CN101597339B - 一种以银耳次、残品及耳脚为原料制备银耳多糖的方法 - Google Patents
一种以银耳次、残品及耳脚为原料制备银耳多糖的方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种以银耳次、残品及耳脚为原料制备银耳多糖的方法，其特点是将银耳次、残品及耳脚3～30重量份加水浸泡20～30min，沥干，置于温度-20～-10℃冷冻6～10h，然后粉碎至粒径1～3mm；将上述粉碎后的银耳粒料与水按固液比1∶40～80混合均匀，经功率700w，温度90～100℃微波处理15～25min，按总固液比1∶80定容；再将上述微波处理后的原料放入三角瓶中，在温度60～80℃水浴中振荡1～2h，经3000～5000rpm离心10～20min，取上层清液在真空度0.08～0.09MPa、温度55～65℃浓缩至20～30％体积，在温度10～20℃，搅拌加入2～3倍体积的冷藏无水乙醇沉淀粗多糖，静止沉淀后过滤，获得糖泥在真空度0.08～0.09MPa、温度55～65℃干燥6～10小时，获得粗多糖产品。粗多糖的收率为15～25％，粗多糖中多糖含量以苯酚-硫酸法测定为90～99％。
Description
技术领域
本发明涉及一种以银耳次、残品及耳脚为原料制备银耳多糖的方法，属于银耳资源的综合利用领域。
背景技术
近年来我国银耳产量大幅度增加，但目前产生的大量银耳脚料仅用于沼气发酵或者作为食用菌培养的基料等低效率方面，因此银耳食用资源不能得到充分利用，造成巨大浪费。另一方面，关于银耳多糖的研究日益得到重视，这种从银耳子实体或液体深层发酵的银耳孢子中提取出来的活性多糖，被证实具有提高人体免疫能力、降血糖、降血脂、抗衰老、抗溃疡、抗血栓形成、抗突变等生理功能作用。
银耳多糖的提取有单纯热水提取法或酶解热水提取法。如：何伟珍，吴丽仙在论文《银耳多糖的提取分离与纯化》(《海峡药学》2008年第7期)中提出单纯热水提取法，多糖得率为2.75％。该工艺由于不完善，银耳多糖提取率很低，且耗时长。酶解热水提取法。如：袁思霓等人在论文《银耳多糖的提取及其对小鼠免疫功能的影响》(《安徽农业科学》2007年第26期)中采用酶法浸提银耳多糖得到多糖得率为19.8％。该方法多糖提取率相对较高，但投入成本也较高，且加入酶制剂会对后期产品处理造成影响。以上两种方法都没有充分利用资源，不易实现高效工业生产银耳多糖。
微波加热是靠微波电子管发出的电磁波转化成分子的动能而发热，具有快速、高效、安全的特点，而且微波的频率很高，能透入物体的深度较深，直接作用于生物体细胞结构。近年来，微波辅助萃取法在银耳多糖提取中也有应用，如：吴琼等人在论文《微波辅助萃取银耳多糖的研究》(《食品科技》2006年第9期)中提出微波辅助萃取银耳多糖的方法，得到粗多糖提取率为20.15％，这比一般方法的多糖提取率高，同时降低了工艺成本，且更易实现连续高效的工业生产，但该方法和以上水提法、酶提法一样，所提取多糖纯度不高，最高值仅70％为左右。
另外值得注意的是，冷冻粉碎有利于细胞中多糖成分浸出，这项技术在提取真菌多糖的应用中效果显著，如：高大维等在论文《冷冻预处理提取灵芝营养成分》(《食品与发酵工业》1996年第2期)中指出冷冻预处理可以使灵芝多糖的产量提高20.69％，而这项技术在辅助提取银耳子实体中银耳多糖研究中未见有报道。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术不足而提供一种以银耳次、残品及耳脚为原料制备银耳多糖的方法，其特点是借助现代分离提取技术的集成进行银耳多糖提取，获得较高的多糖提取率及较高纯度的银耳多糖产品。
本发明的目的由以下技术措施实现，其中所述原料份数除特殊说明外，均为重量份数。
以银耳次、残品及耳脚为原料制备银耳多糖的方法：
(1)银耳次、残品及耳脚浸泡后冷冻粉碎
将银耳次、残品及耳脚3～30份，加水至原料被完全浸没，浸泡20～30min，沥干水分，置于温度-20～-10℃冷冻6～10小时至完全呈固态冰状，然后粉碎至粒径为1～3mm；
(2)微波预处理
将上述粉碎后的银耳粒料按照固液比1∶40～80加水混匀，经过功率700w、温度90～100℃微波处理15～25min，按总固液比1∶80定容；
(3)银耳多糖的制备
将上述微波处理后的原料放入三角瓶中，在温度60～80℃水浴中振荡1～2h，经3000～5000rpm离心10～20min，取上清液在真空度0.08～0.09MPa、温度55～65℃浓缩至20～30％体积，在温度10～20℃，根据粘稠程度缓慢搅拌加入2～3倍体积的冷藏无水乙醇沉淀粗多糖，静止沉淀后过滤，然后，将获得的糖泥放入真空干燥箱中，在真空度0.08～0.09MPa、温度55～65℃干燥6～10小时，获得粗多糖成品；
粗多糖产率为15～25％，其中多糖含量以苯酚-硫酸法测定为90％～99％。
以银耳次、残品及耳脚为原料制备银耳多糖的方法制备得到的银耳多糖用于银耳多糖食品。
本发明制备的银耳粗多糖和精多糖提取率与现有银耳多糖提取方法的比较，详见表1所示。结果表明，本发明制备的银耳多糖为白色或者淡黄色粉末，有胶韧性，易溶于水，无甜味，无不良气味，多糖纯度为90～99％，较其它方法制备的多糖纯度高20多个百分点。
本发明具有如下优点：
1、解决了银耳精制加工中资源利用效率低下的问题，实现了银耳资源综合高效利用，可以增加银耳资源附加价值，创造更高经济效益。为银耳精制加工生产中产生废料的处理提供有效途径，为地方循环经济的建立提供技术平台。
2、获得的多糖成品应用范围广，有广阔的市场前景，生产废料的合理利用，变废为宝，并对环境保护具有重要意义。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明进行具体的描述，有必要在此指出的是本实施例只用于对本发明进行进一步说明，但不能理解为对本发明保护范围的限制，该领域的技术熟练人员可以根据上述本发明的内容做出一些非本质的改进和调整。
实施例1
1)原料浸泡
将3g干燥银耳脚料，加水至原料被完全浸没，浸泡30min后沥干水分。
2)冷冻粉碎
将上述沥干水分后的原料在-10℃以下冷冻10h至原料结冰，取出粉碎至粒径为2～3mm。
3)浸提浓缩
将上述粉碎后的原料按照固液比1∶40加水混匀，经过功率700w、温度100℃微波处理20min，按总固液比1∶80定容，在温度80℃恒温水浴中振荡1h后，经4000rpm离心15min，取上清液在真空度0.08MPa、温度65℃真空浓缩至20％体积。
4)结晶分离
将上述浓缩的多糖溶液在温度15℃以下，搅拌加入3倍体积的冷藏无水乙醇沉淀粗多糖，静止过滤后放入真空干燥箱中，在真空度0.085MPa、温度60℃干燥8小时，获得粗多糖产品为0.57g(n＝3)，收率为19％，测定粗多糖中多糖含量为0.54g(n＝3)，多糖纯度为94.7％。
实施例2
1)原料浸泡
将10g干燥银耳脚料，加水至原料被完全浸没，浸泡25min后沥干水分。
2)冷冻粉碎
将上述沥干水分后的原料在温度-15℃下冷冻8h至原料结冰，取出粉碎至粒径为2mm。
3)浸提浓缩
将上述粉碎后的原料按照固液比1∶50加水混匀，经功率700w、温度95℃微波处理15min，按总固液比1∶80定容，在温度70℃恒温水浴中振荡1.5h后，经5000rpm离心10min，取上清液在真空度0.085MPa、温度60℃真空浓缩至30％体积。
4)结晶分离
将上述浓缩多糖溶液在温度20℃以下，搅拌加入2倍体积的冷藏无水乙醇沉淀粗多糖，静止过滤后放入真空干燥箱中，在真空度0.08MPa、温度65℃干燥6小时，获得粗多糖产品为2.02g(n＝3)，收率为20.2％，测定粗多糖中多糖含量为1.99g(n＝3)，多糖纯度为98.5％。
实施例3
1)原料浸泡
将30g干燥银耳脚料，加水至原料被完全浸没，浸泡20min后沥干水分。
2)冷冻粉碎
将上述沥干水分后的原料在-20℃下冷冻6h至原料结冰，取出粉碎至粒径为1～2mm。
3)浸提浓缩
将上述粉碎后原料按照固液比1∶80加水混匀，经功率700w、温度90℃微波处理25min后，按总固液比1∶80定容，在温度60℃恒温水浴中振荡2h后，经3000rpm离心20min，取上清液在真空度0.09MPa、温度55℃下真空浓缩至25％体积。
4)结晶分离
将上述浓缩多糖溶液在温度10℃以下，搅拌加入2.5倍体积的冷藏无水乙醇沉淀粗多糖，静止过滤后放入真空干燥箱中，在真空度0.09MPa、温度55℃干燥10小时，获得粗多糖产品为5.4g(n＝3)，收率为20.2％，测定粗多糖中多糖含量为4.88g(n＝3)，多糖纯度为90.4％。
表1本发明银耳废弃耳脚多糖提取与现有多糖提取技术的比较
| 提取原料 | 银耳子实体 | 银耳子实体 | 银耳子实体 | 银耳孢子 | 银耳废弃耳脚* |
| 技术特点 | 水提多糖(季铵盐纯化) | 水提多糖(超声波辅助) | 水提多糖(微波辅助) | 水提多糖(复合酶解) | 水提多糖(冷冻-微波偶联集成) |
| 粗多糖得率(％) | 2.75(结晶干燥) | 20.99(未结晶) | 20.15(未结晶) | 29.00(未结晶) | 20.30(结晶干燥) |
| 精多糖纯度(％) | 76.28 | - | - | - | 96.60 |
*注：现有技术采用公开发表的实验数据，本发明数据表示多次实验数据的平均水平(n＝18)
Claims (1)
1.一种以银耳次、残品及耳脚为原料制备银耳多糖的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：
(1)银耳次、残品及耳脚浸泡后冷冻粉碎
将银耳次、残品及耳脚3～30重量份，加水至原料被完全浸没，浸泡20～30min，沥干水分，置于温度-20～-10℃冷冻6～10小时至完全呈固态冰状，然后粉碎至粒径为1～3mm；
(2)微波预处理
将上述粉碎后的银耳粒料按照固液比1∶40～80加水混匀，经过功率700W、温度90～100℃微波处理15～25min，按总固液比1∶80定容；
(3)银耳多糖的制备
将上述微波处理后的原料放入三角瓶中，在温度60～80℃水浴中振荡1～2h，经3000～5000rpm离心10～20min，取上清液在真空度0.08～0.09MPa、温度55～65℃浓缩至20～30％体积，在温度10～20℃，根据粘稠程度缓慢搅拌加入2～3倍体积的冷藏无水乙醇沉淀粗多糖，静止沉淀后过滤，然后，将获得的糖泥放入真空干燥箱中，在真空度0.08～0.09MPa、温度55～65℃干燥6～10小时，获得粗多糖成品；
粗多糖的收率为15～25％，其中粗多糖中多糖含量以苯酚-硫酸法测定为90％～99％。
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