CN107569548A - 一种治疗轮状病毒的中药组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗轮状病毒的中药组合物及其制备方法，该组合物由以下重量份的中药组成：重瓣白花石榴5～15重量份，华西小石积7～21重量份，藏绵芪6～18重量份，迭裂黄堇2～6重量份，唐古特虎耳草15～45重量份，防腐剂苯甲酸重量比为0.1％～0.2％。本发明的中药组合物具有标本兼治，整体疗效高，疗程短，不易产生耐药性，残留低，毒副作用小等优点。

Description

一种治疗轮状病毒的中药组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种治疗轮状病毒的中药组合物以及该中药组合物的制备和用途，属于医药卫生领域。

背景技术

轮状病毒是引起婴幼儿腹泻的主要病原体之一，其主要感染小肠上皮细胞，从而造成细胞损伤，引起腹泻。轮状病毒每年在夏秋冬季流行，感染途径为粪－口途径，临床表现为急性胃肠炎，呈渗透性腹泻病，病程一般为7天，发热持续3天，呕吐2～3天，腹泻5天，严重出现脱水症状。

轮状病毒(Rotavirus，简称RV)是一种双链核糖核酸病毒，属于呼肠孤病毒科。它是婴儿与幼儿腹泻的单一主因，几乎世界上每个大约五岁的小孩都曾感染过轮状病毒至少一次。然而，每一次感染后人体免疫力会逐渐增强，后续感染的影响就会减轻，因而成人就很少受到其影响。

轮状病毒是由消化道传染的。它会感染与小肠连结的肠黏膜细胞(enterocyte)并且产生肠毒素(enterotoxin)，肠毒素会引起肠胃炎，导致严重的腹泻，有时候甚至会因为脱水而导致死亡。虽然轮状病毒于1973年就被由澳洲的露丝·毕夏普(Ruth Bishop)所发现，而且造成婴儿与幼儿总计超过50％以上因为严重腹泻而住院治疗的案例，但是在公共卫生社群中它仍然没有被广泛地重视，特别是在发展中国家更是如此。除了对人类健康的影响之外，轮状病毒也会感染动物，是家畜的病原体之一。

目前尚未有使用安全、用量少且能有效治疗轮状病毒的纯中药制剂。

发明内容

本发明的目的在于提供一种使用安全、用量少且能有效治疗轮状病毒的中药组合物，该中药组合物能迅速杀灭肠道轮状病毒，减少腹泻次数，减轻脱水症状，避免加重酸中毒，达到标本兼治的目的。

本发明的另一目的是提供该中药组合物的制备方法。

本发明的目的是通过以下方式实现的：

一种治疗轮状病毒的中药组合物，它由以下重量份的中药组成：重瓣白花石榴5～15重量份，华西小石积7～21重量份，藏绵芪6～18重量份，迭裂黄堇2～6重量份，唐古特虎耳草15～45重量份。

上述治疗轮状病毒病的中药组合物，优选由以下重量份的中药组成：重瓣白花石榴6～8重量份，华西小石积9～12重量份，藏绵芪8～10重量份，迭裂黄堇3～4重量份，唐古特虎耳草16～20重量份。

本发明所述的治疗轮状病毒的中药组合物可与药学可接受的辅料制成剂型。优选所述的剂型为口服液。

上述用于治疗轮状病毒病的中药组合物的制备方法包括以下步骤：

(1)将重瓣白花石榴、唐古特虎耳草混合加水浸泡后蒸馏，收集蒸馏液，蒸馏液重蒸馏一次，收集药材总重量1/2量的蒸馏液；

(2)将蒸馏后的残渣和残液加入藏绵芪、华西小石积、迭裂黄堇煎煮2～3次，煎液合并后浓缩至稠状，加95％乙醇调至乙醇60％～70％，充分搅匀，冷藏沉淀，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加95％乙醇至乙醇75％～80％，搅匀，冷藏，沉淀，过滤，滤液回收乙醇后再浓缩至无醇味，得到药液浓缩液；

(3)将重瓣白花石榴、唐古特虎耳草蒸馏液与藏绵芪、华西小石积、迭裂黄堇浓缩液合并。

上述步骤(1)中，重瓣白花石榴、唐古特虎耳草混合加2种中药材总重量的4～5倍水，浸泡24～30小时，使药材充分膨胀。第一次蒸馏液是药材重量的一倍。

步骤(2)中，冷藏沉淀时间均为48小时。步骤(2)中，滤液回收乙醇后再浓缩至无醇味后，得到的浓缩药液可以再加浓缩液2倍水，冷藏沉淀48小时，再浓缩至所需浓度；可以进一步达到充分去除药液中鞣质、蛋白、淀粉、树脂等无效成份的目的。

上述用于治疗轮状病毒的中药口服液的制备方法包括以下步骤：

(1)将重瓣白花石榴、唐古特虎耳草混合加水浸泡后蒸馏，收集蒸馏液，蒸馏液重蒸馏一次，收集药材重量1/2量的蒸馏液；

(2)将蒸馏后的残渣和残液加入藏绵芪、华西小石积、迭裂黄堇煎煮2～3次，煎液合并后浓缩至稠状，加95％乙醇调至乙醇60％～70％，充分搅匀，冷藏沉淀，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加95％乙醇至乙醇75％～80％，搅匀，冷藏，沉淀，过滤，滤液回收乙醇后再浓缩至无醇味，药液浓缩；

(3)将重瓣白花石榴、唐古特虎耳草蒸馏液与步骤(2)的药液浓缩液合并，得到浓度为每毫升含1～2克生药量的药液。

使用量：每毫升含1克生药浓度，0-1岁一次口服4-6mL，2-3岁一次服7-10mL，4-5岁一次服11-15mL。一天2次口服，连用3-5天。

所述的用于治疗轮状病毒的中药组合物可在制备治疗轮状病毒的药物中应用。

所述的用于治疗轮状病毒病的中药组合物可在制备抑制小肠推进的药物中应用。

所述的用于治疗轮状病毒病的中药组合物可在止泻的药物中应用。

根据中医的病理学说，轮状病毒病由外感湿热疫毒所致，纯属胃肠湿热。由于病期与病理不同，所产生的证候有差异。病初表热未解而已入胃肠，为表热挟杂胃肠湿热症。中期后，湿热蕴结胃肠，胃失和降，故见呕吐，湿热犯脾，则食欲减退；湿热下注，大肠传导和小肠分泌失调，水湿不能分离，故泻如注，尿减少；内热积盛，故喜饮。本发明药物组合物中，重瓣白花石榴为石榴科植物重瓣白花石榴Punica granatum L.cv.multipler Sweet的花。功能：涩肠止血。主治久痢，便血，咳血，衄血。华西小石积为蔷薇科植物华西小石积Osteomeles Schneid的叶或根。功能：清热解毒，收敛止泻，祛风除湿。主治疮疡肿毒，咽喉肿痛，痢疾，泄泻，肠风下血，阴挺，风湿痹痛。藏绵芪为豆科植物西藏黄芪Astrogalustibetanus Benth.ex Bunge的根。功能：补气固表，托毒生肌。主治体弱，表虚自汗，贫血，消化不良，带下，月经不调，水肿，痈疽不溃或溃不收口。迭裂黄堇为罂粟科植物迭裂黄堇Corydalis dasyptera Maxim的全草。功能：清热解毒,止血敛疮。主治热病高热，黄疸型肝炎，肠炎，外伤出血，疮疡溃后不收口。唐古特虎耳草为虎耳草科植物唐古特虎耳草Saxifraga tangutica Engl的全草。功能：清湿热，利肝胆。主治肝炎，胆囊炎，流行性感冒。本发明的治疗以清热解毒，除湿止泻，益气滋阴，止泻收敛，保护胃肠粘膜为原则，提供一种有效治疗轮状病毒感染的中药组合物。

本发明选择的中药治疗轮状病毒感染，容易获取，价格低廉，毒副作用小，几乎无残留，无抗药性，不污染环境，还能达到标本兼治的效果。

下面就本发明的临床效果进一步说明本发明的疗效

一、对蓖麻油所致小鼠泄泻模型的影响

取ICR小鼠80只，雌雄各半，随机分成空白对照组、模型对照组、思密达(蒙脱石散)组、本发明实施例4高剂量组、中剂量组、低剂量组、华西小石积组、唐古特虎耳草组。按组分别灌胃给予相应药物0.2mL/10gB.W.，空白对照组与模型组给予等体积生理盐水，每日一次，连续三天。末次给药40分钟后，空白对照组每只小鼠给予0.2mL生理盐水，其余试验组每只小鼠灌胃给予0.2毫升蓖麻油。然后将小鼠放入正下方放有滤纸的单元隔离笼内，每格一只。观察指标：湿粪计数；每单元格正下方铺一10cm×10cm面积的滤纸作湿粪计数。以湿粪粒数反应泄泻程度，前1～6小时每小时更换滤纸一次，7～24小时内，更换滤纸的次数，以湿粪不重叠为原则，计数1～24小时各只小鼠的累积湿粪总数，与模型对照组比较，用SPSS软件进行组间t检验。结果见表1.

表1对蓖麻油所致泄泻的止泻作用(X±SD)

组别	小鼠数(只)	给药剂量(g/kg)	24h稀便粒数
				空白对照组	10	0	0
模型对照组	10	0	7.2±3.06
				思密达组	10	0.45	1.9±1.95*
本发明高剂量组	10	20.0	0.62±1.25**
				本发明中剂量组	10	10.0	0.93±1.51**
本发明低剂量组	10	5.0	2.28±1.75*
				华西小石积组	10	20.0	1.8±1.63*
唐古特虎耳草组	10	20.0	6.1±2.84

注：与模型对照组比较，*<0.05，**<0.01

从表1可见，本发明药物能显著抑制蓖麻油所致小鼠泄泻。

二、本发明对小肠推进运动试验

取ICR小鼠70只，雌雄各半，随机分成正常对照组、易蒙停(盐酸洛派丁胺胶囊)组、本发明实施例1高剂量组、中剂量组、低剂量组、华西小石积组、唐古特虎耳草组。按组分别灌胃，分别给予相应药物0.2mL/10gB.W.，正常对照组给予等体积生理盐水，每日一次，连续4天。各组小鼠在给药后第三天开始禁食24小时。实验第四天，给药后1小时，灌胃5％活性炭悬液0.2mL/10gB.W.，20分钟后，脱颈椎处死小鼠，打开腹腔，分离肠系膜，剪取上至幽门，下至回盲部之间的肠管，置于平底托盘上，轻轻将小肠拉成直线，测量肠道长度作为“小肠总长度”，从幽门至炭末前沿的距离作为“炭末在肠道推进距离”。计算炭末推进百分率，用spss软件进行组间t检验。

炭末推进率(％)＝炭末在小肠推进距离/小肠总长度×100％。

结果见表2。

表2对小肠推进运动的影响(X±SD)

注：与正常对照组比较，*<0.05，**<0.01

从表2可见，本发明药物比易蒙停对小肠推进功能有明显抑制作用。

三、安全性评价

为了明确本发明制剂的毒副作用，并对其安全性做出准确、客观的评价，为临床用药提供科学依据，确保用药安全，进行了本发明的毒性试验。

急性毒性试验：通过对ICR小鼠进行本发明的(按实施例2制备得到)LD₅₀和最大耐受量试验表明，按设计剂量经口服后，8日内各组小鼠行为体征正常，均未出现中毒症状和死亡。故无法测定出LD₅₀，而只好以最大给药量50g/kg为最高剂量。第10天扑杀后，各组小鼠的肝、肾、脾、肺等脏器均无病变。

长期毒性试验：选用SD大鼠24只，分成3个组，每组8只，雌雄各半，给予不同剂量(18.0、9.0、4.5g生药/kg)的本发明的中药(按实施例3制备得到)，每天灌药一次，连续30天。本发明的三个剂量组动物生活状态良好，外观体征、行为活动、进食量和体重增长均无异常变化。各组大鼠的肝、肾、脾、肺等脏器均无病变。表明本发明无毒副作用和不良反应，临床应用安全可靠。

四、临床资料

1、一般资料临床治疗观察135例病例患儿，大便轮状病毒抗原阳性(ELISA法)，均诊断为轮状病毒性肠炎，大便呈黄色水样或蛋花样，大便常规化验阴性，细菌培养阴性，大便次数6次一25次/d。将其分为治疗组90例(其中男52例，女38例)，对照组45例(其中男27例，女18例)；年龄5个月～25个月；均发病后1d-5d就诊，大多数伴有不同程度的发热、呕吐、脱水及酸中毒。两组资料经统计学处理无显著性差异(P>0.05)，具有可比性。

2.诊断标准参照《实用儿科学》，并具有以下特点：(1)发热、呕吐、腹泻，水样便，无脓血、粘液，1天内大便4次以上，小便减少，病程在3天以内。(2)就诊前未服用清热解毒及抗病毒药(3)大便轮状病毒检测阳性。

3.治疗方法

对照组：不用抗生素，给予口服补液盐，纠正脱水及酸中毒，并调饮食，将患儿母乳或牛乳喂养次数减半，以婴儿米粉、稀饭补充等对症治疗。根据其失水程度不同适当补液(口服或静脉补液)，纠正水电解质及酸碱平衡紊乱，并常规口服病毒唑片10mg一15mg/(kg·d)及思密达1/2包一1包。

治疗组：在采用对照组相同治疗的基础上加服用中药口服液(实施例1)，1d 1次，一次口服4-10mL。

4.疗效标准

显效：治疗72h大便性状及次数恢复正常，全身症状消失；

有效：治疗72h大便性状、次数明显好转，全身症状明显改善；

无效：治疗72h大便性状、次数及全身症状均无好转。

5.治疗结果

治疗组中显效68例，有效16例，无效6例，总有效率93.3％。对照组中显效10例，有效12例，无效23例，总有效率48.8％：两组总有效率比较，P<0.05，有显著性差异。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步的描述

实施例1：

组方；重瓣白花石榴6克，华西小石积9克，藏绵芪8克，迭裂黄堇3克，唐古特虎耳草16克，具体制备方法如下：

(1)将重瓣白花石榴、唐古特虎耳草混合，加2种药材总重量的4倍水浸泡24小时，蒸馏，收集蒸馏液，第一次蒸馏液是药材重量的一倍，蒸馏液重蒸馏一次，收集药材重量1/2量的蒸馏液，装瓶灭菌备用；

(2)将蒸馏后的残渣、残液加入华西小石积、藏绵芪、迭裂黄堇，煎煮3次，煎液合并后浓缩至稠状，加95％乙醇调至乙醇60％～70％，充分搅匀，冷藏，沉淀48小时，回收乙醇。回收乙醇后的药液再加95％乙醇至75％～80％，搅匀冷藏沉淀48小时，回收乙醇，再浓缩至无醇味，药液继续浓缩至所需浓度；

(3)将重瓣白花石榴、唐古特虎耳草2味中药蒸馏液与步骤(2)的药液浓缩液合并，达到每毫升含1克生药浓度，加入药液百分比为0.1％防腐剂苯甲酸，无菌分装即得。

实施例2：

组方；重瓣白花石榴5克，华西小石积7克，藏绵芪6克，迭裂黄堇2克，唐古特虎耳草20克，具体制备方法如下：

(1)将重瓣白花石榴、唐古特虎耳草混合，加2钟药材总重量的5倍水浸泡24小时，蒸馏，收集蒸馏液，第一次蒸馏液是药材重量的一倍，蒸馏液重蒸馏一次，收集药材重量1/2量的蒸馏液，装瓶灭菌备用；

(2)将蒸馏后的残渣、残液加入华西小石积、藏绵芪、迭裂黄堇煎煮3次，煎液合并后浓缩至稠状，加95％乙醇调至乙醇60％～70％，充分搅匀，冷藏，沉淀48小时，回收乙醇。回收乙醇后的药液再加95％乙醇至75％～80％，搅匀冷藏沉淀48小时，回收乙醇，再浓缩至无醇味，药液继续浓缩至所需浓度；

(3)将重瓣白花石榴、唐古特虎耳草2味中药蒸馏液与步骤(2)的药液浓缩液合并，达到每毫升含1克生药浓度，加入药液百分比为0.15％防腐剂苯甲酸，无菌分装即得。

实施例3：

组方；重瓣白花石榴15克，华西小石积14克，藏绵芪10克，迭裂黄堇4克，唐古特虎耳草30克，具体制备方法如下：

(1)将重瓣白花石榴、唐古特虎耳草混合加2种药材总重量的4倍水浸泡蒸馏，收集蒸馏液，第一次蒸馏液是药材重量的一倍，蒸馏液重蒸馏一次，收集药材重量1/2量的蒸馏液，装瓶灭菌备用；

(2)将蒸馏后的残渣、残液加入华西小石积、藏绵芪、迭裂黄堇煎煮3次，煎液合并后浓缩至稠状，加95％乙醇调至乙醇60％～70％，充分搅匀，冷藏，沉淀48小时，回收乙醇。回收乙醇后的药液再加95％乙醇至75％～80％，搅匀冷藏沉淀48小时，回收乙醇，再浓缩至无醇味，药液继续浓缩至所需浓度；

(3)将重瓣白花石榴、唐古特虎耳草2味中药蒸馏液与步骤(2)的药液浓缩液合并，达到每毫升含2克生药浓度，加入药液百分比为0.1％防腐剂苯甲酸，无菌分装即得。

实施例4：

组方；重瓣白花石榴8克，华西小石积10克，藏绵芪9克，迭裂黄堇3克，唐古特虎耳草20克，具体制备方法如下：

(1)将重瓣白花石榴、唐古特虎耳草混合，加2种药材总重量的5倍水浸泡30小时，蒸馏，收集蒸馏液，第一次蒸馏液是药材重量的一倍，蒸馏液重蒸馏一次，收集药材重量1/2量的蒸馏液，装瓶灭菌备用；

(2)将蒸馏后的残渣、残液加入华西小石积、藏绵芪、迭裂黄堇煎煮3次，煎液合并后浓缩至稠状，加95％乙醇调至乙醇60％～70％，充分搅匀，冷藏，沉淀48小时，回收乙醇。回收乙醇后的药液再加95％乙醇至75％～80％，搅匀冷藏沉淀48小时，回收乙醇，再浓缩至无醇味，得到的浓缩药液加浓缩液2倍水，冷藏沉淀48小时，再浓缩至所需浓度；

(3)将重瓣白花石榴、唐古特虎耳草2味中药蒸馏液与步骤(2)的药液浓缩液合并，达到每毫升含1克生药浓度，加入药液百分比为0.2％防腐剂苯甲酸，无菌分装即得。

Claims (9)

1.一种治疗轮状病毒的中药组合物，其特征在于，它由以下重量份的中药组成：重瓣白花石榴5～15重量份，华西小石积7～21重量份，藏绵芪6～18重量份，迭裂黄堇2～6重量份，唐古特虎耳草15～45重量份。

2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，它由以下重量份的中药组成：重瓣白花石榴6～8重量份，华西小石积9～12重量份，藏绵芪8～10重量份，迭裂黄堇3～4重量份，唐古特虎耳草16～20重量份。

3.根据权利要求1或2所述的治疗轮状病毒病的中药组合物，其特征在于所述的组合物与药学可接受的辅料制成剂型。

4.权利要求3所述的用于治疗轮状病毒的中药组合物，其特征在于所述的剂型为口服液。

5.权利要求1或要求2所述的用于治疗轮状病毒的中药组合物的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤：

(1)将重瓣白花石榴、唐古特虎耳草混合加水浸泡后蒸馏，收集蒸馏液，蒸馏液重蒸馏一次，收集药材总重量1/2量的蒸馏液；

(2)将蒸馏后的残渣和残液加入藏绵芪、华西小石积、迭裂黄堇煎煮2～3次，煎液合并后浓缩至稠状，加95％乙醇调至乙醇60％～70％，充分搅匀，冷藏沉淀，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加95％乙醇至乙醇75％～80％，搅匀，冷藏沉淀，过滤，滤液回收乙醇后再浓缩至无醇味，得到药液浓缩液；

(3)将重瓣白花石榴、唐古特虎耳草蒸馏液与步骤(2)的药液浓缩液合并。

6.权利要求4所述的用于治疗轮状病毒的口服液的制备方法，其特征在于该口服液的制备方法包括以下步骤：

(1)将重瓣白花石榴、唐古特虎耳草混合加水浸泡后蒸馏，收集蒸馏液，蒸馏液重蒸馏一次，收集药材重量1/2量的蒸馏液；

(2)将蒸馏后的残渣和残液加入藏绵芪、华西小石积、迭裂黄堇煎煮2～3次，煎液合并后浓缩至稠状，加95％乙醇调至乙醇60％～70％，充分搅匀，冷藏沉淀，过滤，滤液回收乙醇，回收乙醇后的药液再加95％乙醇至乙醇75％～80％，搅匀，冷藏，沉淀，过滤，滤液回收乙醇后再浓缩至无醇味，得到药液浓缩液；

(3)将重瓣白花石榴、唐古特虎耳草蒸馏液与步骤(2)的药液浓缩液合并，得到浓度为每毫升含1～2克生药量的药液。

7.权利要求1或2所述的用于治疗轮状病毒的中药组合物在制备治疗轮状病毒的药物中的应用。

8.权利要求1或2所述的用于治疗轮状病毒的中药组合物在制备抑制小肠推进的药物中的应用。

9.权利要求1或2所述的用于治疗轮状病毒的中药组合物在制备止泻的药物中的应用。