CN104840689B - 连花解毒口服液及其制备方法 - Google Patents
连花解毒口服液及其制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种连花解毒口服液，其含有活性成分，所述活性成分由金银花、连翘、板蓝根、白花蛇舌草、鱼腥草、山豆根、重楼、青蒿、贯众和甘草制成。本发明药物连花解毒口服液，针对鸡传染性支气管炎病疗效显著，产品质量稳定、可控，具有较强的市场竞争力，可有效替代抗病毒西药。本发明药物具有制备工艺简单，药效好、疗效快，安全、环保、生产成本低等诸多优点。
Description
技术领域
本发明涉及中药组合物及其制备方法，具体涉及用于治疗鸡传染性支气管炎的中药组合物，属中兽药领域。
背景技术
鸡传染性支气管炎（IB）是由传染性支气管炎病毒（IBV）引起的一种急性、高度接触性传染病，该病的病原存在众多的血清型和变异株，为养鸡场的多发疾病之一。目前针对该病，疫苗免疫难度很大，抗病毒西药如利巴韦林、金刚烷胺等禁用于畜禽。目前，在治疗人的支气管炎方面，中药较多，如发明专利200810104909.6、201010572252.3、201010218115.X、201310201259.8、201310178413.4等，尽管人用治疗支气管炎中药用在畜禽上可能有效，但由于人兽机体结构差异较大，致病毒株更是不同，因此人药用在畜禽上尚需验证。
鉴于抗病毒西药禁用于畜禽，许多兽医科研工作者将注意力集中到我国巨大的中药宝库中来，在治疗鸡传染性支气管炎中药方面，有不少发明专利，但这些中药组合物治疗鸡传染性支气管炎的效果并不显著，均停留在专利申报上面，未形成合法的上市产品，不能满足迅速抑制鸡传染性支气管炎病的需要，其有效性和实用性尚需验证。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种连花解毒口服液及其制备方法
本发明所解决的技术问题采用以下技术方案来实现：
本发明提供一种连花解毒口服液，其含有活性成分，所述活性成分由金银花、连翘、板蓝根、白花蛇舌草、鱼腥草、山豆根、重楼、青蒿、贯众和甘草制成。
优选的，所述活性成分由金银花100-150份、连翘100-150份、板蓝根100-150份、白花蛇舌草80-120份、鱼腥草80-120份、山豆根60-100份、重楼60-100份、青蒿60-100份、贯众60-100份和甘草30-80份制成。
更优选的，所述活性成分由金银花110-130份、连翘110-130份、板蓝根110-130份、白花蛇舌草90-110份、鱼腥草90-110份、山豆根70-90份、重楼70-90份、青蒿70-90份、贯众70-90份和甘草50-70份制成。
最优选的，所述活性成分由金银花120份、连翘120份、板蓝根120份、白花蛇舌草100份、鱼腥草100份、山豆根80份、重楼80份、青蒿80份、贯众80份和甘草60份制成。
其中，
本发明还提供了所述连花解毒口服液的制备方法，包括如下步骤：
（1）按重量配比称取各中药饮片；
（2）将称得的各中药饮片经水煎煮三次，每次1.5h，合并煎液，过滤，滤液浓缩成浸膏，加入适量蔗糖、苯甲酸、尼泊金乙酯，加水搅拌、静置、过滤，制备成每1ml相当于原生药0.5g的口服液。
本品的鉴定方法如下：
（1）取本品5ml，置水浴上蒸干，残渣加甲醇10ml溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。另取绿原酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（《中国兽药典》2010版2部附录32页）试验，吸取供试品溶液10～20μl，对照品溶液10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上，以乙酸丁酯-甲酸-水（70∶25∶25）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
（2）取本品10ml，置水浴上蒸干，残渣加三氯甲烷30ml，加热回流1小时，滤过，弃去滤液，药渣挥干，加甲醇40ml，加热回流1小时，滤过，滤液浓缩至约1ml，加于聚酰胺柱（14～30目，3g，内径1～1.2cm，用水50ml预洗）上，用水50ml洗脱，弃去水液，再用乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取连翘对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（《中国兽药典》2010版2部附录32页）试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一以含5%磷酸二氢钠的羧甲基纤维素钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以苯-丙酮-乙酸乙酯-甲酸-水（20∶25∶30∶3∶3）为展开剂，薄层板置展开缸中预饱和30分钟，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；再喷以香草醛硫酸试液，加热至斑点显色清晰，显相同颜色的斑点。
（3）取本品10ml，置水浴上蒸干，残渣加稀乙醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加稀乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取精氨酸对照品，加稀乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（《中国兽药典》2010版2部附录32页）试验，吸取上述两种溶液各1～2μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上（自然干燥），以正丁醇-冰醋酸-水（19∶5∶5）为展开剂，展开，取出，热风吹干，喷以茚三酮试液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
（4）取本品30ml，置水浴上蒸干，残渣加石油醚（60～90℃）50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加正己烷30ml使溶解，用20%乙腈溶液提取3次，每次10ml，合并乙腈液，蒸干，残渣加乙醇0.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取青蒿素对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（《中国兽药典》2010版2部附录32页）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（60～90℃）-乙醚（3∶2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
本发明药物的优点和有益效果在于：
本发明药物为防治鸡传染性支气管炎病的中兽药口服液，将传统中草药合理组方，充分发挥中兽药整体观念和辩证施治理论，为养禽业提供了一种有效防治鸡传染性支气管炎的药物，具有疗效显著，见效快，安全、环保，不会产生危害人类健康的药物残留、不易产生耐药性等特点，为目前治疗鸡传染性支气管炎的首选药物。本发明药物产品质量稳定、可控，具有较强的市场竞争力，可有效替代抗病毒西药。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
实施例1本发明药物制备及使用
（1）称取含有下述重量的原料：
金银花100份、连翘100份、板蓝根100份、白花蛇舌草80份、鱼腥草80份、山豆根60份、重楼60份、青蒿60份、贯众60份、甘草30份。
（2）将步骤（1）中称得的各中药饮片经水煎煮三次，每次1.5h，合并煎液，过滤，滤液浓缩成浸膏，加入适量蔗糖、苯甲酸、尼泊金乙酯，加水搅拌、静置、过滤，制备成每1ml相当于原生药0.5g的口服液。
（3）本发明药物使用方法：用于鸡传染性支气管炎病的预防与治疗，混饮：鸡，每1L水添加本发明中药2-4ml，连用5-7日。
实施例2 本发明药物制备及使用
（1）称取含有下述重量的原料：
金银花150份、连翘150份、板蓝根150份、白花蛇舌草120份、鱼腥草120份、山豆根100份、重楼100份、青蒿100份、贯众100份、甘草80份
（2）将步骤（1）中称得的各中药饮片经水煎煮三次，每次1.5h，合并煎液，过滤，滤液浓缩成浸膏，加入适量蔗糖、苯甲酸、尼泊金乙酯，加水搅拌、静置、过滤，制备成每1ml相当于原生药0.5g的口服液。
（3）本发明药物使用方法：用于鸡传染性支气管炎病的预防与治疗，混饮：鸡，每1L水添加本发明中药2-4ml，连用5-7日。
实施例3 本发明药物制备及使用
（1）称取含有下述重量的原料：
金银花110份、连翘110份、板蓝根110份、白花蛇舌草90份、鱼腥草90份、山豆根70份、重楼70份、青蒿70份、贯众70份、甘草50份
（2）将步骤（1）中称得的各中药饮片经水煎煮三次，每次1.5h，合并煎液，过滤，滤液浓缩成浸膏，加入适量蔗糖、苯甲酸、尼泊金乙酯，加水搅拌、静置、过滤，制备成每1ml相当于原生药0.5g的口服液。
（3）本发明药物使用方法：用于鸡传染性支气管炎病的预防与治疗，混饮：鸡，每1L水添加本发明中药2-4ml，连用5-7日。
实施例4 本发明药物制备及使用
（1）称取含有下述重量的原料：
金银花130份、连翘130份、板蓝根130份、白花蛇舌草110份、鱼腥草110份、山豆根90份、重楼90份、青蒿90份、贯众90份、甘草70份
（2）将步骤（1）中称得的各中药饮片经水煎煮三次，每次1.5h，合并煎液，过滤，滤液浓缩成浸膏，加入适量蔗糖、苯甲酸、尼泊金乙酯，加水搅拌、静置、过滤，制备成每1ml相当于原生药0.5g的口服液。
（3）本发明药物使用方法：用于鸡传染性支气管炎病的预防与治疗，混饮：鸡，每1L水添加本发明中药2-4ml，连用5-7日。
实施例5 本发明药物制备及使用
（1）称取含有下述重量的原料：
金银花120份、连翘120份、板蓝根120份、白花蛇舌草100份、鱼腥草100份、山豆根80份、重楼80份、青蒿80份、贯众80份、甘草60份。
（2）将步骤（1）中称得的各中药饮片经水煎煮三次，每次1.5h，合并煎液，过滤，滤液浓缩成浸膏，加入适量蔗糖、苯甲酸、尼泊金乙酯，加水搅拌、静置、过滤，制备成每1ml相当于原生药0.5g的口服液。
（3）本发明药物使用方法：用于鸡传染性支气管炎病的预防与治疗，混饮：鸡，每1L水添加本发明中药2-4ml，连用5-7日。
实施例6 本发明药物制备及使用
（1）称取含有下述重量的原料：
金银花150份、连翘150份、板蓝根150份、白花蛇舌草100份、鱼腥草100份、山豆根100份、重楼80份、青蒿100份、贯众80份、甘草60份。
（2）将步骤（1）中称得的各中药饮片经水煎煮三次，每次1.5h，合并煎液，过滤，滤液浓缩成浸膏，加入适量蔗糖、苯甲酸、尼泊金乙酯，加水搅拌、静置、过滤，制备成每1ml相当于原生药0.5g的口服液。
（3）本发明药物使用方法：用于鸡传染性支气管炎病的预防与治疗，混饮：鸡，每1L水添加本发明中药2-4ml，连用5-7日。
为表明本发明药物对鸡传染性支气管炎病的防治效果，对本发明药物进行临床疗效观察试验，以下通过试验例来进一步阐述本发明药物的有益效果。
试验例1
为观察本发明药物组合物预防人工感染鸡传染性支气管炎病的效果，本试验采用IBV标准株M41人工感染3周龄海兰褐雏鸡致其发病，于接种前在其饮水中加入口服液形式的本发明药物组合物，观察该药预防人工感染性鸡传染性支气管炎病的效果。
1 材料与方法
1.1 药品与试剂
用本发明药物实施例1-实施例6制备的药物组合物。5%利巴韦林可溶性粉，自配。传染性支气管炎病毒IBV标准株M41（EID50 107.0/mL）及阳性血清，购至中国兽药监察所。IBV使用前1 000倍稀释，接种于10日龄SPF鸡胚尿囊腔，每胚0.1 mL，37℃培养36 h，收集鸡胚尿囊液，加入青霉素1000 U/mL、链霉素1 mg/mL，2000 r/min离心15min，取上清作为病毒感染液备用。
1.2 试验动物与攻毒试验方法
选择未接种IB疫苗、体重均匀的3周龄海兰褐雏鸡，每只气管注射IBV病毒感染液0.2 mL。根据临床症状、病理变化及微量HA-HI试验确诊。
1.3 分组处理
3周龄罗曼雏鸡405只，随机分为9组，每组45只。试验1组采用实施例1制备，批号：120512；试验2组采用实施例2制备，批号：120514；试验3组采用实施例3制备，批号：120516；试验4组采用实施例4制备，批号：120518；试验5组采用实施例5制备，批号：120520；试验6组采用实施例6制备，批号：120522；试验1至6组于攻毒前5 d开始给药，各组均以3mL口服液兑水1 L，自由饮服，连续给药5 d。试验7组为药物对照组，5％利巴韦林可溶性粉，混饮，剂量1g/L。阳性对照组：感染后不给药；空白对照组：不感染不给药，隔离饲养。其它各组饲养条件均一致。
1.4 观察指标
每天观察各组的临床症状、病理变化，记录发病数、死亡数，计算发病率、死亡率、保护率。连续观察7日，统计各组与攻毒对照组的差异。
1.5 数据的分析和处理
采用PASW Statistics18.0软件对数据的显著性检验，对发病率、死亡率、保护率进行各组间X2检验。
2 结果
2.1 一般观察与临床诊断
试验鸡于攻毒后48h陆续发病。病鸡精神沉郁，食欲减损或废绝，畏寒怕冷，羽毛松乱，垂翅呆立，流泪，鼻黏膜肿胀等。继而呼吸困难，气促喘粗，咳嗽喷嚏，出现明显的气管啰音，尤其夜间严重。少量病鸡排白色稀粪或水样下痢。攻毒后72 h后开始出现死亡。
剖检病鸡见鼻腔咽喉、气管及支气管有浆液性、卡他性和干酪样的渗出物，气囊浑浊或附有黄色干酪样渗出物，支气管周围肺炎，气管后段或支气管内，可见到干酪样的栓子。取病鸡病料病毒分离物经过蔗糖密度梯度离心提纯、1µg/mL的磷酸酶37℃处理后，用微量HA-HI试验检测，具有典型的血凝性，能够凝集鸡0.5％红细胞，而且血凝性可被传染性支气管炎特异抗血清中和。说明病料中含有传染性支气管炎病毒，据此可确诊鸡传染性支气管炎病造模成功。
2.2 本发明口服液的预防效果
结果见表1。各攻毒组的发病率在44.44％-75.56％之间，阳性对照组攻毒后48 h开始出现死亡。试验1-6组及利巴韦林组的发病率显著低于阳性对照组（P<0.05），表明本发明口服液和利巴韦林对雏鸡感染IBVM41有显著的保护作用。口服液各试验组间，以试验5组预防效果最好，保护率达95.00%。表明本发明口服液对雏鸡感染IBVM41有显著的预防作用。
表1 各组的发病率、死亡率和保护率
3 小 结
本试验结果表明：试验5组预防效果最好，为该组方最佳配比，保护率达95.00%。试验结果证明，在雏鸡饮水中加人本发明口服液的药物组合物，对IBV强毒攻击有保护作用，攻毒后的发病率显著低于阳性对照组，表明本发明药物组合物可用于鸡传染性支气管炎病的预防。
试验例2
为观察连花解毒口服液对人工感染鸡传染性支气管炎病的治疗效果，本试验采用IBV标准株M41人工感染3周龄海兰褐雏鸡致其发病，于接种后在其饮水中加入连花解毒口服液，观察该药治疗人工感染性鸡传染性支气管炎病的效果。
1 材料与方法
1.1 药品与试剂
连花解毒口服液，由大北农集团动物保健技术研究中心研制，采用本发明药物实施例5制备，批号120520，100 mL/瓶。5%利巴韦林可溶性粉，自配。病毒处理同试验例1。
1.2 试验动物与攻毒试验方法
试验动物及攻毒试验方法同试验例1。
1.3 分组处理
3周龄罗曼雏鸡400只，随机分为4组，每组100只。第1为本发明药物组，3 mL连花解毒口服液兑水1 L，自由饮服，连续给药5 d；第2组为药物对照组，5％利巴韦林可溶性粉，混饮，剂量1g/L；药物组于攻毒后72 h鸡群出现症状时，开始给药。第3组为攻毒对照组，攻毒后不喂任何药物，隔离饲养；第4组为空白对照组，不攻毒，不给药，隔离饲养。
1.4 观察指标
每天观察各组的临床症状、病理变化，记录发病数、死亡数，计算发病率、死亡率、保护率。连续观察7日，统计各组与攻毒对照组的差异。
1.5 数据的分析和处理
采用PASW Statistics18.0软件对数据的显著性检验，对发病率、死亡率、保护率进行各组间X2检验。
2 结果
2.1 一般观察与临床诊断
试验鸡于攻毒后24h陆续发病，病鸡精神沉郁，食欲减损或废绝，畏寒怕冷，羽毛松乱，垂翅呆立，羞明流泪，鼻黏膜肿胀等。继而呼吸困难，气促喘粗，咳嗽喷嚏，出现明显的气管啰音，尤其夜间严重。约20％的鸡排白色稀粪或水样下痢，消瘦，饮水量增加。攻毒后48 h后开始出现死亡。根据临床诊断、剖检、微量HA-HI试验检测结果，可确诊攻毒造模成功。
2.2 连花解毒口服液的治疗效果
结果见表2、表3。各攻毒组的发病率在76.0％-81.0％之间，各攻毒后48 h开始出现死亡，第5 d达到高峰。本发明药物和利巴韦林组的死亡率显著低于阳性对照组（P<0.05），保护率明显高于阳性对照组（P<0.05）。本发明药物治疗效果略好于利巴韦林组，但统计学结果表明两者死亡率和保护率无显著差异（P>0.05）。本发明药物组通过饮水给予连花解毒口服液治疗后，与阳性对照组及利巴韦林组相比，病情明显减轻，精神、食欲逐渐好转，呼吸困难逐渐改善，湿啰音减弱，咳嗽减轻，攻毒后第7天后死亡停止，病鸡症状基本消失，饮食欲恢复正常，保护率达81.48%，显著高于阳性对照组56.41%（P<0.05）。表明连花解毒口服液对雏鸡感染IBVM41有显著的治疗作用。
表2 攻毒后各组的发病数和死亡数
表3 各组的发病率、死亡率和保护率
| 组 别 | 动物数（只） | 发病率（%） | 死亡率（%） | 保护率（%） |
| 本发明药物组 | 100 | 81 | 18.52 | 81.48 |
| 药物治疗组 | 100 | 76 | 23.68 | 76.32 |
| 阳性对照组 | 100 | 78 | 43.59 | 56.41 |
| 空白对照组 | 100 | 0 | 0 | - |
3 小 结
本试验结果表明，采用连花解毒口服液治疗病鸡，使人工感染性传染性支气管炎病情很快得到控制，保护率达81.48％，显著高于阳性对照组，证明连花解毒口服液可用于鸡传染性支气管炎病的治疗。
试验例3
2012年11月，河北省某市蛋鸡场的蛋鸡感染了传染性支气管炎。临床症状：4周龄以下的雏鸡出现流鼻液、喘气、咳嗽和气管啰音。病雏怕冷，互相拥挤在一起，精神萎靡，饮食和增重减少。有些病雏流眼泪，偶见眶下窦肿大。在5-6周龄以上的幼鸡出气管啰音，伴一定程度的咳嗽和喘气。成年产蛋母鸡喘气、气管啰音、咳嗽和打喷嚏，但程度比较轻，主要是表现在产蛋量下降，严重者减少一半，并产生软壳蛋和畸形蛋或蛋壳粗糙。根据发病情况、临床症状、病理变化和实验室病原检查诊断为该鸡场感染了一种低毒的鸡传染性支气管炎病毒。采用本发明药物连花解毒口服液进行治疗，将试验结果报告如下：
1 材料与方法
1.1 试验药物
连花解毒口服液，由大北农集团动物保健技术研究中心研制，采用本发明药物实施例5制备，批号120906，100 mL/瓶。
1.2分组处理
将鸡棚、料槽和饮水槽清扫、消毒，挑出400羽病鸡随机分成连花解毒口服液高、中、低剂量组和空白对照组。高剂量组，100羽，用连花解毒口服液按6 mL兑水1 L给药；连花解毒口服液中剂量组，100羽，用连花解毒口服液按4 mL兑水1 L给药；连花解毒口服液低剂量组，100羽，用连花解毒口服液按2 mL兑水1 L给药。2次/d，连用5 d。空白对照组，100羽，不给药。
1.3临床观察
停药后观察期14 d，每天观察各组鸡的临床症状，记录产蛋率情况。
1.4 疗效判定
每日观察记录鸡群的精神、采食量、粪便变化、产蛋率和破壳率，于处理后1周按以下标准判定和统计疗效：
治愈：鸡群的临床症状消失，平均周产蛋率上升达到90％以上、破壳率下降、粪便恢复正常。
好转：粪便基本恢复正常，平均周产蛋率在原有的基础上上升2％但没有达到90％，破壳率下降。
总有效率=治愈率+好转率。
无效：症状不减轻甚至加重，产蛋率未上升或下降，破壳率没有变化或上升。
1.5 数据处理
采用PASW Statistics18.0软件对数据的显著性检验，对各组间治愈率、好转率、有效率进行X2检验。
2 治疗结果
连花解毒口服液3个试验组的治愈率和总有效率均显著高于空白对照组（P<0.05）；连花解毒口服液的高剂量组、中剂量组的治愈率和总有效率显著高于低剂量组；高剂量组、中剂量组之间的疗效差异不显著（P>0.05），表明连花解毒口服液对鸡新传染性支气管炎病有一定的疗效（见表4）。
表4 连花解毒口服液对鸡传染性支气管炎病的治疗效果
| 组别 | 动物数 | 治愈数 | 好转数 | 好转率（%） | 治愈率（%） | 总有效率（%） |
| 高剂量组 | 100 | 27 | 55 | 55.0 | 27.0<sup>a</sup> | 82.0<sup>a</sup> |
| 中剂量组 | 100 | 24 | 52 | 53.0 | 24.0<sup>a</sup> | 76.0<sup>a</sup> |
| 低剂量组 | 100 | 8 | 39 | 39.0 | 8.0<sup>b</sup> | 47.0<sup>b</sup> |
| 空白对照组 | 100 | - | 15 | 15.0 | - | 15.0<sup>c</sup> |
注：同列数据上标不同小写字母表示差异显著。
3 小节
试验结果表明，连花解毒口服液高剂量组的治愈率和总有效率分别为27.0％和82.0％，连花解毒口服液中剂量组的治愈率和总有效率分别为24.0％和76.0％，明显好于低剂量组和空白对照组，低剂量组的治愈率和总有效率也明显好于空白对照组。试验结果证明连花解毒口服液对感染传染性支气管炎的蛋鸡有一定的治疗效果，可用于鸡传染性支气管炎病的预防与治疗。
试验例4
2012年12月，河北省衡水市某养鸡专业户饲养的2000余只罗曼鸡，育至25日龄时开始发病，病鸡表现精神沉郁，羽毛松乱，翅膀下垂，拱背缩颈，张口呼吸，甩头，叫声嘶哑，拉白色稀粪，饮水增加，食欲减少，出现症状2天后开始死亡，发病初期使用氧氟沙星等治疗，但收效甚微整个发病持续1月，经统计共发病712只，发病率35.6%，死亡363只，死亡率50.9%.主要病理变化表现为肾脏肿大，肾小管扩张，输尿管充满白色尿酸盐，可见典型的花斑肾，直肠和泄殖腔内充满白色稀粪，气管内有黏稠分泌物，有的气管下段有血栓，肺部充血等后经实验室检验确诊为鸡传染性支气管炎。由于诊断及时，对引进的第二批种蛋及第三批种蛋孵出的雏鸡给药预防，结果如下：
1 材料与方法
1.1 试验药物
连花解毒口服液，由大北农集团动物保健技术研究中心研制，采用本发明药物实施例5制备，批号121118，100 mL/瓶。对照中药，处方板蓝根30g、青黛50g、杏仁30g、黄芩30g、桔梗20g、栀子20g、紫苑10g、款冬花15g、甘草35g，经水煎煮2次，浓缩后用60%乙醇沉淀，制备成每1ml相当于原生药0.5g的口服液。
1.2分组处理
将第一批发病没有应用本发明药物的2000只作为空白对照组；第二批孵化雏鸡1500只，应用对照中药治疗；第三批孵化雏鸡1800应用本发明药物连花解毒口服液治疗；给药组于雏鸡20日龄时采用连花解毒口服液按4 mL兑水1 L给药预防，连用7 d。
1.3临床观察
停药后观察期14 d，每天观察各组鸡的发病数、死亡数，40日时统计发病数及死亡数，计算发病率及死亡率。
1.4 数据处理
采用PASW Statistics18.0软件对数据的显著性检验，对各组间发病率、死亡率进行X2检验。
2 预防结果
预防试验结果见表5。从表5中可以看出，给药组的发病率和死亡率均比空白对照组低，差异显著（P<0.05）。与对照中药组比较，本发明药物连花解毒口服液组的发病率和死亡率较低，说明本发明中药连花解毒口服液对鸡传染性支气管炎的预防效果好于对照中药组。
表5 预防试验结果
| 组别 | 动物数 | 发病数数 | 死亡数 | 发病率（%） | 死亡率（%） |
| 空白对照组 | 2000 | 712 | 363 | 35.6 | 50.9 |
| 对照中药组 | 1500 | 448 | 52 | 29.8 | 11.6 |
| 连花解毒口服液组 | 1800 | 435 | 45 | 24.17 | 10.34 |
3 小结
本试验证明：连花解毒口服液可有效用于鸡传染性支气管炎的预防。在进行本试验的同时，强化防疫消毒，搞好环境卫生，加强饲养管理等综合措施，极大地减少了经济损失。
Claims (4)
1.一种防治鸡传染性支气管炎病的连花解毒口服液，其特征在于，含有活性成分，所述活性成分由金银花100-150份、连翘100-150份、板蓝根100-150份、白花蛇舌草80-120份、鱼腥草80-120份、山豆根60-100份、重楼60-100份、青蒿60-100份、贯众60-100份和甘草30-80份制成。
2.根据权利要求1所述的连花解毒口服液，其特征在于，所述活性成分由金银花110-130份、连翘110-130份、板蓝根110-130份、白花蛇舌草90-110份、鱼腥草90-110份、山豆根70-90份、重楼70-90份、青蒿70-90份、贯众70-90份和甘草50-70份制成。
3.根据权利要求2所述的连花解毒口服液，其特征在于，所述活性成分由金银花120份、连翘120份、板蓝根120份、白花蛇舌草100份、鱼腥草100份、山豆根80份、重楼80份、青蒿80份、贯众80份和甘草60份制成。
4.一种权利要求1-3任一项所述的连花解毒口服液的制备方法，其包括如下步骤：
（1）按重量份称取各中药饮片；
（2）将称得的各中药饮片经水煎煮三次，每次1.5h，合并煎液，过滤，滤液浓缩成浸膏，加入适量蔗糖、苯甲酸、尼泊金乙酯，加水搅拌、静置、过滤，制备成每1ml相当于原生药0.5g的口服液。
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