KR20090129490A

KR20090129490A - 호로파 추출물

Info

Publication number: KR20090129490A
Application number: KR1020097022218A
Authority: KR
Inventors: 젠스 스틴 올슨
Original assignee: 브이-바이오텍 홀딩 에이피에스
Priority date: 2007-04-13
Filing date: 2008-04-14
Publication date: 2009-12-16
Also published as: JP2010527326A; EA200970942A1; WO2008125120A2; LT2155222T; EP2155222B1; EP2155222A2; BRPI0810532A2; PL2155222T3; AU2008238445A1; US20160000845A1; IL201047A0; ES2655876T3; WO2008125120A3; US9107920B2; DK2155222T3; NO2155222T3; AU2008238445B2; EA018425B1; CN101687002B; US10195239B2

Abstract

본 발명은 호로파로부터 얻을 수 있는 추출물에 대한 것이다. 특히, 상기 추출물은 호로파로 부터 얻을 수 있는 식물성 물질과 액체의 혼합물을 준비하는 단계, 상기 혼합물을 적어도 3시간 동안 배양하는 단계, 상기 혼합물을 가열하는 단계, 및 상기 혼합물에서 액상 추출물을 회수하는 단계를 포함하는 프로세스에 의해서 얻어질 수 있다. 상기 추출물은 의약적 조성물, 소독제나 보존제와 같은 다양한 유형의 조성물의 제조에 유용하다. 상기 의약적 조성물은 염증성 질환 또는 감염성 증상을 예방하거나 치료하는데 사용될 수 있다.

Description

호로파 추출물 {Extract of Trigonella foenum-graecum}

본 출원서에 인용된 모든 특허 문헌 및 비 특허 문헌은 그대로 인용되어 통합되었다.

본 발명은 호로파(Trigonella foenum-graecum) 추출물 및 이의 추출물을 포함한 조성물에 대한 것이다. 또한, 본 발명은 상기 추출물의 용도 및 상기 추출물을 사용하는 방법에 대한 것이다. 특히, 본 발명은 상기 추출물을 포함하는 의약적 조성물 및 염증성 및 감염성 증상(conditions)의 치료를 위한 이들의 용도에 대한 것이다. 본 발명의 다른 측면은 소독제 또는 세정 제품의 준비를 위한 또는 그에 대한 상기 호로파 추출물의 용도에 대한 것이다.

호로파(Fenugreek, Trigonella foenum - graecum)

호로파(Fenugreek, Trigonella foenum - graecum)는 통합의학(integrative medicine) 분야에서 새의 발(bird's foot), 그리스 풀씨(Greek hayseed), 트리고넬라(trigonella), 보크쇼른사메(bockshornsame), 메티(Methi), 및 후루바(hu lu ba)라는 명칭으로 널리 알려져 있는 허브이다.

호로파는 허브(잎) 및 종자로 모두 사용된다. 호로파 및 이의 제품들은 전통적으로 완화제(demulcent), 완하제(laxative), 유즙분비 자극제(lactation stimulant)로 사용된다. 호로파는 아유베다 요법(ayurvedic medicine)에서의 일반적인 구성성분이다. 호로파 및 이의 제품들은 탈모증(alopecia), 관절염(arthritis), 암(cancer), 당뇨병(diabets), 위장장애(gastro-intestinal disorders), 고콜레스테롤(high cholesterol), 유도분만(induce childbirth), 감염(infections), 염증(inflammations), 유즙분비의 자극(stimulation of lactation), 임파절염(iymphadenitis), 근육통(muscle pain), 오줌소태(promote urination), 피부 궤양(skin ulcers), 상처치료(wound healing)과 같이 다양한 치료 증상에 제안되어 왔다. 호로파의 추출물은 생체 내에서 항 박테리아성 및 살선충성 활성(nematocidal activity)을 보인다(Zia 등, (2001) Phytotherapy Research 15:538). 상기 작용의 메카니즘은 확실하게 설명되어 있지 않다. 호로파의 대부분의 전통적인 용도는 이의 높은 섬유 함유량에 기인하는 것으로 보인다.

출혈, 타박상(bruising), 헛배부름(flatulence), 설사(diarrhea), 위장장애(gastrointestinal disturbances) 및 저혈당(hypoglycemia)과 같은 부작용이 보고되고 있으나, FDA는 호로파를 '일반적으로 안전하다고 간주된다'고 한다.

통합의학에서 허브를 이용하는 것에 대한 메모리얼 슬로안 캐터링 암센터 사이트(Memorial Sloan-Kettering Cancer Center's site)에서 인용된 문헌에 따르면: 알카로이드(Alkaloids): 트리고넬린(Trigonelline, 배전과정을 통해 니코틴산 생산), 젠티아닌(gentianine), 카르파인(carpaine), 콜린(choline); 단백질 및 아미 노산: 4-하이드록시이소류신(4-Hydroxyisoleucine), 히스티딘(histidine), 리신(lysine), 아르기닌(arginine); 플라보노이드(Flavonoids): 아피제닌(Apigenin), 루네올린(luteolin), 오리엔틴(orientin), 비텍신(vitexin), 케르세틴(quercetin); 사포닌(Saponins): 그래큐닌(Graecunins), 페누그린(fenugrin) B, 페뉴그리킨(fenugreekine), 트리고포에노사이드(trigofoenosides) A-G; 스테로이드성 사피노젠(Steroidal sapinogens): 야모게닌(Yamogenin), 디오스게닌(diosgenin), 스미라게닌(smilagenin), 사르사사포게닌(sarsasapogenin), 티고제닌(tigogenin), 네오티고제닌(neotigogenin), 기토제닌(gitogenin), 네오기토제닌(neogitogenin), 유카제닌(yuccagenin); 식이섬유(Fiber): 검(Gum), 중성 세제불용성 섬유(neutral detergent fiber); 기타: 쿠마린(Coumarin), 지질(lipids), 비타민(vitamins), 미네랄(minerals);과 같은 물질(substances)이 호로파에서 확인된다고 한다.

상기 호로파의 구성성분(constituents)들 중 하나인 사포닌은 중성 세제(mild detergent)이고, 고대 필사본(ancient manuscripts) 및 섬유(textiles)를 부드럽게 세척할 때 적용된다. 연구에 따르면, 침투 특성(permeabilizing properties)이 있는 (세포)막은 상기 막에 의해서 항체가 세포내 단백질에 접근할 수 있기 때문에 세포간 조직 화학(intracellular histochemistry)의 염색 적용에 사용된다.

발명의 요약

본 발명의 하나의 측면은 호로파로부터 얻은 식물성 물질 및 액체의 혼합물을 준비하는 단계, 상기 혼합물을 적어도 3시간 동안 배양하는 단계, 상기 혼합물을 가열하는 단계 및 상기 혼합물로부터 액상 추출물로 회수하는 단계를 포함하는 프로세스에 의해 얻을 수 있는 추출물에 대한 것이다.

상기 추출물은 의약적 조성물, 소독제 또는 보존제와 같은 다양한 유형의 조성물에 포함될 수 있다.

본 발명의 다른 측면은 염증성 질환 또는 감염 증상의 치료 또는 예방에 대한 약제의 준비와 같은 상기 추출물의 용도에 대한 것이다.

발명의 상세한 설명

본 발명은 감염의 치료를 하기 위한 호로파에서 특정한 방법에 의해 얻은 추출물 및 상기 추출물을 포함하는 조성물의 용도에 대한 것이다. 감염은 박테리아성 감염, 기타 미생물적 감염 및 바이러스성 감염을 포함한다. 바람직하게는, 상기 감염은 피부감염, 위장관에서의 감염과 같은 점막 감염, 목구멍 및 구강에서의 감염들이다. 상기 추출물 및 이의 조성물의 치료 대상은 인간 및 포유동물이며, 바람직하게는 인간과 가축이다. 본 발명은 또한 감염과 관련된 또는 감염에 의한 염증성 증상의 치료에 관련되어 있다.

호로파 추출물의 조제 방법

본 발명의 하나의 측면은 트리고넬라 속(genus Trigonella)의 적어도 하나의 식물의 식물성 물질의 추출물의 준비에 대한 것이다. 바람직한 일 실시형태에 있어서, 상기 식물성 물질은 호로파에서 얻어진 것이다.

본 발명에 따른 상기 추출물을 조제하는 방법은

a. 식물성 물질 및 액체(liquid)의 혼합물을 준비하는 단계;

b. 상기 혼합물을 적어도 3 시간 동안 배양하는 단계;

c. 상기 혼합물을 가열하는 단계; 및

d.상기 혼합물로부터 잔여 식물성 물질을 분리하는 등 상기 혼합물에서 액상 추출물을 회수하는 단계;

를 포함한다.

상기 식물성 물질은 식물 전체, 상기 식물의 잎, 종자 또는 뿌리, 또는 상기 식물성 물질의 조합인 것이다. 상기 식물성 물질은 날 것, 냉동제품, 건조제품,또는 이들의 조합인 것이다. 상기 식물성 물질의 바람직한 일 실시형태는 호로파의 종자인 것이며, 가장 바람직하게는 상기 식물의 건조 종자인 것이다.

상기 식물성 물질의 활성 성분(active ingredients)의 추출을 용이하게 하기 위해서, 상기 식물성 물질을 액체, 바람직하게는 물에 담근다. 상기 식물성 물질과 액체의 혼합물을 적어도 3시간 동안, 바람직하게는 적어도 6시간동안, 가장 바람직하게는 적어도 12시간 동안, 이를 테면 적어도 24 시간 동안 배양시킨다. 상기 배양은 일반적으로 0℃ 내지 45℃, 적당하게는 10℃ 내지 40℃에의 온도에서 수행된다.

다음으로, 액체에 담근 상기 식물성 물질을 포함하는 상기 혼합물이 가열되는데, 바람직하게는 단백질이 엉기는 온도를 초과하는 것이 바람직하다. 어떤 측면에서는 상기 혼합물을 끓인다.

본 발명에 따른 상기 혼합물은 식물성 물질 및 액체를 포함한다. 상기 혼합물에서 상기 식물성 물질 및 상기 액체의 중량비는 1:1이며, 또는 바람직하게는 1:2의 비율과 같이 식물성 물질이 덜 포함되거나, 1:3 비율과 같이 식물성 물질이 덜 포함되거나, 1:4 비율과 같이 식물성 물질이 덜 포함되거나, 1:5 비율과 같이 식물성 물질이 덜 포함되거나, 1:6 비율과 같이 식물성 물질이 덜 포함되거나, 1:7 비율과 같이 식물성 물질이 덜 포함되거나, 1:8 비율과 같이 식물성 물질이 덜 포함되거나, 1:9 비율과 같이 식물성 물질이 덜 포함되거나, 1:10 비율과 같이 식물성 물질이 덜 포함되는 것이다. 바람직한 실시형태에서, 상기 식물성 물질과 상기 액체의 중량비는 1:6인 것이다.

상기 혼합물을 가열하는 동안, 상기 식물성 물질에 의해 취해지는 액체 및 증발되는 액체를 보상하기 위해 추가적으로 적어도 한번 액체를 첨가할 수 있다. 상기 액체는 적어도 5분 동안, 가령 10 내지 45분 동안, 더욱 바람직하게는 20 내지 30분 동안, 가령 20분 동안 가열된다. 상기 가열은 상기 종자가 발아하면 종료되는데, 이것은 상기 혼합물의 점도 증가와 관련이 있다.

하나의 실시형태에서, 상기 혼합물은 상기 가열단계 전 또는 후에 적어도 3시간동안, 바람직하게는 6시간 이상, 가령 12시간 동안, 또는 12시간 이상 동결시킨다(바람직하게는 영하 18℃에서). 다음으로, 상기 혼합물을 잔여 식물성 물질을 제거하여 상기 추출물을 회수하기 전에 2번째 가열을 할 수 있다. 상기 동결 단계는 상기 식물성 물질에서 활성 성분이 방출되는 것을 더욱 증진시키는 것으로 예상된다.

종자와 같은 식물성 물질 1/2kg 에서 유래된 상기 최종 농축된 추출물의 부피는 약 2 리터이다.

상기 추출물은 장기간 보관을 위해 냉동시킬 수 있다. 상기 적용에 있어서, 상기 추출물은 물로 희석되거나 또는 그 자체로 사용될 수 있다. 상기 추출물은 용매(solvent)를 제거하여 더 농축시킬 수 있다. 상기 용매는 적절한 방법, 막 여과, 증발, 침전, 추출, 공비 증류, 감압동결건조, 분무 건조 및 이들의 조합과 같은 적절한 방법에 의해서 제거될 수 있다.

상기 이론에 상관없이, 여기에서 서술된 상기 방법은 상기 식물성 물질로부터 하나 이상의 성분을 효과적으로 방출시킬 수 있다. 배경기술 부분에서 기술된 것과 같이, 식물 및 호로파에서 유래된 식물성 물질과 같은 식물성 물질은 다양한 효과를 나타내는 활성 성분을 포함한다.

본 발명의 상기 추출물은 적절한 방법에 의해 정제하여 상기 활성 성분을 분리 할 수 있다. 따라서 상기 추출물은 젤 여과법, HPCL, 추출, 침전 등을 이용하여 분획화 할 수 있다. 현재 유용한 방법에 있어서, HPLC를 사용하여 상기 추출물을 분획화한다. 방법을 상세하게 설명하면, 상기 활성 성분(들)은 역상 크로마토그래피(Merck사, 컬럼사이즈 B, Lichroprep RP-18(40-63㎛)이용)를 수행함으로써 얻어진 추출물 분획(fractions)에 포함된다. 상기 역상 크로마토 그래피는 상기 기준 추출물을 이용하였으며, 기울기는 0 내지 1분에서는 H₂O/AcN 98:2 였으며, 다음으로는 1에서 40분 동안은 100%가 되도록 점진적인 기울기를 사용했으며, 5분 내지 10분 간격으로 상기 분획(fraction)을 수집하였다.

본 발명에 따른 상기 방법에 의해 얻어진 상기 추출물은 특히 여기에서 기술된 성분에 유용하며, 질과 양의 측면에서 상기 식물성 물질에서 상기 추출물로 방출된 상기 활성 성분의 프로필을 반영하는 것으로 여겨지고 있다.

비교하기 위한 목적으로 추출물은 배양단계를 거치지 않고 준비되었다. 본 발명에 따른 상기 추출물 및 비교를 위해 준비된 상기 추출물의 HPLC 분석은 조성면에서 상당한 차이점이 있는 것으로 나타났다. 상기 분석에 대해서는 실시예 13에 기술하였다.

치료의 범위 내에서의 조건

감염

상기 용어 "감염"은 외래 감염성 종에 의한 숙주 생물의 해로운 군체 형성(detrimental colonization)을 의미한다. 감염에 대한 상기 숙주의 반응은 염증이다. 감염성 종은 박테리아, 기생충, 곰팡이 및 바이러스를 포함한다.

본 발명에 따른 하나의 측면은 감염성 증상의 치료를 위해 여기에 서술된 바와 같이 호로파의 추출물과 같은 식물성 물질의 추출물을 포함하는 조성물의 용도에 대한 것이다.

박테리아성 감염

본 명세서에서 "박테리아 감염"에 의한 것이라 함은 박테리아에 의한 정상적인 무균 숙주 조직에의 침범을 의미한다. 본 발명의 박테리아성 감염은 그람 음성 또는 그람 양성 박테리아, 또는 이들의 조합 또는 곰팡이 및 바이러스를 포함한 감염성 활성제(agent)의 침범으로 인한 것이다.

본 발명에 다른 바람직한 실시형태는 박테리아성 감염의 치료에 대해 여기에 기술한 바와 같이 호로파 추출물과 같은 식물성 물질의 추출물을 포함한다. 본 발명에 따른 다른 실시형태에 있어서, 상기 감염은 박테리아성 감염 및 곰팡이나 바이러스와 같은 다른 종에 의한 감염의 조합일 수 있다.

농가진( impetigo )

상기 용어 "농가진(impetigo)"은 여러 가지 다른 감염성 피부 질환을 말한다. 전염성 농가진은 표피성(superficial)이고, 피부내부적, 단일(unilocular)의, 소포 농포(vesiculopustular) 감염이다. 전염성 농가진은 어린 아이들에게 가장 흔한 피부 감염이다. 물집 농가진(Bullous impetigo)은 독성 매개 홍피증(toxin-mediated erythroderma)인데, 넓은 범위의 피부를 손실하게 되는 표피층의 피부 종기(sloughs)이다. 일반적인 농가진은 원래 있던 상처에서 염증이 발생하는 경우 적용되는 용어이다. 농가진은 또한 모낭염(folliculitis)의 형태로 나타낼 수 있는데,이것은 황색포도상 구균(Staphylococcus aureus)에 의해서 발생한 모낭의 농가진으로 간주된다. 고름 궤양증(Ecthyma)은 더 깊은 궤양성 농가진 감염으로 종종 임파선염을 동반한다. 박테리아 유발 농가진의 두 가지 주요한 유형은 연쇄상구균(streptococcal) 및 포도상구균(staphylococcal)에 의한 것이다. 두 가지 모두 일반적으로 일반 환경 및 대부분의 사람의 피부 표면에서 발견된다.

본 발명에 따른 일 실시형태는 호로파 추출물을 포함하는 조성물의 상기 농가진 치료에 대한 용도이다.

본 발명에 따른 일 실시형태에 있어서, 상기 증상(conditions)은 황색포도상 구균(Staphylococcus aureus)과 같은 포도상(Staphylococcal) 및 연쇄상(Streptococcal) 구균 감염에 의한 것이다.

치주 질환( Periodontal diseases )

치주염(periodontitis, 또는 periodontosis, paradentosis, pyorrrhea)은 치은염(gingivitis)이 진전되면서 유래되는 치아 장애(dental disorder)로 치아를 지지하는 뼈(bones)와 인대(ligaments)의 염증 및 감염을 수반한다.

수년간 치료하지 않으면, 치아를 지지하는 뼈를 손실하고 최종적으로는 치아를 손실한다. 상기 증상(conditions)은 하나 이상의 치아와 관련된다.

치은염은 잇몸이 붉어지고 붓고 잇몸에서 쉽게 출혈이 있는 것을 제외하고는 불편함이 아주 적거나 거의 없다. 치은염은 종종 치아의 플라그에 남아 있는 박테리아에 잇몸에 염증을 유발하게 되는 부적절한 구강 위생(oral hygiene)에 의해 일어난다. 치은염은 전문적인 치료나 적절히 집에서 관리하면 원래 상태로 돌아갈 수 있다. 만일 치은염을 치료하지 않으면, 플라그가 확산되어 잇몸라인(gum line) 아래에서 자랄 수 있고 상기 증상(condition)이 치주염으로 발전될 수 있다. 플라그 내 박테리아에서 방출된 독은 상기 잇몸에서 염증성 반응을 일으키고 이것은 만성이 되어 치아를 지지하는 상기 뼈를 망가뜨린다. 잇몸은 감염되는 낭(pockets, 치아와 잇몸 사이의 공간)을 형성함으로써 상기 치아로부터 분리된다. 상기 질환이 진행됨에 따라서 상기 낭은 깊어지고 더 많은 잇몸 조직과 뼈가 파괴된다. 종종 상기 파괴적인 프로세스는 아주 가벼운 증상을 동반할 수 있다. 결국은 치아가 모두 소실되어 제거해야만 하게 될 수도 있다.

만성적인 치주염은 치주염의 가장 빈번하게 발생하는 형태로 인식된다. 만성 치주염은 상기 치아의 지지 조직내의 염증, 점진적인 어태치먼트 및 뼈의 손실을 일으키는데 낭의 형성 및/또는 상기 치은 퇴축(recession of the gums(gingiva))의 특징이 있다. 이것은 성인에게 매우 흔하며 성인의 치아 소실원인 중 주된 것이나 이 질환은 어느 연령대에서든지 발생할 수 있다. 어태치먼트(attachment) 소실의 진행이 일반적으로 천천히 발생하지만 빠른 기간에 걸쳐 진행이 발생될 수 있다.

급진성 치주염(Aggressive periodontitis)은 임상적으로 건강한 환자에게 영향을 미치는 증상이다. 흔한 특징(features)로는 급속한 어태치먼트의 소실 및 뼈의 붕괴 그리고 질병의 유전성(familial aggregation)이 포함된다. 치주염은, 종종 어린 나이에 발병하기도 하는데, 당뇨병이나 골다공증과 같은 여러 조직적인 질환의 하나와 관련이 있다(조직적인 질환의 출현으로서의 치은염). 궤사성 치주질환(Necrotizing periodontal diseases)은 다른 형태의 감염으로 잇몸 조직(gingival tissues), 치주 인대(periodontal ligament) 및 치조골(alveolar)의 괴사가 특징이다. 상기 증상은,이에 한정되는 것은 아니나, HIV 감염, 영양실조 및 면역억제를 포함하는 진단적인 증상과 가장 관련이 있다.

박테리아성 플라그 이외에도 잇몸 건강에 영향을 미치는 요소들은 흡연, 유전, 임신, 사춘기(puberty), 스트레스, 약물(medication), 이악물기(clenching)/이갈이(grinding), 영양 부족, 당뇨병 및 다른 조직적인 질환도 있다.

치은염(Gingtivitis)은 일반적으로 적절히 자가 치료(self care)하면 사라진다. 반면, 치주염은 반복적인 전문 케어가 요구된다. 양호한 구강 위생을 사용하는 사람은 잇몸 라인 아래 2-3mm를 (1/12 인치) 2회 내지 3회만 세정할 수 있다. 치과의사는 스케일링이나 뿌리 이식(root planing)을 이용해서 치주낭을 4 내지 6 mm(1/5 인치) 깊이까지 세정할 수 있는데, 타르타르 및 질병이 있는 뿌리 표면 (diseased root surface)이 완전히 제거된다. 5mm(1/4 인치) 또는 더 깊은 치주낭에 대해서는 수술을 해야 한다. 치과의사 또는 치주과의사(periodontist)는 수술적인 방법(periodontal flap surgery)으로 잇몸 아래에 있는 치아에 접근하여 상기 치아를 철저하게 세정하고 상기 감염으로 인한 뼈의 결함을 고칠 수 있다. 치과 의사 또는 치주과의사는 또한 감염된 부위를 제거하고 잇몸(gingivectomy)을 분리해서 잇몸의 나머지 부분을 상기 치아에 다시 붙일 수 있으며, 이 환자는 집에서 플라그를 제거할 수 있다. 치과 의사는 특히 농양(abscess)이 발생하는 경우 항생제(테트라사이클린 또는 메트로니다졸과 같은)를 처방할 수 있다. 치과의사는 또한 항생제가 혼합된 물질(필라멘트(filaments) 또는 젤(gels))를 잇몸낭 깊숙히 집어넣어서 고농도의 약이 환부까지 도달하도록 할 수 있다. 치은 농양(periodontal abscesses)에 의해서 뼈가 갑작스럽게 붕괴하는데, 그러나 수술 및 항생제를 이용하여 즉각적으로 처치하면 손상된 뼈의 상당부분을 다시 자라게 할 수 있다.

만일 수술 후 상기 입이 따갑다면 칫솔질이나 치실을 사용하지 하는 대신 일시적으로 클로르헥시딘 구강 헹굼제(chlorhexidine mouth rinse)를 1일 2회 1분 동안 사용할 수 있다. 만일 환자가 치아 주변 대부분에 5mm(1/4 인치) 또는 더 깊은 낭을 가지고 있다면, 그들은 수년 동안 대부분의 그들을 치아를 소실할 위험에 처해있는 것이다. 만일 이것이 확인되지 않고 상기 환자가 상기 점진적인 치주 질환에 대해 인식하지 못하고 있다면 수년 후 그들은 대부분의 치아가 갑자기 소실되어 이들 대부분을 뽑아내야 하는 것처럼 보여 놀랄 수 있다.

테트라사이클린(tetracyclines)을 사용하는 치은염(gingivitis), 치주염(급성 또는 만성), 조직적인 질환의 현상으로서의 치주염 및 궤사성 치주 질환의 의약적인 조직적 치료는 치료동안 테트라사이클린 내성 박테리아종이 빠르게 발생하고 칸디다(candida)와 같은 민감하지 않은 병원균의 과성장의 발생과 같은 여러 단점이 있다. 테트라사이클린으로 치주 감염을 단기간 치료하는 것은 종종 효과적이지 않다. 혐기성 박테리아에 대한 항미생물성 조성물로 높은 효과가 있다고 일반적으로 알려진 페니실린은 치주 감염에 주요한 박테리아 생물종(예를 들어, P. 긴기발리스(P. gingivalis))에 대해 비효과적이다.

최근 사용되는 수술적 및 비수술적 치료에 있어서, 상기와 같은 제한과 단점은 이러한 치과적 증상의 효과적인 치료에 대한 필요성을 나타내는 것이다.

본 발명에 따른 일 실시형태는 구강에서 감염의 치료에 대해 상기와 같이 호로파(fenugreek) 추출물과 같은 식물성 물질의 추출물을 포함하는 조성물의 용도에 대한 것이다.

본 발명에 따른 하나의 주로 선호되는 일 실시형태는 상기의 호로파 추출물과 같은 식물성 물질의 추출물을 포함한 조성물의, 치주염, 치은염(급성 및 만성), 조직적인 질환의 발현으로서의 치주염 및 궤사성 치주 질환과 같은 치주 질환의 치료에 대한, 용도와 관련되어 있다.

구취(halitosis)는 입냄새(morning breath)와 같은 아주 흔한 일시적인 증상이다. 만성적인 구취는, 매우 심각하고 지속적인 증상으로서, 주로 잠복기가 긴 특정 종류의 구강 박테리아가 과성장하기 때문에 일어난다. 만성적인 구취는 종종 상기의 치주 질환과 관련이 있다.

본 발명에 따른 일 실시형태에 있어서, 상기의 호로파 추출물과 같은 식물성 물질의 추출물을 포함하는 조성물은 구취의 치료용으로 사용된다. 바람직한 실시형태에서는 상기 구취는 만성적인 구취이다.

인후염( Pharyngitis )

인두염(sore throat)으로 알려진 인후염(pharyngitis)도 삼킬때 또는 그렇지 않을때, 후인두(posterior pharynx)에서 통증이 있는 것이다. 대부분의 원인은 바이러스성 또는 박테리아성(연쇄구균성 인후염) 감염이다.

본 발명에 따른 일 실시형태에 있어서, 상기의 호로파 추출물과 같은 식물성 물질의 추출물은 인후염의 치료에 사용된다. 본 발명의 다른 일 실시형태에 있어서, 상기의 인후염은 연쇄구균성 인후염이다.

바이러스성 감염

바이러스성 감염은 바이러스에 의함 감염을 말한다. 박테리아와는 달리, 바이러스의 복제는 전사 인자(transcription factor) 및 번역 기구(translational machinery)와 같은 이용되는 숙주세포에 좌우된다. 바이러스에 의해 일어나는 대부분의 일반적인 사람의 질환은 일반 감기, 독감(flu), 단순성 포진(cold sores) 및 사마귀(warts)가 있다.

본 발명에 따른 일 실시형태에 있어서, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 상기 호로파 추출물과 같은 식물성 추출물을 포함하는 조성물은 일반 감기, 플루, 단순성 포진 및 사마귀와 같은 바이러스성 감염의 치료에 사용된다.

단순성 포진

단순성 포진(구순 포진(oral herpes, herpes labialis))는 단순포진바이러스(herpes simplex virus 1 (HSV-1)) 감염에 의해 일어나며, 입이나 입술 주위의 피부나 점막에 통증을 수반한 사마귀 수포가 발생한다.

단순성 포진에 유용한 치료로는 아시클로버(aciclovir) 및 발라시클로버(valaciclovir)와 같은 항바이러스성 약제(medications)를 포함하는데, 이것은 증상이 발생하는 기간을 줄이고, 치료를 촉진한다. 상기 증상을 치료하지는 않는다.

본 발명에 따른 일 실시형태에 있어서, 본 명세서에 기재된 바와 같은 상기 호로파 추출물과 같은 식물성 추출물을 포함하는 조성물은 단순성 포진의 치료에 사용된다.

일반 감기

일반 감기(급성 바이러스성 비인두염, actute viral nasopharyngitis)은 상부 호흡기 기관의 가벼운 바이러스성 감염 질환이다. 일반 감기는 사람의 질환 중 가장 흔하며, 전형적으로 상기 증상은 수일 지속되고 그 이후에도 몇 주 동안 기침 증세가 지속된다. 개인간의 상기 바이러스성 전염은 효과적이고, 아이들, 가족 구성원 및 간병인에게 전염될 위험이 높다. 상기 일반 감기의 발병율은 높고 성인들의 경우 1년에 여러 번 걸릴 수 있으며 아이들이 걸리는 비율은 더 높다. 일반 감기에 연관된 바이러스로는 리노바이러스(rhinoviruses), 코로나 바이러스(coronaviruses) 그리고, 또한 특히 에코바이러스(echoviruses), 파라믹소바이러스(paramyxoviruses) 및 콕사키바이러스(coxsackieviruses)가 포함된다. 일반 감기 자체로는 생명을 위협하지는 않지만, 그러나 이것은 면역체계를 약화시키고 더 나아가 폐렴과 같은 합병증이 일어날 수 있다. 현재까지 일반 감기에 대한 치료법은 알려져 있지 않다.

본 발명에 따른 일 실시형태에 있어서, 본 명세서에 기재된 바와 같은 상기 호로파 추출물과 같은 식물성 물질의 추출물을 포함하는 조성물은 일반 감기를 치료하는데 사용된다.

사마귀

사마귀는 인간 파필로마바이러스(human papillomavirus infection, HPV) 감염과 관련된 일반 양성 피부 손상이다. 증상에 따른 사마귀 참조자(referrers)는, 상기 증상, 형태를 일으키는 파필로마바이러스의 종류, 손가락, 발, 입술이나 눈꺼풀과 같은 얼굴, 생식기 부분과 같은 몸에 나타나는 외양에 따라 다르다. 사마귀의 예로는 HPV 1, 2, 4, 27 및 29에 의해서 유발되는 일반적인 사마귀(심상성 사마귀, verruca vulgaris), HPV 3, 10, 28 및 49에 의해서 발생하는 편평 사마귀(flat wart, verruca plana), HPV 1에 의해서 발생하는 손바닥(palmar) 및 발바닥(plantar) 사마귀(verruca, verruca pedis), 모자이크 사마귀(mosaic wart) 및 생식기 사마귀(genital wart, venereal wart, condyloma acuminatum, verruca acuminata)를 포함한다.

통증과는 별개로 사마귀는 또한, 미용적인 문제가 있다. 사마귀의 효과적인 치료법은 없으며, 치료 후 소실되더라도 몇 달 또는 몇 년 후 재발하는 경우가 많다.

본 발명에 따른 바람직한 실시형태에 있어서, 상기 추출물을 포함하는 조성물 또는 상기 추출물은 손가락, 발, 입술이나 눈꺼풀 근처와 같은 얼굴부분 또는 생식기 부위에 있는 사마귀를 치료하는 데 사용할 수 있다.

눈 내 및 눈 주변 부위의 감염

본 발명에 따른 일 실시형태는 눈 및/또는 눈꺼풀과 같은 눈의 부속기(adnexa)의 감염 치료를 위한 상기 추출물을 포함하는 조성물 또는 상기 추출물의 용도에 대한 것이다. 상기 증상은 염증, 박테리아성 감염, 바이러스성 감염 또는 이들의 조합일 수 있다.

염증

염증은 기계적인 부상 또는 박테리아성, 바이러스성 또는 다른 생물 감염으로 인한 조직 손상에 의해서 유발되는 방어 작용이다. 상기 염증성 반응은 첫째, 모세관이 확장하여 혈액의 흐름이 증가함; 둘째, 미세혈관의 조직적인 변화 및 혈류로부터 혈장 단백질이 빠져나감; 셋째, 백혈구의 내피(endothelium)를 통한 이주 및 상처 부분에의 축적 및 감염;과 같은 주요 3 단계를 포함한다. 상기 염증성 반응은 염증성 매개체의 방출로 시작된다. 상기 염증성 매개체는 가용성, 확산성 분자로 염증성 반응의 결과로 생기는 사건에 영향을 미치면서 손상 및 감염된 조직 부위 및 그보다 더 먼 부위에서 국소적으로 작용한다. 염증성 매개체는 박테리아성 산물 또는 독소와 같은 외인성이거나, 손상된 조직 세포, 임파구(lymphocytes), 비만세포 및 혈액 단백질뿐만 아니라 면역 체계 자체내에서 생산되는 내인성일 수 있다. 염증성 증상은 다양한 조직과 관련이 있다. 염증성 증상의 예로는 천식, 기저귀 피부염과 같은 피부염, 여드름, 크론씨 병과 같은 위장관에서의 염증성 증상, 염증성 장질환(궤양성 대장염과 같은)이 있다.

본 발명에 따른 일 실시형태에 있어서, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 상기 호로파 추출물과 같은 식물성 물질의 추출물을 포함하는 조성물은 천식, 기저귀 피부염과 같은 피부염, 여드름, 크론씨 병과 같은 위장관에서의 염증성 증상, 염증성 장질환(궤양성 대장염)을 포함하는 증상의 치료에 사용된다.

본 발명에 따른 바람직한 일 실시형태에 있어서, 상기 추출물 또는 상기의 추출물을 포함한 조성물은 박테리아성 감염과 관련된 피부의 일반적인 염증성 질환인 여드름(acne vulgaris)의 치료에 사용된다.

본 발명에 따른 다른 바람직한 일 실시형태에 있어서, 상기 추출물 또는 상기 추출물을 포함하는 조성물은 박테리아성 감염을 포함하는 여드름(acne vulgaris)의 치료에 사용된다.

본 발명에 따른 다른 바람직한 실시형태에 따르면, 상기 추출물을 포함하는 조성물 또는 상기 추출물은 기저귀 피부염(기저귀 발진)과 같은 피부염의 치료에 사용된다.

상처

용어 '상처(wound)'는 피부나 점막(구강점막, 위 및 장 점막)의 손상을 의미한다. 상기 상처는 감염, 부상 또는 수술의 결과일 수 있다. 본 발명에 따른 상처는 또한 만성적인 상체 및 궤양을 포함한다.

본 발명에 따른 바람직한 일 실시형태에는 본 명세서에 기재된 바와 같이 상기 호로파 추출물과 같은 식물성 물질의 추출물을 포함하는 조성물의, 수술에 의한 상처, 베인 상처(incised wounds), 관통한 상처(penetration wound), 자상(puncture wound), 찰과상(abrasion), 만성적인 상처 또는 궤양에 대한, 용도와 관련이 있다.

상처는 또한 물려서 생길 수 있다. 사람 및 포유동물(대부분은 개 및 고양이, 또한 다람쥐, 게르빌루스 쥐(gerbil), 토끼, 기니아 피그 및 원숭이) 물림은 일반적이고, 때때로 심각하면 사망에 이르거나 불구가 될 수도 있다. 비록 사람들의 물림은 종종 가슴 및 생식기가 포함되기도 하지만, 상기 손, 사지(extremities) 및 얼굴은 가장 빈번하게 영향을 받는다. 조직의 외상(trauma)에 덧붙여, 상기 무는 동물의 구강 세균총(oral flora)는 주요 문제이다.

본 발명에 따른 일 실시형태에 있어서, 본 명세서에 기재된 바와 같은 상기 호로파 추출물과 같은 식물성 추출물을 포함하는 조성물은 사람 또는 포유동물 바람직하게는 개로 인한 물린 상처를 치료하는데 사용된다.

호로파 추출물을 포함하는 조성물

본 발명에 따른 일 실시형태에 있어서, 바람직하게는 호로파 추출물인 식물성 물질의 추출물은 의약적인 조성물의 준비에 사용된다.

본 발명의 추출물의 농도 또는 상기 추출물의 분획은 또한 본 발명의 범위내에 있다. 특히, 필수적으로 모든 용매가 제거되고 상기 추출물이 건조 분말인 농도는 약제(medicament)의 준비에 사용될 수 있다. 상기 추출물의 분획이 다른 것에 비해 높은 영향을 보여주고 있기 때문에, 의약적인 조성물을 생산하기 위한 활성 요소(active components)를 함유하는 상기 분획을 이용하는 발명의 한 측면이 선호된다.

상기 호로파 추출물을 포함하는 상기 의약적 조성물은 특정한 약제의 목적 및 투여의 유형에 따라 여러 가지 다른 방법으로 제제화될 수 있다. 이것은 바람직한 투여의 유형에 따른 조성물을 제제화하는 기술 분야의 당업자의 범위에 있는 것이다.

본 발명에 따른 상기 추출물을 포함하는 상기 약제는 예를 들어, "The Science and Practice of Pharmacy 1995, edited by E. W. Martin, Mack Publishing Company, 19th edition, Easton, Pa."에 기술된 공지의 기술에 의해 제조될 수 있다.

상기 약제는 종래에 사용된 의약적으로 허용되는 첨가제와 같은 의약적으로 허용되는 첨가제를 포함할 수 있는데, 상기 특정한 제제(formulation), 의도하는 투여 경로 등에 따라 선택되어야 한다. 예를 들어, 상기 의약적으로 허용되는 첨가제는 네마(Nema) 등(1997)에서 언급된 첨가제 중 하나인 것이다. 또한, 상기 의약적으로 허용되는 첨가제는 FDA의 "비활성 성분 리스트"로부터의 허용되는 첨가제인 것인데, 이것들은 이의 인터넷 주소(http://www.fda.gov/cder/drug/lig/ default.htm)에서 확인할 수 있다.

국소적인 투여 형태

본 발명의 바람직한 일 실시형태는 상처, 수포, 사마귀, 여드름, 기저귀 발진과 같은 국소의 상피 및 제한적인 부위에 제제화된 의약적인 조성물의 국소적 적용을 제공하는 것이다.

상기에서 언급된 실시형태에 있어서, 상기 약제는 연고, 로션, 크림, 입욕제(bath admixture), 젤, 페이스트(paste), 밀크(milk), 현탁액(suspension), 에어로졸(aerosol), 스프레이(spray), 필름(film), 폼(foam), 세럼(serum), 스왑(swab), 가제(pledget), 패드(pad), 패치(patch), 분말(powder), 페이스트(paste), 바르는 약(liniment), 비스코스 에멀젼(viscous emulsion), 포리지(porridge) 또는 국소적인 투여에 적당한 다른 형태의 제제로 제제화될 수 있다.

국소용 투여를 위한 이러한 조성물은 또한 이러한 유형의 투여에 적당한 캐리어, 계면활성제(surfactants), 보존제(preservatives), 안정제(stabilizing agents), 완충제(buffers), 부형제(excipients) 및 유화제(emulsifiers)와 같은 생리학적으로 허용되는 요소를 포함할 수 있다. 국소적인 전달 시스템을 위한 적절한 요소는 피투약자(recipients)에 대해 바람직하게는 과도하거나 피할 수 없는 염증이나 통증이 나타나지 않도록 하는 요소로부터 선택된 것이다. 캐리어로는 희석제(diluents)가 포함되며, 의약적인 구성성분이 용해, 확산, 분산되는 매체를 제공한다.

본 발명에 따른 상기 약제는, 이에 한정되는 것은 아니나, 수성의 액상 베이스, 비수성 액상 베이스, 수용성 젤, 미네랄 오일 베이스, 에멀젼, 연고, 크림, 젤, 로션, 고형 입자의 액상 중 현탁액과 같은 캐리어인 것이다.

약물(drug)의 상기 국소적인 이용가능성(availability)는 다음의 두 가지 대비되는 요소에 좌우된다. 이들이 캐리어(젤, 크림-친수성)에 용해되는 능력 및 이들이 피부인 장애물(barrier)(즉, 각질층(stratum corneum) - 혐수성)를 침투하는 능력. 따라서, 특유의 혐수성-친수성 균형이 요구된다. 제제화(formulations)는 침투 증진제(permeation enhancers) 및 가용제(solubilizers)와 같은 부형제를 첨가해서 전달 프로세스(transport process)(비히클로의 용해 및 피부를 가로지르는 확산)를 촉진시킬 것이 요구된다. 알콜, 지방성 알콜, 지방산, 모노, 디(di) 또는 트리(tri)-글리세라이드, 글리세롤 모노에테르, 사이클로덱스트린 및 유도체, 폴리머, 생접착제(bioadhesives), 테르펜(terpenes), 킬레이팅제(chelating agents) 및 계면활성제와 같은 첨가제는 약물의 피부투과전달(transdermal delivery)를 증가시키는 것으로 개시되어 있다. 이러한 부형제의 사용은 본 발명의 범위 내인 것이다.

상기에서 언급한 것에 제한되지 않으며, 피부투과전달을 증가시키는 어떠한 방법이든 본 발명의 범위 내인 것이다. 본 발명에 따른 상기 약제는 따라서, 이온성 및/또는 비이온성 계면활성제를 포함한다. 적절한 비이온성 계면활성제로는 예를 들어: 지방성 알콜 에톡실레이트(fatty alcohol ethoxylates)(알킬폴리에틸렌 글리콜(alkylpolyethylene glycols)); 알킬페놀 폴리에틸렌 글리콜(alkylphenol polyethylene glycols); 알킬 메르캅단 폴리에틸렌 글리콜(alkyl mercaptan polyethylene glycols); 지방성 아민 에톡실레이트(fatty amine ethoxylates)(알킬아미노폴리에틸렌 글리콜(alkylaminopolyethylene glycols)); 지방산 에톡실레이트(fatty acid ethoxylates)(아실폴리에틸렌 글리콜(acylpolyethylene glycols)); 폴리프로필렌 글리콜 에톡실레이트(polypropylene glycol ethoxylates)(플루로닉(, Pluronic)); 지방산 알킬올아미드(fatty acid alkylolamides)(지방산 아미드 폴리에틸렌 글리콜(fatty acid amide polyethylene glycols));알킬 폴리글리코사이드(alkyl polyglycosides), N-알킬-(N-alkyl-), N-알콕시폴리하이드록시 지방산 아미드(N-alkoxypolyhydroxy fatty acid amide), 특히, N-메틸 지방산 글루카미드(N- methyl-fatty acid glucamide), 수크로오스 에스테르(sucrose esters); 솔비톨 에스테르(sorbitol esters), 솔비톨 폴리글리콜 에테르의 에스테르(esters of sorbitol polyglycol ethers) 및 레시틴(lecithin)이 포함된다. 이온성 계면활성제로는 예를 들어, 소듐 라우릴 설패이트(sodium lauryl sulfate), 소듐 라우레이트(sodium laurate), 폴리옥시에틸렌-20-세틸레더(polyoxyethylene-20-cetylether), 라우레쓰-9(Laureth-9), 소듐 도데실설페이트(sodium dodecylsulfate (SDS)) 및 다이옥틸 소듐 술포숙시네이트(dioctyl sodium sulfosuccinate)가 포함된다.

알콜은, 이에 한정되는 것은 아니지만, 에탄올, 2-프로판올 및 폴리에틸렌 글리콜(PEG), 프로필렌 글리콜, 글리세롤, 프로판디올과 같은 폴리올이 포함된다.

국소적인 투여를 통해 약물 전달을 증진하는 방법은 본 발명에 적용될 수 있으며, 상기 호로파 추출물과 같은 약제의 흡수 증가, 대사를 최소화함 및/또는 상기 활성 성분(active ingredient)의 반감기를 연장함의 어떤 방법이든 포함된다. 이러한 방법으로는 리포솜 ISCOMs, 나노 입자, 마이크로스피어(microspheres), 하이드로젤(hydrogels), 오가노젤(organogels), 폴리머 또는 다른 미세 캡슐화 기술(micro encapsulation techniques)와 같은 이송자(transporter)의 사용을 포함한다.

본 발명의 국소적인 전달을 위한 약제는 상기 호로파 추출물이 5 내지 100 중량%가 포함될 수 있으며, 바람직하게는 상기 추출물이 50 내지 100 중량% 포함될 수 있다.

경구 투여 형태

본 발명의 바람직한 다른 실시형태에 있어서, 경구 투여 형태는 구강 세정액(mouth wash)와 같은 구강 투여를 위해 제제화된 약제를 제공하는 것이다.

바람직한 일 실시형태에 있어서, 상기 약제는 본 발명의 추출물을 액상으로 희석하여 구강 세정액으로 제제화한 것이다.

상기 액체(liquid)는 임의의 유용한 액상이면 가능한데 바람직하게는 수성 액체인 것이다. 이것은 또한, 무균의 액체인 것이 바람직하다. 무균화(sterility)는 여과, 조사(irradiation) 또는 가열과 같은 공지의 방법을 이용하여 수행할 수 있다.

감염에 대한 증가된 위해성 또는 감염과 관련된 것으로 상술한 임상적인 증상을 치료하는데 대한, 식물성 물질의 추출물, 바람직하게는 호로파의 추출물을 포함하는 조성물, 이의 용도 및 약제의 공급은 본 발명의 범위 내인 것이다. 예를 들어, 이에 한정되는 것은 아니지만, 미생물종에 의한 감염 또는 감염에 대한 위해성을 수반하는 임상적인 증상이 있다. 호로파 추출물의 한 실시형태에 있어서, 하나 이상의 제2 활성 성분이 함께 투여된다. 바람직하게는 호로파 추출물 및 상기 하나 이상의 활성 성분이 동일한 약제에 존재하거나 이들이 키트를 이루어 공급될 수 있다. 바람직하게는 상기 제2 활성 성분은 항미생물 제제(antimicrobial substance), 예를 들어, 방부제(antiseptic agent), 항생제(antibiotic agent), 항균제(antifungal agent), 항기생충제(antiparasitic agent) 또는 항바이러스제(antiviral agent)인 것이다.

본 발명에 따른 일 실시형태에 있어서 상기 식물성 추출물 바람직하게는 호로파 추출물은 치약의 구성성분인 것이다.

호로파 추출물을 포함하는 약제의 투여

식물성 물질의 추출물 바람직하게는 호로파 추출물을 포함하는 상기 구강 투여용 약제는 물과 같은 액체에 희석될 수 있다. 상기 약제는 5 내지 100 부피%의 분량의 상기 추출물 및 액체를 포함한다.

본 발명에 따른 상기 조성물(본 발명에 따른 추출물과 같은)의 "의약적으로 효과적인 투여량(dosage)"은 치료가 필요한 환자에게 바람직한 생물학적 효과를 야기하는데 필요한 양을 말한다.

본 발명에 따른 약제는 하루에 한번 또는 그 이상 투여될 수 있는데, 예를 들어, 하루에 2회 내지 10회의 범위, 즉, 2회 내지 7회, 예를 들어 2회 내지 5회, 즉, 2회 내지 4회, 2회 내지 3회 투여될 수 있다.

본 발명에 따른 약제는 1주 또는 그 이상 즉, 2주, 3주, 4주, 5주, 6주, 7주, 8주 또는 8주 이상의 기간 동안 환자치료를 위해 투여될 수 있다. 상기 치료는 병이 재발하는 환자에게 반복적으로 이루어질 수 있다.

호로파 추출물을 포함하는 방부제/소독제( disinfectant )

본 발명의 일 측면은 상기 추출물 또는 상기 추출물을 포함하는 조성물의 방부제 또는 소독제로서의 용도에 대한 것이다.

본 발명의 일 실시형태에 따라 감염의 위해성을 최소화하기 위해 수술 상처와 같은 생 조직/피부에 적용할 목적으로 호로파 추출물을 방부제/소독제로 제제화한다.

일 실시형태에 있어서, 식물성 물질 추출물 바람직하게는 호로파 추출물은 비누제품에 포함된다.

다른 바람직한 일 실시형태에 있어서, 본 발명에 따른 식물성 물질의 추출물 바람직하게는 호로파 추출물은 항생 또는 소독 제품의 준비를 위해 이용된다. 본 발명에 따라서, 상기 제품은 부엌 기구(kitchen utensils), 냉장고, 냉동고, 부엌 설비(installation), 바닥, 마굿간 또는 도축장(slaughter houses)와 같은 무생물의 세정에 이용된다.

바람직한 일 실시형태에 있어서, 식물성 물질의 추출물, 바람직하게는 호로파 추출물 또는 상기 추출물을 포함하는 조성물은 콘크리트 바닥 또는 콘크리트 구성요소(element)의 요소 얼룩(urine stains)의 세정에 사용된다.

일 실시형태에 있어서, 식물성 추출물, 바람직하게는 호로파 추출물 또는 이러한 추출물을 포함하는 조성물은 음용수용 소독제(disinfectant)로 사용된다.

또 다른 일 실시형태에 있어서, 식물성 물질의 추출물 바람직하게는 호로파 추출물 또는 상기 추출물을 포함하는 조성물은 레지오넬라로 감염된 물탱크의 세정에 사용된다. 다른 일 실시형태에 있어서, 물은 수영장 풀이다.

식품의 보존

본 발명에 따른 상기 추출물은 또한 다진 고기(meat) 및 가금(poultry)와 같은 고기와 같은 식품에 대한 보존제로 사용될 수 있다. 일 실시형태에 있어서, 상기 추출물은 저장 전 다진 고기와 함께 혼합된다.

실시예 1

종자 추출물의 제조

호로파 종자 500g의 추출물을 준비하여 약 24시간 동안 2리터의 물에 담갔다. 다음으로 상기 미리 담가둔 종자를 30분동안 끓이고(cooked) 종자의 잔여물은 상기 혼합물에서 제거하였다. 상기 추출물을 냉각시켰다.

실시예 2.

사마귀 및 구순 포진의 치료

실시예 1에 따른 추출물을 사마귀 및 구순 포진(lip herpes, herpes labialis)의 치료에 사용하였다. 상기 추출물을 두 명의 여성 환자(18세 및 44세) 에게 증상이 있는 부위에 적용하였다. 상기 증상은 몇 시간 후에 사라졌다. 상기 추출물은 발 사마귀가 있는 남성(44세) 및 여성(48세)에게 시험되었다. 상기 사마귀에 바늘로 상처를 내고 상기 추출물을 상기 증상이 있는 부위에 국소적으로 투여하였다. 상기 두 경우에, 상기 환자는 투여 후 몇 시간만에 관련된 불편함이 경감되는 것을 느꼈다.

실시예 3

만성적인 치주염의 치료

70세의 여성. 65세에 만성적인 치주염 및 그로 인한 구취 및 잇몸 출혈을 진단받았다. 구강 세정 외에는 상기 환자는 다른 구강 치료는 받지 않았다. 상기 환자는 본 발명에 따른 추출물을 구강 세정제로서 투여하여 치료되었다. 치료 2일 후, 입냄새는 없어지고, 치료 두 달 후에는 잇몸의 염증 및 출혈이 없어졌다.

실시예 4

치주염의 치료

54세 남성. 치과의사로부터 치주염 때문에 구취가 있는 것으로 진단받았다. 상기 환자는 본 발명에 따른 추출물을 구강 세정제로 사용하여 치료하였다. 치료 수일 후 입냄새가 없어졌다. 수 달 후에 치주염 및 잇몸의 구취가 사라진 것을 확인하였다. 추가적인 치료가 필요하지 않았다.

실시예 5

다리에 상처

54세 남성. 압착 크레오소티드 나무 파편에 의한 다리의 뒤쪽에 감염된 상처를 본 발명에 따른 상기 추출물을 이용하여 감염된 부위에 국소적으로 투여하여 치료하였다. 하루 후 감염이 없어졌다.

실시예 6

개에게 물린 상처

개에게 물린 상처가 있는 44세의 여성을 치료하였다. 물린 후 상기 상처가 나았으나 며칠 후 염증이 발생하였다. 상기 감염된 고름(matter)을 상기 상처에서 제거하고 본 발명에 따른 상기 추출물을 상기 상처에 투여하였다. 상기 상처의 상기 감염에 수반된 통증은 즉시 사라졌으며, 상기 상처는 며칠 후 나았다.

실시예 7

동물의 상처

고양이 및 개의 감염된 상처를 본 발명에 따른 추출물로 치료하였다. 상기 개는 하루 두번 이틀동안 감염된 부위(직경 200mm)에 국소적으로 투여하여 치료하였다. 상기 상처는 적절하게 아물었다. 상기 고양이는 중증의 감염된 상처(직경 약 300mm)가 있었다. 상기 상처를 3일 동안 하루에 2회 국소적으로 투여하여 치료하였다. 상기 상처는 2 내지 3일만에 완전히 아물었다.

실시예 8

경미한 상처 및 가려움증의 치료

항문 부위의 경미한 상처 및 가려움을 호소하는 44세의 남성 성인을 본 발명에 따른 추출물로 치료하였다. 상기 증상의 부위에 상기 추출물을 국소적으로 치료한 후 상기 환자는 몇 분 후 가려움증이 사라졌으며, 상기 상처는 약 12시간 후 아물었다. 상기 상처에 대해 더 이상의 치료는 필요하지 않았다. 코디손 액(cordison liniment)의 국소적인 투여는 효과가 적었다.

실시예 9

인후염의 치료

인후염을 앓는 18세의 여성. 상기 증상의 치료는 구강 및 목을 본 발명에 따른 추출물로 세정하는 것이었다. 그녀는 즉각적으로 상기 증상으로 인한 불편함이 경감되었다고 보고했다.

실시예 10

돼지의 진무른 상처

약 100cm²의 진무른 상처가 있는 돼지에게 상기 실시예 1에 따른 추출물과 물의 1:1 혼합물을 스프레이 하였다. 상기 치료 24시간 후 상기 진무른 상처에 막 이 형성되었다. 진물 및 감염은 없었다. 4일 동안 1일 1회 반복적으로 치료한 후 상기 상처가 아물었다.

실시예 10

악취(malodour)의 제거

상기 실시예 1에 따라 생산된 상기 추출물을 악취를 제거하는데 성공적으로 사용했다. 네오프렌(neoprene)의 신발 및 신발의 안창을 본 발명에 따른 상기 추출물의 희석액(물 희석액)에 담근 후 말렸다. 농축된 추출물을 상기 신발 및 안창에 적용하였다. 상기 치료 후 악취가 나지 않았다.

콘크리트상의 소변 얼룩(개 소변, dog urine)을 염소(chlorine) 및 보편적인 가정용 세정제(cleasing agent)로 닦았지만 악취를 제거하지 못했다. 상기 얼룩을 상기 추출물의 희석액으로 닦았더니 악취가 완전히 사라졌다. 상기 추출물은 또한 발한제로 성공적으로 사용했는데, 효과가 24시간 이상 지속되었다.

실시예 11

다진 고기의 보존

상기 본 발명의 추출물을 다진 고기 50g에 떨어뜨렸다. 상기 처리된 고기 및 대조용 샘플인 미처리된 다진 고기를 냉장고에 넣어두었다. 냉장고에서 2일 후 상기 미처리된 다진 고기 샘플에서 심한 악취가 발생했다. 상기 처리된 고기는 5일 후에도 악취가 없이 신선했다. 6일째 부터 처리된 샘플에서 악취가 관측되었다.

실시예 12

치주염의 임상적 프로토콜

상기 실험에서의 등록( enrolment ): 치주염의 상기 제안된 증상의 범주를 만족하는 20명의 환자(지원자)가 이 실험에 등록하였다.

실험: 상기 실험은 이중 검맹, 위약 대조 방식의 방법으로 진행된다. 환자들을 A 및 B 그룹으로 나누었다(각 그룹당 10명). 상기 환자들은 본 발명에 따른 상기 추출물을 이용하여 하루에 2회 2분의 구강 세정을 포함한 자가 치료를 하도록 지시되었다. 상기 치료는 3달 동안 진행되었다. 상기 환자들은 치료기간 동안 실험되는 증상의 시간, 유형, 중증도를 인지할때 일지를 쓰도록 하였다.

1회 투여 분량( Dosing ): 그룹 A는 본 발명에 따른 상기 추출물을 받았다. 그룹 B는 위약을 받았다.

실험의 평가: 상기 조사자가 상기 환자들의 일지를 검토하고 통계적인 분석을 하였으며, 상기 증상의 중증도는 실험 초기 증상과 관련하여 결정되었다.

실시예 13

비교 추출물(Comparative extract)

호로파 종자 500g을 물 2리터에 넣고 약 30분동안 끓이고, 종자의 잔여물을 상기 혼합물에서 제거하였다. 상기 추출물을 냉각시켰다.

상기 실시예 1의 추출물 및 실시예 13의 상기 추출물을 UV 검출 및 광산란법을 이용해 HPLC 분석하였다.

추출물의 샘플을 물로 5배 희석하고, 0.45㎛ 나이론 필터를 이용해 여과하였다. 상기 분석은 용리액으로서 10.6 mM 포름산/메탄올(15분 동안 98% 포름산, 30분 후 기울기 65%까지, 60분 후에는 기울기 0%까지)을 이용해서 시너지 폴라 RP 80A(Synergi Polar-RP 80A)(250X4.6mm, 4㎛, nr. 16)에서 수행되었고 광산란법으로 검출하였다.

아래 표 1은 상기 크로마토그램에서 높은 것으로 선택된 순으로 개시한 것이다.

높은 순 Nr.	RT(분)	참조(Ex. 13)	발명(Ex. 1)
1	1.8	0.188	12.358
2	2.5	6.778	12.973
3	2.8	137.36	165.609
4	3.2	144.218	241.491
5	3.5	30.959	51.101
6	3.9	33.887	47.785
7	4.4	2.102	2.741
8	38.1	0.45	1.672
9	38.6	3.509	3.828
10	39.2	3.904	6.371
11	41.1	7.358	8.189
12	41.4	6.885	6.638
13	56.2	314.319	250.972
14	62.7	5.927	5.615
15	65.1	27.663	23.852

실시예 14

호로파 종자를 2.5리터의 물에 약 24시간동안 담갔다. 다음으로 미리 담가둔 상기 종자를 20분동안 끓이고, 종자의 잔여물을 상기 혼합물에서 제거하였다. 상기 추출액을 냉각시켰다.

상기 수성 추출물을 우선 셀룰로오스 필터로 여과시키고(0.45㎛) 다음으로 폴리아미드 수지(시그마 알드리치(Aldrich)/수펄코(Supelco)로 부터의 DPA-6S)를 통과시켜 폴리페놀릭스(polyphenolics)를 제거하였다. 이것은 건조물 함량(dry matter content)을 약 14.5 mg/ml에서 약 8.5mg/ml까지 낮추어준다.

컬럼 사이즈 B인 리크로프렙 RP-18(40-64㎛)(Merck사)에서의 역상 크로마토그래피(reverse phase chromatography)를 이용해 상기 추출물에서 잔여 성분을 6 분획으로 분리하였다. 농축 식물 추출물 1 ml을 상기 컬럼(column)에 다음의 기울기를 이용해 주사하였다: 기울기는 0 내지 1분에서는 H₂O/AcN 98:2 였으며, 다음으로는 1에서 40분 동안은 AcN 100%가 되도록 점진적인 기울기를 사용했다. 상기 용리된 성분을 다이오드 어레이 검출(200 내지 600nm)을 이용해서 검출하였다. 도 1은 상기 210nm에서의 크로마토그램을 보여준다. 6 부분(fraction)은 5 에서 10 분; 10 에서 15분; 15 에서 17.5분; 17.5 에서 21분; 21 에서 24분; 24 에서 27분의 시간 간격에 따라 수집되었다. 세번의 반복된 주사로부터의 고여있는 분획을 로터리 증발기(rotary evaporator)를 이용해 건조시키고, 상기 6개의 분획을 0.5ml의 정제수(milli Q water)에 다시 용해시켜 분획의 농도가 5배 더 진하게 되도록 하였다.

호로파로부터의 6개의 HPLC 분획과 상기 기준 추출물을 단순포진바이러스(herpes simplex virus, HSV-2)에 대한 항 바이러스 활성을 분석하였다.

상기 분획을 바이러스(1:1 혼합물에서 1x10⁵ 플라그 형성 단위(plaque-forming units in a 1 :1 mixture))와 혼합한 후 상온에서 15분 동안 배양하였다. 상기 혼합물을 10배 희석된 베로 세포(Vero cell) 배양액에 첨가하고 상기 세포에 대한 세포병리효과(cytopathic effect)에 의해 바이러스 복제를 모니터 하였다.

감염 2일 후, 상기 기준 혼합물로 처리된 배양액에서 바이러스 복제에 있어서 5배 감소효과가 관찰되었다. 3 내지 6번의 분획에서는 아무런 효과도 관찰되지 않았다. 2번 분획에서는 미미한 효과가 나타난 반면 1번 분획에서는 바이러스 복제가 약 100배 감소되었다.

상기 실험을 바탕으로, 호로파는 항 바이러스성을 가지고 있으며, 이것은 HPLC 1번 분획에 국한적이라는 결과를 얻었다.

실시예 15

실시예 14번에 따라 생산된 1번 분획을 베로 세포에서의 HSV-1(Stain Mclntyre)에 대한 항 바이러스 활성에 대한 실험에 이용하였다.

상기 분획을 바이러스(1:1 혼합물에서 1x10⁵ 플라그 형성 단위(plaque-forming units)와 혼합하여 15분 동안 상온에서 배양하였다. 상기 혼합물을 베로 세포 배양액에 넣고 바이러스 복제를 세포에 대한 세포병리효과(cytophthic effect)를 이용해 모니터하였다. 상기 분획이나 상기 1번 분획을 배제하고 공시험(blank tests)이 수행되었다.

감염 2일 후, 상기 바이러스 및 상기 1번 분획의 혼합물이 함유된 용기에서 상기 베로 세포의 성장이 관찰되었다. 상기 공시험에서 1번 분획이 아니라 상기 바이러스를 받은 용기에서 세포 사멸(cell death)이 관찰된 반면, 상기 바이러스가 아니라 상기 1번 분획을 받은 용기에서 세포 성장이 관찰되었다.

이러한 실험을 바탕으로 하여, 1번 분획의 함유물(content)는 항 바이러스성 활성을 갖고 있으며, 1번 분획의 함유물은 베로 세포에 대한 독성을 갖지 않는다는 결론을 얻었다.

도 1은 상기 210nm에서의 크로마토그램 결과를 도시한 것이다.

Claims

a. 호로파(Trigonella foenum-graecum)에서 얻은 식물성 물질과 액체의 혼합물을 제조하는 단계;

b. 상기 혼합물을 적어도 3 시간 동안 배양하는 단계;

c. 상기 혼합물을 가열하는 단계; 및

d. 상기 혼합물로부터 액상 추출물을 회수하는 단계;

를 포함하는 방법에 의해서 얻을 수 있는 추출물.
제1항에 있어서,

상기 식물성 물질은 전식물(whole plant), 잎, 종자 및 뿌리로 구성된 그룹에서 선택된 것인, 추출물.
제2항에 있어서,

상기 식물성 물질은 상기 식물의 종자인 것인, 추출물.
제2항에 있어서,

상기 종자는 상기 식물의 건조된 종자인 것인, 추출물.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 혼합물을 적어도 6시간 동안 배양하는 것인, 추출물.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 혼합물의 가열은 끓이는 것에 의한 것인, 추출물.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 혼합물을 적어도 5분 동안 끓이는 것인, 추출물.
제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 가열하는 단계 동안, 적어도 한 번 액체를 더 가하는 것인, 추출물.
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 액체는 수성(aqueous)인 것인 추출물.
제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서,

상기 c 단계에 따른 가열 처리를 하기 전에 상기 배양된 혼합물을 냉각하는 단계 또는 상기 가열 처리된 혼합물을 냉각하는 단계를 추가적으로 포함하는 것인, 추출물.
제10항에 있어서,

상기 혼합물을 적어도 3시간 동안 냉각시키는 것인, 추출물.
제10항에 있어서,

상기 추가적으로 포함하는 단계는 제10항 또는 11항에서 정의된 상기 혼합물을 냉각하고 상기 1.c 단계를 반복하는 것을 포함하는 것인, 추출물.
컬럼 사이즈 B의 리크로프렙(Lichropre RP-18(40-63㎛), Merck사)을 이용해 0 에서 1 분동안은 H₂O/AcN 98:2의 기울기를 사용하고, 다음 1 내지 40분 동안 AcN 100%가 되도록 점진적인 기울기를 사용하고 5 내지 10분 간격으로 상기 분획을 수집하는 역상 크로마토그래피를 수행하여 얻을 수 있는, 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 따른, 추출물의 분획.
제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서,

용매를 제거함으로써 농화하는 것인, 추출물 또는 이의 분획.
제14항에 있어서,

상기 용매는 부분적으로 또는 전체적으로 막 여과, 증발(evaporation), 침강(precipitation), 추출(extraction), 공비 증류(azeotrope distillation), 동결건조(lyophilixation), 분무 건조 및 이들의 조합으로 이루어진 그룹에서 선택된 방법에 의해 제거되는 것인, 추출물 또는 이의 분획.
제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 따른 추출물을 포함하는 조성물.
제16항에 있어서,

상기 조성물은 의약적 조성물인 것인, 조성물.
제16항에 있어서,

상기 조성물은 소독제(disinfection agent)인 것인, 조성물.
제16항에 있어서,

상기 조성물은 보존제인 것인, 조성물.
제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 따른 추출물의 염증성 증상의 치료용 의약적 조성물의 제조를 위한 용도.
제20항에 있어서,

상기 염증성 증상은 기저귀 피부염, 여드름, 천식, 및 위장관에서의 염증성 증상으로 구성된 그룹에서 선택된 것인, 용도.
제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 따른 추출물의 감염 증상의 치료 또는 예방용 의약적 조성물의 제조를 위한 용도.
제22항에 있어서,

상기 감염성 증상은 단순포진(Herpes simplex)인 것인, 용도.
제22항에 있어서,

상기 감염성 증상은 감염된 상처, 수술로 인한 상처, 농가진(impetigo), 황색포도상구균과 같은 포도상구균의 감염, 구강에서의 감염, 치주질환, 눈 또는 눈의 부속기(adnexa)에서의 감염, 일반 감기, 단순 포진, 사마귀 및 인후염으로 구성된 그룹에서 선택된 것인, 용도.
제24항에 있어서,

상기 치주 질환은 치은염(gingivitis), 치주염(periodontitis) 및 구취(halitosis)에서 선택된 것인, 용도.
제20항 내지 제25항에 있어서,

상기 의약적 조성물은 구강 세정제, 츄잉 검, 치약, 밤(balm), 플라스터(plaster), 입술 연고(lip salve), 스프레이, 연고, 젤, 캡슐, 점액(drop) 또는 정제로 제제화된 것인, 용도.
피부; 부엌, 도축장, 화장실 및 마굿간과 같은 설비(installation); 냉장고 또는 냉동고와 같은 부엌 기구류(hardware); 물; 물 저장고; 환자의 냄새를 가진 주거(residences); 또는 콘크리트 구성요소;의 소독용 조성물의 제조를 위한, 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 따른 추출물의 용도.
고기, 가금류 및 이들의 제품과 같은 식품의 보존용 조성물의 제조를 위한 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 따른 추출물의, 용도.
염증성 증상을 겪는 사람에게 청구항 1항에 따른 추출물을 포함하는 의약적 조성물의 상기 증상을 완화하거나 치료하는데 충분한 양을 투여하는, 염증성 증상 의 예방 또는 치료 방법.
제29항에 있어서,

상기 염증성 증상은, 기저귀 피부염, 여드름, 천식 또는 위장관에서의 염증성 증상에서 선택된 것인, 방법.
감염을 겪는 사람에게 청구항 1항에 따른 추출물을 포함하는 의약적 조성물의 상기 증상을 완화하거나 치료하는데 충분한 양을 투여하는, 감염성 증상의 예방또는 치료 방법.
제31항에 있어서,

상기 감염성 증상은 감염된 상처, 수술로 인한 상처, 농가진, 황색포도상구균과 같은 포도상 구균에 의한 감염, 구강의 감염, 치주질환, 눈 또는 눈의 부속기의 감염, 일반 감기, 단순 포진(cold sores, herpes simplex), 사마귀 및 인후염(pharyngitis)으로 이루어진 그룹에서 선택된 것인, 방법.
제29항 또는 제31항에 있어서,

상기 의약적 조성물은 구강 세정제, 츄잉 검, 치약, 밤(balm), 플라스터(plaster), 입술 연고(lip salve), 스프레이, 연고, 젤, 캡슐, 점액 또는 정제로 제제화 된 것인, 방법.
청구항 제1항에 따른 추출물을 함유하는 소독제를 피부; 부엌, 도축장, 화장실 및 마굿간과 같은 설비; 냉장고 및 냉동고와 같은 부엌 기구류; 물; 물 저장고; 또는 콘크리트 구성요소;에 감염의 위해성을 줄이는데 충분한 양을 적용하는 소독 방법.
제1항에 따른 추출물을 포함하는 보존제를 그 식품의 부패를 지연시키는데 충분한 양으로 식품을 처리하는, 식품의 보존 방법.