CN101780153A - 一种猪用中药组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种猪用中药组合物及其制备方法和应用。该组合物由木蓝6～18重量份，鸡血七4～12重量份，香薷5～15重量份的原料药组成，该组合物的制备方法是将香薷蒸馏，收集蒸馏液；将蒸馏后的残渣、残液加入木蓝，鸡血七煎煮2～3次，合并煎液浓缩至稠状，乙醇调至醇浓度60％～70％，沉淀、过滤，浓缩后的药液再加乙醇调至醇浓度75％～80％，沉淀、过滤、滤液浓缩，加蒸馏水冷藏沉淀，过滤、浓缩；将香薷的蒸馏液与木蓝、鸡血七的提取浓缩液合并。该中药组合物用于制备治疗猪蓝耳病、圆环病毒病、伪狂犬病、仔猪白痢病、仔猪副伤寒、猪丹毒和仔猪水肿病的中兽药物，副作用小，使用安全方便。

Description

一种猪用中药组合物及其制备方法和应用

技术领域：

本发明属于中药制药领域，涉及一种猪用中药组合物，本发明还涉及该中药组合物的制备方法及该中药组合物在制备治疗猪蓝耳病、猪圆环病毒病和猪伪狂犬病的中兽药中的应用。

背景技术：

近年来广泛流行的猪传染病，往往是2种或2种以上病原继发、并发的原因。常见的病原有猪蓝耳病病毒、猪圆环病毒、猪伪狂犬病病毒等，给诊断和防治带来很大困难。母猪感染蓝耳病病毒、圆环病毒、伪狂犬病病毒后，造成母猪繁殖障碍(母猪流产、产死胎、弱仔等)。仔猪感染蓝耳病病毒、伪狂犬病病毒后，死亡率非常高。仔猪感染圆环病毒后，虽然死亡率不高，但仔猪生长发育停滞，均给养猪生产造成很大损失，这些猪病有的还无疫苗预防接种，西药又无治疗作用。我国中药资源丰富，现代医学研究结果表明，许多中药含有丰富的多糖类、生物碱类、有机酸类、甙类、挥发油类等物质，用这些物质制成的中药制剂用于动物，可具有激活免疫细胞，增强免疫功能，抗病毒、抗细菌、抗应激的作用，发明人探索一种治疗猪蓝耳病、猪圆环病毒病和伪狂犬病等疾病的猪中兽药组合物，效果显著，迄今未见有本发明的同类药物防治猪传染病的报道。

发明内容：

本发明的目的在于提供一种猪用中药组合物。

本发明另一个目的是提供上述猪用中药组合物的制备方法。

本发明还有一个目的是提供上述猪用中药组合物在制备治疗猪蓝耳病、猪圆环病毒病、伪狂犬病、仔猪白痢病、仔猪副伤寒、猪丹毒和仔猪水肿病的中兽药物中的应用。

本发明的目的是通过下列技术措施来实施的：

一种猪用中药组合物，该组合物由下列重量份的原料药制成：木蓝6～18重量份，鸡血七4～12重量份，香薷5～15重量份。

上述组合物优选由下列重量份的原料药组成：木蓝6～10重量份，鸡血七5～8重量份，香薷7～9重量份。

上述猪用中药组合物是通过下列步骤制备得到的：

a、将香薷加蒸馏水浸泡，蒸馏，收集蒸馏液，备用：

b、向蒸馏后的残渣、残液中加入木蓝、鸡血七煎煮2～3次，合并煎液后浓缩至稠状，加乙醇调至醇浓度为60％～70％，充分搅拌混匀，沉淀，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加乙醇调至醇浓度为75％～80％，搅匀，沉淀，过滤，滤液回收乙醇后再浓缩至无醇味，药液加蒸馏水冷藏沉淀，过滤，滤液浓缩得到木蓝和鸡血七的提取浓缩液；

c、将香薷蒸馏液与“b”步骤得到的木蓝和鸡血七的提取浓缩液合并，制成适当剂型。

上述猪用中药组合物优选制备剂型是注射液和口服液。

上述猪用中药组合物的制备方法，该方法包括下列步骤：

a、将香薷加蒸馏水浸泡，蒸馏，收集蒸馏液，备用；

b、向蒸馏后的残渣、残液中加入木蓝、鸡血七煎煮2～3次，合并煎液后浓缩至稠状，加乙醇调至醇浓度为60％～70％，充分搅拌混匀，沉淀，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加乙醇调至醇浓度为75％～80％，搅匀，沉淀，过滤，滤液回收乙醇后再浓缩至无醇味，药液加蒸馏水冷藏沉淀，过滤，滤液浓缩得到木蓝和鸡血七的提取浓缩液；

c、将香薷蒸馏液与“b”步骤得到的木蓝和鸡血七的提取浓缩液合并，制成适当剂型。

所述的猪用中药组合物的制备方法，具体可以按下列步骤制备：

a、加香薷药材总重3～4倍的蒸馏水浸泡24～30小时后蒸馏，收集蒸馏液，再将蒸馏液重蒸馏，收集重蒸液，备用；

b、向蒸馏后的残渣、残液中加入木蓝、鸡血七并添加三味药材总重量4～5倍量的蒸馏水，浸泡24～30小时后煎煮3次，每次煮沸后维持0.5～1小时，合并煎液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％乙醇调至醇浓度为60％～70％，充分搅拌混匀，沉淀，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加95％乙醇调至醇浓度为75％～80％，搅匀沉淀，过滤，滤液回收乙醇再浓缩至无醇味，药液加蒸馏水冷藏沉淀，过滤，滤液浓缩得到木蓝和鸡血七的提取浓缩液；

c、将香薷蒸馏液与木蓝和鸡血七的提取浓缩液合并，得浓度为每mL含1～2g生药量的药液，调pH7.0，制成注射液或口服液。

该猪用中药组合物在治疗猪蓝耳病、猪圆环病毒病、伪狂犬病等猪疾病中应用具有显著疗效，可应用于制备治疗猪蓝耳病、猪圆环病毒病、伪狂犬病、仔猪白痢病、仔猪副伤寒、猪丹毒和仔猪水肿病的中兽的药物。

本发明的有益效果：本发明吸取中兽医学精髓，木蓝Indigofera tinctoria L.清热解毒、凉血止血，主治湿热病。鸡血七Polygonum amplexicaule D.Don var.sinense Oliv有清热解毒、活血舒筋、行气止痛、止血生肌作用。木蓝与鸡血七还有抗菌、抗病毒作用。香薷为唇形科植物石香薷Mosla chinensis Maxim或江香薷Mosla chinensis“jiangxiangru”的干燥地上部分，性味辛，微温，具有祛暑解表、化湿和中、理气止痛、解表止痒的功能。药理研究表明，香薷的挥发油或水煎剂对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、链球菌、炭疽杆菌等均有显著抗菌作用，并对机体非特异性免疫和特异性免疫功能有显著增强作用。本发明不但对猪猪蓝耳病、伪狂犬病有很好的防治作用，对猪圆环病毒病、仔猪白痢病、仔猪副伤寒、猪丹毒和仔猪水肿病也有很好的疗效，3种药物配伍，达到标本兼治的作用。

下面就药效实验进一步说明本发明的疗效。

一、本发明体外抗猪伪狂犬病病毒试验研究

1、试验鸡胚  10日龄非免鸡胚，购自仪征市大仪种鸡场。

2、伪狂犬病容A株AV25毒株由  中国兽医药品监察所提供，毒株用生理盐水稀释，接种非免鸡胚，收集尿囊液，供试验用。鸡胚尿囊液的HA效价为6log₂。

3、药品  本试验以本发明组合物为试验药品；利巴韦林为西药对照药品，由济南利民制药有限公司生产，配成0.05g/mL浓度。鞣酸由上海凌锋化学试剂有限公司生产。

4、实验动物和红细胞的制备  成年Balb/c小鼠，购于扬州大学实验动物中心。红细胞的制备：用眼科剪剪去小鼠眼球，暴露眼底血管，采血数滴于加有抗凝剂的离心管中，用PBS洗涤3次，然后用PBS配成10％红细胞，与1/40000浓度鞣酸溶液等体积均匀混合，于37℃作用1小时离心，再用PBS洗涤3次，以1500r/min离心，每次5min，使用时加PBS配成0.5％红细胞悬液。

5、试验分组  10日龄鸡胚64枚，随机分成4组，具体分组情况见表1。

表1鸡胚分组情况

6、试验方法

(1)最小致死量测定  将病毒尿囊液稀释不同倍数，接种非免鸡胚，得出胚胎最小致死量。经过测定，鸡胚病毒尿囊液最小致死量的稀释度为1∶50，正式试验接种稀释度用1∶50的尿囊液。

(2)药物毒性试验  中药原药液用生理盐水作倍比稀释，将中药原液及不同浓度的药液分别接种于4枚10日龄鸡胚尿囊腔中，每只0.2mL，置37℃温箱孵育72小时，每天观察存活情况，鸡胚全部存活的最高药液浓度为正式试验起始浓度，同时设生理盐水对照组，药物对鸡胚毒性试验结果见表2。

表2中药对鸡胚毒性实验结果(n＝4)

★分母为接种胚数，分子为存活胚数。

(3)本发明药物对伪狂犬病病毒增殖的抑制作用测定用1∶50尿囊液的稀释度和表2的药物浓度做为接种的依据。具体方法如下。

试验I组每个鸡胚尿囊腔同时接种本发明药物(按实施例1方法制备得到)0.2mL，病毒稀释液0.1mL。

试验II组每个鸡胚尿囊腔同时接西药0.2mL，病毒稀释液0.1mL。

试验III组每个鸡胚尿囊腔同时接种生理盐水0.2mL，病毒稀释液0.1mL。

上述鸡胚在37℃恒温箱中孵育，每天照蛋2～3次，弃去24小时内死胚。收取72小时内活胚和24～72小时死胚尿囊液，低温保存备用。以血凝(HA)试验检测每组鸡胚尿囊液的病毒滴度。

7、中药对猪伪狂犬病病毒增殖的抑制作用

第I组鸡胚在24～72小时死亡4枚，72小时存活12枚，收集4枚死亡的鸡胚与12枚存活的鸡胚尿囊液，HA滴度为0；

第II组鸡胚在24小时内死亡3枚，弃去。24～72小时死亡9枚，72小时存活4枚，收集9枚死胚与4枚活胚的尿囊液，HA滴度为4log₂；

第III组鸡胚在24小时内死亡4枚，弃去。24～72小时死亡12枚，收集12枚尿囊液，HA滴度为7log₂；

第IV组在72小时内无鸡胚死亡，收集所有活胚尿囊液，HA滴度为0，详细结果见表3。

表3中药对伪狂犬病病毒增殖的抑制作用测定结果

与第III组比较，**P＜0.01

二、本发明对实验性猪伪狂犬病的治疗试验

1、试验动物  购30日龄昆明小鼠两批，第1批30只，用于病毒致死量测定。第2批84只，分成6组，每组14只，即发明预防组与中药治疗组(按实施例1方法制备得到)，西药预防组与治疗组，感染对照组，空白对照组。

2、试验方法

(1)最小致死量测定  用30日龄昆明小鼠30只，，随机分为5组，用经鸡胚复壮的猪伪狂犬病病毒尿囊液进行最小致死量测定。试验结果最小致死量为尿囊液30倍稀释0.2mL/只口服。

(2)接种  空白对照组的小鼠不用药，不接种尿囊液。其余5组的小鼠在同一时间里每只口服经测定最小致死量为1∶30稀释的尿囊液0.2mL。

(3)用药时间  发明预防组接种尿囊液的同时，开始用本发明中药(按实施例1方法制备得到)口服，每只小鼠每次1mL，每天2次，连用5天。发明治疗组在接种尿囊液2天后(出现症状)用药(按实施例1方法制备得到)，每只小鼠每次1mL，每天用药2次，连用5天。西药预防组在接种尿囊液的同时，开始用0.05g/mL的利巴韦林口服，每只1mL，每日2次，连用5天。西药治疗组，在接种尿囊液2天后(出现症状)用药，用0.05g/mL的利巴韦林口服，每只小鼠每次1mL，每天用药2次，连用5天。感染对照组的小鼠只接种尿囊液，不用任何药物，结果见表4。

表4猪伪狂犬病预防与治疗结果               单位：只·％

三、本发明对猪蓝耳病与圆环病毒病的临床治疗结果

2009年12月10日，浙江杭州某规模猪场，有60日龄仔猪86头，出现精神沉郁，食欲减退或废绝。12月11日，体温上升到41℃左右，呼吸困难，全身皮肤发红，腹泻，腹股沟淋巴结肿大。剖检6头，剖检变化：喉头充血肿胀，肺呈点状和斑块状出血，切面呈大理石样变化，肾水肿、出血，呈土黄色。心包膜和胸腔存在大量积液，心脏有大量出血斑。肠系膜淋巴结、腹股沟淋巴结出血。取病料送浙江农科院检查，用RT-PCR(反转录聚合酶链式反应)检测，诊断为猪蓝耳病病毒与圆环病毒感染。立即用本发明药物(按照实施例1方法制备得到)治疗，并用黄芪多糖为对照药物，共治疗4天，每头仔猪每次5mL，每天用药2次，治疗结果见表5。

表5猪蓝耳病与圆环病毒混合感染临床疗效结果          单位：头·％

通过本次临床应用结果看，本发明中药注射液治疗猪蓝耳病、圆环病毒病，疗效比黄芪多糖效果明显。表明本发明中药制剂，治疗猪病毒性传染病有甚高疗效。

四、本发明对猪其它传染病的疗效

本发明(按实施例4方法制备得到)对猪其它传染病的疗效见表6。

表6猪其它传染病的疗效统计              单位：头·％

本发明猪用中药组合物为纯中药配方，副作用小，使用安全方便，吸收快。对病毒与细菌性传染病的治愈率在90％左右，难以产生耐药性，并且避免了兽药残留和社会公害的发生。

具体实施方式：

下面结合具体实施例对本发明作进一步的描述：

实施例1：

组方：木蓝8g，鸡血七6g，香薷8g

具体制备过程如下：

a、将香薷药材加总重量3倍的蒸馏水浸泡24小时，使药材充分膨胀后蒸馏，收集蒸馏液，得到药材总重2倍的蒸馏液，再将蒸馏液重蒸馏1次，收集得到此种药材总重1/2蒸馏液，装瓶灭菌备用。

B、将蒸馏后的残渣与残液加木蓝，鸡血七并添加三味药材总重量4倍的蒸馏水，浸泡24小时后煎煮3次，每次煮沸后维持0.5小时以上，合并煎液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％的乙醇调至乙醇浓度60％，充分搅拌混匀，沉淀48小时以上，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加95％乙醇调至醇浓度75％，搅匀沉淀48小时，过滤，滤液回收乙醇，再浓缩至无醇味，浓缩后得到的药液加药液重量的4倍量蒸馏水冷藏沉淀48小时，过滤，滤液浓缩得到木蓝和鸡血七的提取浓缩液；

C、将香薷蒸馏液与木蓝，鸡血七的提取浓缩液合并，制得浓度为每mL含生药1.5g的药液，调pH7.0，制成注射液或口服液，分装，灭菌即得。

实施例2：

组方：木蓝6g，鸡血七4g，香薷10g

具体制备过程如下：

a、将香薷药材加总重量3倍的蒸馏水浸泡24小时，使药材充分膨胀后蒸馏，收集蒸馏液，得到药材总重2倍的蒸馏液，再将蒸馏液重蒸馏1次，收集得到此种药材总重1/2蒸馏液，装瓶灭菌备用。

B、将蒸馏后的残渣与残液加木蓝，鸡血七并添加三味药材总重量4倍的蒸馏水，浸泡24小时后煎煮3次，每次煮沸后维持0.5小时以上，合并煎液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％的乙醇调至乙醇浓度60％，充分搅拌混匀，沉淀48小时以上，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加95％乙醇调至醇浓度75％，搅匀沉淀48小时，过滤，滤液回收乙醇，再浓缩至无醇味，浓缩后得到的药液加药液重量的4倍量蒸馏水冷藏沉淀48小时，过滤，滤液浓缩得到木蓝和鸡血七的提取浓缩液；

C、将香薷蒸馏液与木蓝，鸡血七的提取浓缩液合并，得浓度为每mL含生药1g的药液，调pH7.0，制成注射液或口服液，分装，灭菌即得。

实施例3：

组方：木蓝12g，鸡血七8g，香薷5g

具体制备过程如下：

a、将香薷药材加总量4倍的蒸馏水浸泡30小时，使药材充分膨胀后蒸馏，收集蒸馏液，得到此药材总重量2倍的蒸馏液，再将蒸馏液重蒸馏1次，收集得到此种药材总重的1/2蒸馏液，装瓶灭菌备用。

B、将蒸馏后的残渣与残液加木蓝，鸡血七并添加三味药材总重量5倍的蒸馏水，浸泡浸泡24小时后煎煮3次，每次煮沸后维持1小时，合并煎液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％乙醇调至乙醇浓度65％，充分搅拌混匀，沉淀60小时，过滤，滤液回收乙醇。回收乙醇后的药液再加95％乙醇调至醇浓度80％，搅匀沉淀48小时，过滤，滤液回收乙醇，再浓缩至无醇味，浓缩后得到的药液加药液重量的2倍量蒸馏水冷藏沉淀24小时，过滤，滤液浓缩得到木蓝和鸡血七的提取浓缩液。

C、将香薷蒸馏液与木蓝，鸡血七的提取浓缩液合并，得浓度为每mL含生药2g的药液，调pH 7.0，制成注射液或口服液，分装，灭菌即得。

实施例4：

组方：木蓝18g，鸡血七12g，香薷15g

具体制备过程如下：

a、将香薷药材加香薷药材总重量3倍的蒸馏水浸泡27小时，使药材充分膨胀后蒸馏，收集蒸馏液，得到此药材总重量2倍的蒸馏液，再将蒸馏液重蒸馏1次，收集得到此种药材总重的1/2蒸馏液，装瓶灭菌备用。

B、将蒸馏后的残渣与残液加木蓝，鸡血七并添加三味药材总药材重量5倍的蒸馏水，浸泡24小时后煎煮3次，每次煮沸后维持1小时，合并煎液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％乙醇调至乙醇浓度70％，充分搅拌混匀，沉淀48小时，过滤，滤液回收乙醇。回收乙醇后的药液再加95％乙醇调至醇浓度80％，搅匀沉淀48小时，过滤，滤液回收乙醇，再浓缩至无醇味，药液加3倍量蒸馏水冷藏沉淀24小时，过滤，滤液浓缩得到木蓝和鸡血七的提取浓缩液。

C、将香薷蒸馏液与木蓝，鸡血七的的提取浓缩液合并，达每mL含生药1.5g的浓度，调pH7.0，制成注射液或口服液，分装，灭菌即得。

Claims (6)

1.一种猪用中药组合物，其特征在于该组合物由下列重量份的原料药组成：木蓝6～18重量份，鸡血七4～12重量份，香薷5～15重量份。

2.根据权利要求1所述的猪用中药组合物，其特征在于该组合物由下列重量份的原料药组成：木蓝6～10重量份，鸡血七5～8重量份，香薷7～9重量份。

3.根据权利要求1或2所述的猪用中药组合物，其特征在于所述的组合物制备的剂型是注射液或口服液。

4.一种权利要求1或2所述的猪用中药组合物的制备方法，其特征在于该方法为：

a、将香薷加蒸馏水浸泡，蒸馏，收集蒸馏液，备用；

b、向蒸馏后得到的残渣、残液中加入木蓝、鸡血七煎煮2～3次，合并煎液后浓缩至稠状，加乙醇调至醇浓度为60％～70％，充分搅拌混匀，沉淀，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加乙醇调至醇浓度为75％～80％，搅匀，沉淀，过滤，滤液回收乙醇后再浓缩至无醇味，药液加蒸馏水冷藏沉淀，过滤，滤液浓缩得到木蓝和鸡血七的提取浓缩液；

c、将香薷蒸馏液与“b”步骤得到的木蓝和鸡血七的提取浓缩液合并，制剂。

5.根据权利要求4所述的猪用中药组合物的制备方法，其特征在于该方法具体按下列步骤制备：

a、加香薷药材总重3～4倍的蒸馏水浸泡24～30小时后蒸馏，收集蒸馏液，再将蒸馏液重蒸馏，收集重蒸液，备用；

b、向蒸馏后得到的残渣、残液中加入木蓝、鸡血七并添加三味药材总重量4～5倍量的蒸馏水，浸泡24～30小时后煎煮3次，每次煮沸后维持0.5～1小时，合并煎液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％乙醇调至醇浓度为60％～70％，充分搅拌混匀，沉淀，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加95％乙醇调至醇浓度为75％～80％，搅匀，沉淀，过滤，滤液回收乙醇再浓缩至无醇味，药液加蒸馏水冷藏沉淀，过滤，滤液浓缩得到木蓝和鸡血七的提取浓缩液；

C、将香薷蒸馏液与木蓝和鸡血七的提取浓缩液合并，得浓度为每mL含1～2g生药量的药液，调药液的pH7.0后，制成注射液或口服液。

6.权利要求1或2所述的猪用中药组合物在制备治疗猪蓝耳病、猪圆环病毒病、伪狂犬病、仔猪白痢病、仔猪副伤寒、猪丹毒和仔猪水肿病的中兽药物中的应用。