CN101460138A - 生发组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种具有新的作用机理的生发剂以及一种包含该生发剂的生发组合物。具体地说，本发明提供一种新的包含一种或更多种ε－N－(γ－谷氨酰基)赖氨酸或其盐的生发组合物。
Description
技术领域
本发明涉及一种由ε-N-(γ-谷氨酰基)赖氨酸或其盐组成的生发剂、以及一种包含ε-N-(γ-谷氨酰基)赖氨酸或其盐的生发组合物。本发明也涉及进一步包含特定的氨基酸的生发组合物。
背景技术
脱发症由如下原因引起：遗传因素的复杂影响、雄性荷尔蒙的影响、身体因素比如毛囊血流低下、衰老等、以及压力增加、生活方式的变化等。
传统的生发剂，比如，包含甘油五癸酸酯、腺苷、米诺地尔(minoxidil)等作为其主要组分的生发剂主要致力于补给营养、促进血液循环、改善头皮、细胞活化效果等。
已知甘油五癸酸酯作为有效的能量供给材料用于具有较低能量代谢水平的毛囊，从而促进头发生长(Fragrance Journal，No.80，1986，109-114页)。然而，它不一定提供令人满意的生发效果。
已知腺苷和米诺地尔作用于毛乳头细胞，诱发细胞成长因子的产生并激活毛囊细胞(参见J.Invest.Dermatol.，117，2001，1594-1600页；Fragrance Journal，No.6，2005，13-18页；以及Fragrance Journal，No.3，2001，39-46页)。然而，它们也不一定提供令人满意的生发效果。
另一方面，包含ε-N-(γ-谷氨酰基)赖氨酸或其盐的化妆品是已知的(JP-A-5-301814)。然而，其目的是所谓的“美肤效果”。
传统的生发剂及其内包含的有效成分没有充足的令人满意的生发效果，于是人们期望开发一种具有新的作用机理的新的生发组合物。
发明内容
本发明要解决的问题
本发明的目的在于提供一种具有新的作用机理的新的生发组合物。
本发明人进行了深入的研究，结果发现ε-N-(γ-谷氨酰基)赖氨酸及其盐促进毛乳头细胞和人表皮角化细胞增殖从而具有生发效果，由此完成了本发明。此外，他们发现，通过组合使用本发明的生发剂和特定的氨基酸可促进人表皮角化细胞增殖，从而提供更优越的生发效果。
于是，本发明包括如下实施方式。
[1]由ε-N-(γ-谷氨酰基)赖氨酸或其盐组成的生发剂。
[2]包含ε-N-(γ-谷氨酰基)赖氨酸或其盐的生发组合物。
[3]包含ε-N-(γ-谷氨酰基)赖氨酸或其盐、以及选自于如下第一组氨基酸中的一种或更多种氨基酸及其盐的生发组合物：
第一组氨基酸；谷氨酰胺、亮氨酸。
[4]包含ε-N-(γ-谷氨酰基)赖氨酸或其盐、选自于如下第一组氨基酸中的一种或更多种氨基酸及其盐以及选自于如下第二组氨基酸中的一种或更多种氨基酸及其盐的生发组合物：
第一组氨基酸；谷氨酰胺、亮氨酸；
第二组氨基酸：赖氨酸、异亮氨酸、天冬酰胺、精氨酸、谷氨酸。
[5]上述[3]或[4]的生发组合物，其中第一组氨基酸(成分B)的质量与ε-N-(γ-谷氨酰基)赖氨酸或其盐(成分A)的质量的比值(B/A)为0.015～700。
[6]上述[4]或[5]的生发组合物，其中第二组氨基酸(成分C)的质量与ε-N-(γ-谷氨酰基)赖氨酸或其盐(成分A)的质量的比值(C/A)为0.0005～200。
[7]ε-N-(γ-谷氨酰基)赖氨酸或其盐用于生发的应用。
[8]一种生发方法，包括将包含ε-N-(γ-谷氨酰基)赖氨酸或其盐的组合物涂覆到皮肤上。
[9]一种生发方法，包括在皮肤上涂覆包含ε-N-(γ-谷氨酰基)赖氨酸或其盐、以及选自于如下第一组氨基酸中的一种或更多种氨基酸及其盐的组合物：
第一组氨基酸；谷氨酰胺、亮氨酸。
[10]一种生发方法，包括在皮肤上涂覆包含ε-N-(γ-谷氨酰基)赖氨酸或其盐、选自于如下第一组氨基酸中的一种或更多种氨基酸及其盐以及选自于如下第二组氨基酸中的一种或更多种氨基酸及其盐的组合物：
第一组氨基酸；谷氨酰胺、亮氨酸；
第二组氨基酸：赖氨酸、异亮氨酸、天冬酰胺、精氨酸、谷氨酸。
[11]上述[9]或[10]的生发方法，其中第一组氨基酸(成分B)的质量与ε-N-(γ-谷氨酰基)赖氨酸或其盐(成分A)的质量的比值(B/A)为0.015～700。
[12]上述[10]或[11]的生发方法，其中第二组氨基酸(成分C)的质量与ε-N-(γ-谷氨酰基)赖氨酸或其盐(成分A)的质量的比值(C/A)为0.0005～200。
在本说明书中，“成分A的质量”是指谷氨酰基赖氨酸的质量，并且当谷氨酰基赖氨酸盐用作成分A时，可以在恰当的换算后使用该盐。
类似地，在本说明书中，“成分B的质量”和“成分C的质量”是指将作为组分B和组分C待被包含的游离态的氨基酸的质量，并且当使用其盐时，可以在恰当的换算后使用其盐。发明效果
本发明能提供一种可促进毛囊细胞比如毛母细胞和毛乳头细胞增殖的生发组合物。
具体实施方式
以下顺次说明本发明的生发组合物。
本发明中使用的ε-N-(γ-谷氨酰基)赖氨酸(以下简称为谷氨酰基赖氨酸)是具有如下结构式(1)所示结构的二肽(异肽)。
至于获得上述谷氨酰基赖氨酸的方法，可以使用Biochemistry，2卷，740-745页(1963)、日本特开JP-A-51-105014等中所述的方法。
如上所述获得的谷氨酰基赖氨酸是无气味的白色粉末，其难溶于或不溶于各种有机溶剂比如甲醇、乙醇、丙酮等，但可溶于碱性水、酸性水等。
上述谷氨酰基赖氨酸可以以其盐的形式使用。以谷氨酰基赖氨酸盐的形式使用，其不仅可溶于上述碱性水和酸性水，还可溶于中性水。
其盐的例子包括碱金属盐比如钾盐、钠盐等、碱土金属盐比如钙盐、镁盐等、有机胺盐比如铵盐、三乙醇胺等、碱性氨基酸盐比如赖氨酸、精氨酸等、无机酸盐比如盐酸、硫酸等、有机酸盐比如乙酸、柠檬酸等。考虑到溶解性、安全性等，优选碱金属盐、碱土金属盐以及碱性氨基酸盐，进一步优选碱金属盐和碱土金属盐，特别优选碱金属盐。
接下来，对作为成分A的ε-N-(γ-谷氨酰基)赖氨酸或其盐进行说明。
当ε-N-(γ-谷氨酰基)赖氨酸或其盐与选自于第一组氨基酸中的一种或更多种氨基酸及其盐组合使用时，谷氨酰基赖氨酸盐的细胞增殖效果可得到增强，而不抑制正常细胞增殖。
接下来，对作为成分B的第一组氨基酸进行说明。第一组氨基酸由谷氨酰胺和亮氨酸组成。这些氨基酸可以以游离态或以盐的形式存在。可以使用光学异构体比如L-型和D-型中的任一种，也可以使用外消旋体(DL-型)。可以仅使用这些中的一种或者混合使用两种或更多种。
当用作组分时，本发明中所用的成分B的量没有限制。然而，成分B的质量相对于成分A的质量(B/A)优选为0.015～700。当比值小于0.015时，细胞增殖率有时未如预期的那样增加，当比值超过700时，有时会抑制细胞增殖率。考虑到可有效地增强细胞增殖率，下限进一步优选为0.1，更进一步优选为0.2，进一步优选为2，尤其优选为4，特别优选为4.8。另一方面，考虑到不抑制细胞增殖率，上限进一步优选为300，更进一步优选为250，进一步优选为125，尤其优选为60，特别优选为35。
特别地，考虑到增强谷氨酰基赖氨酸本身的效果而不抑制正常细胞增殖，优选组合使用谷氨酰胺或其盐与亮氨酸或其盐。在该情况中，谷氨酰胺或其盐与亮氨酸或其盐的质量比优选为1:2～250:1，进一步优选为3:1～60:1，更进一步优选为5:1～25:1。
此外，当组合使用选自于第二组氨基酸中的一种或更多种氨基酸及其盐时，可进一步增强细胞增殖效果。接下来，对作为成分C的第二组氨基酸进行说明。第二组氨基酸由赖氨酸、异亮氨酸、天冬酰胺、精氨酸和谷氨酸组成。这些氨基酸可以以游离态或以盐的形式存在。可以使用光学异构体比如L-型和D-型中的任何一种，也可以使用外消旋体(DL-型)。可以仅使用这些中的一种或者混合使用两种或更多种。由于细胞增殖率是特别明显的，故优选赖氨酸和异亮氨酸，特别优选赖氨酸。
虽然本发明中使用的成分C的量没有限制，但成分C的质量相对于成分A的质量(C/A)优选为0.0005～200。当比值小于0.0005时，其有时几乎不影响细胞增殖效果的增强，当比值超过200时，其有时抑制细胞增殖率。考虑到能活化细胞，下限进一步优选为0.001，更优选为0.01，更进一步优选为0.015，尤其优选为0.03，特别优选为0.07。另一方面，考虑到不抑制细胞增殖率，上限进一步优选为160，更进一步优选为120，进一步优选为60，尤其优选为30，特别优选为15。
本发明的生发剂通过溶于溶剂中而可用作生发组合物。待使用的溶剂的具体例子包括低级醇比如乙醇、异丙醇等；多元醇比如甘油、丙二醇、丁二醇等；水等。可以根据生发组合物的组分合适地选择所使用的溶剂的量。
生发组合物中的成分A的含量优选为0.0001～10mass％。当其含量小于0.0001mass％时，生发效果有时较差，当其量超过10mass％时，实质上不能增强预期生发效果并且皮肤上的毛孔被成分A的沉积物填满。考虑到有效地提供生发效果，下限进一步优选为0.0005mass％，进一步优选为0.0007mass％，特别优选为0.001mass％。考虑到能提供生发效果而不堵塞毛孔，上限值进一步优选为5mass％，更进一步优选为2mass％，特别优选为0.1mass％。
此外，本发明的生发组合物可以适当地包含不会抑制本发明的效果、常用于医药品、化妆品等中的各种成分。具体地说，可以添加水性成分、油性成分、粉末成分、界面活性剂、保湿剂、增粘剂、色剂、香料、抗氧化剂、PH调节剂、螯合剂、防腐剂、或紫外线防御剂、抗炎症剂、美白剂、抗老化剂、血流促进剂、白发防止剂等。
虽然本发明的生发组合物的形态没有特别限制，但具体的例子包括液状、糊状、凝胶状、泡沫状、乳状、固态等。考虑到能有效地提供生发效果，优选液状和凝胶状。
为测试本发明的生发效果，已采用如“Fragrance Journal增刊，第13期，1994，105-106页”中所述的一种测定毛乳头细胞和毛母细胞的细胞增殖率的试验方法。特别地，本发明中的试验方法是尤其有用的，这是因为其能利用毛乳头细胞和人表皮角化细胞(毛母细胞的替代品)简便并快速地测试生发效果。特别地，基于人表皮角化细胞测试的试验方法(无氨基酸的培养基)使用完全不含氨基酸的培养基作为营养源，从而是一种能在毛发退化期简便地观察头皮中的细胞增殖的特别有用的试验方法。
实施例
下面结合实施例对本发明进行详细说明，但本发明不限于此。
现在对试验方法进行说明。
<毛乳头细胞增殖试验>
(1)使用增殖培养基PCGM：乳头细胞增殖培养基(购自TOYOBO有限公司，TPGM-250)，在96孔板中以1.0×104个细胞/孔的细胞播种密度播种毛乳头细胞。
(2)在37℃、5％二氧化碳气体(CO2)的环境中培养1天后，除去培养基，并使用用于细胞增殖试验的评估培养基，即含1％FCS(胎牛血清)的DMEM培养基(Dulbecco’sModified Eagle’s Medium)洗净细胞。然后，将各种试验成分溶于类似的评估培养基中并加至各种浓度(μmol/l)。
(3)随后，在37℃、5％二氧化碳气体(CO2)的环境中进一步培养细胞2天，并通过MTT方法测定毛乳头细胞增殖率。
(4)以使用无各种生发成分的培养基获得的增值率为100作基准，计算相对评估值，并将该值作为增殖率。
<人表皮角化细胞增殖试验>
(1)使用添加了增殖添加剂HuMedia-KG(购自KURABO工业有限公司，KK-6150)的无血清的增殖培养基HuMedia-KB2(购自KURABO工业有限公司，KK-2350S)，在96孔板中以2.0×104个细胞/孔的细胞播种密度播种人表皮角化细胞。
(2)在37℃、5％二氧化碳气体(CO2)的环境中培养1天后，除去培养基，并使用用于细胞增殖试验的评估培养基，即MCDB153培养基洗净细胞。然后，将各种试验成分溶于类似的评估培养基中并加至各种浓度(μmol/l)。
(3)随后，在37℃、5％二氧化碳气体(CO2)的环境中进一步培养细胞2天，并通过MTT方法测定人表皮角化细胞增殖率。
(4)以使用无各种生发成分的培养基获得的增值率为100作基准，计算相对评估值，并将该值作为增殖率。
<人表皮角化细胞增值率(无氨基酸的培养基)>
(1)使用添加了增殖添加剂HuMedia-KG(购自KURABO工业有限公司，KK-6150)的无血清的增殖培养基HuMedia-KB2(购自KURABO工业有限公司，KK-2350S)，在96孔板中以2.0×104个细胞/孔的细胞播种密度播种人表皮角化细胞。
(2)在37℃、5％二氧化碳气体(CO2)的环境中培养1天后，除去培养基，并使用用于细胞增殖试验的评估培养基，即已除去所有氨基酸的MCDB153培养基(无氨基酸的培养基)洗净细胞。然后，添加溶于类似的评估培养基中的如表2所示的各种生发组分。
(3)随后，在37℃、5％二氧化碳气体(CO2)的环境中进一步培养细胞2天，并通过MTT方法测定人表皮角化细胞增殖率。
(4)以使用无各种氨基酸和各种生发成分的培养基获得的增值率为100作基准，计算相对评估值，并将该值作为增殖率。
[实施例1，对照例1-2]
如表1所示的化合物以各种浓度进行人表皮角化细胞增殖试验和毛乳头细胞增殖试验。
表1
就毛乳头细胞和人表皮角化细胞来说，已知谷氨酰基赖氨酸具有与已知的生发成分腺苷和米诺地尔相当或更大的增殖效果。
[实施例2-14]
制备实施例2-14的组合物并进行人表皮角化细胞增殖试验(无氨基酸的培养基)。
作为本发明的生发剂的谷氨酰基赖氨酸通过添加第一组氨基酸对人表皮角化细胞产生了增强的增殖效果。此外，可清楚地看出，通过添加第二组氨基酸进一步增强了对人表皮角化细胞的增殖效果。
[配方实施例1]
使用如表3所示的组分制备生发液。
表3
工业实用性
现在能提供具有新的作用机理的生发剂和生发组合物。
Claims (11)
1.一种生发剂，由ε-N-(γ-谷氨酰基)赖氨酸或其盐组成。
2.一种生发组合物，包含ε-N-(γ-谷氨酰基)赖氨酸或其盐。
3.一种生发组合物，包含ε-N-(γ-谷氨酰基)赖氨酸或其盐、以及选自于如下第一组氨基酸中的一种或更多种氨基酸及其盐：
第一组氨基酸：谷氨酰胺、亮氨酸。
4.一种生发组合物，包含ε-N-(γ-谷氨酰基)赖氨酸或其盐、选自于如下第一组氨基酸中的一种或更多种氨基酸及其盐、以及选自于如下第二组氨基酸中的一种或更多种氨基酸及其盐：
第一组氨基酸：谷氨酰胺、亮氨酸；
第二组氨基酸：赖氨酸、异亮氨酸、天冬酰胺、精氨酸、谷氨酸。
5.如权利要求3或4所述的生发组合物，其特征在于，所述第一组氨基酸(成分B)的质量与所述ε-N-(γ-谷氨酰基)赖氨酸或其盐(成分A)的质量的比值(B/A)为0.015～700。
6.如权利要求4或5所述的生发组合物，其特征在于，所述第二组氨基酸(成分C)的质量与所述ε-N-(γ-谷氨酰基)赖氨酸或其盐(成分A)的质量的比值(C/A)为0.0005～200。
7.一种生发方法，包括将包含ε-N-(γ-谷氨酰基)赖氨酸或其盐的组合物涂覆到皮肤上。
8.一种生发方法，包括在皮肤上涂覆包含ε-N-(γ-谷氨酰基)赖氨酸或其盐、以及选自于如下第一组氨基酸中的一种或更多种氨基酸及其盐的组合物：
第一组氨基酸：谷氨酰胺、亮氨酸。
9.一种生发方法，包括在皮肤上涂覆包含ε-N-(γ-谷氨酰基)赖氨酸或其盐、选自于如下第一组氨基酸中的一种或更多种氨基酸及其盐、以及选自于如下第二组氨基酸中的一种或更多种氨基酸及其盐的组合物：
第一组氨基酸：谷氨酰胺、亮氨酸；
第二组氨基酸：赖氨酸、异亮氨酸、天冬酰胺、精氨酸、谷氨酸。
10.如权利要求8或9所述的生发方法，其特征在于，所述第一组氨基酸(成分B)的质量与所述ε-N-(γ-谷氨酰基)赖氨酸或其盐(成分A)的质量的比值(B/A)为0.015～700。
11.如权利要求9或10所述的生发方法，其特征在于，所述第二组氨基酸(成分C)的质量与所述ε-N-(γ-谷氨酰基)赖氨酸或其盐(成分A)的质量的比值(C/A)为0.0005～200。
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