CN109432390A - 一种用于鸡传染性喉气管炎的中药肽、药物及其制备方法 - Google Patents

一种用于鸡传染性喉气管炎的中药肽、药物及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及动物医药技术领域，具体公开一种用于鸡传染性喉气管炎的中药肽、药物及其制备方法。所述中药肽由如下重量份数的原料组分经酶解制得：金银花9‑27份；大青叶9‑27份；黄芪4.5‑13.5份；蒲公英4.5‑13.5份；甘草3‑9份，所述酶解过程中所用的酶为淀粉酶和蛋白酶。本发明提供的中药肽，提高中药的利用度，并与诸药中的活性物质进行螯合，吸收利用高，疗效可靠，作用迅速，安全环保，无药物残留且不易产生耐药性，能够用于鸡传染性喉气管炎。

Description

一种用于鸡传染性喉气管炎的中药肽、药物及其制备方法
技术领域
本发明涉及动物医药技术领域，尤其涉及一种用于鸡传染性喉气管炎的中药肽、药物及其制备方法。
背景技术
鸡传染性喉气管炎是由传染性喉气管炎病毒引起的一种急性、接触性上部呼吸道传染病，各种年龄及品种的鸡均可感染，其特征是呼吸困难、咳嗽和咳出含有血样的渗出物，剖检时可见喉部、气管粘膜肿胀、出血和糜烂。本病一旦传入鸡群，则迅速传开，感染率可达90％～100％，死亡率一般在10％～20％或以上，最急性型死亡率可达50％～70％，急性型一般在10％～30％之间，慢性或温和型死亡率约5％。该病一年四季均可发生，在我国较多地区发生和流行，危害养鸡业的发展。
鸡传染性喉气管炎的病原属疱疹病毒I型，病毒核酸为双股DNA，由呼吸器官及鼻分泌物污染的垫草、饲料、饮水及用具可成为传播媒介，人及野生动物的活动也可机械地传播。目前，治疗该病常用方法为中药和抗病毒西药，如采用硫氰酸红霉素和林可霉素饮水并配合中药治疗。这种治疗方法中多存在如下问题，中药的利用度低且药效作用缓慢，抗病毒药物使鸡体容易产生耐药性，鸡粪对环境也造成抗生素污染，肉和蛋易检测出药残。
因此，研发一种疗效确切、作用迅速、临床效果显著、毒副作用小且无药物残留和无耐药性产生的用于防治鸡传染性喉气管炎的中药肽具有重要的意义。
发明内容
针对现有防治鸡传染性喉气管炎过程中存在的中药的利用度低且药效作用缓慢，抗病毒药物易产生耐药性，药物残留及污染环境等问题，本发明提供一种用于鸡传染性喉气管炎的中药肽、药物及其制备方法。
为达到上述发明目的，本发明实施例采用了如下的技术方案：
一种用于鸡传染性喉气管炎的中药肽，由如下重量份数的原料组分经酶解制得：金银花9-27份；大青叶9-27份；黄芪4.5-13.5份；蒲公英4.5-13.5份；甘草3-9份，所述酶解过程中所用的酶为淀粉酶和蛋白酶。
进一步地，所述的用于鸡传染性喉气管炎的中药肽，由如下重量份数的原料组分经酶解制得：金银花12-21份；大青叶12-21份；黄芪7-11份；蒲公英7-11份；甘草5-7份，所述酶解过程中所用的酶为淀粉酶和蛋白酶。
进一步地，所述的用于鸡传染性喉气管炎的中药肽，由如下重量份数的原料组分经酶解制得：金银花18份；大青叶18份；黄芪10份；蒲公英8份；甘草6份，所述酶解过程中所用的酶为淀粉酶和沙棘蛋白酶。
本发明中药组分的药理如下：
金银花味甘，性寒，归肺、胃经，清热解毒，具有抑菌和杀菌、抗炎解毒作用，有助于清除体内有毒物质。
大青叶味苦，性寒，归肝，心、胃、脾经，清热解毒，凉血消斑，具有抗菌消炎、抗病毒等功效，与金银花共同作用可以有效鸡传染性喉气管炎。
黄芪味甘，性微温，归肺、脾、肝、肾经，补气固表，托毒排脓，利尿，生肌，具有增强免疫功能、促进机体代谢、抗菌及抑制病毒作用。
蒲公英味苦甘，性寒，入肝、胃经，富含蒲公英素、蒲公英醇、蛋白质以及微量元素和维生素等，具有清热解毒、抗菌及治疗上呼吸道感染等功效。
甘草味甘，性平，归心、肺、脾、胃经，具有补脾益气、清热解毒、祛痰止咳及缓急止痛作用，用于调和诸药。
相对于现有技术，本发明提供的用于鸡传染性喉气管炎的中药肽，以金银花、大青叶、黄芪、蒲公英、甘草为原料经酶解制得，使中药中的蛋白质水解为分子量为500-1000Da的多肽，提高中药的利用度，并与诸药中的活性物质进行螯合，其中，金银花、大青叶中的活性物质具有抗菌消炎、抗病毒作用，黄芪、蒲公英及甘草中的活性物质有助于增强清热解毒功效，增强免疫功能。螯合活性物质的中药肽，吸收利用率高，疗效可靠，作用迅速，安全环保，无药物残留且不易产生耐药性，能够用于鸡传染性喉气管炎。
本发明还提供了上述用于鸡传染性喉气管炎的中药肽的制备方法，包括以下步骤：
(1)根据所述的用于鸡传染性喉气管炎的中药肽的原料组成称取各中药组分；
(2)将所述金银花、大青叶及甘草进行粉碎处理，以水为溶剂进行第一提取处理，得到第一提取液；将所述黄芪、蒲公英进行粉碎处理，以水为溶剂并调节pH至8-10，进行第二提取处理，得到第二提取液，合并提取液，得到中药提取液；
(3)将所述中药提取液升温至56-58℃，加入淀粉酶，酶解0.5-1.5h，调节温度至35-45℃，加入沙棘蛋白酶，酶解3.0-4.0h，升温对酶进行灭活处理，得到酶解液；
(4)将所述酶解液进行过滤处理，得到滤液，滤液进行离心处理，得到离心液；
(5)所述离心液经浓缩处理，喷雾干燥，得到用于鸡传染性喉气管炎的中药肽。
进一步地，步骤(2)中，所述第一提取处理方法为将金银花、大青叶及甘草采用超声波辅助提取，采用上述三种组分总质量8-10倍量纯化水，于90℃-95℃超声提取0.5-1.5h；所述第二提取处理是将黄芪和蒲公英采用两种组分总质量10-15倍量的纯化水，于30-50℃提取1.5-2.5h。
进一步地，所述淀粉酶加入量为中药组分总质量的1.0％-1.5％，将提取物中的多糖转化为低聚糖，便于机体吸收，同时也为沙棘蛋白酶中的益生菌提供养分用于蛋白的发酵得到多肽。
进一步地，所述沙棘蛋白酶加入量为中药组分总质量的1.0％-1.5％，沙棘蛋白酶是沙棘全果原浆与复合24株益生菌和酶(酶菌共存菌种)发酵而成，沙棘蛋白酶酶解中药蛋白的同时，其中的益生菌可进行蛋白质发酵有助于得到多肽。
进一步地，所述灭活处理温度为90-95℃，时间为10-15min。
相对于现有技术，本发明提供的用于鸡传染性喉气管炎的中药肽的制备方法，提取蛋白质的同时保留了中药中的有效活性物质，并利用淀粉酶将提取物中的多糖转化为低聚糖，便于机体吸收，同时也为沙棘蛋白酶中的益生菌提供养分用于蛋白的发酵，与沙棘蛋白酶的水解共同作用，增加中药多肽的得率，得到中药肽，该方法的生产周期短、成本低、不产生任何有毒有害物质，安全环保。
本发明还提供了包括上述用于鸡传染性喉气管炎的中药肽的用于鸡传染性喉气管炎的药物，其剂型为散剂、口服液、颗粒剂、片剂、丸剂或膏剂，可以应用于鸡传染性喉气管炎。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1
一种用于鸡传染性喉气管炎的中药肽，由如下重量份数的原料组分经酶解制得：金银花900g；大青叶900g；黄芪450g；蒲公英450g；甘草300g，所述酶解过程中所用的酶为淀粉酶30g和沙棘蛋白酶30g。
上述用于鸡传染性喉气管炎的中药肽的制备方法，包括以下步骤：
(1)根据所述的用于鸡传染性喉气管炎的中药肽的原料组成称取各中药组分；
(2)将所述金银花、大青叶及甘草进行粉碎处理后，采用17L纯化水，于95℃超声提取0.5h，得到第一提取液；将所述黄芪、蒲公英进行粉碎处理后，加入9L的纯化水，调节pH至8，并于50℃提取1.5h。得到第二提取液，合并提取液，得到中药提取液22L；
(3)将所述中药提取液升温至56℃，加入30g的淀粉酶，酶解1.5h，调节温度至35℃，加入30g的沙棘蛋白酶，酶解4.0h，升温至90℃对酶进行灭活处理15min，得到酶解液；
(4)将所述酶解液用卧锣离心机进行过滤处理，得到滤液，滤液再用三相离心机以18000r/min进行离心处理30min，得到离心液；
(5)所述离心液用双效浓缩器浓缩至相对密度为1.25(60℃)的中药肽浸膏，将浸膏进行喷雾干燥处理，控制进风温度为80℃，出风温度为50℃，物料温度为60℃，雾化压力为0.6MPa，得到用于鸡传染性喉气管炎的中药肽。
实施例2
一种用于鸡传染性喉气管炎的中药肽，由如下重量份数的原料组分经酶解制得：金银花1200g；大青叶1200g；黄芪700g；蒲公英700g；甘草500g，所述酶解过程中所用的酶为淀粉酶52g和沙棘蛋白酶52g。
上述用于鸡传染性喉气管炎的中药肽的制备方法，包括以下步骤：
(1)根据所述的用于鸡传染性喉气管炎的中药肽的原料组成称取各中药组分；
(2)将所述金银花、大青叶及甘草进行粉碎处理后，采用29L纯化水，于90℃超声提取0.5h，得到第一提取液；将所述黄芪、蒲公英进行粉碎处理后，加入21L的纯化水，调节pH至9，并于40℃提取2.0h。得到第二提取液，合并提取液，得到中药提取液45L；
(3)将所述中药提取液升温至58℃，加入52g的淀粉酶，酶解1.0h，调节温度至40℃，加入52g的沙棘蛋白酶，酶解3.5h，升温至95℃对酶进行灭活处理10min，得到酶解液42L；
(4)将所述酶解液用卧锣离心机进行过滤处理，得到滤液，滤液再用三相离心机以18000r/min进行离心处理30min，得到离心液；
(5)所述离心液用双效浓缩器浓缩至相对密度为1.20(60℃)的中药肽浸膏，将浸膏进行喷雾干燥处理，控制进风温度为90℃，出风温度为60℃，物料温度为55℃，雾化压力为0.4MPa，得到的用于鸡传染性喉气管炎的中药肽。
实施例3
一种用于鸡传染性喉气管炎的中药肽，其特征在于，由如下重量份数的原料组分经酶解制得：金银花1800g；大青叶1800g；黄芪1000g；蒲公英800g份；甘草600g，所述酶解过程中所用的酶为淀粉酶72g和沙棘蛋白酶70g。
上述用于鸡传染性喉气管炎的中药肽的制备方法，包括以下步骤：
(1)根据所述的用于鸡传染性喉气管炎的中药肽的原料组成称取各中药组分；
(2)将所述金银花、大青叶及甘草进行粉碎处理后，采用42L纯化水，于95℃超声提取0.5h，得到第一提取液；将所述黄芪、蒲公英进行粉碎处理后，，加入27L的纯化水，调节pH至9，并于40℃提取2.0h。得到第二提取液，合并提取液，得到中药提取液67L；
(3)将所述中药提取液升温至56℃，加入72g的淀粉酶，酶解1.0h，调节温度至35℃，加入70g的沙棘蛋白酶，酶解3.5h，升温至90℃对酶进行灭活处理15min，得到酶解液65L；
(4)将所述酶解液用卧锣离心机进行过滤处理，得到滤液，滤液再用三相离心机以18000r/min进行离心处理30min，得到离心液；
(5)所述离心液用双效浓缩器浓缩至相对密度为1.25(60℃)的中药肽浸膏，将浸膏进行喷雾干燥处理，控制进风温度为85℃，出风温度为55℃，物料温度为55℃，雾化压力为0.5MPa，得到用于鸡传染性喉气管炎的中药肽。
实施例4
一种用于鸡传染性喉气管炎的中药肽，由如下重量份数的原料组分经酶解制得：金银花2100g；大青叶2100g；黄芪1100g；蒲公英1100g；甘草700g，所述酶解过程中所用的酶为淀粉酶106g和沙棘蛋白酶106g。
上述用于鸡传染性喉气管炎的中药肽的制备方法，包括以下步骤：
(1)根据所述的用于鸡传染性喉气管炎的中药肽的原料组成称取各中药组分；
(2)将所述金银花、大青叶及甘草进行粉碎处理后，采用38L纯化水，于90℃超声提取1.5h，得到第一提取液；将所述黄芪、蒲公英进行粉碎处理后，加入26L的纯化水，调节pH至10，并于50℃提取1.5h。得到第二提取液，合并提取液，得到中药提取液62L；
(3)将所述中药提取液升温至58℃，加入106g的淀粉酶，酶解0.5h，调节温度至45℃，加入106g的沙棘蛋白酶，酶解3.0h，升温至95℃对酶进行灭活处理10min，得到酶解液60L；
(4)将所述酶解液用卧锣离心机进行过滤处理，得到滤液，滤液再用三相离心机以18000r/min进行离心处理30min，得到离心液；
(5)所述离心液用双效浓缩器浓缩至相对密度为1.23(65℃)的中药肽浸膏，将浸膏进行喷雾干燥处理，控制进风温度为80℃，出风温度为55℃，物料温度为60℃，雾化压力为0.7MPa，得到用于鸡传染性喉气管炎的中药肽。
实施例5
一种用于鸡传染性喉气管炎的中药肽，由如下重量份数的原料组分经酶解制得：金银花2700g；大青叶2650g；黄芪1350g；蒲公英1300g；甘草900g，所述酶解过程中所用的酶为淀粉酶130g和沙棘蛋白酶100g。
上述用于鸡传染性喉气管炎的中药肽的制备方法，包括以下步骤：
(1)根据所述的用于鸡传染性喉气管炎的中药肽的原料组成称取各中药组分；
(2)将所述金银花、大青叶及甘草进行粉碎处理后，采用50L纯化水，于95℃超声提取1.0h，得到第一提取液；将所述黄芪、蒲公英进行粉碎处理后，加入32L的纯化水，调节pH至9，并于45℃提取1.5h。得到第二提取液，合并提取液，得到中药提取液81L；
(3)将所述中药提取液升温至58℃，加入130g的淀粉酶，酶解0.5h，调节温度至45℃，加入100g的沙棘蛋白酶，酶解3.0h，升温至95℃对酶进行灭活处理10min，得到酶解液79.5L；
(4)将所述酶解液用卧锣离心机进行过滤处理，得到滤液，滤液再用三相离心机以18000r/min进行离心处理30min，得到离心液；
(5)所述离心液用双效浓缩器浓缩至相对密度为1.21(60℃)的中药肽浸膏，将浸膏进行喷雾干燥处理，控制进风温度为90℃，出风温度为65℃，物料温度为55℃，雾化压力为0.4MPa，得到用于鸡传染性喉气管炎的中药肽。
本发明实施例1-5中提供的用于鸡传染性喉气管炎的中药肽，加入常规辅料，按照常规方法制成散剂、口服液、颗粒剂、片剂、丸剂或膏剂剂型的用于鸡传染性喉气管炎的药物。
为了更好的说明本发明的技术方案，下面还通过对比例和本发明的实施例做进一步的对比。
对比例1
实施例1中的大青叶组分替换为板蓝根，其他组分与制备过程与实施例1相同。
对比例2
将实施例1中的沙棘蛋白酶替换为木瓜蛋白酶，其他组分与制备过程与实施例1相同。
为了更好的说明本发明实施例提供的鸡传染性喉气管炎的中药肽的特性，下面将实施例1-5及对比例1-2制备得到的用于鸡传染性喉气管炎的中药肽进行临床动物实验。
实验例
安全性试验：
选取20日龄健康鸡30只，将本发明实施例3所得的中药肽拌料饲喂或饮水10天，日服用量为：10mg/只，用药期间，健康鸡没有任何不良或异常行为表现，采食饮水正常，体重增加和空白对照组(即健康不给药组)相比差异不显著。
临床试验：
临床实验动物选用实验室确诊为鸡传染性喉支气管炎的患病鸡。将患病鸡隔离单独饲养，饲喂全价饲料，并随机分为8组(空白对照组和给药组)，每组100只，8组饲养环境完全相同，实验共进行10天；空白对照组不做任何处理，给药组喂食实施例1-5及对比例1-2中所得的中药肽，日服用量为：10mg/只，拌料饲喂或饮水，每日1次，连用10日。口服后通过胃肠道吸收达到治疗疾病的目的。临床疗效判断标准：治疗后病鸡精神、食欲恢复正常，咳嗽、喘气、流涕等症状完全消失、湿性罗音消失、呼吸恢复正常，剖检无特征性病理变化，为痊愈，计算治愈率。治疗过程中，因感染死亡，试验结束时虽未死亡但剖检仍可见喉头和气管有出血、渗出的病理变化，计为无效，根据无效数占治疗总数比例计算无效率。死亡率＝死亡数/试验数×100％，治愈率＝治愈数/试验数×100％。表1为实验结束时的结果。
表1
从表1可以看出，自然感染鸡在用本发明中药组合物治疗过程中，呼吸困难的症状逐渐减轻或消失；精神、采食、饮水逐渐恢复正常或基本正常；食欲明显增强，粪便也转为正常。到用药后的第10天，所有患病鸡只基本全部治愈，治愈率≥90％。通过治疗试验证明，本发明实施例提供的用于鸡传染性喉气管炎的中药肽对鸡传染性喉炎有很好的疗效。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换或改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种用于鸡传染性喉气管炎的中药肽，其特征在于，由如下重量份数的原料组分经酶解制得：金银花9-27份；大青叶9-27份；黄芪4.5-13.5份；蒲公英4.5-13.5份；甘草3-9份，所述酶解过程中所用的酶为淀粉酶和蛋白酶。
2.如权利要求1所述的用于鸡传染性喉气管炎的中药肽，其特征在于，由如下重量份数的原料组分经酶解制得：金银花12-21份；大青叶12-21份；黄芪7-11份；蒲公英7-11份；甘草5-7份，所述酶解过程中所用的酶为淀粉酶和蛋白酶。
3.如权利要求1所述的用于鸡传染性喉气管炎的中药肽，其特征在于，由如下重量份数的原料组分提取并酶解制得：金银花18份；大青叶18份；黄芪10份；蒲公英8份；甘草6份，所述酶解过程中所用的酶为淀粉酶和沙棘蛋白酶。
4.权利要求1～3任一项所述的用于鸡传染性喉气管炎的中药肽的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)根据所述的用于鸡传染性喉气管炎的中药肽的原料组成称取各中药组分；
(2)将所述金银花、大青叶及甘草进行粉碎处理，以水为溶剂进行第一提取处理，得到第一提取液；将所述黄芪、蒲公英进行粉碎处理，以水为溶剂并调节pH至8-10，进行第二提取处理，得到第二提取液，合并提取液，得到中药提取液；
(3)将所述中药提取液升温至56-58℃，加入淀粉酶，酶解0.5-1.5h，调节温度至35-45℃，加入沙棘蛋白酶，酶解3.0-4.0h，升温对酶进行灭活处理，得到酶解液；
(4)将所述酶解液进行过滤处理，得到滤液，滤液进行离心处理，得到离心液；
(5)所述离心液经浓缩处理，喷雾干燥，得到用于鸡传染性喉气管炎的中药肽。
5.如权利要求4所述的用于鸡传染性喉气管炎的中药肽的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，所述第一提取处理方法为将金银花、大青叶及甘草采用超声波辅助提取，采用上述三种组分总质量8-10倍量纯化水，于90℃-95℃超声提取0.5-1.5h；所述第二提取处理是将黄芪和蒲公英采用两种组分总质量10-15倍量的纯化水，于30-50℃提取1.5-2.5h。
6.如权利要求4所述的用于鸡传染性喉气管炎的中药肽的制备方法，其特征在于：所述淀粉酶加入量为中药组分总质量的1.0％-1.5％。
7.如权利要求4所述的用于鸡传染性喉气管炎的中药肽的制备方法，其特征在于：所述沙棘蛋白酶加入量为中药组分总质量的1.0％-1.5％。
8.如权利要求4所述的用于鸡传染性喉气管炎的中药肽的制备方法，其特征在于：所述灭活处理温度为90-95℃，时间为10-15min。
9.一种用于鸡传染性喉气管炎的药物，其特征在于包括权利要求1～3任一项所述的用于鸡传染性喉气管炎的中药肽。
10.如权利要求9所述的用于鸡传染性喉气管炎的药物，其特征在于：其剂型为散剂、口服液、颗粒剂、片剂、丸剂或膏剂。
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