CN102091103B - 超声提取制备低酸值银杏提取物的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种超声提取制备低酸值银杏提取物的方法，包括以下工艺步骤：(1)将银杏叶烘干、粉碎得到银杏叶粉末；(2)将银杏叶粉末与乙醇溶液混合，超声提取得到提取液；(3)将提取液减压浓缩后得到浓缩液；向浓缩液中加入沉淀剂，调节浓缩液的pH值至5～10；经抽滤或离心后得到清液；(4)将清液经大孔树脂柱富集，以使清液中的银杏提取物成分富集在树脂上；用洗脱剂对大孔树脂柱进行洗脱；收集过柱液，即经洗脱剂洗脱下来的液体；(5)将过柱液减压浓缩后高压喷雾干燥得到所述的银杏提取物。本发明操作简便、生产周期短、生产成本低、脱酸效果。

Description

超声提取制备低酸值银杏提取物的方法
技术领域
本发明涉及一种超声提取制备低酸值银杏提取物的方法，属于中药制备技术领域。
背景技术
银杏叶提取物是从银杏科银杏属银杏植物的叶子中提取分离而得，已被几乎所有的发达西方国家收载入药典，银杏叶提取物(EGB)也是中国古老药用植物对国际药学界的一大贡献。目前国际市场上银杏叶提取物及其下游产品已形成年销售额达50亿美元以上的销售规模，堪称“天然植物药之王”。
银杏叶提取物中的有效成分主要为黄酮类化合物和内酯类化合物，治疗中老年人心脑血管疾病、老年性痴呆症、脑功能不全、精神障碍、记忆功能衰退、冠心病、高血压、高血脂、心绞痛等症药理功效，同时还具有延长心脑血管机能衰退，抗衰老、皮肤抗绉等保健功能。但研究发现银杏叶提取物中还含有一类被统称为银杏酚酸，可致人体强烈过敏和造成接触性皮炎等疾病的酚酸类物质。国际要求银杏叶提取物中的银杏酚酸类物质的含量必须小于5ppm，2010年版中国药典(一部)部分增修订及新增品种中规定银杏叶提取中总银杏酸的含量为不得过5ppm，这一限度在银杏叶口服制剂中可以满足质量控制及安全的目的。但对于安全性要求极高的银杏叶针剂而言，银杏叶提取物中的银杏酚酸的限度要求不得过1ppm。而当前国内市售的银杏叶提取物产品中的银杏酚酸含量还达不到这一要求，我国出口的银杏叶提取物浸膏粉往往由于银杏酚酸含量不符合西方客商要求而被退货。因此如何将银杏叶提取物中银杏酚酸脱除，生产低酸值银杏提取物就显得格外重要。
目前，我国国内厂家脱除银杏酚酸的方法大都是采用溶剂萃取，和一次或多次过柱层析柱吸附，这些工艺要么脱除效果不佳，无法达到要求；要么提取工艺复杂，脱除成本高；要么脱除银杏酚酸的同时，银杏黄酮和内酯含量也同时降低。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术中存在的不足，提供一种超声提取制备低酸值银杏提取物的方法，工艺简单、成本低廉、生产周期短、脱除银杏酚酸效果好，符合国际标准的银杏叶提取物。
按照本发明提供的技术方案，所述超声提取制备低酸值银杏提取物的方法，包括以下工艺步骤：
(1)将银杏叶在60～80℃的条件下烘干24～48h，并粉碎得到100～150目的银杏叶粉末；
(2)将步骤(1)得到的银杏叶粉末与浓度为10％～50％的乙醇溶液混合，银杏粉末与乙醇溶液的比例为1g∶5～30ml，在30～70℃的条件下超声提取15分钟～3小时得到提取液，超声频率为20～50Hz；
(3)将步骤(2)得到的提取液减压浓缩后得到浓缩液，减压浓缩的真空度为0.05～0.098MPa；向浓缩液中加入沉淀剂，直至浓缩液的pH值为5～10；经抽滤或离心后得到清液；
(4)将步骤(3)得到的清液经大孔树脂柱富集，以使清液中的银杏提取物成分富集在树脂上，清液与树脂的体积比是5～30∶1，清液的流速是0.5～10ml/min；用洗脱剂对大孔树脂柱进行洗脱，将树脂上富集的银杏提取物成分洗脱下来，洗脱剂的流速是1～20ml/min，洗脱剂与树脂的体积比是2～10∶1；收集过柱液，即经洗脱剂洗脱下来的液体；
(5)将步骤(4)收集的过柱液减压浓缩后再经高压喷雾干燥，即得到所述的银杏提取物；减压浓缩的真空度为0.05～0.098MPa，干燥温度为300～350℃，高压喷雾干燥的压力为2～20MPa，干燥时间为10～30秒。
所述沉淀剂为MgCl2、AlCl3、CaCl2、CuCl2或FeCl2中的一种或多种的饱和溶液。
所述沉淀剂为Ca(OH)2或NaOH中的一种或多种的饱和溶液。
所述沉淀剂为NH3·H2O或CaCl2中的一种或多种的饱和溶液。
所述沉淀剂为Ca(OH)2或CaCl2中的一种或多种的饱和溶液。
所述大孔树脂柱中的填充树脂为AB-8、BS-30、D311、D101、X-5、H107、S-8、NKA-9、D3520、D4006或聚酰胺树脂。
所述洗脱剂为乙醇溶液、盐酸溶液、氨水溶液、乙醇与盐酸的混合溶液或乙醇与氨水的混合溶液。
所述乙醇溶液为浓度为50％～80％的乙醇溶液；所述盐酸溶液为pH值为1～6的盐酸溶液；所述氨水溶液为pH值为8～14的氨水溶液。
本发明从银杏叶直接提取获得脱除银杏酸的银杏叶提取物，将原有的两次过柱技术缩短为一次过柱，本发明具有操作简便、生产周期短、生产成本低、脱酸效果好等优点，获得的产品符合有关国家药品的技术要求，是一种具有较好推广应用前景的从银杏叶中提取银杏叶提取物的方法。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。
实施例一：一种超声提取制备低酸值银杏提取物的方法，包括以下工艺步骤：
(1)将银杏叶在60℃的条件下烘干24h，并粉碎得到100目的银杏叶粉末；
(2)将步骤(1)得到的银杏叶粉末与浓度为10％的乙醇溶液混合，银杏粉末与乙醇溶液的比例为1g∶5ml，在30℃的条件下超声提取15分钟得到提取液，超声频率为20Hz；
(3)将步骤(2)得到的提取液减压浓缩除去乙醇后，得到浓缩液，减压浓缩的真空度为0.05MPa；向浓缩液中加入沉淀剂MgCl2的饱和溶液，直至浓缩液的pH值为5；经抽滤后得到清液；
(4)将步骤(3)得到的清液经AB-8大孔树脂柱富集，以使清液中的银杏提取物成分富集在树脂上，清液与树脂的体积比是5∶1，清液的流速是0.5ml/min；用洗脱剂对大孔树脂柱进行洗脱，将树脂上富集的银杏提取物成分洗脱下来，洗脱剂的流速是1ml/min，洗脱剂与树脂的体积比是2∶1；收集过柱液，即经洗脱剂洗脱下来的液体；所使用的AB-8大孔树脂的厂家为上海摩速科学器材有限公司；所述洗脱剂为浓度为50％的乙醇溶液；
(5)将步骤(4)收集的过柱液减压浓缩后再经高压喷雾干燥，即得到所述的银杏提取物；减压浓缩的真空度为0.05MPa，干燥温度为300℃，高压喷雾干燥的压力为2MPa，干燥时间为10秒。银杏提取物的产品得率为1.17％，经检测其中银杏黄酮含量为21.53％，银杏内酯含量为5.32％，银杏酚酸含量大于10ppm。
实施例二：一种超声提取制备低酸值银杏提取物的方法，包括以下工艺步骤：
(1)将银杏叶在80℃的条件下烘干48h，并粉碎得到150目的银杏叶粉末；
(2)将步骤(1)得到的银杏叶粉末与浓度为50％的乙醇溶液混合，银杏粉末与乙醇溶液的比例为1g∶30ml，在70℃的条件下超声提取3小时得到提取液，超声频率为28Hz；
(3)将步骤(2)得到的提取液减压浓缩除去乙醇后得到浓缩液，减压浓缩的真空度为0.098MPa；向浓缩液中加入沉淀剂AlCl3的饱和溶液，直至浓缩液的pH值为10；经抽滤或离心后得到清液；
(4)将步骤(3)得到的清液经BS-30大孔树脂柱富集，以使清液中的银杏提取物成分富集在树脂上，清液与树脂的体积比是30∶1，清液的流速是10ml/min；用洗脱剂对大孔树脂柱进行洗脱，将树脂上富集的银杏提取物成分洗脱下来，洗脱剂的流速是20ml/min，洗脱剂与树脂的体积比是10∶1；收集过柱液，即经洗脱剂洗脱下来的液体；所使用的BS-30大孔树脂采用蚌埠市辽源新材料有限公司生产的BS-30大孔吸附树脂；所述洗脱剂为浓度为60％的乙醇溶液；
(5)将步骤(4)收集的过柱液减压浓缩后再经高压喷雾干燥，即得到所述的银杏提取物；减压浓缩的真空度为0.098MPa，干燥温度为350℃，高压喷雾干燥的压力为20MPa，干燥时间为30秒。银杏提取物的产品得率为1.23％，经检测其中银杏黄酮含量为24.02％，银杏内酯含量为5.27％，银杏酚酸含量大于10ppm。
实施例三：一种超声提取制备低酸值银杏提取物的方法，包括以下工艺步骤：
(1)将银杏叶在70℃的条件下烘干36h，并粉碎得到100目的银杏叶粉末；
(2)将步骤(1)得到的银杏叶粉末与浓度为30％的乙醇溶液混合，银杏粉末与乙醇溶液的比例为1g∶10ml，在50℃的条件下超声提取2小时得到提取液，超声频率为35Hz；
(3)将步骤(2)得到的提取液减压浓缩去除乙醇后得到浓缩液，减压浓缩的真空度为0.06MPa；向浓缩液中加入沉淀剂CaCl2的饱和溶液，直至浓缩液的pH值为6；经抽滤或离心后得到清液；
(4)将步骤(3)得到的清液经D-101大孔树脂柱富集，以使清液中的银杏提取物成分富集在树脂上，清液与树脂的体积比是10∶1，清液的流速是5ml/min；用洗脱剂对大孔树脂柱进行洗脱，将树脂上富集的银杏提取物成分洗脱下来，洗脱剂的流速是5ml/min，洗脱剂与树脂的体积比是5∶1；收集过柱液，即经洗脱剂洗脱下来的液体；所使用的D-101大孔树脂为江阴明大化工有限公司生产的D-101大孔吸附树脂；所述洗脱剂为浓度为75％的乙醇溶液；
(5)将步骤(4)收集的过柱液减压浓缩后再经高压喷雾干燥，即得到所述的银杏提取物；减压浓缩的真空度为0.06MPa，干燥温度为325℃，高压喷雾干燥的压力为10MPa，干燥时间为20秒。银杏提取物的产品得率为1.45％，经检测其中银杏黄酮含量为24.31％，银杏内酯含量为6.37％，银杏酚酸含量小于5ppm。
实施例四：一种超声提取制备低酸值银杏提取物的方法，包括以下工艺步骤：
(1)将银杏叶在75℃的条件下烘干40h，并粉碎得到120目的银杏叶粉末；
(2)将步骤(1)得到的银杏叶粉末与浓度为40％的乙醇溶液混合，银杏粉末与乙醇溶液的比例为1g∶20ml，在50℃的条件下超声提取2小时得到提取液，超声频率为35Hz；
(3)将步骤(2)得到的提取液减压浓缩以去除乙醇后得到浓缩液，减压浓缩的真空度为0.07MPa；向浓缩液中加入沉淀剂Ca(OH)2的饱和溶液，直至浓缩液的pH值为7；经抽滤或离心后得到清液；
(4)将步骤(3)得到的清液经D311大孔树脂柱富集，以使清液中的银杏提取物成分富集在树脂上，清液与树脂的体积比是20∶1，清液的流速是6ml/min；用洗脱剂对大孔树脂柱进行洗脱，将树脂上富集的银杏提取物成分洗脱下来，洗脱剂的流速是15ml/min，洗脱剂与树脂的体积比是3∶1；收集过柱液，即经洗脱剂洗脱下来的液体；所述D311大孔树脂采用安徽三星树脂科技有限公司生产的D311大孔吸附树脂；所述洗脱剂为pH值为12的氨水溶液；
(5)将步骤(4)收集的过柱液减压浓缩后再经高压喷雾干燥，即得到所述的银杏提取物；减压浓缩的真空度为0.07MPa，干燥温度为330℃，高压喷雾干燥的压力为15MPa，干燥时间为25秒。银杏提取物的产品得率为1.33％，经检测其中银杏黄酮含量为25.32％，银杏内酯含量为5.72％，银杏酚酸含量小于5ppm。
实施例五：一种超声提取制备低酸值银杏提取物的方法，包括以下工艺步骤：
(1)将银杏叶在65℃的条件下烘干30h，并粉碎得到110目的银杏叶粉末；
(2)将步骤(1)得到的银杏叶粉末与浓度为45％的乙醇溶液混合，银杏粉末与乙醇溶液的比例为1g∶16ml，在60℃的条件下超声提取2小时得到提取液，超声频率为35Hz；
(3)将步骤(2)得到的提取液减压浓缩以去除乙醇后得到浓缩液，减压浓缩的真空度为0.08MPa；向浓缩液中加入沉淀剂CuCl2的饱和溶液，直至浓缩液的pH值为8；经抽滤或离心后得到清液；
(4)将步骤(3)得到的清液经聚酰胺大孔树脂柱富集，以使清液中的银杏提取物成分富集在树脂上，清液与树脂的体积比是25∶1，清液的流速是6ml/min；用洗脱剂对大孔树脂柱进行洗脱，将树脂上富集的银杏提取物成分洗脱下来，洗脱剂的流速是15ml/min，洗脱剂与树脂的体积比是8∶1；收集过柱液，即经洗脱剂洗脱下来的液体；所述洗脱剂为浓度为80％的乙醇溶液；
(5)将步骤(4)收集的过柱液减压浓缩后再经高压喷雾干燥，即得到所述的银杏提取物；减压浓缩的真空度为0.08MPa，干燥温度为320℃，高压喷雾干燥的压力为12MPa，干燥时间为25秒。银杏提取物的产品得率为1.38％，经检测其中银杏黄酮含量为24.52％，银杏内酯含量为6.35％，银杏酚酸含量小于5ppm。
实施例六：一种超声提取制备低酸值银杏提取物的方法，包括以下工艺步骤：
(1)将银杏叶在80℃的条件下烘干48h，并粉碎得到150目的银杏叶粉末；
(2)将步骤(1)得到的银杏叶粉末与浓度为50％的乙醇溶液混合，银杏粉末与乙醇溶液的比例为1g∶30ml，在70℃的条件下超声提取3小时得到提取液，超声频率为20Hz；
(3)将步骤(2)得到的提取液减压浓缩以去除乙醇后得到浓缩液，减压浓缩的真空度为0.098MPa；向浓缩液中加入沉淀剂NaOH和Ca(OH)2的饱和溶液，直至浓缩液的pH值为9；经抽滤或离心后得到清液；
(4)将步骤(3)得到的清液经NKA-9大孔树脂柱富集，以使清液中的银杏提取物成分富集在树脂上，清液与树脂的体积比是25∶1，清液的流速是8ml/min；用洗脱剂对大孔树脂柱进行洗脱，将树脂上富集的银杏提取物成分洗脱下来，洗脱剂的流速是18ml/min，洗脱剂与树脂的体积比是8∶1；收集过柱液，即经洗脱剂洗脱下来的液体；所述NKA-9大孔树脂采用上海摩速公司生产的NKA-9大孔树脂；所述洗脱剂为pH值为1的盐酸溶液；
(5)将步骤(4)收集的过柱液减压浓缩后再经高压喷雾干燥，即得到所述的银杏提取物；减压浓缩的真空度为0.098MPa，干燥温度为350℃，高压喷雾干燥的压力为20MPa，干燥时间为30秒。银杏提取物的产品得率为1.58％，经检测其中银杏黄酮含量为21.12％，银杏内酯含量为4.35％，银杏酚酸含量大于10ppm。

Claims (2)

1.一种超声提取制备低酸值银杏提取物的方法，其特征是，包括以下工艺步骤：
（1）将银杏叶在60~80℃的条件下烘干24~48h，并粉碎得到100~150目的银杏叶粉末；
（2）将步骤（1）得到的银杏叶粉末与浓度为10%~50%的乙醇溶液混合，银杏粉末与乙醇溶液的比例为1g:5~30ml，在30~70℃的条件下超声提取15分钟~3小时得到提取液，超声频率为20~50Hz；
（3）将步骤（2）得到的提取液减压浓缩后得到浓缩液，减压浓缩的真空度为0.05~0.098MPa；向浓缩液中加入沉淀剂，直至浓缩液的pH值为5~10；经抽滤或离心后得到清液；
（4）将步骤（3）得到的清液经大孔树脂柱富集，以使清液中的银杏提取物成分富集在树脂上，清液与树脂的体积比是5~30:1，清液的流速是0.5~10ml/min；再用洗脱剂对大孔树脂柱进行洗脱，将树脂上富集的银杏提取物成分洗脱下来，洗脱剂的流速是1~20ml/min，洗脱剂与树脂的体积比是2~10:1；收集过柱液，即经洗脱剂洗脱下来的液体；
（5）将步骤（4）收集的过柱液减压浓缩后再经高压喷雾干燥，即得到所述的银杏提取物；减压浓缩的真空度为0.05~0.098MPa，干燥温度为300~350℃，高压喷雾干燥的压力为2~20MPa，干燥时间为10~30秒；
所述洗脱剂为乙醇溶液、盐酸溶液、氨水溶液、乙醇与盐酸的混合溶液或乙醇与氨水的混合溶液；
所述乙醇溶液为浓度为50%~80%的乙醇溶液；所述盐酸溶液为pH值为1~6的盐酸溶液；所述氨水溶液为pH值为8~14的氨水溶液；
所述沉淀剂为MgCl2、AlCl3、CaCl2、CuCl2或FeCl2中的一种或多种的饱和溶液；
或者，所述沉淀剂为Ca（OH）2或NaOH中的一种或多种的饱和溶液；
或者，所述沉淀剂为NH3·H2O或CaCl2中的一种或多种的饱和溶液；
或者，所述沉淀剂为Ca（OH）2或CaCl2中的一种或多种的饱和溶液。
2.如权利要求1所述的超声提取制备低酸值银杏提取物的方法，其特征是，所述大孔树脂柱中的填充树脂为AB-8、BS-30、D311、D101、X-5、H107、S-8、NKA-9、D3520、D4006或聚酰胺树脂。
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