CN102091039B - 一种头孢特仑新戊酯脂质体固体制剂 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种头孢特仑新戊酯脂质体固体制剂，其由包括以下重量配比的组分的原辅料制成：头孢特仑新戊酯1份、大豆卵磷脂4-25份、胆固醇1-12份、0.5-20份吐温80、1-4份大豆甾醇和5-40份药学可接受的载体。本发明提供的脂质体固体制剂包封率高、粒径均匀、药物在血液循环中保留时间长，并且其制备方法的设备简单，易于操作，提高了产品质量，减少了毒副作用，适合于工业化大生产。

Description

一种头孢特仑新戊酯脂质体固体制剂

技术领域

本发明涉及脂质体固体制剂及其制法，具体涉及头孢特仑新戊酯脂质体固体制剂及其制备方法，属于医药技术领域。

背景技术

头孢菌素类即头孢烯类，是由冠头孢菌培养液中分离的头孢菌素C，经改造侧链而得到的一系列半合成抗生素，包括头孢烯、氧头孢烯、碳头孢烯和7-α-甲氧基头孢烯在内的一类药物。

头孢特仑新戊酯(也称为“头孢特仑酯”)属于头孢菌素类抗生素，其化学名称为(6R，7R)-7-[(Z)-2-(2-氨基-4-噻唑基)-2-(甲氧亚氨基)乙酰氨基]-3-[2-(5-甲基-2H-四唑-2-基)甲基)-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4，2，0]辛-2-烯-2-羧酸新戊酰氧甲酯，分子式：C₂₂H₂₇N₉O₇S₂，分子量：593.64，结构为：

头孢特仑新戊酯水溶性差，脂溶性良好，其易溶于甲醇、乙醇，难溶于乙醚，几乎不溶于水。

头孢特仑新戊酯作用机制是阻断细菌细胞壁的合成，头孢特仑新戊酯与青霉素结合蛋白(PBP)中的3、1A、1Bs具有很强的结合性，从而发挥杀菌作用。头孢特仑新戊酯对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有抗菌作用。尤其对革兰氏阳性菌中的链球菌属、肺炎球菌，革兰氏阴性菌中的大肠杆菌、克雷伯氏菌属、淋球菌、流感嗜血杆菌及厌氧菌脓链球菌属等更显示很强的抗菌作用。  对以往口服头孢制剂(先锋IV号、头孢克洛等)不敏感的沙雷氏菌属、吲哚阳性变形杆菌、肠杆菌属、柠檬酸菌属等显示良好的抗菌作用。头孢特仑新戊酯对各种细菌产生的β-内酰胺酶稳定，故对产β-内酰胺酶的菌株有效。

临床上头孢特仑新戊酯用于治疗敏感菌所致的呼吸道感染，如咽喉炎、扁桃体炎、急慢性支气管炎、肺炎、弥漫性细支气管炎、支气管扩张、慢性呼吸系统疾病的重复感染；泌尿及生殖系统感染，如肾盂肾炎、膀胱炎；淋菌性尿道炎；子宫炎、子宫内感染、巴氏腺炎或脓肿；中耳炎、副鼻窦炎；以及口腔感染。

目前上市的头孢特仑新戊酯的制剂有干混悬剂、胶囊剂和片剂，均为口服给药制剂。由于头孢特仑新戊酯在水中的溶解度较低，加之遇酸、碱后易于分解，其现有的口服给药制剂生物利用度相对较低，药物在体内的吸收和分布较慢，影响了药物的治疗速度和效果。

为了改进头孢特仑新戊酯的生物利用度，研究者们从多个角度进行了研究，迄今已有报道。

例如，CN101103965A描述了一种制备含有无定形头孢特仑酯的固体制剂的方法，该方法包括以下步骤：提供含有无定形头孢特仑酯的固体制剂，并将该固体制剂用一层或多层含有一种或多种成膜剂的水分散体包衣。无定形头孢特仑酯的溶解性具有提高的在水中的溶解度，固体制剂上的水分散体包衣确保头孢特仑酯的无定形形式保持热力学稳定并防止结晶。不过，通过该方法制得的仍是传统的包衣型口服制剂，头孢特仑酯的生物利用度仍然较低。

此外，CN100998595B公开了含有头孢特仑酯环糊精包合物的药物组合物，其基本组成包括头孢特仑酯和药学可接受的环糊精。该包合物是稳定的，使头孢特仑酯的分子稳定性增强，且由于环糊精的水溶性比头孢特仑酯高，包合状态的头孢特仑酯的溶解度得以提高，其稳定性和活性提高。

由于上述现有技术分别存在各自所述的缺点，头孢特仑新戊酯作为活性药物在稳定性、生物利用度、毒副作用等方面仍然具有改进的空间。

脂质体(liposomes)最早是1965年被英国Banghan等作为研究生物膜的模型提出的。Banghan等发现，当磷脂分散在水中时形成多层囊泡，而且每一层均为脂质双分子层，各层之间被水相隔开。后来将这种由脂质双分子组成，内部为水相的闭合囊泡称为脂质体。

人们通过研究发现，脂质体作为药物的载体能够控制药物的释放，提高药物靶向性，减少药物毒性和副作用，提高药物疗效。

如果能将头孢特仑新戊酯制成脂质体，则有望克服现有的头孢特仑新戊酯制剂存在的一系列问题，提高药物的稳定性，延长药物在体内的保留时间，长久发挥药效，提高生物利用度，降低毒副作用，降低不良反应的发生率，改进治疗速度和治疗效果。

不过，制备脂质体的挑战在于选择适当的脂质体组成成分和制法。由于脂质体的性质如包封率、稳定性、起效时间、在体内的循环时间、生物利用度和毒副作用等与脂质体的组成直接地密切相关，而脂质体的组成与所要包封的药物性质直接地密切相关，因此，选择什么样的成分形成具有良好品质的头孢特仑新戊酯脂质体是亟待解决的课题。

发明内容

本发明人经过长期认真地研究，发现可以将头孢特仑新戊酯、大豆卵磷脂、胆固醇、吐温80和大豆甾醇这五种材料按照特定比例制备成脂质体，再将该脂质体制备成固体制剂，从而完成本发明。

本发明提供的头孢特仑新戊酯脂质体品质优异，包封率高，稳定性高，生物利用度高，可解决脂质体的稳定性和包封率不佳的技术问题，获得了意想不到的制剂效果，从而提供了质量优良的脂质体固体制剂。

本发明的目的在于提供一种头孢特仑新戊酯脂质体及其固体制剂，通过将活性成分头孢特仑新戊酯和大豆卵磷脂、胆固醇、吐温80以及大豆甾醇制备成脂质体，再和其它药用辅料混合制成固体制剂。

本发明提供的固体制剂包封率高，粒径均匀，在水中的溶解性大，药物在体内的保留时间长，生物利用度和稳定性高。

一方面，本发明提供头孢特仑新戊酯脂质体，其由包括以下重量配比的组分的原辅料制成：

头孢特仑新戊酯        1份

大豆卵磷脂            4-25份

胆固醇                1-12份

吐温80                0.5-20份

大豆甾醇              1-4份。

另一方面，本发明提供上述头孢特仑新戊酯脂质体的制备方法，该方法包括以下步骤：

(a)将头孢特仑新戊酯、大豆卵磷脂、胆固醇、吐温80和大豆甾醇溶于有机溶剂中，混合均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去有机溶剂，得到磷脂膜；

(b)加入缓冲溶液使磷脂膜完全水化，用组织捣碎机高速匀质乳化，通过微孔滤膜进行过滤，制得脂质体混悬液；

(c)将上述脂质体混悬液喷雾干燥，制得头孢特仑新戊酯脂质体粉末。

再一方面，本发明提供头孢特仑新戊酯脂质体固体制剂，其包括上述的本发明头孢特仑新戊酯脂质体以及药学可接受的载体或赋形剂5-40重量份，基于1重量份头孢特仑新戊酯而言。

再一方面，本发明提供上述头孢特仑新戊酯脂质体固体制剂的制备方法，该方法包括以下步骤：

(1)头孢特仑新戊酯脂质体的制备：其包括上述步骤(a)、(b)和(c)；

(2)头孢特仑新戊酯脂质体固体制剂的制备：将步骤(1)中所得头孢特仑新戊酯脂质体和药学上可接受的载体或赋形剂混合，制备头孢特仑新戊酯脂质体固体制剂。

附图说明

图1是本发明头孢特仑新戊酯脂质体片剂和市售的头孢特仑新戊酯片的平均血药浓度与时间的关系曲线。

其中，表示本发明的头孢特仑新戊酯脂质体片剂，表示市售的头孢特仑新戊酯片。

具体实施方式

以下结合具体实施方式对本发明进行详细描述。本发明的特点和优点会随着这些描述而变得更为清楚。

一方面，本发明提供了头孢特仑新戊酯脂质体，其由包括以下重量配比的组分的原辅料制成：

头孢特仑新戊酯    1份

大豆卵磷脂        4-25份

胆固醇            1-12份

吐温80            0.5-20份

大豆甾醇          1-4份。

在本发明头孢特仑新戊酯脂质体的一个实施方案中，所用原辅料优选包括以下重量配比的组分：

头孢特仑新戊酯    1份

大豆卵磷脂        4-10份

胆固醇            1-4份

吐温80            1-5份

大豆甾醇          1-2份，

所用原辅料更优选包括以下重量配比的组分：

头孢特仑新戊酯    1份

大豆卵磷脂        4份

胆固醇            1份

吐温80            1份

大豆甾醇          1份。

在进一步优选的实施方式中，所用原辅料由上述重量配比的组分组成。

在本发明的头孢特仑新戊酯脂质体中，使用的磷脂材料为大豆卵磷脂(Lecithin High Potency，也称为大豆蛋黄素，是一种天然磷脂)。

用于形成的常用磷脂材料种类繁多，包括大豆卵磷脂、卵磷脂、蛋黄卵磷脂、蛋黄磷脂酰丝氨酸、蛋黄磷脂酰肌醇、氢化大豆磷脂、大豆磷脂酰甘油、大豆磷脂酰丝氨酸、大豆磷脂酰肌醇、二月桂酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱、肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、棕榈酰肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、棕榈酰硬脂酰磷脂酰胆碱、硬脂酰棕榈酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰胆碱、二月桂酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻酰磷脂酰酰甘油、二棕榈酰磷脂酰甘油、二硬脂酰磷脂酰甘油、二油酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油、二油酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻酰磷脂酸、二棕榈酰磷脂酸、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺、二肉豆蔻酰磷脂酰丝氨酸、和二棕榈酰磷脂酰丝氨酸等。

本发明人经过锐意研究发现，在通常的磷脂材料中，适当量的作为天然磷脂的大豆卵磷脂能用于形成品质优良的头孢特仑新戊酯脂质体，通过本发明中提供的方法能形成适当大小、适当结构成分的包封率高的脂质体，而且这些成分，尤其是头孢特仑新戊酯，在所形成的脂质体中不渗漏。

本发明的头孢特仑新戊酯脂质体中，基于1重量份头孢特仑新戊酯而言，如果大豆卵磷脂的量低于4重量份，则无法形成稳定的脂质体，如果卵磷脂的量高于25重量份，则头孢特仑新戊酯的包封率降低，而且脂质体的稳定性有所下降。

本发明的头孢特仑新戊酯脂质体中，胆固醇调节脂质体的膜结构，调节膜结构的流动性和通透性。基于1重量份头孢特仑新戊酯而言，1-12重量份的胆固醇能形成稳定性良好的脂质体。

在本发明的头孢特仑新戊酯脂质体中，吐温80进一步增强脂质体的稳定性。基于1重量份头孢特仑新戊酯而言，0.5-20重量份的吐温80能形成稳定性良好的脂质体。

在本发明的头孢特仑新戊酯脂质体中，大豆甾醇进一步增强脂质体的稳定性。基于1重量份头孢特仑新戊酯而言，1-4重量份的大豆甾醇能形成稳定性良好的脂质体。

所述大豆甾醇是大豆甾醇葡萄糖苷去葡萄糖残基的水解产物，而大豆甾醇葡萄糖苷是从经提炼豆油的大豆残渣中分离出来的甾醇葡萄糖苷的混合物，是天然来源的产物，安全性高，易于获得，且价格便宜。

在本发明的头孢特仑新戊酯脂质体中，通过适量配比的胆固醇、吐温80和大豆甾醇的对膜结构的协同调节促进作用，能形成包封率高、稳定性高的头孢特仑新戊酯脂质体。

另一方面，本发明提供上述头孢特仑新戊酯脂质体的制备方法，该方法包括以下步骤：

(a)将头孢特仑新戊酯、大豆卵磷脂、胆固醇、吐温80和大豆甾醇溶于有机溶剂中，混合均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去有机溶剂，得到磷脂膜；

(b)加入缓冲溶液使磷脂膜完全水化，用组织捣碎机高速匀质乳化，通过微孔滤膜进行过滤，制得脂质体混悬液；

(c)将上述脂质体混悬液喷雾干燥，制得头孢特仑新戊酯脂质体粉末。

在本发明头孢特仑新戊酯脂质体的制备方法的一个优选实施方案中，在步骤(a)中，所用的有机溶剂选自乙醇、甲醇、叔丁醇、正丁醇、异丙醇、丙酮、乙腈、苯甲醇、正己烷和二氯甲烷中的一种或几种，优选体积比为2∶1的乙醇和丙酮的混合溶剂。

在本发明头孢特仑新戊酯脂质体的制备方法的一个优选实施方案中，在步骤(b)中，所述的缓冲溶液选自磷酸盐缓冲液、枸橼酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液、和碳酸盐缓冲液中的一种，优选pH为5.6的醋酸-醋酸钠缓冲溶液。

在本发明头孢特仑新戊酯脂质体的制备方法的一个优选实施方案中，在步骤(b)中，用于过滤的微孔滤膜孔径为0.45μm。

在本发明头孢特仑新戊酯脂质体的制备方法的一个优选实施方案中，步骤(b)如下：

加入缓冲溶液，振摇，搅拌30分钟，转速为400-700r/min，使磷脂膜完全水化，用组织捣碎机高速匀质乳化10-15分钟，转速5000r/min，0.45μm微孔滤膜过滤，制得脂质体混悬液。

通过本发明提供的方法制备的头孢特仑新戊酯脂质体粉末粒径小、粒径分布均匀、头孢特仑新戊酯的包封率高、脂质体的稳定性高。

再一方面，本发明提供头孢特仑新戊酯脂质体固体制剂，其包括上述的本发明头孢特仑新戊酯脂质体以及药学可接受的载体或赋形剂5-40重量份，优选10-20重量份，基于1重量份头孢特仑新戊酯。

在本发明的一个优选实施方案中，头孢特仑新戊酯脂质体固体制剂由上述头孢特仑新戊酯脂质体以及药学可接受的载体或赋形剂制成。最优选地，头孢特仑新戊酯脂质体固体制剂由以下重量配比的原料制成：

头孢特仑新戊酯1份、大豆卵磷脂4份、胆固醇1份、吐温801份、大豆甾醇1份和其它药用辅料10-20份。

在本发明头孢特仑新戊酯脂质体固体制剂的优选实施方案中，该固体制剂包括片剂、胶囊剂、或干混悬剂等口服制剂。

在本发明的头孢特仑新戊酯脂质体固体制剂中，所用的药学可接受的载体或赋形剂(也称为药用辅料)选自稀释剂、崩解剂、甜味剂、粘合剂、助流剂、润滑剂及其组合。各种药用辅料的用量可以由本领域技术人员根据各辅料在固体制剂中的一般用量进行选择，这在本领域技术人员的能力范围内。

进一步地，作为优选，稀释剂可以选自淀粉、糖粉、乳糖、可压性淀粉、微晶纤维素、糊精、甘露醇中的一种或几种，优选为淀粉和微晶纤维素。其用量可以为所述固体制剂总重量的5％-80％(重量/重量)，优选为20％-70％(重量/重量)。

进一步地，作为优选，崩解剂可以选自羧甲淀粉钠、干淀粉、低取代羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠、预胶化淀粉中的一种或多种的组合，优选为羧甲淀粉钠。其用量可以为所述固体制剂总重量的1％-8％(重量/重量)，优选为1％-5％(重量/重量)。

进一步地，作为优选，甜味剂可以选自甘露醇、蔗糖、异麦芽酮糖、乳酮糖、棉子糖、大豆低聚糖、低聚果糖、低聚乳果糖、糖精钠、甜蜜素和安赛蜜中的一种或几种，优选为蔗糖和甘露醇。其用量可以为所述固体制剂总重量的5％-70％(重量/重量)。

进一步地，作为优选，粘合剂可以选自羟丙甲纤维素、聚维酮K30、羧甲基纤维素钠、黄原胶、阿拉伯胶、甲基纤维素、乙基纤维素中的一种，优选为聚维酮K30。其用量可以为所述固体制剂总重量的0.01％-2％(重量/重量)，优选为0.5％-1％(重量/重量)。

进一步地，作为优选，助流剂或润滑剂可以选自滑石粉、微粉硅胶、硬脂酸镁、硬脂酸锌、聚乙二醇4000、硬脂酸中的一种或多种的组合，优选为硬脂酸镁。其用量可以为所述固体制剂总重量的0.1％-1％(重量/重量)，优选为0.5％-1％(重量/重量)。

如上所述，各种药用辅料的用量在所规定的范围内，同时，各种药用辅料的总重量还应满足前述的头孢特仑新戊酯脂质体固体制剂组成要求，即，基于1重量份头孢特仑新戊酯，各种药用辅料的总重量为5-40重量份，优选10-20重量份。

在实践中，考虑到药物的有效剂量和用药的便利性，在本发明的头孢特仑新戊酯脂质体固体制剂的优选实施方案中，头孢特仑新戊酯的规格用量为50mg或100mg。

再一方面，本发明提供上述头孢特仑新戊酯脂质体固体制剂的制备方法，该方法包括以下步骤：

(1)头孢特仑新戊酯脂质体的制备：其包括上述步骤(a)、(b)和(c)；

(2)头孢特仑新戊酯脂质体固体制剂的制备：将步骤(1)中所得头孢特仑新戊酯脂质体和药学上可接受的载体或赋形剂混合，制备头孢特仑新戊酯脂质体固体制剂。

优选地，其中所述药学上可接受的载体或赋形剂选自稀释剂、崩解剂、甜味剂、粘合剂、助流剂、润滑剂及其组合，具体如上所述。

在本发明的头孢特仑新戊酯脂质体固体制剂的制备方法中，步骤(2)优选包括如下步骤：

(d)将头孢特仑新戊酯脂质体粉末和稀释剂、崩解剂、甜味剂混合，过80目筛混合均匀，加入粘合剂溶液制备软材，过20目筛制粒，干燥；

(e)将干颗粒和助流剂或润滑剂混合均匀，过20目筛整粒；

(f)压片、填充胶囊或装袋，制得头孢特仑新戊酯脂质体固体制剂。

在本发明的方法中，还可以根据需要对脂质体和/或脂质体固体制剂进行灭菌。灭菌方法没有特殊要求，可以使用制药领域中常用的脂质体灭菌方法，如加热灭菌、过滤除菌、辐射灭菌或无菌操作等。

本发明先通过活性成分头孢特仑新戊酯和大豆卵磷脂、胆固醇、吐温80与大豆甾醇的特定的组合制备成脂质体，再和其它药用辅料混合制成固体制剂。所得固体制剂的粒径均匀，包封率高，在水中的溶解性大，药物在血液循环中保留时间长，疗效显著；所用辅料简单廉价，利用度高，污染小，经济价值高；本发明提供的头孢特仑新戊酯脂质体固体制剂的制备方法提高了产品质量，降低了毒副作用，并且制备方法的设备简单，易于操作，极有利于工业化大生产。

在本文中，如果没有特别地说明，含量或用量都以重量份计，所采用的装置、仪器、原料、物质、用量、方法、时间、适度及其他条件都为本领域众所周知的，或者是本领域技术人员根据申请的描述结合现有技术可以获得的。

实施例

以下通过实施例进一步说明本发明，但是本发明并不限于这些实施例以及使用的制备方法。而且，本领域技术人员根据本发明的描述可以对本发明进行等同替换、组合、改良或修饰，但这些都将包括在本发明的范围内。

实施例1  头孢特仑新戊酯脂质体固体片剂的制备

所用原辅料如下：

头孢特仑新戊酯    25g

大豆卵磷脂        100g

胆固醇            25g

吐温80            25g

大豆甾醇          25g

淀粉              200g

微晶纤维素        75g

羧甲淀粉钠        20g

聚维酮K30        3g

硬脂酸镁         2g

制备工艺：

(1)头孢特仑新戊酯脂质体的制备

(a)将25g头孢特仑新戊酯、100g卵磷脂、25g胆固醇、25g吐温80和25g大豆甾醇溶于600ml体积比为2∶1的乙醇和丙酮的混合溶剂中，混合均匀，于60℃旋转薄膜蒸发器上减压除去乙醇和丙酮，得到磷脂膜；

(b)加入pH＝5.6的醋酸-醋酸钠缓冲液600ml，振摇，搅拌30分钟，转速为400r/min，使磷脂膜完全水化，再用组织捣碎机高速匀质乳化15分钟，转速5000r/min，用孔径为0.45μm微孔滤膜过滤，制得头孢特仑新戊酯脂质体混悬液；

(c)将上述(b)中所得头孢特仑新戊酯脂质体混悬液喷雾干燥，制得头孢特仑新戊酯脂质体粉末；

(2)头孢特仑新戊酯脂质体固体片剂的制备

(d)将上述(c)中所得头孢特仑新戊酯脂质体粉末和200g淀粉、75g微晶纤维素、20g羧甲淀粉钠混合，过80目筛混匀，加入6％的聚维酮K30的40％乙醇水溶液50ml制备软材，20目筛制湿颗粒，干燥；

(e)将上述(d)中所得干颗粒与2g硬脂酸镁混合均匀，过20目筛整粒；

(f)压片，制得500片头孢特仑新戊酯脂质体片剂。

对比例1  头孢特仑新戊酯脂质体固体片剂的制备

所用原辅料如下：

头孢特仑新戊酯        25g

大豆卵磷脂        25g

胆固醇            300g

吐温80            15g

大豆甾醇          25g

淀粉              200g

微晶纤维素        75g

羧甲淀粉钠        20g

聚维酮K30         3g

硬脂酸镁          2g

制备工艺与实施例1相同，制得500片头孢特仑新戊酯脂质体固体片。

实施例2  头孢特仑新戊酯脂质体固体胶囊剂的制备

所用原辅料如下：

头孢特仑新戊酯    25g

大豆卵磷脂        250g

胆固醇            100g

吐温80            125g

大豆甾醇          50g

淀粉              250

聚维酮K30         5g

羧甲淀粉钠        40g

硬脂酸镁          5g

制备工艺：

(1)头孢特仑新戊酯脂质体的制备

(a)将25g头孢特仑新戊酯、250g大豆卵磷脂、100g胆固醇、125g吐温80和50g大豆甾醇溶于1000ml体积比为2∶1的乙醇和丙酮的混合溶剂中，混合均匀，于60℃旋转薄膜蒸发器上减压除去乙醇和丙酮，得到磷脂膜；

(b)加入pH＝5.6的醋酸-醋酸钠缓冲液1000ml，振摇，搅拌30分钟，转速为400r/min，使磷脂膜完全水化，再用组织捣碎机高速匀质乳化15分钟，转速5000r/min，用孔径为0.45μm微孔滤膜过滤，制得脂质体混悬液；

(c)将上述(b)中所得脂质体混悬液喷雾干燥，制得头孢特仑新戊酯脂质体粉末；

(2)头孢特仑新戊酯脂质体固体胶囊剂的制备

(d)将上述(c)中所得头孢特仑新戊酯脂质体粉末和250g淀粉、40g羧甲淀粉钠混合，过80目筛混匀，加入5％的聚维酮K30的40％乙醇水溶液100ml制备软材，20目筛制湿颗粒，干燥；

(e)将上述(d)中所得干颗粒与5g硬脂酸镁混合均匀，过20目筛整粒；

(f)上述(e)中所得颗粒填充至500个胶囊中，制得500粒头孢特仑新戊酯脂质体胶囊。

对比例2  头孢特仑新戊酯脂质体胶囊剂的制备

所用原辅料与实施例2相同，制备工艺如下所述。

制备工艺：

(1)头孢特仑新戊酯脂质体的制备

(a)将250g大豆卵磷脂、100g胆固醇、125g吐温80和50g大豆甾醇溶于1000ml体积比为2∶1的乙醇和丙酮的混合溶剂中，混合均匀，于60℃旋转薄膜蒸发器上减压除去乙醇和丙酮，得到磷脂膜；

(b)将25g头孢特仑新戊酯溶于pH＝5.6醋酸-醋酸钠缓冲液1000ml，混匀，然后加入到上述磷脂膜中，振摇，搅拌20分钟，转速为200r/min，使磷脂膜完全水化，再用组织捣碎机高速匀质乳化15min，转速10000r/min，用孔径为0.45μm微孔滤膜过滤，制得脂质体混悬液；

(c)将上述(b)中所得脂质体混悬液喷雾干燥，制得头孢特仑新戊酯脂质体粉末；

(2)头孢特仑新戊酯脂质体固体胶囊剂的制备

(d)将上述头孢特仑新戊酯脂质体粉末和250g淀粉、40g羧甲淀粉钠混合，过80目筛混匀，加入5％的聚维酮K30的40％乙醇水溶液100ml制备软材，20目筛制湿颗粒，干燥；

(e)将上述(d)中所得干颗粒与5g硬脂酸镁混合均匀，过20目筛整粒；

(f)上述(e)中所得颗粒填充至500个胶囊中，制得500粒头孢特仑新戊酯脂质体胶囊。

实施例3  头孢特仑新戊酯脂质干混悬剂的制备

所用原辅料如下：

头孢特仑新戊酯    50g

大豆卵磷脂        400g

胆固醇            100g

吐温80            150g

大豆甾醇          125g

蔗糖              600g

甘露醇            100g

羧甲淀粉钠        20g

聚维酮K30        10g

制备工艺：

(1)头孢特仑新戊酯脂质体的制备

(a)将50g头孢特仑新戊酯、400g大豆卵磷脂、100g胆固醇、150g吐温80和125g大豆甾醇溶于1500ml体积比为2∶1的乙醇和丙酮的混合溶剂中，混合均匀，于60℃旋转薄膜蒸发器上减压除去乙醇和丙酮，得到磷脂膜；

(b)加入pH＝5.6的醋酸-醋酸钠缓冲液1000ml，振摇，搅拌30分钟，转速为400r/min，使磷脂膜完全水化，再用组织捣碎机高速匀质乳化15分钟，转速5000r/min，用孔径为0.45μm微孔滤膜过滤，制得脂质体混悬液；

(c)将上述(b)中所得脂质体混悬液喷雾干燥，制得头孢特仑新戊酯脂质体粉末；

(2)头孢特仑新戊酯脂质体固体制剂的制备

(d)将上述(c)中所得头孢特仑新戊酯脂质体粉末和600g蔗糖、100g甘露醇、20g羧甲淀粉钠混合，过80目筛混匀，加入5％的聚维酮K30的40％乙醇水溶液200ml制备软材，20目筛制湿颗粒，干燥；

(e)过20目筛整粒；

(f)将所得颗粒装入500个袋中，制得500袋头孢特仑新戊酯脂质体干混悬剂。

对比例3  头孢特仑新戊酯脂质体干混悬剂的制备

所用原辅料如下：

头孢特仑新戊酯        50g

大豆卵磷脂            100g

胆固醇            700g

吐温80            25g

大豆甾醇          25g

蔗糖              600g

甘露醇            100g

羧甲淀粉钠        20g

聚维酮K30         10g

制备工艺与实施例3相同，制得500袋头孢特仑新戊酯脂质体干混悬剂。

实施例4  头孢特仑新戊酯脂质体固体片剂的制备

所用原辅料如下：

头孢特仑新戊酯    25g

大豆卵磷脂        625g

胆固醇            300g

吐温80            500g

大豆甾醇          100g

淀粉              400g

微晶纤维素        100g

羧甲淀粉钠        40g

聚维酮K30         6g

硬脂酸镁          4g

制备工艺与实施例1相同，制得头孢特仑新戊酯脂质体片剂500片。

实施例5  头孢特仑新戊酯脂质体片剂的制备

所用原辅料如下：

头孢特仑新戊酯    50g

大豆卵磷脂        200g

胆固醇            50g

吐温80            25g

大豆甾醇          50g

淀粉              200g

微晶纤维素        75g

羧甲淀粉钠        25g

聚维酮K30         6g

硬脂酸镁          4g

制备工艺与实施例1相同，制得头孢特仑新戊酯脂质体片剂500片。

试验例1  脂质体包封率的测定

采用超速离心的方法测定头孢特仑新戊酯脂质体的包封率，具体操作步骤如下：

(1)离心样品溶液的制备：精密量取实施例1-5以及对比例1-3中于步骤(b)中制得的头孢特仑新戊酯脂质体混悬液3.0ml，置于冷冻超速离心机中，16000r/min，4℃离心30分钟，取上清液，用于脂质体溶液中游离药物的含量测定。

(2)未离心的样品溶液的制备：精密量取实施例1-5和对比例1-3中于步骤(b)中制得的头孢特仑新戊酯脂质体混悬液3.0ml，置于10ml棕色容量瓶中，加入5％的Triton X-100的乙醇溶液6ml破乳，用蒸馏水稀释并定容至刻度，摇匀，用于脂质体中总药物的含量测定。

(3)分别取上述(1)中所得头孢特仑新戊酯脂质体的离心样品溶液与上述(2)中所得头孢特仑新戊酯脂质体的未离心样品溶液，按相应色谱条件测定峰面积，并计算头孢特仑新戊酯脂质体的离心样品溶液中药物浓度(C_游离)及头孢特仑新戊酯脂质体的未离心样品溶液中药物浓度(C_总)，再分别乘以各自稀释倍数即得未包封药物的重量(W_游离)及脂质体中药物的总重量(W_总)，通过下式计算包封率，包封率＝(W_总-W_游离)/W_总×100％。

分别对实施例1-5以及对比例1-3中的脂质体混悬液测量包封率，结果如下表1中所示。

表1  脂质体的包封率

由表1可知，与比较例中的脂质体相比，本发明的头孢特仑新戊酯脂质体的包封率要高出很多。

通过比较实施例1-5与重量配比不在本发明范围内的对比例1和3可知，本发明的脂质体具有更高的包封率。这表明，头孢特仑新戊酯脂质体的包封率不仅与用于形成脂质体的成分有关，还与各成分的用量直接相关。

通过比较实施例2与对比例2可知，在使用同样的原辅料时，通过本发明方法制得的脂质体的包封率更高。

试验例2  脂质体粒径的测定

用电子显微镜观察实施例1-5和对比例1-3中制得的头孢特仑新戊酯脂质体的粒径，结果如下表2中所示。

表2  脂质体的粒径

由表2可知，本发明实施例1-5中所得脂质体的平均粒径比对比例1-3中所得脂质体的平均粒径小很多，而且粒径大小均一。

现有研究表明，脂质体颗粒大小和分布均匀程度与其包封率和稳定性以及在人体内的停留时间有关，脂质体颗粒越小、粒径分布越均匀，其包封率和稳定性越高，在人体循环系统内的停留时间越长(参见药物新剂型，第一版，第十八章，408-468页，朱盛山主编，化学工业出版社)。将该文献全文引入此处作为参考。

因此，本发明的头孢特仑新戊酯脂质体平均粒径小、粒径分布均匀是进一步促进其包封率、稳定性、在体内的保留时间时间长、生物利用度等性能优异的一个因素。

试验例3  测定本发明的头孢特仑新戊酯脂质体片剂在比格犬体内的血药浓度

将12条雄性比格犬(体重10-12kg，来自山东大学实验动物中心)随机分成2组。在其中一组中，每条比格犬分别灌胃给予实施例1中制备的头孢特仑新戊酯脂质体片，每天灌胃一次，每次100mg(以头孢特仑新戊酯计)；在另外一组中，以相同方式分别灌胃给予每条比格犬以市售的头孢特仑新戊酯片剂(先声药业有限公司，批号：H20095423)。给药后分别于0.5h、1h、1.5h、2h、3h、6h、8h、12h和24h由每条比格犬腿静脉采血3ml，血样经处理后，以建立的HPLC-MS法测定血药浓度。制作本发明的头孢特仑新戊酯脂质体片剂和市售的头孢特仑新戊酯片的平均血药浓度与时间的关系曲线，如图1中所示。

由图1可知，与市售的头孢特仑新戊酯片相比，服用本发明的头孢特仑新戊酯脂质体片剂具有以下特点：药物吸收迅速、达峰时间快、峰浓度高。表明本发明的制剂具有起效迅速、生物利用度高等特点。

试验例4  脂质体的稳定性研究

通过加速试验，评价本发明实施例1-5和对比例1-3中的头孢特仑新戊酯脂质体固体制剂以及市售的头孢特仑新戊酯片剂(先声药业有限公司，批号：H20095423)的稳定性。在高温40℃、高湿75％条件下进行加速试验，共计180天，结果如下表3所示。

表3  加速试验结果

由表3可知，本发明实施例1-5的头孢特仑新戊酯脂质体固体制剂的稳定性高于对比例1-3的头孢特仑新戊酯脂质体固体制剂以及市售的头孢特仑新戊酯片剂。

Claims (10)

1.一种头孢特仑新戊酯脂质体，其由包括以下重量配比的组分的原辅料制成：

该头孢特仑新戊酯脂质体是通过包括以下步骤的制备方法制得的：

(a)将头孢特仑新戊酯、大豆卵磷脂、胆固醇、吐温80和大豆甾醇溶于有机溶剂中，混合均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去有机溶剂，得到磷脂膜；

(b)加入缓冲溶液使磷脂膜完全水化，用组织捣碎机高速匀质乳化，通过微孔滤膜进行过滤，制得脂质体混悬液；

(c)将上述脂质体混悬液喷雾干燥，制得头孢特仑新戊酯脂质体粉末。

2.根据权利要求1所述的头孢特仑新戊酯脂质体，其特征在于所述原辅料包括以下重量配比的组分：

3.根据权利要求1所述的头孢特仑新戊酯脂质体，其特征在于所述原辅料包括以下重量配比的组分：

4.权利要求1-3中任一项所述的头孢特仑新戊酯脂质体的制备方法，该方法包括以下步骤：

(a)将头孢特仑新戊酯、大豆卵磷脂、胆固醇、吐温80和大豆甾醇溶于有机溶剂中，混合均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去有机溶剂，得到磷脂膜；

(b)加入缓冲溶液使磷脂膜完全水化，用组织捣碎机高速匀质乳化，通过微孔滤膜进行过滤，制得脂质体混悬液；

(c)将上述脂质体混悬液喷雾干燥，制得头孢特仑新戊酯脂质体粉末。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：

在步骤(a)中，所述有机溶剂为2∶1的乙醇和丙酮的混合溶剂；和/或

在步骤(b)中，所述缓冲溶液是pH为5.6的醋酸-醋酸钠缓冲溶液；和/或

在步骤(b)中，用于过滤的微孔滤膜孔径为0.45μm。

6.根据权利要求4或5所述的制备方法，其特征在于步骤(b)如下：

加入缓冲溶液，振摇，搅拌30分钟，转速为400-700r/min，使磷脂膜完全水化，用组织捣碎机高速匀质乳化10-15分钟，转速5000r/min，用孔径为0.45μm微孔滤膜过滤，制得脂质体混悬液。

7.一种头孢特仑新戊酯脂质体固体制剂，其包括根据权利要求1-3中任一项所述的头孢特仑新戊酯脂质体以及药学可接受的载体或赋形剂5-40重量份，基于1重量份头孢特仑新戊酯。

8.根据权利要求7所述头孢特仑新戊酯脂质体固体制剂，其包括根据权利要求3所述的头孢特仑新戊酯脂质体以及药学可接受的载体或赋形剂10-20重量份，基于1重量份头孢特仑新戊酯。

9.根据权利要求7或8所述头孢特仑新戊酯脂质体固体制剂，其特征在于，所述的药学可接受的载体或赋形剂选自稀释剂、崩解剂、甜味剂、粘合剂、助流剂、润滑剂及其组合。

10.根据权利要求7所述头孢特仑新戊酯脂质体固体制剂，其特征在于，所述的药学可接受的载体或赋形剂为10-20重量份。

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