CN101671319A - 红豆杉无毒提取物的工艺 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种红豆杉无毒提取物的工艺，它包括下列步骤：(1)将红豆杉的干和根按4∶1的重量配比磨成红豆杉干粉；(2)将红豆杉原料2千克和8千克55°～65°的白酒一起放入密封玻璃瓶，温度在25℃～40℃之间；(3)浸泡第7天、第14天和第21天分别加250克白酒和100克红豆杉干粉后搅拌，在搅拌同时温度加热到50℃~60℃，至酒的颜色呈褐红色，滴在地上干后呈粉红色为浸泡加工完成；4)过滤、去渣，密封沉淀48小时以上，去沉淀物，浸泡后的成品用容器加温至50℃~100℃真空抽干保留湿提取物，烘干后即得紫杉醇醇提取物。本发明有益的效果：可作为保健品的添加物，可以让人们提前预防肿瘤。可作为抗瘤中成药的添加物，可治疗肿瘤，可减轻患者的痛苦。

Description

红豆杉无毒提取物的工艺
技术领域
本发明涉及食品、保健品、药品的添加剂领域，具体涉及一种红豆杉无毒提取物的工艺。
背景技术
2005年召开的肿瘤防治宣传周通报会上，来自卫生部的通报，目前，我国年均癌症发病人数约180万～200万，死亡人数约140万～150万；如不加以防控，今后20年中，我国癌症死亡人数将翻一番。专家预计：2020年中国癌症死亡人数将超400万，在恶性肿瘤死亡率中，肺癌列男、女性恶性肿瘤第一位。
红豆杉的药用价值主要体现在它的提取物——次生代谢衍生物——紫杉醇。根椐方唯硕博士(方唯硕——1997年毕业于中国协和医科大学、药物化学博士曾师从于梁晓天教授)的研究结果，紫杉醇最早是从短叶红豆杉的树皮中分离出来的抗肿瘤活性成份。是治疗转移性卵巢癌和乳腺癌的最好药物之一，同时对肺癌、食道癌也有显著疗效，对肾炎及细小病毒炎症有明显抑制。紫杉醇的抗癌机理是：紫杉醇能与微量蛋白结合，并促进其聚合，抑制癌细胞的有丝分裂，有效阻止癌细胞的增殖。
国外最早报道是1971年美国从红豆杉中提取紫杉醇，美国食品医药管理局(FDA)1992年批准用于临床，经证明对多种癌症有疗效，由其是对卵巢癌、乳腺癌的治疗获得成功，治愈率达33％，有效率75％.用美国肿瘤研究所(NEI)所长BRODER的话说：紫杉醇是继阿霉素、顺铂之后十五年来，人类与各种癌症相抗争时，疗效最好、副作用最小的药物。
目前98％纯度的紫杉醇国际市场价格为每千克40至60万美元，我国纯度为70％的紫杉醇售价为160至180万元/千克，比黄金价格还要昂贵。
国际上现对红豆杉的使用主要建立在从红豆杉中提取紫杉醇，并制成针剂，以注射化疗的方式使用，化疗对病人的二次损害程度大家有目共睹，国内有很多中医对红豆杉的使用以在各种不同的中药处方中加入少量的红豆杉原料，但不宜过量的使用，因怕其毒性对病人造成其它伤害。
我国目前没有很好有效的治疗肿瘤病人疼痛的方法，目前使用的镇痛剂，主要以西药为主，但它的缺点是长期使用对病人产生依赖性和抗药性，而中药就没有该难点，能很好地解决该缺点。
发明内容
本发明目的在于克服上述技术的不足，而提供一种红豆杉无毒提取物的工艺，使红豆杉提取物无毒。
本发明实现上述目的所采用的技术方案。这种红豆杉无毒提取物的工艺，它包括下列步骤：
(1)、将红豆杉的干和根按4∶1的重量配比磨成红豆杉干粉备用；
(2)、将红豆杉的叶、干、根、皮按1∶7∶1∶1的重量配比形成红豆杉原料，将上述红豆杉原料2千克和8千克55°~65°的白酒一起放入密封玻璃瓶，环境温度在25℃~40℃之间；
(3)、浸泡第7天加250克白酒和100克红豆杉干粉，并要求充分搅拌，在搅拌同时温度加热到50℃~60℃，然后自然冷却；
(4)、第14天再加250克白酒和100克红豆杉干粉，并要求充分的搅拌，在搅拌同时温度加热到50℃~60℃，然后自然冷却；
(5)、第21天再加250克白酒和100克红豆杉干粉，并要求充分的搅拌，在搅拌同时温度加热到50℃~60℃，然后加盖密封，时间为45天~60天，酒的颜色呈褐红色，滴在地上干后呈粉红色为浸泡加工完成：
(6)、过滤、去渣，密封沉淀48小时以上，去沉淀物，浸泡后的成品用不锈钢容器加温至50℃~100℃真空抽干保留湿提取物，再把湿提取物放入烘箱内50℃~100℃烘干，即得紫杉醇醇提取物。
作为优选，所述的白酒，在原料中加入重量比为1％红豆杉干粉，按白酒加工工艺加工而成，要求浸泡红豆杉的白酒在加工后的12小时内使用。
本发明有益的效果：已达到无毒效果，首次发现了红豆杉提取物除了有抗癌功效外，还对肿瘤病人有明显的镇痛作用，如肿瘤病人一天吃1.5g就不需要其它任何镇痛药物。1、可作为保健品的添加物，可以让人们提前预防肿瘤。2、可作为抗瘤中成药的添加物，可治疗肿瘤，可减轻患者的痛苦。3、肿瘤患者可直接购买，作为辅助治疗的添加物。
具体实施方式：
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明：本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。
本发明所述的这种红豆杉无毒提取物的工艺，它包括下列步骤：
(1)、将红豆杉的干和根按4∶1的重量配比磨成红豆杉干粉备用；
(2)、将红豆杉的叶、干、根、皮按1∶7∶1∶1的重量配比形成红豆杉原料，将上述红豆杉原料2千克和8千克55°~65°的白酒一起放入密封玻璃瓶，环境温度在25℃~40℃之间；
(3)、浸泡第7天加250克白酒和100克红豆杉干粉，并要求充分搅拌，在搅拌同时温度加热到50℃~60℃，然后自然冷却；
(4)、第14天再加250克白酒和100克红豆杉干粉，并要求充分的搅拌，在搅拌同时温度加热到50℃~60℃，然后自然冷却；
(5)、第21天再加250克白酒和100克红豆杉干粉，并要求充分的搅拌，在搅拌同时温度加热到50℃~60℃，然后加盖密封，时间为45天~60天，酒的颜色呈褐红色，滴在地上干后呈粉红色为浸泡加工完成：
(6)、过滤、去渣，密封沉淀48小时以上，去沉淀物，浸泡后的成品用不锈钢容器加温至50℃~100℃真空抽干保留湿提取物，再把湿提取物放入烘箱内50℃~100℃烘干，即得紫杉醇醇提取物。
所述的白酒，在原料中加入重量比为1％红豆杉干粉，按白酒加工工艺加工而成，要求浸泡红豆杉的白酒在加工后的12小时内使用最好，去毒最彻底。
本发明已达到无毒效果。附无毒试验数据，抑瘤试验数据一份，紫杉醇含量检测数据一份。首次发现了红豆杉提取物除了有抗癌功效外，还对肿瘤病人有明显的镇痛作用。如肿瘤病人一天吃1.5g就不需要其它任何镇痛药物。
紫杉醇醇提取物(无醇)急性毒性实验(浙江省中医药研究院)
一、实验目的：观察紫杉醇醇提取物灌胃给药后，对小鼠产生的急性毒性反应，预测其临床用药的安全性。
二、受试药物：紫杉醇醇提取物，红棕色液体，人用量为60ml/人/天，每ml醇提取物相当于0.2g生药，由专利申请人提供。实验时45℃水浴挥发乙醇，用聚乙二醇溶解，配成2.0g生药/ml浓度。
三、实验动物：ICR种小鼠，体重18-22g；雌雄各半；由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，许可证：SCXK(沪2007-0005)，动物合格证号：0056789。饲养于浙江省中医药研究院实验动物室内，实验动物使用许可证：SYXK(浙2009-0122)。
四、实验方法与结果：紫杉醇醇提取物以最大容积的剂量一次性灌胃给药40ml/kg，观察5天，10只小鼠均无死亡。故改为最大耐受量测定。
最大耐受量测定：取小鼠40只，雌雄各半，禁食12小时后，其中20只以最大容积、最大浓度的剂量一天内灌胃二次紫杉醇醇提取物(2.0g生药/ml)，总剂量为160.0g生药/kg体重，此剂量相当于成年人(按60kg体重计算)日服剂量(0.2g生药/kg/日)的800倍。小鼠给药后无不良反应，常规饲养观察15天，除雄小鼠给药后第5天和给药后第15天的体重轻于相应时间的对照组(p＜0.05)。其余未发现死亡和明显的毒性反应。因此小鼠的最大耐受量为成人临床拟日用剂量的800倍以上。
五、小结：以上结果显示，紫杉醇醇提取物(无醇)小鼠的最大耐受量为成人临床拟日用剂量的800倍以上，表明紫杉醇提取物急性毒性甚小，这为该制剂开发提供了一定的理论依据。
表1：紫杉醇提取物对雌性小鼠体重的影响(g，X±SD)
  1天   3天   5天   7天   9天   11天   13天   15天
  紫杉醇提取物   17.9±0.77   22.0±1.07   24.9±1.07   25.5±0.77   26.8±0.87   26.8±0.87   27.7±1.10   27.8±1.15
  聚乙二醇对照组   18.2±0.79   22.2±0.58   24.6±0.74   25.8±0.85   27.6±1.19   27.5±1.51   29.0±1.83   28.8±1.84
表2：紫杉醇提取物对雄性小鼠体重的影响(g，X±SD)
  1天   3天   5天   7天   9天   11天   13天   15天
  紫杉醇提取物   19.0±1.03   23.2±0.88   25.9±0.94*   28.4±1.17   30.3±1.33   31.2±1.44   33.2±1.66   33.2±1.49*
  聚乙二醇对照组   18.9±0.83   23.1±1.26   27.1±1.04   29.3±1.37   31.5±1.53   32.4±1.79   34.4±1.86   34.8±1.86
*表示与水对照组相比p＜0.05。
紫杉醇提取物抗小鼠S180作用的实验研究
一、目的：观察不同剂量紫杉醇提取物口服给药对小鼠S180实体瘤的抑制作用。
二、材料：
1、紫杉醇醇提取物，红棕色液体，人用量为60ml/人/天；每ml醇提取物相当于0.2g生药，由专利申请人提供。实验时45℃水浴挥发乙醇，用10％聚乙二醇溶解，配成0.81g生药/ml、0.27g生药/ml、0.09g生药/ml三个浓度。
2、实验动物：ICR种小鼠，体重18-22g，全为雄性，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，许可证：SCXK(沪2007-0005)，动物合格证号：0056789。饲养于浙江省中医药研究院实验动物室内，实验动物使用许可证：SYXK(浙2009-0122)。
3、瘤株：S180肉瘤、肝癌腹水瘤株，均由中国科学院上海药物研究所肿瘤室引进，浙江省中医药研究院基础所液氮保存。
三、方法与结果：
取ICR小鼠2只，右腋皮下接种液氮复苏的S180细胞悬液(1×107/ml)0.2ml/只，常规饲养10天后，脱颈椎处死，75％乙醇浸泡消毒，纱布吸干乙醇，剥离皮下肿瘤块剪碎，加无菌生理盐水5ml，在100目无菌尼龙滤网上研磨、过滤，再用无菌生理盐水配成1×107个/ml细胞悬液。取雄性ICR种小鼠，适应性饲养一天后，均皮下注射上述S180细胞悬液0.2ml/只，次日分组、称重。设紫杉醇醇提取物高剂量组(16.2g生药/kg)、紫杉醇醇提取物中剂量组(5.4g生药/kg)、紫杉醇醇提取物低剂量组(1.8g生药/kg)及10％聚乙二醇溶媒对照组，各组动物每目灌胃相应的药物14天，停药次日，称体重，处死小鼠、剥离实体瘤、称瘤重，计算抑瘤率(％)。结果见表1：
表1：紫杉醇醇提取物对肉瘤生长的影响(X±SD)
Figure G2009101528663D00061
由表1可见，紫杉醇醇提取物灌胃给药，抑瘤率(％)在-5.9％～20.7％，说明紫杉木醇醇提取物灌胃给药对小鼠S180实体瘤无明显的抑瘤作用。
紫杉醇醇提取物灌胃给药对小鼠S180实体瘤抑瘤率(％)在-5.9％～20.7％，说明紫杉醇醇提取物灌胃给药对荷瘤小鼠无明显的抑瘤作用。

Claims (2)

1、一种红豆杉无毒提取物的工艺，其特征在于：它包括下列步骤：
(1)、将红豆杉的干和根按4∶1的重量配比磨成红豆杉干粉备用；
(2)、将红豆杉的叶、干、根、皮按1∶7∶1∶1的重量配比形成红豆杉原料，将上述红豆杉原料2千克和8千克55°~65°的白酒一起放入密封玻璃瓶，环境温度在25℃~40℃之间；
(3)、浸泡第7天加250克白酒和100克红豆杉干粉，并要求充分搅拌，在搅拌同时温度加热到50℃~60℃，然后自然冷却；
(4)、第14天再加250克白酒和100克红豆杉干粉，并要求充分的搅拌，在搅拌同时温度加热到50℃~60℃，然后自然冷却；
(5)、第21天再加250克白酒和100克红豆杉干粉，并要求充分的搅拌，在搅拌同时温度加热到50℃~60℃，然后加盖密封，时间为45天~60天，酒的颜色呈褐红色，滴在地上干后呈粉红色为浸泡加工完成：
(6)、过滤、去渣，密封沉淀48小时以上，去沉淀物，浸泡后的成品用不锈钢容器加温至50℃~100℃真空抽干保留湿提取物，再把湿提取物放入烘箱内50℃~100℃烘干，即得紫杉醇醇提取物。
2、根据权利要求1所述的红豆杉无毒提取物的工艺，其特征在于：所述的白酒，在原料中加入重量比为1％红豆杉干粉，按白酒加工工艺加工而成，要求浸泡红豆杉的白酒在加工后的12小时内使用。
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