CN101745102B - 5-氨基酮戊酸及其衍生物的组合物及其用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及医药技术领域，尤其是一种5-氨基酮戊酸及其衍生物组合物及其用途。本发明公开了一种5-氨基酮戊酸及其衍生物的组合物，包括有效剂量的活性成分5-氨基酮戊酸或其衍生物，其特征在于所述组合物还包括0.035-277U/g组合物的蛋白水解酶。同时本发明还公开了上述组合物在制备治疗妇科疾病的药物中用途。本发明所述组合物能有效地改善了宫颈粘液对药物活性成分ALA及其衍生物的影响，增加了药物药物活性成分ALA及其衍生物在宫颈部位的渗透性，提高了ALA及其衍生物的生物利用度。本发明所述组合物不仅将极大提高ALA及其衍生物治疗妇科疾病尤其是宫颈疾病的效果，而且也将会改善在现有技术治疗过程中患者不适度。

Description

5-氨基酮戊酸及其衍生物的组合物及其用途

技术领域

本发明涉及医药技术领域，尤其是一种5-氨基酮戊酸及其衍生物组合物及其用途。

背景技术

5-氨基酮戊酸(δ-aminolevulinic acid，ALA)及其衍生物是常用的光动力治疗药，已经上市的产品包括5-氨基酮戊酸的盐酸盐，5-氨基酮戊酸甲酯和5-氨基酮戊酸己酯。进入人体后转化为血卟啉(ProtorphyrinIX，PpIX)并滞留体内，经特定波长的光照后即产生活性氧如单线态氧和其他自由基并杀死致病细胞(癌细胞、HPV和HSV感染的细胞、疣体细胞)，而邻近的正常组织细胞不受任何影响。临床上5-氨基酮戊酸(δ-aminolevulinic acid，ALA)及其衍生物用于治疗痤疮、尖锐湿疣、光化性角化病、宫颈癌及阴道及宫颈部位的上皮鳞状细胞瘤样变等多种疾病。

使用ALA及其衍生物治疗宫颈及阴道部位疾病时通常将其直接置备成水溶液擦涂。例如：Kasiak Jan等人(Internet Journal of Gynecology and Obstetrics(2006)，6(1))公开了以20％ALA溶液治疗HPV高危的宫颈部位病变的光动力疗法，治疗率为16/20。由于阴道和宫颈部位的特殊生理结构，ALA溶液擦涂给药过程中不可避免会刺激引导分泌大量粘液，使药物随流出的粘液带出体外，不能有效的与病灶接触。而且在给药之前通常需要用干的纱布之类的东西先伸入患者的阴道(或宫颈)部位将其内部粘液擦去，不仅引起患者的极度不舒适感，而且给医护人员带来不便。即便如此，已经涂在病灶部位的药物仍然部分会被因药物刺激产生的粘液冲走，因而药物进入体内的量达不到有效治疗量，导致治疗效果的下降。

另一种是凝胶制剂：Journal of Pharmaceutical Sciences(2008)，97(7)，2680-2690：公开了17％的PF407与ALA己酯共同配成温敏凝胶制剂，用于宫颈部位给药，治疗宫颈上皮瘤样变(CIN)。Fehr Mathias K等(Lasers in surgery and medicine(2002)，30(4)，273-9)公开了10％ALA凝胶局部用于治疗外阴和阴道疣体或上皮内瘤样变(VIN，VaIN)和疣体的方法，结果显示ALA光动力治疗的有效率达到60％以上。ALA局部给药时必须使药物与给药部位接触3-5小时，才能使ALA进入病灶细胞，起到治疗作用。因此，虽然凝胶进入后会根据给药部位的生理结构贴合在腔道内壁上，一定程度上减少了ALA的流失，但是给药前仍然需要事先对腔道进行清理，尤其是随着敷药时间延长，宫颈分泌的大量粘液容易使原本贴合在腔道内壁上的凝胶脱落，实际敷药时间下降，给药量下降，治疗效果不佳。

发明内容

本发明的目的在于提供一种5-氨基酮戊酸及其衍生物的组合物，以克服阴道或宫颈部位给药时腔道受药物刺激分泌大量粘液影响5-氨基酮戊酸及其衍生物在病灶部位的吸收。

本发明的另一个目的是提供这种5-氨基酮戊酸及其衍生物的组合物的用途。

本发明所述的5-氨基酮戊酸及其衍生物的组合物，包括有效剂量的活性成分5-氨基酮戊酸或其衍生物，其特征在于所述组合物还包括蛋白水解酶，所述蛋白水解酶含量为0.035-277U/g组合物。优选1-100U/g组合物，更优选10-30U/g组合物。

本发明的思路在于：由于宫颈粘液的主要成分是粘蛋白，因此在将ALA及其衍生物用于阴道或宫颈的同时使用适量的蛋白水解酶可以将宫颈析出的粘液分解，ALA及其衍生物不会被宫颈粘液冲走或稀释，在3-5小时的给药时间内也可与病灶保持有效接触，以提高ALA及其衍生物的生物利用度，提高治疗效果。

在一些实施方式中，本发明所述蛋白水解酶可选自糜蛋白酶(胰凝乳蛋白酶)、胃蛋白、胰蛋白酶、弹性蛋白酶、链霉蛋白酶或中性蛋白酶之一或它们的任一组合。

在一些实施方式中，本发明所述蛋白水解酶为胃蛋白酶，其含量为0.035-277U/克组合物，优选1-100U/g组合物，更优选10-30U/g组合物。

本发明所述的5-氨基酮戊酸衍生物包括：盐酸盐、硫酸盐、琥珀酸盐、甲酯、己酯等；优选5-氨基酮戊酸盐酸盐。

在一些实施方式中，本发明的组合物中还包含以所述组合物总重量为基准，重量百分比为0.2％-66％的稳定剂和/或抑菌剂和/或助流剂和/或增粘剂。

所述的抑菌剂选自下列至少一种：尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、溴化十六烷铵、氯化十六烷基吡啶；

所述的助流剂是聚维酮或微粉硅胶；

所述的增粘剂选自下列至少一种：聚乙二醇、甲基纤维素、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素；

所述的稳定剂可以是乙二胺四乙酸或乙二胺四乙酸二钠。由于溶液状态下的本发明的5-氨基酮戊酸盐酸盐可能发生降解(European Journal of Pharmaceutical Sciences(1999)，7(2)，87-91)，组合物中加入适量的稳定剂，可以进一步保证组合物使用的安全有效性。

本发明组合物还可以与本领域技术人员熟知的药用辅料制成溶液剂、栓剂或凝胶剂等。优选将5-氨基酮戊酸或其衍生物与胃蛋白酶的混合物与凝胶基质和水或生理盐水混合成凝胶制剂直接放入阴道或宫颈使用，以便药物与病灶的充分接触。所述的凝胶基质包括泊洛沙姆407(Poloxamer 407，PF407)、卡波姆、壳聚糖衍生物、或羟乙基纤维素，优选PF407。

采用本发明组合物制成上述任何一种形式的局部给药制剂，由于给药过程中药物与病灶接触部位的宫颈粘液会被蛋白水解酶分解，不会形成粘液冲走药物，甚至患者行走、蹲跳等站立式行为时药物也不会脱离病灶部，促进了5-氨基酮戊酸或其衍生物的吸收。

另一方面，本发明还公开了上述组合物在制备治疗妇科疾病的药物中用途，所述的妇科疾病包括现有技术中5-氨基酮戊酸或其衍生物的妇科疾病的治疗范围，包括但不限于宫颈上皮瘤样变(CIN)、HPV感染的疾病如宫颈炎、宫颈癌、阴道上皮内瘤样变(VaIN)和外阴上皮内瘤样变(VIN)。

本发明所述组合物能有效地改善了宫颈粘液对药物活性成分ALA及其衍生物的影响，增加了药物药物活性成分ALA及其衍生物在宫颈部位的渗透性，提高了ALA及其衍生物的生物利用度。本发明所述组合物不仅将极大提高ALA及其衍生物治疗妇科疾病尤其是宫颈疾病的效果，而且也将会改善在现有技术治疗过程中患者不适度。

具体实施方式

本发明中，术语“蛋白水解酶”是指能水解粘蛋白的非限制性水解蛋白酶或限制性水解蛋白酶，按其活性中心和最适pH值，又可将蛋白水解酶分为丝氨酸蛋白酶、巯基蛋白酶、金属蛋白酶和酸性蛋白酶。按其反应的最适pH值，分为酸性蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶。

术语“有效剂量”是指足以产生疗效的量。有效量可分一或多次给药。通常，有效量足以缓和、改善、稳定、减慢或延迟疾病的进一步发展。在一些优选实施方案中，本发明所述的活性成分5-氨基酮戊酸或其衍生物，以所述组合物总重量为基准，其有效剂量为5％-99.99％(wt)。

所用的活性成分的有效剂量可随给药模式和待治疗疾病的严重程度而变化。对大部分大型哺乳动物而言，每天施以有效成分的总剂量约为0.01-1000mg。通常，成人临床给药量的范围为0.01-200mg/日，优选为0.05-100mg/日。

本发明的组合物使用时直接溶于水或生理盐水涂敷在阴道或宫颈的病灶部或用组合物的溶液将纱布之类的物体浸湿推入腔道内。

以下结合具体实施例，进一步阐明本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。比例和百分比基于重量，除非特别说明。

胃蛋白酶(购自sigma，1200U/g)  胰蛋白酶(购自sigma，1000U/g)；其它药物或辅料均为市售产品。

实施例1

处方：(以1000瓶计)

盐酸氨酮戊酸   400g

尼泊金乙酯     0.9g

依地酸二钠     7.5g

聚维酮         30.0g

胃蛋白酶       9.0g

精密称取尼泊金乙酯、聚维酮、依地酸二钠置100ml烧杯中，加入100ml浓度为10％的乙醇溶液，搅拌使各辅料溶解，0.8μm微孔滤膜滤过，滤液用小型喷雾干燥器(Buchi191型喷雾干燥器，瑞士)喷雾干燥，喷雾干燥条件如下：进口温度：140℃；出口温度：86～94℃；漩涡混合器：80％；压缩气流：600～700L/h；进料速度：10％。于收集器收集粉末。

将盐酸氨酮戊酸粉碎过80目筛，再与胃蛋白酶及上述粉末混匀，过80目筛两遍，加入乙醇溶液适量，制软材，20目筛制粒，30℃恒温鼓风干燥箱中干燥1小时，20目筛整粒。

使用时将粉末溶于适量水，擦涂。

实施例2：

处方：(以1000瓶计)

盐酸氨酮戊酸   100g

胃蛋白酶       30.0g

称取100g盐酸氨基酮戊酸粉碎过80目筛，再与30.0g胃蛋白酶粉末均匀混合，过80目筛两遍，得粉末状固体，分装。

使用时将粉末溶于适量水，擦涂。

实施例3：

处方：(以1000瓶计)

盐酸氨酮戊酸    2000g

胃蛋白酶        0.06g

称取2000g盐酸氨基酮戊酸粉碎过80目筛，再与0.06g胃蛋白酶粉末均匀混合，过80目筛两遍，得粉末状固体，分装。

使用时将粉末溶于适量水，擦涂。

实施例4

处方：(以1000瓶计)

盐酸氨酮戊酸   1000g

胃蛋白酶       0.8g

称取1000g盐酸氨基酮戊酸粉碎过80目筛，再与0.8g胃蛋白酶粉末均匀混合，过80目筛两遍，得粉末状固体，分装。

使用时将粉末溶于适量水，擦涂。

实施例5

处方：(以1000瓶计)

盐酸氨酮戊酸    100g

胃蛋白酶    9.1g

称取100g盐酸氨基酮戊酸粉碎过80目筛，再与9.1g胃蛋白酶粉末均匀混合，过80目筛两遍，得粉末状固体，分装。

使用时将粉末溶于适量水，擦涂。

实施例6

处方：(以1000瓶计)

盐酸氨酮戊酸    600g

胃蛋白酶        5.0g

称取600g盐酸氨基酮戊酸粉碎过80目筛，再与5.0g胃蛋白酶粉末均匀混合，过80目筛两遍，得粉末状固体，分装。

使用时将粉末溶于适量水，擦涂。

实施例7

处方：(以1000瓶计)

盐酸氨酮戊酸    200g

胃蛋白酶        5.1g

称取200g盐酸氨基酮戊酸粉碎过80目筛，再与5.1g胃蛋白酶粉末均匀混合，过80目筛两遍，得粉末状固体，分装。

使用时将粉末溶于适量水，擦涂。

实施例8

处方(1)：(以1000瓶计算)

盐酸氨基酮戊酸：      200g

胃蛋白酶：            6.0g

PF407                 400g

处方(2)(以1000瓶计算)

盐酸氨基酮戊酸：      21g

胃蛋白酶：            6.0g

PF407                 400g

制备方法：

1、称取盐酸氨基酮戊酸粉碎过80目筛，再与胃蛋白酶粉末均匀混合，过80目筛两遍，得粉末状固体，按1000瓶分装。

2、将生理盐水加入装有400g PF407的容器中，至2000ml，缓慢搅拌均匀，于4℃的冰箱中静置过夜制得凝胶基质。分装为2ml/瓶。

3、使用前取2ml胶液，将分装好的1瓶5-氨基酮戊酸盐酸盐加入胶液中，震摇约1-2min溶解。胶液PH值为6.59。

使用时用常用的宫颈给药装置(如)直接将凝胶送入阴道或宫颈部位。

实施例9

处方：(以1000瓶计)

盐酸氨酮戊酸    200g

胰蛋白酶        5.0g

称取200g盐酸氨基酮戊酸粉碎过80目筛，再与5.0g胰蛋白酶粉末均匀混合，过80目筛两遍，得粉末状固体，分装。

使用时将粉末溶于适量水，擦涂。

实施例10

稳定性：以ALA为平行对照，将上述实施例得到的混合粉末置于ALA的贮存条件下存放一段时间，观察粉末的性状：纯ALA粉末和本发明实施例制得的混合粉末的颜色均和贮存前一致呈现白色。说明ALA与胃蛋白酶的混合物具有同单纯ALA固体同样的稳定性。

实施例11

本发明组合物消除妇科疾病患者病变部位(宫颈)黏液和体外渗透性的试验

分别向实施例1、4、5、6、7、9制备的组合物(分装后取一瓶)中分别加入生理盐水4ml、10ml、1ml、6ml、2ml、2ml，保证上述其中5-氨基酮戊酸盐酸盐的浓度均为100mg/ml，胃蛋白酶的浓度分别为：24U/g、1U/g、100U/g、10U/g、30U/g、25U/g；实施例8(1)制备的凝胶制剂中含有5-氨基酮戊酸盐酸盐的浓度为100mg/ml，胃蛋白酶的浓度为12U/g；以ALA的生理盐水溶液为对照组进行下述试验：

根据文献《5-氨基酮戊酸磷脂复合物的研究》(中国药学杂志，2007，42(1)：36-39)描述的体外渗透性试验进行测定，在Valia-Chien扩散池的供给池和接收池间的皮肤位于供给池的一面上倾倒较厚的新鲜的宫颈部位的粘液，然后将含药溶液均匀涂(对于凝胶制剂，贴)在上面，观察皮肤表面宫颈粘液的状态；测定3小时后的荧光强度并计算表观渗透系数Papp/10-3·cm-2·h-1(n＝3)。

结果：

1)：使用含有胃蛋白酶的组合物时皮肤上粘液迅速被分解消失，而单纯使用ALA不影响皮肤表面的粘液的状态。

2)：3小时后的吸收情况

结果如下表：

组别	单纯ALA	实施例1	实施例4	实施例5	实施例6	实施例7	实施例8(1)	实施例9
									Papp/10-3·cm-2·h-1	0.51	0.85	0.62	0.88	0.76	0.82	0.95	0.81

上述结果表明胃蛋白酶的加入有效的改善了粘液对药物的影响，提高了药物在宫颈部位的渗透性。

本发明的范围不受所述具体实施方案的限制，所述实施方案只欲作为阐明本发明各个方面的单个例子，本发明范围内还包括功能等同的方法和组分。实际上，除了本文所述的内容外，本领域技术人员参照上文的描述和附图可以容易地掌握对本发明的多种改进。所述改进也落入所附权利要求书的范围之内。

Claims (7)

1.一种组合物，包括有效剂量的活性成分5-氨基酮戊酸或其衍生物，所述5-氨基酮戊酸衍生物是5-氨基酮戊酸盐酸盐、5-氨基酮戊酸硫酸盐、5-氨基酮戊酸琥珀酸盐、5-氨基酮戊酸甲酯或5-氨基酮戊酸己酯，其特征在于所述组合物还包括蛋白水解酶，所述蛋白水解酶含量为1-100U/g组合物，所述蛋白水解酶为糜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、弹性蛋白酶中之一。

2.如权利要求1所述组合物，其特征在于所述蛋白水解酶为胃蛋白酶。

3.如权利要求2所述的组合物，其特征在于，所述胃蛋白酶含量为10-30U/g组合物。

4.如权利要求1所述组合物，其特征在于所述的活性成分5-氨基酮戊酸或其衍生物，以所述组合物总重量为基准，其有效剂量为33％－99.99％（wt）。

5.如权利要求1所述组合物，其特征在于所述组合物的制剂可为溶液剂、栓剂或凝胶剂。

6.如权利要求5所述组合物，其特征在于所述凝胶剂为所述组合物与凝胶基质和水或生理盐水混合成凝胶制剂，其中所述凝胶基质选自泊洛沙姆407、卡波姆、壳聚糖衍生物或羟乙基纤维素。

7.如权利要求1所述组合物在制备治疗妇科疾病的药物中的用途，所述妇科疾病为CIN、VIN、VaIN、HPV感染的宫颈炎、宫颈癌。