CN106361987A - 一种猪用中药组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种猪用中药组合物及其制备方法和应用，该组合物由楮实6～18重量份，大树甘草15～45重量份，刺黄芩9～27重量份，观音竹8～24重量份的原料药制成。该组合物的制备方法是将4种中药混合加水浸泡，煎煮2～3次，合并煎液浓缩至稠状，乙醇调至醇浓度60％～70％，沉淀、过滤，浓缩后的药液再加乙醇调至醇浓度75％～80％，沉淀、过滤、滤液浓缩，加蒸馏水冷藏沉淀，过滤、浓缩，制成所需剂型。该中药组合物用于制备治疗猪蓝耳病、圆环病毒病、伪狂犬病、仔猪副伤寒、猪气喘病和副猪嗜血杆菌病的中兽药物，无明显毒副作用，使用安全方便。

Description

一种猪用中药组合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于中药制药领域，涉及一种猪用中药组合物，本发明还涉及该中药组合物的制备方法及该中药组合物在制备治疗猪蓝耳病、猪圆环病毒病和猪伪狂犬病等传染病的中兽药中的应用。
背景技术
猪的传染性疾病大多是由病毒和细菌混合感染引起的，也有两种或两种以上病毒混合感染的，给诊断和防治带来很大困难。从理论上讲，细菌性传染病可以用抗生素药物治疗，但由于长期、大量与频繁的使用，使很多细菌对抗生素的敏感性降低或产生抗药性。猪的病毒性传染病，目前，除了疫苗免疫接种外，尚无有效的解决方法。我国中药资源丰富，现代医学研究结果表明，许多中药含有丰富的多糖类、生物碱类、有机酸类、甙类、挥发油类等物质，用这些物质制成的中药制剂用于动物，可具有激活免疫细胞，增强免疫功能，抗病毒、抗细菌、抗应激的作用。发明人探索一种治疗猪蓝耳病、猪圆环病毒病和伪狂犬病等传染病的猪中兽药组合物，效果显著，迄今未见有本发明的同类药物防治猪传染病的报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种猪用中药组合物。
本发明另一个目的是提供上述猪用中药组合物的制备方法。
本发明还有一个目的是提供上述猪用中药组合物在制备治疗猪蓝耳病、猪圆环病毒病、伪狂犬病、仔猪副伤寒、猪气喘病和副猪嗜血杆菌病的中兽药物中的应用。
本发明的目的是通过下列技术措施来实施的：
一种猪用中药组合物，该组合物由下列重量份的原料药制成：楮实6～18重量份，大树甘草15～45重量份，刺黄芩9～27重量份，观音竹8～24重量份。
上述组合物优选由下列重量份的原料药组成：楮实6～9重量份，大树甘草15～20重量份，刺黄芩10～15重量份，观音竹9～13重量份。
上述组合物与药学可接受的辅料制成各种制剂，优选剂型是注射液或口服液。
上述猪用中药组合物是通过下列步骤制备得到的：
将楮实、大树甘草、刺黄芩、观音竹混合，加水浸泡后煎煮2～3次，合并煎液后浓缩至稠状，加乙醇调至醇浓度为60％～70％，充分搅拌混匀，沉淀，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加乙醇调至醇浓度为75％～80％，搅匀，沉淀，过滤，滤液回收乙醇后再浓缩至无醇味，药液加蒸馏水冷藏沉淀，过滤，滤液浓缩得到提取浓缩液。
上述猪用中药组合物的制备方法包括下列步骤：
将楮实、大树甘草、刺黄芩、观音竹混合，加药材总重3～4倍的蒸馏水浸泡24～30小时后煎煮2～3次，每次煮沸后维持0.5～1小时，合并煎液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％乙醇调至醇浓度为60％～70％，充分搅拌混匀，沉淀，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加浓度为95％的乙醇调至醇浓度为75％～80％，搅匀，沉淀，过滤，滤液回收乙醇，再浓缩至无醇味，药液加蒸馏水冷藏沉淀，过滤，滤液浓缩得到提取浓缩液，得浓度为每mL含1～2g生药量的药液，调pH7.0，制成注射液或口服液。
该猪用中药组合物在治疗猪蓝耳病、猪圆环病毒病、伪狂犬病等猪传染病中应用，具有显著疗效，可应用于制备治疗猪蓝耳病、猪圆环病毒病、伪狂犬病、仔猪副伤寒、猪气喘病和副猪嗜血杆菌病的中兽药物。
本发明的有益效果：本发明吸取中兽医学精髓，楮实为桑科植物构树Broussonetia papyrifera(L.)vent.的果实，具有滋肾益阴、清肝明目、健脾利水作用。主治肾虚腰膝酸软，阳痿，目昏，目翳，水肿，尿少，抗病毒。大树甘草为茜草科植物裂果金花Schizamussaenda dehiscens(Craib)Li.d的根。具有清热解毒，止咳化痰，利尿消肿。主治肺热咳嗽，咽喉肿痛，肾炎水肿，尿路感染，气管炎，支气管炎。刺黄芩为檗科植物大叶刺黄柏Mahonia Takeda的全株。具有清热、燥湿、解毒作用。主治肺痨，咳嗽，咯血，黄疸，湿热腹泻，目赤肿痛。观音竹为兰科植物舌唇兰Platanthera japonica(Thunb.)Lindl.的带根全株。具有补气润肺，化痰止咳，解毒。主治病后虚弱，肺热咳嗽，痰喘气壅，虚火牙痛，毒蛇咬伤。本发明不但对猪蓝耳病、伪狂犬病、仔猪副伤寒、猪气喘病有很好的防治作用，对猪圆环病毒病和副猪嗜血杆菌病也有很好的疗效，4种药物配伍，达到标本兼治的作用。
下面就药效实验进一步说明本发明的疗效。
一、本发明体外抗猪伪狂犬病病毒试验研究
1、SPF试验鸡胚购自广东新兴大华农禽蛋有限公司。
2、伪狂犬病容A株AV25毒株由中国兽医药品监察所提供，毒株用生理盐水稀释，接种SPF鸡胚，收集尿囊液，供试验用。鸡胚尿囊液的HA效价为6log2。
3、药品本试验以本发明组合物为试验药品；利巴韦林为西药对照药品，由济南利民制药有限公司生产，配成0.05g/mL浓度。鞣酸由上海凌锋化学试剂有限公司生产。
4、实验动物和红细胞的制备成年Balb/c小鼠,购于扬州大学实验动物中心。红细胞的制备：用眼科剪剪去小鼠眼球，暴露眼底血管，采血数滴于加有抗凝剂的离心管中，用PBS洗涤3次，然后用PBS配成10％红细胞，与1/40000浓度鞣酸溶液等体积均匀混合，于37℃作用1小时离心，再用PBS洗涤3次，以1500r/min离心，每次5min,使用时加PBS配成0.5％红细胞悬液。
5、试验分组10日龄鸡胚48枚，随机分成4组，具体分组情况见表1。
表1鸡胚分组情况
6、试验方法
(1)最小致死量测定将病毒尿囊液稀释不同倍数，接种非免鸡胚，得出胚胎最小致死量。经过测定，鸡胚病毒尿囊液最小致死量的稀释度为1∶50，正式试验接种稀释度用1∶50的尿囊液。
(2)药物毒性试验中药原药液用生理盐水作倍比稀释，将中药原液及不同浓度的药液分别接种于3枚10日龄鸡胚尿囊腔中，每只0.2mL，置37.8℃温箱孵育72小时，每天观察存活情况，鸡胚全部存活的最高药液浓度为正式试验起始浓度，同时设生理盐水对照组，药物对鸡胚毒性试验结果见表2。
表2中药对鸡胚毒性实验结果(n＝4)
分母为接种胚数，分子为存活胚数。
(3)本发明药物对伪狂犬病病毒增殖的抑制作用测定用1：50尿囊液的稀释度和表2的药物浓度做为接种的依据。具体方法如下。
试验Ⅰ组每个鸡胚尿囊腔同时接种本发明药物(按实施例1方法制备得到)0.2mL，病毒稀释液0.1mL。
试验Ⅱ组每个鸡胚尿囊腔同时接西药0.2mL，病毒稀释液0.1mL。
试验Ⅲ组每个鸡胚尿囊腔同时接种生理盐水0.2mL，病毒稀释液0.1mL。
上述鸡胚在37.8℃恒温箱中孵育，每天照蛋2～3次，弃去24小时内死胚。收取72小时内活胚和24～72小时死胚尿囊液，低温保存备用。以血凝(HA)试验检测每组鸡胚尿囊液的病毒滴度。
7、中药对伪狂犬病病毒增殖的抑制作用
第Ⅰ组鸡胚在24～72小时死亡1枚，72小时存活11枚，收集1枚死亡的鸡胚与11枚存活的鸡胚尿囊液，HA滴度为0；
第Ⅱ组鸡胚在24～72小时死亡12枚，72小时无存活，收集12枚死胚的尿囊液，HA滴度为5log2；
第Ⅲ组鸡胚在24～72小时死亡12枚，收集12枚尿囊液，HA滴度为7log2；
第Ⅳ组在72小时内无鸡胚死亡，收集所有活胚尿囊液，HA滴度为0，详细结果见表3。
表3中药对伪狂犬病病毒增殖的抑制作用测定结果
与第Ⅲ组比较，**P＜0.01
二、本发明对实验性伪狂犬病的治疗试验
1、试验动物购30日龄昆明小鼠两批，第1批20只，用于病毒致死量测定。第2批60只，分成6组，每组10只，即发明预防组与中药治疗组(按实施例2方法制备得到)，西药预防组与治疗组，感染对照组，空白对照组。
2、试验方法
(1)最小致死量测定用30日龄昆明小鼠20只，随机分为5组，用经鸡胚复壮的伪狂犬病病毒尿囊液进行最小致死量测定。试验结果,最小致死量为尿囊液30倍稀释0.2mL/只口服。
(2)接种空白对照组的小鼠不用药，不接种尿囊液。其余5组的小鼠在同一时间里每只口服经测定最小致死量为1∶30稀释的尿囊液0.2mL。
(3)用药时间发明预防组接种尿囊液的同时，开始用本发明中药(按实施例2方法制备得到)口服，每只小鼠每次1mL，每天2次，连用5天。发明治疗组在接种尿囊液2天后(出现症状)用药(按实施例2方法制备得到)，每只小鼠每次1mL，每天用药2次，连用5天。西药预防组在接种尿囊液的同时，开始用0.05g/mL的利巴韦林口服，每只1mL，每日2次，连用5天。西药治疗组，在接种尿囊液2天后(出现症状)用药，用0.05g/mL的利巴韦林口服，每只小鼠每次1mL，每天用药2次，连用5天。感染对照组的小鼠只接种尿囊液，不用任何药物，结果见表4。
表4伪狂犬病预防与治疗结果 单位：只·％
三、本发明对猪蓝耳病与圆环病毒病的临床治疗结果
2015年12月10日，广西武鸣县城厢镇某规模猪场，有45日龄仔猪116头，出现精神沉郁，食欲减退或废绝。12月12日，体温上升到41℃左右，呼吸困难，全身皮肤发红，腹泻，腹股沟淋巴结肿大。剖检3头，剖检变化：喉头充血肿胀，肺呈点状和斑块状出血，切面呈大理石样变化，肾水肿、出血，呈土黄色。心包膜和胸腔存在大量积液，心脏有大量出血点。肠系膜淋巴结、腹股沟淋巴结出血。取病料送广西大学，用RT-PCR(反转录聚合酶链式反应)检测，诊断为猪蓝耳病病毒与圆环病毒混合感染。立即用本发明药物(按照实施例1方法制备得到)治疗，并用黄芪多糖为对照药物，共治疗4天，每头仔猪每次5mL，每天用药2次，治疗结果见表5。
表5猪蓝耳病与圆环病毒混合感染疗效结果 单位：头·％
通过本次临床应用结果看，本发明中药注射液治疗猪蓝耳病、圆环病毒病，疗效比黄芪多糖效果明显。表明本发明中药制剂，治疗猪病毒性传染病有甚高疗效。
四、本发明对猪其它传染病的疗效
本发明(按实施例4方法制备得到)对猪其它传染病的疗效见表6。
表6猪其它传染病的疗效统计 单位：头·％
本发明猪用中药组合物为纯中药配方，副作用小，使用安全方便，吸收快。对病毒与细菌性传染病的治愈率均在90％以上，且难以产生耐药性，并且避免了兽药残留和社会公害的发生。
五、安全性评价
取ICR小鼠40只，体重在25～30克，按体重随机分组，每组10只，雌雄各半，口服溶液给药(按实施例2制备得到)，给药量分别为0.5mL/只、1mL/只、2mL/只和4mL/只。每天口服2次，连续给药5天，停药后连续观察20天，结果所有小鼠健存，其活动、饮食、毛发、排泄物未发现异常，未见毒性反应。对小鼠口腔和破损皮肤进行刺激性试验，未见有刺激性反应和其它不良反应。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步的描述：
实施例1：
组方：楮实8g，大树甘草17g，刺黄芩11g，观音竹10g
具体制备过程如下：
将楮实、大树甘草、刺黄芩、观音竹混合，加药材总重4倍的蒸馏水浸泡24小时后煎煮3次，每次煮沸后维持0.5小时，合并煎液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％乙醇调至醇浓度为70％，充分搅拌混匀，静置沉淀48小时以上，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加浓度为95％的乙醇调至醇浓度为75％，搅匀，静置沉淀48小时，过滤，滤液回收乙醇，再浓缩至无醇味，向得到的药液中加其4倍量蒸馏水冷藏沉淀48小时，过滤，滤液浓缩，得浓度为每mL含生药1.5g的药液，调pH7.0，制成注射液，分装，灭菌即得。
实施例2：
组方：楮实6g，大树甘草15g，刺黄芩9g，观音竹8g
具体制备过程如下：
将楮实、大树甘草、刺黄芩、观音竹混合，加药材总重3倍的蒸馏水浸泡24小时后煎煮2次，每次煮沸后维持1小时，合并煎液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％乙醇调至醇浓度为60％，充分搅拌混匀，静置沉淀48小时以上，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加浓度为95％的乙醇调至醇浓度为80％，搅匀，静置沉淀48小时，过滤，滤液回收乙醇，再浓缩至无醇味，向得到的药液中加其4倍量蒸馏水冷藏沉淀48小时，过滤，滤液浓缩，得浓度为每mL含生药1g的药液，调pH7.0，制成口服液，分装，灭菌即得。
实施例3：
组方：楮实12g，大树甘草45g，刺黄芩18g，观音竹16g
具体制备过程如下：
将楮实、大树甘草、刺黄芩、观音竹混合，加药材总重4倍的蒸馏水浸泡24小时后煎煮2次，每次煮沸后维持0.5小时，合并煎液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％乙醇调至醇浓度为60％，充分搅拌混匀，静置沉淀48小时以上，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加浓度为95％的乙醇调至醇浓度为75％，搅匀，静置沉淀48小时，过滤，滤液回收乙醇，再浓缩至无醇味，向得到的药液中加其4倍量蒸馏水冷藏沉淀48小时，过滤，滤液浓缩，得浓度为每mL含生药2g的药液，调pH7.0，制成口服液，分装，灭菌即得。
实施例4：
组方：楮实18g，大树甘草30g，刺黄芩27g，观音竹24g
具体制备过程如下：
将楮实、大树甘草、刺黄芩、观音竹混合，加药材总重4倍的蒸馏水浸泡30小时后煎煮2次，每次煮沸后维持1小时，合并煎液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％乙醇调至醇浓度为60％，充分搅拌混匀，静置沉淀48小时以上，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加浓度为95％的乙醇调至醇浓度为75％，搅匀，静置沉淀48小时，过滤，滤液回收乙醇，再浓缩至无醇味，向得到的药液中加其4倍量蒸馏水冷藏沉淀60小时，过滤，滤液浓缩，得浓度为每mL含生药1.5g的药液，调pH7.0，制成注射液，分装，灭菌即得。

Claims (7)

1.一种猪用中药组合物，其特征在于该组合物由下列重量份的原料药制成：楮实6～18重量份，大树甘草15～45重量份，刺黄芩9～27重量份，观音竹8～24重量份。
2.根据权利要求1所述的猪用中药组合物，其特征在于该组合物由下列重量份的原料药制成：楮实6～9重量份，大树甘草15～20重量份，刺黄芩10～15重量份，观音竹9～13重量份。
3.根据权利要求1或2所述的猪用中药组合物，其特征在于所述组合物与药学可接受的辅料制成剂型。
4.根据权利要求3所述的猪用中药组合物，其特征在于所述剂型是注射液或口服液。
5.一种权利要求1或2所述的猪用中药组合物的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤：
将楮实、大树甘草、刺黄芩、观音竹混合，加水浸泡后煎煮2～3次，合并煎液后浓缩至稠状，加乙醇调至醇浓度为60％～70％，充分搅拌混匀，沉淀，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加乙醇调至醇浓度为75％～80％，搅匀，沉淀，过滤，滤液回收乙醇后再浓缩至无醇味，药液加蒸馏水冷藏沉淀，过滤，滤液浓缩得到提取浓缩液。
6.根据权利要求5所述的猪用中药组合物的制备方法，其特征在于该方法具体包括以下步骤：
将楮实、大树甘草、刺黄芩、观音竹混合，加药材总重3～4倍的蒸馏水浸泡24～30小时后煎煮2～3次，每次煮沸后维持0.5～1小时，合并煎液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％乙醇调至醇浓度为60％～70％，充分搅拌混匀，沉淀，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加浓度为95％的乙醇调至醇浓度为75％～80％，搅匀，沉淀，过滤，滤液回收乙醇，再浓缩至无醇味，药液加蒸馏水冷藏沉淀，过滤，滤液浓缩得到提取浓缩液，得浓度为每mL含1～2g生药量的药液，调pH7.0，制成注射液或口服液。
7.权利要求1或2所述的猪用中药组合物在制备治疗猪蓝耳病、猪圆环病毒病、伪狂犬病、仔猪副伤寒、猪气喘病和副猪嗜血杆菌病的中兽药物中的应用。
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