CN106963822A - 防治鸡传染性支气管炎的中药组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

防治鸡传染性支气管炎的中药组合物及其制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种防治鸡传染性支气管炎的中药组合物及其制备方法和应用。该中药组合物由大黄药8～24重量份，菜头肾9～27重量份，鱼鳖金星15～45重量份，长瓣金莲花3～9重量份，三开瓢6～18重量份的原料药制成。该组合物是将大黄药、长瓣金莲花蒸馏，收集蒸馏液；将蒸馏后的残渣、残液加入菜头肾、鱼鳖金星、三开瓢煎煮2～3次，合并煎液浓缩至稠状，乙醇调至醇浓度60％～70％，沉淀、过滤，浓缩后的药液再加乙醇调至醇浓度75％～80％，沉淀、过滤、滤液浓缩，加蒸馏水冷藏沉淀，过滤、浓缩；将大黄药、长瓣金莲花的蒸馏液与提取浓缩液合并。该中药组合物用于制备防治鸡传染性支气管炎的中兽药物，效果好，安全方便。

Description

防治鸡传染性支气管炎的中药组合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于中兽药制药领域，涉及一种鸡用抗病毒中药组合物。本发明还涉及该中药组合物的制备方法及该中药组合物在制备防治鸡传染性支气管炎的中兽药中的应用。
背景技术
鸡传染性支气管炎(Infectious Bronchitis,IB)简称鸡传支，是由冠状病毒科冠状病毒属的传染性支气管炎病毒(Infectious Bronchitis virus，IBV)引起鸡急性、高度接触性呼吸道疾病，主要侵害鸡的呼吸系统、泌尿系统和消化系统。由于本病具有高度传染性，且病原有多个血清型，免疫接种复杂，效果具有一定限制性。采用抗病毒药物治疗如金刚烷胺、病毒灵等，虽具有一定的效果，但相关政策禁止抗病毒西药用于动物疫病防治；使用干扰素治疗，费用较高，使治疗成本提高；市场上销售的治疗鸡传染性支气管炎的中药散剂、口服液虽有一定的疗效，但却存在着容易复发和不能根治的弊病。
发明内容
本发明的目的在于提供一种鸡用抗鸡传染性支气管炎中药组合物。
本发明另一个目的是提供上述鸡用抗鸡传染性支气管炎中药组合物的制备方法。
本发明还有一个目的是提供中药组合物在制备防治鸡传染性支气管炎的中兽药物的应用。
本发明的目的是通过下列技术措施来实施的：
一种鸡用抗鸡传染性支气管炎中药组合物，该组合物由下列重量份的原料药制成：大黄药8～24重量份，菜头肾9～27重量份，鱼鳖金星15～45重量份，长瓣金莲花3～9重量份，三开瓢6～18重量份。
上述组合物优选由下列重量份的原料药组成：大黄药9～11重量份，菜头肾11～13重量份，鱼鳖金星18～21重量份，长瓣金莲花4～6重量份，三开瓢8～10重量份。
上述鸡用抗鸡传染性支气管炎中药组合物是通过下列步骤制备得到的：
a、将大黄药、长瓣金莲花加蒸馏水浸泡，蒸馏，过滤，收集蒸馏液，备用；
b、向蒸馏后的残渣及残液中加入菜头肾、鱼鳖金星、三开瓢煎煮2～3次，合并煎液后浓缩至稠状，加乙醇调至醇浓度为60％～70％，充分搅拌混匀，沉淀，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加乙醇调至醇浓度为75％～80％，搅匀，沉淀，过滤，滤液回收乙醇后再浓缩至无醇味，药液加蒸馏水冷藏沉淀，过滤，滤液浓缩得到提取浓缩液；
c、将大黄药、长瓣金莲花蒸馏液与“b”步骤得到的提取浓缩液合并。
上述鸡用抗鸡传染性支气管炎中药组合物与药学可接受的辅料制成制剂。优选制备剂型是口服液。
上述鸡用抗鸡传染性支气管炎病毒中药组合物的制备方法，该方法包括下列步骤：
a、将大黄药、长瓣金莲花加蒸馏水浸泡，蒸馏，过滤，收集蒸馏液，得到大黄药、长瓣金莲蒸馏液；
b、向蒸馏后的残渣及残液中加入菜头肾、鱼鳖金星、三开瓢煎煮2～3次，合并煎液后浓缩至稠状，加乙醇调至醇浓度为60％～70％，充分搅拌混匀，沉淀，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加乙醇调至醇浓度为75％～80％，搅匀，沉淀，过滤，滤液回收乙醇后再浓缩至无醇味，药液加蒸馏水冷藏沉淀，过滤，滤液浓缩得到提取浓缩液；
c、将大黄药、长瓣金莲花蒸馏液与“b”步骤得到的提取浓缩液合并，制剂。
所述的抗鸡传染性支气管炎中药组合物的制备方法，具体可以按下列步骤制备：
a、向大黄药、长瓣金莲花中加大黄药、长瓣金莲花两味药材总重3～4倍的蒸馏水浸泡24～30小时后蒸馏，收集蒸馏液，再将蒸馏液重蒸馏，收集重蒸液，得到大黄药、长瓣金莲花蒸馏液，此蒸馏液是药材重量的1/2；
b、向蒸馏后得到的残渣及残液中加入菜头肾、鱼鳖金星、三开瓢三味药材，并添加五种药材总重量4～5倍量的蒸馏水，浸泡24～30小时后煎煮3次，每次煮沸后维持0.5～1小时，合并煎液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％乙醇调至醇浓度为60％～70％，充分搅拌混匀，沉淀过夜，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加95％乙醇调至醇浓度为75％～80％，搅匀，沉淀过夜，过滤，滤液回收乙醇再浓缩至无醇味，药液加蒸馏水冷藏沉淀，过滤，滤液浓缩得到提取浓缩液；
c、将大黄药、长瓣金莲花蒸馏液与“b”步骤得到的提取浓缩液合并，得浓度为每mL含1～2g生药量的药液，调pH7.0，制成口服液。
鸡用抗病毒中药组合物在防治鸡传染性支气管炎病毒性传染病中应用，具有显著疗效，可应用于制备防治鸡呼吸道疾病，特别是鸡传染性支气管炎的中兽药物。
本发明的有益效果：本发明吸取中兽医学精髓；大黄药，为唇形科植物垂花香薷ElsholtziaW.W.Smith的全草。功能：清肺止咳，清热解毒。主治流感，肺炎，支气管炎，胆囊炎，尿路感染，扁桃体炎，乳腺炎，炭疽，外伤感染。
菜头肾，为爵床科植物菜头肾Strobilanthes(C.Ling)H.S.Ho的全草。功能：补肾养阴，清热解毒。主治肾虚，腰痛，肝炎，肾炎，疔疮疖肿。
鱼鳖金星，为水龙骨科植物抱石莲Lepidogrammitis drymoglossoides(Bak.)Ching的全草。功能：清热解毒，利水通淋，消瘀，止血。主治高热，淋浊，便血，疔疮痈肿，鼻炎，气管炎。
长瓣金莲花，为毛莨科植物长瓣金莲花Trollius macropetalus Fr.Schmidt的花。功能：清热解毒。主治上呼吸道感染，急、慢性扁桃体炎，急性结膜炎，急性痢疾，急性阑尾炎。
三开瓢，为西番莲科植物三开瓢Adenia cardiophylla(Mast.)Engl的茎叶。功能：清热解毒，活血散瘀。主治疖痈初起，胸内热痰。
本发明对鸡的生理机能进行综合调理，提高机体免疫力、抗病力和抗病毒等方面具有独到之处，可有效防制和治疗。将五味药物配伍，对鸡传染性支气管炎有显著的防治作用，达到标本兼治的目的。
下面就本发明的效果进一步说明本发明的疗效。
一、本发明体外抗鸡传染性支气管炎病毒试验
1、药品：
(1)本发明样品1：按照实施例1方法制备得到，用生理盐水配成每毫升药液含1g生药的浓度。
(2)本发明样品2：按照实施例3方法制备得到，用生理盐水配成每毫升药液含1g生药的浓度。
(3)西药对照药品：将金刚烷胺粉剂稀释成0.2mg/mL溶液，灭菌。
2、鸡传染性支气管炎毒株由扬州大学兽医学院惠赠，经非免鸡胚盲传5代复壮，后检测半数致死量ELD50＝10-5.82/0.2mL，置-20℃保存，备用。
3、非免鸡胚 购自江苏仪征大仪种鸡场。
4、试验分组 非免鸡胚102个，具体分组情况见表1。
5、试验方法
(1)药物毒性实验 将本发明样品1和本发明样品2分别用生理盐水稀释，将原液及不同浓度的药液分别接种于4只10日龄鸡胚的尿囊腔中，每只0.2mL，置37.8℃温箱孵育72h，每天观察存活情况，鸡胚全部存活的最高药液浓度为正式实验起始浓度，同时设生理盐水对照组，药物对鸡胚毒性实验结果见表1。
表1中药对鸡胚毒性实验结果(n＝4)
*分母为接种胚数，分子为存活胚数。
(2)本发明药物对鸡传染性支气管炎病毒的抑制作用测定，具体方法见表2：
表2实验分组情况
试验I组 每个鸡胚尿囊腔同时接种本发明样品1药液0.2mL，100ELD50IBV第五代病毒稀释液0.1mL。
试验Ⅱ组 每个鸡胚尿囊腔同时接种本发明样品2药液0.2mL，100ELD50IBV第五代病毒稀释液0.1mL。
试验III组 每个鸡胚尿囊腔同时接种0.2mg/mL的金刚烷胺0.2mL，100ELD50IBV第五代病毒稀释液0.1mL。
阳性对照组 每个鸡胚尿囊腔同时接种生理盐水0.2mL，100ELD50IBV第五代病毒0.1mL。
空白对照组 不接种病毒，不给药。
上述鸡胚在37.8℃恒温箱中继续孵化，每天照蛋2～3次，弃去24h内死胚，收取24～72h死胚和72h活胚的尿囊液。低温保存备用。测定病毒效价前，将鸡胚尿囊液经5000r/min离心后，取上清液，加入10％胰蛋白酶，37℃水浴作用3h，以血凝(HA)实验检测鸡胚尿囊液的病毒效价。本发明药物对鸡传染性支气管炎病毒增殖的影响，结果见表3。
表3本发明药物对鸡传染性支气管炎病毒增殖的抑制作用测定结果
二、本发明对实验性鸡传染性支气管炎的治疗试验
1、试验动物：本试验用25日龄艾维茵肉鸡160只，随机分为8组，每组20只，即本发明样品1(按实施例2制备)预防组与治疗组，本发明样品2(按实施例4制备，使用时稀释成每毫升含1g生药浓度)预防组与治疗组，西药预防组与治疗组，感染对照组，空白对照组。
2、病毒 用100ELD50IBV第五代尿囊液作为病毒接种液。
3、试验方法：
(1)操作 空白对照组的鸡不用药，不接种尿囊液，其余7组的鸡在同一时间里每只滴鼻稀释后的尿囊液0.2mL。
(3)用药方法与疗效 本发明样品1预防组在接种尿囊液的同时，开始用本发明样品1口服，每只鸡每次1mL，每天用药2次，连用4d。本发明样品1治疗组在接种尿囊液4d后(出现病状)用药，每只鸡每次1mL，每天用药2次，连用4d。本发明样品2预防组在接种尿囊液的同时，用本发明样品2口服，每只鸡每次1mL，每天用药2次，连用4d；本发明样品2治疗组在接种尿囊液4d后(出现病状)用药，每只鸡每次1mL，每天用药2次，连用4d。金刚烷胺预防组在接种尿囊液的同时，用2mg/mL的金刚烷胺口服，每只鸡1mL，每日2次，连用4d。金刚烷胺治疗组在接种尿囊液4d后(出现症状)，用2mg/mL的金刚烷胺药物治疗，每只鸡每次1mL口服，每天2次，连用4d。感染对照组的鸡只接种尿囊液，不用任何药物，结果见表4。
表4鸡传染性支气管炎预防与治疗结果
三、SOD活性测定：鸡接种传染性支气管炎病毒尿囊液后，每组于第4天、第7天各使用6只鸡通过翅静脉采血1-2mL，制备血清方法测定血清SOD活性，结果见表5。
表5各组鸡血清SOD活性测定
备注：与空白对照组比较，*p＜0.05，**p＜0.01
早期鸡感染支气管炎病毒后，体内清除自由基的SOD酶(超氧化物歧化酶)活性逐渐下降，至第5天显著，第7天极为显著；通过表6可得到，在使用本发明药物后，可显著提高并维持机体内SOD活性，降低自由基对机体产生的损伤。
四、本发明对鸡传染性支气管炎治疗的临床观察
鸡传染性支气管炎由鸡传染性支气管炎病毒引起的一种急性高度接触性传染病，幼龄鸡主要表现为罗音，咳嗽，呼吸困难。产蛋鸡则通常发生蛋的品质下降，输卵管受到永久性的损伤而丧失产蛋能力；发生肾型传支的病鸡表现为拉淀粉糊状粪便，肾脏苍白，肿大，肾小管和输卵管内有大量的尿酸盐，可造成很大经济损失。用本发明样品1(按实施例2制备)和本发明样品2(按实施例4制备，使用时稀释成每毫升含1g生药浓度)，每只鸡每次口服1mL，每天用药两次，连用4天。在江苏省连云港市、宿迁市、南通市、盐城市对发病的幼龄鸡进行药物治疗试验，结果见表6、表7。
表6本发明样品1对鸡传染性支气管炎临床疗效结果
表7本发明样品2对鸡传染性支气管炎临床疗效结果
可见，本发明所制作的药物治疗鸡传染性支气管炎6245只，均取得较好疗效，一般治疗2d后停止死亡，3～4d后可治愈，治愈后一般不复发，表明本发明治疗鸡传染性支气管炎有甚高疗效。
五、安全性试验
用本发明实施例1制备的口服液，小鼠口服的半数致死量为18.62±0.79g/kg。每日给小鼠灌服本发明口服液37g/kg，连服3d，未见有异常现象。本发明口服液20g/kg给大鼠灌胃，连续21天，也未发现有组织学的改变。
具体实施方式：
下面结合具体实施例对本发明作进一步的描述：
实施例1：
组方：大黄药17g，菜头肾11g，鱼鳖金星18g，长瓣金莲花4g，三开瓢8g
具体制备过程如下：
a、将大黄药、长瓣金莲花药材加两味药材总重量3倍的蒸馏水浸泡24小时，使药材充分膨胀后蒸馏，收集蒸馏液，得到药材总重2倍的蒸馏液，再将蒸馏液重蒸馏1次，收集得到此种药材总重1/2蒸馏液，装瓶灭菌备用；
b、将蒸馏后的残渣及残液加大黄药、菜头肾三味中药，并添加五种药材总重量4倍的蒸馏水，浸泡24小时后煎煮3次，每次煮沸后维持0.5小时以上，合并煎液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％的乙醇调至乙醇浓度60％，充分搅拌混匀，沉淀48小时以上，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加95％乙醇调至醇浓度75％，搅匀沉淀48小时，过滤，滤液回收乙醇，再浓缩至无醇味得到药液，再加药液重4倍量蒸馏水冷藏沉淀48小时，过滤，滤液浓缩得到提取浓缩液；
c、将大黄药、长瓣金莲花蒸馏液与“b”步骤得到的提取浓缩液合并，得浓度为每mL含生药1.5g的药液，调pH7.0，制成口服液，分装，灭菌即得。
实施例2：
组方：大黄药8g，菜头肾9g，鱼鳖金星15g，长瓣金莲花6g,三开瓢6g，具体制备过程如下：
a、将大黄药、长瓣金莲花药材加两味药材总重量3倍的蒸馏水浸泡24小时，使药材充分膨胀后蒸馏，收集蒸馏液，得到药材总重2倍的蒸馏液，再将蒸馏液重蒸馏1次，收集得到此种药材总重1/2蒸馏液，装瓶灭菌备用；
b、将蒸馏后的残渣及残液加菜头肾、鱼鳖金星、三开瓢三味中药，并添加五种药材总重量4倍的蒸馏水，浸泡24小时后后煎煮3次，每次煮沸后维持0.5小时以上，合并煎液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％的乙醇调至乙醇浓度60％，充分搅拌混匀，沉淀48小时以上，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加95％乙醇调至醇浓度75％，搅匀沉淀48小时，过滤，滤液回收乙醇，再浓缩至无醇味得到药液，再加药液重4倍量蒸馏水冷藏沉淀48小时，过滤，滤液浓缩得到提取浓缩液；
c、将大黄药、长瓣金莲花蒸馏液与与“b”步骤得到的提取浓缩液合并，得浓度为每mL含生药1g的药液，调pH7.0，制成口服液，分装，灭菌即得。
实施例3：
组方：大黄药16g，菜头肾18g，鱼鳖金星30g，长瓣金莲花8g，三开瓢12g
具体制备过程如下：
a、将大黄药、长瓣金莲花药材加两味总重量4倍的蒸馏水浸泡30小时，使药材充分膨胀后蒸馏，收集蒸馏液，得到此药材总重量2倍的蒸馏液，再将蒸馏液重蒸馏1次，收集得到此种药材总重的1/2蒸馏液，装瓶灭菌备用；
b、将蒸馏后的残渣及残液加菜头肾、鱼鳖金星、三开瓢三味中药，并添加五种药材总重量5倍的蒸馏水，浸泡浸泡24小时后后煎煮3次，每次煮沸后维持1小时，合并煎液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％乙醇调至乙醇浓度65％，充分搅拌混匀，沉淀60小时，过滤，滤液回收乙醇。回收乙醇后的药液再加95％乙醇调至醇浓度80％，搅匀沉淀48小时，过滤，滤液回收乙醇，再浓缩至无醇味得到药液，再加药液重2倍量蒸馏水冷藏沉淀24小时，过滤，滤液浓缩得到提取浓缩液。
c、将大黄药、长瓣金莲花蒸馏液与“b”步骤得到的提取浓缩液合并，得浓度为每mL含生药2g的药液，调pH7.0，制成口服液，分装，灭菌即得。
实施例4：
组方：大黄药11g，菜头肾13g，鱼鳖金星18g，长瓣金莲花6g,三开瓢8g
具体制备过程如下：
a、将大黄药、长瓣金莲花药材加两味总重量3倍的蒸馏水浸泡27小时，使药材充分膨胀后蒸馏，收集蒸馏液，得到此药材总重量2倍的蒸馏液，再将蒸馏液重蒸馏1次，收集得到此种药材总重的1/2蒸馏液，装瓶灭菌备用；
b、将蒸馏后的残渣及残液加菜头肾、鱼鳖金星、三开瓢三味中药，并添加五种药材总重量5倍的蒸馏水，浸泡24小时后煎煮3次，每次煮沸后维持1小时，合并煎液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95％乙醇调至乙醇浓度70％，充分搅拌混匀，沉淀48小时，过滤，滤液回收乙醇。回收乙醇后的药液再加95％乙醇调至醇浓度80％，搅匀沉淀48小时，过滤，滤液回收乙醇，再浓缩至无醇味得到药液，再加药液重3倍量蒸馏水冷藏沉淀24小时，过滤，滤液浓缩得到提取浓缩液；
c、将大黄药、长瓣金莲花蒸馏液与“b”步骤得到的提取浓缩液合并，得浓度为每mL含生药1.5g的药液，调pH7.0，制成口服液，分装，灭菌即得。

Claims (8)

1.一种防治鸡传染性支气管炎的中药组合物，其特征在于该组合物由下列重量份的原料药制成：大黄药8～24重量份，菜头肾9～27重量份，鱼鳖金星15～45重量份，长瓣金莲花3～9重量份，三开瓢6～18重量份。
2.根据权利要求1所述的防治鸡传染性支气管炎的中药组合物，其特征在于该组合物由下列重量份的原料药制成：大黄药9～11重量份，菜头肾11～13重量份，鱼鳖金星18～21重量份，长瓣金莲花4～6重量份，三开瓢8～10重量份。
3.根据权利1或2所述的防治鸡传染性支气管炎的中药组合物，其特征在于所述中药组合物与药学可接受的辅料制成制剂。
4.根据权利3所述的防治鸡传染性支气管炎的中药组合物，其特征在于所述的制剂剂型是口服液。
5.根据权利要求1或2所述的防治鸡传染性支气管炎的中药组合物的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤：
a.将大黄药、长瓣金莲花加蒸馏水浸泡，蒸馏，过滤，收集蒸馏液，得到大黄药、长瓣金莲花蒸馏液；
b.向蒸馏后的残渣及残液中加入菜头肾、鱼鳖金星、三开瓢，再加水煎煮2～3次，合并煎液后浓缩至稠状，加乙醇调至醇浓度为60%～70%，充分搅拌混匀，沉淀，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加乙醇调至醇浓度为75%～80%，搅匀，沉淀，过滤，滤液回收乙醇后再浓缩至无醇味，药液加蒸馏水冷藏沉淀，过滤，滤液浓缩得到提取浓缩液；
c.将大黄药、长瓣金莲花蒸馏液与“b”步骤得到的提取浓缩液合并。
6.根据权利要求4所述的防治鸡传染性支气管炎的中药组合物的制备方法，其特征在于该方法具体按下列步骤制备：
a.向大黄药、长瓣金莲花中加两味药材总重3～4倍的蒸馏水浸泡24～30小时后蒸馏，收集蒸馏液，再将蒸馏液重蒸馏，收集重蒸液，得到大黄药、长瓣金莲花蒸馏液，此蒸馏液是药材重量的1/2；
b.向蒸馏后得到的残渣、残液中加入菜头肾、鱼鳖金星、三开瓢，三味药材，并添加五种药材总重量4～5倍量的蒸馏水，浸泡24～30小时后煎煮3次，每次煮沸后维持0.5～1小时，合并煎液并浓缩至稠状，加重量百分比浓度为95%乙醇调至醇浓度为60%～70%，充分搅拌混匀，沉淀过夜，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加95%乙醇调至醇浓度为75%～80%，搅匀，沉淀过夜，过滤，滤液回收乙醇再浓缩至无醇味，药液加蒸馏水冷藏沉淀，过滤，滤液浓缩得到提取浓缩液；
c.将大黄药、长瓣金莲花蒸馏液与“b”步骤得到的提取浓缩液合并，得浓度为每mL含1～2g生药量的药液，调pH7.0，制成口服液。
7.权利要求1或2所述的中药组合物在制备防治鸡呼吸道疾病的中兽药物中的应用。
8.权利要求1或2所述的中药组合物在制备防治鸡传染性支气管炎的中兽药物中的应用。
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