CN101524375A - 灵芝孢子粉的湿法破壁方法 - Google Patents

灵芝孢子粉的湿法破壁方法 Download PDF

Info

Publication number
CN101524375A
CN101524375A CN200910030702A CN200910030702A CN101524375A CN 101524375 A CN101524375 A CN 101524375A CN 200910030702 A CN200910030702 A CN 200910030702A CN 200910030702 A CN200910030702 A CN 200910030702A CN 101524375 A CN101524375 A CN 101524375A
Authority
CN
China
Prior art keywords
spore powder
ganoderma
cyclodextrin
ganoderma spore
wet
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN200910030702A
Other languages
English (en)
Other versions
CN101524375B (zh
Inventor
任勇
安翠翠
朱文杰
裴会娜
吴玲
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Tianjin Chengjin Biotechnology Co., Ltd.
Nanjing Normal University
Original Assignee
Nanjing Normal University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nanjing Normal University filed Critical Nanjing Normal University
Priority to CN2009100307023A priority Critical patent/CN101524375B/zh
Publication of CN101524375A publication Critical patent/CN101524375A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN101524375B publication Critical patent/CN101524375B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

灵芝孢子粉的湿法破壁方法,(1)灵芝孢子粉用乙醇浸泡,过滤;(2)用纯净水洗涤,除去杂质;(3)加入“混合固体物”与灵芝孢子粉混合,再加入固体物总质量1~5倍的纯净水成均匀的混悬液,研磨成为混悬液;所述混合固体物与灵芝孢子粉的质量比0.5~6∶1;(4)干燥。粉碎、过筛,得固体孢子粉产品;其中“混合固体物”为:可口服的环糊精,或可口服的环糊精与食用固体辅料或药用固体辅料的混合物;其中混合固体物与灵芝孢子粉的质量比0.5~2∶1。本发明灵芝孢子粉破壁率高;保证了灵芝孢子粉中的有效成分稳定;加工更方便。卫生、安全;生产周期短,耗时少,产品得率高。操作简便,设备投资小,利于及产业化生产。

Description

灵芝孢子粉的湿法破壁方法
技术领域
本发明涉及一种灵芝孢子粉的湿法破壁方法,属于孢粉破壁技术领域。
背景技术
灵芝(Ganoderma lucidum)为担子菌纲多孔菌科属真菌,是一种良好的药用真菌。明代李时珍在本草纲目中认为灵芝有清热解毒、整肠强心、益肾保肝、滋补强身、扶正固本、美容养颜、安神益精气等功效。灵芝孢子(Ganoderma lucidium spore)是灵芝子实体生长成熟期从灵芝菌盖弹射出来的极其微小的孢子,它凝聚了灵芝的全部精华含有灵芝的全部遗传活性物质,由于灵芝孢子具有丰富的营养成分且有广泛的药理活性,近年来受到人们重视,关于灵芝孢子粉的新产品也不断的开发出来,灵芝孢子应用时主要有破壁和不破壁两种,灵芝孢子拥有一层坚硬的孢子壁(多糖壁),它主要由几丁质和葡聚糖构成,孢子壁质地坚韧,耐酸碱,极难氧化分解,对消化酶也非常稳定。因此人体服用未破壁的孢子粉后极难被胃酸消化,限制了人体对孢内有效物质的消化吸收。因此只有打开这层外壁,有效成分才能最大程度地被利用吸收。
灵芝孢子的化学成分主要有以下几类:蛋白质和氨基酸类、糖肽类、维生素类、胡萝卜素、甾醇类、三萜类(重要的生物活性物质)、生物碱类、脂肪酸类、内酯和无机离子类等。其中蛋白质含量达18%,维生素E含量超过600mg/kg,另外还含有少量维生素C。而且富含多种人体必需氨基酸和脂肪酸(以不饱和脂肪酸油酸和亚油酸为主,也包含长链烯酸)。
灵芝孢子粉具有广泛的药理作用,可以抑制肿瘤细胞生长,促进白细胞介素-II的释放,提高晚期肿瘤患者免疫力,缓解放射治疗、化学治疗对机体的损伤,提高肿瘤患者的生存质量,延长生存期。可以提高机体细胞免疫功能,减少免疫低下引起的疾病,如感冒、肝炎等。具有安神、镇痛,治疗神经衰弱的作用,而且具有保肝、解毒,提高肝脏的解毒排毒能力,减少面部色素沉淀,美容养颜,延缓衰老的作用。可以降低血糖浓度,对中、老年人的糖尿病有良好治疗效果。还具有镇咳、祛痰、平喘作用,对慢性气管炎有良好的治疗作用。
目前国内外对灵芝孢子粉破壁技术研究较多,概括起来主要有:生物酶解法、物理法、化学法、机械法。生物酶解法与物理法进行破壁(CN1709141),处理程序复杂,产物容易受污染,设备投入大,成本较高;化学破壁法破壁率不高且破壁过程中花粉的有效成分遭到破坏且产品中的有害残留较高且难以去除。利用机械法进行破壁,由于灵芝孢子的直径非常小,只有5-7μm。对普通粉碎机械来说,这样的颗粒尺寸已经是粉碎的最小极限尺寸,因而破壁效果也不理想。灵芝孢子粉中富含不饱和脂肪酸等易被氧化的成分,因此采用传统方法破壁后稍微保存不当,有效成分就会氧化、霉变,产生臭味,过氧化值、酸价严重超标,因此在破壁过程中要及时对破壁孢子粉采取抗氧化措施,或利用干燥灭菌设备,进行烘干灭菌或添加天然抗氧化剂、充氮内包装等措施来防止氧化,加工工序复杂,增加孢子粉生产周期及成本。
因此寻找一种简便有效、破壁率高、成本低且不破坏孢子粉营养成分稳定性的破壁工艺就显得尤为重要。
发明内容
本发明目的是提供一种一种灵芝孢子粉的湿法破壁方法,是一种简单高效可行且能够保持有效成分稳定的孢子粉湿法破壁,制备方便使用的固体孢子粉产品技术。采用水溶溶性小的固体食用或药用辅料拌以环糊精的混合固体物与孢子粉共研磨增加破壁率并且同时包合孢子粉有效成分的方法制备得到高品质的孢子粉固体粉状产品,可作为再加工保健品、药品、饮料等的原料。工艺简单,成本低,克服了传统技术的多种缺陷。
完成上述发明任务的方案是,一种灵芝孢子粉的湿法破壁方法,其特征在于,步骤如下,
(1)、灵芝孢子粉用乙醇浸泡,过滤;
(2)、用纯净水洗涤,除去杂质;
(3)、加入“混合固体物”与灵芝孢子粉混合,再加入固体物总质量1~5倍的纯净水成均匀的混悬液,研磨成为混悬液;
所述混合固体物与灵芝孢子粉的质量比0.5~4∶1。根据实验得到优化方案是:混合固体物与灵芝孢子粉的质量比0.5~2∶1;
(4)、干燥。粉碎、过筛,得固体孢子粉产品。
)。根据实验得到优化方案是:混合固体物与灵芝孢子粉的质量比0.5~2∶1;
(4)、干燥。粉碎、过筛,得固体孢子粉产品。
所述灵芝孢子粉是指:赤芝、紫芝、白芝或黑芝等的孢子粉。
所述的“混合固体物”为:可口服的环糊精,或可口服的环糊精与食用固体辅料的混合物;或可口服的环糊精与药用固体辅料的混合物;所述的混合固体物也可以是单一的β-环糊精。
固体物使用单一β-环糊精时,β-环糊精与灵芝孢子粉的质量比为0.5~2∶1。
采用可口服的环糊精与食用或药用固体辅料的混合物时,其中可口服的环糊精与食用或药用固体辅料的质量比为,1∶0.5~2.0。
所述可口服的环糊精包括:β-环糊精、羟乙基-β-环糊精、羟丙基-β-环糊精、羧甲基-β-环糊精、磺丁基-β-环糊精等,或这些环糊精的任意比例混合物;食用或药用固体辅料包括:食用纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基羧甲基纤维素、微晶纤维素。
更优化和更具体地说,本发明的操作步骤是:
(1)、灵芝孢子粉用75%乙醇浸泡10~20min,过滤;
(2)、用纯净水洗涤2~3次,除去杂质;
(3)、加入“混合固体物”与灵芝孢子粉混合,再加入固体物总质量1~5倍的纯净水成均匀的混悬液,研磨0.5~2小时,成为混悬液;
所述混合固体物与灵芝孢子粉的质量比0.5~4∶1。优化方案是:混合固体物与灵芝孢子粉的质量比0.5~2∶1;
(4)、置普通烘箱或减压干燥箱中干燥。粉碎、过筛,得固体孢子粉产品。
所述灵芝孢子粉是指:赤芝、紫芝、白芝或黑芝等的孢子粉。
在本发明的灵芝孢子粉的湿法破壁方法中,研磨过程中,调整加入的水量,使不溶性固体物或溶解不完全的环糊精以5~12μm大小微晶与灵芝孢子粉共存,固体物或环糊精晶体与孢子粉混合研磨是加快孢子粉破壁、提高破壁率的重要原因。加入的溶解的环糊精能够包合孢子粉有效成分,并且在研磨破壁同时完成包合,有效保护了孢子粉的有效成分。β-环糊精由于具有较小的溶解度和良好的包合作用,是更加重要的破壁添加剂,发挥出促进孢子粉破壁并包合孢子粉有效成分的双重功能,可以单一使用。
破壁率试验:称取适量灵芝孢子粉,先后用75%乙醇和纯净水处理后进行研磨,观察加入2倍比例的不溶性固体物与对照灵芝孢子粉研磨,显微镜观察10min、20min、30min、40min时的破壁率如表1:
表1加入不溶性固体物研磨灵芝孢子粉的破壁率对比
Figure A20091003070200081
不溶性固体物极大地提高了灵芝孢子粉破壁率。
取灵芝孢子粉(未破壁)、市售破壁灵芝孢子粉、本工艺破壁灵芝孢子粉三种样品适量,样品置恒湿密闭器皿中于室温25℃下,在相对湿度(90±5)%(饱和KNO3溶液)条件下放置10天,分别对0、5、10天样品查看霉变及味觉变化。结果见表2
表2湿度试验结果
注:“+”:有霉变异味;“++”:严重霉变及异味;“-”:无变化
结果表明:市售传统机械法的破壁孢子粉很容易霉变,而本工艺得到的孢子粉产品抗霉变能力显著提高,利于破壁灵芝孢子粉长期保存。
所得固体孢子粉产品流动性好、光热稳定性强、不易霉变,有效成分溶出性能好,可以直接压制成为片剂或者装入胶囊,或者添加其他辅料按照通常技术制作为其他剂型。
本发明的优点:
(1)灵芝孢子粉破壁率高。
(2)保证了天然灵芝孢子粉中的有效成分稳定,并且保持了天然灵芝孢子粉的风味。
(3)破壁灵芝孢子粉产品稳定性和性能提高,使用和加工更方便。
(4)本工艺增加了消毒灭菌和去杂操作,提高了产品的卫生及安全性质。
(5)生产周期短,耗时少,降低了生产过程的污染,产品得率高。
(6)制备方法简单,操作简便,设备投资小,成本低,利于技术推广及产业化生产。
(7)产品为干燥的粉末状固体,便于运输,易于再加工。
具体实施方式
实施例1,将10克天然灵芝孢子粉用75%乙醇浸泡10分钟,抽滤,纯净水洗涤2次备用。称取10克羟乙基-β-环糊精和20克微晶纤维素,加入30毫升水,研磨均匀后加入处理过的备用灵芝孢子粉,研磨1小时,然后置于50℃烘箱中干燥,粉碎过100目筛即得40克粉末状产品,灵芝孢子粉破壁率90%以上。
实施例2,称取500克天然灵芝孢子粉用75%乙醇浸泡20分钟,抽滤,纯净水洗涤2次,灵芝孢子子粉中加入250克β-环糊精和1.5升纯净水,混合均匀后倒入胶体磨中,研磨,体系温度自然上升至45℃,研磨1小时,后置于50℃烘箱中减压干燥,粉碎过100目筛即得740克破壁孢子粉,灵芝孢子破壁率90%以上。
实施例3,与实施例2基本相同,但是加入500克羟丙基-β-环糊精和250克微晶纤维素和2.0升纯净水,制得1250克的灵芝孢子粉破壁包合产品。
实施例4,与实施例2基本相同,但是加入200克羧甲基-β-环糊精和400克微晶纤维素和2.5升纯净水,制得1100克的灵芝孢子粉破壁包合产品。
实施例5,与实施例2基本相同,但是加入200克磺丁基-β-环糊精和300克微晶纤维素,制得1000克的灵芝孢子粉破壁包合产品。
实施例6,与实施例2基本相同,但是加入2000克β-环糊精和2.0纯净水,制得2500克的灵芝孢子粉破壁包合产品。
实施例7,与实施例2基本相同,但是加入500克β-环糊精、500克甲基纤维素和2.5升纯净水,制得1500克的灵芝孢子粉破壁包合产品。
实施例8,与实施例2基本相同,但是加入500克β-环糊精、1000克羧甲基纤维素和3.0升纯净水,制得2000克的灵芝孢子粉破壁包合产品。
实施例9,与实施例2基本相同,但是加入500克β-环糊精、500克羟乙基纤维素和2.5升纯净水,制得1500克的灵芝孢子粉破壁包合产品。
实施例10,与实施例2基本相同,但是加入600克β-环糊精、300克羟丙基纤维素和3.5升纯净水,制得1400克的灵芝孢子粉破壁包合产品。
实施例11,与实施例2基本相同,但是加入300克β-环糊精、600克羟丙基羧甲基纤维素和3.5升纯净水,制得1400克的灵芝孢子粉破壁包合产品。
实施例12,与实施例2基本相同,但是加入1000克β-环糊精、1000克微晶纤维素和4.0升纯净水,制得2500克的灵芝孢子粉破壁包合产品。

Claims (6)

1、一种灵芝孢子粉的湿法破壁方法,其特征在于,步骤如下,
(1)、灵芝孢子粉用乙醇浸泡,过滤;
(2)、用纯净水洗涤,除去杂质;
(3)、加入“混合固体物”与灵芝孢子粉混合,再加入固体物总质量1~5倍的纯净水成均匀的混悬液,研磨成为混悬液;
所述混合固体物与灵芝孢子粉的质量比0.5~4∶1;
(4)、干燥。粉碎、过筛,得固体孢子粉产品;
其中所述的“混合固体物”为:可口服的环糊精,或可口服的环糊精与食用固体辅料的混合物;或可口服的环糊精与药用固体辅料的混合物;
采用可口服的环糊精与食用或药用固体辅料的混合物时,其中可口服的环糊精与食用或药用固体辅料的质量比为,1∶0.5~2.0。
2、根据权利要求1所述的灵芝孢子粉的湿法破壁方法,其特征在于,所述可口服的环糊精选自:β-环糊精、羟乙基-β-环糊精、羟丙基-β-环糊精、羧甲基-β-环糊精或磺丁基-β-环糊精,或这些环糊精的任意比例混合物;
所述的食用或药用固体辅料选自:食用纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基羧甲基纤维素或微晶纤维素。
3、根据权利要求1所述的灵芝孢子粉的湿法破壁方法,其特征在于,所述灵芝孢子粉是指:赤芝、紫芝、白芝或黑芝的孢子粉。
4、根据权利要求1或2或3所述的灵芝孢子粉的湿法破壁方法,其特征在于,具体操作步骤如下:
(1)、灵芝孢子粉用75%乙醇浸泡10~20min,过滤;
(2)、用纯净水洗涤2~3次,除去杂质;
(3)、加入“混合固体物”与灵芝孢子粉混合,再加入固体物总质量1~5倍的纯净水成均匀的混悬液,研磨0.5~2小时,成为混悬液;
(4)、置普通烘箱或减压干燥箱中干燥,粉碎、过筛,得固体孢子粉产品。
5、根据权利要求4所述的灵芝孢子粉的湿法破壁方法,其特征在于,所述混合固体物与灵芝孢子粉的质量比0.5~2∶1。
6、根据权利要求5所述的灵芝孢子粉的湿法破壁方法,其特征在于,所述的混合固体物采用单一的β-环糊精。
CN2009100307023A 2009-04-10 2009-04-10 灵芝孢子粉的湿法破壁方法 Expired - Fee Related CN101524375B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2009100307023A CN101524375B (zh) 2009-04-10 2009-04-10 灵芝孢子粉的湿法破壁方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2009100307023A CN101524375B (zh) 2009-04-10 2009-04-10 灵芝孢子粉的湿法破壁方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN101524375A true CN101524375A (zh) 2009-09-09
CN101524375B CN101524375B (zh) 2012-07-18

Family

ID=41092550

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2009100307023A Expired - Fee Related CN101524375B (zh) 2009-04-10 2009-04-10 灵芝孢子粉的湿法破壁方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN101524375B (zh)

Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104256360A (zh) * 2014-10-17 2015-01-07 吉林农业大学 灵芝健康营养面条及其生产方法
CN104719874A (zh) * 2015-04-18 2015-06-24 黑龙江北极杉生物科技有限公司 一种灵芝全成分混合咀嚼片及其制备方法
CN105533518A (zh) * 2016-01-21 2016-05-04 南京呈鼎生物科技有限公司 一种红球藻环糊精组合物及其制备方法和制剂
CN105561327A (zh) * 2016-01-21 2016-05-11 南京师范大学 一种β-环糊精-三七微粉组合物及其制备方法和制剂
CN109517742A (zh) * 2018-12-27 2019-03-26 浙江大学 一种真菌杀虫剂母药及其充氮常温贮藏方法
CN112403904A (zh) * 2020-11-20 2021-02-26 江苏滋补堂药业有限公司 一种灵芝孢子粉精制除尘去瘪方法
CN113081978A (zh) * 2021-03-24 2021-07-09 浙江万寿康生物科技有限公司 一种去壁灵芝孢子粉的制剂
CN115068424A (zh) * 2022-07-15 2022-09-20 中农弘仁纳米生物科技(北京)有限公司 一种纳米级破壁灵芝孢子粉制备方法及应用
CN116531415A (zh) * 2023-06-14 2023-08-04 贵州省生物技术研究所(贵州省生物技术重点实验室、贵州省马铃薯研究所、贵州省食品加工研究所) 一种灵芝水煎液祛苦的方法

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1179747C (zh) * 2002-10-14 2004-12-15 李新胜 一种灵芝孢子的破壁方法

Cited By (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104256360A (zh) * 2014-10-17 2015-01-07 吉林农业大学 灵芝健康营养面条及其生产方法
CN104719874A (zh) * 2015-04-18 2015-06-24 黑龙江北极杉生物科技有限公司 一种灵芝全成分混合咀嚼片及其制备方法
CN105533518A (zh) * 2016-01-21 2016-05-04 南京呈鼎生物科技有限公司 一种红球藻环糊精组合物及其制备方法和制剂
CN105561327A (zh) * 2016-01-21 2016-05-11 南京师范大学 一种β-环糊精-三七微粉组合物及其制备方法和制剂
CN109517742A (zh) * 2018-12-27 2019-03-26 浙江大学 一种真菌杀虫剂母药及其充氮常温贮藏方法
CN112403904A (zh) * 2020-11-20 2021-02-26 江苏滋补堂药业有限公司 一种灵芝孢子粉精制除尘去瘪方法
CN113081978A (zh) * 2021-03-24 2021-07-09 浙江万寿康生物科技有限公司 一种去壁灵芝孢子粉的制剂
CN113081978B (zh) * 2021-03-24 2022-04-01 浙江万寿康生物科技有限公司 一种去壁灵芝孢子粉的制剂
CN115068424A (zh) * 2022-07-15 2022-09-20 中农弘仁纳米生物科技(北京)有限公司 一种纳米级破壁灵芝孢子粉制备方法及应用
CN115068424B (zh) * 2022-07-15 2024-05-24 中农弘仁纳米生物科技(北京)有限公司 一种纳米级破壁灵芝孢子粉制备方法及应用
CN116531415A (zh) * 2023-06-14 2023-08-04 贵州省生物技术研究所(贵州省生物技术重点实验室、贵州省马铃薯研究所、贵州省食品加工研究所) 一种灵芝水煎液祛苦的方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN101524375B (zh) 2012-07-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101524375B (zh) 灵芝孢子粉的湿法破壁方法
CN101524377B (zh) 破壁灵芝孢子粉与环糊精的组合物及其制备方法
JP5946457B2 (ja) 漢方薬組成物の、肉体疲労の緩和及び予防治療のための健康食品や医薬品の調製への応用
CN104383116B (zh) 一种黑果枸杞片剂
CN102145022B (zh) 一种具有增强免疫力和抗辐射作用的灵芝组合物及其制备方法
CN101518303B (zh) 花粉的湿式破壁方法
WO2020177389A1 (zh) 一种含麦角硫因的猴头菌保健品制剂及其制备方法
CN112021555A (zh) 一种灵芝孢子粉片剂及其制备方法
CN102204617B (zh) 一种桑椹粉保健茶及其制备方法
CN108524493A (zh) 二氢杨梅素组合物在抗酒精性肝氧化损伤中的应用
CN104381991A (zh) 一种破壁灵芝孢子粉灵芝胶囊及其制备方法
CN103608024A (zh) 控制血糖、血脂及体重的药物组合物
CN101966205B (zh) 一种无辅料超细粉片剂及其制备方法
CN103520519A (zh) 一种天麻超微粉泡腾片及其制备方法
CN107006840A (zh) 一种雪莲培养物胶囊及其制备方法
CN106261450A (zh) 一种清热去火的红球藻泡腾片及其制备方法
CN101313979A (zh) 一种润肠通便芦荟胶囊
CN112370516A (zh) 一种具有活性成分的破壁灵芝孢子粉制品及其制备方法
CN111870627A (zh) 一种解酒制剂及其制备方法和用途
CN106728208A (zh) 一种人参灵芝多糖三萜制剂及其制备方法
CN102462743B (zh) 一种对化学性肝损伤有辅助保护作用的中药组合物及其制备方法和用途
CN107048408A (zh) 制备具有调理改善癌症病人病症、提高生存质量功效的植物酵素的发酵组合物及制法
CN103027957B (zh) 肉苁蓉细胞破壁方法及该方法获得的肉苁蓉微粉制备的含片
CN107467654B (zh) 一种海带海参复合提取物及其制备方法和应用
CN112168944A (zh) 预防新冠肺炎的中药组合物、提取物、其制备方法及应用

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
ASS Succession or assignment of patent right

Owner name: TIANJIN CHENGJIN BIOTECHNOLOGY CO., LTD.

Effective date: 20120320

C41 Transfer of patent application or patent right or utility model
TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20120320

Address after: Ya Dong New District Yuen Road 210046 in Jiangsu province Nanjing City No. 1

Applicant after: Nanjing Normal University

Co-applicant after: Tianjin Chengjin Biotechnology Co., Ltd.

Address before: Ya Dong New District Yuen Road 210046 in Jiangsu province Nanjing City No. 1

Applicant before: Nanjing Normal University

C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
C17 Cessation of patent right
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20120718

Termination date: 20140410