CN102050843B - 一种从茶叶中提取生物碱、儿茶素的方法 - Google Patents
一种从茶叶中提取生物碱、儿茶素的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102050843B CN102050843B CN 201010552546 CN201010552546A CN102050843B CN 102050843 B CN102050843 B CN 102050843B CN 201010552546 CN201010552546 CN 201010552546 CN 201010552546 A CN201010552546 A CN 201010552546A CN 102050843 B CN102050843 B CN 102050843B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- tealeaves
- catechin
- water
- ethanolic soln
- alkaloid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Abstract
本发明涉及从茶叶中提取生物碱、儿茶素的方法，属于分离提取领域。本发明所解决的技术间题是提供了一种无有毒有机溶剂残留的从茶叶中提取分离生物碱和儿茶素的方法。本发明从茶叶中提取生物碱和儿茶素的方法包括如下步骤：a、原料前处理：采用水或乙醇溶液提取茶叶，然后过滤，滤液浓缩；b、凝胶层析分离：浓缩后的滤液上样到凝胶层析柱，然后用水洗脱，收集0.8～2BV的洗脱液，洗脱液经干燥得到生物碱；其中，所述凝胶过滤层析所用的填料为葡聚糖凝胶LH-20或交联葡聚糖琼脂糖凝胶；c、儿茶素分离：b步骤用水洗脱生物碱后，用1～2BV的乙醇溶液反冲层析柱，收集乙醇溶液，浓缩干燥得儿茶素。
Description
技术领域
本发明涉及一种从茶叶中提取生物碱、儿茶素的方法，属于分离提取领域。
背景技术
茶叶中生物碱含量一般在2％～4％，主要以咖啡碱为主。咖啡碱在医药方面的有广泛的用途，如：可用作心脏和呼吸兴奋剂，具有使中枢神经系统兴奋的作用；也是一种重要的解热镇痛剂，是复方阿司匹林、可立克、去痛片、速效感冒胶囊等的主要成分之一；还有一定的利尿作用。在食品方面的用途：咖啡因作为兴奋剂、苦味剂、香料，主要供可乐型饮料及含咖啡饮料使用，同时也作为食品添加剂使用。
茶叶中儿茶素的含量为12～24％，是茶叶中多酚类物质的主体部分。儿茶素是一种具有优越抗氧性能的天然抗氧化剂，并具有抗癌、抗衰老、抗辐射、清除人体自由基、降血糖、降血压、降血脂及杀菌消炎等一系列药理功能，在油脂、食品、医药、化妆品及饮料等领域具有广泛的应用前景。近年来，随着儿茶素应用范围的扩大，市场需求量急剧增加。
目前从茶叶中提取生物碱的方法主要有毒有害有机溶剂(氯仿)萃取法和升华法，升华法利用高温使咖啡碱升华，该方法产品的得率低，且高温对茶叶中的其它活性成分破坏大，不利于茶叶综合提取利用。儿茶素的提取主要使用乙醚、乙酸乙酯等有毒有害试剂萃取，环境污染大，产品纯度低；柱层析分离儿茶素法：通常采用含有机溶剂(乙酸乙酯等)的溶液作为洗脱剂，工艺耗时长。以上两种方法得到的儿茶素有机残留较高，限制其在食品、医药等行业应用。
发明内容
本发明所要解决的第一个技术问题是提供一种无有毒有机溶剂残留的从茶叶中提取分离生物碱的方法。
本发明从茶叶中提取生物碱的方法包括如下步骤：
a、原料前处理：采用水或乙醇溶液提取茶叶，然后过滤，滤液浓缩；
b、凝胶层析分离：浓缩后的滤液上样到凝胶层析柱，然后用水洗脱，收集0.8～2BV的洗脱液，洗脱液经干燥得到生物碱；其中，所述凝胶过滤层析所用的填料为葡聚糖凝胶LH-20或交联葡聚糖琼脂糖凝胶。
其中，上述a步骤中所述乙醇溶液的浓度优选为1～40wt％。
其中，上述a步骤中优选采用水提取茶叶。
其中，上述a步骤中所述的过滤优选为膜过滤，所述浓缩优选为减压旋蒸浓缩。
其中，上述b步骤用水洗脱时的流速优选为0.5～5BV/h。
本发明所要解决的第二个技术问题是提供一种无有毒有机溶剂残留的从茶叶中提取分离儿茶素的方法。
本发明从茶叶中提取儿茶素的方法包括如下步骤：
a、原料前处理：采用水或乙醇溶液提取茶叶，然后过滤，滤液浓缩；
b、凝胶层析分离：浓缩后的滤液上样到凝胶层析柱，然后用水洗脱，收集0.8～2BV的洗脱液，洗脱液经干燥得到生物碱；其中，所述凝胶过滤层析所用的填料为葡聚糖凝胶LH-20或交联葡聚糖琼脂糖凝胶；
c、儿茶素分离：b步骤用水洗脱生物碱后，用1～2BV的乙醇溶液反冲层析柱，收集乙醇溶液，浓缩干燥得儿茶素。
其中，上述a步骤中所述乙醇溶液的浓度优选为1～40wt％。
其中，上述a步骤中优选采用水提取茶叶。
其中，上述a步骤中所述的过滤优选为膜过滤，所述浓缩优选为减压旋蒸浓缩。
其中，上述b步骤用水洗脱时的流速优选为0.5～5BV/h。
其中，上述c步骤中反冲层析柱的乙醇溶液的浓度优选为20～40wt％。
本发明方法操作简单，生产效率高，经济环保，产品无有毒试剂残留，用于食品、医药等行业安全可靠。本发明方法得到的生物碱只含咖啡碱和少量可可碱；得到的儿茶素由8类儿茶素单体组成，其中抗氧化性最强EGCG含量在60％以上，柱层析对生物碱和儿茶素的回收率都达到98％以上。本发明为茶叶中生物碱、儿茶素的提取提供了一种新的选择，具有广阔的应用前景。
附图说明
图1为柱层析分离茶叶中生物碱的色谱图，其中，峰C为需要收集的生物碱；
图2为高效液相分析色谱图，图中，图(A)为茶叶浸提液的色谱图；图(B)为水洗脱的收集液的色谱图，图(C)为咖啡碱和可可碱标准品的色谱图。
具体实施方式
本发明从茶叶中提取生物碱的方法包括如下步骤：
a、原料前处理：采用水或乙醇溶液提取茶叶，然后过滤，滤液浓缩；
b、凝胶层析分离：浓缩后的滤液上样到凝胶层析柱，然后用水洗脱，收集0.8～2BV的洗脱液，洗脱液经干燥(优选真空冷冻干燥)得到生物碱；其中，所述凝胶过滤层析所用的填料为葡聚糖凝胶LH-20或交联葡聚糖琼脂糖凝胶。
其中，用水或乙醇溶液提取茶叶时，水或乙醇溶液的用量为常规用量即可，进一步的，水或乙醇溶液的用量优选为茶叶重量的6～70倍，水或乙醇溶液的用量最优选为茶叶重量的15～30倍。
其中，任意浓度的乙醇溶液包括纯乙醇溶液(即95wt％以上的乙醇溶液)都可以用于茶叶的浸提，为了降低成本，上述a步骤中所述乙醇溶液的浓度优选为1～40wt％。
其中，由于用水浸提茶叶中生物碱与用乙醇溶液浸提茶叶中生物碱相比没有明显差异，为了使产品中不残留任何有机试剂，且降低成本，优选采用水浸提茶叶。
其中，上述a步骤中所述的过滤优选为膜过滤，可以采用常规方法进行浓缩，浓缩方法优选为减压旋蒸浓缩。
其中，为了使洗脱效果更好，上述b步骤用水洗脱时的流速优选为0.5～5BV/h。
其中，上述b步骤所述凝胶过滤层析所用的填料优选为葡聚糖凝胶LH-20。
本发明从茶叶中提取儿茶素的方法包括如下步骤：
a、原料前处理：采用水或乙醇溶液提取茶叶，然后过滤，滤液浓缩；
b、凝胶层析分离：浓缩后的滤液上样到凝胶层析柱，然后用水洗脱，收集0.8～2BV的洗脱液，洗脱液经干燥(优选真空冷冻干燥)得到生物碱；其中，所述凝胶过滤层析所用的填料为葡聚糖凝胶LH-20或交联葡聚糖琼脂糖凝胶；
c、儿茶素分离：b步骤用水洗脱生物碱后，用1～2BV的乙醇溶液反冲层析柱(用水洗脱1.5～3BV后，即可用乙醇溶液反冲层析柱)，收集乙醇溶液，浓缩干燥(优选真空冷冻干燥)得儿茶素。
其中，用水或乙醇溶液浸提茶叶时，水或乙醇溶液的用量为常规用量即可，进一步的，水或乙醇溶液的用量优选为茶叶重量的6～70倍，水或乙醇溶液的用量最优选为茶叶重量的15～30倍。
其中，任意浓度的乙醇溶液包括纯乙醇溶液(即95wt％以上的乙醇溶液)都可以用于茶叶的浸提，为了降低成本，上述a步骤中所述乙醇溶液的浓度优选为1～40wt％。
其中，为了使产品中不残留任何有机试剂，且降低成本，上述a步骤中优选采用水浸提茶叶。
其中，上述a步骤中所述的过滤优选为膜过滤，可以采用常规方法进行浓缩，浓缩方法优选为减压旋蒸浓缩。
其中，为了使洗脱效果更好，上述b步骤用水洗脱时的流速优选为0.5～5BV/h。
其中，上述b步骤所述凝胶过滤层析所用的填料优选为葡聚糖凝胶LH-20。
其中，上述c步骤中反冲层析柱的乙醇溶液的浓度优选为20～40wt％。
下面结合实施例对本发明的具体实施方式做进一步的描述，并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。
实施例1采用本发明方法从茶叶中提取生物碱和儿茶素
3g茶叶加沸水50ml浸提30min，过0.45μm孔径的滤膜，滤液浓缩上样到填充好的葡聚糖凝胶LH-20(购至GE医疗集团)柱子，然后用纯水洗脱，洗脱时的流速为3BV/h，收集洗脱液(1～1.4BV)，洗脱液浓缩、真空冷冻干燥得到产品1。水洗脱2BV后，用乙醇溶液(用量1.5BV，浓度30wt％)反冲层析柱，收集乙醇溶液，浓缩、干燥得产品2。柱层析分离茶叶中生物碱的色谱图如图1所示，其中，峰C即为需要收集的生物碱。
产品1通过飞行时间质谱仪和高效液相色谱检测，结果如图2所示，由图2和检测结果可知产品1的纯度较高，其只含有咖啡碱和可可碱，咖啡碱含量为93.9％，可可碱含量为6.1％。高效液相色谱条件：安捷伦1100液相色谱仪(配备二元泵、柱温箱、DAD检测器)，色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18(5μm，250mm×4.6mm)；进样量：10μl；流速：1mL/min；紫外检测波长：278nm；流动相：A相(0.2％甲酸水溶液)，B相(乙腈)；梯度洗脱条件：0～5min保持8％B相，5min～40min线性变化到21％B相，40min～50min100％B相冲洗。
经检测，产品2为儿茶素类含量为91.3％，其中EGCG含量61.7％。
经测定，本实施例柱层析对生物碱的回收率为99.3％，对儿茶素的回收率为98.0％。生物碱得率为3.1％，儿茶素得率为10.0％。
实施例2采用本发明方法从茶叶中提取生物碱和儿茶素
3g茶叶加乙醇溶液(浓度20wt％)70ml并加热至沸腾浸提30min，过0.45μm孔径的滤膜，滤液浓缩上样到填充好的琼脂糖交联葡聚糖凝胶(购至GE医疗集团)柱子，然后用纯水洗脱，洗脱时的流速为5BV/h，收集部分(0.8～1BV)洗脱液，浓缩、真空冷冻干燥得到产品1。水洗脱1.5BV后，用乙醇溶液(用量1.5BV，浓度30wt％)反冲层析柱，收集乙醇溶液，浓缩、干燥得产品2。
产品1和2分别通过飞行时间质谱仪和高效液相色谱检测(检测方法与实施例1相同)，所得产品1只含有咖啡碱和可可碱，咖啡碱含量为97.2％，可可碱含量为2.8％。产品2为儿茶素类含量92.7％的物质，其中EGCG含量63.5％。
经测定，本实施例柱层析对生物碱的回收率为98.6％，对儿茶素的回收率为98.8％。生物碱得率为3.1％，儿茶素得率为10.2％。
Claims (11)
1.从茶叶中提取生物碱的方法，其特征在于包括如下步骤：
a、原料前处理：采用水或乙醇溶液提取茶叶，然后过滤，滤液浓缩；
b、凝胶层析分离：浓缩后的滤液上样到凝胶层析柱，然后用水洗脱，收集0.8～2BV的洗脱液，洗脱液经干燥得到生物碱；其中，所述凝胶过滤层析所用的填料为交联葡聚糖琼脂糖凝胶。
2.根据权利要求1所述的从茶叶中提取生物碱的方法，其特征在于：a步骤中所述乙醇溶液的浓度为1～40wt％。
3.根据权利要求1所述的从茶叶中提取生物碱的方法，其特征在于：a步骤中采用水提取茶叶。
4.根据权利要求1～3任一项所述的从茶叶中提取生物碱的方法，其特征在于：a步骤中所述的过滤为膜过滤，所述浓缩为减压旋蒸浓缩。
5.根据权利要求1～3任一项所述的从茶叶中提取生物碱的方法，其特征在于：b步骤用水洗脱时的流速为0.5～5BV/h。
6.根据权利要求4所述的从茶叶中提取生物碱的方法，其特征在于：b步骤用水洗脱时的流速为0.5～5BV/h。
7.从茶叶中提取儿茶素的方法，其特征在于包括如下步骤：
a、原料前处理：采用水或乙醇溶液提取茶叶，然后过滤，滤液浓缩；
b、凝胶层析分离：浓缩后的滤液上样到凝胶层析柱，然后用水洗脱，收集0.8～2BV的洗脱液，洗脱液经干燥得到生物碱；其中，所述凝胶过滤层析所用的填料为交联葡聚糖琼脂糖凝胶；
c、儿茶素分离：b步骤用水洗脱生物碱后，用1～2BV的乙醇溶液反冲层析柱，收集乙醇溶液，浓缩干燥得儿茶素。
8.根据权利要求7所述的从茶叶中提取儿茶素的方法，其特征在于：a步骤中所述乙醇溶液的浓度为1～40wt％。
9.根据权利要求7所述的从茶叶中提取儿茶素的方法，其特征在于：a步骤中采用水提取茶叶。
10.根据权利要求7所述的从茶叶中提取儿茶素的方法，其特征在于：b步骤用水洗脱时的流速为0.5～5BV/h。
11.根据权利要求7～10任一项所述的从茶叶中提取儿茶素的方法，其特征在于：c步骤中反冲层析柱的乙醇溶液的浓度为20～40wt％。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201010552546 CN102050843B (zh) | 2010-11-22 | 2010-11-22 | 一种从茶叶中提取生物碱、儿茶素的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201010552546 CN102050843B (zh) | 2010-11-22 | 2010-11-22 | 一种从茶叶中提取生物碱、儿茶素的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102050843A CN102050843A (zh) | 2011-05-11 |
| CN102050843B true CN102050843B (zh) | 2013-04-10 |
Family
ID=43955687
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN 201010552546 Active CN102050843B (zh) | 2010-11-22 | 2010-11-22 | 一种从茶叶中提取生物碱、儿茶素的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102050843B (zh) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108014517A (zh) * | 2017-12-20 | 2018-05-11 | 泰州医药城国科化物生物医药科技有限公司 | 一种利用多糖基介质对原小檗碱型生物碱富集纯化的方法 |
| CN113150039A (zh) * | 2021-05-13 | 2021-07-23 | 襄阳嘉达生物科技有限公司 | 一种从绿茶中提取生物碱的方法 |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1557841A (zh) * | 2004-01-14 | 2004-12-29 | 中国农业科学院茶叶研究所 | 从茶叶中综合提取茶多糖、茶多酚、茶氨酸、咖啡碱的方法 |
| CN1310901C (zh) * | 2004-04-02 | 2007-04-18 | 胡绍海 | 高纯茶多酚和单体儿茶素的制备工艺及其装置 |
| PL1728434T3 (pl) * | 2005-05-31 | 2009-05-29 | Kraft Foods R & D Inc | Sposób wytwarzania kompozycji wzbogaconej w polifenol na drodze ekstrakcji łupin kakao |
| CN101386614B (zh) * | 2008-10-24 | 2011-07-20 | 集美大学 | 树脂吸附法制备表没食子儿茶素没食子酸酯的方法 |
| CN101508690B (zh) * | 2009-03-17 | 2011-05-11 | 林峰 | 一种从茶叶中同时提取茶多酚、茶多糖、咖啡因的新方法 |
| CN101665460A (zh) * | 2009-08-07 | 2010-03-10 | 南京中医药大学 | 一种新结构类型化合物莲子心新碱及其分离鉴定方法 |
-
2010
- 2010-11-22 CN CN 201010552546 patent/CN102050843B/zh active Active
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| Extraction and purification of catechins from tea;Hiroshi Horita.;《Proceeding of international symposium on tea science》;19910829;625-629 * |
| Hiroshi Horita..Extraction and purification of catechins from tea.《Proceeding of international symposium on tea science》.1991,625-629. |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN102050843A (zh) | 2011-05-11 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU2019395470B2 (en) | Method for preparing cannabidiol by means of high-speed countercurrent chromatography separation and purification | |
| CN102976909B (zh) | 一种从生姜中提取纯化6-姜酚的方法 | |
| CN103626814B (zh) | 一种从黑果枸杞果实中分离制备花色苷单体的方法 | |
| CN102229632B (zh) | 矢车菊-3-o-葡萄糖苷的制备方法 | |
| CN106588616B (zh) | 一种姜黄素的制备方法 | |
| CN104398669B (zh) | 无咖啡因茶多酚分离纯化的方法 | |
| CN103102375A (zh) | 从连翘叶中复合提取连翘苷、连翘酯苷a和芦丁的方法 | |
| CN103012403B (zh) | 茶叶综合利用深加工方法 | |
| CN104892687A (zh) | 高速逆流色谱分离纯化十大功劳叶中单体化合物的方法 | |
| CN103772339A (zh) | 一种从茶叶下脚料中提取高含量的表没食子儿茶素没食子酸酯的方法 | |
| CN102824394A (zh) | 从淫羊藿中同时提取分离淫羊藿苷和淫羊藿次苷ii的方法 | |
| CN104817445B (zh) | 一种从虎杖中分离纯化大黄素甲醚和大黄素的方法 | |
| CN102050843B (zh) | 一种从茶叶中提取生物碱、儿茶素的方法 | |
| CN109021046A (zh) | 一种从罗汉果茎叶中同时提取槲皮苷和山萘苷的方法 | |
| CN102228488A (zh) | 一种细梗香草总皂苷的制备方法 | |
| CN102040500B (zh) | 一种黄腐酚和黄酮类化合物的萃取分离方法 | |
| CN102464693B (zh) | 一种人参皂苷Re的提取分离方法 | |
| CN103479751A (zh) | 联合提取枇杷花中三萜酸、多酚和多糖的方法 | |
| CN102225122B (zh) | 无咖啡因茶多酚及其制备方法 | |
| CN103601771A (zh) | 一种从白刺果实中分离制备花色苷单体的方法 | |
| CN101658598B (zh) | 从泽泻中提取并富集泽泻总三萜酮醇类组分的方法 | |
| CN104262231B (zh) | 从白刺种子中提取分离l-色氨酸的方法 | |
| CN108101923B (zh) | 一种光甘草定单体的分离提纯方法 | |
| CN102180934A (zh) | 一种土贝母苷甲的制备方法 | |
| CN101348489A (zh) | 缬草提取物环烯醚萜酯类化合物 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| ASS | Succession or assignment of patent right |
Owner name: NT TESTING TECHNOLOGY CO., LTD. Free format text: FORMER OWNER: SICHUAN ZHONGCE TECHNOLOGY INVESTMENT CO., LTD. Effective date: 20131012 |
|
| C41 | Transfer of patent application or patent right or utility model | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20131012 Address after: 610021 Sichuan city of Chengdu province Chenghua District Yushuang Road No. 10 China Testing Technology Research Institute comprehensive building two floor Patentee after: NIMTT MEASUREMENT AND TESTING TECHNOLOGY CO., LTD. Address before: Chengdu City, Sichuan province Chenghua District 610021 Ring Road East three section Yushuang Road No. 10 Patentee before: Sichuan Zhongce Technology Investment Co., Ltd. |