CN102088984B

CN102088984B - 幽门螺杆菌驱除剂和驱除方法

Info

Publication number: CN102088984B
Application number: CN2008801303288A
Authority: CN
Inventors: 秦忠世; 秦知世; 真木修一; 丸冈俊之
Original assignee: Panacea Disinfectant Co Ltd
Current assignee: Panacea Disinfectant Co Ltd
Priority date: 2008-07-11
Filing date: 2008-07-11
Publication date: 2012-08-22
Anticipated expiration: 2028-07-11
Also published as: JPWO2010004653A1; CN102088984A; WO2010004653A1; JP5434915B2; HK1156528A1

Abstract

本发明提供一种幽门螺杆菌驱除剂，其特征在于，以具有抗菌作用的金属离子和L-半胱氨酸及L-抗坏血酸为主要成分，在该主要成分中含有除非离子型表面活性剂以外的表面活性剂。其中，本发明的幽门螺杆菌驱除剂是安全性优异的幽门螺杆菌驱除剂，其通过与选自阿莫西林、克拉霉素和质子泵抑制剂中的一种以上的抗生素并用，在以往驱除困难的幽门螺杆菌保菌者中也能够在短期内实质上使幽门螺杆菌死亡。本发明还提供幽门螺杆菌的驱除方法。

Description

幽门螺杆菌驱除剂和驱除方法

技术领域

本发明涉及在胃粘膜和胃粘液中感染、固定、繁殖，成为从慢性胃炎发展到胃十二指肠溃疡，进而成为胃癌的诱因的幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)的驱除剂及其驱除方法。

背景技术

作为胃癌和胃十二指肠溃疡的原因，由免疫学研究中可知与幽门螺杆菌的慢性胃粘膜感染相关，其驱除、除菌推荐从发病的预防和治疗两方面入手。

该菌在1982年初次从人的胃粘膜分离而被发现。据说40岁以上的日本人中有70％被感染，现在达到作为国民病而被认知的程度。以具有极多毛性鞭毛的革兰氏阴性的螺旋状杆菌为主，紧贴在胃粘膜上皮细胞表层及其细胞间隙中生长繁殖，推测该病原性的主体(慢性活动性胃炎)是通过由该菌强大的尿素酶活性产生的铵和称为细胞毒素的毒素而使浸润在胃粘膜固有层中的中性白细胞生成的活性氧等导致的。

这样，可以说由持续的感染导致慢性胃炎，胃粘膜逐渐老化变薄，进展为萎缩性胃炎，其加重成为溃疡，进一步发展为难治性的复发倾向强的溃疡，被破坏的胃壁细胞不久发生癌化，变为胃癌。

实际上，从胃十二指肠溃疡患者的幽门前庭部胃粘膜被高频率分离，也有调查称94％的胃癌患者被感染，世界卫生组织(WHO)将幽门菌认定为确实的致癌物质。

上述情况类似于丙型肝炎病毒(HCV)长时间在肝细胞中栖居而导致从肝炎向肝硬化发展、最终成为肝癌的丙型肝炎情形。

幽门菌的检查有以下几种方法：(1)使用内窥镜直接采取胃组织，通过显微镜和培养而进行调查的方法；(2)在服用以13C标记的尿素前和服用后，采集其呼气，根据其中所含有的二氧化碳比例调查有无幽门菌的方法；(3)调查在血液和尿中有无抗体的方法等，但现在，因为(2)尿素呼气检查因其迅速且高灵敏度而受到推荐，所以本发明的发明人也决定在检查时采用该方法。

目前，为了除去幽门螺杆菌，尝试以抗生素为中心的各种药剂的组合。在欧美，并用铋制剂、甲硝唑和抗菌剂的三剂并用疗法，另外，并用酸分泌抑制剂质子泵抑制剂和阿莫西林的二剂并用疗法成为主流。另外，在最近，也进行并用普劳诺托、索法酮和阿莫西林的疗法，但在这些疗法中，都不能得到充分的除菌率。此外，由抗生素的投与，不仅担心腹泻等的副作用，而且也开始指责出现耐性菌的危险性(专利文献1)。

例如，现在进行的主流驱除、除菌方法是2次/日、连续服用7日2种抗菌剂(阿莫西林、克拉霉素)和胃酸分泌抑制剂(PPI)，其成功率达到80％左右，但最近也有耐药株的出现，除菌困难的情况也经常可见，在某大学的调查中，也有成功率38％的报告。除菌成功和组织炎症改善，溃疡复发被抑制，胃癌发生的危险性也下降。

另一方面，作为不依赖药剂的方法，也有投与特殊的乳酸菌和日常摄取梅干等具有抗菌作用的食品有效的报告，但实际情况是也有很多专家质疑其实效性是未知数。

专利文献1：日本特开平11-189529号公报(段落0004)

发明内容

本发明就是鉴于上述情况而做出的发明，目的在于基于以往没有过的概念，提供一种短期且能够使其实质性死亡的安全性优异的幽门螺杆菌驱除剂及其驱除方法。

另外，本发明的目的在于提供一种通过并用现有的抗生素，在以往驱除困难的幽门螺杆菌保菌者中也能够使幽门螺杆菌实质性死亡的、安全性优异的幽门螺杆菌的驱除剂及其驱除方法。

本发明的发明人等深入研究了在采用现有方法达不到除菌的情况下也几乎能够100％除菌的驱除剂及其方法，结果成功地使在覆盖胃粘液的胃粘膜内外潜伏生存的幽门菌更迅速且完全地死亡，从而完成了本发明。

即，本发明的要旨关于：

[1]一种幽门螺杆菌驱除剂，其特征在于，以具有抗菌作用的金属离子和L-半胱氨酸及L-抗坏血酸为主要成分，在该主要成分中含有除非离子型表面活性剂以外的表面活性剂。

[2]如上述[1]中记载的幽门螺杆菌驱除剂，其中，具有抗菌作用的金属离子是三价的铁离子(Fe³⁺)、二价的铁离子(Fe²⁺)、锌离子(Zn²⁺)、铜离子(Cu²⁺)、钴离子(Co²⁺)、镍离子(Ni²⁺)或银离子(Ag⁺)。

[3]如上述[2]中记载的幽门螺杆菌驱除剂，其中，具有抗菌作用的金属离子的浓度在三价的铁离子的情况下为30～100ppm、在二价的铁离子的情况下为50～250ppm、在锌离子的情况下为5～10ppm、在铜离子的情况下为10～25ppm、在钴离子的情况下为50～180ppm、在镍离子的情况下为40～85ppm、在银离子的情况下为0.5～1ppm。

[4]如上述[1]～[3]中任一项记载的幽门螺杆菌驱除剂，其中，L-半胱氨酸的浓度为25～250ppm，L-抗坏血酸的浓度为20～100ppm。

[5]如上述[1]～[4]中任一项记载的幽门螺杆菌驱除剂，其中，除非离子型表面活性剂以外的表面活性剂是选自烷基苯磺酸盐、直链烷基苯磺酸盐、聚氧乙烯烷基醚硫酸盐、高级醇硫酸酯盐、十二烷基硫酸钠、月桂酰肌氨酸钠、十八烷基二甲基苄基氯化铵、苯扎氯铵、苄索氯铵、烷基二氨乙基甘氨酸盐酸盐和烷基聚氨乙基甘氨酸盐酸盐中的一种以上。

[6]如上述[1]～[5]中任一项记载的幽门螺杆菌驱除剂，其中，除非离子型表面活性剂以外的表面活性剂的浓度为5～10ppm。

[7]如上述[1]～[6]中任一项记载的幽门螺杆菌驱除剂，其中，还含有选自山梨酸、山梨酸盐、苯甲酸、苯甲酸盐和对羟基苯甲酸酯中的一种以上。

[8]如上述[7]中记载的幽门螺杆菌驱除剂，其特征在于：

山梨酸、山梨酸盐、苯甲酸、苯甲酸盐和对羟基苯甲酸酯的浓度为10～20ppm。

[9]如上述[1]～[8]中任一项记载的幽门螺杆菌驱除剂，其中，pH调整为2.5～4.0。

[10]一种幽门螺杆菌驱除剂，其包含上述[1]～[9]中任一项记载的幽门螺杆菌驱除剂和抗生素。

[11]如上述[10]中记载的幽门螺杆菌驱除剂，其中，抗生素选自阿莫西林、克拉霉素和质子泵抑制剂中的一种以上。

[12]一种幽门螺杆菌的驱除方法，其特征在于，投与75ml以上的上述[1]～[11]中任一项记载的幽门螺杆菌驱除剂。

[13]一种幽门螺杆菌的驱除方法，其特征在于，连续4日至5日投与上述[1]～[11]中任一项记载的幽门螺杆菌驱除除菌剂。发明的效果

现在是在所有领域中“放心和安全性”比什么都受到重视的时代，健康和医疗也不例外。老龄化社会的到来引起的成人病(生活习惯病)和慢性感染症的增加及其所伴随的医疗费的增加必定到来，此时，在各发达国家中据说显著地多达6000万人的幽门螺杆菌慢性感染所引发的胃十二指肠溃疡和胃癌的预防和治疗中，本剂能够做出很大贡献。如果一旦驱除、除菌成功，则复发的可能性无限接近0。如果进一步与作为现在除菌主流的“3剂”并用数日，其成功率几乎是100％，也不会表现出由抗生素长时间投与所产生的副作用(腹泻、过敏性反应、出血性大肠炎、味觉障碍等)。

具体实施方式

本发明的幽门螺杆菌驱除剂的特征在于，以具有抗菌作用的金属离子和L-半胱氨酸及L-抗坏血酸为主要成分，在该主要成分中含有除非离子型表面活性剂以外的表面活性剂。

(1)具有抗菌作用的金属离子

所谓具有抗菌作用的金属离子，可以列举三价的铁离子(Fe³⁺)、二价的铁离子(Fe²⁺)、锌离子(Zn²⁺)、铜离子(Cu²⁺)、钴离子(Co²⁺)、镍离子(Ni²⁺)、银离子(Ag⁺)。这些金属离子可以单独使用，也可以并用。

作为本发明的杀菌消毒液中的上述金属离子的量，可以适当调整以得到所希望的杀菌力，例如，优选在三价铁离子的情况下为30～100ppm、在二价的铁离子的情况下为50～250ppm、在锌离子的情况下为5～10ppm、在铜离子的情况下为10～25ppm、在钴离子的情况下为50～180ppm、在镍离子的情况下为40～85ppm、在银离子的情况下为0.5～1ppm。

另外，作为上述金属离子，例如，可以使用可溶于水中成为离子的上述各种化合物。例如，对于Fe³⁺离子而言，可以列举氯化铁、硝酸铁六水合物、硝酸铁九水合物、硝酸铁n水合物、磷酸铁n水合物、柠檬酸铁n水合物等，对于Fe²⁺离子而言，可以列举氯化亚铁四水合物、葡糖酸亚铁、柠檬酸亚铁、草酸亚铁等，对于Zn²⁺而言，可以列举柠檬酸锌二水合物、葡糖酸锌等，对于Cu²⁺而言，可以列举氯化铜二水合物、氯化二铵铜二水合物、硝酸铜三水合物等，对于Co²⁺而言，可以列举葡糖酸钴三水合物、氢氧化钴、柠檬酸钴等，对于Ni²⁺而言，可以列举硝酸镍等，对于Ag⁺而言，可以列举硫酸银、磷酸银等。

(2)L-半胱氨酸

L-半胱氨酸是含硫氨基酸的一种，是皮肤代谢中不可缺少的成分，有助于胶原的生成，与L-抗坏血酸协同作用抑制黑色素的生成。是皮肤、指甲、毛发的主要构成成分，在体内广泛分布。意外地发现，L-半胱氨酸不仅其本身源于其用法表现出抗菌作用，而且在分子结构中，SH基(硫和氢结合而成的巯基)与抗菌性金属离子结合，放大其活性，表现出很强的杀菌性，通过DNA抑制、酶失活、代谢功能抑制、蛋白变性或产生自由基而促进菌体破坏。以强烈的抗氧化作用和还原作用有助于构成成分的稳定性，与机体的亲和性高，很强地附着在病原体上，承担能够助长渗透性的功能。其最佳浓度根据含有的金属离子的种类及其浓度而有若干差别，但优选为离子浓度的数倍左右。例如，在本发明的杀菌消毒液中的L-半胱氨酸含量优选为20～250ppm。

(3)L-抗坏血酸

关于L-抗坏血酸的作用如前所述。本发明的幽门螺杆菌驱除剂中的L-抗坏血酸含量优选为20～100ppm。

(4)除非离子型表面活性剂以外的表面活性剂

表面活性剂的基本结构由容易亲油的亲油基团和容易亲水的亲水基团构成，其作用是湿润、吸湿、渗透、助溶性、乳化、分散、起泡、润滑、洗净、抗静电、吸附、成膜、抗菌、搅乱细胞膜、防锈等广泛的范围。主要用途完全深入于合成洗涤剂、厨房清洗剂、牙膏、染发液、乳化剂、柔软剂等我们日常生活中，目前作为不可缺少的物质而被认知。

多数表面活性剂或多或少同时具有上述作用，但从“杀菌消毒”的观点和用途考虑，作为在本发明中使用的、能够发挥优异效果的除非离子型表面活性剂以外的表面活性剂，可以列举以下的阴离子型表面活性剂、阳离子型表面活性剂和两性表面活性剂。

(阴离子类表面活性剂)

烷基苯磺酸盐(ABS类)、直链烷基苯磺酸盐(LAS类)、聚氧乙烯烷基醚硫酸盐(AES类)、十二烷基硫酸钠、月桂酰肌氨酸钠、高级醇硫酸酯盐(AS)。

(阳离子类表面活性剂)

十八烷基二甲基苄基氯化铵、苯扎氯铵、苄索氯铵。

(两性表面活性剂)

烷基二氨乙基甘氨酸盐酸盐、烷基聚氨乙基甘氨酸盐酸盐。

上述除非离子型表面活性剂以外的表面活性剂可以使用一种或组合两种以上使用。

其中，除非离子型表面活性剂以外的表面活性剂优选是选自烷基苯磺酸盐、直链烷基苯磺酸盐、聚氧乙烯烷基醚硫酸盐、高级醇硫酸酯盐、十二烷基硫酸钠、月桂酰肌氨酸钠、十八烷基二甲基苄基氯化铵、苯扎氯铵、苄索氯铵、烷基二氨乙基甘氨酸盐酸盐和烷基聚氨乙基甘氨酸盐酸盐中的一种以上。

除非离子型表面活性剂以外的表面活性剂的浓度在幽门螺杆菌驱除剂中优选为5～10ppm。

(5)其它

本发明的杀菌消毒液通过含有山梨酸、山梨酸盐、苯甲酸、苯甲酸盐和对羟基苯甲酸酯中的一种以上，能够提高杀菌力。

作为上述山梨酸盐，可以列举山梨酸钾、山梨酸钠。另外，作为苯甲酸盐，可以列举苯甲酸钾、苯甲酸钠、苯甲酸钙、苯甲酸铵、苯甲酸锌。

上述山梨酸、山梨酸钾、苯甲酸、苯甲酸钠和对羟基苯甲酸酯类在幽门螺杆菌驱除剂中的浓度优选为10～20ppm。

本发明的杀菌消毒液可以通过将上述各种成分在水中添加并混合来制备。添加顺序没有特别限定。另外，关于作为介质所使用的水，可以列举自来水、离子交换水、纯水、精制水等，可以根据使用目的适当选择。

(6)pH

另外，本发明的幽门螺杆菌驱除剂中，通过调整为酸性，有助于幽门螺杆菌驱除剂构成成分的效价维持和稳定性，同时有助于向病原体内部的渗透。本发明的幽门螺杆菌驱除剂的pH优选为2.5～4.0。其中，在pH调整中，可以使用公知的pH调整剂。

另外，本发明的幽门螺杆菌驱除剂通过与抗生素并用，对于只以抗生素难以驱除的具有抗生素耐性的幽门螺杆菌也能够驱除，因此能够发挥显著的驱除效果。

上述抗生素可以列举阿莫西林、克拉霉素和质子泵抑制剂。作为上述质子泵抑制剂，可以列举兰索拉唑、奥美拉唑等。这些抗生素可以单独使用，也可以组合两种以上使用。其中，优选并用阿莫西林、克拉霉素和质子泵抑制剂三种。

本发明的幽门螺杆菌驱除剂的作用机理复杂，尚未充分解明，但推测由表面张力下降产生细胞膜损伤、破坏，使随之引起的金属离子抗菌作用(该机理的中心在于强大的氧化能力，由离子催化剂作用产生活性氧、由离子还原产生过氧化氢、由OH自由基的生成导致菌体本身的破坏。另外，使蛋白质凝固变性，对酶类带来损伤，阻碍代谢功能。还与细菌的-SH基、-COOH基、-OH基等结合，破坏细菌的细胞核膜)能够得到最大限度地发挥，表现出在极短时间内的杀伤能力。

本发明的幽门螺杆菌驱除剂通过摄入胃内接触幽门螺杆菌而杀菌、驱除。

作为上述幽门螺杆菌驱除剂向胃内送达的方法，可以将上述驱除剂直接饮用或将上述驱除剂与其它液体成分一同饮用而进行。

其中，作为幽门螺杆菌的驱除方法，通过投与75ml以上的上述幽门螺杆菌驱除剂，能够提高驱除效果。

另外，通过连续投与4日至5日上述幽门螺杆菌驱除除菌剂，能够提高驱除效果。

以下，对具体的制造例和实施例进行说明，但本发明的主旨不受这些制造例和实施例的限定。

实施例

以下，对本发明依次说明开发的经过。

首先从不依赖外科手术对一直以来难以治愈的慢性感染症的治疗方法的成功例作为教材开始。

作为其一例，有皮肤发癣菌病，其原因发癣菌在皮肤表面的角质层寄生繁殖，以角质层的蛋白(角蛋白)为营养源繁殖，当其处于从脚踝至脚趾处时，俗称为足癣，以前只从外部涂布药剂，现在以根据症状内服数个月毒性较小的咪唑类抗真菌药与以往的外用药并用的治疗为主。即，从内和外攻击发癣菌，使称为不治的顽固的足癣几乎完全治愈。

另外，对于慢性副鼻窦炎(蓄脓症)而言，也是作为内服药投与抗生素(大多是大环内酯类)3～6个月，从外部喷雾微量清洗剂(类固醇、抗生素、粘液溶解剂、血管收缩剂等)使之附着在鼻粘膜上而进行治疗，将患者从痛苦中解放出来。

痔疮，特别是内痔的情况下，也是通过并用内服和栓剂或软膏而很快痊愈。

而且，在慢性皮肤念珠菌属症(浅表性念珠菌症)时，通过并用作为外用的咪唑类抗真菌药和三唑类内服药，也能够驱逐顽固的念珠菌。

另外，对于非感染症但皮肤粗糙而言，也是通过从内部将全身症状调整好和外用雪花膏而消除迅速。不限于疾病，通过从内外同时行动能够达到目的的情况在我们日常生活中也是经常体验的。类似于古代攻城时，不仅从外部猛烈攻打，而且从内部也进行导致瓦解的工作，由此即使以较少的兵力也能够迅速攻下城池。

这些事实暗示，病灶在表皮下和粘膜下存在时，为了迅速治疗和期望完整，不是只从外部或只从内部投与药剂，必不可少的是从内外同时攻击病灶。

本发明的发明人在螺旋杆菌的驱除中也采用该现象和实际情况。这是因为在解剖学上，胃和肠的内腔与外界直接连通，因此构想“胃粘膜是身体表面的反转”，从该理论出发，判断上述治疗法是能够应用的。

[1]从外部的驱除、除菌

(1)首先，对坊间相传对螺旋杆菌有效的物质，尝试了以试管内试验(体外)进行验证。在添加有10％量的各食品和各植物提取液的水溶液中，添加2重量％幽门菌的悬浊液(1×10⁸cells/ml)，经时地挑菌，将该菌接种在Skirrow培养基中，在含有5％二氧化碳的环境下培养，观察菌的损伤及其杀菌效果。

另外，使接触时间最长不超过5分钟，该时间考虑在摄取时在胃内滞留而作用于幽门菌的时间。

培养基组成(Skirrow培养基)

示蛋白胨 15g

肝消化物末 2.5g

酵母提取物 5g

NaCl 5g

脱纤维马血 5ml

37℃培养96小时

在以下第1表中表示其成绩。

第1表幽门菌有无生长发育及其程度

^*溶菌酶添加100ppm

效果：

◎效果显著 ○有效 △稍有效 ×无效

发育程度：

++如通常地充分增殖 +增殖 ⊥稍繁殖 -不增殖(死亡)

如从上述成绩可知，以5分钟的接触使幽门菌死亡是不能实现的，但能够确认除了可可以外给予幽门菌相应的损害。也实验性地尝试了30分钟接触，与5分钟的成绩基本不变，达不到死亡。

接着是类似的试验，在添加有10％量以滤纸除菌的上述提取物的Skirrow培养基中接种1×10⁷cells/培养基ml的幽门菌，观察其发育的有无程度。——(设定培养期间中接触提取物)。

在第2表中，简略化地表示该结果。

第2表在培养基中添加提取物时的发育的有无程度

评价基准与第1表相同

通过在培养基中添加10％量的提取物，任意一种都显示抗菌作用，但其作用是抑制发育或抑菌的效果，与第1表中的成绩同样，不显示杀菌效果。

花茎甘蓝的新芽、洋甘菊、加术、薄荷、甘草等也得到与上述同样的结果。另外，也尝试了各提取物等的组合试验，但没有特别地看到相加作用和相乘效果，可知对潜伏在胃粘膜内外的幽门菌的驱除、除菌没有太大的贡献。即，长期连续摄取时是否有效尚不清楚，短期摄取不得不说是几乎无效的。

这样，在试验对象中只残留所谓的杀菌液类。

(2)现有的杀菌消毒液内，关于最近在食品杀菌消毒中也被使用的、对人体也称为比较安全的杀菌液进行了试验。制备幽门菌的悬浊液(1×10⁸cells/生理食盐水)，滴加杀菌消毒液2重量％的该菌液，经时地以铂制挑菌环挑菌，接种在上述Skirrow培养基中培养，以有无增殖来观察杀菌效果。

以下，在第3表中表示成绩。

第3表杀菌液的杀菌效果

评价基准与第1表相同

上述所谓“强酸性水”，是在水中加入食盐，隔着特殊的膜进行电解而得到的物质，是pH为2.7以下，氧化还原电位(ORP)为1100mV，残留氯为20ppm以上的水，因为远远超越了微生物的生长发育环境而具有强大的杀菌力。是近似于作为杀菌消毒液被广泛使用的次氯酸钠液的物质，杀菌力主要源自强氧化作用。

所谓“臭氧水”，是指在夹住电介质的2个电极内通入交流高压电，在放电中使氧通过，由此将氧(O₂)变为臭氧(O₃)，将其暴露在水中溶解得到的物质，含有0.1ppm左右臭氧的臭氧水以强氧化作用使细菌的细胞膜破坏溶菌。

另外，所谓“臭氧超微细气泡水”，是指对臭氧的50μm以下的微小气泡给予物理刺激，成为更微细的气泡，溶解在水中而得到的物质，呈现粉色，不仅具有杀菌作用，而且具有各种生理活性效果。

将使用的驱除剂称为幽门螺杆菌杀菌液，在以下表示其组成(制造例1)。

制造例1(1000ml)

FeCl₃·6H₂O 0.96g

L-半胱氨酸 1g

L-抗坏血酸 0.1g

山梨酸钾 0.05g

十二烷基硫酸钠 0.1g

3N HCl 1ml

水其余

如从上表可知地，任意一种杀菌液都可以以10秒钟左右的接触使幽门菌死亡。

接着，分别添加Skirrow培养基的10％量和20％量的上述各种杀菌液，接种幽门菌进行培养，只有幽门螺杆菌杀菌液发挥强大的抗菌作用，达到使幽门菌发育抑制或死亡。在第4表中表示这些结果。

第4表在培养基中添加杀菌液时的杀菌效果

评价基准与第1表相同

该试验结果如实地说明在有机物的存在下，强酸性水、臭氧水、臭氧超微细气泡水，其杀菌成分均迅速分解或消耗，几乎不能对最重要的幽门菌给予损伤。即，暗示即使将除了幽门螺杆菌杀菌液以外的杀菌液送入胃内，也可能因胃粘液和食物残渣等使效果迅速减弱或变为无效。

因此，接着实际地制成人工胃粘液，在各杀菌液中添加10％量、20％量、50％量，然后，在刚添加后、5分钟后、10分钟后和15分钟后分别滴加2重量％幽门菌悬浊液(1×10⁸cells/1ml生理食盐水)，使之接触，经时地观察其杀菌效果。其中，人工胃粘液参考美国药物局的方法，使用在以下的第5表中表示的组成。

第5表人工胃粘液的组成

物质名称	用量
		示蛋白胨	2g
D-乙二醇	0.7g
		NaCl	0.4g
KH₂PO₄	0.12g
		CaCl₂	0.02g
KCl	0.07g
		胆汁末	0.01g
溶菌酶	0.02g
		胃蛋白酶	0.003g
白蛋白	50ml
		水	950ml

以1N的盐酸调整为pH2.0

胃粘液由在胃粘膜表面存在的表层粘膜细胞和在胃表面存在的腺粘液细胞产生分泌，在不溶性粘液凝胶层和胃内腔以可被溶化的状态存在，以1mm的厚度覆盖胃粘膜，作为保卫胃的壁垒发挥作用。是以各种物质构成的复杂混合物，其主要成分是粘蛋白(大部分是由糖质构成的糖蛋白质)，但还未被充分解明。

在第6表(1)(2)中表示得到的杀菌结果。另外，混合10分钟后和15分钟后时，因为显示和混合5分钟后类似的成绩而割舍。

第6表(1)混合人工胃粘液后的杀菌效果(刚混合后)

+生存 -死亡

第6表(2)混合人工胃粘液后的杀菌效果(混合5分钟后)

+生存 -死亡

从上述成绩可知，在刚混合人工胃粘液后摄取幽门菌时，强酸性水、臭氧水、臭氧超微细气泡水的情况下，通过以人工胃粘液的浓度10％接触3分钟以上，幽门菌死亡。在幽门螺杆菌杀菌液的情况下，10秒钟时不死亡，但接触30秒钟死亡。

添加20％量人工胃粘液时，幽门螺杆菌杀菌液以外的3种杀菌液即使接触5分钟也不死亡，但以幽门螺杆菌杀菌液接触1分钟就死亡。

另外可知，添加50％量时，3种杀菌液接触5分钟但当然不死亡，而以幽门螺杆菌杀菌液接触3分钟就死亡。

接着，在人工胃粘液混合5分钟后添加幽门菌时，强酸性水、臭氧水、臭氧超微细气泡水的情况下，胃粘液的浓度即使是10％也不死亡。

与此相对，在幽门螺杆菌杀菌液的情况下，显示了与人工胃粘液刚混合同样的效果。即，以10％量混合，30秒钟死亡；以20％量混合，1分钟死亡；以50％量混合，3分钟死亡。

从以上的试验成绩证明，使杀菌液的胃内滞留时间为5分钟，即使假定强酸性水、臭氧水、臭氧超微细气泡水没有毒性，在胃腔中投与终究不能实现扑灭游走于胃粘液中的幽门菌和在粘膜下潜伏的幽门菌或使其失活。

因此，今后仅对“幽门螺杆菌杀菌液”进行了各种实验、试验。所谓幽门螺杆菌杀菌液，如上所述，以生命活动的基本物质作为主要成分，粘膜亲和性高，具有细胞渗透性。

接着，在第7表(1)(2)中将在制造例1以外制造的各种幽门螺杆菌杀菌液的例子作为制造例2～10汇总。

第7表(1)本杀菌消毒液的制造例

第7表(2)本杀菌消毒液的制造例

在这些制造例中制成的各幽门螺杆菌杀菌液中分别添加10％量、20％量、30％量和50％量的人工胃粘液，接种幽门菌，概算测定其死亡时间，在第8表中记载。

第8表添加人工胃粘液时的死亡时间

由第8表可知，任意的幽门螺杆菌杀菌液以人工胃粘液10％量添加、接触30秒～1分钟就能使幽门菌死亡，以20％量接触1～2分钟就能使幽门菌死亡，以30％量接触1.5～3分钟就能使幽门菌死亡，以50％量接触3～5分钟就能使幽门菌死亡。

例如，在胃内投与(服用)100ml时，在5分钟胃内滞留期间，胃粘液的混合即使多估计，也推测是20％左右，因此，显示幽门菌在2分钟以内死亡的可能性。

接着，以水稀释幽门螺杆菌杀菌液，在该液体中添加20％量的人工胃粘液，调查幽门菌在5分钟以内死亡的浓度。本幽门螺杆菌杀菌液可以说实质上近于无害无毒，如果变稀时使用也是有效的，则其使用更加容易就是不言自明的。在第9表中表示结果。

第9表稀释幽门螺杆菌杀菌液时的幽门菌杀伤能力

————(含有20％人工胃粘液)

(与制造例无关，含有的表面活性剂全为10ppm)

+生长发育 -不生长发育

任意的幽门螺杆菌杀菌液即使稀释3～4倍(含有20％量人工胃粘膜)，也在5分钟以内显示了幽门菌杀菌能力。

此外，在幽门螺杆菌杀菌液成分中，关于最被担心的表面活性剂最小需要限度进行了各种试验，结果可知，对作为主要成分的氨基酸、维生素、矿物质的浓度几乎没有影响，以5～10ppm的浓度显示对幽门菌充分的杀菌效果。

这比我们在每日早晚刷牙、漱口1～2次后，在口内残留的表面活性剂的浓度还稀，没有任何问题。(顺便提及，在一般牙膏中，作为清洗剂兼发泡剂的十二烷基硫酸钠等表面活性剂含有5％量左右，大致为50000ppm)。

以上述试验为开始，深入实施了各种测试，结果查明，主要成分的浓度在三价的铁离子的情况下含有30～100ppm、在二价的铁离子的情况下含有50～250ppm、在锌离子的情况下含有5～10ppm、在铜离子的情况下含有10～25ppm、在钴离子的情况下含有50～180ppm、在镍离子的情况下含有40～85ppm、在银离子的情况下含有0.5～1ppm，此外，含有25～250ppm浓度的L-半胱氨酸、20～100ppm浓度的L-抗坏血酸、5～10ppm的除非离子型表面活性剂以外的表面活性剂，还含有山梨酸、山梨酸盐、苯甲酸、苯甲酸盐和对羟基苯甲酸酯时，以10～20ppm就能够对幽门菌发挥充分的杀菌能力。

在本说明书中，将基于以上见解制造的杀菌液称为“ピロリ·コロリ”(注册商标)液，在以下第10表中表示制造例(每1L)。

第10表ピロリ·コロリ液的制造例

^*溶液[Ⅰ]：在200ml精制水中溶解0.32g FeCl₃·6H₂O

溶液[Ⅱ]：在800ml精制水中溶解0.2g L-半胱氨酸、0.02g L-抗坏血酸、0.01g十二烷基硫酸钠。

接着，使溶液[Ⅰ]和溶液[Ⅱ]混合，添加1ml的3当量盐酸(pH3.0)。B～E也使用同样的制造方法。

[2]从内部的驱除、除菌

沿袭了现在被广泛实行的作为幽门菌除菌方法的抗生素与胃酸分泌抑制剂的组合。

2次/日(早晨、晚饭后)连续7日内服适用于健康保险的青霉素类的阿莫西林(AMPC)和大环内酯类的克拉霉素(CAM)的2剂与胃酸分泌抑制剂的质子泵抑制剂(PPI)的兰索拉唑或奥美拉唑的3剂，其成功率据称为80％，但如果根据另一说法，耐药幽门菌的出现也占有50％，因此，分离采取胃粘膜生长的幽门菌进行感受性测试，希望根据该结果投与抗生素，但基本上可以采用以往的3剂内服的除菌方法。

以下，记载了上述“ピロリ·コロリ液”的制造例中的实施例、“3剂”中的实施例以及并用两者时的实施例。

<实施例1>只投与“ピロリ·コロリ液”

在尿素呼气试验(尿素：¹³Cコ一ビツト片，大塚制药，二氧化碳碳同位素比分析装置，POC one大塚电子株式会社)中，10名幽门菌感染者禁食食8小时后，1次/日只投与100ml的“ピロリ·コロリ液”，投与后，将身体的左侧向下横卧5分钟，采用了狙击以胃幽门前庭部为主作为生息部位的幽门菌而杀菌的方法(连续投与7日)。

治疗试验成绩以投与刚结束后和1个月的尿素呼气试验进行判断。在第11(1)表中表示结果。

由第11(1)表中表示的成绩可知，在只投与“ピロリ·コロリ液”的情况下，10人内除菌成功者是2人(20％)，6人可以确认相当的效果，但遗憾的是达不到完全除菌，其余2人效果低。

在考察中，2名除菌成功者投与前的检查值¹³C变化量是8.5％和7.5％，数值低，推测幽门菌的感染量少或其活动低。另外，在所有治疗试验者中看不到任何副作用。

因此，接下来，对¹³C变化量为10％以下的10名感染者实施同样的只以“ピロリ·コロリ液”的治疗试验时，8人(80％)完全除菌成功。在第11(2)表中表示该成绩。

可以说上述感染者的幽门菌的活性弱，除菌成功率达到80％，显示与公开发表的“3剂”内服向匹敌或在其之上的成绩。另外，在所有治疗试验者中看不到任何副作用。

第11表(1)使用“ピロリ·コロリ液”时的治疗试验成绩

数值：¹³C变化量％基准值2.5％以下

第11表(2)使用“ピロリ·コロリ液”时的治疗试验成绩

其中，第11表(1)、(2)中的评价基准表示如下。

判定◎：推测为完全死亡

○：具有相当的效果，但没有达到完全死亡，幽门菌慢慢复活

△：有效，但没有达到充分死亡，幽门菌再次变得旺盛

×：几乎看不到效果

<比较例>“以往的3剂内服”

按照手册，对10名幽门菌感染者投与现有的“3剂”。

具体而言，让感染者每日早晨、晚饭后2次服用3个250mg阿莫西林胶囊、1片200mg克拉霉素、1个30mg兰索拉唑胶囊。在第12表中表示该治疗试验成绩。

第12表只投与“3剂”时的治疗试验成绩

由上表可知，除菌成功率是60％。另外，可以看到效果，但达不到完全除菌的是30％，无效是10％(认为是抗生素耐性幽门菌感染)。

对于基本上随机选择的感染者的治疗试验成绩，得到比只投与“ピロリ·コロリ液”的更好成绩，但是当为耐性菌时，当然完全没有效果。

<实施例2>

10名幽门菌感染者禁食8小时以上，1次/日投与100ml的“ピロリ·コロリ液”，也按照通常方法投与了现有的“3剂”。另外，在比较例中除菌不成功的4人也参加了该治疗试验。在第13表中表示结果。

第13表由“ピロリ·コロリ液”和“3剂”并用产生的治疗试验成绩

^*以“3剂”除菌不成功的人

由上表可知，除菌率是100％。

特别是认为感染耐药株的E.T氏也成功除菌。推测“ピロリ·コロリ液”使菌衰弱，从活动型变为休眠型，使本来接近于无效的抗生素也有效地作用。

除了上述10人以外，参加本治疗试验的人达到50人，但最终除菌不成功的人仅仅是2人，实质成功率达到96％。另外，在所有治疗试验者中看不到任何副作用。

<实施例3>

接着，并用制造例1的“ピロリ·コロリ液”和“3剂”时，观察其投与日数和除菌率的关系。在第14表中表示其结果。

第14表因投与日数而异的除菌率

由上表可知，连续投与4日至5日显示100％的除菌率。另外，在所有治疗试验者中看不到任何副作用。

<实施例4>

再进行对于制造例1的“ピロリ·コロリ液”浓度与投与量和投与日数的相关关系的调查。将投与量设定为25ml、50ml、75ml和100ml，以100ml时的浓度为1(与在实施例1～3中投与的浓度相同)时，设定了25ml(浓度1、2、3、4)、50ml(浓度1、1.5、2)、75ml(浓度1、1.3)。与“3剂”并用，在以下第15表中记载除菌成功率的概略情况。

第15表“ピロリ·コロリ液”的投与量和浓度的相关关系

由上表可知，判明“ピロリ·コロリ液”的投与量优选为75ml以上，希望为100ml以上，即使减少液量而提高其浓度，在体内也不能得到充分的效果。

作为其理由，认为是为了使“ピロリ·コロリ液”遍布以作为幽门菌主要生息场所部分的胃幽门前庭部分为中心的全部胃内腔，100ml左右是必须的。另外，在所有治疗试验者中看不到任何副作用。

另外，在“ピロリ·コロリ液”中，以香料和香精附加香气和味道而容易饮用，当然是可以随意进行的。

以上介绍了一部分实施例，最后进行毒性测试。

在制造例1中制作的本发明的幽门螺杆菌杀菌液的毒性对小鼠的LD50为口服投与1ml＞、腹腔投与4ml，另外，对动物细胞的损伤性(细胞增殖抑制度)因供试细胞(猴肾CV-1细胞和人淋巴细胞)而有若干差异，但即使稀释10倍，也有约半数细胞不受损伤地增殖。这样，以1000～10000倍稀释可以认为完全无损伤。

另外，在其它制造例中制作的本发明的ピロリ·コロリ液的毒性更低，被证明是安全性极高的幽门螺杆菌的驱除剂。

产业上的可利用性

几十年前，将结核称为国民病的国家的预防和治疗等的结核对策发挥功效而使结核迅速减少，可以暂时称之为过去的传染病，通过本剂的使用，幽门菌感染症也可能与结核的情况是相同的轨迹。

另外，本剂的使用方法使得在感染症的病原菌扑灭中须从外部的攻击(药剂、乳酸菌等的益生菌)和从内部的攻击(抗生素、疫苗等)两方面进行处理是非常必要的道理更广泛地被知晓，因此可能成为今后的感染症对策、特别是陷入慢性时的治疗方法的方针。

在上述中叙述了本说明书所包含的本发明的许多优点，但应理解为该公开在许多方面只不过是例示。如果不脱离本发明的范围，在细节方面，特别是关于部件的形状、大小和配置等事项能够进行各种变更。

毋庸置疑，本发明的范围由附属的权利要求的范围所述的文字限定。

Claims

1.一种幽门螺杆菌驱除剂，其特征在于：

以具有抗菌作用的金属离子和L-半胱氨酸及L-抗坏血酸为主要成分，在该主要成分中含有除非离子型表面活性剂以外的表面活性剂，

所述具有抗菌作用的金属离子是三价的铁离子Fe³⁺、二价的铁离子Fe²⁺、锌离子Zn²⁺、铜离子Cu²⁺、钴离子Co²⁺、镍离子Ni²⁺或银离子Ag⁺，

所述除非离子型表面活性剂以外的表面活性剂是选自烷基苯磺酸盐、聚氧乙烯烷基醚硫酸盐、高级醇硫酸酯盐、月桂酰肌氨酸钠、十八烷基二甲基苄基氯化铵、苯扎氯铵、苄索氯铵、烷基二氨乙基甘氨酸盐酸盐和烷基聚氨乙基甘氨酸盐酸盐中的一种以上。

2.如权利要求1所述的幽门螺杆菌驱除剂，其特征在于：

所述除非离子型表面活性剂以外的表面活性剂是选自直链烷基苯磺酸盐、十二烷基硫酸钠中的一种以上。

3.如权利要求1所述的幽门螺杆菌驱除剂，其特征在于：

具有抗菌作用的金属离子的浓度在三价的铁离子的情况下为30～100ppm、在二价的铁离子的情况下为50～250ppm、在锌离子的情况下为5～10ppm、在铜离子的情况下为10～25ppm、在钴离子的情况下为50～180ppm、在镍离子的情况下为40～85ppm、在银离子的情况下为0.5～1ppm。

4.如权利要求1所述的幽门螺杆菌驱除剂，其特征在于：L-半胱氨酸的浓度为25～250ppm，L-抗坏血酸的浓度为20～100ppm。

5.如权利要求1所述的幽门螺杆菌驱除剂，其特征在于：除非离子型表面活性剂以外的表面活性剂的浓度为5～10ppm。

6.如权利要求1所述的幽门螺杆菌驱除剂，其特征在于：还含有选自山梨酸、山梨酸盐、苯甲酸、苯甲酸盐和对羟基苯甲酸酯中的一种以上。

7.如权利要求6所述的幽门螺杆菌驱除剂，其特征在于：

8.如权利要求1所述的幽门螺杆菌驱除剂，其特征在于：

pH调整为2.5～4.0。

9.如权利要求6所述的幽门螺杆菌驱除剂，其特征在于：

pH调整为2.5～4.0。

10.如权利要求1、6、8或9中任一项所述的幽门螺杆菌驱除剂，其特征在于：

包含抗生素。

11.如权利要求10所述的幽门螺杆菌驱除剂，其特征在于：

抗生素选自阿莫西林和克拉霉素中的一种以上。

12.如权利要求1、6、8或9中任一项所述的幽门螺杆菌驱除剂，其特征在于：

包含质子泵抑制剂。