CN101302479A - 香型蘑菇菌种以及利用其生产香型蘑菇的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于食用菌的栽培，特别是指一种香型蘑菇菌种以及利用其生产香型蘑菇的方法。是将蘑菇(Agaricus sp.)CGMCCNo.2507作为栽培种接种于含有碳源、有机氮源、无机氮源、无机盐和水的培养基中进行发酵，发酵过程是在温度为25－40℃、发酵周期为23－35天的条件下进行的需氧发酵。本发明解决了现有技术存在的国内高温型双孢菇很少的问题，具有大大降低了秸秆还田的处理成本，有效实现其增收的优点；填补了我国乃至世界在此季节无鲜双孢菇的空白，具有广泛的市场前景；对于其它双孢菇的高产栽培具有普遍的指导意义。
Description
所属技术领域
本发明属于食用菌的栽培，特别是指一种香型蘑菇菌种以及利用其生产香型蘑菇的方法。
背景技术
目前国内双孢菇的栽培品种多为中低温型，高温型的很少，中低温型的主要以AS2796为代表，它的出菇温度一般为8℃-22℃，在自然条件下，出菇期为当年的10月-次年的5月，6-9月为无菇期。我国在高温双孢菇的栽培历史中，十多年前曾出现过新登96，现在种植很少，一直没有形成规模化生产。
发明内容
本发明的目的在于提供一种香型蘑菇菌种。
本发明的另一目的是提供一种利用香型蘑菇菌种在高温期生产香型蘑菇的方法。
本发明的目的是这样实现的：
香型蘑菇菌种，是蘑菇(Agaricus sp.)CGMCCNo.2507。
该香型蘑菇菌种于1999年在7月冀南地区的闲置蔬菜大棚中发现，暂命名为大98，经组织分离、培养获得纯菌种，其具体的培养方法是取香型蘑菇中菌柄与伞盖交接处的组织块1mm2，置于PDA斜面培养基中通风培养，培养周期为14天，培养温度为27℃。
(一)形态分类特征：
此菌株新鲜子实体纯白色，菌盖直径3-9.5厘米，有时更大，初期半球形、扁半球形，后期中部略下凹，肉厚、质地紧密、不易开伞，香气浓。菌褶较密，不等长，离生。菌柄粗壮、白色、平滑。菌环膜质，生菌柄中下部，白色，双层，稍薄。担子棒状，具2、3、4小梗，以2小梗为主。孢子属于双孢、三孢或四孢等，以双孢为主，孢子褐色、褐黑色，近球形或宽椭圆形，光滑壁稍厚，具小尖，5-6.4×4-4.5μm，Melzer反应不明显。
(二)形态学鉴定结果
形态学鉴定结果属于伞菌目Agaricales，蘑菇科Agaricaceae。此样品接近双胞蘑菇和大肥蘑菇，暂定蘑菇属Agaricus一个新菌株，拉丁学名暂定Agaricus sp.。根据形态及培养特征，建议中文名称取香型蘑菇。
(三)孢子观察：
该菌株子实体子实层担子可产生三种类型的孢子，其中双孢占53％，三孢占38％，四孢占9％。不同于现有的双孢菇(双孢占81％)和四孢菇(四孢占85％)，也不同于英国发现的野生浅棕色双孢菇96-4，96-4蘑菇双孢占64％，三孢占35％，四孢占3％，虽二者孢子类型接近，但有三点区别：第一、96-4为浅棕色，香型蘑菇为纯白色；第二、96-4为中低温型，香型蘑菇为高温型，第三、96-4蘑菇尚无人工栽培，香型蘑菇可人工栽培。
(四)酯酶同工酶分析：
从香型蘑菇的酯酶同工酶图谱来看，共电泳出11条带，其相对迁移率分别为0.121，0.218，0.268，0.316，0.382，0.403，0.455，0.521，0.610，0.669，0.729，其条带数和迁移率明显与现有的双孢菇不同。
(五)拮抗试验：
从拮抗试验来看，香型蘑菇与现有新登94、大肥菇有明显的拮抗线，表明不是同一个种。
(六)营养分析：
经对其营养成分进行测定，结果是：蛋白质含量高达39.26％，脂肪含量2.92％，谷氨酸7.03％，从这一结果看，香型蘑菇属高蛋白、低脂肪、香味浓的健康食品。
本发明的另一目的是这样实现的：
将CGMCCNo.2507制成栽培种接种于含有碳源、有机氮源、无机氮源、无机盐和水的培养基中进行发酵，发酵过程是在温度为25-40℃、发酵周期为23-35天的条件下进行的需氧发酵。
本发明中各工艺步骤中的具体条件包括：
发酵过程包括如下的工艺步骤：
A、将母种制成原种；
B、将A步骤中制备的原种经扩大培养制成栽培种；
C、制备发酵培养基并置于室内床架表面，发酵培养基包括下列单位重量份的组分：
碳源2000-2500 有机氮源1800-2175 机氮源30-50
轻质碳酸钙50-75 过磷酸钙或磷酸二氢钾5-17 草木灰或氯化钾5-10
石膏50-75 熟石灰75-92
D、将栽培种介入发酵培养基进行发酵，C步骤中的接种量为：每平方米的发酵培养基接入750毫升的B步骤中制备的栽培种。
所述的碳源选用农作物秸秆，包括棉杆、稻草杆、麦秸、玉米秸秆、大豆秸秆中的一种或其混合物，无机氮源选用尿素和硫酸铵、硝酸铵、碳酸氢铵中的一种或其混合物，其中尿素占无机氮源总质量的50％；有机氮包括如下单位重量份的组分：
畜禽粪便1750-2100 饼肥50-75
其中畜禽粪便选用牛粪、驴粪、羊粪、鸡粪、鸭粪、猪粪中的一种或其混合物，饼肥选用豆饼、花生饼、棉籽饼、菜籽饼中的一种或其混合物。
步骤A中母种的制备采用PDA培养基培养，培养周期为14-20，温度为27-32℃。
B步骤中的扩大培养包括将母种制成原种的一级扩大培养，以及将原种制备成栽培种的二级扩大培养，其中一级扩大培养是将母种接种于一级扩大培养的培养基中进行培养制成原种，二级扩大培养是将原种接种于二级扩大培养的培养基中进行培养制成栽培种，一、二级扩大培养的培养基包括下列单位重量份的组分：
麦粒100 稻草粉3
将麦粒采用蒸、煮或浸泡至其含水量为55％-60％后，与稻草粉混合均匀并置于容器中，在1.52×105Pa的压力条件下高压灭菌两小时，然后冷却至不低于30℃-35℃接种；稻草粉是选自稻草或麦秸粉碎成长度不超过1.5厘米的粉状物，一、二级扩大培养中的接种量为1％-5％，培养温度为25℃-29℃，培养周期为30-40天。
C步骤中的发酵培养基的制备包括如下工艺步骤：
(1)物料的预湿：
畜禽粪便的预湿：将畜禽粪便加入其自重2％的熟石灰混合均匀，在对其浇水搅拌的同时，将其建成条形堆，含水量为手紧握时有水渗出、但不下滴，堆温为50℃-55℃，保持3-4天；
秸秆的预湿：将秸秆加入余量的熟石灰混合均匀，在对其浇水搅拌的同时，将其建堆，含水量为手紧握时有水渗出、但不下滴，堆温60-65℃，保持3-4天；
饼肥的预湿：将饼肥浇水搅拌，含水量为手紧握时有水渗出、但不下滴。
(2)建堆发酵：
a、建堆：将步骤(1)中预湿后的物料建条形料堆，并将饼肥、无机氮中的尿素、30％-50％的石膏均匀埋设于料堆中间，在料堆上加水至水渗出料堆外；
b、第一次翻堆：建堆后4-6天，当堆温开始下降时，进行翻堆并在料堆上加水至水渗出料堆外，同时将30％-50％的石膏、50％的轻质碳酸钙、除尿素外的无机氮源依次均匀撒入料堆内；
c、第二次翻堆：将余量的石膏、50％的轻质碳酸钙、50％的过磷酸钙依次均匀撒入料堆内；
d、第三次翻堆：将草木灰或氯化钾、余量的过磷酸钙依次均匀撒入料堆内；
(3)后发酵：
将第三次翻堆后的物料转入室内培养床架进行后发酵，物料的厚度为30-40厘米，对物料通蒸汽升温，温度60℃-62℃、时间为6-10小时，然后通风使物料降温至50℃-55℃，保持4-5天，当料温降低至50℃以下时，对物料进行自然通风使其温度降低至不超过35℃，制成发酵培养基。
D步骤中的发酵包括如下工艺步骤：
a、调水：将pH＝8的水喷入步骤C中制备好的发酵培养基并进行翻拌，使其混合均匀，料堆含水量为手紧握时有水渗出、但不下滴；
b、接种：待培养基温度降至30℃，先将2/3的栽培种均匀接种在步骤a中的料堆不超过3厘米的表层内，将余量栽培种均匀接种于料堆表面，用板拍平形成培养料，接种过程中空气湿度不低于85％；
c、发菌：发菌温度为25℃-40℃，湿度为85％-75％；接种十天后松动培养料；
d、覆土调水、出菇：接种后经15-20天，菌丝长满培养基，在培养料表面覆土，在培养料表面所覆盖的土选用轻质粘土、草炭土、河泥土中的任一种，覆土的厚度为3.5-4厘米，培养料表面先覆颗粒度1.5-2厘米的粗土，然后在粗土的表面覆盖颗粒度为0.5-1厘米的细土，加水调整至覆土层的含水量为18％-22％，培养料的含水量为55％-70％，经8-15天的培养后出菇。
D步骤中的b工序中接种时床架表面的发酵培养基的厚度为18-22厘米。
D步骤中的c工序中发菌温度为27℃-32℃。
本发明所取得的实质性特点和显著的技术进步在于：
1、本发明发现并选育出香型蘑菇新菌株，并在生产过程中形成了独特的栽培技术，不仅适用于香型蘑菇的栽培，而且对于其它双孢菇的高产栽培具有普遍的指导意义。
2、本发明所涉及的香型蘑菇适宜我国夏季6-9月份出菇，填补了我国乃至世界在此季节无鲜双孢菇的空白，具有广泛的市场前景。
3、香型蘑菇适宜在园区棚架式规模化栽培，有利于充分发挥技术、管理、销售三集中的优势。
4、以作物秸秆作为生产香型蘑菇的主要原料，大大降低了秸秆还田的处理成本，有效实现其增收的效果。
附图说明
本发明的附图有：
图1是本发明中香型蘑菇的酯酶同工酶分析图谱。
图2是用显微镜观察本发明中香型蘑菇的担子上孢子种类面图片.
图3是本发明中的香型蘑菇与不同四孢菇之间的拮抗试验结果。
其中图3a是本发明的香型蘑菇与新登96之间的拮抗试验；图3b是本发明的香型蘑菇与夏秀2000之间的拮抗试验；图3c是本发明的香型蘑菇与大肥菇之间的拮抗试验。
具体实施方式
以下对本发明的实施例作进一步描述，但不作为对本发明的进一步限定。
实施例1
生产菌种采用蘑菇(Agaricus sp.)CGMCCNo.2507。
将CGMCCNo.2507制成栽培种接种于含有碳源、有机氮源、无机氮源、无机盐和水的培养基中进行发酵，发酵过程是在温度为25-40℃、发酵周期为23-35的条件下进行的需氧发酵。
本发明中各工艺步骤中的具体条件包括：
发酵过程包括如下的工艺步骤：
A、将母种制成原种；
B、将A步骤中制备的原种经扩大培养制成栽培种；
C、制备发酵培养基并置于室内床架表面，发酵培养基包括下列单位重量份的组分：
碳源21 有机氮源2000 机氮源40
轻质碳酸钙60 过磷酸钙12 草木灰8
石膏70 熟石灰80
D、将栽培种介入发酵培养基进行发酵，C步骤中的接种量为：每平方米的发酵培养基接入750毫升的B步骤中制备的栽培种。
所述的碳源选用棉杆，无机氮源选用尿素和硫酸铵，其中尿素占无机氮源总质量的50％；有机氮包括如下单位重量份的组分：
畜禽粪便1940 饼肥60
其中畜禽粪便选用牛粪，饼肥选用豆饼。
步骤A中母种制备采用PDA培养基培养，培养周期18天，温度为28℃。
B步骤中的扩大培养包括将母种制成原种的一级扩大培养，以及将原种制备成栽培种的二级扩大培养，其中一级扩大培养是将母种接种于一级扩大培养的培养基中进行培养制成原种，二级扩大培养是将原种接种于二级扩大培养的培养基中进行培养制成栽培种，一、二级扩大培养的培养基包括下列单位重量份的组分：
麦粒100 稻草粉3
将麦粒煮至其含水量为55％-60％后，与稻草粉混合均匀并置于容器中，在1.52×105Pa的压力条件下高压灭菌两小时，然后冷却至不低于30℃-35℃接种；稻草粉是选自稻草或麦秸粉碎成长度不超过1.5厘米的粉状物，一、二级扩大培养中的接种量为3％，培养温度为27℃，培养周期为35天。
C步骤中的发酵培养基的制备包括如下工艺步骤：
(1)物料的预湿：
畜禽粪便的预湿：将畜禽粪便加入其自重2％的熟石灰混合均匀，在对其浇水搅拌的同时，将其建成条形堆，含水量为手紧握时有水渗出、但不下滴，堆温为52℃，保持3.5天；
秸秆的预湿：将秸秆加入余量的熟石灰混合均匀，在对其浇水搅拌的同时，将其建堆，含水量为手紧握时有水渗出、但不下滴，堆温62℃，保持3.5天；
饼肥的预湿：将饼肥浇水搅拌，含水量为手紧握时有水渗出、但不下滴。
(2)建堆发酵：
a、建堆：将步骤(1)中预湿后的物料建条形料堆，并将饼肥、无机氮中的尿素、35％的石膏均匀埋设于料堆中间，在料堆上加水至水渗出料堆外；
b、第一次翻堆：建堆后4-6天，当堆温开始下降时，进行翻堆并在料堆上加水至水渗出料堆外，同时将35％的石膏、50％的轻质碳酸钙、除尿素外的无机氮源依次均匀撒入料堆内；
c、第二次翻堆：将余量的石膏、50％的轻质碳酸钙、50％的过磷酸钙依次均匀撒入料堆内；
d、第三次翻堆：将草木灰、余量的过磷酸钙依次均匀撒入料堆内；
(3)后发酵：
将第三次翻堆后的物料转入室内培养床架进行后发酵，物料的厚度为35厘米，对物料通蒸汽升温，温度61℃、时间为8小时，然后通风使物料降温至52℃，保持4天，当料温降低至50℃以下时，对物料进行自然通风使其温度降低至不超过35℃，制成发酵培养基。
D步骤中的发酵包括如下工艺步骤：
a、调水：将pH＝8的水喷入步骤C中制备好的发酵培养基并进行翻拌，使其混合均匀，料堆含水量为手紧握时有水渗出、但不下滴；
b、接种：待培养基温度降至30℃，先将2/3的栽培种均匀接种在步骤a中的料堆不超过3厘米的表层内，将余量栽培种均匀接种于料堆表面，用板拍平形成培养料，接种过程中空气湿度不低于85％；
c、发菌：发菌温度为32℃，湿度为85％-75％；接种十天后松动培养料；
d、覆土调水、出菇：接种后经18-20天，菌丝长满培养基，在培养料表面覆土，在培养料表面所覆盖的土选用轻质粘土、草炭土、河泥土中的任一种，覆土的厚度为3.5-4厘米，培养料表面先覆颗粒度1.5-2厘米的粗土，然后在粗土的表面覆盖颗粒度为0.5-1厘米的细土，加水调整至覆土层的含水量为18％-22％，培养料的含水量为55％-70％，经8-15天的培养后出菇。
D步骤中的b工序中接种时床架表面的发酵培养基的厚度为18-22厘米。
D步骤中的c工序中发菌温度为27℃-32℃。
实施例2
生产菌种采用蘑菇(Agaricus sp.)CGMCCNo.2507。
将CGMCCNo.2507制成栽培种接种于含有碳源、有机氮源、无机氮源、无机盐和水的培养基中进行发酵，发酵过程是在温度为25-40℃、发酵周期为23-35的条件下进行的需氧发酵。
本实施例中各工艺步骤中的具体条件包括：
发酵过程包括如下的工艺步骤：
A、将母种制成原种；
B、将A步骤中制备的原种经扩大培养制成栽培种；
C、制备发酵培养基并置于室内床架表面，发酵培养基包括下列单位重量份的组分：
碳源2300 有机氮源1900 无机氮源40
轻质碳酸钙70 磷酸二氢钾15 氯化钾8
石膏70 熟石灰90
D、将栽培种介入发酵培养基进行发酵，C步骤中的接种量为：每平方米的发酵培养基接入750毫升的B步骤中制备的栽培种。
所述的碳源选用麦秸，无机氮源选用尿素和碳酸氢铵，其中尿素占无机氮源总质量的50％；有机氮包括如下单位重量份的组分：
畜禽粪便1840 饼肥60
其中畜禽粪便选用猪粪，饼肥选用花生饼。
步骤A中母种的制备采用PDA培养基培养，培养周期为14-20天，温度为27-32℃。
B步骤中的扩大培养包括将母种制成原种的一级扩大培养，以及将原种制备成栽培种的二级扩大培养，其中一级扩大培养是将母种接种于一级扩大培养的培养基中进行培养制成原种，二级扩大培养是将原种接种于二级扩大培养的培养基中进行培养制成栽培种，一、二级扩大培养的培养基包括下列单位重量份的组分：
麦粒100 稻草粉3
将麦粒采用蒸、煮或浸泡至其含水量为55％-60％后，与稻草粉混合均匀并置于容器中，在1.52×105Pa的压力条件下高压灭菌两小时，然后冷却至不低于30℃-35℃接种；稻草粉是选自稻草或麦秸粉碎成长度不超过1.5厘米的粉状物，一、二级扩大培养中的接种量为1％-5％，培养温度为25℃-29℃，培养周期为30-40。
C步骤中的发酵培养基的制备包括如下工艺步骤：
(1)物料的预湿：
畜禽粪便的预湿：将畜禽粪便加入其自重2％的熟石灰混合均匀，在对其浇水搅拌的同时，将其建成条形堆，含水量为手紧握时有水渗出、但不下滴，堆温为53℃，保持4天；
秸秆的预湿：将秸秆加入余量的熟石灰混合均匀，在对其浇水搅拌的同时将其建堆，含水量为手紧握时有水渗出、但不下滴，堆温65℃，保持3天；
饼肥的预湿：将饼肥浇水搅拌，含水量为手紧握时有水渗出、但不下滴。
(2)建堆发酵：
a、建堆：将步骤(1)中预湿后的物料建条形料堆，并将饼肥、无机氮中的尿素、50％的石膏均匀埋设于料堆中间，在料堆上加水至水渗出料堆外；
b、第一次翻堆：建堆后4-6天，当堆温开始下降时，进行翻堆并在料堆上加水至水渗出料堆外，同时将30％的石膏、50％的轻质碳酸钙、除尿素外的无机氮源依次均匀撒入料堆内；
c、第二次翻堆：将余量的石膏、50％的轻质碳酸钙、50％的过磷酸钙依次均匀撒入料堆内；
d、第三次翻堆：将氯化钾、余量的过磷酸钙依次均匀撒入料堆内；
(3)后发酵：
将第三次翻堆后的物料转入室内培养床架进行后发酵，物料的厚度为30-40厘米，对物料通蒸汽升温，温度60℃-62℃、时间为6-10小时，然后通风使物料降温至50℃-55℃，保持4-5天，当料温降低至50℃以下时，对物料进行自然通风使其温度降低至不超过35℃，制成发酵培养基。
D步骤中的发酵包括如下工艺步骤：
a、调水：将pH＝8的水喷入步骤C中制备好的发酵培养基并进行翻拌，使其混合均匀，料堆含水量为手紧握时有水渗出、但不下滴；
b、接种：待培养基温度降至30℃，先将2/3的栽培种均匀接种在步骤a中的料堆不超过3厘米的表层内，将余量栽培种均匀接种于料堆表面，用板拍平形成培养料，接种过程中空气湿度不低于85％；
c、发菌：发菌温度为28℃，湿度为85％-75％；接种十天后松动培养料；
d、覆土调水、出菇：接种后经16-20天，菌丝长满培养基，在培养料表面覆土，在培养料表面所覆盖的土选用轻质粘土、草炭土、河泥土中的任一种，覆土的厚度为3.5-4厘米，培养料表面先覆颗粒度1.5-2厘米的粗土，然后在粗土的表面覆盖颗粒度为0.5-1厘米的细土，加水调整至覆土层的含水量为20％，培养料的含水量为68％-70％，经8-15天的培养后出菇。
D步骤中的b工序中接种时床架表面的发酵培养基的厚度为18-22厘米。
D步骤中的c工序中发菌温度为27℃-32℃。
Claims (9)
1、香型蘑菇菌种，其特征在于是蘑菇(Agaricus sp.)CGMCCNo.2507。
2、一种利用权利要求1所述的菌种生产香型蘑菇的方法，其特征在于将CGMCCNo.2507制成栽培种接种于含有碳源、有机氮源、无机氮源、无机盐和水的培养基中进行发酵，发酵过程是在温度为25-40℃、发酵周期为23-35天的条件下进行的需氧发酵。
3、根据权利要求2所述的生产香型蘑菇的方法，其特征在于所述的发酵过程包括如下的工艺步骤：
A、将母种制成原种；
B、将A步骤中制备的原种经扩大培养制成栽培种；
C、制备发酵培养基并置于室内床架表面，发酵培养基包括下列单位重量份的组分：
碳源2000-2500 有机氮源1800-2175 无机氮源30-50
轻质碳酸钙50-75 过磷酸钙或磷酸二氢钾5-17 草木灰或氯化钾5-10
石膏50-75 熟石灰75-92
D、将栽培种介入发酵培养基进行发酵，C步骤中的接种量为：每平方米的发酵培养基接入750毫升的B步骤中制备的栽培种。
所述的碳源选用农作物秸秆，包括棉杆、稻草杆、麦秸、玉米秸秆、大豆秸秆中的一种或其混合物，无机氮源选用尿素和硫酸铵、硝酸铵、碳酸氢铵中的一种或其混合物，其中尿素占无机氮源总质量的50％；有机氮包括如下单位重量份的组分：
畜禽粪便1750-2100 饼肥50-75
其中畜禽粪便选用牛粪、驴粪、羊粪、鸡粪、鸭粪、猪粪中的一种或其混合物，饼肥选用豆饼、花生饼、棉籽饼、菜籽饼中的一种或其混合物。
4、根据权利要求3所述的生产香型蘑菇的方法，其特征在于所述的步骤A中母种的制备采用PDA培养基培养，培养周期为14-20天，温度为27-32℃。
5、根据权利要求3所述的生产香型蘑菇的方法，其特征在于所述的B步骤中的扩大培养包括将母种制成原种的一级扩大培养，以及将原种制备成栽培种的二级扩大培养，其中一级扩大培养是将母种接种于一级扩大培养的培养基中进行培养制成原种，二级扩大培养是将原种接种于二级扩大培养的培养基中进行培养制成栽培种，一、二级扩大培养的培养基包括下列单位重量份的组分：
麦粒100 稻草粉3
将麦粒采用蒸、煮或浸泡至其含水量为55％-60％后，与稻草粉混合均匀并置于容器中，在1.52×105Pa的压力条件下高压灭菌两小时，然后冷却至不低于30℃-35℃接种；稻草粉是选自稻草或麦秸粉碎成长度不超过1.5厘米的粉状物，一、二级扩大培养中的接种量为1％-5％，培养温度为25℃-29℃，培养周期为30-40天。
6、根据权利要求3所述的生产香型蘑菇的方法，其特征在于所述的C步骤中的发酵培养基的制备包括如下工艺步骤：
(1)物料的预湿：
畜禽粪便的预湿：将畜禽粪便加入其自重2％的熟石灰混合均匀，在对其浇水搅拌的同时，将其建成条形堆，含水量为手紧握时有水渗出、但不下滴，堆温为50℃-55℃，保持3-4天；
秸秆的预湿：将秸秆加入余量的熟石灰混合均匀，在对其浇水搅拌的同时，将其建堆，含水量为手紧握时有水渗出、但不下滴，堆温60-65℃，保持3-4天；
饼肥的预湿：将饼肥浇水搅拌，含水量为手紧握时有水渗出、但不下滴。
(2)建堆发酵：
a、建堆：将步骤(1)中预湿后的物料建条形料堆，并将饼肥、无机氮中的尿素、30％-50％的石膏均匀埋设于料堆中间，在料堆上加水至水渗出料堆外；
b、第一次翻堆：建堆后4-6天，当堆温开始下降时，进行翻堆并在料堆上加水至水渗出料堆外，同时将30％-50％的石膏、50％的轻质碳酸钙、除尿素外的无机氮源依次均匀撒入料堆内；
c、第二次翻堆：将余量的石膏、50％的轻质碳酸钙、50％的过磷酸钙依次均匀撒入料堆内；
d、第三次翻堆：将草木灰或氯化钾、余量的过磷酸钙依次均匀撒入料堆内；
(3)后发酵：
将第三次翻堆后的物料转入室内培养床架进行后发酵，物料的厚度为30-40厘米，对物料通蒸汽升温，温度60℃-62℃、时间为6-10小时，然后通风使物料降温至50℃-55℃，保持4-5天，当料温降低至50℃以下时，对物料进行自然通风使其温度降低至不超过35℃，制成发酵培养基。
7、根据权利要求3或5所述的生产香型蘑菇的方法，其特征在于所述的D步骤中的发酵包括如下工艺步骤：
a、调水：将pH＝8的水喷入步骤C中制备好的发酵培养基并进行翻拌，使其混合均匀，料堆含水量为手紧握时有水渗出、但不下滴；
b、接种：待培养基温度降至30℃，先将2/3的栽培种均匀接种在步骤a中的料堆不超过3厘米的表层内，将余量栽培种均匀接种于料堆表面，用板拍平形成培养料，接种过程中空气湿度不低于85％；
c、发菌：发菌温度为25℃-40℃，湿度为85％-75％；接种十天后松动培养料；
d、覆土调水、出菇：接种后经15-20天，菌丝长满培养基，在培养料表面覆土，在培养料表面所覆盖的土选用轻质粘土、草炭土、河泥土中的任一种，覆土的厚度为3.5-4厘米，培养料表面先覆颗粒度1.5-2厘米的粗土，然后在粗土的表面覆盖颗粒度为0.5-1厘米的细土，加水调整至覆土层的含水量为18％-22％，培养料的含水量为55％-70％，经8-15天的培养后出菇。
8、根据权利要求7所述的生产香型蘑菇的方法，其特征在于所述的D步骤中的b工序中接种时床架表面的发酵培养基的厚度为18-22厘米。
9、根据权利要求7所述的生产香型蘑菇的方法，其特征在于所述的D步骤中的c工序中发菌温度为27℃-32℃。
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