ES2655876T3 - Extracto de Trigonella foenum-graecum - Google Patents

Extracto de Trigonella foenum-graecum Download PDF

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Abstract

Un proceso para obtener un extracto, que comprende las etapas de a. preparar una mezcla de semillas obtenidas de Trigonella foenum-graecum y agua, b. incubar dicha mezcla durante al menos 3 horas a una temperatura entre 10 y 45 °C, c. hervir dicha mezcla durante 10 a 45 minutos para liberar el embrión de las semillas, y d. recuperar el extracto líquido de la mezcla.

Description

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plantar (verruca, verruca pedis) causada por HPV 1, la verruga mosaico, y la verruga genital (verruga venérea, condyloma acuminatum, verruca acuminata).
Aparte de que las verrugas pueden ser dolorosas, también pueden ser un problema cosmético y no existe un tratamiento efectivo para las verrugas, las cuales frecuentemente reaparecen a los pocos meses o años después que se ha terminado el tratamiento disponible.
En una modalidad preferida de acuerdo con la invención, el extracto o la composición que comprende dicho extracto se usa para el tratamiento de verrugas tales como verrugas localizadas en los dedos, el pie, la cara, tal como en los labios
o cerca de los párpados, o en las áreas genitales.
Infección en los ojos y en el área alrededor de los ojos
Una modalidad de acuerdo con la invención se refiere al uso del extracto o de una composición que comprende dicho extracto para los tratamientos de las infecciones en los ojos y/o en los anexos de los ojos, como los párpados. La afección puede involucrar inflamación, infección bacteriana, infección viral o sus combinaciones.
Inflamación
La inflamación es una reacción de defensa causada por el daño al tejido debido a lesión mecánica, bacteriana, viral o de otro organismo infeccioso. La respuesta inflamatoria involucra tres etapas principales: primera, dilatación de los capilares para aumentar el flujo sanguíneo; segunda, cambios estructurales microvasculares y escape de las proteínas del plasma desde el torrente circulatorio; y tercera, transmigración de leucocitos a través del endotelio y acumulación en el sitio de la lesión y la infección. La respuesta inflamatoria comienza con la liberación de los mediadores de la inflamación. Los mediadores de la inflamación son moléculas solubles, difusibles, que actúan localmente en el sitio del daño tisular y la infección, y en sitios más distantes que influyen en los eventos consecuentes de la respuesta inflamatoria. Los mediadores de la inflamación pueden ser exógenos, por ejemplo, productos bacterianos o toxinas, o endógenos, los cuales se producen dentro del mismo sistema inmune, así como también células de los tejidos lesionados, linfocitos, mastocitos y proteínas de la sangre. Las afecciones inflamatorias se asocian con una variedad de tejidos. Ejemplos de afecciones inflamatorias son el asma, la dermatitis, tal como la dermatitis por pañales, el acné, afecciones inflamatorias en el tracto gastrointestinal como la enfermedad de Crohn, la enfermedad inflamatoria del intestino (tal como la colitis ulcerativa).
En una modalidad de acuerdo con la presente invención, se usa una composición que comprende extracto de fenogreco, como se describe en la presente descripción, para el tratamiento de una afección que comprende inflamación tal como asma, dermatitis tal como dermatitis por pañales, acné, afecciones inflamatorias en el tracto gastrointestinal tal como la enfermedad de Crohn, enfermedad inflamatoria del intestino (tal como la colitis ulcerativa).
En una modalidad preferida de acuerdo con la invención, el extracto o una composición que comprende dicho extracto, se usa para el tratamiento del acné (acne vulgaris), que es una afección inflamatoria común de la piel, a menudo asociada a infección bacteriana.
En otra modalidad preferida de acuerdo con la invención, el extracto o una composición que comprende dicho extracto, se usa para el tratamiento del acné (acne vulgaris) que comprende infección bacteriana. En otra modalidad preferida de acuerdo con la invención, el extracto o una composición que comprende dicho extracto, se usa para el tratamiento de la dermatitis tal como la dermatitis por pañales (pañalitis).
Heridas
El término "herida" se refiere a una lesión de la piel o mucosa (tal como la mucosa oral, la mucosa gástrica y la mucosa intestinal). La herida puede resultar de una infección, lastimadura o cirugía. La herida, de acuerdo con la invención, también incluye las heridas crónicas y las úlceras.
Una modalidad preferida de acuerdo con la invención se refiere al uso de una composición que comprende el extracto de material vegetal, tal como el extracto de fenogreco, como se describe en la presente descripción, para el tratamiento
o la prevención de la infección en una herida tal como la herida quirúrgica, la herida por incisión, la herida por penetración, la herida por pinchazo, la herida por abrasión, una herida crónica o una úlcera.
También puede haber heridas como resultado de mordeduras. Las mordeduras de humanos y de mamíferos (principalmente de perros y gatos, pero también de ardilla, gerbil, conejo, conejillo de Indias y mono) son comunes y ocasionalmente causan morbilidad e incapacidad significativas. Las manos, las extremidades y la cara son las partes más frecuentemente afectadas, aunque las mordidas humanas ocasionalmente pueden involucrar los pechos y los genitales. Además del trauma tisular, la preocupación mayor es la infección a partir de la flora bucal del organismo que muerde.
En una modalidad de acuerdo con la invención, se usa una composición que comprende el extracto de fenogreco, como
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etoxilatos de polipropilen glicol (Pluronic); alquilolamidas de ácidos grasos (polietilen glicoles de amidas de ácidos grasos); alquil poliglicósidos, N-alquil-, N-alcoxipolihidroxi amida de ácido graso, en particular N-metil-glucamida de ácido graso, ésteres de sacarosa; ésteres de sorbitol, éteres de poliglicol y lecitina. Los surfactantes iónicos incluyen, por ejemplo, lauril sulfato de sodio, laurato de sodio, polioxietilen-20-cetiléter, Laureth-9, dodecilsulfato de sodio (SDS) y dioctil sulfosuccinato de sodio.
Los alcoholes incluyen, pero no están limitados a, etanol, 2-propanol y polioles tales como polietilen glicol (PEG), propilenglicol, glicerol, propanodiol.
Los métodos para realzar el suministro de fármaco a través de la administración tópica pueden aplicarse con la presente invención, e incluyen cualquier medio para aumentar la absorción, minimizar el metabolismo, y/o prolongar la vida media del ingrediente activo del medicamento, tal como el extracto de Trigonella foenum-graecum. Tales medios incluyen el uso de transportadores del tipo liposomas, ISCOM, nano-partículas, microesferas, hidrogeles, organogeles, polímeros u otras técnicas de micro-encapsulación.
El medicamento para el suministro tópico de acuerdo con la presente invención puede comprender de 5 a 100 % en peso del extracto de Trigonella foenum-graecum, preferiblemente de 50 a 100 % en peso por peso de dicho extracto.
Formas de administración oral
Otra modalidad preferida de la presente invención es proporcionar un medicamento formulado para administración oral, tal como un enjuague bucal.
En una modalidad preferida, el medicamento se formula como un enjuague bucal mediante la dilatación del extracto de acuerdo con la invención en un líquido.
El líquido puede ser cualquier líquido útil, sin embargo, frecuentemente se prefiere que el líquido se un líquido acuoso. Además, se prefiere que el líquido sea estéril. La esterilidad se puede alcanzar por cualquier método convencional, por ejemplo, por filtración, irradiación o calentamiento.
Dentro del alcance de la presente invención está proporcionar un medicamento, y los usos del mismo, que comprende un extracto de material vegetal, preferiblemente extracto de Trigonella foenum-graecum para el tratamiento de las afecciones clínicas descritas anteriormente, que involucran infección o un aumento del riesgo de adquirir una infección. Por ejemplo, pero sin que se limiten, están las afecciones clínicas que involucran infección o el riesgo de infectarse por una especie microbiana. En una modalidad, el extracto de Trigonella foenum-graecum se coadministra con al menos un segundo ingrediente activo. Preferentemente, el extracto de Trigonella foenum-graecum y dicho al menos segundo ingrediente activo, están presentes en el mismo medicamento, o ellos se pueden suministrar en partes de un estuche. Preferentemente, dicho segundo ingrediente activo es una sustancia antimicrobiana, por ejemplo, un agente antiséptico, antibiótico, antifúngico, antiparasitario o antiviral.
En una modalidad de acuerdo con la presente invención, el extracto de Trigonella foenum-graecum es un constituyente en una pasta dental.
Administración del medicamento que comprende el extracto de Trigonella foenum-graecum
El medicamento para administración oral que comprende el extracto de Trigonella foenum-graecum puede diluirse en un líquido tal como agua. Dicho medicamento puede comprender 5 a 100 % en vol/vol del extracto y líquido.
De acuerdo con la presente invención, "una dosis farmacéutica efectiva" de la composición (tal como el extracto de acuerdo con la invención) se refiere a la cantidad necesaria para inducir el efecto biológico que se desea en el sujeto necesitado de tratamiento.
El medicamento de acuerdo con la presente invención se puede administrar una o más veces al día, por ejemplo, ellos pueden administrarse en el intervalo de 2 a 10 veces al día, tal como 2 a 7 veces, por ejemplo, 2 a 5 veces, tal como 2 a 4 veces, tal como 2 a 3 veces al día.
El medicamento de acuerdo con la presente invención puede administrarse al sujeto por un período de tratamiento de una o más semanas, tal como dos semanas, tres semanas, cuatro semanas, cinco semanas, seis semanas, siete semanas, ocho semanas o más de ocho semanas. El tratamiento puede repetirse a los sujetos que sufren recaída.
Antisépticos y desinfectantes que comprenden el extracto de Trigonella foenum-graecum
Un aspecto de la presente invención se refiere al uso del extracto o de una composición que comprende dicho extracto como antiséptico o desinfectante.
En consecuencia, en una modalidad de acuerdo con la invención, el extracto de Trigonella foenum-graecum se formula
como un antiséptico/desinfectante para su aplicación a tejido vivo o a piel viva, tal como una herida quirúrgica, para minimizar el riesgo de infección.
En una modalidad, el extracto de Trigonella foenum-graecum está comprendido en un producto jabonoso.
5 En una modalidad más preferida, el extracto de Trigonella foenum-graecum de acuerdo con la invención se usa para la preparación de un producto antiséptico o desinfectante. De acuerdo con la invención, dichos productos se usan para la desinfección de objetos no vivientes, tales como utensilios de cocina, refrigeradores, congeladores, instalaciones de cocina, pisos, instalaciones de establos o mataderos.
10 En otra modalidad preferida, el extracto de Trigonella foenum-graecum, o una composición que comprende dicho extracto, se usa para la limpieza de manchas de orina en elementos de concreto o en pisos de concreto.
En una modalidad, el extracto de Trigonella foenum-graecum o composiciones que comprenden dicho extracto, se usan 15 como desinfectante para el agua de beber.
Aún en otra modalidad, el extracto de Trigonella foenum-graecum o composiciones que comprenden dicho extracto, se usan para la desinfección de tanques de agua infectados con Legionella. En una modalidad el agua es la de una piscina de natación.
20 Preservación de productos alimenticios
El extracto de acuerdo con la invención también puede usarse como preservante para productos alimenticios tales como carne, tal como carne molida y carne de aves. En una modalidad, el extracto se mezcla con la carne molida antes del 25 almacenamiento.
Ejemplos
Ejemplo 1 30
Preparación del extracto de semillas
500 g de semillas de Trigonella foenum-graecum se remojaron en 2 L de agua durante aproximadamente 24 horas. A continuación del pre-remojado, se cocinaron las semillas durante 30 minutos y los remanentes de las semillas se 35 eliminaron de la mezcla. Se enfrió el extracto.
Ejemplo 2
Tratamiento de verrugas y herpes labiales
40 El extracto de acuerdo con el ejemplo 1 se usó en el tratamiento de verrugas y herpes labiales (Herpes labialis). El extracto se aplicó al área de la afección en dos pacientes femeninas (de 18 y 44 años). Las afecciones desaparecieron en unas pocas horas. El extracto se probó en un hombre (44 años) y en una mujer (48 años) que sufrían verrugas localizadas en el pie. Las verrugas se hirieron mediante el uso de una aguja y se administró el extracto tópicamente en
45 el área de la afección. En ambos casos, los pacientes sintieron alivio de las incomodidades asociadas al cabo de unas pocas horas después de la administración.
Ejemplo 3
50 Tratamiento de la periodontitis crónica
Mujer de 70 años. La periodontitis crónica y halitosis asociada y encías sangrantes se diagnosticaron a la edad de 65 años. Aparte de la limpieza de los dientes, la paciente no estaba sometida a ningún tratamiento dental. La paciente se trató con los extractos de acuerdo con la presente invención, que se administraron como enjuague bucal. Después de
55 dos días de tratamiento, la halitosis desapareció y después de dos meses de tratamiento desaparecieron la inflamación y el sangrado de las encías.
Ejemplo 4
60 Tratamiento de la periodontitis
Hombre de 54 años. Un dentista diagnosticó periodontitis asociada a halitosis. El paciente se trató con el extracto de acuerdo con la invención, que se administró como un enjuague bucal. Después de unos pocos días de tratamiento, la halitosis desapareció. Un dentista confirmó la desaparición de la periodontitis y la cicatrización de las encías unos pocos
65 meses después. No se requirió más tratamiento.
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Ejemplo 5
Herida en una pierna
Hombre de 54 años. Se trató una herida infectada en la parte posterior de la pierna, debida a una esquirla de madera de creosota compactada, con el extracto de acuerdo con la invención, mediante administración tópica al área infectada. La infección desapareció en un día.
Ejemplo 6
Herida por la mordedura de un perro
Se trató un hombre de 44 años que sufrió una herida por la mordedura de un perro. Después de la mordedura, la herida estaba cicatrizando, pero la inflamación apareció después de unos pocos días. Se eliminó la materia infectada de la herida y se administró el extracto de acuerdo con la invención sobre la herida. Inmediatamente desapareció el dolor asociado con la infección de la herida y la herida cicatrizó adecuadamente en unos pocos días.
Ejemplo 7
Heridas en animales
Se trataron heridas en un gato y en un perro con el extracto de acuerdo con la invención. El perro se trató dos veces al día durante dos días, mediante administración tópica al área infectada (200 mm de diámetro). La herida cicatrizó adecuadamente. El gato sufría de una herida severamente infectada (aproximadamente 300 mm de diámetro). La herida se trató por administración tópica dos veces al día durante 3 días. La herida cicatrizó completamente en dos a tres días.
Ejemplo 8
Tratamiento de heridas menores y picazón
Se trató un hombre de 44 años que sufría frecuentes heridas menores y picazón en el área del ano, con el extracto de acuerdo con la invención. La administración tópica del extracto al área de la afección alivió al paciente de la picazón en unos pocos minutos y las heridas cicatrizaron en aproximadamente 12 horas. No se necesitó más tratamiento para las heridas. La administración tópica de un linimento de cordison fue menos eficiente.
Ejemplo 9
Tratamiento de la faringitis
Mujer de 18 años que sufre faringitis. El tratamiento de las afecciones fue con enjuagues de la cavidad bucal y de la garganta, mediante el uso del extracto de acuerdo con la invención. Ella reportó alivio inmediato de la incomodidad asociada con la afección.
Ejemplo 10
Llaga en cerdo
A un cerdo con una llaga de un área aproximada de 100 cm2 se le roció una mezcla de agua con el extracto de acuerdo con el ejemplo 1, en proporción 1:1.24 horas después del tratamiento se había formado una película sobre la llaga. No hubo ni exudado ni infección. Después de repetir el tratamiento una vez al día durante 4 días, la llaga cicatrizó.
Ejemplo 10
Eliminación del mal olor
Se usó exitosamente el extracto de acuerdo con el ejemplo 1 para eliminar el mal olor. Se remojaron zapatos de neopreno y las suelas internas en una dilución (en agua) del extracto de acuerdo con la invención, y se secaron. Se aplicó un extracto concentrado a los zapatos y las suelas. Después del tratamiento no hubo indicios de mal olor.
Se lavaron manchas de orina (orina de perro) sobre concreto con cloro y con un agente limpiador universal doméstico sin que se eliminara exitosamente el mal olor. Al lavar las manchas con una dilución del extracto, el mal olor se eliminó completamente. El extracto también se usó exitosamente como desodorante, efectivo durante más de 24 horas.
Ejemplo 11
Preservación de la carne molida.
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Pico núm.
RT (min) Referencia (Ej.13) Invención (Ej.1)
10
39.2 3.904 6.371
11
41.1 7.358 8.189
12
41.4 6.885 6.638
13
56.2 314.319 250.972
14
62.7 5.927 5.615
15
65.1 27.663 23.852
Ejemplo 14
500 g de semillas de Trigonella foenum-graecum se remojaron en 2.5 L de agua durante aproximadamente 24 horas. A 5 continuación del pre-remojado, se cocinaron las semillas durante 20 minutos y los remanentes de las semillas se eliminaron de la mezcla. Se enfrió el extracto.
El extracto acuoso se filtró primero a través de un filtro de celulosa (0.45 µm) y después a través de una resina de poliamida (DPA-6S de Sigma-Aldrich/Supelco) para eliminar, por ejemplo, los polifenólicos. Esto reduce el contenido de 10 materia seca desde aproximadamente 14.5 mg/ml hasta aproximadamente 8.5 mg/ml.
Los componentes remanentes en el extracto se separaron en seis fracciones mediante el uso de cromatografía de fase reversa en un Lichroprep RP-18 (40-63 µm) (Merck) tamaño B. Se inyectó un ml del extracto de planta enriquecido en la columna, mediante el uso del siguiente gradiente:0-1 min H2O/AcN 98:2, y después, usar un gradiente estable de 1-40 15 min hasta 100 % de AcN. Los componentes eluídos se detectaron mediante el uso de la detección de arreglos de diodo (200-600 nm). La Fig. 1 muestra el cromatograma a 210 nm. Se recogieron seis fracciones en los siguientes intervalos de tiempo (5-10; 10-15; 15-17,5; 17,5-21; 21-24; 24-27 min). Las fracciones acumuladas a partir de tres inyecciones repetidas se llevaron a sequedad mediante el uso de un evaporador de rotación y las seis fracciones se redisolvieron en
0.5 ml de agua Milli Q para dar fracciones enriquecidas aproximadamente cinco veces en concentración.
20 Se analizaron seis fracciones de HPLC de Trigonella foenum-graecum y el extracto base para actividad antiviral hacia el virus del herpes simple (HSV)-2.
Las fracciones se mezclaron con virus (1x105 unidades formadoras de placas en una mezcla 1:1) y se incubó durante 15 25 minutos a temperatura ambiente. Las mezclas se añadieron a cultivos de células Vero en diluciones seriadas 10-veces, y se monitorizó la replicación del virus por el efecto citopático en las células.
Dos días después de la infección, se observó una reducción de 5 veces en la replicación del virus en los cultivos tratados con la mezcla base. No se observaron efectos en las fracciones 3 a 6. En la fracción 2 apareció un efecto 30 menor, mientras que en la fracción 1 la replicación del virus se redujo aproximadamente 100 veces.
Basado en este experimento, se concluye que la Trigonella foenum-graecum tiene actividad antiviral y que ésta se localiza en la fracción HPLC número 1.
35 Ejemplo 15
La fracción número 1 que se produce de acuerdo con el ejemplo 14 se usó para probar la actividad antiviral hacia el HSV-1 (Stain Mclntyre) en células Vero.
40 La fracción se mezcló con virus (1x105 unidades formadoras de placa en mezcla 1:1) y se incubó durante 15 minutos a temperatura ambiente. Las mezclas se añadieron a cultivos de células Vero y se monitoreó la replicación del virus por el efecto citopático en las células. Se realizaron ensayos en blanco en los cuales cualquier fracción o la fracción número 1 se dejaba fuera.
45 Dos días después de la infección, se observó un crecimiento de las células Vero en los frascos que contenían la mezcla del virus con la fracción núm.1. En los ensayos en blanco se observó muerte celular en el frasco que recibió el virus pero no la fracción número 1, mientras que se observó crecimiento celular en el frasco que recibió la fracción número 1 pero no el virus.
50 Basado en estos experimentos, se concluye que el contenido de la fracción número 1 tiene actividad antiviral y que el contenido de la fracción número 1 no es tóxico hacia las células Vero.

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  1. imagen1
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