CN101324493A - 大组织标本切片快速制作方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种大组织标本切片快速制作方法。它方法简单，处理过程迅速，能够满足制作大组织切片要求。其过程为：1)采用10％的甲醛溶液对厚度小于4mm标本进行固定；2)脱水，选用梯度乙醇；3)透明，采用氯仿或二甲苯进行透明处理；4)浸蜡；5)进行包埋；6)切片；7)染色，完成大组织标本切片的快速制作。
Description
技术领域
本发明涉及一种标本处理方法，尤其涉及一种大组织标本切片快速制作方法。
背景技术
在医学领域为观察细胞、组织生理、病理形态变化的常常需要制作石蜡切片，在制作石蜡切片前需要对组织标本进行处理。由于通常的石蜡切片比较小，一般在2.5cm×1.5cm×0.1cm以内，结合显微镜下观察组织结构有一定的局限性。如果采用大组织切片则便于观察，更易作出准确判断。但大切片的制作过程周期长，难度大，不易作出高质量切片，而要制作大切片则必须先进行大组织标本的处理，但传统的大组织标本处理方法周期长，制作效果差，不易加工出满足要求的大切片。
发明内容
本发明的目的就是为了解决上述问题，提供一种方法简单，处理过程迅速，能够满足制作大组织切片要求的大组织标本切片快速制作方法。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
1)采用10％的甲醛溶液对厚度小于4mm标本进行固定；固定时间按照公式t＝V大/Vs·Z·Fg/10，其中，t为组织固定时间，V大为大组织的体积，Vs为常规取材的体积，其为0.1×0.2×0.1的常量，Z为1.1是甲醛穿透组织厚度最初1mm所述时间数，F为组织取材厚度3-5mm，g为1.2是甲醛在组织固定式的扩散速度；
2)脱水，选用梯度乙醇，其浓度从70％开始至无水乙醇位置，脱水时间按照公式t脱水时间＝V脱大/V脱s·Z脱·F脱 g 脱，其中，Z脱为乙醇穿透组织最初1mm所示时间，其值为2；F脱为组织取材厚度3-5mm，g 脱为乙醇扩散速度其值取t脱水时间的一半；V脱大为脱水大组织的体积；
3)透明，采用氯仿或二甲苯进行透明处理，透明时间按照t透明时间＝(V透大/V透s·Z透·F透 g 透)/Z透，其中，Z透为二甲苯穿透组织1mm厚度所需时间是1.2，F透取材厚度3-5mm，g 透是二甲苯扩散速度是5；V透大为透明大组织的体积；
4)浸蜡，浸蜡温度在50-60℃，用量公式为S石蜡用量＝V浸×(40-50)，及组织体积的40-50倍；浸蜡时间公式为t浸蜡时间＝(V浸大/5)×4；V浸大为浸蜡大组织体积；
5)进行包埋；
6)切片；
7)染色，完成大组织标本切片的快速制作。
所述步骤1)中，在自动脱水机加热状态下，取t的1/10值应用。
所述步骤2)中，梯度乙醇的浓度分别为70％乙醇、80％乙醇、90％乙醇、95％乙醇、无水乙醇I、无水乙醇II、无水乙醇III；同时在自动脱水机加热状态下脱水时，取t脱水时间的1/2应用，再根据取值具体分配在梯度乙醇中的各个时间。
所述步骤3)中，透明剂为氯仿或二甲苯溶液；并可采用脱水时间+2＝组织透明时间作为标准；透明剂用三缸。
所述步骤4)中，浸蜡时间还可按照组织厚度4mm计，需4小时，即组织厚1mm，需浸蜡时间为1小时。
所述步骤1)、步骤2)、步骤3)中，甲醛、乙醇和透明剂的用量为大组织体积的50-150倍。
所述步骤5)中，包埋是用蜂蜡与石蜡按照3∶7比例组成混合蜡。
所述步骤6)中，切片厚度5-7um。
本发明通过对各个步骤时间的精确控制，解决大组织标本材料因对处理时间掌握不好，造成无法进行切片加工的问题，同时也大大缩短了整个加工的时间。
本发明的有益效果是：
1.缩短制作时间，使制作时间由15天缩短为24小时；
2.用自动脱水机处理，减少了人工操作带来的差异性；
3.使标本制作程序化，合理化；
4.可有效防止标本制作过程中发生变形；
5.减少误差，使组织的处理趋于精确；
6.有利于降低试剂对环境的污染程度；
7.试剂可多次重复使用，并与常规标本制作工作不冲突。
8.克服了用微波处理标本时间不宜被掌握，标本处理程度失当，极易造成空气污染等技术难题。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步说明。
1)采用10％的甲醛溶液对厚度小于4mm标本进行固定；固定时间按照公式t＝V大/Vs·Z·Fg/10，其中，t为组织固定时间，V大为大组织的体积，Vs为常规取材的体积，其为0.1×0.2×0.1的常量，Z为1.1是甲醛穿透组织厚度最初1mm所述时间数，F为组织取材厚度3-5mm，g为1.2是甲醛在组织固定式的扩散速度；
2)脱水，选用梯度乙醇，其浓度从70％开始至无水乙醇位置，脱水时间按照公式t脱水时间＝V脱大/V脱s·Z脱·F脱 g 脱，其中，Z脱为乙醇穿透组织最初1mm所示时间，其值为2；F脱为组织取材厚度3-5mm，g 脱为乙醇扩散速度其值取t脱水时间的一半；V脱大为脱水大组织的体积；
3)透明，采用氯仿或二甲苯进行透明处理，透明时间按照t透明时间＝(V透大/V透s·Z透·F透 g 透)/Z透，其中，Z透为二甲苯穿透组织1mm厚度所需时间是1.2，F透取材厚度3-5mm，g 透是二甲苯扩散速度是5；V透大为透明大组织的体积；
4)浸蜡，浸蜡温度在50-60℃，用量公式为S石蜡用量＝V浸×(40-50)，及组织体积的40-50倍；浸蜡时间公式为t浸蜡时间＝(V浸大/5)×4；V浸大为浸蜡大组织体积；
5)进行包埋；
6)切片；
7)染色，完成大组织标本切片的快速制作。
所述步骤1)中，在自动脱水机加热状态下，取t的1/10值应用。
所述步骤2)中，梯度乙醇的浓度分别为70％乙醇、80％乙醇、90％乙醇、95％乙醇、无水乙醇I、无水乙醇II、无水乙醇III；同时在自动脱水机加热状态下脱水时，取t脱水时间的1/2应用，再根据取值具体分配在梯度乙醇中的各个时间。
所述步骤3)中，透明剂为氯仿或二甲苯溶液；并可采用脱水时间+2＝组织透明时间作为标准；透明剂用三缸。
所述步骤4)中，浸蜡时间还可按照组织厚度4mm计，需4小时，即组织厚1mm，需浸蜡时间为1小时。
所述步骤1)、步骤2)、步骤3)中，甲醛、乙醇和透明剂的用量为大组织体积的50-150倍。
所述步骤5)中，包埋是用蜂蜡与石蜡按照3∶7比例组成混合蜡。
所述步骤6)中，切片厚度5-7um。
Claims (8)
1.一种大组织标本切片快速制作方法，其特征是，它的步骤为：
1)采用10％的甲醛溶液对厚度小于4mm标本进行固定；固定时间按照公式t＝V大/Vs·Z·Fg/10，其中，t为组织固定时间，V大为大组织的体积，Vs为常规取材的体积，其为0.1×0.2×0.1的常量，Z为1.1是甲醛穿透组织厚度最初1mm所述时间数，F为组织取材厚度3-5mm，g为1.2是甲醛在组织固定式的扩散速度；
2)脱水，选用梯度乙醇，其浓度从70％开始至无水乙醇位置，脱水时间按照公式t脱水时间＝V脱大/V脱s·Z脱·F脱 g 脱，其中，Z脱为乙醇穿透组织最初1mm所示时间，其值为2；F脱为组织取材厚度3-5mm，g 脱为乙醇扩散速度其值取t脱水时间的一半；V脱大为脱水大组织的体积；
3)透明，采用氯仿或二甲苯进行透明处理，透明时间按照t透明时间＝(V透大/V透s·Z透·F透 g 透)/Z透，其中，Z透为二甲苯穿透组织1mm厚度所需时间是1.2，F透取材厚度3-5mm，g 透是二甲苯扩散速度是5；V透大为透明大组织的体积；
4)浸蜡，浸蜡温度在50-60℃，用量公式为S石蜡用量＝V浸×(40-50)，及组织体积的40-50倍；浸蜡时间公式为t浸蜡时间＝(V浸大/5)×4；V浸大为浸蜡大组织体积；
5)进行包埋；
6)切片；
7)染色，完成大组织标本切片的快速制作。
2.如权利要求1所述的大组织标本切片快速制作方法，其特征是，所述步骤1)中，在自动脱水机加热状态下，取t的1/10值应用。
3.如权利要求1所述的大组织标本切片快速制作方法，其特征是，所述步骤2)中，梯度乙醇的浓度分别为70％乙醇、80％乙醇、90％乙醇、95％乙醇、无水乙醇I、无水乙醇II、无水乙醇III；在自动脱水机加热状态下脱水时，取t脱水时间的1/2应用，再根据取值具体分配在梯度乙醇中的各个时间。
4.如权利要求1所述的大组织标本切片快速制作方法，其特征是，所述步骤3)中，透明剂为氯仿或二甲苯溶液；并可采用脱水时间+2＝组织透明时间作为标准。
5.如权利要求1所述的大组织标本切片快速制作方法，其特征是，所述步骤4)中，浸蜡时间还可按照组织厚度4mm计，需4小时，即组织厚1mm，需浸蜡时间为1小时。
6.如权利要求1-5中任一所述的大组织标本切片快速制作方法，其特征是，所述步骤1)、步骤2)、步骤3)中，甲醛、乙醇和透明剂的用量为大组织体积的50-150倍。
7.如权利要求1所述的大组织标本切片快速制作方法，其特征是，所述步骤5)中，包埋是用蜂蜡与石蜡按照3∶7比例组成混合蜡。
8.如权利要求1所述的大组织标本切片快速制作方法，其特征是，所述步骤6)中，切片厚度5-7um。
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| CNA2008101388057A CN101324493A (zh) | 2008-07-29 | 2008-07-29 | 大组织标本切片快速制作方法 |
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| CNA2008101388057A CN101324493A (zh) | 2008-07-29 | 2008-07-29 | 大组织标本切片快速制作方法 |
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| CNA2008101388057A Pending CN101324493A (zh) | 2008-07-29 | 2008-07-29 | 大组织标本切片快速制作方法 |
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