CN102183588A - 保健食品中七种人参皂苷含量的测定方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种保健食品中七种人参皂苷含量的测定方法，所述七种人参皂苷为Rg1、Re、Rc、Rf、Rb1、Rb2、Rd。所述测定方法包括以下步骤：1)样品预处理；2)使用反相高效液相色谱柱进行色谱分析；3)紫外检测器(UV)检测；4)根据色谱峰的保留时间对其中人参皂苷进行定性；5)用外标法对其中人参皂苷含量进行定量。本发明有效克服了现有检测技术存在的缺陷，增加了人参皂苷Rf的测定，能够更好的分析保健食品中人参皂苷的含量，并能更好的为西洋参和人参的判断提供依据，填补了国内相关标准中关于此项内容的空白。

Description

保健食品中七种人参皂苷含量的测定方法

技术领域

本发明涉及七种人参皂苷含量的测定方法，特别是涉及一种高效液相色谱测定保健食品中七种人参皂苷含量的测定方法。

背景技术

人参皂苷是人参的主要功效成分，目前通过科学、先进的工艺技术可以分离和精制出数十种人参皂苷单体，皆由苷元和糖组成，除Ro的苷元是齐墩果酸外，其他的是原人参二醇和原人参三醇；其中人参中单体皂苷Rg1和Rb1是人参中益智作用的主要陈分，此外一些人参皂苷还具有抗衰老、抗疲劳、调节中枢神经系统、活化皮肤细胞、增强皮肤弹性，减少皱纹等作用，并且对于糖尿病，不同类型的神经衰弱症、抗癌等均具有较好的功效。人参单体皂苷因具有优越的生理学、药学特性，使之广泛使用于保健食品中，同时又可用作医药行业的原料，是国内外保健食品研究的热门领域。

随着人们生活水平的提高，对食品尤其是保健食品的检测，提出了更高的要求，而目前现有的保健食品标准体系尚不健全、信息交流和应急反应体系建设缓慢，现有的检测方法与食品工艺要求和食品安全要求，仍有较大的差距，并且因为人参皂苷单体种类繁多，本底组分复杂，给日常检测其中人参皂苷Rg1、Re、Rc、Rf、Rb1、Rb2、Rd的含量带来了一定的困难。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是为了克服上述现有技术的缺陷，提供一种保健食品中七种人参皂苷含量的测定方法，该方法可以有效的测定保健食品中七种人参皂苷Rg1、Re、Rc、Rf、Rb1、Rb2、Rd的含量，克服了现有《保健食品检验与评价技术规范》检测方法技术存在的缺陷，增加了人参皂苷Rf的测定，能够更好的分析保健食品中人参皂苷Rg1、Re、Rc、Rf、Rb1、Rb2、Rd的含量，更好的为西洋参和人参的判断提供依据，填补了国内相关标准中关于此项内容的空白。

本发明是通过下述技术方案来达到上述目的的：

一种保健食品中七种人参皂苷含量的测定方法，包括以下步骤：

1)样品预处理；

2)使用反相高效液相色谱柱进行色谱分析；

3)紫外检测器检测；

4)根据色谱峰的保留时间对其中的人参皂苷进行定性；

5)用外标法对其中人参皂苷含量进行定量。

其中，上述测定方法，所述七种人参皂苷为Rg1、Re、Rc、Rf、Rb1、Rb2、Rd。

所述样品预处理分固体试样处理和液体试样处理。

所述固体试样处理：取试样(片剂或胶囊内容物等)研成粉末，并过20目筛，精确取该粉末于磨口三角瓶中，准确加入35-45ml的乙醇/水溶液(体积比1∶1)，50-60℃超声30-60min，冷却后加入少量的乙腈，二次水定容，离心后过0.45μm膜，滤液进行色谱分析。

所述液体试样处理：准确称取试样，加2.5ml的乙醇/水溶液(体积比1∶1)，超声溶解均匀，冷却后加少量的乙腈，二次水定容，离心后过0.45μm膜，滤液进行色谱分析。

所述反相高效液相色谱分析参数分别为：色谱柱：AgilentC18柱，4.6×150mm，5μm；柱温：30℃；进样量：10μl；流动相：乙腈和水。测定时，首先，配制人参皂苷Rg1、Re、Rc、Rf、Rb1、Rb2、Rd混合标准溶液，浓度分别为0.01、0.05、0.10、0.20、0.50mg/ml；然后，采用梯度洗脱对目标物进行有效分离。

所述紫外检测是在波长205nm处进行检测。

所述人参皂苷定性是指采用人参皂苷标样色谱峰的保留时间对样品色谱峰来进行定性。

所述人参皂苷含量采用外标法进行定量。

本发明的检测方法可以检测市售任何一种含有人参制品的保健产品，例如袋泡茶、西洋参蜂王浆、养元益肾酒等。

有益效果：

本发明为检测保健食品中七种人参皂苷Rg1、Re、Rc、Rf、Rb1、Rb2、Rd的含量提供了更准确、方便和经济的检测方法，更加有利于保健食品生产厂家监控七种人参皂苷的添加使用量，以及为西洋参和人参的判断提供了重要依据，填补了国内相关标准中关于此项内容的空白。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明的技术方案进一步解释说明。

实施例1

1)取袋泡茶的内容物研成粉末，并过20目筛，精确称取0.2g该粉末于磨口三角瓶中，准确加入35-45ml乙醇/水溶液(体积比1∶1)，50-60℃超声30-60min，冷却后加入少量的乙腈，二次水定容至50ml，离心后过0.45μm膜，滤液进行色谱分析。

2)使用反相高效液相色谱柱进行色谱分析。色谱柱为；AgilentC18柱，4.6×150mm，5μm；柱温：30℃；进样量：10μl；流动相：乙腈和水。

a.配制人参皂苷Rg1、Re、Rc、Rf、Rb1、Rb2、Rd混合标准溶液，浓度分别为0.01、0.05、0.10、0.20、0.50mg/ml。

b.采用梯度洗脱对目标物进行有效分离。

3)试样进行HPLC分析，用峰面积对浓度做各单体皂苷的标准回归曲线。在波长205nm处进行紫外检测。

4)将人参皂苷Rg1、Re、Rc、Rf、Rb1、Rb2、Rd标准溶液和处理好的样品按相同色谱测定条件进行检测，用工作站记录系统记录各色谱峰的保留时间和峰面积，用人参皂苷Rg1、Re、Rc、Rf、Rb1、Rb2、Rd标样色谱峰的保留时间对样品色谱峰进行定性。

5)采用外标法对样品色谱峰定量。测定样品中人参皂苷Rg1、Re、Rc、Rf、Rb1、Rb2、Rd的含量，从而计算出人参皂苷Rg1、Re、Rc、Rf、Rb1、Rb2、Rd的含量，具体数据参见表1(KH-1600型薄层色谱扫描仪和WatersACQUITYUPLC)。

注：若样品为西洋参蜂王浆、养元益肾酒等，则按照前述液体样品的前处理方式进行操作，其他步骤均相同。

表1

虽然以上描述了本发明的具体实施方式，但是本领域的技术人员应当理解，这些仅是举例说明，在不背离本发明的原理和实质的前提下，可以对这些实施方式做出多种变更或修改。因此，本发明的保护范围由所附权利要求书限定。

Claims (10)

1.一种保健食品中七种人参皂苷含量的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)样品预处理；

2)使用反相高效液相色谱柱进行色谱分析；

3)紫外检测器检测；

4)根据色谱峰的保留时间对其中人参皂苷进行定性；

5)用外标法对其中人参皂苷含量进行定量。

2.如权利要求1所述的保健食品中七种人参皂苷含量的测定方法，其特征在于，所述七种人参皂苷为Rg1、Re、Rc、Rf、Rb1、Rb2、Rd。

3.如权利要求1或2所述的保健食品中七种人参皂苷含量的测定方法，其特征在于，所述样品预处理分固体试样处理和液体试样处理。

4.如权利要求3所述的保健食品中七种人参皂苷含量的测定方法，其特征在于，所述固体试样处理如下：取片剂或胶囊内容物研成粉末，并过20目筛，精确取该粉末于磨口三角瓶中，准确加入35-45ml体积比为1∶1的乙醇/水溶液，50-60℃超声30-60min，冷却后加入少量的乙腈，二次水定容，离心后过0.45μm膜，滤液进行色谱分析。

5.如权利要求3所述的保健食品中七种人参皂苷含量的测定方法，其特征在于，所述液体试样处理如下：准确称取试样，加2.5ml体积比为1∶1的乙醇/水溶液，超声溶解均匀，冷却后加少量的乙腈，二次水定容，离心后过0.45μm膜，滤液进行色谱分析。

6.如权利要求1或2所述的保健食品中七种人参皂苷含量的测定方法，其特征在于，所述反相高效液相分析参数分别为：色谱柱：AgilentC18柱，4.6×150mm，5μm；柱温：30℃；进样量：10μl；流动相：乙腈和水。

7.如权利1或2或6所述的保健食品中七种人参皂苷含量的测定方法，其特征在于，所述反相高效液相分析包括以下步骤：首先，分别配制七种人参皂苷混合标准溶液，浓度分别为0.01、0.05、0.10、0.20、0.50mg/ml；然后再采用梯度洗脱对目标物进行有效分离。

8.如权利要求1或2所述的保健食品中七种人参皂苷含量的测定方法，其特征在于，所述紫外检测是在205nm处进行检测。

9.如权利要求1或2所述的保健食品中七种人参皂苷含量的测定方法，其特征在于，将人参皂苷标准溶液和处理好的样品按相同色谱测定条件进行检测，用工作站记录系统记录各色谱峰的保留时间和峰面积，用人参皂苷标样色谱峰的保留时间对样品色谱峰进行定性。

10.如权利要求1所述的保健食品中七种人参皂苷含量的测定方法，其特征在于，所述人参皂苷含量采用外标法进行定量。