CN109045127A - 一种药物组合物在防治鸡传染性支气管炎的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种药物组合物在防治鸡传染性支气管炎的应用。该药物组合物由刺红珠17～51重量份，爪虎耳草6～18重量份，花楸茎皮9～27重量份，黑面神15～45重量份的原料药制成。该组合物的制备方法是将刺红珠、爪虎耳草、花楸茎皮、黑面神混合浸泡、煎煮2～3次，合并煎液浓缩至稠状，乙醇调至醇浓度60％～70％，沉淀、过滤，浓缩后的药液再加乙醇调至醇浓度75％～80％，沉淀、过滤、滤液浓缩，加水冷藏沉淀，过滤、浓缩。该药物组合物用于制备防治鸡传染性支气管炎的中兽药物，效果好，使用安全方便。

Description

一种药物组合物在防治鸡传染性支气管炎的应用

技术领域

本发明属于中兽药制药领域，涉及一种药物组合物在制备防治鸡传染性支气管炎的药物中的应用。

背景技术

鸡传染性支气管炎的病原是传染性支气管炎病毒，该种病毒主要影响蛋鸡和肉鸡养殖业。在临床上以咳嗽、气管啰音、打喷嚏、肾脏病变、产蛋率下降为主要特征。由于本病具有高度传染性，且病原有多个血清型，免疫接种效果具有一定限制性。采用抗病毒药物治疗如金刚烷胺、病毒灵等，虽具有一定的效果，但相关政策禁止抗病毒西药用于动物疫病防治；使用干扰素治疗，费用较高，使治疗成本提高；市场上销售的治疗鸡传染性支气管炎的中药散剂、口服液虽有一定的疗效，但却存在着容易复发和不能根治的弊病。

发明内容

本发明的目的在于提供一种药物组合物在制备防治鸡传染性支气管炎的中兽药物中的应用。

本发明的目的是通过下列技术措施来实施的：

一种药物组合物在制备防治鸡传染性支气管炎的药物中的应用，该组合物由下列重量份的原料药制成：刺红珠17～51重量份，爪虎耳草6～18重量份，花楸茎皮9～27重量份。黑面神15～45重量份。

上述组合物由下列重量份的原料药制成：刺红珠19～21重量份，爪虎耳草8～10重量份，花楸茎皮10～12重量份，黑面神17～20重量份。

上述药物组合物与药学可接受的辅料制成制剂，所述的制剂剂型优选口服液。上述防治鸡传染性支气管炎的药物组合物的制备方法包括以下步骤：

将刺红珠、爪虎耳草、花楸茎皮、黑面神混合加水浸泡，煎煮2～3次，合并煎液后浓缩至稠状，加乙醇调至醇浓度为60％～70％，充分搅拌混匀，沉淀，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加乙醇调至醇浓度为75％～80％，搅匀，沉淀，过滤，滤液回收乙醇后再浓缩至无醇味，药液加水冷藏沉淀，过滤，滤液浓缩。

上述防治鸡传染性支气管炎的药物口服液的制备方法具体如下：

将刺红珠、爪虎耳草、花楸茎皮、黑面神药材总重3～4倍的水浸泡24～30小时后煎煮3次，每次煮沸后维持0.5～1小时，合并煎液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％乙醇调至醇浓度为60％～70％，充分搅拌混匀，沉淀，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加95％乙醇调至醇浓度为75％～80％，搅匀沉淀，过滤，滤液回收乙醇再浓缩至无醇味，药液加水冷藏沉淀，过滤，滤液浓缩得浓度为每mL含1～2g生药量的药液，调pH7.0，制成口服液。

该药物组合物在防治鸡传染性支气管炎的传染病中应用，具有显著疗效，可应用于制备防治鸡传染性支气管炎的中兽药物。

本发明的有益效果：本发明吸取中兽医学精髓；刺红珠(BerbcherisdictyophyllaFranch)主治口疮，咽喉痛，目赤，泄泻，刀伤，消化不良。爪虎耳草(SaxifrragaunguiculataEngl)功效：清热解毒。主治胆囊炎，肝炎，发热，痈毒。花楸(Sorbuspohuashanensis(Hance)Hedl)茎皮，本发明主要使用花楸的茎皮，功效：镇咳祛痰，健脾利水。主治慢性支气管炎，肺痨，痢疾。黑面神(Breyaiafruticasa(L.)Hook.L.为大戟科植物黑面神属植物黑面神Breyniafruacosa(IArm.)Hook.￡的干燥嫩枝叶，微苦，凉；有小毒。归脾、胃经，。主治吐泻，湿疹，缠腰火丹，皮炎，乳汁不通。本发明组合物以刺红珠为君药，对鸡的生理机能进行综合调理，提高机体免疫力、抗病力和抗病毒等方面具有独到之处。将四味药物配伍，对鸡传染性支气管炎有显著的防治作用，达到标本兼治的目的。

下面就本发明的效果进一步说明本发明的疗效。

一、本发明体外抗鸡传染性支气管炎病毒试验

1、药品：

(1)本发明样品1：按照实施例1方法制备得到，用生理盐水配成每毫升药液含1g生药的浓度。

(2)本发明样品2：按照实施例3方法制备得到，用生理盐水配成每毫升药液含1g生药的浓度。

(3)西药对照药品：将金刚烷胺粉剂稀释成0.2mg/mL溶液，灭菌。

2、鸡传染性支气管炎毒株由扬州大学提供，经非免鸡胚传2代复壮，鸡胚尿囊液的毒价7log₂，经测定，半数致死量为1：230万倍稀释。

3、非免鸡胚9-11日龄，购自江苏仪征大仪种鸡场。

4、试验方法

(1)药物毒性实验将本发明样品1和本发明样品2分别用生理盐水稀释，将原液及不同浓度的药液分别接种于3只10日龄鸡胚的尿囊腔中，每只0.2mL，置37.8℃温箱孵育72h，每天观察存活情况，鸡胚全部存活的最高药液浓度为正式实验起始浓度，同时设生理盐水对照组，具体分组情况见表1。药物对鸡胚毒性实验结果见表2，结果表明本发明样品1和2原液及不同浓度稀释液接种的鸡胚均存活，因此本发明样品1和2对鸡胚无毒性

表1实验分组情况

编号	组别	数量(枚)	处理
				1	试验I组	10	本发明样品1的原液和不同浓度稀释液
2	试验II组	10	本发明样品2的原液和不同浓度稀释液
				3	试验III组	10	金刚烷胺
4	空白对照组	10	接种生理盐水

表2中药对鸡胚毒性实验结果(n＝4)

*分母为接种胚数，分子为存活胚数。

(2)本发明药物对鸡传染性支气管炎病毒的抑制作用测定，具体方法：

试验I组每个鸡胚尿囊腔同时接种本发明样品1原液0.2mL，病毒稀释液0.1mL。

试验Ⅱ组每个鸡胚尿囊腔同时接种本发明样品2原液0.2mL，病毒稀释液0.1mL。

试验III组每个鸡胚尿囊腔同时接种0.2mg/mL的金刚烷胺0.2mL，病毒稀释液0.1mL。

病毒对照组每个鸡胚尿囊腔同时接种生理盐水0.2mL，病毒0.1mL。

空白对照组不接种病毒，不给药。

上述鸡胚在37.8℃恒温箱中继续孵化，每天照蛋2～3次，弃去24h内死胚，收取24～72h死胚和72h活胚的尿囊液。低温保存备用。测定病毒效价前，将鸡胚尿囊液经5000r/min离心后，取上清液，加入10％胰蛋白酶，37℃水浴作用3h，以血凝(HA)实验检测鸡胚尿囊液的病毒效价，进行统计学分析。本发明药物对鸡传染性支气管炎病毒增殖的影响结果见表3。病毒对照组与试验III组在24-72h鸡胚全部死亡，试验I组与II组鸡胚在24-72h死亡数分别为1和2个；试验I组和II组鸡胚的死亡数和HA效价均显著低于病毒对照组与试验III组。

表3本发明药物对鸡传染性支气管炎病毒增殖的抑制作用测定结果

与阳性对照组比较：*P<0.05，**P<0.01

二、本发明对实验性鸡传染性支气管炎的治疗试验

1、试验动物本试验用20日龄艾维茵肉鸡360只。

2、鸡传染性支气管炎毒株由扬州大学提供，鸡胚尿囊液的HA效价为7log₂。

3.试验分组随机分为12组，每组30只，即本发明样品1(按实施例2制备)预防组与治疗组，本发明样品2(按实施例4制备，使用时稀释成每毫升含1g生药浓度)预防组与治疗组，西药预防组与治疗组，感染对照组，空白对照组，4种单味药材对照(刺红珠、爪虎耳草、花楸茎皮、黑面神4种单味药材口服液制备方法分别同实施例2，只是制备时仅取一味药材，使用时稀释成每毫升含1g生药浓度)。

4、试验方法(1)先测定尿囊液致死量，经测定尿囊液的最小致死量为130倍稀释。正式试验时每只鸡滴鼻100倍稀释后的尿囊液0.2mL。

(2)操作空白对照组的鸡不用药，不接种尿囊液，其余11组的鸡在同一时间里每只滴鼻稀释后的尿囊液0.2mL。

(3)用药方法与疗效本发明样品1预防组在接种尿囊液的同时，开始用本发明样品1口服，每只鸡每次1mL，每天用药2次，连用4d。本发明样品1治疗组在接种尿囊液4d后(出现病状)用药，每只鸡每次1mL，每天用药2次，连用4d。本发明样品2预防组在接种尿囊液的同时，用本发明样品2口服，每只鸡每次1mL，每天用药2次，连用4d；本发明样品2治疗组在接种尿囊液4d后(出现病状)用药，每只鸡每次1mL，每天用药2次，连用4d。金刚烷胺预防组在接种尿囊液的同时，用2mg/mL的金刚烷胺口服，每只鸡1mL，每日2次，连用4d。金刚烷胺治疗组在接种尿囊液4d后(出现症状)，用2mg/mL的金刚烷胺药物治疗，每只鸡每次1mL口服，每天2次，连用4d。感染对照组的鸡只接种尿囊液，不用任何药物。空白对照组不作任何处理。4种单味药材的治疗组分别在接种尿囊液4d后(出现病状)用药，每只鸡每次1mL，每天用药2次，连用4d。结果见表4，本发明样品1和2组的预防组和治疗的治愈率均明显高于金刚烷胺预防组和治疗组以及4种单味药材的治疗组。

表4鸡传染性支气管炎预防与治疗结果

三、SOD活性测定

鸡接种传染性支气管炎病毒尿囊液后，每组于第4天、第7天各选取6只鸡通过翅静脉采血1-2mL，制备血清，测定血清SOD活性，结果见表5，早期鸡感染支气管炎病毒后，体内清除自由基的SOD酶(超氧化物歧化酶)活性逐渐下降，至第5天显著，第7天极为显著；通过表5可得知，在使用本发明药物后，可显著提高并维持机体内SOD活性，降低自由基对机体产生的损伤。

表5各组鸡血清SOD活性测定

备注：与空白对照组比较，*p＜0.05，**p＜0.01

四、本发明对鸡传染性支气管炎治疗的临床观察

鸡传染性支气管炎由鸡传染性支气管炎病毒引起的一种急性高度接触性传染病，幼龄鸡主要表现为罗音，咳嗽，呼吸困难。产蛋鸡则通常发生蛋的品质下降，输卵管受到永久性的损伤而丧失产蛋能力；发生肾型传支的病鸡表现为拉淀粉糊状粪便，肾脏苍白，肿大，肾小管和输卵管内有大量的尿酸盐，可造成很大经济损失。用本发明样品1(按实施例2制备)和本发明样品2(按实施例4制备，使用时稀释成每毫升含1g生药浓度)，每只鸡每次口服1mL，每天用药两次，连用4天。在江苏省连云港市、宿迁市、南通市、扬州市对发病的幼龄鸡进行药物治疗试验，结果见表6、表7。

表6本发明样品1对鸡传染性支气管炎临床疗效结果

单位	例数/只	样品1治愈数/只	死亡数/只	治愈率/％
					连云港市灌南鸡场	488	461	27	94.47
宿迁市宿豫鸡场	892	793	99	88.90
					南通市海门鸡场	1311	1181	130	90.08
扬州市宝应鸡场	876	815	61	93.03
					合计	3567	3250	317	91.11

表7本发明样品2对鸡传染性支气管炎临床疗效结果

单位	例数/只	样品2治愈数/只	死亡数/只	治愈率/％
					连云港市灌南鸡场	379	341	38	89.97
宿迁市宿豫鸡场	818	751	67	91.80
					南通市海门鸡场	1024	963	61	94.04
扬州市宝应鸡场	578	525	53	90.83
					合计	2799	2580	219	92.17

可见，本发明所制作的药物治疗鸡传染性支气管炎六千余例，均取得较好疗效，一般治疗2d后停止死亡，3～4d后可治愈，治愈后一般不复发，表明本发明治疗鸡传染性支气管炎有甚高疗效。

五、安全性试验

用本发明实施例1制备的口服液，小鼠口服的半数致死量为17.96±0.84g/kg。每日给小鼠灌服本发明口服液36g/kg，连服3d，未见有异常现象。本发明口服液20g/kg给大鼠灌胃，连续21天，也未发现有组织学的改变。

用黑面神制成每毫升含0.5g生药的口服液，每日给小鼠灌服本发明口服0.5mL，每天1次，连服3d，未见有异常现象。家兔口服10mL后，再每日口服2次，每次5mL，连用10天，未见异常。15天后解剖检查，各脏器无如何变化。

具体实施方式：

下面结合具体实施例对本发明作进一步的描述：

实施例1：

组方：刺红珠19g，爪虎耳草10g，花楸茎皮12g，黑面神17g

具体制备过程如下：

a、将刺红珠、爪虎耳草、花楸茎皮、黑面神四味中药，并添加药材总重量4倍的水，浸泡24小时后煎煮3次，每次煮沸后维持0.5小时以上，合并煎液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％的乙醇调至乙醇浓度60％，充分搅拌混匀，沉淀48小时以上，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加95％乙醇调至醇浓度75％，搅匀，沉淀48小时，过滤，滤液回收乙醇，再浓缩至无醇味，得到药液，再加药液重4倍量水冷藏沉淀48小时，过滤，滤液浓缩得到提取浓缩液，得浓度为每mL含生药1.5g的药液，调pH7.0，制成口服液，分装，灭菌即得。

实施例2：

组方：刺红珠21g，爪虎耳草8g，花楸茎皮9g，黑面神20g；

具体制备过程如下：

a、将刺红珠、爪虎耳草、花楸茎皮、黑面神四味中药，并添加药材总重量4倍的水，浸泡24小时后后煎煮3次，每次煮沸后维持0.5小时以上，合并煎液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％的乙醇调至乙醇浓度60％，充分搅拌混匀，沉淀48小时以上，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加95％乙醇调至醇浓度75％，搅匀沉淀48小时，过滤，滤液回收乙醇，再浓缩至无醇味得到药液，再加药液重4倍量水冷藏沉淀48小时，过滤，滤液浓缩得到提取浓缩液，得浓度为每mL含生药1g的药液，调pH7.0，制成口服液，分装，灭菌即得。

实施例3：

组方：刺红珠44g，爪虎耳草15g，花楸茎皮15g，黑面神25g

具体制备过程如下：

将刺红珠、爪虎耳草、花楸茎皮、黑面神四味中药，并添加药材总重量3倍的水，浸泡浸泡24小时后后煎煮3次，每次煮沸后维持1小时，合并煎液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％乙醇调至乙醇浓度65％，充分搅拌混匀，沉淀60小时，过滤，滤液回收乙醇。回收乙醇后的药液再加95％乙醇调至醇浓度80％，搅匀沉淀48小时，过滤，滤液回收乙醇，再浓缩至无醇味得到药液，再加药液重2倍量水冷藏沉淀24小时，过滤，滤液浓缩得到提取浓缩液，得浓度为每mL含生药2g的药液，调pH7.0，制成口服液，分装，灭菌即得。

实施例4：

组方：刺红珠20g，爪虎耳草9g，花楸茎皮10g，黑面神19g

具体制备过程如下：

将刺红珠、爪虎耳草、花楸茎皮、黑面神四味中药，并添加药材总重量4倍的水，浸泡30小时后煎煮3次，每次煮沸后维持1小时，合并煎液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％乙醇调至乙醇浓度70％，充分搅拌混匀，沉淀48小时，过滤，滤液回收乙醇。回收乙醇后的药液再加95％乙醇调至醇浓度80％，搅匀沉淀48小时，过滤，滤液回收乙醇，再浓缩至无醇味得到药液，再加药液重3倍量水冷藏沉淀24小时，过滤，滤液浓缩提取浓缩液，得浓度为每mL含生药1.5g的浓度，调pH7.0，制成口服液，分装，灭菌即得。

Claims (6)

1.一种药物组合物在防治鸡传染性支气管炎的应用，该组合物由下列重量份的原料药制成：刺红珠17～51重量份，爪虎耳草6～18重量份，花楸茎皮9～27重量份黑面神15～45重量份。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于所述的组合物由下列重量份的原料药制成：刺红珠19～21重量份，爪虎耳草8～10重量份，花楸茎皮10～12重量份，黑面神17～20重量份。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于所述药物组合物与药学可接受的辅料制成制剂。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于所述的制剂剂型是口服液。

5.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于所述的防治鸡传染性支气管炎的药物组合物的制备方法包括以下步骤：

将刺红珠、爪虎耳草、花楸茎皮、黑面神混合加水浸泡，煎煮2～3次，合并煎液后浓缩至稠状，加乙醇调至醇浓度为60％～70％，充分搅拌混匀，沉淀，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加乙醇调至醇浓度为75％～80％，搅匀，沉淀，过滤，滤液回收乙醇后再浓缩至无醇味，药液加水冷藏沉淀，过滤，滤液浓缩。

6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于所述的防治鸡传染性支气管炎的口服液的制备方法具体如下：

将刺红珠、爪虎耳草、花楸茎皮、黑面神药材总重3～4倍的水浸泡24～30小时后煎煮3次，每次煮沸后维持0.5～1小时，合并煎液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％乙醇调至醇浓度为60％～70％，充分搅拌混匀，沉淀，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加95％乙醇调至醇浓度为75％～80％，搅匀沉淀，过滤，滤液回收乙醇再浓缩至无醇味，药液加水冷藏沉淀，过滤，滤液浓缩得浓度为每mL含1～2g生药量的药液，调pH7.0，制成口服液。