CN101721625A - 肾炎康复片的质量控制方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及由中药材西洋参、人参、生地黄、杜仲、山药、白花蛇舌草、黑豆、土茯苓、益母草、丹参、泽泻、白茅根、桔梗制成的一种中药复方制剂肾炎康复片的质量控制方法，其特征是利用薄层色谱法鉴别该中药复方制剂中药材桔梗和西洋参。该方法能够有效控制肾炎康复片的质量，可作为该药质量控制和考察工艺可靠性的指标。
Description
技术领域
本发明涉及一种治疗慢性肾炎中药的质量控制方法，属于制药领域。
技术背景
肾炎康复片执行国家标准，具有补脾益肾、活血化瘀、利尿消肿及清解余毒作用，主治慢性肾炎，对症见神疲乏力、腰酸腿软、面浮肢肿、头晕及蛋白尿等有极好的效果。该药由中药材西洋参、人参、生地黄、杜仲、山药、白花蛇舌草、黑豆、土茯苓、益母草、丹参、泽泻、白茅根、桔梗制成；其中西洋参和桔梗均是主要药味，前者具有补气养阴、清热生津作用，后者则能宣肺利气。由国家颁布的现有肾炎康复片质量控制方法中，缺少对这两种主药的薄层鉴别，有局限性；本发明克服现有技术的不足，完善肾炎康复片的质量控制标准，增加主药桔梗和西洋参薄层色谱定性鉴别方法，使本复方制剂质量控制标准进一步完善。
发明内容
本发明目的是克服现有技术不足，完善并制定肾炎康复片的质量控制方法，增加该复方制剂中主药西洋参及桔梗的薄层色谱鉴别，使质量检测方法更完善，能够有效控制肾炎康复片的产品质量。
本发明通过下述技术方案得以实现：
1.肾炎康复片中药材桔梗用薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)鉴别：
a.对照药材溶液的制备：取桔梗对照药材0.2-2g，加甲醇或乙酸乙酯的任一种5-30ml，加盐酸0.1-0.5ml，水浴回流30-70分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇或乙酸乙酯的任一种1-5ml使溶解，制成对照药材溶液；
b.供试品溶液的制备：取肾炎康复片5-18片小片或2-10片大片，研细，加甲醇或乙酸乙酯的任一种15-60ml，再加盐酸0.2-1.0ml，水浴回流30-70分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇或乙酸乙酯的任一种1-5ml使溶解，制成供试品溶液；
c.薄层色谱法试验：吸取上述对照药材和供试品两种溶液各1-6μl，分别点于同一硅胶G或GF254任一种薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-冰醋酸为展开剂，三组份的配比为3∶2∶0.5或4∶2∶1，展开，取出，晾干，喷以1-5％香草醛硫酸或5-10％硫酸乙醇溶液，于100-110℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
2.肾炎康复片中药材西洋参用薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)鉴别：
a.对照品溶液的制备：取拟人参皂苷F11、人参皂甙Rb1、人参皂甙Re及人参皂甙Rg1对照品，加甲醇或乙醇制成每1ml各含0.5-2mg的混合溶液，作为对照品溶液；
b.供试品溶液的制备：取肾炎康复片20-30片小片或10-20片大片，粉碎，置250ml平底烧瓶中以50ml60-80％乙醇或甲醇超声提取两次，每次20-40min，合并二次提取液水浴蒸至减半，加乙醚或三氯甲烷萃取两次，每次10-20ml，弃取乙醚或三氯甲烷液，加水饱和正丁醇萃取3次，每次10-20ml，加氨水洗涤2次，每次10-20ml，合并正丁醇液，水浴蒸干，加1-6ml甲醇或乙醇使溶解，制成供试品溶液；
c.薄层色谱法试验：吸取上述对照品和供试品两种溶液各1-6μl，分别点于同一硅胶G或GF254任一种薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水5-10℃以下放置8-16小时的下层溶液为展开剂，四组份的配比为15∶40∶22∶10或20∶35∶20∶15，展开，取出，晾干，喷以5-10％硫酸乙醇溶液，在100-110℃加热至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的斑点及荧光斑点。
本发明可通过下述最佳技术方案得以实现：
1.肾炎康复片中药材桔梗用薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)鉴别：
a.对照药材溶液的制备：取桔梗对照药材0.5g，加乙酸乙酯10ml，加盐酸0.2ml，水浴回流60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，制成对照药材溶液；
b.供试品溶液的制备：取肾炎康复片8片小片或5片大片，研细，加乙酸乙酯30ml，再加盐酸0.5ml，水浴回流60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，制成供试品溶液；
c.薄层色谱法试验：吸取上述对照药材和供试品两种溶液各1-2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-冰醋酸为展开剂，三组份的配比为3∶2∶0.5，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
2.肾炎康复片中药材西洋参用薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)鉴别：
a.对照品溶液的制备：取拟人参皂苷F11、人参皂甙Rb1、人参皂甙Re及人参皂甙Rg1对照品，加甲醇制成每1ml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液；
b.供试品溶液的制备：取肾炎康复片25片小片或16片大片，粉碎，置250ml平底烧瓶中以50ml70％乙醇超声提取两次，每次30min，合并二次提取液水浴蒸至减半，加乙醚萃取两次，每次15ml，弃取乙醚液，加水饱和正丁醇萃取3次，每次15ml，加氨水洗涤2次，每次15ml，合并正丁醇液，水浴蒸干，加2ml甲醇使溶解，制成供试品溶液；
c.薄层色谱法试验：吸取上述对照品和供试品两种溶液各1-2μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水5-10℃以下放置12小时的下层溶液为展开剂，四组份的配比为15∶40∶22∶10，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的斑点及荧光斑点。
本发明所述肾炎康复片国家标准为国家药典委员会‘药典业发(1999)字第378号’发文所附标准，每片片重小片0.30克或大片0.45克。
本发明提供了西洋参和桔梗的薄层鉴别方法，其简便易行，可作为肾炎康复片质量控制指标。
具体实施方式
实施例1：
取组方中山药58.1g、土茯苓58.1g、桔梗58.1g粉碎成细粉，将组方中丹参29.1g、人参5.8g、西洋参17.4g分别粉碎成细粉；剩余生地黄58.1g、杜仲34.9g、白花蛇舌草29.1g、黑豆58.1g、益母草58.1g、白茅根87.2g、泽泻29.1g用水提取二次，第一次1.5小时，加水8倍量，第二次1小时，加水7倍量，每次提取水温98-102℃，提取液滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度1.35-1.40(60±5℃热测)的浸膏；浸膏加入山药、土茯苓、桔梗细粉，混匀，真空干燥，干固物粉碎成细粉，混匀，分别加入丹参、人参、西洋参细粉，混合均匀，制粒，压片，基片重0.45g，约制成625片包薄膜衣；该药物的质量控制方法包括下列步骤：
1.肾炎康复片中药材桔梗用薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)鉴别：
a.对照药材溶液的制备：取桔梗对照药材0.5g，加乙酸乙酯10ml，加盐酸0.2ml，水浴回流60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，制成对照药材溶液；
b.供试品溶液的制备：取肾炎康复片5片，研细，加乙酸乙酯30ml，再加盐酸0.5ml，水浴回流60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，制成供试品溶液；
c.薄层色谱法试验：吸取上述对照药材和供试品两种溶液各1-2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-冰醋酸为展开剂，三组份的配比为3∶2∶0.5，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
2.肾炎康复片中药材西洋参用薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)鉴别：
a.对照品溶液的制备：取拟人参皂苷F11、人参皂甙Rb1、人参皂甙Re及人参皂甙Rg1对照品，加甲醇制成每1ml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液；
b.供试品溶液的制备：取肾炎康复片16片，粉碎，置250ml平底烧瓶中以50ml70％乙醇超声提取两次，每次30min，合并二次提取液水浴蒸至减半，加乙醚萃取两次，每次15ml，弃取乙醚液，加水饱和正丁醇萃取3次，每次15ml，加氨水洗涤2次，每次15ml，合并正丁醇液，水浴蒸干，加2ml甲醇使溶解，制成供试品溶液；
c.薄层色谱法试验：吸取上述对照品和供试品两种溶液各1-2μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水5-10℃以下放置12小时的下层溶液为展开剂，四组份的配比为15∶40∶22∶10，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的斑点及荧光斑点。
实施例2：
取组方中山药58.1g、土茯苓58.1g、桔梗58.1g粉碎成细粉，将组方中丹参29.1g、人参5.8g、西洋参17.4g分别粉碎成细粉；剩余生地黄58.1g、杜仲34.9g、白花蛇舌草29.1g、黑豆58.1g、益母草58.1g、白茅根87.2g、泽泻29.1g用水提取二次，第一次1.5小时，加水8倍量，第二次1小时，加水7倍量，每次提取水温98-102℃，提取液滤过，合并滤液，减压浓缩至相对密度1.35-1.40(60±5℃热测)的浸膏；浸膏加入山药、土茯苓、桔梗细粉，混匀，真空干燥，干固物粉碎成细粉，混匀，分别加入丹参、人参、西洋参细粉，混合均匀，制粒，压片，基片重0.30g，约制成1000片包糖衣；该药物的质量控制方法包括下列步骤：
1.肾炎康复片中药材桔梗用薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)鉴别：
a.对照药材溶液的制备：取桔梗对照药材0.5g，加乙酸乙酯10ml，加盐酸0.2ml，水浴回流60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，制成对照药材溶液；
b.供试品溶液的制备：取肾炎康复片8片，研细，加乙酸乙酯30ml，再加盐酸0.5ml，水浴回流60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，制成供试品溶液；
c.薄层色谱法试验：吸取上述对照药材和供试品两种溶液各1-2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-冰醋酸为展开剂，三组份的配比为3∶2∶0.5，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
2.肾炎康复片中药材西洋参用薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)鉴别：
a.对照品溶液的制备：取拟人参皂苷F11、人参皂甙Rb1、人参皂甙Re及人参皂甙Rg1对照品，加甲醇制成每1ml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液；
b.供试品溶液的制备：取肾炎康复片25片，粉碎，置250ml平底烧瓶中以50ml70％乙醇超声提取两次，每次30min，合并二次提取液水浴蒸至减半，加乙醚萃取两次，每次15ml，弃取乙醚液，加水饱和正丁醇萃取3次，每次15ml，加氨水洗涤2次，每次15ml，合并正丁醇液，水浴蒸干，加2ml甲醇使溶解，制成供试品溶液；
c.薄层色谱法试验：吸取上述对照品和供试品两种溶液各1-2μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水5-10℃以下放置12小时的下层溶液为展开剂，四组份的配比为15∶40∶22∶10，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的斑点及荧光斑点。
Claims (2)
1.肾炎康复片的质量控制方法，其中所述的药物配方由中药材西洋参17.4g、人参5.8g、生地黄58.1g、杜仲34.9g、山药58.1g、白花蛇舌草29.1g、黑豆58.1g、土茯苓58.1g、益母草58.1g、丹参29.1g、泽泻29.1g、白茅根87.2g、桔梗58.1g组成，上述原料共制成1000片或625片，其特征在于该方法包括下列步骤：
(1)该药物中药材桔梗用薄层色谱法鉴别：
a.对照药材溶液的制备：取桔梗对照药材0.2-2g，加甲醇或乙酸乙酯的任一种5-30ml，加盐酸0.1-0.5ml，水浴回流30-70分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇或乙酸乙酯的任一种1-5ml使溶解，制成对照药材溶液；
b.供试品溶液的制备：取肾炎康复片5-18片小片或2-10片大片，研细，加甲醇或乙酸乙酯的任一种15-60ml，再加盐酸0.2-1.0ml，水浴回流30-70分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇或乙酸乙酯的任一种1-5ml使溶解，制成供试品溶液；
c.薄层色谱法试验：吸取上述对照药材和供试品两种溶液各1-6μl，分别点于同一硅胶G或GF254任一种薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-冰醋酸为展开剂，三组份的配比为3∶2∶0.5或4∶2∶1，展开，取出，晾干，喷以1-5％香草醛硫酸或5-10％硫酸乙醇溶液，于100-110℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(2)该药物中药材西洋参所含人参皂苷用薄层色谱法鉴别：
a.对照品溶液的制备：取拟人参皂苷F11、人参皂甙Rb1、人参皂甙Re及人参皂甙Rg1对照品，加甲醇或乙醇制成每1ml各含0.5-2mg的混合溶液，作为对照品溶液；
b.供试品溶液的制备：取肾炎康复片20-30片小片或10-20片大片，粉碎，置250ml平底烧瓶中以50ml60-80％乙醇或甲醇超声提取两次，每次20-40min，合并二次提取液水浴蒸至减半，加乙醚或三氯甲烷萃取两次，每次10-20ml，弃取乙醚或三氯甲烷液，加水饱和正丁醇萃取3次，每次10-20ml，加氨水洗涤2次，每次10-20ml，合并正丁醇液，水浴蒸干，加1-6ml甲醇或乙醇使溶解，制成供试品溶液；
c.薄层色谱法试验：吸取上述对照品和供试品两种溶液各1-6μl，分别点于同一硅胶G或GF254任一种薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水5-10℃以下放置8-16小时的下层溶液为展开剂，四组份的配比为15∶40∶22∶10或20∶35∶20∶15，展开，取出，晾干，喷以5-10％硫酸乙醇溶液，在100-110℃加热至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的斑点及荧光斑点。
2.根据权利要求1所述肾炎康复片的质量控制方法，其特征在于该方法包括下列步骤：
(1)该药物中药材桔梗用薄层色谱法鉴别：
a.对照药材溶液的制备：取桔梗对照药材0.5g，加乙酸乙酯10ml，加盐酸0.2ml，水浴回流60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，制成对照药材溶液；
b.供试品溶液的制备：取肾炎康复片8片小片或5片大片，研细，加乙酸乙酯30ml，再加盐酸0.5ml，水浴回流60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，制成供试品溶液；
c.薄层色谱法试验：吸取上述对照药材和供试品两种溶液各1-2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-冰醋酸为展开剂，三组份的配比为3∶2∶0.5，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，于105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(2)该药物中药材西洋参所含人参皂苷用薄层色谱法鉴别：
a.对照品溶液的制备：取拟人参皂苷F11、人参皂甙Rb1、人参皂甙Re及人参皂甙Rg1对照品，加甲醇制成每1ml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液；
b.供试品溶液的制备：取肾炎康复片25片小片或16片大片，粉碎，置250ml平底烧瓶中以50ml70％乙醇超声提取两次，每次30min，合并二次提取液水浴蒸至减半，加乙醚萃取两次，每次15ml，弃取乙醚液，加水饱和正丁醇萃取3次，每次15ml，加氨水洗涤2次，每次15ml，合并正丁醇液，水浴蒸干，加2ml甲醇使溶解，制成供试品溶液；
c.薄层色谱法试验：吸取上述对照品和供试品两种溶液各1-2μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水5-10℃以下放置12小时的下层溶液为展开剂，四组份的配比为15∶40∶22∶10，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，分别显相同颜色的斑点及荧光斑点。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| PE01 | Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right |
Denomination of invention: Quality control method of shenyankangfu tablet Effective date of registration: 20150713 Granted publication date: 20120523 Pledgee: China Minsheng Banking Corp Tianjin branch Pledgor: Tianjin Tongrentang Group Co., Ltd. Registration number: 2015120000035 |
|
| PLDC | Enforcement, change and cancellation of contracts on pledge of patent right or utility model | ||
| PC01 | Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right |
Date of cancellation: 20160928 Granted publication date: 20120523 Pledgee: China Minsheng Banking Corp Tianjin branch Pledgor: Tianjin Tongrentang Group Co., Ltd. Registration number: 2015120000035 |
|
| PLDC | Enforcement, change and cancellation of contracts on pledge of patent right or utility model | ||
| CP02 | Change in the address of a patent holder |
Address after: 300385 Tianjin Saida Xiqing Economic Development Zone No. 1 eight branch Patentee after: Tianjin Tongrentang Group Co., Ltd. Address before: 300132 Hongqiao District of Tianjin city in the West Village No. 126 Patentee before: Tianjin Tongrentang Group Co., Ltd. |