CN107375925A - 一种防治家禽呼吸道疾病的复合制剂的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种防治家禽呼吸道疾病的中兽药卵黄免疫球蛋白复合制剂的制备方法，包括以下步骤：a.制备中兽药粉剂或中兽药提取物粉剂；b.制备卵黄免疫球蛋白粉剂；c.按照质量比1：1混合步骤a和b的粉剂。所述中兽药包括但不限于野马追、板蓝根、麻黄、桔梗、穿心莲、鱼腥草、黄芪、葶苈子和茯苓。所述卵黄免疫球蛋白是使用市购或自制的呼吸道病原微生物单价或多价疫苗(如鸡新城疫－传染性支气管炎－禽流感三联灭活疫苗或鸡新城疫一传染性法氏囊一传染性支气管炎三联疫苗)免疫蛋鸡后得到的。

Description

一种防治家禽呼吸道疾病的复合制剂的制备方法

技术领域

本发明涉及兽药与饲料添加剂领域，具体地涉及一种防治家禽呼吸道疾病的复合制剂的制备方法。

背景技术

鸡上呼吸道感染是指鸡上呼吸道受病原微生物侵袭所致的疾病。鸡常见呼吸道病主要由病毒、细菌和败血霉形体等引起，其临床的主要特征为流泪、流鼻涕、咳嗽、气喘、罗音和呼吸困难、眼肿。常见有传染性喉气管炎和传染性支气管炎(冠状病毒属传染性支气管炎病毒引起) 等，该病多发生于春季的3～6月份，病传播快，感染率高，死亡率与环境、管理及鸡的个体健康状况有关，一般其死亡率一般在10％～40 ％，继发性感染死亡率则更高，产蛋率下降20％左右，甚者下降50％，此类疾病对鸡的生产性能，甚至对养鸡业的发展危害极大。据国外学者的一项专题调查统计，南美北部的养鸡户中，呼吸道疾病的治疗支出费用占鸡所有疾病总支出的59％，其中死亡支出为46.56％，药物支出占治疗费用的65％。中兽医认为，造成呼吸道病主要是外感病邪所致，治疗原则:清热解毒、通利咽喉、止咳化痰。

家禽呼吸道病主要是指家禽呼吸道感染性病症，如家禽慢性呼吸道病、传染性支气管炎、传染性喉气管炎、曲霉菌病等。这些常见、多发的传染性疾病，严重的影响了家禽生长发育，以至造成大批死亡，给家禽生产带来巨大损失。防治此类疾病，由于多采用抗生素和化学药物，且由于应用的不规范、不合理，经长期应用后，除了药物毒性较大容易造成药物中毒以外，还导致抗药性和药物在禽蛋产品中的残留，被人摄食后，屡有中毒事件发生，以至造成人群慢性中毒、致畸、致癌等不良后果。对此，国内外均越来越引起高度重视。2001年，国家农业部颁发的《无公害食品标准》中明确规定减少化学药品和抗生素的使用，禁止使用激素或其他有激素作用的物质及催眠镇静类药物等等，因此，以高效、低毒、低残留为主攻方向，研制微生物制剂、开发现代中兽药及发展和充分利用生物技术搞好畜禽疾病防治已成为当前兽药界的努力方向和热门话题。运用中兽药不但可防治鸡病毒性呼吸道疾病，而且对细菌性疾病、真菌性疾病等也具有显著疗效。今后应继续开展中兽药防治鸡呼吸道疾病的研究，通过分析、分离和提取其主要有效成分，为人工合成提供研究基础。对中兽药抗病毒、抗菌以及防治机理方面进行进一步的研究。

野马追为菊科植物轮叶泽兰(Eupatorium)多年生草本，分布于华东、华南、华北、东北及中国台湾等地。盛产于江苏、安徽等地区，其它各省也有分布，药源丰富，并可引种野生为家种。中医药理论认为野马追有化痰止咳、清热解毒、利尿消肿、降压的功能，用于感冒、咳嗽多痰、头疼、扁桃体炎、菌病、高血压。常用于治疗慢性气管炎，支气管炎，高血压等疾病。野马追中含有丰富的微量元素，主要以Fe、Al、 Si为主，其次为Sr、Ti、Mn、Ba，再次为Zn、B、Pb、V、Cu。据报道，中药中的微量元素常与有机酸、氨基酸、肽等成分络合，产生协同作用而增强其疗效。另外，尽管微量元素在人的机体内只占总质量的万分之一以下，但它们在整个生命活动中却发挥了巨大作用。微量元素参与机体各种酶及活性物质的代谢，维持机体内环境的平衡。经过对野马追活性筛选提示乙酸乙酯提取部位为主要活性部位，并从中分离得到6 种黄酮类化合物，结构鉴定为：棕矢车菊素、山奈酚、槲皮素、黄芪苷、三叶豆苷、金丝桃苷。

卵黄免疫球蛋白(Egg Yolk Immunoglobulin,lgY)具有增强机体抗菌、免疫功能，采用生物技术从产蛋鸡卵黄中制备特异性多克隆免疫球蛋白，具有成本低，产量高的特点。IgY能够凝聚、吞噬和中和细菌及毒素成分，增强免疫系统功能，预防呼吸道等疾病，促进营养吸收，用于家禽的保健和疾病治疗等。

近年来，在畜禽呼吸道疾病防治方面，中兽药的研究开发和生物技术的应用取得了明显的进展。但大多药物作用重在治标，呼吸道疾病又多有反复发作，往往呈现防不胜防之势。有些生物制品能增强动物免疫功能，然而目前应用还不广。利用中兽药防治家禽呼吸道病或者利用免疫球蛋白等生物制剂增强家禽自身免疫功能的研究只见于单项研究报告，而中兽药与免疫球蛋白有机结合治疗禽呼吸道病鲜有报导。

由于家禽呼吸道病的血清型较多，临床免疫预防效果不好，治疗上也没有特效药物。采取被动免疫不失为一种有效的措施，为此发明人进行了中兽药卵黄免疫球蛋白复合制剂对蛋鸡传染性支气管炎治疗效果的应用试验。使用中兽药与卵黄免疫球蛋白结合治疗家禽呼吸道疾病，能达到低毒、低残留甚至无毒无残留的目的，其禽蛋产品可为绿色和无公害食品，从而保证了食品的安全性，有利于冲破一些国家对我国禽蛋产品出口的制约，赢得国际市场，扩大对外贸易。

发明内容

本发明提供了一种防治家禽呼吸道疾病的中兽药卵黄免疫球蛋白复合制剂的制备方法，包括以下步骤：

a.制备中兽药粉剂或中兽药提取物粉剂；

b.制备卵黄免疫球蛋白粉剂；

c.按照质量比1：1混合步骤a和b的粉剂。

在一个实施方案中，所述步骤a的中兽药包括但不限于野马追。

在一个实施方案中，所述步骤a的中兽药包括但不限于野马追、板蓝根、麻黄、桔梗、穿心莲、鱼腥草、黄芪、葶苈子和茯苓。

在一个实施方案中，野马追、板蓝根、麻黄、桔梗、穿心莲、鱼腥草、黄芪、葶苈子和茯苓的质量比为1～10:1:1:1:1:1:1:1:1。

在一个实施方案中，所述步骤a的中兽药粉剂是通过微粉碎机粉碎后混合制备的。

在一个实施方案中，所述步骤a的中兽药提取物粉剂是通过乙酸乙酯浸泡、超声、浓缩和冷冻干燥后制备的。

在一个实施方案中，所述步骤b的卵黄免疫球蛋白粉剂是使用市购或自制的呼吸道病原微生物单价或多价疫苗(如鸡新城疫－传染性支气管炎－禽流感三联灭活疫苗或鸡新城疫一传染性法氏囊一传染性支气管炎三联疫苗)免疫蛋鸡后得到的，将免疫蛋鸡得到的鸡蛋(例如乙酸 -乙酸钠缓冲液法)提取水溶性成分，经超滤和离子交换纯化，再经冷冻干燥即可得到卵黄免疫球蛋白粉剂。

在一个实施方案中，所述复合制剂可以为粉剂、水剂、颗粒剂、气雾剂或其他剂型。

在一个实施方案中，所述复合制剂为粉剂，可以配制为水溶液或其他适合的载体溶液以灌服方式给药。

在一个实施方案中，所述复合制剂为气雾剂，可以通过喷洒以吸入方式给药，适于大规模的给药。

发明人筛选了中药处方，制备了特异性卵黄免疫球蛋白，确定了卵黄免疫球蛋白与中兽药最佳配比，制备了气雾剂；进行了抑菌、抑病毒实验，进行了呼吸道病临床治疗试验。

鸡传染性呼吸道疾病主要有鸡传染性喉气管炎、传染性支气管炎、慢性呼吸道病、传染性鼻炎以及禽大肠杆菌病等。目前治疗病毒引起的呼吸道疾病尚没有特效的西药，对细菌引起的呼吸道疾病，主要使用抗菌素如高力米先、绿消炎宝、红霉素、卡那霉素等，可根据不同的病因，采用不同的治疗方法对症治疗。但细菌对抗菌素易产生抗药性，且抗菌素毒副作用较大。近年来，我国兽医工作者根据传统兽医学的理论，运用中兽药防治鸡呼吸道疾病，尤其是病毒性呼吸道疾病取得了显著成绩。

中兽药具有清热解毒类、固涩类、补虚类、理血类、泻下类等功效，中兽药多数对畜禽病原体具有一定的抑制作用。在对一些中兽药及其方剂进行体外抑菌及抗病毒实验中，发现许多中兽药对细菌有一定的抑制作用，其中包括许多对西药已产生耐药性的菌株。中兽药含有丰富的免疫活性物质，如维生素和高级不饱和脂肪酸兼有营养和促进免疫的作用。中兽药主要机制就是对动物机体的免疫机能进行调节，调节机体自身的抗病机制。中兽药是免疫促进剂，在疫苗接种前后或同时应用时，可使机体的免疫应答及早出现，维持时间延长，免疫水平提高，增强机体抗病力的中药制剂或提取物。

中兽药制剂采用纯天然草药配制而成，卵黄免疫球蛋白是利用高免鸡蛋作为抗体生产原料，利用蛋鸡作为适于蛋黄抗体生产的反应器，研究卵黄免疫球蛋白对鸡的免疫治疗，保证抗体来源的持续广泛性和规模生产的经济性。鸡蛋黄作为特异卵黄免疫球蛋白的来源有许多优点。如：母鸡易于饲养，费用不高；收集鸡蛋方便，无需抽动物血，无损伤，符合现代动物保护规则；产生有效免疫反应所需抗原量小，尤其是高度保守的哺乳动物蛋白质对种系发生学上距离较远的禽类通常有较强的免疫原性。

试验表明，中兽药与卵黄免疫球蛋白配合使用后，肉鸡对传染性支气管炎的抵抗力有明显增强。抗体消长规律同时表明这类复合制剂与气雾剂在肉鸡体内的有效期为18～21d。在疫病流行地区，商品肉鸡使用一次中兽药与卵黄免疫球蛋白复合制剂与气雾剂，即可控制传染性支气管炎的发生和流行，同时相应鸡肉也能符合卫生检疫要求。

中兽药卵黄免疫球蛋白制剂及其气雾剂均具有无毒副作用、无耐药性、无药物残留等优点，为抗生素替代品。利用该制剂生产的家禽产品，具有无污染、无残留、安全、优质的特点。同时，该项技术在生产中应用不仅解决了在集约化、高密度饲养环境下鸡群防病、治病的难题，减少了机体的药物残留和饲养过程中有害物质对环境的污染，而且能向市场提供安全优质的产品，提高了禽类胴体的品质，使消费者吃上放心禽产品，确保市民饮食的安全，社会效益和生态效益十分显著。

中兽药与卵黄免疫球蛋白复合制剂与气雾剂是一种高效安全的绿色添加剂。

中兽药与卵黄免疫球蛋白复合制剂与气雾剂效果确实，安全性良好，无副作用，可用于预防传染性支气管炎，降低死亡率，提高经济效益。在食品安全日益重视的情况下，迫切需要能够有效代替抗生素等的绿色添加剂。中兽药与卵黄免疫球蛋白复合制剂与气雾剂正满足这样的要求，符合发展绿色畜牧业的需要。因此，中药卵黄免疫球蛋白复合制剂与气雾剂必将具有广阔的开发应用前景。

附图说明

图1示出了本发明的技术路线。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明进行详细说明。但应理解，以下实施例仅是对本发明实施方式的举例说明，而非是限定本发明的范围。

实施例

实施例1：中兽药的提取物和粉剂制备

发明人对治疗家禽呼吸道病的中兽药进行筛选、临床验证，确定了基础的处方为野马追，最优选为野马追、板蓝根、麻黄、桔梗、穿心莲、鱼腥草、黄芪、葶苈子和茯苓的质量比为1～10:1:1:1:1:1:1:1:1。利用超声波技术与真空冷冻干燥工艺对中药成分进行浓缩、提取，制备了中兽药提取物。

将野马追烘干后，用微粉碎机粉碎后混合，置于具塞三角瓶中，加入5倍体积量的提取溶剂乙酸乙酯，再利用超声波提取其有效成分，提取前浸泡时间是60-90min。超声波频率采用20-40kHz，超声波处理 30min，过滤后，滤液减压浓缩，再加入5倍体积量的提取溶剂，超声波处理15min，过滤，滤液减压浓缩，如此重复2次，合并3次提取物的浓缩物，即得到粗提物，经过低温冷冻干燥机或喷雾干燥制成野马追提取物粉剂。

将野马追烘干后，用微粉碎机粉碎后混合，制备野马追粉剂。

按照野马追、板蓝根、麻黄、桔梗、穿心莲、鱼腥草、黄芪、葶苈子和茯苓等中草药1～10:1:1:1:1:1:1:1:1的比例混合，利用微粉碎机粉碎后混合，置于具塞三角瓶中，加入5倍体积量的提取溶剂乙酸乙酯，再利用超声波提取其有效成分，提取前浸泡时间是60-90min。超声波频率采用20-40kHz，超声波处理30min，过滤后，滤液减压浓缩，再加入5倍体积量的提取溶剂，超声波处理15min，过滤，滤液减压浓缩，如此重复2次，合并3次提取物的浓缩物，即得到粗提物，经过低温冷冻干燥机或喷雾干燥制成中兽药提取物粉剂。

按照野马追、板蓝根、麻黄、桔梗、穿心莲、鱼腥草、黄芪、葶苈子和茯苓等中草药1～10:1:1:1:1:1:1:1:1的比例混合，利用微粉碎机粉碎后混合，制成中兽药粉剂。

实施例2：鸡卵黄免疫球蛋白粉剂的研制

选择健康产蛋母鸡，使用市购或自制的呼吸道病原微生物单价或多价疫苗(如鸡新城疫－传染性支气管炎－禽流感三联灭活疫苗或鸡新城疫一传染性法氏囊一传染性支气管炎三联疫苗)对蛋鸡胸部肌肉分别多点注射，0.5mL/只，每周免疫一次，三次免疫后，免疫球蛋白水平达到高效价后，收集鸡蛋。

提取卵黄免疫球蛋白(以乙酸-乙酸纳缓冲液方法为例)，鸡蛋先用清水洗去蛋壳表面的污物，浸入0.5％新洁尔灭溶液中，浸泡10分钟，再用75％的酒精冲洗，无菌打破蛋壳，倒入消毒好的容器中，用灭菌勺分离出卵黄放入无菌容器。1体积蛋黄加9体积的乙酸-乙酸纳缓冲液 (0.05mol/L,pH为5.2)，搅拌15min，4℃，静置10小时。离心(4℃， 10000g，25min)，取上清液，即取水溶性成分(含有卵黄免疫球蛋白的水溶性蛋白组分water-soluble fraction，WSF)，提取液中蛋白质分子量在3.6kDa-338kDa。

应用平板式膜超滤技术与DEAE离子交换层析法对上述上清液中的卵黄免疫球蛋白(IgY)进行分离纯化。首先用平板式膜组件对其超滤，分析了各种因素的影响，确定分子截留量为100kDa，操作压力差为 0.12MPa、进料温度为30℃，pH5.2，截留液抗体回收率达到91.89％，纯度为86％；最后，经DEAE离子交换层析得到高纯度的IgY。

将所分离的卵黄免疫球蛋白进行真空冷冻干燥，制备了卵黄免疫球蛋白粉剂。

实施例3：中兽药卵黄免疫球蛋白复合制剂最佳配比选择

按不同配比，进行中兽药与鸡卵黄免疫球蛋白最佳配比的研究。

按完全随机设计，将5周龄未免疫AA肉公鸡200只按体重随机分为4个试验组和1个对照组，每组40只鸡。按照实施例1所述的中兽药提取物粉剂与实施例2所述的卵黄免疫球蛋白的不同配比(质量比) 分为试验组I、II、III和Ⅳ，配比分别为1:1，1:0.8，1:0.5，1:0.2。试验组每只鸡每天灌服1.5ml中兽药卵黄免疫球蛋白复合制剂的水溶液，对照组灌服1.5ml生理盐水作安慰剂。

试验表明，试验组每天灌服1.5ml中兽药卵黄免疫球蛋白复合制剂，对传染性支气管炎的保护率可达到87.5％～97.5％。而灌服生理盐水的对照组肉鸡的保护率仅为12.5％。中兽药卵黄免疫球蛋白配合使用后，肉鸡对传染性支气管炎的抵抗力有明显增强。抗体消长规律同时表明这类复合制剂在肉鸡体内的有效期为18～21d。在疫病流行地区，商品肉鸡使用一次中兽药卵黄免疫球蛋白复合制剂，即可控制传染性支气管炎的发生和流行，同时相应鸡肉也能符合卫生检疫要求。

中兽药卵黄免疫球蛋白复合制剂有提高肉鸡生长性能的潜力。在有效防治传染性支气管炎的同时，中兽药卵黄免疫球蛋白复合制剂对肉鸡的生长有一定的促进作用。试验结果表明，各组间生长性能指标没有显著差异，但试验各组饲料转化率都要高于对照组。这也揭示使用复合制剂能提高肉鸡生产的经济效益。卵黄免疫球蛋白和中兽药在提高机体抗病能力的同时，也有效保证了肉鸡的正常生长。中兽药能作为促生长添加剂使用也已被很多研究所证明。

综合考虑抗传染性支气管炎和促生长的能力，四种配比的中兽药卵黄免疫球蛋白复合制剂中以1：1比例的效果最佳。中兽药卵黄免疫球蛋白以1：1配比后，对传染性支气管炎的保护率高达97.5％，饲料转化效率也最高(3.52±0.21)，抗体效价水平也较高。1：0.8配比的效果次之，1：0.5，1：0.2的效果相对较差。

实施例4：中兽药卵黄免疫球蛋白复合制剂对肉鸡禽流感的保护效果

为研究中兽药卵黄免疫球蛋白复合制剂的效用，观察不同配比中兽药卵黄免疫球蛋白复合制剂在AA肉公鸡日粮中的应用。按照实施例1 所述的中兽药提取物粉剂与实施例2所述的卵黄免疫球蛋白的不同配比分为试验组I、II、III和Ⅳ，配比(质量比)分别为1:1，1:0.8，1:0.5， 1:0.2。试验组每只鸡每天灌服1.5ml中兽药卵黄免疫球蛋白复合制剂的水溶液，对照组灌服1.5ml生理盐水作安慰剂。

试验表明，经禽流感病毒攻毒后每天灌服1.5ml中兽药卵黄免疫球蛋白复合制剂，对禽流感的保护率可达到87.5％～97.5％。而没有灌服复合制剂的肉鸡的保护率仅为12.5％。中兽药卵黄免疫球蛋白配合使用后，肉鸡对禽流感的抵抗力有明显增强。抗体消长规律同时表明这类复合制剂在肉鸡体内的有效期为18～21d。在疫病流行地区，商品肉鸡使用一次中兽药卵黄免疫球蛋白复合制剂，即可控制禽流感的发生和流行，同时相应鸡肉也能符合卫生检疫要求。

实施例5：中兽药与鸡卵黄免疫球蛋白二联组合药物新剂型一气雾剂的研制

使用实施例1所述的中兽药提取物粉剂与卵黄免疫球蛋白粉剂按照其干粉质量比1：1，1：0.8，1：0.5，1：0.2的比例制成复合气雾剂，分别为样品I、II、III和Ⅳ，以及二个对照组，包括全部为中兽药提取物粉剂的气雾剂，全部为免疫球蛋白的气雾剂。

实施例6：不同配比的中兽药卵黄免疫球蛋白气雾剂体外抑菌试验

本试验利用实施例5所制备的不同配比的中兽药卵黄免疫球蛋白气雾剂对禽大肠杆菌分离株(0422)、大肠杆菌(C84010)、大肠杆菌O2 型(C84002)、大肠杆菌O78型(C84008)菌株等进行药敏试验。结果表明，4种配比的复合制剂对各型禽大肠杆菌都有一定的抗菌活性，MIC (最低抑菌浓度，minimum inhibitory contentration)在15.63g/L至 125g/L之间，中兽药卵黄免疫球蛋白为1：1时禽大肠杆菌敏感性最高，其余各组对不同血清型的禽大肠杆菌也有较高的敏感性，而两个对照组效果都明显不如复合制剂组。

试验证明：中兽药卵黄免疫球蛋白气雾剂可减弱或制止大肠杆菌培养平板上该菌的生长。其防止大肠杆菌附着于肠细胞的这类特性，在抗沙门氏菌方面也得到了证实。卵黄免疫球蛋白与中兽药之间表现出协同作用，各组都有较好的抑菌作用，其中中兽药与卵黄免疫球蛋白按1： 1进行配合显示出最大的配伍优势。卵黄免疫球蛋白和中兽药复合气雾剂是一种新型、高效的绿色制剂，将具有广阔的应用前景。

实施例7：中兽药卵黄免疫球蛋白复合气雾剂的体外抑制病毒实验

对实施例5所制备的不同配比的中兽药卵黄免疫球蛋白气雾剂体外抑制病毒的能力进行比较，以确定中兽药卵黄免疫球蛋白的最佳配比。抑病毒实验采用两种方法：病毒致细胞病变抑制实验和血凝抑制实验，以产生50％细胞病变的最高药物稀释度或不产生凝血的最小药物浓度为其最小抑病毒的浓度。样品I对腺病毒7型(AdV7)的最小抑制浓度为1/640，作用弱于样品II，而对其它病毒的作用都最强。样品IV除对腺病毒3型(AdV3)的最小抑制浓度为1/640，对其余病毒的抑制作用在4种样品中最弱。

体外抑制病毒实验表明，中兽药卵黄免疫球蛋白配比为1：1的复合气雾剂对各病毒的抑制效果最强，最能有效防治呼吸道疾病。急性上呼吸道感染有70％～80％由病毒引起，实验所选7种病毒为呼吸道感染最常见的病毒，尤其是合胞病毒，对呼吸道病毒感染具有一定代表性。

本实验是相同条件下的体外抑病毒试验，在临床实际应用中，因给药途径、剂量、作用方式的不同，疗效自然有一定差异，但早期能及时气雾吸入，继之静点粉针剂，疗效应当很好。

实施例8：中药免疫球蛋白复合气雾剂治疗传染性支气管炎试验

本试验研究观察实施例5所制备的不同配比的中兽药卵黄免疫球蛋白气雾剂对蛋鸡传染性支气管炎的治疗效果。选用体重相近的20周龄伊莎蛋鸡200只，采用单因素随机试验，随机分为5个组，每个组设5 个重复，每个重复8只鸡。5个组分别作为试验组I、II、III和Ⅳ与对照组，试验组分别吸入中兽药卵黄免疫球蛋白配比为1：1，1：0.8，1： 0.5，1：0.2的复合气雾剂，连用7天观察后对免疫器官指数的影响，经鸡传染性支气管炎病毒攻毒后观察各组免疫保护效果，并在临床上加以观察利用。试验结果表明，中兽药卵黄免疫球蛋白复合气雾剂(配比 1：1)能促进蛋鸡法氏囊发育，对传染性支气管炎有很好的免疫保护效果。吸入复合气雾剂对传染性支气管炎有较好的保护作用，保护率在 85％～100％范围内。其中，以试验组I(配比1：1)效果最优，保护率达100％。利用复合气雾剂(配比为1：1)进行紧急治疗，结果对三个鸡场发病鸡的治愈率分别为91.16％、96.02％、91.22％，表现出较好的治疗效果。

Claims (8)

1.一种防治家禽呼吸道疾病的中兽药卵黄免疫球蛋白复合制剂的制备方法，包括以下步骤：

a.制备中兽药粉剂或中兽药提取物粉剂；

b.制备卵黄免疫球蛋白粉剂；

c.按照质量比1：1混合步骤a和b的粉剂。

2.权利要求1的方法，所述步骤a的中兽药包括但不限于野马追。

3.权利要求1的方法，所述步骤a的中兽药包括但不限于野马追、板蓝根、麻黄、桔梗、穿心莲、鱼腥草、黄芪、葶苈子和茯苓。

4.权利要求3的方法，所述野马追、板蓝根、麻黄、桔梗、穿心莲、鱼腥草、黄芪、葶苈子和茯苓的质量比为1～10:1:1:1:1:1:1:1:1。

5.权利要求2或3或4的方法，所述步骤a的中兽药粉剂是通过微粉碎机粉碎后混合制备的；所述步骤a的中兽药提取物粉剂是通过乙酸乙酯浸泡、超声、浓缩和冷冻干燥后制备的。

6.权利要求5的方法，所述步骤b的卵黄免疫球蛋白粉剂是使用市购或自制的呼吸道病原微生物单价或多价疫苗免疫蛋鸡后得到的，将免疫蛋鸡得到的鸡蛋提取水溶性成分，经超滤和离子交换纯化，再经冷冻干燥即可得到卵黄免疫球蛋白粉剂。

7.权利要求5的方法，所述复合制剂可以为粉剂、水剂、颗粒剂、气雾剂或其他剂型。

8.权利要求6或7的方法，所述复合制剂为粉剂，可以配制为水溶液或其他适合的载体溶液以灌服方式给药。