CN101306081A - 一种心舒宁片的质量控制方法 - Google Patents
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Abstract
一种心舒宁片的质量控制方法,包括采用:(1)薄层色谱法鉴别心舒宁片中含有银杏叶的有效成份总黄酮醇苷;(2)薄层色谱法鉴别心舒宁片中含有银杏叶的有效成份萜类内酯;(3)薄层色谱法鉴别心舒宁片中含有益母草的有效成份盐酸水苏碱;(4)薄层色谱法鉴别心舒宁片中的豨莶草;(5)高效液相色谱法测定心舒宁片中的葛根素的含量。克服了原鉴别方法仅有葛根素的HPLC定性鉴别方法,鉴别药味少,且无有效成份的含量测定方法的缺点,提高了心舒宁片质量控制方法的专属性和质量稳定性,确保了人们用药的安全和有效性。
Description
技术领域
本发明涉及中成药的质量控制方法,具体地说,本发明涉及一种心舒宁片的质量控制方法。
背景技术
心舒宁片是活血化瘀的中成药,在我国已应用多年,临床用于心脉瘀阻所致的胸痹心痛、冠心病、心绞痛、冠状动脉供血不全,动脉硬化见上述症候者。心舒宁片由毛冬青、银杏叶、葛根、益母草、豨莶草、柿叶按照中成药片剂的常规工艺制备而成。该标准收载于该标准收载于中华人民共和国卫生部药品标准中药成方制剂第17册,标准号WS3-B-3153-98。该标准的鉴别方法仅有葛根素的HPLC定性鉴别方法,鉴别药味少,且无有效成份的含量测定方法,无法有效控制产品质量。
发明内容
本发明的目的就是为了克服目前心舒宁片的质量标准的缺点,提供一种专属性强、能更准确控制产品质量的心舒宁片的质量控制方法。
本发明是这样实现的。
本发明采用:(1)薄层色谱法鉴别心舒宁片中含有银杏叶的有效成份总黄酮醇苷;(2)薄层色谱法鉴别心舒宁片中含有银杏叶的有效成份萜类内酯;(3)薄层色谱法鉴别心舒宁片中含有益母草的有效成份盐酸水苏碱;(4)薄层色谱法鉴别心舒宁片中的豨莶草;(5)高效液相色谱法测定心舒宁片中的葛根素的含量。
实际上,银杏叶中的总黄酮醇苷及萜类内酯均有较强的药理作用,通过薄层色谱法检测银杏、益母草有效成份和豨莶草,及定量测定葛根素的含量,将大大提高本品的检验效果和专属性。
(1)薄层色谱法鉴别心舒宁片中含有银杏叶的有效成份总黄酮醇苷的较佳条件是:
取本品,除去糖衣,研细,加甲醇,超声处理,滤过,滤液作为供试品溶液。另取银杏叶对照药材1g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验,吸取上述两种溶液,分别点于同一含4%醋酸钠的硅胶G薄层板上,以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5∶3∶1∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应位置上,显相同颜色的荧光斑点。
(2)薄层色谱法鉴别心舒宁片中含有银杏叶的有效成份萜类内酯的较佳条件是:
取本品,除去糖衣,研细,加水,盐酸溶液(5→100,即将5体积浓盐酸加入水中,至100体积)调至酸性,水浴温热使溶解,放冷,用乙酸乙酯提取3次,每次20ml,合并乙酸乙酯液,蒸干,残渣加15%乙醇溶液使溶解,置于已预先处理好的聚酰胺柱(60~80目,6g,内径1~1.5cm,用水湿法装柱)上,用5%乙醇溶液50ml洗脱,收集洗脱液,置水浴上蒸去乙醇,残液用乙酸乙酯振摇提取2次,合并乙酸乙酯提取液,蒸干,残渣加乙酸乙酯1ml使溶解,作为供试品溶液。另取银杏内酯A对照品、银杏内酯B对照品、银杏内酯C对照品,加乙酸乙酯制成每1ml各含0.5mg的混合溶液作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验,吸取上述两种溶液,分别点于同一含4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上,以甲苯-乙酸乙酯-丙酮-甲醇(10∶5∶5∶1)为展开剂,预饱和15分钟,在15℃以下展开,取出,晾干,在醋酐蒸气中熏15分钟,取出,晾干,在140~160℃中加热30分钟,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
(3)薄层色谱法鉴别心舒宁片中含有益母草的有效成份盐酸水苏碱的较佳条件是:
取本品,除去糖衣,研细,加乙醇,超声处理,滤过,滤液浓缩至约5ml,加于活性炭-氧化铝柱(活性炭1g;中性氧化铝100~120目,4g;内径1.5cm,干法装柱)上,用乙醇洗脱,收集洗脱液,蒸干,残渣加乙醇1ml使溶解,作为供试品溶液。另取盐酸水苏碱对照品,加乙醇制成每1ml含5mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验,吸取上述两种溶液,分别点于同一硅胶G薄层板(预制板)上,以乙酸乙酯-正丁醇-盐酸(1∶8∶3)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾试液-1%三氯化铁乙醇溶液(10∶1)。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
(4)薄层色谱法鉴别心舒宁片中的豨莶草的较佳条件是:
取本品,除去糖衣,研细,加水及稀盐酸,振摇,静置后滤过,滤液用乙酸乙酯提取3次,,合并乙酸乙酯液,水浴上蒸干,残渣用乙醇2ml溶解后,加入中性氧化铝柱(100-200目,2g,内径1cm)上,用乙醇20ml洗脱,合并乙醇洗脱液,水浴蒸干,残渣加乙醇1ml使溶解,作为供试品溶液。另取豨莶草对照药材,加水适量微沸1小时,滤过,滤液调至约40ml,加稀盐酸,摇匀,自“用乙酸乙酯提取3次…”起同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验,吸取上述两种溶液,分别点于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷-丙酮-甲醇-甲酸-水(10∶10∶5∶1∶5)的下层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%香草醛硫酸溶液,用热风吹至斑点显色清晰。在供试品色谱中,在与对照药材色谱相应位置上,显相同颜色的斑点。
(5)高效液相色谱法测定心舒宁片中的葛根素的含量的较佳条件是:
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-水(25∶75)为流动相;检测波长为250nm。理论板数按葛根素峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备 取葛根素对照品适量,精密称定,加30%乙醇溶液制成每1ml含25μg的溶液,即得。
供试品溶液的制备 取本品,除去糖衣,精密称定,研细,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入30%乙醇溶液,密塞,称定重量,超声处理(功率160W,频率50kHz),放冷,再称定重量,用30%乙醇溶液补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品每片含葛根以葛根素(C21H20O9)计,不得少于1.5mg。
该测定方法经过方法学验证,准确度试验平均回收率=99.2%,RSD=1.9%;重复性试验RSD=2.1%;回归方程为Y=4.2995×104X+1.6118×104(r=0.9999),范围为4.144μg/ml~62.16μg/ml。
10批样品含量测定结果
本发明的心舒宁片的质量控制方法,克服了原鉴别方法仅有葛根素的HPLC定性鉴别方法,鉴别药味少,且无有效成份的含量测定方法的缺点,提高了心舒宁片质量控制方法的专属性和质量稳定性,确保了人们用药的安全和有效性。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明。
取申请人生产的批号为5001的心舒宁片。
【鉴别】(1)取本品2片,除去糖衣,研细,加甲醇10ml,超声处理15分钟,滤过,滤液作为供试品溶液。另取银杏叶对照药材1g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验,吸取上述两种溶液各5μl,分别点于同一含4%醋酸钠的硅胶G薄层板上,以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5∶3∶1∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应位置上,显相同颜色的荧光斑点。
(2)取本品10片,除去糖衣,研细,加水20ml,盐酸溶液(5→100)5滴,水浴温热使溶解,放冷,用乙酸乙酯提取3次,每次20ml,合并乙酸乙酯液,蒸干,残渣加15%乙醇溶液5ml使溶解,置于已预先处理好的聚酰胺柱(60~80目,6g,内径1~1.5cm,用水湿法装柱)上,用5%乙醇溶液50ml洗脱,收集洗脱液,置水浴上蒸去乙醇,残液用乙酸乙酯振摇提取2次,每次20ml,合并乙酸乙酯提取液,蒸干,残渣加乙酸乙酯1ml使溶解,作为供试品溶液。另取银杏内酯A对照品、银杏内酯B对照品、银杏内酯C对照品,加乙酸乙酯制成每1ml各含0.5mg的混合溶液作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验,吸取上述两种溶液各2~5μl,分别点于同一含4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上,以甲苯-乙酸乙酯-丙酮-甲醇(10∶5∶5∶1)为展开剂,预饱和15分钟,在15℃以下展开,取出,晾干,在醋酐蒸气中熏15分钟,取出,晾干,在140~160℃中加热30分钟,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
(3)取本品20片,除去糖衣,研细,加乙醇20ml,超声处理15分钟,滤过,滤液浓缩至约5ml,加于活性炭-氧化铝柱(活性炭1g;中性氧化铝100~120目,4g;内径1.5cm,干法装柱)上,用乙醇30ml洗脱,收集洗脱液,蒸干,残渣加乙醇1ml使溶解,作为供试品溶液。另取盐酸水苏碱对照品,加乙醇制成每1ml含5mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验,吸取上述两种溶液各2μl,分别点于同一硅胶G薄层板(预制板)上,以乙酸乙酯-正丁醇-盐酸(1∶8∶3)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾试液-1%三氯化铁乙醇溶液(10∶1)。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
(4)取本品10片,除去糖衣,研细,加水40ml及稀盐酸4滴,振摇30分钟,静置后滤过,滤液用乙酸乙酯提取3次,每次30ml,合并乙酸乙酯液,水浴上蒸干,残渣用乙醇2ml溶解后,加入中性氧化铝柱(100-200目,2g,内径1cm)上,用乙醇20ml洗脱,合并乙醇洗脱液,水浴蒸干,残渣加乙醇1ml使溶解,作为供试品溶液。另取豨莶草对照药材3g,加水适量微沸1小时,滤过,滤液调至约40ml,加稀盐酸4滴,摇匀,自“用乙酸乙酯提取3次…”起同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验,吸取上述两种溶液各5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷-丙酮-甲醇-甲酸-水(10∶10∶5∶1∶5)的下层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%香草醛硫酸溶液,用热风吹至斑点显色清晰。在供试品色谱中,在与对照药材色谱相应位置上,显相同颜色的斑点。
【检查】应符合片剂项下有关的各项规定(中国药典2005年版一部附录ID)。
【含量测定】照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-水(25∶75)为流动相;检测波长为250nm。理论板数按葛根素峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备取葛根素对照品适量,精密称定,加30%乙醇溶液制成每1ml含25μg的溶液,即得。
供试品溶液的制备 取本品10片,除去糖衣,精密称定,研细,取约0.15g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入30%乙醇溶液50ml,密塞,称定重量,超声处理(功率160W,频率50kHz)30分钟后,放冷,再称定重量,用30%乙醇溶液补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品每片含葛根以葛根素(C21H20O9)计,不得少于1.5mg。
本批号产品每片含葛根以葛根素(C21H20O9)计,不得少于2.0mg。
Claims (6)
1、一种心舒宁片的质量控制方法,包括采用:(1)薄层色谱法鉴别心舒宁片中含有银杏叶的有效成份总黄酮醇苷;(2)薄层色谱法鉴别心舒宁片中含有银杏叶的有效成份萜类内酯;(3)薄层色谱法鉴别心舒宁片中含有益母草的有效成份盐酸水苏碱;(4)薄层色谱法鉴别心舒宁片中的豨莶草;(5)高效液相色谱法测定心舒宁片中的葛根素的含量。
2、根据权利要求1所述的一种心舒宁片的质量控制方法,其特征在于薄层色谱法鉴别心舒宁片中含有银杏叶的有效成份总黄酮醇苷的条件是:取本品,除去糖衣,研细,加甲醇,超声处理,滤过,滤液作为供试品溶液;另取银杏叶对照药材,同法制成对照药材溶液;照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液,分别点于同一含4%醋酸钠的硅胶G薄层板上,以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水5∶3∶1∶1为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯365nm下检视;供试品色谱中,在与对照药材色谱相应位置上,显相同颜色的荧光斑点。
3、根据权利要求1所述的一种心舒宁片的质量控制方法,其特征在于薄层色谱法鉴别心舒宁片中含有银杏叶的有效成份萜类内酯的条件是:取本品,除去糖衣,研细,加水,盐酸溶液调至酸性,水浴温热使溶解,放冷,用乙酸乙酯提取3次,合并乙酸乙酯液,蒸干,残渣加15%乙醇溶液使溶解,置于已预先处理好的聚酰胺柱上;柱为60~80目,6g,内径1~1.5cm,用水湿法装柱;用5%乙醇溶液洗脱,收集洗脱液,置水浴上蒸去乙醇,残液用乙酸乙酯振摇提取2次,合并乙酸乙酯提取液,蒸干,残渣加乙酸乙酯使溶解,作为供试品溶液;另取银杏内酯A对照品、银杏内酯B对照品、银杏内酯C对照品,加乙酸乙酯制成每1ml各含0.5mg的混合溶液作为对照品溶液;照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液,分别点于同一含4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上,以甲苯-乙酸乙酯-丙酮-甲醇10∶5∶5∶1为展开剂,预饱和15分钟,在15℃以下展开,取出,晾干,在醋酐蒸气中熏15分钟,取出,晾干,在140~160℃中加热30分钟,置紫外光灯365nm下检视;供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
4、根据权利要求1所述的一种心舒宁片的质量控制方法,其特征在于薄层色谱法鉴别心舒宁片中含有益母草的有效成份盐酸水苏碱的条件是:取本品,除去糖衣,研细,加乙醇,超声处理15分钟,滤过,滤液浓缩至约5ml,加于活性炭-氧化铝柱上;柱为活性炭1g,中性氧化铝100~120目,4g,内径1.5cm,干法装柱;用乙醇洗脱,收集洗脱液,蒸干,残渣加乙醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取盐酸水苏碱对照品,加乙醇制成每1ml含5mg的溶液,作为对照品溶液;照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各,分别点于同一硅胶G薄层板上,以乙酸乙酯-正丁醇-盐酸1∶8∶3为展开剂,展开,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾试液-1%三氯化铁乙醇溶液10∶1;供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
5、根据权利要求1所述的一种心舒宁片的质量控制方法,其特征在于薄层色谱法鉴别心舒宁片中的豨莶草的条件是:取本品,除去糖衣,研细,加水及稀盐酸,振摇30分钟,静置后滤过,滤液用乙酸乙酯提取3次,合并乙酸乙酯液,水浴上蒸干,残渣用乙醇溶解后,加入中性氧化铝柱上;柱为100-200目,2g,内径1cm;用乙醇洗脱,合并乙醇洗脱液,水浴蒸干,残渣加乙醇1ml使溶解,作为供试品溶液;另取豨莶草对照药材,加水适量微沸1小时,滤过,滤液调至约40ml,加稀盐酸4滴,摇匀,用乙酸乙酯提取3次,合并乙酸乙酯液,水浴上蒸干,残渣用乙醇2ml溶解后,加入中性氧化铝柱上;柱为100-200目,2g,内径1cm;用乙醇洗脱,合并乙醇洗脱液,水浴蒸干,残渣加乙醇1ml使溶解,制成对照药材溶液;照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液,分别点于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷-丙酮-甲醇-甲酸-水10∶10∶5∶1∶5的下层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%香草醛硫酸溶液,用热风吹至斑点显色清晰;在供试品色谱中,在与对照药材色谱相应位置上,显相同颜色的斑点。
6、根据权利要求1所述的一种心舒宁片的质量控制方法,其特征在于高效液相色谱法测定心舒宁片中的葛根素的含量的条件是:
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-水25∶75为流动相;检测波长为250nm;理论板数按葛根素峰计算应不低于2000;
对照品溶液的制备取葛根素对照品适量,精密称定,加30%乙醇溶液制成每1ml含25μg的溶液,即得;
供试品溶液的制备取本品,除去糖衣,精密称定,研细,取约0.15g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入30%乙醇溶液,密塞,称定重量,超声功率160W,频率50kHz处理30分钟后,放冷,再称定重量,用30%乙醇溶液补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得;
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液,注入液相色谱仪,测定,即得;
本品每片含葛根以葛根素计,不得少于1.5mg。
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