CN102085178B - 一种提高依诺肝素钠注射液稳定性的生产工艺 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种提高依诺肝素钠注射液稳定性的生产工艺，其特征在于将氮气保护及pH调节工艺应用于依诺肝素钠注射液的生产。首先将用于配制药液的注射用水充氮除氧直至其溶解氧小于0.1ppm，再加入依诺肝素钠原料药，搅拌溶解，并且一直充氮保护，保持药液中溶解氧小于0.1ppm，然后调节药液pH至6.5-7.5，优选7.0-7.5，最后在氮气保护下进行无菌过滤和灌装，得到稳定性良好的依诺肝素钠注射液，有效解决了药液稳定性较差的问题，该方法经济实用，易于在工业大生产中应用。

Description

一种提高依诺肝素钠注射液稳定性的生产工艺

技术领域

本发明属于药学领域，涉及一种提高依诺肝素钠注射液稳定性的生产工艺，特别涉及一种应用氮气保护工艺和pH调节工艺提高依诺肝素钠注射液稳定性的生产工艺。

背景技术

依诺肝素钠是一种低分子肝素的钠盐，系由猪小肠黏膜提取的肝素经苄基酯化后，碱降解获得的硫酸氨基葡聚糖片断的钠盐，为多糖混合物，平均分子量为4500道尔顿左右。1993年获得FDA批准，在美国上市，其主要作用机制在于通过与抗凝血酶及其复合物结合，抑制Xa因子和IIa因子的活性，其主要适应症包括：预防活动受限患者发生的深度静脉血栓、预防腹部手术后存在血栓栓塞并发症患者的深度静脉血栓、预防髋部置换手术后患者发生的深度静脉血栓、预防膝关节置换手术后患者发生的深度静脉血栓、与阿司匹林合用预防不稳定型心绞痛和无Q波心肌梗塞患者发生的动脉血栓、与华法林合用用于无肺栓塞的急性深度静脉血栓的患者、由各种原因引起的弥漫性血管内凝血、也用于血液透析、体外循环、导管术、微血管手术等操作中及某些血液标本或器械的抗凝处理。

依诺肝素钠具有较强的抗Xa活性和较低的抗IIa活性，因此相对于普通肝素，具有低抗凝、高抗栓、生物利用度高、作用时间长、使用方便和出血作用少的优点。由于普通肝素在临床使用上的不便和具有较大的副作用，因此依诺肝素钠在临床上使用量远远大于肝素钠。

依诺肝素钠注射液通常的生产工艺为：将依诺肝素钠原料药溶解在冷却后的注射用水中，然后无菌过滤和灌装，最后检查、包装。按照上述工艺生产出来的依诺肝素钠注射液在pH、颜色和活性稳定性方面较差，特别是加速实验过程中，加速实验后期，其颜色往往会深于相应的质量标准，并且活性会有一定幅度的下降、pH会有较大幅度的下降。按照普通无菌工艺生产的依诺肝素钠注射液虽然符合国家相关质量标准，但在放置过程中或者加速实验过程中，药液呈现稳定性不好的情况，包括pH出现较大幅度的下降、颜色发生明显变化、药液效价降低等，因此按照普通无菌工艺生产的注射液存在一定的质量问题。

为了解决上述问题，部分企业在依诺肝素钠注射液中加入亚硫酸氢钠作为稳定剂，加入亚硫酸氢钠的注射液在解决上述存在的问题起到一定作用，但亚硫酸氢钠一般用在食品、化工产品较多，并没有符合注射级别的亚硫酸氢钠，因此本身存在较多的杂质，用于注射液的生产会带入一定的杂质，带来一定的质量风险。

综上所述，除了通过加入亚硫酸氢钠作为稳定剂的方式之外，还需要考虑通过对处方或者工艺进行改进来解决依诺肝素钠注射液存在的上述问题。

发明人在实验过程中，意外的发现在制备依诺肝素钠注射液过程中应用氮气保护和pH调节工艺，可以有效的解决现有技术中存在的问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种提高依诺肝素钠注射液稳定性的生产工艺。

本发明所述工艺是将氮气保护和pH调节工艺应用于依诺肝素钠注射液的生产。使用该工艺生产的依诺肝素钠注射液在稳定性上较现有工艺生产的注射液的稳定性要明显好转，在药液的颜色变深及活性下降、药液pH大幅下降方面有明显改善，并且该工艺简单实用，易于在工业化大生产中使用。

本发明的生产工艺是对现有技术的改进，在生产依诺肝素钠注射液工艺中加入氮气保护和pH调节工艺。所述氮气保护工艺应用在依诺肝素钠注射液所有工序、pH调节工艺应用在依诺肝素钠药液配制工序。

现有的依诺肝素钠注射液生产工艺为：将依诺肝素钠原料药溶解在冷却后的注射用水中，然后无菌过滤和灌装，最后检查、包装。按照上述工艺生产出来的依诺肝素钠注射液符合相关质量标准，但产品在放置过程中，其pH、颜色和活性稳定性较差，特别是加速实验过程中，加速实验后期，其颜色往往会深于相应的质量标准，并且活性会有一定幅度的下降、pH会有较大幅度的下降。

通过对依诺肝素钠的结构及理化性质进行分析，本发明人提出氮气保护对依诺肝素钠的稳定性具有重要作用，并且经过多次实验，通过比较在药液配制过程中应用氮气保护和不用氮气保护药液的稳定性(实验结果见表1)，发现依诺肝素钠原料药在溶解过程中，氮气对药液的稳定性具有明显的保护作用。

表1

本发明人根据上述结论，提出将氮气保护应用于依诺肝素钠注射液整个生产工艺，包括在药液配制前，将氮气通入冷却后的注射用水中，使注射用水的溶解氧含量低于0.1ppm，再投入依诺肝素钠原料药，搅拌，并且在搅拌过程中一直通入氮气，保持药液的溶解氧始终低于0.1ppm，然后在氮气保护下进行无菌过滤和灌装，最后检查、包装。

本发明对按照上述氮气保护工艺生产的样品进行稳定性实验，比较应用氮气保护工艺生产的药液与没有应用氮气保护工艺生产的药液的加速稳定性。得到意想不到的结果(结果见表2)，应用氮气保护工艺生产的依诺肝素钠注射液的稳定性明显好于未使用氮气保护工艺生产的注射液，并且在加速实验过程中表现出良好的稳定性。

表2

因此本发明提出在依诺肝素钠注射液生产工艺中加入氮气保护。

虽然氮气保护工艺生产的依诺肝素钠注射液稳定性已经大大提高，但氮气保护工艺在提高药液颜色稳定性方面略显不足，药液在加速试验过程中颜色仍然发生变深的现象。因此需要进一步考虑应用其他能提高药液颜色稳定性的工艺。

依诺肝素钠作为已有国家标准的药品，其质量标准要求依诺肝素钠注射液的pH范围为5.5-7.5，为了研究不同pH值对药液稳定性的影响，寻找最佳的pH条件，本发明经过多次实验，通过比较在药液配制过程中将药液调节到不同的起始pH值，然后比较不同起始pH对药液稳定性的影响，得到意想不到的结果(结果见表3、表4)，药液pH值对药液的稳定性具有明显的影响作用。将药液pH调节到6.5-7.5，特别是将药液pH调节到7.0-7.5，药液在加速实验过程中表现出良好的稳定性。

表3

表4

实验结果表明将药液pH控制在6.5-7.5，特别是控制在7.0-7.5，药液颜色稳定性明显提高，但单用pH调节工艺，药液的pH下降幅度较大。

鉴于氮气保护和控制药液pH值均能提高依诺肝素钠注射液的稳定性，本发明进一步提出将两种工艺联合应用于依诺肝素钠注射液生产过程中，得到更让人意想不到的结果，两种工艺联合应用具有良好的协同作用，将上述两种工艺同时应用生产的依诺肝素钠注射液稳定性比应用其中一种工艺生产的注射液的稳定性大大提高，不仅解决了单用氮气保护工艺时药液颜色不稳定的问题，同时解决了单用pH调节工艺时药液pH下降幅度较大的问题，而且还进一步提高了药液活性的稳定性，样品稳定性实验结果见表5

表5

因此本发明提出在依诺肝素钠注射液生产工艺中联合应用氮气保护和pH控制工艺，其中氮气保护工艺应用在依诺肝素钠注射液所有工序，pH调节工艺应用在依诺肝素钠药液配制工序。

本发明的制备方法，包括以下步骤：配制依诺肝素钠药液，无菌过滤和灌装，检查、包装。

其中，在依诺肝素钠药液配制过程中充入氮气保护和调节药液的pH值，在无菌过滤和灌装过程中充入氮气保护。

优选的，在依诺肝素钠药液配制过程中充入氮气保护和调节药液pH至6.5-7.5，在无菌过滤和灌装过程中充入氮气保护。

进一步优选的，在配制依诺肝素钠药液前，将用于配制药液的注射用水中充入氮气，在药液配制时调节药液的pH至7.0-7.5，在无菌过滤和灌装过程中充入氮气保护。

具体的，本发明的制备方法，包括以下步骤：

(1)依诺肝素钠药液配制前，将用于配制药液的注射用水中充入氮气；

(2)然后再加入依诺肝素钠原料药，搅拌溶解，并且在溶解过程中，一直充入氮气，并且调节药液的pH值；

(3)无菌过滤和灌装，整个过程一直进行氮气保护；

(4)检查，包装，即可。

其中，步骤(1)注射用水中充入氮气，使注射用水中的溶解氧小于0.1ppm。

其中，步骤(2)过程中一直充入氮气，保持药液溶解氧小于0.1ppm，并且使用碱性溶液或者酸性溶液调节药液的pH值至6.5-7.5，优选7.0-7.5，更优选为7.5，其中，所述碱性溶液为氢氧化钠溶液，所述酸性溶液为盐酸溶液。

本发明的制备方法与传统工艺相比较，不仅有效的解决了依诺肝素钠注射液在pH、颜色和活性稳定性方面较差、保质期短、使用不安全等问题；还具有制备工艺简单，易于操作，成本低廉，适合大规模生产等特点。

具体实施方式

实施例1、依诺肝素钠注射液的制备工艺

1)注射用水充氮除氧

用2000ml洁净烧杯称取约900g已经冷却的注射用水，将氮气管道和溶解氧测定仪的探头插入注射用水中，调节氮气阀门，向注射用水中不断通入氮气，并读取含氧量测定结果，直至注射用水的溶解氧小于0.1ppm。

2)依诺肝素钠原料药称量

在天平上用烧杯准确称取95g依诺肝素钠原料药(效价为105IU/mg)。

3)药液配制

将称量好的依诺肝素钠原料药缓慢倒入溶解氧小于0.1ppm的注射用水中，用另外注射用水将盛装了原料药的烧杯分几次冲洗，倒入2000ml烧杯中，开启磁力搅拌，溶解(溶解过程中一直保持充氮，并保证药液溶解氧小于0.1ppm)，待原料药完全溶解后，用氢氧化钠溶液调节药液pH至7.5，最后用注射用水补加至1050g。

4)无菌过滤和灌装

在氮气保护条件下通过无菌过滤系统将药液无菌过滤，并无菌灌装，得到约1000支1.0ml/支样品。

5)检查、包装

对上述样品进行检查，并包装。

实施例2、依诺肝素钠注射液的制备工艺

1)注射用水充氮除氧

用2000ml洁净烧杯称取约900g已经冷却的注射用水，将氮气管道和溶解氧测定仪的探头插入注射用水中，调节氮气阀门，向注射用水中不断通入氮气，并读取含氧量测定结果，直至注射用水的溶解氧小于0.1ppm。

2)依诺肝素钠原料药称量

在天平上用烧杯准确称取95g依诺肝素钠原料药(效价为105IU/mg)。

3)药液配制

将称量好的依诺肝素钠原料药缓慢倒入溶解氧小于0.1ppm的注射用水中，用另外注射用水将盛装了原料药的烧杯分几次冲洗，倒入2000ml烧杯中，开启磁力搅拌，溶解(溶解过程中一直保持充氮，并保证药液溶解氧小于0.1ppm)，待原料药完全溶解后，用氢氧化钠溶液调节药液pH至7.0，最后用注射用水补加至1050g。

4)无菌过滤和灌装

在氮气保护条件下通过无菌过滤系统将药液无菌过滤，并无菌灌装，得到约5000支0.2ml/支样品。

5)检查、包装

对上述样品进行检查，并包装。

实施例3、依诺肝素钠注射液的制备工艺

1)注射用水充氮除氧

用5000ml洁净烧杯称取约3500g已经冷却的注射用水，将氮气管道和溶解氧测定仪的探头插入注射用水中，调节氮气阀门，向注射用水中不断通入氮气，并读取含氧量测定结果，直至注射用水的溶解氧小于0.1ppm。

2)依诺肝素钠原料药称量

在天平上用烧杯准确称取381g依诺肝素钠原料药(效价为105IU/mg)。

3)药液配制

将称量好的依诺肝素钠原料药缓慢倒入溶解氧小于0.1ppm的注射用水中，用另外注射用水将盛装了原料药的烧杯分几次冲洗，倒入5000ml烧杯中，开启磁力搅拌，溶解(溶解过程中一直保持充氮，并保证药液溶解氧小于0.1ppm)，待原料药完全溶解后，用氢氧化钠溶液调节药液pH至7.3，最后用注射用水补加至4200g。

4)无菌过滤和灌装

在氮气保护条件下通过无菌过滤系统将药液无菌过滤，并无菌灌装，得到约10000支0.4ml/支样品。

5)检查、包装

对上述样品进行检查，并包装。

实施例4、本发明(实施例1)加速6个月稳定性实验结果见表6

表6

Claims (10)

1.一种提高依诺肝素钠注射液稳定性的生产工艺，其特征在于，在生产依诺肝素钠注射液过程中应用氮气保护和药液pH调节工艺，其中pH调节至6.5-7.5。

2.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，在依诺肝素钠药液配制过程中应用氮气保护。

3.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，在依诺肝素钠药液配制前，将用于配制药液的注射用水中充入氮气除氧。

4.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，在依诺肝素钠药液配制过程中使用碱性溶液或者酸性溶液调节药液的pH值至6.5-7.5。

5.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，在依诺肝素钠药液配制过程中使用碱性溶液或者酸性溶液调节药液的pH值至7.0-7.5。

6.根据权利要求4或5所述的工艺，其特征在于，所述碱性溶液为氢氧化钠溶液，所述酸性溶液为盐酸溶液。

7.根据权利要求1所述的生产工艺，其特征在于，包括以下步骤：

(1)依诺肝素钠药液配制前，将用于配制药液的注射用水中充入氮气，

(2)然后再加入依诺肝素钠原料药，搅拌溶解，并且在溶解过程中，一直充入氮气，并在完全溶解后，使用碱性溶液或者酸性溶液调节药液的pH值至6.5-7.5，

(3)氮气保护下进行无菌过滤和灌装，

(4)检查，包装，即可。

8.根据权利要求7所述的生产工艺，其特征在于，步骤(1)注射用水中充入氮气，使注射用水中的溶解氧小于0.1ppm。

9.根据权利要求7所述的生产工艺，其特征在于，步骤(2)过程中一直充入氮气，保持药液溶解氧小于0.1ppm，并使用氢氧化钠或者盐酸溶液调节药液pH至6.5-7.5。

10.根据权利要求7所述的生产工艺，其特征在于，步骤(2)过程中一直充入氮气，保持药液溶解氧小于0.1ppm，并使用氢氧化钠或者盐酸溶液调节药液pH至7.0-7.5。