CN102124337A - 用于疾病相关的硫醇化合物的快速测定的设备 - Google Patents

用于疾病相关的硫醇化合物的快速测定的设备 Download PDF

Info

Publication number
CN102124337A
CN102124337A CN2009801315877A CN200980131587A CN102124337A CN 102124337 A CN102124337 A CN 102124337A CN 2009801315877 A CN2009801315877 A CN 2009801315877A CN 200980131587 A CN200980131587 A CN 200980131587A CN 102124337 A CN102124337 A CN 102124337A
Authority
CN
China
Prior art keywords
detectable
fluid
amount
concentration
sample
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN2009801315877A
Other languages
English (en)
Other versions
CN102124337B (zh
Inventor
A.伯盖斯-卡斯勒
B.E.哈利
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
PDx Biotech LLC
Original Assignee
ALT Bioscience LLC
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ALT Bioscience LLC filed Critical ALT Bioscience LLC
Publication of CN102124337A publication Critical patent/CN102124337A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN102124337B publication Critical patent/CN102124337B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
    • G01N33/521—Single-layer analytical elements
    • G01N33/523—Single-layer analytical elements the element being adapted for a specific analyte
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
    • G01N33/56911—Bacteria
    • G01N33/56955—Bacteria involved in periodontal diseases
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6803—General methods of protein analysis not limited to specific proteins or families of proteins
    • G01N33/6806—Determination of free amino acids
    • G01N33/6812—Assays for specific amino acids
    • G01N33/6815—Assays for specific amino acids containing sulfur, e.g. cysteine, cystine, methionine, homocysteine
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/18—Dental and oral disorders

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Bioinformatics & Computational Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
  • Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)

Abstract

公开的是用于测定流体的样品中硫醇化合物的浓度的单次使用的可丢弃的制品，以及如何制造和使用所述制品的说明。

Description

用于疾病相关的硫醇化合物的快速测定的设备
关于联邦政府赞助的研究&开发的声明
在本申请中描述的发明不是根据任何联邦政府赞助的研究或开发而作出的。
发明背景
直到最近，口腔和全身健康状态之间的密切关系还未充分地了解，并且很大程度上被忽视。然而，现在强力的身体证据表明的是，口腔疾病例如牙周炎，与影响全身的失调紧密地相关，例如心血管疾病、II型糖尿病和早产。
发明概述
牙周炎的诊断是以及仍然是费力的过程，其中围绕每个牙齿的牙周袋中的空间必需被多次探测，同时患者在牙医的椅子上坐很长时间。传统的诊断操作中涉及的时间和不适阻挡了患者，导致这种严重的但可治疗的状况总体是不良诊断的。
牙周炎涉及宿主组织的微生物感染和宿主的炎性反应。虽然在分析上是可分的，这两个方面实际上串联地作用，在数年和实际上数十年的时间上引起组织破坏的代价。
鉴于这种长期的远景，牙周炎可以看作是连续事件的一部分，其中某些微生物的水平逐渐地提高，常常伴随提高的炎症。这样，从与良性的微生物过度生长时可能出现的相关的口臭，到齿龈炎和牙周炎，显示了正反馈环的特征，其原则上可以通过合适的预防和/或治疗介入来中断。
这种破坏性螺旋的一个独特的生物化学特征是随着受试者从口臭发展到齿龈炎到牙周炎，某些口腔流体中硫醇化合物水平的提高。硫醇化合物是带有-SH或巯基官能团的化合物，被认为也包括硫化物阴离子（HS-）以及带有硫醇阴离子（RS-）的化合物。
口腔流体中硫醇化合物的测量一般涉及填满电路的复杂的装置，或多个步骤、多个容器、耗时的分析。因此，存在着对测量口腔流体中硫醇化合物的简单、快速和低成本方式的长期需要。
本发明满足了这种长期需要，并附带地解决了快速和方便地测定流体中硫醇水平的更一般的难题，以及快速和方便地评估受试者的各种状况和/或疾病的风险的更具体的难题。
本发明提供了用于测定流体的样品中硫醇化合物的浓度的单次使用的可丢弃的制品。
附图的简要说明
本专利或申请文件含有至少一个以彩色制作的图画。带有彩色附图的本申请或专利申请公开物的拷贝将在请求和支付了必要的费用时由美国专利商标局提供。
附图1描绘了直接接触法。附图1A描绘了具有吸饱了试剂溶液的垫片的测试条。箭头表明测试样品的应用。附图1B描绘了在一段时间后的测试棒，其中垫片在口腔流体进入垫片后（例如，舌接触）产生颜色，与试剂反应来为垫片赋予颜色改变。
附图2A-2D描绘了直接接触方法。
附图3A-3E描绘了可选择的测试条结构。
附图4A和4B描绘了间接接触设备（近端/远端型）。
附图5描绘了间接接触设备的实例（屏罩型）。
附图6描绘了间接接触设备的实例（屏罩型）。
附图7A-7D描绘了间接接触设备的各种实施方式，其中折叠或滑动使得分离的部件彼此接触。
附图8A-8F描绘了本发明的各种包装设计。
附图9描绘了间接接触设备的实例。
附图10描绘了间接的有盖的采集器设备的实例。
附图11显示了用原型TDR溶液处理的、在短期稳定性研究中使用的材料的结果。
附图12显示了从垫片释放的试剂的量。
附图13显示了与呈现的TDR的量相比较的信号水平（可见的输出）的图形。
发明的详细说明
本发明提供了用于测定流体的样品中硫醇化合物的浓度的单次使用的可丢弃的制品。
本发明的以下的详细说明意图被诊断测试条和化学领域的技术人员理解。因此，详细说明中采用的术语意图一般地具有它们在诊断测试条和化学领域中普通的含义。在所采用的术语没有为这些领域所特有的一般含义时，这些术语意图是具有同时代的美国英语运用之内的普通含义，其中的使用意图是具有持久的法律效力。如果任何术语在本文件的文本中被定义或澄清，本文件的文本内的定义或澄清意图控制该术语的任何其他含义。
当与本发明联系使用时，“5,5’-二硫代双-（2-硝基苯甲酸）”、“5-（2-氨乙基）-二硫代-2-硝基苯甲酸”、“N,N'-二（4-硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺” “N,N'-二（3-硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺”、“N,N'-二（2-硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺”、“N,N'-二（2,4-二硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺”和“N,N'-二（4-nitrocinnamalylidene）-4,4'-二硫代二苯胺” 不仅是指相应的化学组成本身，还指任何它的盐，包括任何它的化妆学和/或药学上可接受的盐。
当与本发明联系使用时，“吸收材料”是指纤维材料。在某些实施方式中，所述吸收材料是合成的、生物相容的、无纺的和/或多孔的/材料。吸收材料可以是，例如，包含聚酰胺的纤维材料。相信的是，吸收材料可以是例如美国专利NO.7,290,668中描述的材料。吸收材料可以是TRANSORB®牌的材料（TRANSORB是Filtrona Richmond, Inc .的注册商标），例如称为R-27378或R28445 D#4345的TRANSORB®牌材料，可从Filtrona Fibertec, Richmond, Virginia, US获得。
当与本发明联系使用时，“流体”是指至少其相当部分可以经历流动的材料。气体和液体是流体。流体不必是匀质的，但是可以含有偶发的颗粒或其它外来物质。因此，唾液、龈沟液、龈线生物膜、舌生物膜、舌刮擦物和呼吸是流体，这些的任意多种的混合物也是，虽然这些当中的任何可以含有某些固体。
当与本发明联系使用时，“基质”是指根据本发明的物体的部分或部件，样品可以被采集在其中和/或其上，不是指被采样的流体，也不是指该流体中的被分析物。
当与本发明联系使用时，“样片(swatch)”是指代表性的颜色样本。
本发明在许多实施方式中提供，尤其是，可以在各个方面中了解。以下方面提供了本发明的广度和可用性的说明性但非限制性的描述。本发明提供了以下方面的每一个：
方面1. 一种用于测定流体的样品中硫醇化合物的浓度的单次使用的可丢弃的制品，所述制品包括：
(a) 包含至少一种吸收材料的基质，所述基质能够吸收所述样品；和
(b) 一定量的检测试剂，在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后的时间期间，所述检测试剂的量能够提供表明所述样品中硫醇化合物的浓度的信号。
方面2. 方面1的制品，其中所述制品是测试条。
方面3. 方面1的制品，其中所述流体的样品是生理性流体的样品。
方面4. 方面3的制品，其中所述生理性流体是口腔流体。
方面5. 方面4的制品，其中所述口腔流体包括唾液和/或龈沟液和/或龈线生物膜和/或舌生物膜和/或舌刮擦物和/或呼吸。
方面6. 方面1的制品，其中所述至少一种吸收材料包括聚酰胺材料。
方面7. 方面1的制品，其中所述检测试剂包括以下的至少一种：5,5'-二硫代双-（2-硝基苯甲酸）；5-（2-氨乙基）-二硫代-2-硝基苯甲酸；N,N'-二（4-硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（3-硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（2-硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（2,4-二硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（4-nitrocinnamalylidene）-4,4'-二硫代二苯胺。
方面8. 方面7的制品，其中所述检测试剂是5,5'-二硫代双-（2-硝基苯甲酸）。
方面9. 方面1的制品，其中所述时间在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后约一秒开始，在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后约十分钟结束。
方面10. 方面1的制品，其中所述时间在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后约五秒开始，在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后约五分钟结束。
方面11. 方面1的制品，其中所述信号包括电磁信号。
方面12. 方面11的制品，其中所述电磁信号包括可见信号。
方面13. 一种用于测定流体的样品中硫醇化合物的浓度的方法，所述方法包括：
(a) 提供单次使用的可丢弃的制品，其包含 （i）包含至少一种吸收材料的基质，所述基质能够吸收所述样品；和（ii）一定量的检测试剂，在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后的时间期间，所述检测试剂的量能够提供表明所述样品中硫醇化合物的浓度的信号；
(b)使所述基质与所述样品接触；
(c) 观察由所述检测试剂的量提供的信号；
(d)将所述检测试剂的量所提供的信号与一个或更多个参考值比较，参考值的每一个是硫醇化合物的浓度的指示，
从而测定所述样品中硫醇化合物的浓度。
方面14. 方面13的方法，其中所述流体是生理性流体。
方面15. 方面14的方法，其中所述生理性流体是口腔流体。
方面16． 方面15的方法，其中所述口腔流体包括唾液和/或龈沟液和/或龈线生物膜和/或舌生物膜和/或舌刮擦物和/或呼吸。
方面17. 方面13的方法，其中所述制品是测试条。
方面18． 方面13的方法，其中所述至少一种吸收材料包括聚酰胺材料。
方面19. 方面13的方法，其中所述检测试剂包括以下的至少一种：5,5'-二硫代双-（2-硝基苯甲酸），也称为DTNB；5-（2-氨乙基）-二硫代-2-硝基苯甲酸；N,N'-二（4-硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（3-硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（2-硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（2,4-二硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（4-nitrocinnamalylidene）-4,4'-二硫代二苯胺。
方面20． 方面19的方法，其中所述检测试剂是5,5'-二硫代双-（2-硝基苯甲酸）。
方面21. 方面13的方法，其中所述时间在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后约一秒开始，在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后约十分钟结束。
方面22. 方面13的方法，其中所述时间在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后约五秒开始，在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后约五分钟结束。
方面23. 方面13的方法，其中所述信号包括电磁信号。
方面24． 方面23的方法，其中所述电磁信号包括可见信号。
方面25． 方面24的方法，其中所述一个或更多个参考值的每一个是作为（a）颜色的样片和（b）硫醇化合物的浓度的配对的组合提供的。
方面26. 一种用于测定哺乳动物受试者患有特定疾病的风险的方法，所述方法包括：
(a)提供单次使用的可丢弃的制品，其包含 （i）包含至少一种吸收材料的基质，所述基质能够吸收所述样品；和 （ii）一定量的检测试剂，在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后的时间期间，所述检测试剂的量能够提供表明所述样品中硫醇化合物的浓度的信号；
(b)使所述基质与包含来自所述受试者的一种或更多种生理性流体的样品接触；
(c) 观察由所述检测试剂的量提供的信号；
(d)将所述检测试剂的量提供的信号与一个或更多个参考值比较，所述参考值的每一个是受试者患有特定疾病的风险的指示，从而确定所述受试者患有特定疾病的风险。
方面27. 方面26的方法，其中所述流体是生理性流体。
方面28. 方面27的方法，其中所述生理性流体是口腔流体。
方面29. 方面28的方法，其中所述口腔流体包括唾液和/或龈沟液和/或龈线生物膜和/或舌生物膜和/或舌刮擦物和/或呼吸。
方面30． 方面26的方法，其中所述制品是测试条。
方面31. 方面26的方法，其中所述至少一种吸收材料包括聚酰胺材料。
方面32. 方面26的方法，其中所述检测试剂包括以下的至少一种：5，5 '-二硫代双-（2-硝基苯甲酸）；5-（2-氨乙基）-二硫代-2-硝基苯甲酸；N,N'-二（4-硝基苯亚甲基）-4,4 '-二硫代二苯胺；N,N'-二（3-硝基苯亚甲基）-4,4 '-二硫代二苯胺；N,N'-二（2-硝基苯亚甲基）-4,4 '-二硫代二苯胺；N,N'-二（2,4-二硝基苯亚甲基）-4,4 '-二硫代二苯胺；N,N'-二（4-nitrocinnamalylidene）-4,4'-二硫代二苯胺。
方面33. 方面32的方法，其中所述检测试剂是5,5'-二硫代双-（2-硝基苯甲酸）。
方面34. 方面26的方法，其中所述时间在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后约一秒开始，在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后约十分钟结束。
方面35. 方面26的方法，其中所述时间在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后约五秒开始，在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后约五分钟结束。
方面36. 方面26的方法，其中所述信号包括电磁信号。
方面37. 方面36的方法，其中所述电磁信号包括可见信号。
方面38. 方面37的方法，其中所述一个或更多个参考值的每一个是作为（a）颜色的样片和（b）受试者患有特定疾病的风险的配对的组合提供的。
方面39. 方面23的方法，其中所述观察和/或比较的步骤的至少一个是由自动化的读取器进行的。
方面40． 方面36的方法，其中所述观察和/或比较的步骤的至少一个是由自动化的读取器进行的。
方面41. 方面38的方法，其中所述特定疾病是牙周炎。
方面42. 方面38的方法，其中所述特定疾病是齿龈炎。
方面43. 方面38的方法，其中所述特定疾病是口臭。
方面44. 方面38的方法，其中所述特定疾病是心血管疾病。
方面45. 方面38的方法，其中所述特定疾病是II型糖尿病。
方面46. 方面38的方法，其中所述特定疾病是早产。
方面47. 一种试剂盒，包含：
（a） 至少一个用于测定流体的样品中硫醇化合物的浓度的单次使用的可丢弃的制品，所述制品包括：
（i）包含至少一种吸收材料的第一基质，所述基质能够吸收所述样品；和
（ii）一定量的检测试剂，在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后的时间期间，所述检测试剂的量能够提供表明所述样品中硫醇化合物的浓度的可见信号；
（b） 比较物，其上印刷和/或固定了：
（i）至少一个颜色样片，相对所述颜色样片来比较所述可见信号；和
（ii）与每个颜色样片相联系的，表明与所述颜色样片相关的硫醇化合物的相对浓度的字母数字标识符；
（c） 任选地，适合于含有所述制品和所述比较物的包装；
（d） 任选地，所述制品和所述比较物的使用说明书。
方面48. 方面12的制品，进一步包括比较物区域，所述比较物区域包含至少一个颜色样片，相对所述颜色样片来比较所述可见信号。
方面49. 一种用于测定来自哺乳动物受试者的流体的样品中硫醇化合物的浓度的单次使用的可丢弃的测试条，所述测试条包括：
(a) 包含至少一种吸收材料的基质，所述基质能够吸收所述样品；和
(b) 一定量的检测试剂，在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后的时间期间，所述检测试剂的量能够提供表明所述样品中硫醇化合物的浓度的信号。
方面50． 方面49的测试条，其中所述流体包括唾液和/或龈沟液和/或龈线生物膜和/或舌生物膜和/或舌刮擦物和/或呼吸。
方面51. 方面49的测试条，其中所述检测试剂包括以下的至少一种：5，5'-二硫代双-（2-硝基苯甲酸）；5-（2-氨乙基）-二硫代-2-硝基苯甲酸；N,N'-二（4-硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（3-硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（2-硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（2,4-二硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（4-nitrocinnamalylidene）-4,4'-二硫代二苯胺。
方面52. 方面51的测试条，其中所述检测试剂是5,5'-二硫代双-（2-硝基苯甲酸）。
方面53. 方面49的测试条，其中所述时间在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后约一秒开始，在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后约十分钟结束。
方面54. 方面49的测试条，其中所述时间在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后约五秒开始，在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后约五分钟结束。
方面55. 方面49的测试条，其中所述信号包括电磁信号。
方面56. 方面55的测试条，其中所述电磁信号包括可见信号。
方面57. 一种用于测定哺乳动物受试者患有特定疾病的风险的单次使用可丢弃的测试条，所述测试条包括：
(a) 包含至少一种吸收材料的基质，所述基质能够吸收所述样品；和
(b)一定量的检测试剂，在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后的时间期间，所述检测试剂的量能够提供表明所述受试者患有特定疾病的风险的信号，和其中
（i）所述检测试剂包括以下的至少一种：5,5'-二硫代双-（2-硝基苯甲酸）；5-（2-氨乙基）-二硫代-2-硝基苯甲酸；N,N'-二（4-硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（3-硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（2-硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（2,4-二硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（4-nitrocinnamalylidene）-4,4'-二硫代二苯胺；和（ii）所述特定疾病是以下至少一种：牙周炎、齿龈炎、口臭、心血管疾病、II型糖尿病、早产。
方面58. 方面57的测试条，其中所述检测试剂包含5,5'-二硫代双-（2-硝基苯甲酸）。
方面59. 方面57的测试条，其中所述特定疾病是牙周炎。
方面60. 方面57的测试条，其中所述特定疾病是齿龈炎。
方面61. 方面57的测试条，其中所述特定疾病是口臭。
方面62. 方面57的测试条，其中所述特定疾病是心血管疾病。
方面63. 方面57的测试条，其中所述特定疾病是II型糖尿病。
方面64. 方面57的测试条，其中所述特定疾病是早产。
方面65. 一种试剂溶液，包含：缓冲液、5,5'-二硫代双（2-硝基苯甲酸）（DTNB）和湿润剂。
方面66. 方面65的试剂溶液，其中所述缓冲液是浓度约5 mM到200 mM的磷酸钠缓冲液。
方面67. 方面65的试剂溶液，其中所述缓冲液是浓度约20 mM到150 mM的磷酸钠缓冲液。
方面68. 方面65的试剂溶液，其中所述缓冲液是浓度约100mM的磷酸钠缓冲液。
方面69. 方面65的试剂溶液，其中所述缓冲液pH值约6.5到8.5。
方面70. 方面65的试剂溶液，其中所述缓冲液pH值约6.5到7.5。
方面71. 方面65的试剂溶液，其中所述缓冲液pH值约7.0。
方面72. 方面65的试剂溶液，其中所述DTNB以约10 mg/L到150 mg/L的浓度存在。
方面73. 方面65的试剂溶液，其中所述DTNB以约80 mg/L到120 mg/L的浓度存在。
方面74. 方面65的试剂溶液，其中所述DTNB以约100 mg/L的浓度存在。
方面75. 方面65的试剂溶液，其中所述湿润剂包括甘油、木糖醇、山梨醇、甘油或丙二醇。
方面76. 方面75的试剂溶液，其中所述湿润剂包括甘油。
方面77. 方面76的试剂溶液，其中所述甘油以按体积约0.1%到5.0%的浓度存在。
方面78. 方面76的试剂溶液，其中所述甘油以按体积约0.5%的浓度存在。
方面79. 方面75的试剂溶液，其中所述湿润剂包括木糖醇。
方面80. 方面79的试剂溶液，其中所述木糖醇以按重量约2%到10%的浓度存在。
方面81. 方面79的试剂溶液，其中所述木糖醇以按重量约4%的浓度存在。
方面82. 方面65的试剂溶液，进一步包含调味剂或香剂。
方面83. 方面82的试剂溶液，其中所述调味剂或香剂是薄荷。
方面84. 方面65的试剂溶液，进一步包含醇。
方面85． 方面84的试剂溶液，其中所述醇是异丙醇或乙醇。
方面86． 方面65的试剂溶液，进一步包含碱土金属或过渡金属。
方面87． 方面86的试剂溶液，其中所述金属包括锰、镁或钴。
方面88． 一种包含固体基底的检测设备，所述固体基底包含检测区域，其中所述检测区域浸透方面65-87的任一项的试剂溶液。
方面89. 方面88的检测设备，其中所述试剂溶液被干燥。
方面90． 方面88的检测设备，其中所述固体基底是惰性纤维的垫片。
方面91． 方面90的检测设备，其中所述纤维包括美国专利NO. 7,290,668中描述的至少一种材料。
方面92． 方面90的检测设备，其中所述纤维包含称为R-27378或R28445 D#4345的TRANSORB®牌材料。
方面93． 方面88的检测设备，其中所述固体基底是矩形的，或由一个或多个模切的形状组成，一般最多达约8 mm×8 mm，厚度约1.0 mm。
方面94． 方面90-93的检测设备，其中所述固体基底进一步包含一个或更多个标准区域。
方面95． 方面94的检测设备，其中所述一个或更多个标准区域包含预定颜色和强度的比色标准。
方面96． 一种制造硫醇化合物检测设备的方法，包括：使固体基底与根据方面65-87的任一项的试剂溶液接触，以及干燥所述设备。
方面97． 通过方面96的方法制造的检测设备。
方面98． 一种检测受试者中的口臭的方法，包括使采自所述受试者的口腔的生理性流体与方面88或方面97的检测设备接触来形成接触了生理性流体的设备，以及检测所述接触了生理性流体的设备中硫醇化合物浓度水平，其中至少约40微摩尔的硫醇的水平是口臭的指示。
方面99． 一种检测受试者中的齿龈炎的方法，包括使采自所述受试者的口腔的生理性流体与方面88或方面97的检测设备接触来形成接触了生理性流体的设备，以及检测所述接触了生理性流体的设备中硫醇化合物浓度水平，其中至少约80微摩尔的硫醇的水平是齿龈炎的指示。
方面100． 一种检测受试者中的牙周病的方法，包括使采自所述受试者的口腔的生理性流体与方面88或方面97的检测设备接触来形成接触了生理性流体的设备，以及检测所述接触了生理性流体的设备中硫醇化合物浓度水平，其中至少约160微摩尔的硫醇的水平是牙周病的指示。
方面101． 方面98、99或100的任一项的方法，其中所述检测是通过比较（a）接触了生理性流体的设备与（b）标准物的颜色强度或吸光度来进行的。
方面102． 方面101的方法，其中所述检测是通过眼睛进行的。
方面103． 方面101的方法，其中所述检测是通过机械进行的。
方面104． 方面101的方法，其中所述检测是通过分光光度计进行的。
方面105． 方面101的方法，其中所述检测提供了定量或半定量的信号。
方面106． 方面98、99或100的任一项的方法，其中所述生理性流体是GCF、舌刮擦物、舌生物膜、龈线生物膜、唾液或呼吸。
方面107． 一种对于口腔硫醇化合物的检测有用的测试试剂盒，包括方面65的试剂溶液、方面88的检测设备或方面97的检测设备。
本发明的进一步的方面。本发明尤其地在以下进一步的方面中提供。
在正常的状况中，许多微生物在人体之上或之中生存而不引起对这些人的损害。然而，某些微生物的提高的量可能与疾病状态相关联。特别有问题的是产生对人类有毒的显著浓度的化学物的微生物量的提高。这样的毒素包括：挥发性的含硫化合物（VSC），例如，硫化氢、甲硫醇、二甲基二硫醚和二甲基硫。更高浓度的挥发性硫化合物与某些疾病状态相关，并与社交的非难状况相关，例如口臭，或呼吸臭。期望的是允许挥发性硫化合物的容易的检测，以促进潜在致病微生物的存在的检测，以及这些微生物相关的疾病状态和状况的检测。
口腔细菌产生的主要的VSC是硫化氢和甲硫醇。硫化氢由细菌酶 L－半胱氨酸脱巯基酶产生，所述酶降解氨基酸 L－半胱氨酸产生硫化氢、铵和2-丙酮酸。另一种主要的VSC，甲硫醇，在细菌酶 L－甲硫氨酸γ裂解酶的作用下产生，所述酶分解氨基酸 L－甲硫氨酸产生甲硫醇、铵和2-丁酮酸。
已经报道了毫摩尔水平的VSC在患有严重牙周病的人的龈沟液（GCF）中出现。VSC的存在给患有疾病的人的呼吸带来恶臭。除了恶臭之外，VSC还显示了是有毒的以及不利地影响许多哺乳动物酶。在口腔内的舌背面和其他地方寄居的细菌的VSC产生给呼出的呼吸带来恶臭，引起口臭。几种口腔流体的每一种中的VSC的水平与牙周病活性的水平直接相关。呼出气中VSC的水平与呼吸臭或口臭的水平直接相关。
虽然本领域中DTNB的比色反应可能被认为在pH 8.0下最佳地工作，DTNB的水溶液在这样的条件下在室温下保存几天时是不稳定的。出乎意料地发现的是，包含金属盐以及约中性的pH值的调整赋予了显著地延长的储存期限的有利性质。举例来说和非限制性的，发现的是，当混合物包括磷酸盐或咪唑缓冲液，pH 7.0和0.1 mM氯化锰时，DTNB混合物在室温下维持稳定超过一年。因此，本发明尤其地提供了产色的组合物，其吸光度与和所述组合物混合的流体中VSC的浓度直接相关，并且所述组合物具有至少一年的储存期限。
根据本发明的制品和/或方法和/或组合物对于检测口腔流体中存在的、以及由舌背面寄居的尤其是细菌产生的、和来自齿龈缝的GCF中的恶臭性毒素的存在是有用的。
例如，在根据本发明的方法的一个方面中，通过根据本发明的制品的至少基质部分轻轻地接触受试者的口腔中的口腔流体，从而来自受试者口腔的口腔流体被吸收到所述制品的基质部分中，来获得口腔流体的样品，然后等待数秒到数分钟之间的时间，此后观察在所述制品的基质部分上产生的颜色，所述颜色然后与和所述制品一起提供的颜色比较物图表上的一种或更多种颜色比较。
举例来说而非限制性的，根据本发明的检测VSC的方法可以具有10微摩尔VSC级别的检测下限，以及2毫摩尔VSC级别的响应范围的上限。
本发明还提供了检测呼出呼吸中VSC的方法。受试者向紧靠受试者口腔持握的根据本发明的制品上呼出呼吸，呼出呼吸的冷凝物接触并被吸收到所述制品的基质部分中。
根据本发明的制品和/或方法和/或组合物的使用简单性促成了护理专业人员的办公室内测试和受试者的家庭测试。根据本发明的制品和/或方法和/或组合物更一般地对于样品中VSC的检测是有用的，所述样品包括空气、水、油和/或与粮食或食物接触的其他流体，因此对于微生物代谢作用的产物、致病微生物、口臭、VSC污染、食物腐败或污染的检测也是有用的。
本发明在许多实施方式中提供，尤其是，可以在各个实施例中了解。以下实施例提供了本发明的广度和可用性的说明性但非限制性的描述。
实施例1． 根据本发明的制品的实施方式的制造。选择吸收材料。一片选定的吸收材料浸入溶液中，所述溶液含有溶剂和检测试剂以及任选地其他成分。在一段时间以后，片层从溶液中取出并干燥。干燥的片层固定在塑料背衬上形成片层-背衬叠层。片层-背衬叠层切割成条，所述条的每一个是根据本发明的制品。
实施例2． 吸收材料。例如在美国专利NO. 7,290,668中描述的材料或其他类似的材料可以用作吸收材料。材料例如称为R-27378或R28445 D#4345和可从Filtrona Fibertec, Richmond, Virginia, US获得的TRANSORB®牌材料可以用作吸收材料。
实施例3． 检测试剂。检测试剂可以包括5,5'-二硫代双-（2-硝基苯甲酸）；5-（2-氨乙基）-二硫代-2-硝基苯甲酸；N,N'-二（4-硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（3-硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（2-硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（2,4-二硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；和/或N,N'-二（4-nitrocinnamalylidene）-4,4'-二硫代二苯胺。二硫代二苯胺化合物，例如在美国专利NO. 4,414,414的实施例1-13的任一个中描述的，作为检测试剂是合适的。
实施例4． 含有溶剂和检测试剂的溶液。水可以用作5,5'-二硫代双-（2-硝基苯甲酸）的溶剂。非水性溶剂可以用作N,N'-二（4-硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（3-硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（2-硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（2,4-二硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；和/或N,N'-二（4-nitrocinnamalylidene）-4,4'-二硫代二苯胺的溶剂。
实施例5． 含有溶剂和检测试剂的溶液的任选的其他成分。对于水溶液，本领域已知的水可混溶的醇类，例如，异丙醇，可以被包括来促进片层的干燥。本领域已知的缓冲液，例如，磷酸钠，可以被包括用于pH值稳定在接近中性和由此检测试剂的稳定。本领域已知的湿润剂，例如，木糖醇、山梨醇、甘油或丙二醇，可以被包括，从而根据本发明的制品可以保持稍微潮湿和不会不必要地易碎。本领域已知的二价阳离子的化妆上可接受的盐，例如，氯化锰、氯化镁或氯化钴，可以被包括用于根据本发明的未使用的制品的颜色-固定。本领域已知的二价阳离子的化妆上可接受的螯合剂，例如，乙二胺四乙酸（EDTA）可以被包括，用于在根据本发明的制品的使用期间产生的颜色的稳定。本领域已知的香味素、本领域已知的着色剂和/或本领域已知的抗微生物剂也可以任选地被包括。
实施例6． 直接和间接接触设备。在第一个示范性的实施方式中，根据本发明的制品是薄的和浅的正矩形棱柱体。占据最大表面积的棱柱的两个面之一的末端部分、固定于其上的是正矩形的棱柱状的第一垫片。第一垫片含有检测试剂。这种实施方式预计用于样品与检测试剂的直接接触。在第二个示范性的实施方式中，对于样品与检测试剂的间接接触，正矩形的棱柱状的第二垫片置于与第一个示范性的实施方式中固定第一垫片的同一面的对侧末端上，所述制品沿着这个面的纬度方向的轴卷曲，以具有“V”形形状，第一垫片处在“V”形的一个臂的末端，第二垫片处在另一个臂的末端。在这个实施方式中，第二垫片没有检测试剂。第二垫片与样品接触。第二垫片然后与第一垫片接触，从而将所述样品的至少一部分从第二垫片转移到第一垫片。
实施例7． 垫片颜色和检测试剂的组合的选择以便于结果的可视化。在合适的条件下，DTNB在与硫醇化合物反应时提供了黄色的信号。在一个实施方式中，类似于上述第一个示范性的实施方式中的制品用白色垫片制成。观察到的是，淡黄色颜色有时是人眼难以针对比较物来辨别的，DTNB提供的黄色信号将与所述比较物来比较，其带有白色的样片和相应于各种硫醇浓度的各种浓淡的黄色的样片。在一个可选择的实施方式中，类似于上述第一个示范性的实施方式中的制品用蓝色垫片制成。观察到的是，在这个蓝色背景上产生的黄色可以向人眼呈现绿色，在某些情况下比在白色背景上产生的黄色更容易辨别。对于这种可选择的实施方式，提供了比较物，DTNB提供的信号将针对所述比较物来比较，其带有蓝色的样片（来匹配未反应的垫片）、和与各种硫醇浓度相应的各种浓淡的绿色的样片。
实施例8． 根据本发明的制品用于诊断目的的用途：筛选牙周病的唾液测试条的临床研究。制备根据本发明的唾液测试条，其具有浸透显色试剂的多孔的垫片，所述显色试剂检测微生物硫化合物。这项研究比较了有和没有牙周疾病的受试者中的唾液条（SS）分值，并检查了SS分值和牙周病状态的临床度量之间的关系。编入了七十三位受试者，平均年龄（SD）44.73（19.61）,年龄范围23到85岁，男性百分比55%，白种人百分比44%。对每个牙齿的6个位点进行牙周病学评估，包括菌斑指数（PI）、齿龈指数（GI）、临床的牙周病学附着体水平（AL）和探查时的出血（BOP）。受试者分成3个组：牙周健康的（没有附着体的损失和没有牙龈出血，18位受试者）、齿龈炎（没有附着体的损失和存在牙龈出血，32位受试者）、和牙周炎（在5颗或更多牙齿中附着体的损失> 5 mm，23位受试者）。产色的条被用于从所有存在的牙齿的牙龈缘采集唾液流体（每个牙龈1条）。根据比色图表对显色反应计分。计分检查人对临床状态是不知晓的。在平均SS分值和GI（r=0.6，p=0.001）和AL（r=0.47，p = 0.001）之间发现了良好到中度的相关性。方差分析显示了在三个研究组之间SS分值的显著差异（p= 0.03）；post-hoc分析显示了健康和牙周炎之间的差异（p = 0.01）。结果表明这些条作为牙周疾病的筛选测试是有用的。它们使用简单，提供了快速的结果，不需要临床的专门技能。同样的测试可以在任何医学的/牙科的环境中容易地进行。
实施例9． 用于检测/估计溶解的口腔硫醇的装置和方法。口腔的口臭和牙周疾病经常涉及挥发性硫化合物（VSC）、主要是硫化氢和甲硫醇的微生物产生。历史上，工作集中于检测它们在呼出呼吸中的存在，而不是微生物的生物膜内的存在。这项研究的目的是开发针对溶解的硫醇的测试条，其提供了快速可见的结果，易于使用，对口腔组织没有刺激。筛选了各种材料在用含有根据本发明的方面7的硫醇检测试剂的溶液预处理之后提供对溶解的硫醇的视觉可辨别反应的能力。通过用添加的硫醇攻击清洗液，光谱学地估计了干燥的检测试剂从垫片浸出的倾向。原型测试条置入稳定性研究中以估计货架寿命。由独立的实验室进行了刺激测试。最后，改变检测试剂的浓度，来确定是否可以达到不同的“截止”结果显色。鉴定了多孔的垫片材料，其具有良好的物理性质并且适合于硫醇检测试剂和它的生色产物。一旦干燥在垫片上，试剂显示了在再水化时浸出的很低倾向，维持了良好的光谱反应，显示了随着时间的过去的合理的稳定性。当与标准的口腔护理产品比较时，发现所述试剂对于培养的齿龈组织细胞是非刺激性的。最后，通过提高或降低试剂浓度（垫片中检测物的量），我们发现我们可以操纵测试的平台期显色。这些结果表明本发明包含的测试条作为检测口臭和牙周疾病致病病原体的辅助是有用的。
实施例10． 利用原型测试条的溶解的口腔硫醇的检测。革兰氏阴性厌氧菌一般对口臭和牙周病特征性的硫化合物负责。当活跃时，它们可以通过标记代谢活性，例如，硫化氢和甲硫醇的产生来检测。这些可以在气相中，例如在通过口腔呼出的呼吸中检测，然而这样的技术需要昂贵的装置。因此，制备了相对便宜的、易于使用和解释的原型测试条，其可以检测溶解在水性液体中的挥发性和非挥发性的硫醇。这项研究的目的是：1）确定测试条检测舌背面的口腔流体中的硫醇的能力；2）确定测试条检测齿龈表面的口腔流体中的硫醇的能力；3）比较舌表面的发现和齿龈表面的发现；和 4）比较测试条结果与利用气相色谱法分析的样品。制备原型，其类似于和呈现为像可丢弃的pH值测试条。它们由软质塑料背衬上的多孔垫片组成。在装配之前，垫片用硫醇检测物溶液处理并干燥。利用标准的硫醇溶液，产生比色图表，它的颜色条（样片）与硫醇的具体浓度相关。图表随后用于估计未知的流体样品中的硫醇浓度。在采集自舌背面的流体、以及来自齿龈表面的流体中检测溶解的硫醇。在小的研究群体中，来自舌背面的溶解的硫醇的平均水平（15 μM）相对低于自齿龈表面发现的（88 μM）。总体上，具有可检测的口腔流体硫醇（任何来源）的个体显示了一般更高水平的挥发性的硫醇，如通过气相色谱法测量的。因此，开发了快速和容易的分析，其能够检测口腔流体中溶解的硫醇。舌背面和齿龈生物膜具有潜在的诊断价值，每一种显示了与呼出呼吸中可测量的原始挥发性硫醇相关。这些结果表明，类似这些的测试条也可以在期望估计的溶解的硫醇时一般地使用。
另外，以下提供了本发明的进一步描述和实施例说明。
本发明提供了尤其是检测硫醇化合物的试剂溶液、检测设备和产色方法，所述硫醇化合物包括寄居在舌背面上和齿龈缝中的口腔细菌产生的挥发性的硫化合物（VSC）。如在此使用的，“硫醇化合物”是指具有硫醇或“-SH”官能团的分子，或具有硫醇盐或硫化物阴离子的分子。含硫分子的实例包括硫化氢和甲硫醇（methanethiol，甲硫醇）。在本发明的某些实施方式中，根据本发明的产色组合物的吸光度与同所述组合物混合的流体中硫醇化合物的浓度直接相关。
根据本发明的组合物和方法对于检测舌背面上和获自齿龈缝的GCF中寄居的细菌所产生的恶臭性毒素的存在是有用的。
例如，在根据本发明的方法的方面中，通过针对舌背面轻轻地摩擦测试条获得舌刮擦物，来形成装载了刮擦物的敷涂器尖端。另外，或作为选择，测试条可以用唾液湿润。在另一个实施方式中，通过将消毒的纸吸收点插入到齿龈缝中来获得GCF样品。产生发色团的测试条或吸收点的颜色与颜色编码图表上的标准或与内部对照物比较。在某些实施方式中，图表按照黄色的浓淡分级，从相应于20-100微摩尔硫醇的LOW（淡黄）、相应于100-200微摩尔硫醇的MEDIUM（黄色）到相应于>200微摩尔硫醇的HIGH（亮黄）。
本发明提供了，尤其是，含有缓冲液、5,5’-二硫代双（2-硝基苯甲酸）（DTNB）和湿润剂的试剂溶液。当与本发明联系使用时，“DTNB”是指 5,5’-二硫代双（2-硝基苯甲酸）。DTNB也称为Ellman's试剂，具有CAS编号69-78-3。不希望受理论的限制，发明人相信，本领域已知的是DTNB与从H2S或CH3SH中存在的-SH官能团形成的硫化物或硫醇阴离子反应。在这样的反应中，DTNB的二硫化物硫之一被HS-或CH3S-阴离子攻击，此时释放 5-硫代2-硝基苯甲酸盐阴离子（TNB）。TNB与互变的硫代苯醌平衡地存在。硫代苯醌具有在412 nm处最大的吸收（吸光度），13,600M-1cm-1的摩尔消光系数。这容许反应通过混合物的黄色的提高来光谱学地或视觉上定量。
本发明还提供了检测设备，其是固体基底，例如，多孔质固体基底，包括检测区域，其中所述检测区域浸透了含有缓冲液、5,5’-二硫代双（2-硝基苯甲酸）（DTNB）和湿润剂的试剂溶液。
本发明还提供了制造对于检测生理性流体中硫醇化合物有用的检测设备的方法。所述制造方法包括使固体基底与含有缓冲液、5,5’-二硫代双（2-硝基苯甲酸）（DTNB）和湿润剂的试剂溶液接触，和干燥所述设备。
本发明还提供了通过如上所述的方法制造的、对于检测生理性流体中的硫醇化合物有用的检测设备。
本发明提供了通过使取自受试者的口腔的生理性流体与如上所述检测设备接触，来形成接触了生理性流体的设备，检测所述接触了生理性流体的设备中硫醇化合物浓度水平，来检测受试者的口臭的方法，其中大于约40微摩尔硫醇的水平是口臭的指示。在某些实施方式中，所述硫醇化合物浓度水平在约40-200微摩尔之间。
本发明提供了通过使取自受试者的口腔的生理性流体与如上所述检测设备接触，来形成接触了生理性流体的设备，检测所述接触了生理性流体的设备中硫醇化合物浓度水平，来检测受试者的齿龈炎的方法，其中大于约80微摩尔硫醇的水平是齿龈炎的指示。在某些实施方式中，所述硫醇化合物浓度水平在约80-400微摩尔之间。
本发明提供了通过使取自受试者的口腔的生理性流体与如上所述检测设备接触，来形成接触了生理性流体的设备，检测所述接触了生理性流体的设备中硫醇化合物浓度水平，来检测受试者的牙周炎的方法，其中大于约160微摩尔硫醇的水平是牙周炎的指示。在某些实施方式中，所述硫醇化合物浓度水平在约160-600微摩尔之间。
本发明进一步提供了对于检测来自口腔的生理性流体中的硫醇化合物有用的测试试剂盒，包括试剂溶液的测试试剂盒，所述试剂溶液含有缓冲液、5,5’-二硫代双（2-硝基苯甲酸）（DTNB）和润湿剂，是包括检测区域的固体基底的检测设备，其中所述检测区域浸透含有缓冲液、5,5’-二硫代双（2-硝基苯甲酸）（DTNB）和湿润剂的试剂溶液，或通过上述方法制成的检测设备。
试剂溶液． 发明人开发了在检测口臭、齿龈炎和/或牙周疾病中有用的试剂溶液。所述试剂溶液含有缓冲液、检测试剂和湿润剂。所述缓冲液用于将溶液保持在靠近生理学pH值的pH值，其是约7.0的pH值。当前的试剂溶液的pH值可以在约6.5到8.5的范围内，或在约6.5到7.5的范围内。在某些实施方式中，所述试剂溶液的pH值在7.0。在某些实施方式中，所述缓冲液是浓度约5 mM到200 mM的磷酸钠缓冲液。在某些实施方式中，所述缓冲液是浓度约20 mM到150 mM的磷酸钠缓冲液。在某些实施方式中，所述缓冲液是浓度约100 mM的磷酸钠缓冲液。
本发明的试剂溶液含有检测试剂。在某些实施方式中，所述检测试剂是5,5’-二硫代双（2-硝基苯甲酸）（DTNB）。在某些实施方式中，所述DTNB以约10 mg/L到150 mg/L的浓度存在。在某些实施方式中，所述DTNB以约30 mg/L到150 mg/L的浓度存在。在某些实施方式中，所述DTNB以约80 mg/L到120 mg/L的浓度存在。在某些实施方式中，所述DTNB以约100 mg/L的浓度存在。
本发明的试剂溶液含有湿润剂。本发明的湿润剂是食品或药品级别的。适合的湿润剂包括甘油、木糖醇、山梨醇、甘油或丙二醇。在某些实施方式中，所述试剂溶液包括以按体积约0.1%到5.0%的浓度存在的甘油。在某些实施方式中，所述甘油以按体积约0.5%的浓度存在。在某些实施方式中，所述试剂溶液包括木糖醇。在某些实施方式中，所述木糖醇以按重量计算约2%到10%的浓度存在。在某些实施方式中，所述木糖醇以按重量计算约4%的浓度存在。
本发明人发现对于某些应用，甘油和木糖醇良好地工作，来维持垫片材料的起始颜色（米色），以提供检测与硫醇/DTNB反应相关的颜色改变的最佳“平台”。此外，木糖醇为垫片表面赋予了甜味（在许多口腔护理制剂中使用），甘油赋予了更软的触感。添加甘油，一种湿润剂和软化剂，帮助维持干燥时起始的垫片颜色，也为垫片提供了更平滑的触感。
本发明的试剂溶液还可以含有调味剂或香剂，例如，薄荷。在一个实施方式中，0.5 g羟基丙基β-环糊精用作载体，向它添加0.16 mL薄荷油。处在10mL水中的这种混合物用作向100 mL试剂溶液中的添加剂。因而，每1L标准试剂溶液量，香味剂/香剂添加物是5 g羟基丙基环糊精和1.6 mL薄荷油，复合的油混合到100 mL水中，之后将它添加到试剂溶液的主体中。
本发明的试剂溶液还可以含有醇，例如，异丙醇。在某些实施方式中，使用70%的异丙醇。醇是USP级别的。在某些实施方式中，达到试剂的十分之一体积是醇。醇的存在容许检测试剂在固体基底例如垫片材料上更快地干燥。
本发明的试剂溶液任选地还可以含有碱土金属或过渡金属。适合的金属的实例包括锰、镁，以及，特别是对于间接接触设备，包括钴。在室温和大气压力下，当水性液体被容纳在开放容器中时，硫化氢倾向于从溶解了硫化氢的水性液体中逃逸，进入开放容器上方的空气中。本发明的设备和方法在测量液体样品以及气体样品中的硫醇化合物水平方面是令人惊讶地成功的。
检测设备。发明人开发了在检测口臭、齿龈炎和/或牙周炎中有用的检测设备。在某些实施方式中，所述检测设备是固体基底，其含有检测区域，其中所述检测区域浸透如上所述的试剂溶液。在某些实施方式中，所述试剂溶液被干燥在所述固体基底上。发明人发现，一旦试剂溶液被干燥在所述固体基底上，它是相当稳定的。在某些实施方式中，可以添加金属离子（例如锰）。
在某些实施方式中，所述固体基底是惰性纤维的多孔的垫片。在某些实施方式中，所述纤维由美国专利NO. 7,290,668中描述的至少一种材料组成。在某些实施方式中，所述纤维由称为R-27378或R28445 D#4345的TRANSORB®牌材料组成。在某些实施方式中，有色的（例如，蓝色）垫片可以代替白色垫片使用。蓝色的显现容许可选择的颜色发生可能性，能够改变垫片的起始颜色，也容许有效地操纵与疾病过程的不同阶段相应的阈值浓度。在某些实施方式中，“标准”垫片或色带（即，具有静态的颜色）紧邻于“检测物”垫片放置。在其他实施方式中，这些“标准”和“检测物”区域通过小的间隙互相分隔，显示在它们之间的白色背景。当视觉地比较某些颜色组合时，两个区域之间的细小间隙容许更好的可见性。发现的是，当检测取决于黄色指示物时，以及当颜色强度和/或浓淡的差异细微、而不是非常明显时，这是实际的。在某些实施方式中，也可以使用内部对照物。
在某些实施方式中，固体基底可以被切割或另外形成某些期望的形状和/或大小（例如，通过模切）。在某些实施方式中，所述固体基底例如垫片可以是约0.8 mm到约1.2 mm之间的厚度、约5.5 mm到约8 mm之间的宽度，和约7 mm到8 mm之间的长度。可以形成除了正矩形的棱柱状形状以外的形状，例如，在大约8 mm×8 mm的区域内，例如，形成圆形、菱形和加号形。也可以模切其他期望的形状。并且，也可以引入反应性和非反应性部分之间的间隙。
在某些实施方式中，除了具有检测区域之外，检测设备还具有标准区域。因而，检测设备的用户能够容易地比较检测区域和标准区域来确定测试是阳性还是阴性。在某些实施方式中，所述标准区域是预定强度的比色标准。
在一个实施方式中，测试棒被用于直接接触应用（附图1）。在这个实施方式中，使用在棒的一个末端含有垫片的测试棒，其中所述垫片浸透测试溶液。在某些实施方式中测试溶液被干燥，容许溶剂蒸发。垫片置于与样品（例如，唾液）直接接触中。在一段时间之后，检查垫片来确定颜色的发生。
某些实施方式包括直接接触试验设备（附图2A-2D）。在与测试样品接触时，反应性垫片可以或可以不改变颜色（取决于样品中存在的硫醇的水平）。比较物的颜色在测试期间不改变，因为在比较物垫片中不存在检测试剂。比较物可以具有a）与反应性垫片的起始颜色相同的颜色（例如，附图2A，其中样品中更高的硫醇水平导致反应性垫片与比较物颜色逐渐地分开），或b）目标截止颜色（例如，附图2B，其中在设定的时点，逐步更高的硫醇水平引起所述反应性垫片集中，或可能超过比较物颜色）。可以采用超过一个比较物，例如，当例如起始和截止比较物颜色都存在时，分别紧靠反应性垫片的上方或下方（附图2C）。因此，截止颜色可以表明如果样品中存在一定的硫醇水平，反应性垫片可能获得的颜色。嵌套的反应性垫片可以（取决于硫醇浓度）获得或超过比较物的颜色。围绕反应性垫片的间隙（参见上文的较早的论述），可以便于颜色改变的更好的识别。附图2D描绘了一种情况，其中附图2B的垫片位置相反。
附图3（也是直接接触形式）描绘了可选择的测试条结构，其中模切的（成形的）反应性垫片嵌套在比较物内。举例来说，此处呈现的形状是圆形、菱形或交叉形。附图3A-C描绘了嵌套在比较物内的圆形的反应性垫片。嵌套的反应性垫片可以（取决于硫醇浓度）获得或超过比较物的颜色。作为阳性测试的指示的匹配或超过比较物颜色由附图3A和3B显示。作为阳性测试的指示的单独的超过由附图3C-E显示。附图3C和3D类似于3C，但是具有非圆形的反应性垫片。没有在这个系列中显示的是围绕反应性垫片的间隙（参见上文的较早的论述），其可以便于颜色改变的更好的识别。
本发明提供了尤其是间接接触设备（例如，附图4A和4B）。在本发明的一个实施方式中（附图4A），试剂被施加在圆柱形多孔基质的远端，试剂稍微地朝向近端迁移到部分中。然后干燥材料，置入透明的保护罩中。在使用期间，样品施加到近端，流体迁移朝向远端，并填充所述材料。当样品与处在远端的检测试剂接触时，它可以与试剂反应，引起颜色改变。在本发明的另一个实施方式中（附图4B），试剂溶液被施加到两个圆筒之一上，容许干燥。浸透试剂的圆筒置入透明的保护罩内。第二圆筒（用于样品）置于靠近、但不直接接触所述第一圆筒的位置。在使用期间，样品施加到“样品”圆筒上并填充“样品”圆柱。然后使样品圆筒与试剂圆筒接触，样品流体从样品圆筒迁移到检测圆筒中。与检测试剂反应的样品中的硫醇将在检测圆筒中显现。
在间接接触设备的另一个实施方式中（例如，附图5），样品接触平的表面，然后将它导引到反应性垫片上。然后通过相对样品应用面的测试设备的表面的透明窗，观察反应性垫片中的颜色改变（或颜色改变的缺乏）。
本发明的检测设备的一个实施方式在附图6中示出。检测设备10具有样品侧面11和结果侧面12。位于侧面11的是样品垫片20。一旦样品流体进入侧面11上的样品垫片20，它被转移到反应垫片22，其面对侧面12。透明盖23覆盖了结果垫片22。
间接接触设备的其他实施方式在附图7A-7D中示出。附图7A和7B是“折叠”设备的实例。在附图7A中显示了设备30，其具有支持物31、样品采集垫片32和试剂垫片33。试剂溶液浸入试剂垫片33，任选地可以在其中干燥。样品（例如，唾液）施于样品采集垫片32中，折叠支持物，从而所述样品采集垫片32和试剂垫片33相互接触。当折叠时，样品采集垫片32和试剂垫片33可以被轻轻地挤压，从而来自样品采集垫片32的流体湿润了并转移到试剂垫片33。用户然后打开设备并观察结果（例如，颜色改变对比没有颜色改变），在试剂垫片中见到。
附图7B显示了具有样品采集区域41、试剂区域42和反应窗口45的试验设备40。试剂溶液浸入试剂区域42，可以任选地在内干燥。样品（例如，唾液）施于样品采集区域41中，折叠支持物，从而所述样品采集区域41和试剂区域42相互接触。当折叠时，样品采集区域41和试剂区域42可以被轻轻地挤压，从而来自样品采集区域41的流体湿润了试剂区域42。不同于打开设备来观察结果（如附图7A中的），用户简单地翻转试验设备，来通过透明的（例如，塑料的）窗口45观察结果。
附图7C和7D显示了采用“滑动物”构思的检测设备。在附图7C所示的实施方式中，设备50由条51组成，其包括样品采集区域52和透明（例如，塑料）套筒53。套筒53包括附着在其内的试剂区域54。可以被干燥的试剂溶液浸入试剂区域54。用户从套筒53中移出条51，向样品采集区域52施加样品。用户然后滑动条51进入套筒53，从而样品采集区域52接触试剂区域54。用户可以轻轻地挤压样品采集区域52和试剂区域54，从而来自样品采集区域52的流体润湿试剂区域54。在一个实施方式中，试剂区域54是套筒53的不可分割的部分。
附图7D显示了检测设备60，其包括样品采集区域62、套筒63和反应窗口65。套筒63包括试剂区域64。可以被干燥的试剂溶液浸入试剂区域64。用户将样品施加到样品采集区域62上，然后滑动套筒从而试剂区域64接触样品采集区域62。所述接触足够紧密以容许样品迁移到反应区域64中。用户然后通过透明（例如，塑料）窗口65读取结果，其紧靠反应区域64的上方安置。
附图8A-8F描绘了本发明的各种可选择的包装设计。附图8A描绘了“火柴板”设计。单独的条由用户取下。每个条可以任选地被包装，例如，用箔片。每个板具有方便量的测试条，例如每个板6-12个。附图8B描绘了箔包装和盒形设计。测试条以批量保存在盒子中，例如，卡纸板或塑料盒子，或包装在箔条中。每个箔条含有方便量的测试条，例如每条5-10个。附图8C描绘了“口香糖包装”设计。测试条以批量保存在盒子中，例如，纸板或塑料盒子，或单独地包装在铝箔包装中。附图8D是与附图8C类似的设计，仅仅包装是塑料罩。每个测试条独立地包装。在一个实施方式中，5-10个测试条包装在分配器中。附图8E提供了具有盖子的分配器。附图8F提供了滑动抽取型分配器。
本发明进一步提供了模压的测试壳（附图9）。在一个实施方式中，反应区域被包裹在模压的塑料部分中。在这个实施方式中，试剂区域浸入检测试剂溶液，其在反应区域上干燥。反应区域由可移动的多孔膜或垫片覆盖，其充当样品区域。样品（例如，唾液）被采集在样品垫片上，然后迁移到邻近它的试剂区域。不同于通过透明窗口观察结果（如使用附图6中的设备时），样品垫片被取下和丢弃，露出试剂区域。查看结果并解释。
本发明进一步提供了有盖的采集器设备（附图10）。附图10显示了有盖的检测设备80。在一个实施方式中，检测设备包括把手81、样品采集区域82、盖子83和试剂区域84。可以被干燥的试剂溶液浸入试剂区域84。在可选择的实施方式中，检测设备80包括把手81、样品采集区域82和盖子83。可以被干燥的试剂溶液浸入样品采集区域82。在这个实施方式中，保护帽从试验设备上取下，样品采集垫片/棉拭插入受试者的口中。样品采集垫片/棉拭与测试样品接触。然后从口腔中取出样品采集垫片/棉拭，重新盖上设备。在某些实施方式中，样品采集垫片/棉拭已经浸透检测试剂，其可以任选地在样品采集垫片/棉拭上干燥。在其他实施方式中，已经浸透可以任选地在试剂垫片上干燥的检测试剂的试剂垫片被整合到保护帽中。在这个实施方式中，当设备被重新盖上时，这个动作使得样品采集垫片/棉拭与试剂垫片接触。在任一实施方式中，在合适的时间之后，观察试剂垫片来确定颜色改变的程度。
制造方法和制造的设备。本发明包括制造用于测量含有生理性流体的样品中硫醇化合物的量的检测设备的方法。所述制造方法包括用如上所述的试剂溶液接触固体基底，和干燥所述设备。
本发明进一步包括通过如上所述的方法制造的、用于测量含有生理性流体的样品中硫醇化合物的量的检测设备。
生理学样品中硫醇化合物的检测方法。本发明提供了检测受试者中的口臭、齿龈炎和/或牙周炎的方法。所述方法涉及使采自受试者的口腔的生理性流体与如上所述的检测设备之一接触来形成接触了生理学流体的设备，和检测所述接触了生理学流体的设备中硫醇化合物的浓度水平。至少约40微摩尔的水平是口臭的指示，至少约80微摩尔的水平是齿龈炎的指示，至少约160微摩尔的水平是牙周炎指示。在某些实施方式中，所述检测设备能够检测低达10-20微摩尔的水平的硫醇化合物的存在。
在某些实施方式中，所述生理性流体从受试者的口腔中取出，然后与检测设备接触。在其他实施方式中，所述检测设备插入受试者的口腔，从而生理性流体与所述设备原位地直接接触。例如，测试条被插入口腔中，反应性基质直接接触受试者的唾液。令人惊讶地，发现的是，含有检测试剂的原型试剂溶液不刺激口腔，即使当口腔组织与含有DTNB的棉拭直接接触时。
在某些实施方式中，检测设备以“直接接触”方法来使用。在这种方法中，具有浸透检测物的基质的设备与用户进行直接接触。例如，设备的检测区域是条的末端的简单的垫片。在某些实施方式中，所述检测设备在“间接接触”方法中使用。在这种方法中，检测物浸透的基质的设备不与用户进行直接接触。通过流体样品的扩散、或采集的样品基质的机械运动，从而流体样品或采集的样品基质与检测物浸透的基质接触，来在一定时间进行接触。
在某些实施方式中，检测通过比较（a）接触了生理学流体的设备和（b）标准物的颜色强度或吸光度来进行。在某些实施方式中，检测通过眼睛进行。在其他实施方式中，检测通过机器，例如通过分光光度计（例如，反射分光光度计）来进行。在某些实施方式中，检测步骤提供了定量的或半定量的信号，其倾向于最小化人与人之间的主观性。
在当前方法中测试的生理性流体是GCF、舌刮擦物、舌生物膜、龈线生物膜、唾液或呼吸、或多种这些流体的组合。
在本发明的方法的一个实施方式中，滤纸条通过用试剂溶液接触所述条来浸透试剂混合物，容许过量的溶剂蒸发来形成浸透的测试条。然后由受试者吐出唾液到浸透的测试条上。容许反应在浸透的测试条之中或之上进行。在固定的时间之后，通过比较浸透的测试条的表面上产生的颜色和标准物例如分级的比色图表，来测定硫醇化合物的浓度。
在一个实施方式中，测试棒在直接接触应用中使用。在这个实施方式中，使用在棒的一个末端含有多孔的垫片的测试棒，其中所述垫片浸透测试溶液。在某些实施方式中测试溶液被干燥，容许过量的溶剂蒸发。垫片置于与样品（例如，唾液）直接接触中。一段时间以后（例如，5-10秒），检查垫片来确定颜色的发生或颜色的改变。
在另一个实施方式中，测试条含有邻近于所述检测垫片的比较物（即，内部对照物）。在一个实施方式中，未使用的测试条的反应性区域和比较物区域具有相同的颜色。当测试条的这两个区域与样品接触时，它们起初从不使用的测试条变为不同的颜色（即，在被样品水化之后它们都获得的颜色）。一段时间以后，反应性区域的颜色偏离比较物区域，强度是硫醇化合物的浓度的指示（例如，在附图2A中示出的）。
在另一个实施方式中，检测和比较物区域可以起初具有不同的颜色。在更高浓度的硫醇下，反应性垫片变为逐渐更象比较物，并且可以超过截止强度（例如，在附图2B中示出的）。
在另一个直接接触方法实施方式中，条含有三个不同的区域：显示了起始颜色的比较物、显示截止（诊断）颜色的比较物和反应性区域（附图2C）。随着硫醇水平提高，反应性区域颜色偏离起始（上部的）颜色并与比较物（下部）汇合。在这样的情况下，观察者或电子设备比较各个区域，对于反应性区域（例如，中心垫片）是更像起始颜色（例如，上部垫片）还是更像比较物颜色（例如，下部垫片）作出确定。
在另一个直接接触方法实施方式中，条含有两个不同的区域：反应性垫片（上部），以淡蓝色开始；在更高浓度的硫醇下变得逐渐地更绿（例如，如附图2D显示的）。显色可以满足或超过颜色或比较物（垫片下方）。这类似于附图2B中显示的形式，除了检测和比较物垫片的位置被调换。
在某些实施方式中，使用不同的指示物颜色，和/或使用不同的形状（例如，附图3A-3E）。
测试试剂盒。本发明提供了对于硫醇化合物的检测有用的测试试剂盒。所述试剂盒包括如上所述的试剂溶液和/或检测设备。
现在将通过以下非限制性的进一步实施例来说明本发明。
进一步的实施例1. 试剂溶液如下配置：
缓冲液（磷酸钠，USP）-100 mM, pH 7.0
DTNB, 100mg/L
甘油（USP）， 按体积0.5%
木糖醇（食物/药物级别），按重量计算4%
进一步的实施例2. 试剂溶液如下配置：
成分和量（对于1L溶液）
去离子水（DI H2O；适合于摄食）~800 mL+适量到1L
磷酸氢二钠七水化物， USP 3.093 g（3.060-3.120 g）
磷酸二氢钠, USP 1.015 g（1.010-1.020 g）
甘油， USP 5.0 mL（4.9-5.1 mL）
木糖醇，食物/药物级别 40.0 g（39.6-40.4 g）
DTNB 0.100 g（0.099-0.101 g）
70%异丙醇（或USP级别IPA，稀释到70%）100 mL（任选的）
试剂溶液然后利用PES滤器（0.2微米孔径大小）过滤。用50 或100 mg DTNB/L溶液制备的条发现对于白色垫片是合理地适合的，因为DTNB的水平在干燥时给垫片赋予了即使有也很小的颜色。
进一步的实施例3. 本领域已知的是硫醇化合物在与腐坏的肉相关的流体中积累。因而，根据本发明的制品对于检测与腐坏的肉相关的提高的硫醇水平是有用的。
进一步的实施例4. 本领域已知的是硫醇化合物在与降解的墙板产品相关的流体中积累，墙板产品含有硫酸钙并经历硫酸盐还原细菌的降解。因而，根据本发明的制品对于检测与降解的墙板产品相关的提高的硫醇水平是有用的。
进一步的实施例5. 在下文的内容中公开了本发明的各种进一步的方面，其中硫醇检测试剂包含根据本发明的方面7的检测试剂。
检测/估计溶解的口腔硫醇的快速方法
目的： 口腔的口臭和牙周疾病经常涉及挥发性硫化合物（VSC）、主要是硫化氢和甲硫醇的微生物产生。历史上，工作集中于检测它们在呼出呼吸中的存在，而不是微生物的生物膜内的存在。我们的目的是开发针对溶解的硫醇的测试条，其提供了快速可见的结果，易于使用，对口腔组织没有刺激。
方法： 我们筛选了各种材料在用硫醇检测化合物预处理之后提供对溶解的硫醇的视觉上可辨别的反应的能力。通过用添加的硫醇攻击清洗液，光谱学地估计了干燥的检测试剂从垫片浸出的倾向。原型测试条置入稳定性研究中以估计货架寿命。由独立的实验室进行了刺激测试。最后，我们改变检测试剂的浓度，来确定是否可以达到不同的“截止”结果颜色。
结果：鉴定了多孔的垫片材料，其具有良好的物理性质并且适合于硫醇检测试剂和它的产色的产品。一旦干燥在垫片上，试剂显示了在再水化时浸出的很低倾向，维持了良好的光谱反应，显示了随着时间的过去的合理的稳定性。当与标准的口腔护理产品比较时，发现垫片处理试剂对于培养的齿龈组织细胞是非刺激性的。最后，通过提高或降低试剂浓度（垫片中检测物的量），我们发现我们可以操纵测试的平台期显色。
结论∶ 我们的结果表明采用这种技术的测试条作为检测口臭和牙周疾病致病病原体的辅助是有用的。
这项努力中我们的一般方法是利用硫醇检测试剂（"TDR"）的性质和能力，来检测与口腔恶臭和牙周疾病相关的溶解的硫化合物，和利用干燥的化学试剂形式来进行。在此呈现了这种形式的某些设计方面和能力。
背景
口腔恶臭（口臭）和慢性牙周疾病通常特征在于分别在舌背面或槽内、牙齿和牙龈组织之间的细菌的存在。存在于这些舌和齿龈生物膜中的许多革兰氏阴性厌氧细菌，随着它们代谢带有含硫氨基酸的蛋白质，具有从半胱氨酸和甲硫氨酸除去末端含硫基团的能力，分别产生硫化氢和甲硫醇。
Figure 446469DEST_PATH_IMAGE001
在体温下，大多数硫化氢和甲硫醇将挥发，而不是保持溶解在水性环境中。随着它们进入气相，它们可被呼出的呼吸从口腔带出。虽然其他挥发性化合物（含有硫或不含有硫的）可能促进口腔口臭，一般地挥发性的硫化合物（VSC）是有责任的，在VSC中，这两种化合物被认为是主要的贡献物。
已经进行了许多研究来鉴定和定量这些（呼出）气体的浓度。通常被认为是测量口臭的“金标准”的器官感觉的评估，需要训练和校准，不总是易于得到的。
能够定量呼出气的仪器包括Halimeter（InterScan Corporation）和OralChroma（Abilit）。Halimeter测量VSC，而不测量其他类型的恶臭化合物。然而，Halimeter不能辨别促使口臭和不促使口臭的VSC。OralChroma是专门化的气相色谱仪，其被设计以定量三种最常见的VSC：硫化氢、甲硫醇和二甲基硫。二甲基硫已经显示了在口腔口臭中不存在，但在其他疾病状态中存在。OralChroma仅仅鉴定和定量这三种气体，因此虽然它缺乏检测对“非VSC口臭”的贡献物的能力，它特异性地检测和定量主要的VSC贡献物，从而提供了更好的诊断信息。然而，这种仪器是昂贵的，可能不能广泛使用。
方法
筛选垫片材料
获得各种多孔的吸收材料，筛选它们用作样品垫片的适用性。期望的材料必需具有某些固有的性质，以及实现某些性能特征。这些中是以下的：
• 从起初到最终的显色，提供可接受的色饱和或色彩浓淡变化
• 很快地达到它的平台期（最终的）显色
• 维持平台期显色合理的时间
• 保持充足的厚度和持久性（可制造性）
• 具有低光泽的外观
• 实现TDR在干燥时的均匀分布
• 提供对试剂和生物学（口腔流体）样品的足够的能力
• 实现在再水化（通过样品）时TDR均一的和非迁移的分布
• 尽可能块和均匀地吸收样品
• 展现与口腔组织的生物相容性;最小的颗粒脱落
• 附着在塑料（支持物）背衬上
检查了许多基于纤维素和非纤维素的纸\玻璃纤维材料和合成材料。选择这些中的少数（证实潜在地有用的），主要以它们显示合适的颜色的能力、其次在生物相容性和颜色迁移特征的基础上来排列。
试剂从垫片的浸出
作为垫片一旦用TDR处理将不会刺激口腔组织的论据的一部分，我们展现了，在使用的时期内（最多几秒的口腔组织接触），TDR不会从垫片浸出到显著的程度。通过首先尝试从干燥的垫片上洗下它、然后用硫醇攻击清洗流体，根据垫片内的总的TDR反过来计算释放到溶液中的百分比，来进行这一点。
刺激测试（体外）
作为刺激测试的第二种方法，我们将含有TDR的溶液送到独立的实验室，用于使用为此目的建立的细胞系的体外测试。利用严格的质量控制操作并与现有的口腔护理制剂比较，可以测定试剂溶液的相对的刺激的指示。
稳定性研究（可行性阶段）
为了展现可行性阶段原型的稳定性，进行了短期稳定性研究，采用了实时和加速的（在更高的温度下保存）老化。这样的研究可以提高开发过程中早期的关注，或提供随后的原型（最终，制造的产品本身），将展现适合长的货架寿命所必需的稳定性的信心。条进行包装并在各种温度下保存，然后用标准的硫醇溶液在实验过程中预定的时点攻击。根据结果，利用Arrhenius模型（Anderson, G., and M. Scott（1991）Clin Chem 37:398-402）可以得出稳定性的现实的和保守的估计。
限制试剂
为了确定是否可以实现不同的平台期（最终的）测试显色，我们降低了TDR浓度的浓度，从而它是限制性的。指示测试的最终颜色的能力将展现出，可以设计相似类型的设备，其展现了不同的截止浓度。
结果
筛选垫片材料
有趣地，显色反应产品（TDR+硫醇）常常从硫醇溶液的施加点迁移通过垫片基质。一般地，利用 2-巯基乙醇（2-ME）作为标准硫醇，在即将测试之前，制成新制备的水性硫醇稀释物。将这些吸移到干燥垫片上，监视随着时间的过去颜色改变的行为。在液体的前端颜色的迁移表明，干燥的TDR可能在再水化时自由地被液体携带。这样的材料将不能制成好的垫片，因为期望的输出是均匀的（对于颜色改变）。
其他材料看起来是有前途的，因为所述颜色改变是充分可见的和非迁移的。然而，这些垫片中的一些中的纤维是相对松弛的（对于生物相容性而言可能是有问题的）。因而，虽然满足了惰性和颜色改变的可见性的指标，它们需要从直接的口腔接触上分离以使它们可用。
利用一些材料，我们确实实现了好的结果，所述材料提供了我们相信的信噪比、生物相容性和颜色改变可见性的最佳组合。此外，这些可以在常规的厚度中提供，是容易操作的，足够亲水性的，以及适合于人工和自动化的制造环境。选择了五种材料用于短期稳定性研究，用原型TDR溶液处理，保存在室温和37℃下几个星期。在6周后，这些TDR处理的材料利用半胱氨酸溶液（250 μM和更低）攻击；五个中的四个的结果进行拍照，在附图11中示出。保存在环境温度的垫片材料在每一对的左侧；保存在37℃的那些在右侧。编号4的垫片材料显示了在硫醇浓度范围上的最好的总体颜色强度、颜色保持和敏感性。
试剂从垫片的漏出
在垫片在250 μL水（比色杯中）中搅动达3分钟后，从垫片浸出到溶液中的再水化的TDR用25 μL的1 mM半胱氨酸攻击。在t=30秒时通过分光光度测定法读取产生的黄颜色。这些信号表示为最大理论值（即，基于利用干燥在每个垫片上的液体TDR的量所产生的信号）的百分比。附图12展现了仅最大理论量的~1/3在水化时从垫片中出来，该浸出水平在比色杯内搅动约1分钟后达到。然而，垫片的口腔接触时间仅是约5秒。可以看出，即使在10秒时（附图中的箭头），从垫片出来的试剂的量是总数的约5%，并且这采取了在相对大的流动量下搅动，而不是与粘膜组织的短暂表面接触（在这期间，流体运动将进入垫片，而不是从垫片中出来）。
刺激测试（体外）
测试由MatTek Corporation（Ashland, MA）进行。液体TDR送至MatTek，在他们的标准测试的算法中，利用细胞培养物系统“EpiOral”ORL-200来分析。作为“ET-50”来评估刺激可能性，定义为培养的细胞死亡率达到50%的时间。测试结果在以下的表1中示出。
表1
Figure 363609DEST_PATH_IMAGE002
在24小时时点，组织中几乎100%的细胞仍然存活，因此ET-50被确定为>24小时。对于牙膏和增白剂的情况，半数细胞分别在约12和15小时被杀死。
稳定性研究
在下表中报告的稳定性研究结果提供了稳定性的“现实的”（Q10 = 3.00）和“保守的”（Q10 = 2.00）估计。这项研究中的原型垫片含有MatTek研究（上文的）中存在的活性TDR量的约1/4，在密封的箔小袋中作为测试条单独地保存（没有干燥剂）。在45℃保存的测试物的子集上也看到合适的反应性，在实验的结尾完全地测试。在这种情况下，稳定性的“现实的”估计是2.4年（Q10=3.00），“保守的”估计是1.13年（Q10=2.00）。
根据更高的温度下的产品降解在给定温度下降解速率的计算
具有Ea的活化能的产品保存在温度T1下，展现了k1的降解速率；计算对于产品保存在温度T2时预计的降解速率（k2）
现实估计（Q10=3）
Figure 205663DEST_PATH_IMAGE003
保守估计（Q10=2）
Figure 918316DEST_PATH_IMAGE004
限制TDR
通过限制垫片中的TDR，人们能够指示“最大”颜色改变，甚至对于假定有足够量的TDR、不然将产生其他颜色改变的硫醇浓度。
附图13显示了，当TDR在20倍范围内变化时（每个图例沿着图形的右侧边缘），注意到的最终显色也改变，基于从颜色“比较物”图表上视觉地读取的编号的颜色（Y轴）。看到的是，随着TDR的量提高，最终的信号（可见的输出）一般提高，这是根据化学计量法所预期的。
讨论和结论
根据在此呈现的选择的设计方面，我们鉴定了用于"溶解的硫醇"口腔流体测试的充当垫片的候选材料（样本采集和反应阶段）。在起始的垫片筛选研究之后，检查了其他的垫片材料，其展现了甚至超出垫片类型#4的特征（未显示）。
TDR在再水化时保持在垫片之内（即，在口腔样品采集过程期间，需要不超过数秒），看起来一旦它被干燥就是相当稳定的。考虑到这些特征，以及每个测试需要的TDR的相对低的量，我们受到鼓舞地发现，液体形式的TDR对培养的细胞系统是无刺激性的。进一步的安全相关测试（在规划的形式中完整测试的正式的细胞毒性、刺激和敏感性测试）进行了规划，来支持迄今为止进行的生物相容性测试。
稳定性研究数据表明，基于这种类型的干燥的试剂的测试应当具有在正常的储藏条件下适合于可销售产品的货架寿命。
进一步的实施例6. 根据本发明的制品对于筛选慢性疾病包括心血管疾病的并发症的风险是有用的。本领域已知的是，相比不患有牙周炎的、患有心血管疾病的人，也患有牙周炎的患有心血管疾病的人处在发病和死亡的更高的风险中。因此，在患有心血管疾病的人的群体中筛选由于也患有牙周炎而处在发病和死亡的相对高风险中的人方面，根据本发明的制品是有用的。特别地，来自患有心血管疾病的第一受试者的口腔流体的第一样品与根据本发明的制品的基质接触，观察到表明在所述第一样品中相对更高浓度的硫醇化合物的第一和相对更强烈的信号。来自患有心血管疾病的第二受试者的口腔流体的第二样品与根据本发明的基本上类似的制品的基本上类似的基质接触，观察到表明在所述第二样品中相对更低浓度的硫醇化合物的相对更小强度的信号。断定的是，与第二受试者相比，第一受试者处在发病和死亡的相对更高的风险中。
进一步的实施例7. 根据本发明的制品对于筛选慢性疾病包括II型糖尿病的并发症的风险是有用的。本领域已知的是，相比不患有牙周炎的、患有II型糖尿病的人，也患有牙周炎的患有II型糖尿病的人处在发病和死亡的更高的风险中。因此，在患有II型糖尿病的人的群体中筛选由于也患有牙周炎而处在发病和死亡的相对高风险中的人方面，根据本发明的制品是有用的。特别地，来自患有II型糖尿病的第一受试者的口腔流体的第一样品与根据本发明的制品的基质接触，观察到表明在所述第一样品中相对更高浓度的硫醇化合物的第一和相对更强烈的信号。来自患有II型糖尿病的第二受试者的口腔流体的第二样品与根据本发明的基本上类似的制品的基本上类似的基质接触，观察到表明在所述第二样品中相对更低浓度的硫醇化合物的相对更小强度的信号。断定的是，与第二受试者相比，第一受试者处在发病和死亡的相对更高的风险中。
进一步的实施例8. 根据本发明的制品对于筛选怀孕的受试者中早产和/或早娩的风险是有用的。本领域已知的是，相比不患有牙周炎的孕妇，也患有牙周炎的孕妇处在早产和/或早娩的更高的风险中。因此，在孕妇的群体中筛选由于也患有牙周炎而处在早产和/或早娩的相对高风险中的人方面，根据本发明的制品是有用的。特别地，来自第一怀孕受试者的口腔流体的第一样品与根据本发明的制品的基质接触，观察到表明在所述第一样品中相对更高浓度的硫醇化合物的第一和相对更强烈的信号。来自第二怀孕受试者的口腔流体的第二样品与根据本发明的基本上类似的制品的基本上类似的基质接触，观察到表明在所述第二样品中相对更低浓度的硫醇化合物的相对更小强度的信号。断定的是，与第二受试者相比，第一受试者处在早产和/或早娩的相对更高的风险中。
进一步的实施例9. 根据本发明的制品对于检测哺乳动物受试者中的牙周疾病活性是有用的。本领域已知的是，牙周疾病，特别是牙周炎，在它的发展中是非单调性的。相比在较低疾病活性时检测的，在更高疾病活性时检测出更高水平的硫醇。因此，根据本发明的制品在检测牙周疾病活性方面是有用的。在第一时点，来自受试者的口腔流体的第一样品与根据本发明的制品的基质接触，观察到表明在所述第一样品中相对更高浓度的硫醇化合物的第一和相对更强的信号。在第二时点，来自受试者的口腔流体的第二样品与根据本发明的基本上相似的制品的基本上相似的基质接触，观察到表明在所述第二样品中相对更低浓度的硫醇化合物的相对更小强度的信号。断定的是，与第二时点相比，第一时点的受试者中牙周病活性是更高的。
进一步的实施例10. 当与没有急性牙周炎的同一受试者的背景比较时，根据本发明的制品对于检测哺乳动物受试者中的急性牙周炎是有用的。本领域已知的是，在特定受试者中，与没有急性牙周炎时检测的相比，在急性牙周炎时检测出更高水平的硫醇。因此，根据本发明的制品在检测急性牙周炎方面是有用的。在第一时点，来自受试者的口腔流体的第一样品与根据本发明的制品的基质接触，观察到表明在所述第一样品中50微摩尔浓度的硫醇化合物的第一和相对较小强度的信号。在第二时点，来自受试者的口腔流体的第二样品与根据本发明的基本上相似的制品的基本上相似的基质接触，观察到表明在所述第二样品中500微摩尔浓度的硫醇化合物的相对更大强度的信号。断定的是，受试者在第二时点患有急性牙周炎。
进一步的实施例11. 根据本发明的制品对于测定治疗牙周炎的哺乳动物受试者的治疗效力是有用的。本领域已知的是，当牙周炎被有效地治疗时，相对于即将治疗之前口腔流体中硫醇化合物的水平，口腔流体中硫醇化合物的水平降低。因此，根据本发明的制品在治疗效力的测定方面是有用的。在第一时点，在即将开始治疗之前，来自受试者的口腔流体的第一样品与根据本发明的制品的基质接触，观察到表明在所述第一样品中750微摩尔浓度的硫醇化合物的第一和相对更强的信号。在第二时点，在开始治疗两周之后，来自受试者的口腔流体的第二样品与根据本发明的基本上类似的制品的基本上类似的基质接触，观察到表明在第二样品中120微摩尔浓度的硫醇化合物的相对较小强度的信号。断定的是治疗是有效的。
进一步的实施例12. 根据本发明的制品对于测定治疗牙周炎的哺乳动物受试者没有治疗效力是有用的。本领域已知的是，当牙周炎未被有效地治疗时，相对于即将治疗之前口腔流体中硫醇化合物的水平，口腔流体中硫醇化合物的水平不降低。因此，根据本发明的制品在缺乏治疗效力的测定方面是有用的。在第一时点，在即将开始治疗之前，来自受试者的口腔流体的第一样品与根据本发明的制品的基质接触，观察到表明在所述第一样品中750微摩尔浓度的硫醇化合物的第一信号。在第二时点，在开始治疗两周之后，来自受试者的口腔流体的第二样品与根据本发明的基本上类似的制品的基本上类似的基质接触，观察到表明在第二样品中750微摩尔浓度的硫醇化合物的信号。断定的是治疗是无效的。
进一步的实施例13. 根据本发明的制品对于监视哺乳动物受试者中的牙周疾病活性是有用的。本领域已知的是，牙周疾病，特别是牙周炎，在它的发展中是非单调性的。相比在较低疾病活性时检测的，在更高疾病活性时检测到更高水平的硫醇。因此，根据本发明的制品在监视牙周疾病活性方面是有用的。在第一时点，来自受试者的口腔流体的第一样品与根据本发明的制品的基质接触，观察到表明在所述第一样品中相对更高浓度的硫醇化合物的第一和相对更强的信号。在第二时点，来自受试者的口腔流体的第二样品与根据本发明的基本上相似的制品的基本上相似的基质接触，观察到表明在所述第二样品中相对更低浓度的硫醇化合物的相对更低强度的信号。断定的是，从第一时点到第二时点，受试者中牙周疾病活性降低。
进一步的实施例14. 根据本发明的制品对于检测受试者中或上的位点处病原性的硫酸盐还原细菌的感染是有用的。本领域已知的是，病原性的硫酸盐还原细菌作为代谢终产物产生硫醇化合物。与位点不被硫酸盐还原细菌感染时来自同一位点的流体中检测的相比，在来自病原性的硫酸盐还原细菌感染的位点的流体中检测到更高水平的硫醇。因此，根据本发明的制品在检测病原性硫酸盐还原细菌的感染方面是有用的。在第一时点，来自受试者之中或之上的位点的口腔流体的第一样品与根据本发明的制品的基质接触，观察到表明在所述第一样品中25微摩尔浓度的硫醇化合物的第一和相对较小强度的信号。在第二时点，来自受试者之中或之上的同一位点的口腔流体的第二样品与根据本发明的基本上相似的制品的基本上相似的基质接触，观察到表明在所述第二样品中1500微摩尔浓度的硫醇化合物的相对更强的信号。断定的是，受试者在所述位点之处或附近遭遇病原性硫酸盐还原细菌的感染。
进一步的实施例15. 本领域的技术人员将理解的是，所谓的巯基试剂可以用作根据本发明的检测试剂的成分，药学上可接受的缓冲液可以用于代替磷酸盐缓冲液，药学上或化妆上可接受的湿润剂或软化剂可以用于代替甘油和/或木糖醇，等等。因此，上文中这些语词中描述的内容的许多等价物对于本发明所属领域的技术人员是显而易见的。
进一步的实施例16. 还容易看出的是，根据本发明的装置对于希望通过每个患者花费更少的时间来控制成本的牙科医师是有用的。也就是说，当与可选择的诊断方法所需的数十分钟或更久相比，对于这些医师，能够在10秒内确定医师的患者的口腔健康状态将是期望的。此外，由于牙周炎与全身疾病发病相关，例如糖尿病、心血管疾病和早产，对本领域的技术人员显而易见的是，本发明提供了用于筛选这些疾病状态或健康风险因素的任何一种或更多种的存在的方法。与健康个体的成本相比，对于赔付患有一种或更多种这些疾病的患者的保健成本的健康赔付公司来说，每个患者每月的成本是更高的，明显的是，本发明提供了通过对牙周炎的早期诊断的筛选来控制每个患者每月的赔付成本的方法。
进一步的实施例17. 参考值的建立。对于本发明来说，参考值涉及与硫醇化合物的浓度相关的值。对于本发明来说，参考值可以按多种方式的任一种来建立。例如，可以测量来自第一已知浓度的模型硫醇化合物的信号。特别地，含有第一已知浓度的模型硫醇化合物的流体的样品可以与包含一定量检测试剂的基质接触，从而形成提供第一信号的、接触了硫醇标准物的第一基质。同样地，可以测量来自第二已知浓度的模型硫醇化合物的信号。特别地，含有第二已知浓度的模型硫醇化合物的流体的样品可以与包含基本上相同量检测试剂的基本上相同的基质接触，从而形成提供第二信号的、接触了硫醇标准物的第二基质。例如，如果第一信号和第二信号可以分别由眼睛识别为第一颜色强度和第二颜色强度，所述第一颜色强度和第二颜色强度可以分别地描绘，例如，作为第一颜色强度“芯片”或样片，和第二颜色强度“芯片”或样片。更一般地，不论第一信号和第二信号是否处在可见光谱中，可以记录第一信号和第二信号。因此，含有未知浓度的硫醇化合物的流体的样品可以与包含基本上相同量的检测试剂的基本上相同的基质接触，从而形成提供第三信号的、接触了未知的基质，第三信号可以与第一信号和第二信号比较，用于确定两种信号的哪一个与第三信号更紧密地接近。对诊断测试条和化学领域的技术人员显而易见的是，任意的许多浓度的模型硫醇化合物的每一种所提供的信号可以被检测和记录，用于建立任意的许多参考值。在这样的参考值、以及它们的合适的统计学处理的基础上，解释和/或建立标准曲线和/或确定动态范围界限的合适的方式，对于诊断测试条和化学领域的技术人员也是显而易见的。许多硫醇化合物的任一种，例如，二硫苏糖醇或 2-巯基乙醇，可以用作模型硫醇化合物。类似地，对于与受试者患有特定状况或疾病的风险相关的参考值，通过测定例如由根据本发明的多个基质提供的信号的平均值或中值或范围，所述基质的每一个已经与获自不患有所述特定状况或疾病的群体成员的生理性流体的样品接触，可以建立参考值（状况或疾病的较低风险的指示）， 并且，通过以类似方式测定由根据本发明的多个基质提供的信号的平均值或中值或范围，所述基质的每一个已经与获自患有所述特定状况或疾病的群体成员的生理性流体的样品接触，可以建立另一种参考值（状况或疾病的较高风险的指示）。
在以下其他的说明性实例中又进一步描述了本发明。
在第一个另外的说明性实施例中，发现的是 5-（2-氨乙基）-二硫代-2-硝基苯甲酸是根据本发明有用的硫醇检测试剂。就此来说，例如，化学计量的量的 5-（2-氨乙基）-二硫代-2-硝基苯甲酸可以完全地或部分地代替5,5'-二硫代双-（2-硝基苯甲酸）的量。
在第二个另外的说明性实施例中，发现的是，对于通过采样来自哺乳动物受试者的流体、特别是来自哺乳动物受试者的口腔的流体而可检测的状况，根据本发明的制品对于以下的每一个是有用的：筛选所述状况；检测所述状况；诊断所述状况；监视所述状况；和/或在筛选所述状况、检测所述状况、诊断所述状况和/或监视所述状况中充当辅助和/或添加剂。
在第三个另外的说明性实施例中，哺乳动物受试者的状况，针对所述状况根据本发明的制品在筛选所述状况、检测所述状况、诊断所述状况、监视所述状况；和/或在筛选所述状况、检测所述状况、诊断所述状况、监视所述状况中充当辅助和/或添加剂方面是有用的，包括以下的任何一种或更多种： 牙周炎；齿龈炎；口臭；牙周疾病；牙周疾病活性；厌氧微生物感染；心血管疾病的提高的风险；II型糖尿病的提高的风险；和/或早产的提高的风险。
在第四个另外的说明性实施例中，根据本发明的制品在以下方式或任何其等价物中是有用的。在一种或多种研究中，对于多个哺乳动物受试者的每一个，测定来自所述受试者的流体的样品中的硫醇浓度，例如，根据上述的方面13。另外，对于多个哺乳动物受试者的每一个，测定所述受试者的状况，以及，特别地，例如，对于在上文第三个另外的说明性实施例中描述的任何一种或更多种状况的受试者状况。组合数据库，其中由此测定的硫醇浓度和由此测定的状况相互联系。从而建立硫醇浓度和状况之间的关系。
在第五个另外的说明性实施例中，根据上文第四个另外的说明性实施例建立的关系是，更高的硫醇浓度与所述状况的更高的发生率和/或发病率和/或风险相关。
在第六个另外的说明性实施例中，根据上文第四个另外的说明性实施例建立的关系是，大于或等于阈值浓度的硫醇浓度与所述状况的有意义的更高的发生率和/或发病率和/或风险相关。
在第七个另外的说明性实施例中，根据本发明的制品与来自受试者的流体的样品接触，测定所述样品中的硫醇浓度，例如，根据上文的方面13。样品中的硫醇浓度与上文的第六个另外的说明性实施例的阈值浓度比较。如果所述样品中的硫醇浓度大于或等于所述阈值浓度，确定的是所述受试者处在患有所述状况的有意义的风险中。
在第八个另外的说明性实施例中，根据所述第七个另外的说明性实施例的状况是牙周炎，所述阈值浓度在约150微摩尔和约500微摩尔之间，或约155微摩尔和约400微摩尔之间，或约160微摩尔和约300微摩尔之间。
在第九个另外的说明性实施例中，根据所述第七个另外的说明性实施例的状况是齿龈炎，所述阈值浓度在约75微摩尔和约300微摩尔之间，或约78微摩尔和约200微摩尔之间，或约80微摩尔和约150微摩尔之间。
在第十个另外的说明性实施例中，根据所述第七个另外的说明性实施例的状况是口臭，所述阈值浓度在约38微摩尔和约100微摩尔之间，或约39微摩尔和约90微摩尔之间，或约40微摩尔和约80微摩尔之间。
在第十一个另外的说明性实施例中，根据所述第七个另外的说明性实施例的状况是心血管疾病，所述阈值浓度在约150微摩尔和约500微摩尔之间，或约155微摩尔和约400微摩尔之间，或约160微摩尔和约300微摩尔之间。
在第十二个另外的说明性实施例中，根据所述第七个另外的说明性实施例的状况是II型糖尿病，所述阈值浓度在约150微摩尔和约500微摩尔之间，或约155微摩尔和约400微摩尔之间，或约160微摩尔和约300微摩尔之间。
在第十三个另外的说明性实施例中，根据所述第七个另外的说明性实施例的状况是早产，所述阈值浓度在约150微摩尔和约500微摩尔之间，或约155微摩尔和约400微摩尔之间，或约160微摩尔和约300微摩尔之间。
在第十四个另外的说明性实施例中，根据所述第七个另外的说明性实施例的状况是心血管疾病，所述阈值浓度在约75微摩尔和约300微摩尔之间，或约78微摩尔和约200微摩尔之间，或约80微摩尔和约150微摩尔之间。
在第十五个另外的说明性实施例中，根据所述第七个另外的说明性实施例的状况是II型糖尿病，所述阈值浓度在约75微摩尔和约300微摩尔之间，或约78微摩尔和约200微摩尔之间，或约80微摩尔和约150微摩尔之间。
在第十六个另外的说明性实施例中，根据所述第七个另外的说明性实施例的状况是早产，所述阈值浓度在约75微摩尔和约300微摩尔之间，或约78微摩尔和约200微摩尔之间，或约80微摩尔和约150微摩尔之间。
在第十七个另外的说明性实施例中，根据本发明的制品与口腔中的位点接触来根据所述第七个另外的说明性实施例从受试者采集流体的样品，所述根据第七个另外的说明性实施例的状况是任何一种或更多种：牙周炎；齿龈炎；牙周疾病；牙周疾病活性；和/或厌氧微生物感染。在这种第十七个另外的说明性实施例中，如果样品中的硫醇浓度大于或等于阈值浓度，确定所述受试者处于在接触所述制品的口腔中的位点处具有状况的有意义的风险中。
在第十八个另外的说明性实施例中，根据本发明的制品与口腔中的部位接触来根据第七个另外的说明性实施例从受试者采集流体的样品。在这种第十八个另外的说明性实施例中，所述制品接触的口腔中的部位包括一种或多种的：下口腔龈线；门齿之间的下口腔龈线；舌的前庭；舌背面；左侧下口腔龈线；和/或右侧下口腔龈线。样品中的硫醇浓度与上文的第六个另外的说明性实施例的阈值浓度比较。如果所述样品中的硫醇浓度大于或等于所述阈值浓度，确定的是所述受试者处在患有所述状况的有意义的风险中。
虽然上述说明书和实施例完全地公开和实现了本发明，它们不意味着限制本发明的范围，本发明的范围由附随的权利要求定义。本发明所属领域的技术人员将认识到本申请中公开的内容的等价物。因此，本发明涵盖了附随的权利要求的范围，以及要求本申请的优先权的、和/或来自本申请的以及参考本申请的任何专利中的范围，以及任何和所有的等价物。
所有公开物、专利和专利申请通过引用合并在此。在任何这样的参考文献的内容和除了任何这样的参考文献之外的本申请的教导的内容之间存在任何冲突或不一致的情况的程度上，在任何这样的参考文献之外的本申请的教导的内容应当是决定性的。虽然在以上的说明书中已经相对于其某些优选的实施方式描述了本发明，为了例示的目的阐述了许多细节，对于本领域技术人员明显的是，本发明对于其他实施方式是易于接受的，在此描述的某些细节可以被显著地改变而不背离本发明的基本原理。
在描述本发明的上下文中术语“一”以及“该”和类似对象的使用被认为是覆盖了单数和复数，除非在此另有陈述或上下文明显抵触。术语“包含”、“具有”、“包括”和“含有”被看作是开放性的术语（即，意味着“包括但不限于”），除非另有说明。此处的数值范围的叙述仅仅意图充当单独引用落入该范围的每个独立的值的简便方法，除非在此另有陈述，每个独立的值被合并到说明书中，如同它是在此单独地叙述的。此处描述的所有方法按照任何适合的顺序进行，除非在此另有陈述或与上下文明显抵触。在此提供的任何和所有实例、或示范性的措辞（如，“例如”）的使用，仅仅意图更好地说明本发明，不构成对本发明的范围的限制，除非另有陈述。在说明书中的用语不应被看作表示任何未声明的元素对于本发明的实践是必需的。
在此已经描述了本发明的优选的实施方式，包括发明人已知的用于进行本发明的最佳方式。对那些优选的实施方式的变化在普通技术人员阅读上述描述时将会或可能变得显而易见。发明人设想熟练的技术人员视情况采用这样的变化，发明人希望本发明除了在此具体描述的之外地实践。因此，本发明包括由适用法律所许可的、附随在此的权利要求中叙述的主题的所有修改体和等价物。此外，上文描述的元素在所有其可能的变体中的任何组合被本发明涵盖，除非在此另有陈述或明显与上下文矛盾。

Claims (107)

1.一种用于测定流体的样品中硫醇化合物的浓度的单次使用的可丢弃的制品，所述制品包括：
(a) 包含至少一种吸收材料的基质，所述基质能够吸收所述样品；和
(b) 一定量的检测试剂，在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后的时间期间，所述检测试剂的量能够提供表明所述样品中硫醇化合物的浓度的信号。
2.权利要求1的制品，其中所述制品是测试条。
3.权利要求1或权利要求2的制品，其中所述流体的样品是生理性流体的样品。
4.权利要求3的制品，其中所述生理性流体是口腔流体。
5.权利要求4的制品，其中所述口腔流体包括唾液和/或龈沟液和/或龈线生物膜和/或舌生物膜和/或舌刮擦物和/或呼吸。
6.权利要求1到5的任一项的制品，其中所述至少一种吸收材料包括聚酰胺材料。
7.权利要求1到6的任一项的制品，其中所述检测试剂包括至少一种的：5,5'-二硫代双-（2-硝基苯甲酸）；5-（2-氨乙基）-二硫代-2-硝基苯甲酸；N,N'-二（4-硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（3-硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（2-硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（2,4-二硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（4-nitrocinnamalylidene）-4,4'-二硫代二苯胺。
8.权利要求7的制品，其中所述检测试剂是5,5'-二硫代双-（2-硝基苯甲酸）。
9.权利要求1到8的任一项的制品，其中所述时间在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后约一秒开始，在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后约十分钟结束。
10.权利要求1到8的任一项的制品，其中所述时间在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后约五秒开始，在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后约五分钟结束。
11.权利要求1到10的的任一项的制品，其中所述信号包括电磁信号。
12.权利要求11的制品，其中所述电磁信号包括可见信号。
13.权利要求12的制品，进一步包括比较物区域，所述比较物区域包含至少一个颜色样片，相对于所述颜色样片来比较所述可见信号。
14.一种用于测定流体的样品中硫醇化合物的浓度的方法，所述方法包括：
(a) 提供单次使用的可丢弃的制品，其包含（i）包含至少一种吸收材料的基质，所述基质能够吸收所述样品；和（ii）一定量的检测试剂，在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后的时间期间，所述检测试剂的量能够提供表明所述样品中硫醇化合物的浓度的信号；
(b) 使所述基质与所述样品接触；
(c) 观察由所述检测试剂的量提供的信号；
(d) 将所述检测试剂的量所提供的信号与一个或更多个参考值比较，参考值的每一个是硫醇化合物的浓度的指示,
从而测定所述样品中硫醇化合物的浓度。
15.权利要求14的方法，其中所述流体是生理性流体。
16.权利要求15的方法，其中所述生理性流体是口腔流体。
17.权利要求16的方法，其中所述口腔流体包括唾液和/或龈沟液和/或龈线生物膜和/或舌生物膜和/或舌刮擦物和/或呼吸。
18.权利要求14到17的任一项的方法，其中所述制品是测试条。
19.权利要求 14到 18的任一项的方法，其中所述至少一种吸收材料包括聚酰胺材料。
20.权利要求14到19的任一项的方法，其中所述检测试剂包括至少一种的：5,5'-二硫代双-（2-硝基苯甲酸）；5-（2-氨乙基）-二硫代-2-硝基苯甲酸；N,N'-二（4-硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（3-硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（2-硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（2,4-二硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（4-nitrocinnamalylidene）-4,4'-二硫代二苯胺。
21.权利要求20的方法，其中所述检测试剂是5,5'-二硫代双-（2-硝基苯甲酸）。
22.权利要求14到21的任一项的方法，其中所述时间在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后约一秒开始，在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后约十分钟结束。
23.权利要求14到21的任一项的方法，其中所述时间在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后约五秒开始，在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后约五分钟结束。
24.权利要求14到23的任一项的方法，其中所述信号包括电磁信号。
25.权利要求24的方法，其中所述电磁信号包括可见信号。
26.权利要求14到25的任一项的方法，其中所述一个或更多个参考值的每一个是作为（a）颜色的样片和（b）硫醇化合物的浓度的配对的组合提供的。
27.权利要求14到26的任一项的方法，其中所述观察和/或比较的步骤的至少一个是由自动化的读取器进行的。
28.一种用于测定哺乳动物受试者患有特定疾病的风险的方法，所述方法包括：
(a) 提供单次使用的可丢弃的制品，其包含（i）包含至少一种吸收材料的基质，所述基质能够吸收所述样品；和（ii）一定量的检测试剂，在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后的时间期间，所述检测试剂的量能够提供表明所述样品中硫醇化合物的浓度的信号；
(b) 使所述基质与包含来自所述受试者的一种或更多种生理性流体的样品接触；
(c) 观察由所述检测试剂的量提供的信号；
(d) 将所述检测试剂的量提供的信号与一个或更多个参考值比较，所述参考值的每一个是受试者患有特定疾病的风险的指示，
从而确定所述受试者患有特定疾病的风险。
29.权利要求28的方法，其中所述流体是生理性流体。
30.权利要求29的方法，其中所述生理性流体是口腔流体。
31.权利要求30的方法，其中所述口腔流体包括唾液和/或龈沟液和/或龈线生物膜和/或舌生物膜和/或舌刮擦物和/或呼吸。
32.权利要求28到31的任一项的方法，其中所述制品是测试条。
33.权利要求28到32的任一项的方法，其中所述至少一种吸收材料包括聚酰胺材料。
34.权利要求28到33的任一项的方法，其中所述检测试剂包括至少一种的：5,5'-二硫代双-（2-硝基苯甲酸）；5-（2-氨乙基）-二硫代-2-硝基苯甲酸；N,N'-二（4-硝基苯亚甲基）-4,4 '-二硫代二苯胺；N,N'-二（3-硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（2-硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（2,4-二硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（4-nitrocinnamalylidene）-4,4'-二硫代二苯胺。
35.权利要求34的方法，其中所述检测试剂是5,5'-二硫代双-（2-硝基苯甲酸）。
36.权利要求28到35的任一项的方法，其中所述时间在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后约一秒开始，在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后约十分钟结束。
37.权利要求28到35的任一项的方法，其中所述时间在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后约五秒开始，在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后约五分钟结束。
38.权利要求28到37的任一项的方法，其中所述信号包括电磁信号。
39.权利要求38的方法，其中所述电磁信号包括可见信号。
40.权利要求28到39的任一项的方法，其中所述一个或更多个参考值的每一个是作为（a）颜色的样片和（b）受试者患有特定疾病的风险的配对的组合提供的。
41.权利要求28到40的任一项的方法，其中所述观察和/或比较的步骤的至少一个是由自动化的读取器进行的。
42.权利要求28到41的任一项的方法，其中所述特定的疾病是牙周炎。
43.权利要求28到41的任一项的方法，其中所述特定的疾病是齿龈炎。
44.权利要求28到41的任一项的方法，其中所述特定的疾病是口臭。
45.权利要求28到41的任一项的方法，其中所述特定的疾病是心血管疾病。
46.权利要求28到41的任一项的方法，其中所述特定的疾病是II型糖尿病。
47.权利要求28到41的任一项的方法，其中所述特定的疾病是早产。
48.一种试剂盒，包括：
（a） 至少一个用于测定流体的样品中硫醇化合物的浓度的单次使用的可丢弃的制品，所述制品包括：
（i）包含至少一种吸收材料的第一基质，所述基质能够吸收所述样品；和
（ii）一定量的检测试剂，在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后的时间期间，所述检测试剂的量能够提供表明所述样品中硫醇化合物的浓度的可见信号；
（b） 比较物，其上印刷和/或固定了：
（i）至少一个颜色样片，相对所述颜色样片来比较所述可见信号；和
（ii）与每个颜色样片相联系的，表明与所述颜色样片相关的硫醇化合物的相对浓度的字母数字标识符；
(c) 任选地，适合于含有所述制品和所述比较物的包装；
(d) 任选地，所述制品和所述比较物的使用说明书。
49.一种用于测定来自哺乳动物受试者的流体的样品中硫醇化合物的浓度的单次使用的可丢弃的测试条，所述测试条包括：
(a) 包含至少一种吸收材料的基质，所述基质能够吸收所述样品；和
(b) 一定量的检测试剂，在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后的时间期间，所述检测试剂的量能够提供表明所述样品中硫醇化合物的浓度的信号。
50.权利要求49的测试条，其中所述流体包括唾液和/或龈沟液和/或龈线生物膜和/或舌生物膜和/或舌刮擦物和/或呼吸。
51.权利要求49或50的的测试条，其中所述检测试剂包括至少一种的：5,5'-二硫代双-（2-硝基苯甲酸）；5-（2-氨乙基）-二硫代-2-硝基苯甲酸；N,N'-二（4-硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（3-硝基苯亚甲基）-4,4'-二硫代二苯胺；N,N'-二（2-硝基苯亚甲基）-4,4 '-二硫代二苯胺；N,N'-二（2,4-二硝基苯亚甲基）-4,4 '-二硫代二苯胺；N,N'-二（4-nitrocinnamalylidene）-4,4 '-二硫代二苯胺。
52.权利要求51的测试条，其中所述检测试剂是5,5'-二硫代双-（2-硝基苯甲酸）。
53.权利要求49到52的任一项的测试条，其中所述时间在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后约一秒开始，在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后约十分钟结束。
54.权利要求49到52的任一项的测试条，其中所述时间在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后约五秒开始，在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后约五分钟结束。
55.权利要求49到54的的任一项的测试条，其中所述信号包括电磁信号。
56.权利要求55的测试条，其中所述电磁信号包括可见信号。
57.一种用于测定哺乳动物受试者患有特定疾病的风险的单次使用的可丢弃的测试条，所述测试条包括：
(a) 包含至少一种吸收材料的基质，所述基质能够吸收所述样品；和
(b) 一定量的检测试剂，在所述检测试剂的量的至少一部分与所述样品的至少一部分接触之后的时间期间，所述检测试剂的量能够提供表明所述受试者患有特定疾病的风险的信号，和其中
（i）所述检测试剂包括以下的至少一种：5,5'-二硫代双-（2-硝基苯甲酸）；5-（2-氨乙基）-二硫代-2-硝基苯甲酸，N,N'-二（4-硝基苯亚甲基）-4,4 '-二硫代二苯胺；N,N'-二（3-硝基苯亚甲基）-4,4 '-二硫代二苯胺；N,N'-二（2-硝基苯亚甲基）-4,4 '-二硫代二苯胺；N,N'-二（2,4-二硝基苯亚甲基）-4,4 '-二硫代二苯胺；N,N'-二（4-nitrocinnamalylidene）-4,4 '-二硫代二苯胺；和
（ii）所述特定疾病是以下至少一种：牙周炎、齿龈炎、口臭、心血管疾病、II型糖尿病、早产。
58.权利要求57的测试条，其中所述检测试剂包含5,5'-二硫代双-（2-硝基苯甲酸）。
59.权利要求57或58的测试条，其中所述特定疾病是牙周炎。
60.权利要求57或58的测试条，其中所述特定疾病是齿龈炎。
61.权利要求57或58的测试条，其中所述特定疾病是口臭。
62.权利要求57或58的测试条，其中所述特定疾病是心血管疾病。
63.权利要求57或58的测试条，其中所述特定疾病是II型糖尿病。
64.权利要求57或58的测试条，其中所述特定疾病是早产。
65.一种试剂溶液，包含：缓冲液、5,5 '-二硫代双（2-硝基苯甲酸）（DTNB）和湿润剂。
66.权利要求65的试剂溶液，其中所述缓冲液是浓度约5 mM到200 mM的磷酸钠缓冲液。
67.权利要求65的试剂溶液，其中所述缓冲液是浓度约20 mM到150 mM的磷酸钠缓冲液。
68.权利要求65的试剂溶液，其中所述缓冲液是浓度约100mM的磷酸钠缓冲液。
69.权利要求65到68的任一项的试剂溶液，其中所述缓冲液的pH值是约6.5到8.5。
70.权利要求65到68的任一项的试剂溶液，其中所述缓冲液的pH值是约6.5到7.5。
71.权利要求65到68的任一项的试剂溶液，其中所述缓冲液的pH值是约7.0。
72.权利要求65到71的任一项的试剂溶液，其中所述DTNB以约10 mg/L到150 mg/L的浓度存在。
73.权利要求65到71的任一项的试剂溶液，其中所述DTNB以约80 mg/L到120 mg/L的浓度存在。
74.权利要求65到71的任一项的试剂溶液，其中所述DTNB以约100 mg/L的浓度存在。
75.权利要求65到74的任一项的试剂溶液，其中所述湿润剂包括甘油、木糖醇、山梨醇、甘油或丙二醇。
76.权利要求75的试剂溶液，其中所述湿润剂包括甘油。
77.权利要求76的试剂溶液，其中所述甘油以按体积约0.1%到5.0%的浓度存在。
78.权利要求76的试剂溶液，其中所述甘油以按体积约0.5%的浓度存在。
79.权利要求75的试剂溶液，其中所述湿润剂包括木糖醇。
80.权利要求79的试剂溶液，其中所述木糖醇以按重量约2%到10%的浓度存在。
81.权利要求79的试剂溶液，其中所述木糖醇以按重量约4%的浓度存在。
82.权利要求65到81的任一项的试剂溶液，进一步包含调味剂或香剂。
83.权利要求82的试剂溶液，其中所述调味剂或香剂是薄荷。
84.权利要求65到83的任一项的试剂溶液，进一步包含醇。
85.权利要求84的试剂溶液，其中所述醇是异丙醇或乙醇。
86.权利要求65到85的任一项的试剂溶液，进一步包含碱土金属或过渡金属。
87.权利要求86的试剂溶液，其中所述金属包括锰、镁或钴。
88.一种包含固体基底的检测设备，所述固体基底包含检测区域，其中所述检测区域浸透权利要求65-87的任一项的试剂溶液。
89.权利要求88的检测设备，其中所述试剂溶液在所述固体基底上被干燥。
90.权利要求88或89的检测设备，其中所述固体基底是惰性纤维的垫片。
91.权利要求90的检测设备，其中所述纤维包括美国专利NO. 7,290,668中描述的至少一种材料。
92.权利要求90的检测设备，其中所述纤维包含称为R-27378或R28445 D#4345的TRANSORB®牌材料。
93.权利要求88到92的任一项的检测设备，其中所述固体基底是矩形的，或由一个或多个模切的形状组成，一般最多大约8 mm×8 mm，以及约1.0 mm的厚度。
94.权利要求88-93的任一项的检测设备，其中所述固体基底进一步包含一个或更多个标准区域。
95.权利要求94的检测设备，其中所述一个或更多个标准区域包含预定颜色和强度的比色标准。
96.一种制造硫醇化合物检测设备的方法，包括：使固体基底与根据权利要求65-87的任一项的试剂溶液接触，以及干燥所述设备，从而形成所述检测设备。
97.通过权利要求96的方法制造的检测设备。
98.一种检测受试者中的口臭的方法，包括使采自所述受试者的口腔的生理性流体与权利要求88到95或权利要求97的任一项的检测设备接触来形成接触了生理性流体的设备，以及检测所述接触了生理性流体的设备中硫醇化合物浓度水平，其中至少约40微摩尔的硫醇的水平是口臭的指示。
99.一种检测受试者中的齿龈炎的方法，包括使采自所述受试者的口腔的生理性流体与权利要求88到95或权利要求97的任一项的检测设备接触来形成接触了生理性流体的设备，以及检测所述接触了生理性流体的设备中硫醇化合物浓度水平，其中至少约80微摩尔的硫醇的水平是齿龈炎的指示。
100.一种检测受试者中的牙周疾病的方法，包括使采自所述受试者的口腔的生理性流体与权利要求88到95或权利要求97的任一项的检测设备接触来形成接触了生理性流体的设备，以及检测所述接触了生理性流体的设备中硫醇化合物浓度水平，其中至少约160微摩尔的硫醇的水平是牙周炎的指示。
101.权利要求98、99或100的任一项的方法，其中所述检测是通过比较（a）接触了生理性流体的设备与（b）标准物的颜色强度或吸光度来进行的。
102.权利要求101的方法，其中所述检测是通过眼睛进行的。
103.权利要求101的方法，其中所述检测是通过机械进行的。
104.权利要求101的方法，其中所述检测是通过分光光度计进行的。
105.权利要求101到104的任一项的方法，其中所述检测提供了定量或半定量的信号。
106.权利要求98到105的任一项的方法，其中所述生理性流体是GCF、舌刮擦物、舌生物膜、龈线生物膜、唾液或呼吸。
107.一种对于口腔硫醇化合物的检测有用的测试试剂盒，包括权利要求65的试剂溶液，以及权利要求88的检测设备或权利要求97的检测设备。
CN200980131587.7A 2008-06-13 2009-06-15 用于疾病相关的硫醇化合物的快速测定的设备 Expired - Fee Related CN102124337B (zh)

Applications Claiming Priority (9)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US13197308P 2008-06-13 2008-06-13
US61/131973 2008-06-13
US14539309P 2009-01-16 2009-01-16
US61/145393 2009-01-16
US16014209P 2009-03-13 2009-03-13
US61/160142 2009-03-13
US18645309P 2009-06-12 2009-06-12
US61/186453 2009-06-12
PCT/US2009/047393 WO2009152513A1 (en) 2008-06-13 2009-06-15 Device for rapid determination of disease-associated thiol compounds

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN102124337A true CN102124337A (zh) 2011-07-13
CN102124337B CN102124337B (zh) 2015-06-10

Family

ID=40983443

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN200980131587.7A Expired - Fee Related CN102124337B (zh) 2008-06-13 2009-06-15 用于疾病相关的硫醇化合物的快速测定的设备

Country Status (8)

Country Link
US (2) US8815152B2 (zh)
EP (2) EP2243029B1 (zh)
JP (2) JP5385380B2 (zh)
CN (1) CN102124337B (zh)
AU (1) AU2009202908B2 (zh)
CA (1) CA2727668A1 (zh)
HK (1) HK1150296A1 (zh)
WO (1) WO2009152513A1 (zh)

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102183471A (zh) * 2011-01-11 2011-09-14 山西大学 检测硫醇的方法和试剂盒
CN103575730A (zh) * 2013-10-21 2014-02-12 华南农业大学 一种检测蛋白质烷基化修饰剂peg修饰能力的试剂盒及其使用方法
CN105675808A (zh) * 2016-01-06 2016-06-15 广东欧珀移动通信有限公司 基于移动终端的口臭检测方法和系统
CN107407680A (zh) * 2015-02-05 2017-11-28 Ath澳大利亚私人有限公司 用于检测疾病的包括含汞试剂的制剂
CN108535249A (zh) * 2018-04-25 2018-09-14 郑州贝贝生物科技有限公司 农药残留快速检测点卡
CN109459568A (zh) * 2019-01-15 2019-03-12 西安交通大学 纸基牙周炎检测装置和牙周炎检测方法
CN111398511A (zh) * 2020-04-03 2020-07-10 杭州布封科技有限公司 一种用于检测幽门螺杆菌的检测装置及检测方法
CN112999223A (zh) * 2013-11-22 2021-06-22 博世健康爱尔兰有限公司 抗感染的方法、组合物和装置

Families Citing this family (33)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011082354A2 (en) 2009-12-30 2011-07-07 The State Of Oregon Acting By And Through The State Board Of Higher Education On Behalf Of Portland State University Thiol detection
US9650273B2 (en) * 2012-09-25 2017-05-16 Michael James Jungbauer Systems and methods for treating produced water
WO2014098865A1 (en) 2012-12-20 2014-06-26 Hill's Pet Nutrition, Inc. Pattern recognition receptor expression as a measure of systemic health
JP2016524144A (ja) * 2013-05-30 2016-08-12 エーエルティー バイオサイエンス， エルエルシー． アミンおよびチオールの同時検出のための装置
KR101692062B1 (ko) * 2014-12-09 2017-01-03 오스템임플란트 주식회사 휴대용 구취 측정 표시자 및 이의 제조방법
US9864823B2 (en) 2015-03-30 2018-01-09 Uop Llc Cleansing system for a feed composition based on environmental factors
WO2016196370A1 (en) * 2015-05-29 2016-12-08 PDx BioTech Device for detection and/or monitoring of food spoilage
WO2017002754A1 (ja) * 2015-06-29 2017-01-05 国立大学法人徳島大学 蛍光色素を用いた歯周病の簡易検査
US20180024073A1 (en) * 2016-07-21 2018-01-25 Ronald Schornstein Reach-extended test strip
US10545487B2 (en) 2016-09-16 2020-01-28 Uop Llc Interactive diagnostic system and method for managing process model analysis
JP6738719B2 (ja) * 2016-12-06 2020-08-12 テラメックス株式会社 試験片収納容器
JP7066726B2 (ja) * 2017-01-27 2022-05-13 ベクトン・ディキンソン・アンド・カンパニー 流体試料中のグルコース濃度を検出するための垂直流アッセイデバイス
US10754359B2 (en) 2017-03-27 2020-08-25 Uop Llc Operating slide valves in petrochemical plants or refineries
US10678272B2 (en) 2017-03-27 2020-06-09 Uop Llc Early prediction and detection of slide valve sticking in petrochemical plants or refineries
US11130111B2 (en) 2017-03-28 2021-09-28 Uop Llc Air-cooled heat exchangers
US10670353B2 (en) 2017-03-28 2020-06-02 Uop Llc Detecting and correcting cross-leakage in heat exchangers in a petrochemical plant or refinery
US11396002B2 (en) 2017-03-28 2022-07-26 Uop Llc Detecting and correcting problems in liquid lifting in heat exchangers
US10794644B2 (en) 2017-03-28 2020-10-06 Uop Llc Detecting and correcting thermal stresses in heat exchangers in a petrochemical plant or refinery
US10663238B2 (en) 2017-03-28 2020-05-26 Uop Llc Detecting and correcting maldistribution in heat exchangers in a petrochemical plant or refinery
US10752845B2 (en) 2017-03-28 2020-08-25 Uop Llc Using molecular weight and invariant mapping to determine performance of rotating equipment in a petrochemical plant or refinery
US10962302B2 (en) 2017-03-28 2021-03-30 Uop Llc Heat exchangers in a petrochemical plant or refinery
US10695711B2 (en) 2017-04-28 2020-06-30 Uop Llc Remote monitoring of adsorber process units
US10913905B2 (en) 2017-06-19 2021-02-09 Uop Llc Catalyst cycle length prediction using eigen analysis
US11365886B2 (en) 2017-06-19 2022-06-21 Uop Llc Remote monitoring of fired heaters
US10739798B2 (en) 2017-06-20 2020-08-11 Uop Llc Incipient temperature excursion mitigation and control
US11130692B2 (en) 2017-06-28 2021-09-28 Uop Llc Process and apparatus for dosing nutrients to a bioreactor
US11194317B2 (en) 2017-10-02 2021-12-07 Uop Llc Remote monitoring of chloride treaters using a process simulator based chloride distribution estimate
US11105787B2 (en) 2017-10-20 2021-08-31 Honeywell International Inc. System and method to optimize crude oil distillation or other processing by inline analysis of crude oil properties
KR102196655B1 (ko) * 2017-11-16 2020-12-30 고려대학교 산학협력단 커피 분석 센서 및 이를 포함하는 커피 분석 시스템
US10901403B2 (en) 2018-02-20 2021-01-26 Uop Llc Developing linear process models using reactor kinetic equations
US10734098B2 (en) 2018-03-30 2020-08-04 Uop Llc Catalytic dehydrogenation catalyst health index
US10953377B2 (en) 2018-12-10 2021-03-23 Uop Llc Delta temperature control of catalytic dehydrogenation process reactors
JP7466163B1 (ja) 2023-04-06 2024-04-12 株式会社ガステック インジケータ及び濃度測定システム

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4414414A (en) * 1981-09-14 1983-11-08 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army 4,4'-Dithiodianil
US6007999A (en) * 1991-07-31 1999-12-28 Idexx Laboratories, Inc. Reversible flow chromatographic binding assay
US20040076584A1 (en) * 2002-10-18 2004-04-22 Pendergrass James C. Compositions and methods for simultaneous detection of volatile sulfur compounds and polyamines
WO2006094185A2 (en) * 2005-03-03 2006-09-08 Dmi Biosciences Inc. Quantification of proteins
US20070053849A1 (en) * 2000-06-30 2007-03-08 The Procter & Gamble Company Oral care compositions containing combinations of anti-bacterial and host-response modulating agents

Family Cites Families (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3119668A (en) * 1959-01-26 1964-01-28 Dow Chemical Co Sulfhydryl tests and compounds therefor
US3318910A (en) * 1963-12-05 1967-05-09 American Cyanamid Co 2-iminothiolanes and related compounds
US4334540A (en) * 1979-05-01 1982-06-15 Monell Chemical Senses Center Method of diagnosing periodontal disease through the detection of pyridine compounds
JPS57148252A (en) 1981-03-10 1982-09-13 Kao Corp Detecting agent for halitosis
US4578357A (en) * 1983-06-27 1986-03-25 Atlantic Richfield Company Stabilized water indicating paste composition
US4898813A (en) 1986-04-04 1990-02-06 Albarella James P Catalytic test composition intended to produce a range of colors
US5187105A (en) * 1988-07-01 1993-02-16 Miles Inc. Process for determining thiols using chromogenic benzoisothiazolone derivatives
AU645745B2 (en) * 1988-12-22 1994-01-27 Xoma Corporation Hindered linking agents and methods
JPH0469570A (ja) 1990-07-10 1992-03-04 Terumo Corp 分析用試験片
IL97318A0 (en) * 1991-02-20 1992-05-25 Diagnostic Markers Inc Method for the very rapid detection of polyamines
AU3661193A (en) * 1992-02-10 1993-09-03 Actimed Laboratories, Inc. Method for immobilizing dye on substrates
JPH09225322A (ja) 1995-04-14 1997-09-02 Sekisui Chem Co Ltd 光触媒体
WO1997005482A1 (en) 1995-07-31 1997-02-13 The Oralife Group, Inc. A colorimetric method of detecting thiol or mercaptan compounds and its use for oral malodor determination
US5660790A (en) * 1996-08-13 1997-08-26 Litmus Concepts, Inc. PH and amine test elements
JP3949126B2 (ja) 1997-03-19 2007-07-25 テルモ株式会社 成分測定用チップ
US6174696B1 (en) * 1999-11-12 2001-01-16 Genzyme Corporation Method for the determination of homocysteine
ES2167201B1 (es) * 2000-01-18 2003-10-01 Univ Oviedo Dispositivo optico visual para el control de la halitosis.
US6255066B1 (en) * 2000-02-08 2001-07-03 Allan L. Louderback Bacterial vaginosis screening technique and a diagnostic kit for use therein
DE10034647C1 (de) * 2000-07-14 2002-04-04 3M Espe Ag Verfahren zur Durchführung einer Speichelanalyse
US20020120406A1 (en) * 2001-02-01 2002-08-29 Avraham Lorber Diagnostic method and apparatus
IL141233A0 (en) * 2001-02-01 2002-03-10 Scent Ltd Q Diagnostic method and apparatus
JP3878581B2 (ja) * 2002-07-12 2007-02-07 三洋化成工業株式会社 診断用吸収材および吸収性物品
US7041469B2 (en) * 2002-10-10 2006-05-09 Quidel Corporation Assays for trichomonal and other hydrolases
JP2004219309A (ja) * 2003-01-16 2004-08-05 Sapporo Imuno Diagnostic Laboratory:Kk 唾液糖測定方法および測定キット
JP4081034B2 (ja) 2003-04-22 2008-04-23 花王株式会社 体臭判定用指標物質、体臭判定方法及びデオドラント剤の有効性判定方法
CA2543350C (en) * 2003-10-24 2011-04-26 Adhesives Research, Inc. Disintegratable films for diagnostic devices
US7290668B2 (en) * 2004-03-01 2007-11-06 Filtrona Richmond, Inc. Bicomponent fiber wick
US20060084175A1 (en) * 2004-10-19 2006-04-20 Wayne Comper Colorimetric strip containing coomassie blue for semi-quantitation of albumin
US20090104242A1 (en) * 2005-07-28 2009-04-23 Indiana University Research & Technology Corporati Niobium oxide compositions, nanostructures, bioactive forms and uses thereof
JP2008107090A (ja) * 2006-10-23 2008-05-08 Nippon Telegr & Teleph Corp <Ntt> ガス濃度検知シートおよびガス検知紙の製造方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4414414A (en) * 1981-09-14 1983-11-08 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army 4,4'-Dithiodianil
US6007999A (en) * 1991-07-31 1999-12-28 Idexx Laboratories, Inc. Reversible flow chromatographic binding assay
US20070053849A1 (en) * 2000-06-30 2007-03-08 The Procter & Gamble Company Oral care compositions containing combinations of anti-bacterial and host-response modulating agents
US20040076584A1 (en) * 2002-10-18 2004-04-22 Pendergrass James C. Compositions and methods for simultaneous detection of volatile sulfur compounds and polyamines
WO2006094185A2 (en) * 2005-03-03 2006-09-08 Dmi Biosciences Inc. Quantification of proteins

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CHRISTIAN K. RIENER，ET AL.: "Quick measurement of protein sulfhydryls with Ellman"s reagent and with 4, 4′-dithiodipyridine", 《ANALYTICAL AND BIOANALYTICAL CHEMISTRY》 *
孟焕新: "牙周炎与糖尿病的关系", 《北京大学学报（医学版）》 *
潘锋: "牙周炎不只是牙的问题", 《科技文萃》 *

Cited By (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102183471A (zh) * 2011-01-11 2011-09-14 山西大学 检测硫醇的方法和试剂盒
CN103575730A (zh) * 2013-10-21 2014-02-12 华南农业大学 一种检测蛋白质烷基化修饰剂peg修饰能力的试剂盒及其使用方法
CN103575730B (zh) * 2013-10-21 2016-03-30 华南农业大学 一种检测蛋白质烷基化修饰剂peg修饰能力的试剂盒及其使用方法
CN112999223A (zh) * 2013-11-22 2021-06-22 博世健康爱尔兰有限公司 抗感染的方法、组合物和装置
CN107407680A (zh) * 2015-02-05 2017-11-28 Ath澳大利亚私人有限公司 用于检测疾病的包括含汞试剂的制剂
CN107407680B (zh) * 2015-02-05 2019-11-01 Ath澳大利亚私人有限公司 用于检测疾病的包括含汞试剂的制剂
CN105675808A (zh) * 2016-01-06 2016-06-15 广东欧珀移动通信有限公司 基于移动终端的口臭检测方法和系统
CN108535249A (zh) * 2018-04-25 2018-09-14 郑州贝贝生物科技有限公司 农药残留快速检测点卡
CN108535249B (zh) * 2018-04-25 2021-02-26 郑州贝贝生物科技有限公司 农药残留快速检测点卡
CN109459568A (zh) * 2019-01-15 2019-03-12 西安交通大学 纸基牙周炎检测装置和牙周炎检测方法
CN111398511A (zh) * 2020-04-03 2020-07-10 杭州布封科技有限公司 一种用于检测幽门螺杆菌的检测装置及检测方法

Also Published As

Publication number Publication date
EP2243029A1 (en) 2010-10-27
HK1150296A1 (zh) 2011-11-18
US20140322097A1 (en) 2014-10-30
CN102124337B (zh) 2015-06-10
US20090311142A1 (en) 2009-12-17
JP2013190443A (ja) 2013-09-26
AU2009202908A1 (en) 2010-01-07
US8815152B2 (en) 2014-08-26
JP2011524526A (ja) 2011-09-01
EP2687846B1 (en) 2016-10-12
WO2009152513A1 (en) 2009-12-17
EP2687846A1 (en) 2014-01-22
JP5385380B2 (ja) 2014-01-08
CA2727668A1 (en) 2009-12-17
AU2009202908B2 (en) 2011-11-24
EP2243029B1 (en) 2014-12-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102124337B (zh) 用于疾病相关的硫醇化合物的快速测定的设备
Seerangaiyan et al. Tongue coating: Its characteristics and role in intra-oral halitosis and general health—A review
Seerangaiyan et al. The tongue microbiome in healthy subjects and patients with intra-oral halitosis
US8702618B2 (en) Visual indicating device for bad breath
Rösing et al. Halitosis: an overview of epidemiology, etiology and clinical management
Kleinberg et al. Modeling of the oral malodor system and methods of analysis.
FI76379C (fi) Medel och foerfarande foer snabb diagnos av tandkaries medelst ett icke-vaotfoerfarande.
CN104970898B (zh) 用于鉴定口腔状况的装置
Hertel et al. Effect of Tannic Acid on the Protective Properties of the in situ Formed Pellicle
CN102740778B (zh) 诊断口腔装置
Matzeu et al. Functionalized Mouth‐Conformable Interfaces for pH Evaluation of the Oral Cavity
Dadamio et al. Usefulness of a new malodour-compound detection portable device in oral malodour diagnosis
Rosa et al. Oral health, organic and inorganic saliva composition of men with Schizophrenia: Case-control study
Suzuki et al. The relationship between alcohol consumption and oral malodour
Çoban et al. Halitosis: a review of current literature
CN201188085Y (zh) 胆碱酯酶目测比色卡
Yu et al. Prevalence of halitosis among young adults in Dunedin, New Zealand
CN109342342A (zh) 一种利用碳量子点可视化检测l-半胱氨酸浓度的方法
Kapoor et al. Halitosis-Revisited.
Timpel et al. Sensors for in situ monitoring of oral and dental health parameters in saliva
Wilson et al. Collection and biochemical analysis of human dental plaque from the approximal tooth surfaces and comparison with plaque from free smooth surfaces
JP6449136B2 (ja) 歯周病原因菌の分析方法
Kanehira et al. A novel visual test for hydrogen sulfide on the tongue dorsum
Finnegan Developing approaches to skin volatile biodiagnostics using non-invasive techniques
US20130273583A1 (en) Testing apparatus for detection of gastrointestinal disorders

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20150610

Termination date: 20170615