CN102154139A - 热带假丝酵母细胞及其用途 - Google Patents

热带假丝酵母细胞及其用途 Download PDF

Info

Publication number
CN102154139A
CN102154139A CN2010106107682A CN201010610768A CN102154139A CN 102154139 A CN102154139 A CN 102154139A CN 2010106107682 A CN2010106107682 A CN 2010106107682A CN 201010610768 A CN201010610768 A CN 201010610768A CN 102154139 A CN102154139 A CN 102154139A
Authority
CN
China
Prior art keywords
sequence number
candida tropicalis
hydroxyl
gene
cell
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN2010106107682A
Other languages
English (en)
Inventor
M·珀特
H-G·亨内曼
S·沙费尔
T·哈斯
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Evonik Operations GmbH
Original Assignee
Evonik Degussa GmbH
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Evonik Degussa GmbH filed Critical Evonik Degussa GmbH
Publication of CN102154139A publication Critical patent/CN102154139A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/62—Carboxylic acid esters
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C227/00—Preparation of compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C227/04—Formation of amino groups in compounds containing carboxyl groups
    • C07C227/06—Formation of amino groups in compounds containing carboxyl groups by addition or substitution reactions, without increasing the number of carbon atoms in the carbon skeleton of the acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C227/00—Preparation of compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C227/04—Formation of amino groups in compounds containing carboxyl groups
    • C07C227/06—Formation of amino groups in compounds containing carboxyl groups by addition or substitution reactions, without increasing the number of carbon atoms in the carbon skeleton of the acid
    • C07C227/08—Formation of amino groups in compounds containing carboxyl groups by addition or substitution reactions, without increasing the number of carbon atoms in the carbon skeleton of the acid by reaction of ammonia or amines with acids containing functional groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C51/00—Preparation of carboxylic acids or their salts, halides or anhydrides
    • C07C51/347—Preparation of carboxylic acids or their salts, halides or anhydrides by reactions not involving formation of carboxyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C67/00—Preparation of carboxylic acid esters
    • C07C67/39—Preparation of carboxylic acid esters by oxidation of groups which are precursors for the acid moiety of the ester
    • C07C67/42—Preparation of carboxylic acid esters by oxidation of groups which are precursors for the acid moiety of the ester by oxidation of secondary alcohols or ketones
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
    • C12N1/16—Yeasts; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
    • C12N9/0012—Oxidoreductases (1.) acting on nitrogen containing compounds as donors (1.4, 1.5, 1.6, 1.7)
    • C12N9/0036—Oxidoreductases (1.) acting on nitrogen containing compounds as donors (1.4, 1.5, 1.6, 1.7) acting on NADH or NADPH (1.6)
    • C12N9/0038—Oxidoreductases (1.) acting on nitrogen containing compounds as donors (1.4, 1.5, 1.6, 1.7) acting on NADH or NADPH (1.6) with a heme protein as acceptor (1.6.2)
    • C12N9/004—Cytochrome-b5 reductase (1.6.2.2)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
    • C12N9/0012—Oxidoreductases (1.) acting on nitrogen containing compounds as donors (1.4, 1.5, 1.6, 1.7)
    • C12N9/0036—Oxidoreductases (1.) acting on nitrogen containing compounds as donors (1.4, 1.5, 1.6, 1.7) acting on NADH or NADPH (1.6)
    • C12N9/0038—Oxidoreductases (1.) acting on nitrogen containing compounds as donors (1.4, 1.5, 1.6, 1.7) acting on NADH or NADPH (1.6) with a heme protein as acceptor (1.6.2)
    • C12N9/0042—NADPH-cytochrome P450 reductase (1.6.2.4)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
    • C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/40—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carboxyl group including Peroxycarboxylic acids
    • C12P7/42—Hydroxy-carboxylic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/62—Carboxylic acid esters
    • C12P7/625—Polyesters of hydroxy carboxylic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y101/00—Oxidoreductases acting on the CH-OH group of donors (1.1)
    • C12Y101/01—Oxidoreductases acting on the CH-OH group of donors (1.1) with NAD+ or NADP+ as acceptor (1.1.1)
    • C12Y101/01001—Alcohol dehydrogenase (1.1.1.1)

Abstract

本发明的主题是基因工程改性的热带假丝酵母细胞、及其用途以及用于制备ω-羟基-羧酸和ω-羟基-羧酸酯的方法。

Description

热带假丝酵母细胞及其用途
技术领域
本发明的主题是基因工程改性的热带假丝酵母(Candida tropicalis)细胞、其用途以及用于制备ω-羟基-羧酸和ω-羟基-羧酸酯的方法。
技术状态
热带假丝酵母能够用链烷烃生成二羧酸，是一种具有良好特征的子囊菌。
WO91/006660描述了在β-氧化过程中通过中断POX4和/或POX5基因而完全抑制的热带假丝酵母细胞，其可提高a，ω-二羧酸的收率。
WO00/020566描述了热带假丝酵母的Cytochrom P450单加氧酶和NADPH Cytochrom P450氧化还原酶，以及将其用来干预ω-羟基化反应，ω-氧化反应的第一步骤。
WO03/089610描述了热带假丝酵母菌产生的、可催化ω-氧化反应的第二步骤使脂肪醇转变为醛的酶，以及将其用来提高二羧酸的产量。
迄今为止所述的这些细胞和方法并不适合用来制备ω-羟基-羧酸或者其酯，因为ω-羟基-羧酸仅仅短时间以中间产物形式存在，并且立即将其代谢。
ω-羟基-羧酸及其酯可作为聚合物的前体物质，是很经济的化合物，因此本发明适合于商业应用。
发明内容
本发明的任务在于，寻找一种能够以发酵方式、特别是在细胞周围的介质中，制备足量的ω-羟基-羧酸或ω-羟基-羧酸酯的方法。
本发明的说明
令人惊奇地发现，以下所述的细胞有助于解决这任务。
因此本发明的主题是一种如权利要求1所述的细胞。
本发明进一步的主题是本发明所述细胞的用途，以及本发明所述的细胞用于制备ω-羟基-羧酸和ω-羟基-羧酸酯的方法。
本发明的优点是能够将所用的离析物(Eduktes)转变成ω-羟基-羧酸和相应的酯，且该方法的特异性很高，因此相对于所用离析物的收率很高。
本发明的一个主题是一种尤其源自ATCC 20336菌株的热带假丝酵母细胞，其特征在于，所述细胞与其野生型相比至少一种酶的活性有所降低，可通过选自以下两组没有内含子的核酸序列对所述的酶进行编码：
A)序列号1、序列号3、序列号5、序列号7、序列号9、序列号11、序列号13、序列号15、序列号17、序列号19、序列号21、序列号23、序列号25、序列号27、序列号29、序列号31、序列号33、序列号35、序列号37、序列号39、序列号41、序列号43、序列号45、序列号47、序列号49、序列号51、序列号53、序列号55、序列号57、序列号59、序列号61、序列号63、序列号65和序列号67；尤其是序列号1、序列号3、序列号5、序列号7、序列号9、序列号11、序列号13、序列号15、序列号17、序列号19、序列号21、序列号23、序列号25、序列号27、序列号29、序列号31、序列号33、序列号35、序列号37、序列号39、序列号41、序列号43、序列号45、序列号47、序列号49和序列号51；更特别是序列号1、序列号3、序列号5、序列号7、序列号9、序列号11、序列号13、序列号15、序列号17、序列号19、序列号21、序列号23、序列号25和序列号27，
B)与以下序列号的序列至少80％一致、特别优选至少90％一致、特别适宜优选至少95％一致、最优选至少99％一致的一种序列：序列号1、序列号3、序列号5、序列号7、序列号9、序列号11、序列号13、序列号15、序列号17、序列号19、序列号21、序列号23、序列号25、序列号27、序列号29、序列号31、序列号33、序列号35、序列号37、序列号39、序列号41、序列号43、序列号45、序列号47、序列号49、序列号51、序列号53、序列号55、序列号57、序列号59、序列号61、序列号63、序列号65和序列号67；尤其是序列号1、序列号3、序列号5、序列号7、序列号9、序列号11、序列号13、序列号15、序列号17、序列号19、序列号21、序列号23、序列号25、序列号27、序列号29、序列号31、序列号33、序列号35、序列号37、序列号39、序列号41、序列号43、序列号45、序列号47、序列号49和序列号51；更特别是序列号1、序列号3、序列号5、序列号7、序列号9、序列号11、序列号13、序列号15、序列号17、序列号19、序列号21、序列号23、序列号25和序列号27。本发明所述的优选核酸序列组是组A)。
本发明所述的细胞的“野生型”优选指的是可以对通过上述核酸序列号编码的酶的活性有影响的元素(诸如例如包括用来对相应酶进行编码的上述核酸序列的基因，或者包含在相应基因之中与上述核酸序列有功能关系的启动子)进行操控从而从中产生本发明所述细胞的起始菌株。如果能够以抑制相应基因的方式使得例如ATCC 20336菌株中以序列号1编码的酶的活性降低，则应将未经改变、用于进行相应操控的ATCC 20336菌株看成是“野生型”。
本发明所述的术语“基因”并非仅仅指编码的或者转录为mRNA的DNA区域，即“结构基因”，而且也指启动子区、可能的内含子区、增强区和其它调控序列区以及终止子区。
本发明所述术语“酶的活性”指的是能够通过整个细胞对从12-羟基-十二烷酸转变为1，12-十二烷二酸的反应进行催化的酶活性。优选根据以下方法测定该活性：
以单菌落为原料，在温度为30℃和90rpm的条件下，将盛有10毫升YM培养基(0.3％酵母萃取物，0.3％麦芽萃取物，0.5％蛋白胨和1.0％(w/w)葡萄糖)的100毫升锥形烧瓶培养24小时。然后以该培养物为原料，取10毫升注射到盛有100毫升生产培养基(对于1升：25克葡萄糖，7.6克NH4Cl，1.5克Na2SO4，300毫升1mM磷酸二氢钾缓冲液(pH 7.0)，20毫克ZnSO4x7H2O，20毫克MnSO4x4H2O，20毫克烟酸，20毫克吡哆素，8毫克硫胺素和6毫克泛酸盐)的1升锥形烧瓶之中。在温度为30℃的条件下培养24小时。
经过24小时之后，在细胞悬浮液中计量加入12-羟基-十二烷酸，使得浓度不大于0.5g/l。此外还加入葡萄糖或丙三醇作为共基质，使得共基质的浓度不低于0.2g/l。经过0小时、0.5小时、1小时，和然后直至24小时培养时间之后，每小时取一些试样(1毫升)用于检测12-羟基-十二烷酸、12-氧代-十二烷酸和1，12-十二烷二酸以及相应的甲酯，以及检查细胞数。每次检测之后，使用6NNaOH或4N H2SO4将pH值保持在5.0～6.5之间。在培养期间以检查“菌落形成单位”(CFU)的方式检查细胞生长情况。通过LC-MS系统检查12-羟基-十二烷酸的减少量以及1，12-十二烷二酸或者相应甲酯的产量。为此可将500μl培养液调整到pH 1，然后用等体积的二乙醚或乙酸乙酯进行提取，并且利用LC-MS进行分析。
该检测系统的组成为一个HP1100HPLC(Agilent Technologies，Waldbronn，D)，配有除气器、自动取样器和柱温箱，与一个四极质谱选择检测器MSD(Agilent Technologies，Waldbronn，D)联用。在温度为40℃的条件下，在一个例如125x2mm Luna C18(2)反相色谱柱(Phenomenex，Aschaffenburg，D)上进行色谱分离。以每分钟0.3毫升的流量进行梯度洗脱(A：0.02％蚁酸水溶液，和B：0.02％蚁酸乙腈溶液)。也可利用GC-FID(Perkin Elmer，Rodgau-Jügesheim，D)分析有机萃取物。在甲基聚硅氧烷(5％苯基)相色谱柱上进行色谱分离，例如Elite 5，30m，0.25mm ID，0.25μm FD(Perkin Elmer，Rodgau-Jügesheim，D)。进行检测之前在游离酸中掺入一种甲基化剂，例如氢氧化三甲基锍“TMSH”(Macherey-Nagel GmbH & Co.KG，Düren，D)，然后注射到相应的甲酯之中。
计算所测定的1，12-十二烷二酸浓度和取样时间点的细胞数，即可确定从12-羟基-十二烷酸获得1，12-十二烷二酸的比产出率，从而确定细胞中上述定义的“酶的活性”。“与其野生型相比降低的活性”这一说法优选指的是相对于野生型活性而言，活性降低了至少50％，特别优选降低了至少90％，特别优选降低了至少99.9％，还更优选降低了至少99.99％，最优选降低了至少99.999％。
其中在相同条件诸如例如培养基、曝气、搅拌下培养细胞，根据以上所述在细胞数/浓度尽可能相同的情况下测定活性的方法，测定本发明所述细胞的活性与其野生型相比有所降低。
可以利用已知的方法测定相对于指示序列的“核苷酸一致性”。通常可根据具体需要使用具有相关算法的特殊计算机程序。优选的致性测定方法首先在待比较序列之间产生最大的一致性。用于确定一致性的计算机程序包括(但并不仅限于此)GCG程序包，包括：
-GAP(Deveroy，J.等人，1984年核酸研究杂志第12期第387页(Nucleic Acid Research 12(1984)，P387)，威斯康辛大学遗传学计算机集团，医学(Wi)，以及
-BLASTP、BLASTN和FASTA(Altschul，S.等人，1990年分子生物学杂志(Journal of Molecular Biology)第215期第403-410页。BLAST程序可向国际生物技术信息中心(NCBI)及其它来源订购(BLAST手册，Altschul S.等人，NCBI NLM NIH Bethesda ND 22894；Altschul S.等人)。
同样也可使用已知的Smith-Waterman算法来确定核苷酸致性。
使用BLASTN程序测定“核苷酸一致性”的优选参数(Altschul，S.等人，分子生物学杂志(Journal of Molecular Biology)第215期(1990)第403-410页：
期望(Expect)阈值：10
字大小：28
匹配得分：1
失配得分：-2
空位罚分：线性
上述参数是核苷酸序列比较过程中的默认参数。
GAP程序同样也适合与上述参数一起使用。
按照上述算法得出的80％一致性在本发明中就表示一致性为80％。同理适用于更高的一致性。
通过术语“通过没有内含子的核酸序列编码的”强调了与这里所述的序列进行序列比较时必须预先从待比较的核酸序列中清除可能的内含子。
如果没有其它说明，所有百分数(％)均为质量百分数。
专业人士均知晓降低微生物中酶活性的方法。
这里尤其可使用分子生物技术。关于修饰和降低蛋白质表达从而降低热带假丝酵母的酶活性的说明，尤其是关于中断特异性基因的说明，本领域技术人员可参阅：WO91/006660；WO03/100013；Picataggio et al.Mol Cell Biol.1991Sep；11(9)：4333-9；Rohrer et al.Appl Microbiol Biotechnol.1992Feb；36(5)：650-4；Picataggio et al.Biotechnology(N Y).1992Aug；10(8)：894-8；Ueda et al.Biochim Biophys Acta.2003Mar 17；1631(2)：160-8；Ko et al.Appl Environ Microbiol.2006Jun；72(6)：4207-13；Hara et al.Arch Microbiol.2001Nov；176(5)：364-9；Kanayama et al.J Bacteriol.1998Feb；180(3)：690-8。
本发明优选细胞的特征在于，采用修饰至少一种基因的方式降低酶活性，所述基因包括选自上述核酸序列组A)和B)的某一个序列，其中所述修饰选自包括、优选组成如下的组：将外源DNA插入基因之中，删除至少该基因的一部分，在基因序列中形成点突变，对该基因进行在RNA干涉影响下的中断(Aussetzen)，或者用外源DNA替换基因的一部分，尤其是启动子区。
所述外源DNA指的是基因(并非生物体)“之外”的DNA序列，也就是说，热带假丝酵母的内源DNA序列也可以作为“外源DNA”。
特别优选采用插入一种选择标记基因的方式中断基因，因此外源DNA是一种选择标记基因，其中优选采用同源重组方式插入到基因座之中。
比较有益的方式是给选择标记基因增加一些随后能够从基因中删除的其它功能，例如可以通过Cre/loxP系统、通过翻转酶识别靶(FRT)或者同源重组法实现。
本发明优选细胞的特征在于，在其β-氧化过程中至少部分、优选完全将其阻断，因为这样可防止基质外流，从而可实现比较高的滴度。
关于在其β-氧化过程中部分阻断的热带假丝酵母细胞的例子是在EP0499622中所述的菌株H41、H41B、H51、H45、H43、H53、H534、H534B和H435，从中可得到本发明优选的热带假丝酵母细胞。
例如在WO03/100013中还描述了其它在β-氧化过程中阻断的热带假丝酵母细胞。
优先选用的是那些能够使基因POX2、POX4或POX5中至少一种基因诱导失效的方式引起β-氧化反应的细胞。
这些优选的细胞的特征在于，可从选自ATCC 20962和US2004/0014198中所述热带假丝酵母HDC100的菌株得到本发明优选的热带假丝酵母细胞。
本发明还涉及本发明所述的细胞用于制备ω-羟基-羧酸或者ω-羟基-羧酸酯的用途。
特别是本发明所述的细胞用于制备羧酸的链长为6～24、优选8～18、特别优选10～16个碳原子的(其优选为直链、饱和和非取代的)，和酯的醇组分的链长为1～4、尤其为1或2个碳原子的ω-羟基-羧酸或ω-羟基-羧酸酯的用途。所述ω-羟基-羧酸优选是12-羟基-十二烷酸，所述ω-羟基-羧酸酯适宜是12-羟基-十二烷酸甲酯。
本发明所述的优选用途的特征在于使用如上所述的本发明的优选细胞。
本发明还涉及一种用于制备前面所述的本发明热带假丝酵母细胞的方法，该方法包括以下方法步骤：
I)准备一种热带假丝酵母细胞，优选在其β-氧化过程中至少部分、优选完全阻断的细胞；
II)对至少一种基因进行修饰，所述基因包括选自上述核酸序列组A)和B)中的某一个没有内含子的核酸序列，所述修饰通过将外源DNA，尤其是对选择标记基因进行编码的DNA插入到基因之中，删除至少该基因的一部分，在基因序列中形成点突变，对该基因进行在RNA干涉影响下的中断，或者用外源DNA替换基因的一部分，尤其是启动子区。
本发明还涉及一种用于制备ω-羟基-羧酸或者ω-羟基-羧酸酯的方法，尤其是羧酸的链长为6～24、优选8～18、特别优选10～16个碳原子的(其优选为直链、饱和与非取代的)、和酯的醇组分的链长为1～4、尤其为1或2个碳原子的ω-羟基-羧酸或ω-羟基-羧酸酯，尤其是12-羟基十二烷酸或12-羟基-十二烷酸甲酯，该方法包括以下方法步骤：
A)使得上述本发明所述的细胞接触一种培养基，所述培养基含有一种羧酸或羧酸酯，尤其是羧酸的链长为6～24、优选8～18、特别优选10～16个碳原子的(其优选为直链、饱和与非取代的)，和酯的醇组分的链长为1～4个碳原子的羧酸或羧酸酯，尤其是十二烷酸或者十二烷酸甲酯，
B)在所述细胞能够从羧酸或羧酸酯生成相应ω-羟基-羧酸或ω-羟基-羧酸酯的条件下培养细胞，并且
C)任选分离出所生成的ω-羟基-羧酸或ω-羟基-羧酸酯。
本发明的优选方法使用的是上述本发明优选所述的细胞。
例如用于制备12-羟基-十二烷酸或12-羟基十二烷酸甲酯的方法包括以下方法步骤：
a)接触一种在其β-氧化过程中至少部分阻断的、源自菌株ATTC 20336的热带假丝酵母细胞，这种细胞与其野生型相比至少一种酶的活性有所降低，可通过选自上述核酸序列组A)和B)中没有内含子的核酸序列对所述的酶进行编码，其中通过修饰一种基因的方式达到酶活性的降低，所述基因包括选自上述核酸序列组A)和B)的某一个核酸序列，
其中所述修饰包括将一种选择标记基因插入到基因之中，
与一种含有十二烷酸或十二烷酸甲酯的培养基相接触，
b)在所述细胞能够从羧酸或羧酸酯生成相应ω-羟基-羧酸或ω-羟基羧酸酯的条件下培养细胞，并且
c)更特别优选任选分离出所生成的ω-羟基-羧酸或ω-羟基-羧酸酯。
专业人士均知晓适宜的热带假丝酵母的培养条件。尤其适用于方法步骤b)的条件是专业人士知晓的根据生物转化法利用热带假丝酵母制备二羧酸的培养条件。
例如在WO00/017380和WO00/015828中就描述了此类培养条件。
用于分离出所生成的ω-羟基-羧酸或ω-羟基-羧酸酯的方法是专业人士知晓的方法。这些均为从水溶液中分离出长链羧酸的标准方法，诸如例如蒸馏或萃取，且也可以例如参阅WO2009/077461所述的方法。
适宜使用按照本发明所述方法获得的ω-羟基-羧酸或ω-羟基-羧酸酯来制备聚合物尤其是聚酯。此外还可以用ω-羟基羧酸来制备内酯，以后可以用内酯来例如制备聚酯。
另一种有益的用途是将ω-羟基-羧酸或ω-羟基-羧酸酯转变为ω-氨基-羧酸或ω-氨基-羧酸酯，以便获得聚合物聚酰胺。也可以将ω-氨基-羧酸或ω-氨基-羧酸酯首先转变为相应的内酰胺，然后再以阴离子或酸催化法将其转变为聚酰胺。更特别适宜在第一道反应步骤中将ω-羟基-羧酸或者相应的酯转变为ω-氧代-羧酸或者相应的酯，然后在例如还原胺化过程中对氧代基团进行胺化。就此而言，特别优选的是12-羟基-十二烷酸或12-羟基-十二烷酸甲酯用于制备聚合物尤其是聚酰胺12的用途。
Figure ISA00000402075500021
Figure ISA00000402075500031
Figure ISA00000402075500041
Figure ISA00000402075500051
Figure ISA00000402075500061
Figure ISA00000402075500071
Figure ISA00000402075500081
Figure ISA00000402075500091
Figure ISA00000402075500111
Figure ISA00000402075500121
Figure ISA00000402075500161
Figure ISA00000402075500181
Figure ISA00000402075500191
Figure ISA00000402075500201
Figure ISA00000402075500211
Figure ISA00000402075500251
Figure ISA00000402075500261
Figure ISA00000402075500271
Figure ISA00000402075500291
Figure ISA00000402075500301
Figure ISA00000402075500311
Figure ISA00000402075500331
Figure ISA00000402075500341
Figure ISA00000402075500351
Figure ISA00000402075500361
Figure ISA00000402075500371
Figure ISA00000402075500391
Figure ISA00000402075500401
Figure ISA00000402075500411
Figure ISA00000402075500431
Figure ISA00000402075500441
Figure ISA00000402075500451
Figure ISA00000402075500461
Figure ISA00000402075500471
Figure ISA00000402075500481
Figure ISA00000402075500491
Figure ISA00000402075500501
Figure ISA00000402075500511
Figure ISA00000402075500551
Figure ISA00000402075500561
Figure ISA00000402075500571
Figure ISA00000402075500581
Figure ISA00000402075500591
Figure ISA00000402075500601
Figure ISA00000402075500631
Figure ISA00000402075500641
Figure ISA00000402075500661
Figure ISA00000402075500671
Figure ISA00000402075500681
Figure ISA00000402075500691
Figure ISA00000402075500711
Figure ISA00000402075500721
Figure ISA00000402075500731
Figure ISA00000402075500741
Figure ISA00000402075500751
Figure ISA00000402075500761
Figure ISA00000402075500771
Figure ISA00000402075500781
Figure ISA00000402075500791
Figure ISA00000402075500801
Figure ISA00000402075500811
Figure ISA00000402075500821
Figure ISA00000402075500841
Figure ISA00000402075500851
Figure ISA00000402075500861
Figure ISA00000402075500881
Figure ISA00000402075500891
Figure ISA00000402075500901
Figure ISA00000402075500911
Figure ISA00000402075500921
Figure ISA00000402075500931
Figure ISA00000402075500941
Figure ISA00000402075500951
Figure ISA00000402075500961
Figure ISA00000402075500971
Figure ISA00000402075500981
Figure ISA00000402075500991
Figure ISA00000402075501001
Figure ISA00000402075501011
Figure ISA00000402075501021
Figure ISA00000402075501031
Figure ISA00000402075501051
Figure ISA00000402075501061
Figure ISA00000402075501071
Figure ISA00000402075501081
Figure ISA00000402075501091
Figure ISA00000402075501101
Figure ISA00000402075501111
Figure ISA00000402075501121
Figure ISA00000402075501131
Figure ISA00000402075501151
Figure ISA00000402075501161
Figure ISA00000402075501181
Figure ISA00000402075501191
Figure ISA00000402075501211
Figure ISA00000402075501221
Figure ISA00000402075501231
Figure ISA00000402075501241
Figure ISA00000402075501251
Figure ISA00000402075501261
Figure ISA00000402075501271
Figure ISA00000402075501281
Figure ISA00000402075501291
Figure ISA00000402075501311
Figure ISA00000402075501321
Figure ISA00000402075501341
Figure ISA00000402075501351
Figure ISA00000402075501361
Figure ISA00000402075501371
Figure ISA00000402075501381
Figure ISA00000402075501411
Figure ISA00000402075501421
Figure ISA00000402075501431
Figure ISA00000402075501441
Figure ISA00000402075501451
Figure ISA00000402075501461
Figure ISA00000402075501471
Figure ISA00000402075501491
Figure ISA00000402075501501
Figure ISA00000402075501511
Figure ISA00000402075501521
Figure ISA00000402075501531
Figure ISA00000402075501541
Figure ISA00000402075501571
Figure ISA00000402075501581
Figure ISA00000402075501601
Figure ISA00000402075501611
Figure ISA00000402075501631
Figure ISA00000402075501641
Figure ISA00000402075501651
Figure ISA00000402075501661
Figure ISA00000402075501671
Figure ISA00000402075501681
Figure ISA00000402075501691
Figure ISA00000402075501701
Figure ISA00000402075501711
Figure ISA00000402075501721
Figure ISA00000402075501731
Figure ISA00000402075501751
Figure ISA00000402075501761
Figure ISA00000402075501781
Figure ISA00000402075501791
Figure ISA00000402075501801
Figure ISA00000402075501811
Figure ISA00000402075501821
Figure ISA00000402075501841
Figure ISA00000402075501851
Figure ISA00000402075501861
Figure ISA00000402075501871
Figure ISA00000402075501881
Figure ISA00000402075501891
Figure ISA00000402075501901
Figure ISA00000402075501921
Figure ISA00000402075501941
Figure ISA00000402075501951
Figure ISA00000402075501961
Figure ISA00000402075501971
Figure ISA00000402075501981
Figure ISA00000402075501991
Figure ISA00000402075502001
Figure ISA00000402075502011
Figure ISA00000402075502021
Figure ISA00000402075502031
Figure ISA00000402075502041
Figure ISA00000402075502051
Figure ISA00000402075502061
Figure ISA00000402075502071
Figure ISA00000402075502101
Figure ISA00000402075502111
Figure ISA00000402075502121
Figure ISA00000402075502131

Claims (10)

1.热带假丝酵母(Candida tropicalis)细胞，其特征在于，所述细胞与其野生型相比至少一种酶的活性有所降低，可通过选自以下两组A)和B)中没有内含子的核酸序列对所述的酶进行编码：
A)序列号1、序列号3、序列号5、序列号7、序列号9、序列号11、序列号13、序列号15、序列号17、序列号19、序列号21、序列号23、序列号25、序列号27、序列号29、序列号31、序列号33、序列号35、序列号37、序列号39、序列号41、序列号43、序列号45、序列号47、序列号49、序列号51、序列号53、序列号55、序列号57、序列号59、序列号61、序列号63、序列号65和序列号67；
B)与以下序列号的序列之一至少80％一致的一种序列：序列号1、序列号3、序列号5、序列号7、序列号9、序列号11、序列号13、序列号15、序列号17、序列号19、序列号21、序列号23、序列号25、序列号27、序列号29、序列号31、序列号33、序列号35、序列号37、序列号39、序列号41、序列号43、序列号45、序列号47、序列号49、序列号51、序列号53、序列号55、序列号57、序列号59、序列号61、序列号63、序列号65和序列号67。
2.根据权利要求1所述的热带假丝酵母细胞，其特征在于，以修饰一种基因的方式达到酶活性的降低，所述基因包括权利要求1中所述的一种核酸序列，其中所述修饰选自：将外源DNA插入到基因之中，删除该基因的至少一部分，在基因序列中形成点突变，对该基因进行在RNA干涉影响下的中断，并且用外源DNA替换基因的一部分，尤其是启动子区。
3.根据权利要求2所述的热带假丝酵母细胞，其特征在于，所述外源DNA是一种选择标记基因。
4.根据上述权利要求中至少一项所述的热带假丝酵母细胞，其特征在于，所述细胞在其β-氧化过程中至少部分阻断。
5.根据上述权利要求中至少一项所述的热带假丝酵母细胞，其特征在于，所述热带假丝酵母细胞衍生自选自以下的菌株：热带假丝酵母H41、热带假丝酵母H41B、热带假丝酵母H51、热带假丝酵母H45、热带假丝酵母H43、热带假丝酵母H53、热带假丝酵母H534、热带假丝酵母534B、热带假丝酵母H435、热带假丝酵母ATCC20962和热带假丝酵母HDC100，尤其是热带假丝酵母ATCC20962和热带假丝酵母HDC100。
6.上述权利要求中至少一项所述的细胞用于制备ω-羟基-羧酸或者ω-羟基-羧酸酯的用途。
7.用于制备权利要求1～5中至少一项所述的热带假丝酵母细胞的方法，包括以下方法步骤：
I)准备一种热带假丝酵母细胞，并且
II)对至少一种基因进行修饰，所述基因包括选自权利要求1所述核酸序列组A)和B)中的某一个序列，所述修饰是通过将外源DNA尤其是对选择标记基因进行编码的DNA插入到基因之中，删除该基因的至少一部分，在基因序列中形成点突变，对该基因进行在RNA干涉影响下的中断，并且用外源DNA替换基因的一部分，尤其是启动子区。
8.用于制备ω-羟基-羧酸或ω-羟基-羧酸酯的方法，尤其是羧酸的链长为6～24个碳原子和酯的醇组分的链长为1～4个碳原子的ω-羟基-羧酸或ω-羟基-羧酸酯，尤其是12-羟基-十二烷酸或者12-羟基-十二烷酸甲酯，该方法包括以下方法步骤：
a)使权利要求1～5中至少一项所述的细胞接触含有一种羧酸或羧酸酯的培养基，
b)在所述细胞能够从羧酸或羧酸酯生成相应的ω-羟基-羧酸或ω-羟基-羧酸酯的条件下培养细胞，并且
c)任选分离出所生成的ω-羟基-羧酸或ω-羟基-羧酸酯。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，使用权利要求5所述的在其β-氧化过程中至少部分阻断的细胞。
10.通过权利要求8或9所述方法获得的ω-羟基-羧酸或者ω-羟基-羧酸酯用于制备聚合物的用途。
CN2010106107682A 2009-11-11 2010-11-10 热带假丝酵母细胞及其用途 Pending CN102154139A (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE102009046626A DE102009046626A1 (de) 2009-11-11 2009-11-11 Candida tropicalis Zellen und deren Verwendung
DE102009046626.6 2009-11-11

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN102154139A true CN102154139A (zh) 2011-08-17

Family

ID=43558054

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2010106107682A Pending CN102154139A (zh) 2009-11-11 2010-11-10 热带假丝酵母细胞及其用途

Country Status (7)

Country Link
US (3) US20110118433A1 (zh)
EP (5) EP2322598A3 (zh)
JP (2) JP2011101643A (zh)
CN (1) CN102154139A (zh)
DE (1) DE102009046626A1 (zh)
ES (3) ES2658421T3 (zh)
SG (2) SG10201407242RA (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104745490A (zh) * 2015-03-20 2015-07-01 上海应用技术学院 一种热带假丝酵母菌及利用其作为生物催化剂制备异辛酸的方法
CN106497912A (zh) * 2016-10-13 2017-03-15 江苏大学 一种扫频超声处理对数中期热带假丝酵母促进增殖的方法
CN108779470A (zh) * 2015-12-17 2018-11-09 赢创德固赛(中国)投资有限公司 用于酵母细胞中同源重组敲除的基因盒

Families Citing this family (41)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE102006025821A1 (de) * 2006-06-02 2007-12-06 Degussa Gmbh Ein Enzym zur Herstellung von Mehylmalonatsemialdehyd oder Malonatsemialdehyd
DE102007052463A1 (de) * 2007-11-02 2009-05-07 Evonik Degussa Gmbh Fermentative Gewinnung von Aceton aus erneuerbaren Rohstoffen mittels neuen Stoffwechselweges
DE102007060705A1 (de) * 2007-12-17 2009-06-18 Evonik Degussa Gmbh ω-Aminocarbonsäuren oder ihre Lactame, herstellende, rekombinante Zellen
DE102008002715A1 (de) * 2008-06-27 2009-12-31 Evonik Röhm Gmbh 2-Hydroxyisobuttersäure produzierende rekombinante Zelle
DE102009009580A1 (de) 2009-02-19 2010-08-26 Evonik Degussa Gmbh Verfahren zur Herstellung freier Säuren aus ihren Salzen
DE102009046623A1 (de) 2009-11-11 2011-05-12 Evonik Röhm Gmbh Verwendung eines zu einem MeaB-Protein homologen Proteins zur Erhöhung der enzymatischen Aktivität einer 3-Hydroxycarbonsäure-CoA-Mutase
DE102009046626A1 (de) 2009-11-11 2011-05-12 Evonik Degussa Gmbh Candida tropicalis Zellen und deren Verwendung
DE102010014680A1 (de) 2009-11-18 2011-08-18 Evonik Degussa GmbH, 45128 Zellen, Nukleinsäuren, Enzyme und deren Verwendung sowie Verfahren zur Herstellung von Sophorolipiden
DE102010015807A1 (de) 2010-04-20 2011-10-20 Evonik Degussa Gmbh Biokatalytisches Oxidationsverfahren mit alkL-Genprodukt
DE102011004465A1 (de) 2010-09-10 2012-03-15 Evonik Degussa Gmbh Verfahren zur direkten Aminierung sekundärer Alkohole mit Ammoniak zu primären Aminen
DE102010043470A1 (de) 2010-11-05 2012-05-10 Evonik Degussa Gmbh Zusammensetzung aus Polyamiden mit niedriger Konzentration an Carbonsäureamidgruppen und elektrisch leitfähigem Kohlenstoff
DE102011075162A1 (de) 2010-12-08 2012-06-14 Evonik Degussa Gmbh Verfahren zur homogen-katalysierte, hochselektiven direkten Aminierung von primären Alkoholen mit Ammoniak zu primären Aminen bei hohem Volumenverhältnis von Flüssig- zu Gasphase und/oder hohen Drücken
UA112980C2 (uk) 2011-02-16 2016-11-25 Евонік Дегусса Гмбх Рідкі катіоніти
RU2013142804A (ru) 2011-02-21 2015-03-27 Эвоник Дегусса Гмбх Способ прямого аминирования спиртов аммиаком до первичных аминов с помощью каталитической системы на основе ксантфоса
ES2604335T3 (es) 2011-07-20 2017-03-06 Evonik Degussa Gmbh Oxidación y aminación de alcoholes primarios
DE102011110946A1 (de) 2011-08-15 2016-01-21 Evonik Degussa Gmbh Biotechnologisches Syntheseverfahren von omegafunktionalisierten Carbonsäuren und Carbonsäure-Estern aus einfachen Kohlenstoffquellen
DE102011084518A1 (de) 2011-10-14 2013-04-18 Evonik Industries Ag Verwendung einer Mehrschichtfolie mit Polyamid- und Polyesterschichten fürdie Herstellung photovoltaischer Module
EP2602328A1 (de) 2011-12-05 2013-06-12 Evonik Industries AG Verfahren zur Oxidation von Alkanen unter Verwendung einer AlkB Alkan 1-Monooxygenase
EP2607479A1 (en) 2011-12-22 2013-06-26 Evonik Industries AG Biotechnological production of alcohols and derivatives thereof
EP2607490A1 (de) 2011-12-22 2013-06-26 Evonik Industries AG Verfahren zur verbesserten Abtrennung einer hydrophoben organischen Lösung von einem wässrigen Kulturmedium
EP2631298A1 (en) 2012-02-22 2013-08-28 Evonik Industries AG Biotechnological method for producing butanol and butyric acid
EP2639308A1 (de) 2012-03-12 2013-09-18 Evonik Industries AG Enzymatische omega-Oxidation und -Aminierung von Fettsäuren
EP2647696A1 (de) 2012-04-02 2013-10-09 Evonik Degussa GmbH Verfahren zur aeroben Herstellung von Alanin oder einer unter Verbrauch von Alanin entstehenden Verbindung
DE102012207921A1 (de) 2012-05-11 2013-11-14 Evonik Industries Ag Mehrstufiges Syntheseverfahren mit Synthesegas
EP2700448A1 (de) 2012-08-21 2014-02-26 Evonik Industries AG Verzweigte Fettsäuren als flüssige Kationenaustauscher
EP2706076B1 (de) 2012-09-07 2014-12-17 Evonik Industries AG Härtbare Zusammensetzungen auf der Basis von Epoxidharzen ohne Benzylalkohol
EP2730655A1 (de) 2012-11-12 2014-05-14 Evonik Industries AG Verfahren zur Umsetzung eines Carbonsäureesters unter Verwendung BioH-defizienter Zellen
MY175858A (en) 2012-12-19 2020-07-14 Corvay Bioproducts Gmbh Biological methods for preparing a fatty dicarboxylic acid
WO2014100504A2 (en) 2012-12-19 2014-06-26 Verdezyne, Inc. Biological methods for preparing a fatty dicarboxylic acid
EP2746397A1 (de) 2012-12-21 2014-06-25 Evonik Industries AG Herstellung von Omega-Aminofettsäuren
EP2746400A1 (de) 2012-12-21 2014-06-25 Evonik Industries AG Herstellung von Aminen und Diaminen aus einer Carbonsäure oder Dicarbonsäure oder eines Monoesters davon
EP2759598A1 (de) * 2013-01-24 2014-07-30 Evonik Industries AG Verfahren zur Herstellung von alpha, omega-Alkandiol
EP2944697A1 (en) 2014-05-13 2015-11-18 Evonik Degussa GmbH Method of producing nylon
US9695404B2 (en) 2014-07-18 2017-07-04 Industrial Technology Research Institute Genetically modified microorganism for producing long-chain dicarboxylic acid and method of using thereof
EP3050967A1 (en) 2015-01-28 2016-08-03 Evonik Degussa GmbH A method of producing higher alcohols
CA2937594A1 (en) 2015-02-26 2016-08-26 Evonik Degussa Gmbh Alkene production
US10351881B2 (en) 2015-03-10 2019-07-16 The Regents Of The University Of California Host cells and methods for producing diacid compounds
EP3173478A1 (en) 2015-11-25 2017-05-31 Evonik Degussa GmbH Biotechnological production of omega-functionalised carboxylic acids and esters thereof
ES2803208T3 (es) 2015-12-17 2021-01-25 Evonik Operations Gmbh Una célula acetogénica genéticamente modificada
MY187786A (en) 2016-07-27 2021-10-22 Evonik Operations Gmbh N-acetyl homoserine
US11091742B2 (en) 2018-04-04 2021-08-17 Cathay Biotech Inc. Directed evolution of CYP52A12 gene and its use in dicarboxylic acid production

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009077461A1 (de) * 2007-12-17 2009-06-25 Evonik Degussa Gmbh ω-AMINOCARBONSÄUREN, ω-AMINOCARBONSÄUREESTER ODER IHRE LACTAME HERSTELLENDE, REKOMBINANTE ZELLEN

Family Cites Families (39)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5254466A (en) * 1989-11-06 1993-10-19 Henkel Research Corporation Site-specific modification of the candida tropicals genome
US5962285A (en) 1995-09-08 1999-10-05 Henkel Corporation Process for making polycarboxylic acids
US20030077795A1 (en) * 1999-03-10 2003-04-24 Wilson C. Ron Cytochrome P450 monooxygenase and NADPH Cytochrome P450 oxidoreductase genes and proteins related to the omega hydroxylase complex of candida tropicals and methods relating thereto
US6066480A (en) 1998-09-21 2000-05-23 General Electric Company Method for high specific bioproductivity of α,ω-alkanedicarboxylic acids
CA2653985A1 (en) 1998-10-05 2000-04-13 Cognis Ip Management Gmbh Cytochrome p450 monooxygenase and nadph cytochrome p450 oxidoreductase genes and proteins related to the omega hydroxylase complex of candida tropicalis and methods relating thereto
EP1350788A3 (de) 2002-03-28 2003-11-12 Degussa AG Verfahren zur Herstellung von Hexamethylendiamin aus Butadien
ES2379776T3 (es) 2002-04-19 2012-05-03 Cognis Ip Management Gmbh Genes y proteínas de oxidasa de alcohol graso de Cándida Tropicalis y métodos relacionados con los mismos
AU2003247411A1 (en) * 2002-05-23 2003-12-12 Cognis Corporation NON-REVERTIBLE Beta-OXIDATION BLOCKED CANDIDA TROPICALIS
JP2006513693A (ja) * 2002-05-23 2006-04-27 コグニス コーポレーション 非復帰変異可能なβ−酸化遮断カンジダ・トロピカリス
CA2590872C (en) 2004-12-20 2010-05-11 Degussa Gmbh Process for recovering methanol
WO2007131720A1 (en) 2006-05-11 2007-11-22 Cosmoferm B.V. Improved production of sphingoid bases using genetically engineered microbial strains
DE102006025821A1 (de) 2006-06-02 2007-12-06 Degussa Gmbh Ein Enzym zur Herstellung von Mehylmalonatsemialdehyd oder Malonatsemialdehyd
DE102007005072A1 (de) 2007-02-01 2008-08-07 Evonik Degussa Gmbh Verfahren zur fermentativen Herstellung von Cadaverin
DE102007015583A1 (de) 2007-03-29 2008-10-02 Albert-Ludwigs-Universität Freiburg Ein Enzym zur Herstellung von Methylmalonyl-Coenzym A oder Ethylmalonyl-Coenzym A sowie dessen Verwendung
DE102007031689A1 (de) 2007-07-06 2009-01-08 Evonik Goldschmidt Gmbh Enzympräparate
DE102007052463A1 (de) 2007-11-02 2009-05-07 Evonik Degussa Gmbh Fermentative Gewinnung von Aceton aus erneuerbaren Rohstoffen mittels neuen Stoffwechselweges
DE102008004725A1 (de) 2008-01-16 2009-07-23 Evonik Goldschmidt Gmbh Verfahren zur heterogenkatalysierten Herstellung von Carbonsäurederivaten
DE102008004726A1 (de) 2008-01-16 2009-07-23 Evonik Goldschmidt Gmbh Verfahren zur enzymatischen Herstellung von Carbonsäureestern
DE102008002715A1 (de) 2008-06-27 2009-12-31 Evonik Röhm Gmbh 2-Hydroxyisobuttersäure produzierende rekombinante Zelle
DE102008040193A1 (de) 2008-07-04 2010-01-07 Evonik Röhm Gmbh Verfahren zur Herstellung freier Carbonsäuren
DE102008040415A1 (de) 2008-07-15 2010-01-21 Evonik Röhm Gmbh Thermisches Salzspalten von Ammoniumcarboxylaten
DE102008041754A1 (de) 2008-09-02 2010-03-04 Evonik Goldschmidt Gmbh Enzympräparate
DE102009000592A1 (de) 2009-02-04 2010-08-05 Evonik Degussa Gmbh Verfahren zur Herstellung von Aminogruppen tragenden, multizyklischen Ringsystemen
DE102009009580A1 (de) 2009-02-19 2010-08-26 Evonik Degussa Gmbh Verfahren zur Herstellung freier Säuren aus ihren Salzen
DE102009002811A1 (de) 2009-05-05 2010-11-11 Evonik Degussa Gmbh Enzymatisches Verfahren zur Herstellung von Aldehyden
US8158391B2 (en) * 2009-05-06 2012-04-17 Dna Twopointo, Inc. Production of an α-carboxyl-ω-hydroxy fatty acid using a genetically modified Candida strain
DE102009046626A1 (de) 2009-11-11 2011-05-12 Evonik Degussa Gmbh Candida tropicalis Zellen und deren Verwendung
DE102009046623A1 (de) 2009-11-11 2011-05-12 Evonik Röhm Gmbh Verwendung eines zu einem MeaB-Protein homologen Proteins zur Erhöhung der enzymatischen Aktivität einer 3-Hydroxycarbonsäure-CoA-Mutase
DE102010014680A1 (de) 2009-11-18 2011-08-18 Evonik Degussa GmbH, 45128 Zellen, Nukleinsäuren, Enzyme und deren Verwendung sowie Verfahren zur Herstellung von Sophorolipiden
DE102010002809A1 (de) 2010-03-12 2011-11-17 Evonik Degussa Gmbh Verfahren zur Herstellung von linearen alpha,omega-Dicarbonsäurediestern
DE102010015807A1 (de) 2010-04-20 2011-10-20 Evonik Degussa Gmbh Biokatalytisches Oxidationsverfahren mit alkL-Genprodukt
DE102010026196A1 (de) 2010-06-25 2011-12-29 Evonik Degussa Gmbh Synthese von omega-Aminocarbonsäuren und deren Estern aus ungesättigten Fettsäurederivaten
DE102010032484A1 (de) 2010-07-28 2012-02-02 Evonik Goldschmidt Gmbh Zellen und Verfahren zur Herstellung von Rhamnolipiden
DE102011004465A1 (de) 2010-09-10 2012-03-15 Evonik Degussa Gmbh Verfahren zur direkten Aminierung sekundärer Alkohole mit Ammoniak zu primären Aminen
DE102011075162A1 (de) 2010-12-08 2012-06-14 Evonik Degussa Gmbh Verfahren zur homogen-katalysierte, hochselektiven direkten Aminierung von primären Alkoholen mit Ammoniak zu primären Aminen bei hohem Volumenverhältnis von Flüssig- zu Gasphase und/oder hohen Drücken
RU2013142804A (ru) 2011-02-21 2015-03-27 Эвоник Дегусса Гмбх Способ прямого аминирования спиртов аммиаком до первичных аминов с помощью каталитической системы на основе ксантфоса
DE102011015150A1 (de) 2011-03-25 2012-09-27 Evonik Degussa Gmbh Syntese von alpha, omega-Dicarbonsäuren und deren Estern aus ungesättigten Fettsäurederivaten
DE102011110959A1 (de) 2011-08-18 2013-02-21 Evonik Degussa Gmbh Pichia ciferrii Zellen und deren Verwendung
DE102011084518A1 (de) 2011-10-14 2013-04-18 Evonik Industries Ag Verwendung einer Mehrschichtfolie mit Polyamid- und Polyesterschichten fürdie Herstellung photovoltaischer Module

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009077461A1 (de) * 2007-12-17 2009-06-25 Evonik Degussa Gmbh ω-AMINOCARBONSÄUREN, ω-AMINOCARBONSÄUREESTER ODER IHRE LACTAME HERSTELLENDE, REKOMBINANTE ZELLEN

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
NESS,J.E.: "GU056283.1", 《GENBANK》, 21 October 2009 (2009-10-21) *
NESS,J.E.: "GU056284.1", 《GENBANK》, 21 October 2009 (2009-10-21) *
NESS,J.E.: "GU056287.1", 《GENBANK》, 21 October 2009 (2009-10-21) *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104745490A (zh) * 2015-03-20 2015-07-01 上海应用技术学院 一种热带假丝酵母菌及利用其作为生物催化剂制备异辛酸的方法
CN104745490B (zh) * 2015-03-20 2017-08-25 上海应用技术学院 一种热带假丝酵母菌及利用其作为生物催化剂制备异辛酸的方法
CN108779470A (zh) * 2015-12-17 2018-11-09 赢创德固赛(中国)投资有限公司 用于酵母细胞中同源重组敲除的基因盒
CN106497912A (zh) * 2016-10-13 2017-03-15 江苏大学 一种扫频超声处理对数中期热带假丝酵母促进增殖的方法

Also Published As

Publication number Publication date
US8999684B2 (en) 2015-04-07
EP2377944A1 (de) 2011-10-19
EP2602312B1 (de) 2017-04-12
EP2322598A3 (de) 2011-07-13
EP2602311B1 (de) 2017-04-12
EP2602311A1 (de) 2013-06-12
JP2016034289A (ja) 2016-03-17
SG171538A1 (en) 2011-06-29
EP2602313A1 (de) 2013-06-12
EP2602312A1 (de) 2013-06-12
EP2322598A2 (de) 2011-05-18
ES2658421T3 (es) 2018-03-09
DE102009046626A1 (de) 2011-05-12
SG10201407242RA (en) 2014-12-30
ES2631987T3 (es) 2017-09-07
US20130183725A1 (en) 2013-07-18
US20110118433A1 (en) 2011-05-19
US9150890B2 (en) 2015-10-06
JP2011101643A (ja) 2011-05-26
EP2602313B1 (de) 2017-04-12
US20150140617A1 (en) 2015-05-21
ES2626442T3 (es) 2017-07-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102154139A (zh) 热带假丝酵母细胞及其用途
EP1513923B1 (en) Methods and materials for the production of d-lactic acid in yeast
KR102000317B1 (ko) 수성 배양 배지로부터 소수성 유기 용액을 분리하는 개선된 방법
Okamoto et al. Production of itaconic acid using metabolically engineered Escherichia coli
KR20150020619A (ko) 재조합 미생물 및 그에 대한 용도
CN102016024B (zh) 突变体酵母及使用其的物质生产方法
JP2012531903A (ja) アジピン酸を調製する生物学的方法
KR20170121147A (ko) 발효 경로를 통해 플럭스 증가를 나타내는 재조합 미생물
CN112204146A (zh) 具有受抑制的乙醇产生途径的耐酸酵母及使用其生产乳酸的方法
EP3205728B1 (en) Process for producing 7-dehydrocholesterol and vitamin d3
EP2899270A1 (en) Method for producing butanediol
JP2022046736A (ja) グリコール酸および／またはグリオキシル酸の製造のための方法および微生物
JP2014023528A (ja) 改変微生物及び該改変微生物を利用した１，４−ブタンジオールの生産方法
CN107619817B (zh) 生产3-脱氢莽草酸大肠杆菌重组菌株及其构建方法与应用
Mao et al. Succession of microbial community of the pit mud under the impact of Daqu of Nongxiang Baijiu
KR101555867B1 (ko) 3-하이드록시프로피온산을 분해하지 않는 슈도모나스 데니트리피칸스 결실 변이균주 및 이를 이용한 3-하이드록시프로피온산의 생산방법
KR102605543B1 (ko) 메티오닌-생산 효모
KR101965341B1 (ko) 해당과정이 조절된 재조합 미생물 및 이를 이용한 화합물의 생산방법
JP5737650B2 (ja) アセトイン産生細胞および当該細胞を用いたアセトインの製造方法
KR20150051880A (ko) 철에 의해 조절되는 ａｂｃ 트란스포터의 활성이 증가된 미생물 및 이를 이용한 히드록시카르복실산의 제조방법
EP2899273A1 (en) Gene, microorganism, conversion method, and production method
AU2010216617A1 (en) High-efficiency lactic acid manufacturing method using Candida utilis

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20110817

RJ01 Rejection of invention patent application after publication