CN109459568A - 纸基牙周炎检测装置和牙周炎检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种纸基牙周炎检测装置和牙周炎检测方法。该检测装置包括:吸水垫、硝酸纤维素膜、样品垫和底板,所述底板设有安装槽,所述硝酸纤维素膜安装于所述安装槽内,所述吸水垫和所述样品垫均安装于所述底板上,所述样品垫用于添加患者的检测液体样品,所述硝酸纤维素膜表面设有检测区和质控区,所述检测区固定有不带标记的需检测的生物分子的捕获抗体,所述质控区固定有可与检测抗体结合的质控抗体。检测液体样品和带标记的检测抗体会移动至检测区和质控区。反应结束后,根据检测区检测抗体标记物的含量便能计算检测液体样品中目标物的含量,进而根据检测液体样品中目标物的含量能够准确地判断牙周组织当前的炎症状态。
Description
技术领域
本发明涉及医疗器械技术领域,特别是涉及一种纸基牙周炎检测装置及检测方法。
背景技术
牙周炎是口腔第一大疾病,是一种微生物相关、宿主介导并导致牙周附着丧失的炎症。对确诊的牙周炎病变,即使去除刺激因素,并进行彻底的炎症控制,牙周组织只能保持到现有状态,而不能恢复到初始的健康状态;即牙周炎是一种进行性、破坏性、不可逆性疾病,只能被控制,而不能被治愈!因此,即使牙周炎经过良好治疗达到“牙周疾病稳定”,患者也需定期复诊直至终生。
牙周炎的发病是间断的过程,呈现活动性和静止性交替发展的特点,即使牙周炎症被控制后,后期疾病仍可随机、不定时地再次复发进展。牙周炎的进展速度并不均匀,临床可分为慢速、中速、快速进展三级。这些疾病特征表明,牙周炎及时准确的检测及诊断必须明确:目前组织的破坏程度,目前病变处于活动期还是静止期,疾病的分级。只有在此基础上,才能选择恰当的治疗时机及治疗方案,较为准确的预测病变的预后。
目前临床上常用的检查手段有视诊、触诊、探诊及影像学检查,通过这些检查,医生会获得相应的数据包括牙周袋深度、牙齿松动度、脱落牙数、骨吸收程度等,通过这些检查数据,显示的是牙周组织以往破坏的总和非目前真实的病变状态,可以对牙周炎进行分期诊断(基于严重性和管理复杂性),但难以满足判断疾病分级(慢速、中速、快速进展)的要求。
因为判断进展的直接“临床检查”证据为牙周骨丧失或临床附着丧失的纵向数据(5年内的丧失量)。若根据间隔的检查结果来判断,我们只可以判断疾病在过去的时间段内处于哪一分级,只能说过去时间段内疾病处于怎样的进展速度,不能代表现在的进展速度;且此时组织破坏已经发生,无法逆转。因此,临床需要直接的、准确的生物学指标检测方法,辅助判断牙周炎的分级,辅助医生及时采取相应措施,以阻止牙周组织进一步的破坏。
发明内容
基于此,有必要针对牙周炎检测不准的问题,提供一种纸基牙周炎检测装置及检测方法,它能够准确地检测牙周组织当前的炎症状态,能够反映牙周炎是否处于活动期,反映疾病的分级,进而及时指导疾病的防治,阻止牙周永久性破坏的形成。
一种纸基牙周炎检测装置,包括:吸水垫、硝酸纤维素膜、样品垫和底板,所述底板设有安装槽,所述硝酸纤维素膜安装于所述安装槽内,所述吸水垫和所述样品垫均安装于所述底板上,所述吸水垫位于所述安装槽的一侧且所述吸水垫的端部延伸至搭接在所述硝酸纤维素膜上,所述样品垫位于所述安装槽的另一侧,所述样品垫用于添加患者的检测液体样品,所述硝酸纤维素膜表面设有检测区和质控区,所述检测区固定有不带标记的需检测的生物分子的捕获抗体,所述质控区固定有可与检测抗体结合的质控抗体。
上述纸基牙周炎检测装置使用时,检测液体样品和带标记的检测抗体滴加到样品垫上,检测液体样品和带标记的检测抗体会移动至检测区和质控区,进行酶联免疫吸附试验的反应。反应结束后,根据检测区检测抗体标记物的含量便能计算检测液体样品中目标物的含量,进而根据检测液体样品中目标物的含量能够准确地判断牙周组织当前的炎症状态。
在其中一个实施例中,所述纸基牙周炎检测装置还包括结合垫,所述结合垫固定有带标记的需检测的生物分子的检测抗体,所述结合垫安装在所述底板上,所述结合垫一端位于所述样品垫的下方,另一端延伸至搭接在所述硝酸纤维素膜上。
在其中一个实施例中,所述底板为粘接板,所述粘接板的上表面设有粘接层。
在其中一个实施例中,所述检测区为两个以上,两个以上所述检测区间隔分布在所述硝酸纤维素膜表面。
一种牙周炎检测方法,包括以下步骤:
S100:检测前,在检测区固定有不带标记的需检测的生物分子的捕获抗体,以及在质控区固定有可与检测抗体结合的质控抗体;
S200:检测时,在样品垫滴加检测液体样品和带标记的需检测的生物分子的检测抗体;
S300:待反应完成后,根据所述检测区中所述检测抗体标记物的数量计算所述检测液体样品中目标物的含量。
上述牙周炎检测方法实施时,检测液体样品和带标记的检测抗体滴加到样品垫上,检测液体样品和带标记的检测抗体会移动至检测区和质控区,进行酶联免疫吸附试验的反应。反应结束后,根据检测区检测抗体标记物的含量便能计算检测液体样品中目标物的含量,进而根据检测液体样品中目标物的含量能够准确地判断牙周组织当前的炎症状态。
在其中一个实施例中,步骤S100具体为:
人工滴加不带标记的需检测的生物分子的所述捕获抗体在所述检测区上;
和/或,人工滴加可与检测抗体结合的所述质控抗体在所述质控区上。
在其中一个实施例中,步骤S100具体为:
使用机器在硝酸纤维素膜表面将所述捕获抗体划线形成所述检测区;
和/或,使用机器在硝酸纤维素膜表面将所述质控抗体划线形成所述检测区。
一种牙周炎检测方法,采用上述纸基牙周炎检测装置,包括以下步骤:
S100:检测前,在检测区固定有不带标记的需检测的生物分子的捕获抗体,以及在质控区固定有可与检测抗体结合的质控抗体;
S200:检测时,滴加检测液体样品和带标记的需检测的生物分子的检测抗体,使之与捕获抗体及质控抗体反应;
S300:待反应完成后,根据所述检测区中所述检测抗体标记物的数量计算所述检测液体样品中目标物的含量。
上述牙周炎检测方法实施时,检测液体样品与带标记的检测抗体结合,则带标记的检测抗体会标记相应的生物分子,被标记的生物分子继续移动至检测区和质控区,进行酶联免疫吸附试验的反应。反应结束后,根据检测区检测抗体标记物的含量便能计算检测液体样品中目标物的含量,进而根据检测液体样品中目标物的含量能够准确地判断牙周组织当前的炎症状态。
在其中一个实施例中,步骤S100具体为:
人工滴加不带标记的需检测的生物分子的所述捕获抗体在所述检测区上;
或者,使用机器在硝酸纤维素膜表面将所述捕获抗体划线形成所述检测区。
在其中一个实施例中,步骤S100具体为:
人工滴加可与检测抗体结合的所述质控抗体在所述质控区上;
或者,使用机器在硝酸纤维素膜表面将所述质控抗体划线形成所述检测区。
在其中一个实施例中,步骤S200具体为:
将样品垫的一端搭接在硝酸纤维素膜上,并在所述样品垫上滴加检测液体样品和带标记的需检测的生物分子的检测抗体。
在其中一个实施例中,步骤S200具体为:
将结合垫的一端搭接在硝酸纤维素膜上,另一端搭接在样品垫的下方;
在所述结合垫上固定带标记的需检测的生物分子的检测抗体;
在所述样品垫上滴加检测液体样品。
附图说明
图1为实施例一中所述纸基牙周炎检测装置的结构示意图;
图2为图1的俯视图;
图3为实施例二中所述纸基牙周炎检测装置的结构示意图;
图4为图3的俯视图;
图5为实施例三中所述纸基牙周炎检测装置的结构示意图;
图6为图5的俯视图;
图7为实施例四中所述纸基牙周炎检测装置的结构示意图;
图8为图7的俯视图;
图9为本发明所述的牙周炎检测方法的流程示意图。
100、吸水垫,200、硝酸纤维素膜,210、检测区,220、质控区,300、样品垫,400、底板,500、捕获抗体,600、质控抗体,700、结合垫。
具体实施方式
为了便于理解本发明,下面将参照相关附图对本发明进行更全面的描述。附图中给出了本发明的较佳实施方式。但是,本发明可以以许多不同的形式来实现,并不限于本文所描述的实施方式。相反地,提供这些实施方式的目的是使对本发明的公开内容理解的更加透彻全面。
需要说明的是,当元件被称为“固定于”另一个元件,它可以直接在另一个元件上或者也可以存在居中的元件。当一个元件被认为是“连接”另一个元件,它可以是直接连接到另一个元件或者可能同时存在居中元件。相反,当元件被称作“直接在”另一元件“上”时,不存在中间元件。本文所使用的术语“垂直的”、“水平的”、“左”、“右”以及类似的表述只是为了说明的目的。本发明中所述“第一”、“第二”、“第三”不代表具体的数量及顺序,仅仅是用于名称的区分。
牙周炎传统的诊断一般基于物理学评价方法,包括临床病历、口腔卫生状况、牙龈状况、牙周袋探诊深度、牙松动度、放射影像学检查等,这些基本的、半主管的临床检查可以确定牙周病变的部位、组织损伤的程度和疾病的类型,但牙周炎的变化和发展是不规律、非持续性的过程,临床检查指标仅反映牙周组织处于炎症状态,不能揭示实际的组织病损程度和内涵变化。
结合图3和图4,一种纸基牙周炎检测装置,包括:吸水垫100、硝酸纤维素膜200、样品垫300和底板400。底板400设有安装槽。硝酸纤维素膜200安装于安装槽内。吸水垫100和样品垫300均安装于底板400上。吸水垫100位于安装槽的一侧且吸水垫100的端部延伸至搭接在硝酸纤维素膜200上,样品垫300位于安装槽的另一侧,样品垫300用于添加患者的检测液体样品。检测液体样品是指检测液体和缓冲液的混合样品。检测液体可选为龈沟液或唾液等跟牙周炎相关的生理性液体。硝酸纤维素膜200表面设有检测区210和质控区220,检测区210固定有不带标记的需检测的生物分子的捕获抗体500,质控区220固定有可与检测抗体结合的质控抗体600。其中,质控抗体600为羊抗鼠多克隆抗体。生物分子包括但不限于IL-1β、MMP-8和TNF-α。相应地,捕获抗体500分别为抗IL-1β、MMP-8和TNF-α的抗体,检测抗体分别为抗IL-1β、MMP-8和TNF-α的鼠源抗体,每种目标物的检测抗体和捕获抗体500要求为配对抗体,可与各自目标物形成三明治夹心结构。
其中,根据宿主免疫反应产生的牙周组织破坏相关炎症介质(即前述提及的生物分子)的水平变化与牙周炎的发生发展密切相关。它们的含量变化与牙周炎的严重程度及分级变化密切相关。在宿主免疫炎症反应活性不足或过多时,会出现组织破坏,同时炎症介质水平增加,疾病发展,反之,炎症介质水平维持正常,牙周组织处于稳定状态。上述检测液体样品正是含有该牙周炎相关炎症介质,是研究牙周病的关键样本,可以通过分析检测液体成分获得牙周组织变化的早期生化指征,而且取样简便无创伤,又能重复采集,易为患者所接受。
上述纸基牙周炎检测装置使用时,检测液体样品和带标记的检测抗体滴加到样品垫300上,检测液体样品和带标记的检测抗体会移动至检测区210和质控区220,进行酶联免疫吸附试验的反应。反应结束后,质控区220显色,说明反应正常,再读取检测区210检测抗体标记物的含量,便能计算检测液体样品中目标物的含量(即炎症介质的含量),进而根据检测液体样品中目标物的含量能够准确地判断牙周组织当前的炎症状态与活动性,为实现牙周炎快速辅助诊断提供了检测手段。其中,检测区210检测抗体标记物含量的读取,可利用检测抗体修饰基团的种类,通过荧光法,根据检测区荧光信号的强弱实现直观快捷地读取检测抗体标记物的含量。该纸基牙周炎检测装置不依赖于组织形变累积的检测方法,不仅可以反映牙周组织目前的炎症状态,还可以根据其结果判断疾病的进展风险和预后,以对牙周炎进行及时准确的监控。而明确疾病的状态及内涵变化,包括现阶段是处于进展(活动期)还是处于稳定状态(静止期)、处于何种分级等,对优化治疗方案、评估预后疗效具有重要的指导意义。
此外,该纸基牙周炎检测装置操作简便、成本低廉、结构件少、体积小、检测目标物广泛,有利于推广。并且,该纸基牙周炎检测装置根据检测区210反应颜色的深浅,可成为判断牙周炎活动性变化、分级及评估预后的诊断方法,以弥补现有临床诊断手段的不足。
其中,酶联免疫吸附试验(以下简称ELISA)的基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体——比如,聚苯乙烯微量反应板——表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行。ELISA方法的基本原理是酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合,此种结合不会改变抗体的免疫学特性,也不影响酶的生物学活性。此种酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。需要说明的是,ELISA方法反应快,能够实现即时检测,有利于推广。本发明提及的纸基牙周炎检测装置是基于ELISA方法实现即时检测功能。
在其中一个实施例中,结合图1和图2,纸基牙周炎检测装置还包括结合垫700,结合垫700固定有带标记的需检测的生物分子的检测抗体,结合垫700安装在底板400上,结合垫700一端位于样品垫300的下方,另一端延伸至搭接在硝酸纤维素膜200上。如此,带标记的需检测的生物分子的检测抗体事先固定在结合垫700上,检测时,只需在样品垫300上滴加检测液体样品即可,操作更加简单方便,使用方便,无需再进行配制和滴加带标记的检测抗体。
具体地,底板400为粘接板,粘接板的上表面设有粘接层。结合图1,吸水垫100、硝酸纤维素膜200、样品垫300和结合垫700粘接到底板400上,或者,结合图3,吸水垫100、硝酸纤维素膜200和样品垫300粘接到底板400上,因此,该纸基牙周炎检测装置制作简单高效。
在其中一个实施例中,结合图2和图4,检测区210为两个以上,两个以上检测区210间隔分布在硝酸纤维素膜200表面。其中,图2显示检测区210为3个,在其他实施例中,检测区210的数量可不局限于3个。每个检测区210可以固定有对应不同的生物分子的捕获抗体500,从而检测目标物广泛,目标物的种类多,则检测更加准确。如此,该纸基牙周炎检测装置可以进行ELISA来检测牙周炎患者检测液体中至少两种生物分子——比如图2中可以为至少3种生物分子——的含量来判断牙周炎即时状态。
相应地,结合图9,一种牙周炎检测方法,采用上述纸基牙周炎检测装置,包括以下步骤:
S100:检测前,在检测区210固定有不带标记的需检测的生物分子的捕获抗体500,以及在质控区220固定有可与检测抗体结合的质控抗体600;
S200:检测时,滴加检测液体样品和带标记的需检测的生物分子的检测抗体,使之与捕获抗体500及质控抗体600反应;
S300:待反应完成后,根据检测区210中检测抗体标记物的数量计算检测液体样品中目标物的含量。
上述牙周炎检测方法实施时,检测液体样品与带标记的检测抗体结合,则带标记的检测抗体会标记相应的生物分子,被标记的生物分子继续移动至检测区210和质控区220,进行酶联免疫吸附试验的反应。反应结束后,根据检测区210检测抗体标记物的含量便能计算检测液体样品中目标物的含量,进而根据检测液体样品中目标物的含量能够准确地判断牙周组织当前的炎症状态。
在其中一个实施例中,步骤S100具体为:
结合图1至图4,人工滴加不带标记的需检测的生物分子的捕获抗体500在检测区210上;或者,结合图5至图8,使用机器在硝酸纤维素膜200表面将捕获抗体500划线形成检测区210。其中,通过机器划线形成检测区210,适合批量大规模高效生产制造。
在其中一个实施例中,步骤S100具体为:
结合图1至图4,人工滴加可与检测抗体结合的质控抗体600在质控区220上;或者,结合图5至图8,使用机器在硝酸纤维素膜200表面将质控抗体600划线形成检测区210。其中,通过机器划线形成质控区220,适合批量大规模高效生产制造。
在其中一个实施例中,结合图3、图4、图7和图8,步骤S200具体为:将样品垫300的一端搭接在硝酸纤维素膜200上,并在样品垫300上滴加检测液体样品和带标记的需检测的生物分子的检测抗体。
在其中一个实施例中,结合图1、图2、图5和图6,步骤S200具体为:
S210:将结合垫700的一端搭接在硝酸纤维素膜200上,另一端搭接在样品垫300的下方;
S220:在结合垫700上固定带标记的需检测的生物分子的检测抗体;
S230:在样品垫300上滴加检测液体样品。
实施例一
滴加试剂-探针固定模式:结合图1和图2,带标记的检测抗体预先被固定在结合垫700上,捕获抗体500和质控壳体预先人工滴加在硝酸纤维素膜200上形成检测区210和质控区220。检测时,检测液体样品滴加在样品垫300上,反应完成后,根据检测区210检测抗体标记物的含量计算检测液体样品中目标物的含量。
实施例二
滴加试剂-探针非固定模式:结合图3和图4,捕获抗体500和质控壳体预先人工滴加在硝酸纤维素膜200上形成检测区210和质控区220。检测时,检测液体样品和带标记的检测抗体滴加在样品垫300上,反应完成后,根据检测区210检测抗体标记物的含量计算检测液体样品中目标物的含量。
实施例三
划线试剂-探针固定模式:结合图5和图6,带标记的检测抗体预先被固定在结合垫700上,捕获抗体500和质控壳体预先经机器划线固定在硝酸纤维素膜200上形成检测区210和质控区220。检测时,检测液体样品滴加在样品垫300上,反应完成后,根据检测区210检测抗体标记物的含量计算检测液体样品中目标物的含量。
实施例四
划线试剂-探针非固定模式:结合图7和图8,捕获抗体500和质控壳体预先经机器划线固定在硝酸纤维素膜200上形成检测区210和质控区220。检测时,检测液体样品和带标记的检测抗体滴加在样品垫300上,反应完成后,根据检测区210检测抗体标记物的含量计算检测液体样品中目标物的含量。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合,为使描述简洁,未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述,然而,只要这些技术特征的组合不存在矛盾,都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式,其描述较为具体和详细,但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是,对于本领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干变形和改进,这些都属于本发明的保护范围。因此,本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (9)
1.一种纸基牙周炎检测装置,其特征在于,所述的纸基牙周炎检测装置包括:吸水垫、硝酸纤维素膜、样品垫和底板,所述底板设有安装槽,所述硝酸纤维素膜安装于所述安装槽内,所述吸水垫和所述样品垫均安装于所述底板上,所述吸水垫位于所述安装槽的一侧且所述吸水垫的端部延伸至搭接在所述硝酸纤维素膜上,所述样品垫位于所述安装槽的另一侧,所述样品垫用于添加患者的检测液体样品,所述硝酸纤维素膜表面设有检测区和质控区,所述检测区固定有不带标记的需检测的生物分子的捕获抗体,所述质控区固定有可与检测抗体结合的质控抗体。
2.根据权利要求1所述的纸基牙周炎检测装置,其特征在于,所述纸基牙周炎检测装置还包括结合垫,所述结合垫固定有带标记的需检测的生物分子的检测抗体,所述结合垫安装在所述底板上,所述结合垫一端位于所述样品垫的下方,另一端延伸至搭接在所述硝酸纤维素膜上。
3.根据权利要求1所述的纸基牙周炎检测装置,其特征在于,所述底板为粘接板,所述粘接板的上表面设有粘接层。
4.根据权利要求1至3任意一项所述的纸基牙周炎检测装置,其特征在于,所述检测区为两个以上,两个以上所述检测区间隔分布在所述硝酸纤维素膜表面。
5.一种牙周炎检测方法,采用权利要求1至4所述的纸基牙周炎检测装置,其特征在于,包括以下步骤:
S100:检测前,在检测区固定有不带标记的需检测的生物分子的捕获抗体,以及在质控区固定有可与检测抗体结合的质控抗体;
S200:检测时,滴加检测液体样品和带标记的需检测的生物分子的检测抗体,使之与捕获抗体及质控抗体反应;
S300:待反应完成后,根据所述检测区中所述检测抗体标记物的数量计算所述检测液体样品中目标物的含量。
6.根据权利要求5所述的牙周炎检测方法,其特征在于,步骤S100具体为:
人工滴加不带标记的需检测的生物分子的所述捕获抗体在所述检测区上;
或者,使用机器在硝酸纤维素膜表面将所述捕获抗体划线形成所述检测区。
7.根据权利要求5所述的牙周炎检测方法,其特征在于,步骤S100具体为:
人工滴加可与检测抗体结合的所述质控抗体在所述质控区上;
或者,使用机器在硝酸纤维素膜表面将所述质控抗体划线形成所述检测区。
8.根据权利要求5至7任意一项所述的牙周炎检测方法,其特征在于,步骤S200具体为:
将样品垫的一端搭接在硝酸纤维素膜上,并在所述样品垫上滴加检测液体样品和带标记的需检测的生物分子的检测抗体。
9.根据权利要求5至7任意一项所述的牙周炎检测方法,其特征在于,步骤S200具体为:
将结合垫的一端搭接在硝酸纤维素膜上,另一端搭接在样品垫的下方;
在所述结合垫上固定带标记的需检测的生物分子的检测抗体;
在所述样品垫上滴加检测液体样品。
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