药物指定的比例相符合。尿嘧啶和尿素浓度范围由氟尿嘧啶、尿嘧啶和尿素的1∶1∶1的摩尔比来确定。氢氧化钠浓度范围被限定在pH值下限以排除氟尿嘧啶质子化的可能性，和上限-以符合制药要求。
还有另一种已知方法来获得抗肿瘤药物，通过把DNA纤维在含有氯化钠和柠檬酸钠的柠檬酸-盐溶液中保存16-26小时，用机械搅拌溶解纤维和加热DNA溶液至70-90℃，逐步引入被加热至与DNA加热溶液相同温度的顺-二氯二氨络铂(DDP)的柠檬酸盐溶液，在混合物中添加氟尿嘧啶钠盐的水溶液及在70-90℃恒温控制DNA和DDP溶液混合物15-20分钟[见乌克兰专利号70456的专利声明，公开于2004年10月15日，申请人Shalimov S.O.，Voltchenskova I.I.，Maidanevitch N.M.]。
恒温控制前在DNA和DDP溶液的混合物中添加氟尿嘧啶钠盐的水溶液不促进强化Pt-DNA分子与溶液中相关分子的分子间相互作用和弱化它们中协同特性的分子内相互作用，也不排除在温度低于35℃时氟尿嘧啶阴离子和溶液质子相互作用的可能性。这就是公知方法如何既不防止Pt-DNA空间结构的不可逆的分子内缩合，又不干扰氟尿嘧啶阴离子在药物溶液中的质子化。为了避免这些现象，有必要运用附加的技术操作引入一些成分的药物溶液，这些成分能在恒温控制前提升它的pH和密度。此外，只有在温度为35-37℃时有可能使用通过从公知方法获得的抗肿瘤药物，因为温度降低会降低药物的活性。另外高温会使药物的储藏、运输和使用复杂化。
有一种已知方法用以稳定一种抗肿瘤药物，其基于顺铂浓度为0.1-1.0mg/ml的水溶液，在其水溶液中人们使用1-20mg/ml的氯化钠，pH值在2.0-3.0的盐酸和2-150mg/ml的甘露醇(利尿剂)[USSR专利号1192596A，在1985年11月15日公开]。
有已知的Pt-DNA化合物水溶液，它是通过使用氯化钠和柠檬酸钠(抗血液凝固剂)来稳定，它们的量对应于铂、DNA磷、氯化钠和柠檬酸钠的摩尔比为4∶6∶30∶3[乌克兰专利60597.公开于15.07.05；61543，公开于15.08.05；66476 A，公开于17.05.04]。
然而，以Pt-DNA的水溶液(衍生物)为基础的最有效的和具最低毒性的抗肿瘤药物是被上述乌克兰专利70456中所描述的化合物(衍生物)。氯化钠，柠檬酸钠，氯化铵(一种引起咳痰作用和利尿增强作用的药物)和另外的稳定剂-氟尿嘧啶钠盐，在水溶液中以上述成分的指定比例用来稳定药物。
氟尿嘧啶钠盐有强化基本物质抗肿瘤和减弱它们毒性的作用，这是因为它既能够用作生物体中Pt-DNA高分子药理学作用的调节剂，又能用作药物水溶液中Pt-DNA高分子浓度的稳定剂。
然而，Pt-DNA化合物水溶液在已知药物中具有6.5-7.5的pH值，在此范围值使用氟尿嘧啶钠盐允许Pt-DNA溶液中的浓度在温度高于35℃时得以稳定。温度的降低促进Pt-DNA化合物高分子从在疏松沉淀物形式的溶液的外流，氟尿嘧啶碱结晶形式的氟尿嘧啶钠盐引起在药物的剂量形式的溶液中基本物质和稳定剂浓度的减少，从而负面影响它们的抗肿瘤活性和治疗效果。此外，除了它限制它们储藏条件和在局部和腹腔内注射的应用可能性，还排除了静脉内和动脉内注射，内淋巴管注射和间隙内施用的途径。
没有信息关于使用氟尿嘧啶、尿嘧啶和尿素碱的自身活化方式或它们相互间的混合物，或使用pH调节剂作为药物来干扰溶液中金属和DNA高分子化合物的分配。也没有信息关于尿素在肠胃外施用的剂量药物形式的应用。
通过要求保护的方法稳定的水溶液中基本物质的有效浓度范围和比例对应于已知方法发展中发现的浓度和比例，该浓度和比例获得Pt-DNA化合物在腹腔内、静脉内和动脉内注射的水溶液中，具有6.5-7.5的pH值并被保存在35-40℃的温度下。氟尿嘧啶、尿嘧啶和尿素碱的浓度范围由Pt-DNA核苷酸、氟尿嘧啶、尿嘧啶和尿素碱的1∶(6-12)∶(0.6-1.2)∶(0.6-1.2)的摩尔比来确定。pH调节剂的浓度范围被限定在pH值下限以排除氟尿嘧啶质子化的可能性，和上限-以符合制药要求。
给出的稳定方法不允许Pt-DNA和氟尿嘧啶碱高分子从溶液中外流，而该方法提供了一种可能性来获得具有这样的成分浓度的抗肿瘤药物，以致于在长时间的25-5℃储存间隔内使其在治疗温度下的剂量药物形式不改变。
基于上述的方法，很多特定范围内的问题都可用本发明来解决。
其中一个问题在于制备抗肿瘤药物，其中通过在一种已知药物中添加尿嘧啶、尿素和氢氧化钠，我们将获得一种可能性来防止基本物质的分子内缩合和辅助性物质的质子化，由此避免它们的沉降和它们在温度为25-15℃范围内溶液中的浓度减少，达到增加药物抗肿瘤活性和治疗效果和扩展它们的应用。
第二个问题在于在研制获取一种抗肿瘤药物方法，其中通过在相应的技术条件下使用尿嘧啶、尿素和氢氧化钠水溶液，一方面，我们将达到在Pt-DNA分子中协同特征的分子内相互作用的强度弱化。另一方面，我们能提高它们的碱与溶液中有关分子，即与氟尿嘧啶、尿嘧啶和尿素相互作用的强度，这样给予了制造一种含有Pt-DNA活性物质的药物的可能性，其中在温度范围为25-15℃用随时可用的药物治疗时该活性物质分子不缩合，反过来，防止溶液中高分子的沉淀。
第三个问题在于寻找稳定一种基于铂化合物水溶液的抗肿瘤药物的方法，该药物具有增加了的特定作用的鉴别和增强了的治疗效果。
已提出的问题可用被给出的本发明来解决。
第一个问题的解决是通过基于一种铂衍生物和原位脱氧核糖核酸的聚阴离子(Pt-DNA)的水溶液的抗肿瘤药物，它包括在最大测量时大小为0.05-0.15微米非缔合的Pt-DNA高分子，氯化钠，柠檬酸钠，氯化铵和钠盐形式的氟尿嘧啶，根据本发明，另外包含尿嘧啶和尿素使氟尿嘧啶、尿嘧啶和尿素摩尔比为1∶1∶1，在水溶液中各成分比例按重量％计为：
Figure BPA00001374745700061
同时溶液密度为1.0054-1.0058g/cm3。
第二个问题的解决是通过获得一种抗肿瘤药物的方法，该方法是通过把DNA纤维在含有氯化钠和柠檬酸钠的柠檬酸-盐溶液中保持16-26小时，在机械搅拌下溶解纤维并加热DNA溶液至70-90℃，逐步加入被加热至与DNA加热溶液相同温度的顺-二氯二氨络铂(DDP)的柠檬酸盐溶液，在70-90℃恒温控制DNA和DDP溶液混合物15-20分钟，且在恒温控制前向DNA和DDP溶液的混合物中加入氟尿嘧啶钠盐的水溶液。根据本发明，恒温控制前连同氟尿嘧啶钠盐的水溶液，我们加入浓度与氟尿嘧啶、尿嘧啶和尿素1∶1∶1的摩尔比相对应的尿嘧啶的水溶液和尿素的水溶液，和pH 11.0-12.0的氢氧化钠水溶液，及随后使药物溶液达到8.4-9.9的pH值和1.0054-1.0058g/cm3的密度。
给出的获得抗肿瘤药物的方法允许取得增加的pH值和溶液密度，从而排除了氟尿嘧啶和溶液质子相互间作用的可能性，以致能获得具有Pt-DNA高分子的药物，该高分子最大测量时大小为0.05-0.15微米，在温度范围为25-15℃时随时可用的药物治疗时不会缩合。因而增加溶液密度来防止从药物溶液中高分子的沉淀。
在实践中，该抗肿瘤药物可通过以下方法获得。
将DNA纤维在含有氯化钠和柠檬酸钠的柠檬酸-盐溶液中保持16-26小时。用机械搅拌溶解纤维，并将DNA溶液加热至70-90℃。将加热至相同温度的顺-二氯二氨络铂(DDP)的柠檬酸盐溶液逐步引入进加热的DNA溶液中。然后向混合物中添加氟尿嘧啶钠盐的水溶液。在添加氟尿嘧啶钠盐的水溶液的同时另外添加浓度与氟尿嘧啶、尿嘧啶和尿素1∶1∶1的摩尔比相对应的尿嘧啶的水溶液和尿素的水溶液，和pH 11.0-12.0的氢氧化钠水溶液。由此使药物溶液达到8.4-9.9的pH值和1.0054-1.0058g/cm3的密度。之后将DNA和DDP溶液的混合物在温度为70-90℃下保持15-20分钟。
获得抗肿瘤药物的实施例在表1中显示，在该情况下实施例1-3涉及要求保护的药物，实施例4涉及一种已知药物。
表1
Figure BPA00001374745700071
表中的符号：NaCl-氯化钠；Na3Cyt-柠檬酸钠；NaFu-钠盐形式的氟尿嘧啶；Ura-尿嘧啶；Uгea-尿素。
摩尔重量：尿嘧啶112g-mole，氟尿嘧啶153g-mole，尿素60g-mole，在第一个实施例中尿嘧啶的摩尔数等于2.70/112＝0.024；氟尿嘧啶-3.70/153＝0.024；尿素-1.44/60＝0.024；
在第二个实施例中被标示物质的量等于0.016，在第三个实施例中-0.0016。因此，引入浓度与氟尿嘧啶、尿嘧啶和尿素1∶1∶1的摩尔比相对应的尿嘧啶的水溶液和尿素的水溶液。
将依赖于获取条件的被要求保护的药物的特征与已知药物特征相比较。结果在表2中显示，在此情况下实施例1-3涉及被要求保护的药物，实施例4涉及一种已知药物。
表2
Figure BPA00001374745700081
要求保护的药物和已知药物的水溶液的差别通过由电势分析确定不同的pH值和由比重计方法确定不同密度值证实。在温度低于35℃时在已知药物和被要求保护的药物中形成的Pt-DNA高分子空间结构的差别，在实施例表中根据电子显微镜数据它们不同的分子结构大小在彼此不同2-3次实验中得以证实。在要求保护药物的实施例中分子结构的大小与物质的非缔合个体高分子大小相对应，这证明放置于温度为25-15℃药物中的Pt-DNA分子没有分子内缩合。
用从患有恶性脑少突状星形细胞瘤病人外科材料获取的培养细胞模型的细胞毒性试验来研究已知药物和被要求保护药物的抗肿瘤活性。细胞在标准结构的营养混合物中培养：Eagle培养液(40％)，胎牛血清(30-40％)，葡萄糖(800milligram of％)，胰岛素(0.2units/ml)，在温度-调解室中气体组成和温度36.5℃的恒定条件下。
在增强生长的期间接种后4天，对照培养物用普通盐水溶液处理，实验培养细胞用要求保护药物的溶液和已知药物的溶液处理，并存放于25-15℃的温度下。培养物被处理后孵化期为24小时。抗肿瘤活性通过细胞毒性估算，该细胞毒性特征在于通过与死亡细胞的对照量作相对比较。死亡细胞相对量的计算结果以百分比在表3中显示，其中在编号1的情况下，标示为用普通盐水溶液处理过的对照细胞培养物；在编号2-4的情况下-标示为用要求保护药物处理过的细胞实验培养物；在编号5的情况下-标示为用已知药物处理过的细胞实验培养物。表3显示的数据中没有氯化钠盐，柠檬酸钠和氯化铵的浓度数据。
表3
Figure BPA00001374745700091
表3的数据显示与在细胞毒性试验中抗肿瘤活性的定量估算相比，要求保护的药物实质性地优于已知药物。放置于相同的温度15℃和在培养基中加入相同浓度的Pt-DNA衍生物30mkg/ml和氟尿嘧啶50mkg/ml，已知药物引起只有24.2％细胞的破坏，而要求保护的药物引起86.6％的细胞的破坏。
因此，即使温度为25-15℃本发明的药物保持了它高抗肿瘤活性和治疗效果，此温度很大程度上简化了药物的储藏，运输和使用。
本发明的药物可以在不同的剂型中使用。
要求保护的抗肿瘤药物使用在原发性和转移性的肺，肾，腹膜和胸膜肿瘤、消化道器官和运动器官系统肉瘤的临床治疗中，以剂量形式用作于静脉内、动脉内和腹部内施用；在治疗头部，颈部和皮肤的肿瘤损伤-以剂量形式为局部施用作为应用形式；在脑部肿瘤-将奥马耶贮器以间隙手术植入外科手术切除肿瘤的底层。
要求保护的药物在临床应用的经验显示使用它的剂量形式为腹部内和局部应用，和为静脉内，动脉内和间隙内施用，提高了化疗效果，这种效果体现为在长时期的治疗过程中病人预期寿命的增加和生活质量的改善。与此同时，没有在病人中观察到较严重的临床或实验室开发的副作用。
下一个(第三个)问题被本发明要求保护的方法解决，因为本发明给出了一种稳定基于铂衍生物和脱氧核糖核酸(Pt-DNA)的水溶液(化合物)的药物的方法。根据这种方法，他们使用氟尿嘧啶碱与尿嘧啶和尿素的混合物作为附加稳定剂，同时降低溶液质子浓度至8.4-9.9，其中所述Pt-DNA核苷酸、氟尿嘧啶碱、尿嘧啶和尿素的摩尔比为1∶(6-12)∶(0.6-1.2)∶(0.6-1.2)。
此外，他们使用铂化合物和脱氧核糖核酸(Pt-DNA)在浓度为1.30-1.53mg/ml，含有0.80-0.90mg/ml的氯化钠，0.40-0.53mg/ml的柠檬酸钠，0.15-0.18mg/ml的氯化铵和另外的稳定剂，根据本发明，再使用Pt-DNA复合物，其分子在温度低于35℃时不会从溶液中沉淀。
作为药物的一部分，Pt-DNA高分子可以包含一种DNA，其从天然来源获得或通过基因工程方法合成，具有不限定在0.3-20mln道尔顿的分子量。
为增加药物溶液的pH至8.4-9.9，他们使用氢氧化钠，或氢氧化钾，或氢氧化铵，或其它任何药理学上可接受的pH调节剂。
表4列出了要求保护的稳定方法使用于获得抗肿瘤药物的技术中，其中它们的DNA性质及获得Pt-DNA化合物的方法各不相同。
表4
Figure BPA00001374745700111
表中的符号：A-腺嘌呤，T-胸腺嘧啶，G-鸟嘌呤，C-胞嘧啶。
在实践中稳定抗肿瘤药物的方法通过以下步骤来实施。含有氟尿嘧啶碱和尿嘧啶及尿素混合物的附加稳定剂水溶液被加入到含有Pt-DNA化合物、氯化钠、柠檬酸钠和氯化铵的水溶液，其中所述Pt-DNA化合物在低于35℃下分子不会从溶液中沉淀。同时和稳定剂的水溶液一起，加入pH调节剂的水溶液，其含有pH为11-12的氢氧化钠，在该pH调节剂的辅助下，目标药物的溶液达到pH 8.4-9.9.
抗肿瘤药物稳定方法的特定条件列在表4中，在基本物质溶液、在附加的稳定剂溶液和在pH调节剂溶液中初始成分量的标示显示在表5中，其中实施例1-9涉及要求保护的方法，实施例10和11涉及已知方法。
表5
Figure BPA00001374745700121
表中的符号：NaCl-氯化钠；Na3Cyt-柠檬酸钠；NHCl-氯化铵；NaFu-氟尿嘧啶钠盐；Fu-氟尿嘧啶碱；Ura-尿嘧啶；Uгea-尿素；NaOH-氢氧化钠。
在表6中数据显示了要求保护的方法的特征，取决于它实施的条件和药物治疗温度，与已知方法的特征相比较，其中，实施例1-9涉及要求保护的方法，及实施例10和11涉及已知方法。
表6
Figure BPA00001374745700131
要求保护的和已知方法之间特征的差别通过不同的pH值范围得以证实，它是通过电势分析的方法来测量，不存在对基本物质浓度的温度依赖和附加的稳定剂，通过定量分析方法来控制。表中的实施例证实了在已知方法中温度低于35℃的浓度差别，其中在药物水溶液放置于15℃下，Pt-DNA化合物浓度从1.50mg/ml降低到1.04mg/ml，也就是说，降低了30.7％，Nafu从1.89mg/ml降低到1.47mg/ml，也就是说，降低了22％。
当药物被放置在温度大约为10℃，Pt-DNA的浓度从1.48mg/ml降低至0.63mg/ml，也就是说，已降低了57.4％，NaFu的浓度从1.82mg/ml降低至1.19mg/ml，即降低了34.4％。在使用要求保护方法的实施例里，基本物质和附加的稳定剂的浓度对应于放置在温度高于35℃的溶液浓度，从而证实了用本发明方法来提供这样条件的一种可能性：该条件下，在将目的产品保持在25-5℃的温度范围内，Pt-DNA高分子和氟尿嘧啶碱分子不会从溶液中沉淀。
要求保护的和已知的方法来稳定的药物具有提供抗肿瘤活性的能力，通过在已适应培养的人脑多形性成胶质细胞瘤模型的细胞毒性试验中研究。把细胞放置于Eagle‘s营养培养液中，在温度-调节室中在气体成分和温度36.5℃的恒定条件下，加入胎牛血清，葡萄糖和胰岛素。在增强生长的期间，对照培养细胞用普通盐水溶液处理，实验培养细胞用要求保护的和已知方法稳定的药物溶液处理，它们预先放置在10℃的温度。
根据通过涉及经药物处理后24小时所损失的细胞对照量表征它们的细胞毒性，评估抗肿瘤活性。损失细胞相对量的百分比计算结果在表7中给出，在编号1的情况下，标示为用普通盐水溶液处理的对照细胞培养物，在编号2-5的情况下，标示为用要求保护的方法稳定的药物溶液处理的实验培养物，在编号6的情况下，标示为用已知方法稳定的药物溶液处理的实验培养物。
表7
Figure BPA00001374745700151
表7中的数据证明与在细胞毒性试验定量评估抗肿瘤活性对比中，要求保护的稳定方法在实质上优于已知方法。放置在相同温度10℃和应用于相同体积0.02ml和相同量1.48mg/ml的Pt-DNA，在温度高于35℃时，用已知方法稳定的药物水溶液在加入体积为1升的培养液后产生只有12.6mg/l的基本物质浓度，只引起32.2％的破坏，而用要求保护的方法所稳定的药物水溶液，在加入培养液后产生29.6mg/l的Pt-DNA浓度，其引起80.4-82.1％的细胞破坏。
因而，本发明的稳定方法提供Pt-DNA化合物增加的选择性特定效果和即使温度为25-5℃时它们增加了的治疗效果，同时提供扩大了的药物储藏条件，并通过使用铂化合物和脱氧核糖核酸(Pt-DNA)扩大了它们应用的范围，其中在温度低于35℃时，以使用氟尿嘧啶碱和尿嘧啶及尿素的混合物为代价，同时以使用低浓度质子溶液为代价，所述脱氧核糖核酸的高分子不会从溶液中沉淀。
要求保护的方法稳定的抗肿瘤药物可以用在不同剂量形式中。
通过要求保护的方法稳定的抗肿瘤药物在临床应用中的经验已经显示它们以剂量形式作为腹腔内和局部方法导入和作为静脉内、动脉内、内淋巴管和间隙部使用，提高了位于头部、颈部、肺、肾、消化道器官和运动系统区域的原发性和转移性肿瘤治疗的效果。有效性的增加体现在治疗过程中和治疗后长时期内病人预期寿命的增加和生活质量的改善。与此同时，严重的临床或实验室开发的副作用没有在病人中观察到。

Claims (11)

1.基于铂衍生物和脱氧核糖核酸的聚阴离子的水溶液的抗肿瘤药物，其包括在最大测量时大小为0.05-0.15微米的非缔合的Pt-DNA高分子，氯化钠，柠檬酸钠，氯化铵和钠盐形式的氟尿嘧啶，其特征在于以氟尿嘧啶、尿嘧啶和尿素1∶1∶1的摩尔比另外含有尿嘧啶和尿素，在水溶液中各成分的比例按重量％计为：
Figure FPA00001374745600011
2.根据权利要求1所述的抗肿瘤药物，其特征在于溶液密度为1.0054-1.0058g/cm3。
3.获得抗肿瘤药物的方法，所述方法是通过将DNA纤维在含有氯化钠和柠檬酸钠的柠檬酸-盐溶液中保持16-26小时，在机械搅拌下溶解纤维并加热DNA溶液至70-90℃，逐步加入被加热至与DNA加热溶液相同温度的顺-二氯二氨络铂(DDP)的柠檬酸盐溶液，在70-90℃恒温控制DNA和DDP溶液混合物15-20分钟，且在恒温控制前向混合物中加入氟尿嘧啶钠盐的水溶液，所述方法特征在于在恒温控制前另外加入尿嘧啶的水溶液和尿素的水溶液，其浓度对应于氟尿嘧啶、尿嘧啶和尿素1∶1∶1的摩尔比，和具有pH 11.0-12.0的氢氧化钠的水溶液，以及同时加入氟尿嘧啶钠盐的水溶液，之后使药物溶液达到8.4-9.9的pH值和1.0054-1.0058g/cm3的密度。
4.稳定基于铂衍生物和脱氧核糖核酸(Pt-DNA)的水溶液的药物的方法，其特征在于所述方法使用氟尿嘧啶碱与尿嘧啶和尿素的混合物作为附加稳定剂，同时降低溶液质子浓度至8.4-9.9，其中所述Pt-DNA核苷酸、氟尿嘧啶碱、尿嘧啶和尿素的摩尔比为1∶(6-12)∶(0.6-1.2)∶(0.6-1.2)。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于所述Pt-DNA复合物浓度为1.30-1.53mg/ml。
6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于所述药物另外含有0.80-0.90mg/ml量的氯化钠。
7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于所述药物另外含有0.40-0.53mg/ml量的柠檬酸钠。
8.根据权利要求4所述的方法，其特征在于所述药物另外含有0.15-0.18mg/ml量的氯化铵。
9.根据权利要求4所述的方法，其特征在于治疗可接受的DNA从天然来源回收或通过基因工程方法合成，具有0.3-20mln道尔顿的分子量。
10.根据权利要求4所述的方法，其特征在于通过使用氢氧化钠、或氢氧化钾、或氢氧化铵或任何其它药理学上可接受的pH调节剂使药物溶液的pH值达到8.4-9.9。
11.基于铂衍生物(化合物)和脱氧核糖核酸的水溶液的抗肿瘤药物，其是根据权利要求4所述的方法稳定。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110755447A (zh) * 2013-01-04 2020-02-07 德克萨斯系统大学董事会 包含柠檬酸的组合物及其应用

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102784098A (zh) * 2011-05-20 2012-11-21 湖南省湘中制药有限公司 丙戊酸镁注射液及其制备工艺
CN104027301B (zh) * 2013-03-05 2017-05-10 肖云彩 一种奥拉西坦组合物注射液
RU2667128C2 (ru) 2016-12-29 2018-09-14 Герман Петрович Беккер Композиция для приготовления противоопухолевого средства и способ приготовления противоопухолевого средства на ее основе

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5534513A (en) * 1991-09-05 1996-07-09 Taiho Pharmaceutical Company, Ltd. Antitumor potentiator and antitumor composition
UA70455A (en) * 2003-09-23 2004-10-15 Serhii Oleksandrovych Shalimov Antineoplastic platinum drug for topical treatmentantineoplastic platinum drug for topical treatment of oropharyngeal cancer and method for its usage of oropharyngeal cancer and method for its usage
UA70456A (en) * 2003-09-23 2004-10-15 Serhii Oleksandrovych Shalimov Dosage form of infusional antineoplastic drug and dosage form of infusional antineoplastic drug and method for its production method for its production

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110755447A (zh) * 2013-01-04 2020-02-07 德克萨斯系统大学董事会 包含柠檬酸的组合物及其应用

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