CN101248054A - 噻唑衍生物及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及式(I)所示噻唑衍生物，特别是用于治疗和/或预防自身免疫疾病和/或炎症、心血管疾病、神经变性疾病、细菌或病毒感染、肾脏疾病、血小板聚集、癌症、移植、移植物排斥反应或肺损伤的噻唑衍生物。

Description

噻唑衍生物及其应用
发明领域
本发明涉及应用式(I)所示噻唑衍生物治疗和/或预防自身免疫疾病和/或炎症、心血管疾病、神经变性疾病、细菌或病毒感染、变态反应、哮喘、胰腺炎、多器官功能衰竭、肾脏疾病、血小板聚集、癌症、移植、精子运动、红细胞缺乏症、移植物排斥反应或肺损伤。尤其是，本发明涉及应用噻唑衍生物调节，特别是抑制磷酸肌醇-3-激酶(PI3Ks)的活性或功能。
背景技术
磷酸肌醇3-激酶(PI3K)在细胞增殖、细胞存活、血管形成、膜运输、葡萄糖转运、神经轴突生长、膜皱缩、过氧化物产生、肌动蛋白改组(reorganization)和趋化中具有重要的信号转导作用(凯特雷(Cantley)，2000，科学(Science)，296，1655-1657和范义斯布罗克(Vanhaesebroeck)等，2001，生物化学回顾年报(Annu.Rev.Biochem.)，70，535-602)。
术语PI3K指哺乳动物的一个由8个已鉴定的PI3Ks组成的脂激酶家族，根据它们的结构和底物特异性可分为三个亚家族。
第I类PI3K包括两个亚类：IA类和IB类。
IA类由85KDa(千道尔顿)的调节单元(通过Src同源结构域2(SH2)与其他蛋白的磷酸酪氨酸残基相互作用而对蛋白-蛋白之间相互作用负责)和一个110kDa的催化亚单位组成。此类存在三种催化形式(p100α、p110β、p110δ)和五种调节同工型(p85α、p85β、p55γ、p55α和p50α)。
IB类由G蛋白异二聚体的βγ亚基激活。IB类唯一的特征性成员是PI3Kγ(由p110γ催化亚基与101-KDa的调节蛋白p101复合组成)。
II类PI3K包括α、β和γ同工型，约170KDa，以C末端存在C2结构域为特征。
III类PI3K包括磷酸肌醇(磷脂酰肌醇)特异性激酶-3。
进化上保守的同工型P110α和β表达广泛，而δ和γ较特异性表达于造血细胞系统、平滑肌细胞、肌细胞和内皮细胞内(范义斯布罗克(Vanhaesebroeck)等，1997，生化科学趋势(Trends Boichem sci.)，22(7)，267-72)。它们的表达以可诱导方式受到调节，取决于细胞类型、组织类型、刺激因素和疾病状态。
PI3K是参与磷脂信号转导(signalling)的酶，在对各种胞外信号，例如生长因子、有丝分裂原、整合素(细胞之间相互反应)、激素、细胞因子、病毒和神经递质的应答中被激活；也受到其他信号转导分子，例如小GTP酶、激酶或者磷酸酯酶的细胞内交叉调节(即交叉对话，此种初始信号可激活几个平行通路，在第二步中通过细胞内信号转导将信号传递给PI3Ks)。
磷酸肌醇(PtdIns)是组成真核细胞内肌醇脂的基础结构块，含有通过磷酸基团与甘油二酯相连的D-肌原-肌醇-1-磷酸酯(Ins1P)。PtdIns的头部肌醇有五个自由羟基，发现其中三个以不同组合在细胞内被磷酸化。PtdIns及其磷酸化产物统称为肌醇磷脂或磷酸肌醇(PI)。已证明真核细胞中存在八种PI(范义斯布罗克(Vanhaesebroeck)等，2001，同上)。所有PI都存在于细胞膜上，是激酶、磷酸酯酶和脂酶的底物。
在体外，PI3K可使三种不同底物磷酸肌醇(PtdIns)、磷酸肌醇-4-磷酸酯(PI(4)P)和磷酸肌醇-4，5-二磷酸酯(PI(4，5)P2)中肌醇环的3羟基磷酸化，分别产生三种脂产物，即磷酸肌醇-3-单磷酸酯  (PI(3)P)、磷脂酰-3，4-二磷酸酯(PI(3，4)P2)和磷脂酰-3，4，5-三磷酸酯(PI(3，4，5)P3)(见下面的流程A)。
Figure S2006800267463D00031
流程A
I类PI3K酶的优选底物是PI(4，5)P2。II类PIK对底物PtdIns的偏爱强于底物PI(4)P和PI(4，5)P2。III类PI3K在体内只能利用PtdIns作为底物，可能负责产生细胞内大多数的PI(3)P(范义斯布罗克(Vanhaesebroeck)等，2001，同上)。
磷酸肌醇细胞内信号转导通路开始于信号转导分子(细胞外配体、刺激因子、受体二聚化、异源受体(如酪氨酸激酶受体)引起的转录激活)与整合在细质膜中的G蛋白偶联跨膜受体结合，而导致激活PI3Ks。
PI3K一旦被激活，能将膜磷脂PI(4，5)P2转变成PI(3，4，5)P3，进而可通过5’-磷酸肌醇特异性磷酸酶进一步转变成磷酸肌醇的另一种磷酸化形式，因此PI3K的酶活性可直接或间接导致产生两种亚型的3’-磷酸肌醇，它们起胞内信号转导第二信使的作用(托克(Toker)等，2002，Cell Mol Life Sci(细胞分子生命科学)59(5)761-79)。
PtdIns的磷酸化产物作为第二信使参与了各种信号转导通路，包括那些对细胞增殖、细胞分化、细胞生长、细胞大小、细胞存活、细胞凋亡、细胞粘附、细胞运动、细胞迁移、趋化、入侵、细胞骨架重构、细胞变形、囊泡运输和代谢途径所必须的通路，在其中发挥作用(斯泰因(Stein)，2000，当代医学(Mol.Med.Today)  6(9)347-57)。趋化现象指细胞沿着化学诱导剂浓度梯度方向移动。化学诱导剂也称为趋化因子，参与了许多重要的疾病，如炎症/自身免疫疾病、神经退变、新血管生成、入侵/转移和伤口愈合(怀曼(Wyman)等，2000，当今免疫学(Immunol Today)21(6)260-4；荷迄(Hirsch)等，2000，科学(Science)287(5455)1049-53；荷迄(Hirsch)等，2001，FASEBJ.15(11)2019-21及吉拉德(Gerard)等，2001，自然免疫学(Nat immunol.)2(2)108-15)。
因此，认为PI3激酶的活化参与了许多细胞应答反应，包括细胞生长、分化和凋亡(帕克(Parker)等，1995，当今生物学(Current Biology)，5，557-99)。
近年来的生物化学研究表明，I类PI3Ks(如IB类PI3Kγ同工型)是双特异性激酶，即它们显示具有脂激酶活性(磷酸肌醇的磷酸化)及蛋白激酶活性，因为它们能诱导其他蛋白磷酸化作为底物，包括作为细胞内调节机制的自身磷酸化。
PI3Ks似乎参与了白细胞活化的许多方面。已证明p85相关的PI3激酶活性在生理上与抗原应答反应中T细胞活化至关重要的协同刺激因子CD28的胞质结构域相关。这些作用与提高包括白介素-2(一种重要的T细胞生长因子)在内的许多基因的转录增强相关(弗瑞瑟(Fraser)等，1991，科学(Science)，251，313-16)。CD28突变后不再与PI-3激酶相互作用，将导致不能诱导IL-2产生，提示PI-3激酶在T细胞活化中具有重要作用。
在细胞活动中PI3K起着重要作用，包括抑制细胞凋亡、肌动蛋白骨架重组织、心肌细胞生长、胰岛素对糖原合酶的激活、肿瘤坏死因子α介导的嗜中性粒细胞引发、过氧化物的产生、以及白细胞迁移和粘于附内皮细胞。
已将PI3Kγ鉴定为JNK活性的G蛋白β-γ(亚基)依赖性调控的介质，其中的G-蛋白β-γ(亚基)是G蛋白异质三聚体的亚基。
近年来，报导了PI3Kγ可通过各种G(i)偶联受体转达炎症信号(朗法格(Laffargue)等，2002，免疫学16(3)441-51)和例如在肥大细胞功能、激活白细胞、免疫应答包括细胞因子、趋化因子、腺苷、抗体，整联蛋白(integrins)、凝聚因子、生长因子，病毒或激素中起着关键作用(劳罗(Lawlor)等，2001，细胞科学杂志(J.Cell.Sci)，114(Pr16)2903-1)。
酶家族各成员的特异性抑制剂为解读各酶的功能提供了有价值的工具。
两种化合物，LY294002和沃特曼宁(wortmannin)(参看下文)已经广泛用作PI3-激酶抑制剂。这两种化合物是PI3K的非特异性抑制剂，因为它们不能区分I类PI3激酶的四个成员。
Figure S2006800267463D00051
沃特曼宁对任何一种I类PI3-激酶的半数抑制浓度(IC50)为1-10nM；LY294002对任何一种I类PI3-激酶的IC50约为15-20μM(弗鲁曼(Fruman)等，1998，生物化学回顾年报(Ann.Rev.Biochem)，67，481-507)，对CK2蛋白激酶的IC50为5-10mM，对磷酸酯酶也有一定的抑制活性。.
沃特曼宁是一种真菌代谢产物，它通过共价结合PI3K酶的催化功能域而不可逆抑制该酶的活性。沃特曼宁对PI3K活性的抑制消除了随后对细胞外因子的细胞应答反应(塞棱(Thelen)等，1994，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，91，4960-64)。用沃特曼宁做的实验表明，PI3K在造血谱系细胞、尤其是中性粒细胞、单核细胞和其他类型白细胞中具有活性，并参与许多与急慢性炎症相关的非记忆性免疫应答反应。
根据对沃特曼宁的研究，证明PI3-激酶的功能也为通过G-蛋白偶联受体的白细胞信号转导某些方面所必须(塞棱(Thelen)等，1994)。此外，已证明沃特曼宁和LY294002能阻断嗜中性粒细胞迁移和过氧化物释放。然而，几乎所有这些化合物都不能区分PI3K的各种同工型，参与这些反应的PI3K的具体同工型仍然不清楚。
一些结果显示，PI3K抑制剂(如LY294002)可提高体内某些细胞毒药物(如紫彬醇)的抗肿瘤活性(格朗(Grant)，2003，当今药物(Current Drugs)，6(10)，946-948)。
近年来，已开发了噻唑衍生物作为PI3K抑制剂(WO2005/021519；WO04/078754和WO04/096797)。
WO2005/021519公开了以下结构式的噻唑衍生物：
Figure S2006800267463D00061
WO04/078754公开了如下结构式的噻唑衍生物：
Figure S2006800267463D00062
WO04096797公开了如下结构式的噻唑衍生物：
Figure S2006800267463D00071
PI3K通路与某些广泛传播的疾病高度相关，使开发PIKs酶抑制剂(包括选择性抑制剂)的需要更为迫切。
发明概述
本发明的一个具体实施方式提供适合用于治疗和/或预防与磷酸肌醇-3-激酶(PI3Ks)有关的疾病的物质。
本发明的另一个具体实施方式提供适合用于治疗和/或预防自身免疫性和/或炎症性疾病的物质。
本发明的另一个具体实施方式提供适合用于治疗和/或预防心血管疾病的物质。
本发明的另一个具体实施方式提供适合用于治疗和/或预防神经退行性疾病的物质。
本发明的另一个具体实施方式提供适合用于治疗和/或预防选自以下的疾病的物质，所述疾病是细菌和病毒感染、变态反应、哮喘、胰腺炎、多器官衰竭、肾脏疾病、血小板聚集、癌症、移植、精子运动(sperm mortility)、红细胞缺乏症、移植物排斥、肺损伤、呼吸系统疾病和局部缺血症状。
本发明的另一个具体实施方式提供能够调节、特别是抑制哺乳动物(尤其是人类)疾病状态中磷酸肌醇-3-激酶(PI3Ks)活性或功能的化合物。
本发明的另一个具体实施方式提供适合用于治疗和/或预防选自以下的疾病的新的一类药物制剂，所述疾病是自身免疫、炎症性疾病、心血管疾病、神经退行性疾病、细菌和病毒感染、变态反应、哮喘、胰腺炎、多器官衰竭、肾脏疾病、血小板聚集、癌症、移植、精子运动、红细胞缺乏症、移植排斥反应、肺损伤、呼吸系统疾病和局部缺血症状。
本发明的另一个具体实施方式提供用于治疗和/或预防选自以下的疾病的方法，所述疾病是自身免疫、炎症性疾病、心血管疾病、神经退行性疾病、细菌和病毒感染、变态反应、哮喘、胰腺炎、多器官衰竭、肾脏疾病、血小板聚集、癌症、移植、精子运动、红细胞缺乏症、移植排斥反应、肺损伤、呼吸系统疾病和局部缺血症状。
一个具体实施方式中，本发明提供式(I)所示噻唑衍生物：
Figure S2006800267463D00081
其中R1、R2、R3、R4和X在下面的详述中定义。
另一个具体实施方式中，本发明提供用作药物的式(I)所示化合物。
另一个具体实施方式中，本发明提供式(I)所示化合物在制备用于治疗选自以下的疾病的药物组合物中的应用，所述疾病是自身免疫、炎症性疾病、心血管疾病、神经退行性疾病、细菌和病毒感染、肾脏疾病、血小板聚集、癌症、移植、移植排斥反应或肺损伤、呼吸系统疾病和局部缺血症状，以及其它与磷酸肌醇-3-激酶(PI3Ks，包括PI3Kα和γ)有关的疾病。
另一个具体实施方式中，本发明提供包含至少一种式(I)所示化合物及其药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物。
另一个具体实施方式中，本发明提供治疗罹患选自以下疾病的患者的方法，所述疾病是自身免疫、炎症性疾病、心血管疾病、神经退行性疾病、细菌和病毒感染、变态反应、哮喘、胰腺炎、多器官衰竭、肾脏疾病、血小板聚集、癌症、移植、精子运动、红细胞缺乏症、移植排斥反应、肺损伤、呼吸系统疾病和局部缺血症状，以及其它与磷酸肌醇-3-激酶(PI3Ks)有关的疾病。所述方法包括给予式(I)所示化合物。
另一个具体实施方式中，本发明提供式(I)所示化合物的合成方法。
另一个具体实施方式中，本发明提供式(Ia)所示化合物。
另一个具体实施方式中，本发明提供式(P3)所示化合物。
发明详述
以下段落提供了构成本发明化合物各种化学基团的定义，其目的是在说明书和权利要求中统一应用，除非另行表述的定义给出了范围更广的限定。
“C1-C6-烷基”指具有1-6个碳原子的单价烷基基团。该术语可用甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、正己基等来举例说明。以此类推，“C1-C12-烷基”指具有1-12个碳原子的单价烷基基团，包括“C1-C6-烷基”和庚基、辛基、壬基、癸基(decanoyl)、十一烷基(undecanoyl)和十二烷基(dodecanoyl)。以及“C1-C10-烷基”指具有1-10个碳原子的单价烷基基团，“C1-C8-烷基”指具有1-8个碳原子的单价烷基基团，“C1-C5-烷基”指具有1-5个碳原子的单价烷基基团。
“杂烷基”指C1-C12-烷基，优选C1-C6-烷基，其中至少一个碳被选自O、N或S的杂原子代替，包括2-甲氧基乙基。
“芳基”指具有单环(如苯基)或多稠环(如萘基)的6-14个碳原子的不饱和芳香族碳环基团。芳基包括苯基、萘基、菲基等。
“C1-C6-烷基芳基”指具有C1-C6-烷基取代基的芳基基团，包括甲基苯基、乙基苯基等。
“芳基C1-C6-烷基”指具有芳基取代基的C1-C6-烷基基团，包括3-苯基丙酰基、苄基等。
“杂芳基”指单环杂芳族或双环或三环稠环杂芳族基团。杂芳基的具体例子包括任选地取代的吡啶基、吡咯基、嘧啶基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、吡唑基、1，2，3-三唑基、1，2，4-三唑基、1，2，3-噁二唑基、1，2，4-噁二唑基、1，2，5-噁二唑基、1，3，4-噁二唑基、1，3，4-三嗪基、1，2，3-三嗪基、苯并呋喃基、[2，3-二氢]苯并呋喃基、异苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并三唑基、异苯并噻吩基、吲哚基、异吲哚基、3H-吲哚基、苯并咪唑基、咪唑并[1，2-a]吡啶基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹嗪基、喹唑啉基、2，3-二氮杂萘基、喹喔啉基、噌啉基、1，5-二氮杂萘基、吡啶并[3，4-b]吡啶基、吡啶并[3，2-b]吡啶基、吡啶并[4，3-b]吡啶基、喹啉基、异喹啉基、四唑基、5，6，7，8-四氢喹啉基、5，6，7，8-四氢异喹啉基、嘌呤基、喋啶基、咔唑基、呫吨基或苯并喹啉基。
“C1-C6-烷基杂芳基”指具有C1-C6-烷基取代基的杂芳基基团，包括甲基呋喃基等。
“杂芳基C1-C6-烷基”指具有杂芳基取代基的C1-C6-烷基基团，包括呋喃基甲基等。
“C2-C6-烯基”指优选具有2-6个碳原子并具有至少1或2个以上烯基不饱和键的烯基基团。优选的烯基包括乙烯基(-CH＝CH2)、正-2-丙烯基(烯丙基，-CH2CH＝CH2)等。
“C2-C6-烯基芳基”指具有C2-C6-烯基取代基的芳基基团，包括乙烯基苯基等。
“芳基C2-C6-烯基”指具有芳基取代基的C2-C6-烯基基团，包括苯基乙烯基等。
“C2-C6-烯基杂芳基”指具有C2-C6-烯基取代基的杂芳基基团，包括乙烯基吡啶基等。
“杂芳基C2-C6-烯基”指具有杂芳基取代基的C2-C6-烯基基团，包括吡啶基乙烯基等。
“C2-C6-炔基”指优选具有2-6个碳原子并具有至少1-2个炔基不饱和键的炔基基团。优选的炔基基团包括乙炔基(-CH≡CH)、丙炔基(-CH2C≡CH)等。
“C3-C8-环烷基”指具有单环(如环己基)或多稠环(如降冰片基)的3-8个碳原子的饱和碳环基团。C3-C8-环烷基包括环戊基、环己基、降冰片基等。
“杂环烷基”指上述定义的C3-C8-环烷基，其中最多3个碳原子被选自O、S、NR的杂原子替代，R定义为氢或甲基。杂环烷基包括吡咯烷、哌啶、哌嗪、吗啉、四氢呋喃等。
“C1-C6-烷基环烷基”指具有C1-C6-烷基取代基的C3-C8-环烷基基团，包括甲基环戊基等。
“环烷基C1-C6-烷基”指具有C3-C8-环烷基取代基的C1-C6-烷基基团，包括3-环戊基丙基等。
“C1-C6-烷基杂环烷基”指具有C1-C6-烷基取代基的杂环烷基基团，包括1-甲基哌嗪等。
“杂环烷基C1-C6-烷基”指具有杂环烷基取代基的C1-C6-烷基基团，包括4-甲基哌啶基等。
“羧基”指基团-C(O)OH。
“羧基C1-C6-烷基”指具有羧基取代基的C1-C6-烷基基团，包括2-羧基乙基等。
“酰基”，指基团-C(O)R，其中R包括“C1-C12-烷基”，优选“C1-C6-烷基”、“芳基”、“杂芳基”、“C3-C8-环烷基”、“杂环烷基”、“芳基C1-C6-烷基”、“杂芳基C1-C6-烷基”、“C3-C8-环烷基C1-C6-烷基”或“杂环烷基C1-C6-烷基”。
“酰基C1-C6-烷基”指具有酰基取代基的C1-C6-烷基基团，包括乙酰基、2-乙酰基乙基等。
“酰基芳基”指具有酰基取代基的芳基基团，包括2-乙酰基苯基等。
“酰氧基”指基团-OC(O)R，其中R包括H、“C1-C6-烷基”、“C2-C6-烯基”、“C2-C6-炔基”、“C3-C8-环烷基”、“杂环烷基”、“芳基”、“杂芳基”、“芳基C1-C6-烷基”或“杂芳基C1-C6-烷基”、“芳基C2-C6-烯基”、“杂芳基C2-C6-烯基”、“芳基C2-C6-炔基”、“杂芳基C2-C6-炔基”、“环烷基C1-C6-烷基”、“杂环烷基C1-C6-烷基”。
“酰氧基C1-C6-烷基”指具有酰氧基取代基的C1-C6-烷基基团，包括丙酸乙酯等。
“烷氧基”指基团-O-R，其中R包括“C1-C6-烷基”或“芳基”或“杂芳基”或“芳基C1-C6-烷基”或“杂芳基C1-C6-烷基”。优选的烷氧基包括例如甲氧基、乙氧基、苯氧基等。
“烷氧基C1-C6-烷基”指具有C1-C6-烷基取代基的烷氧基基团，包括甲氧基、甲氧基乙基等。
“烷氧基羰基”指基团-C(O)OR，其中R包括H、“C1-C6-烷基”或“芳基”或“杂芳基”或“芳基C1-C6-烷基”或“杂芳基C1-C6-烷基”或“杂烷基”。
“烷氧基羰基C1-C6-烷基”指具有烷氧基羰基取代基的C1-C5-烷基基团，包括2-(苄氧基羰基)乙基等。
“氨基羰基”指基团-C(O)NRR’，其中R、R’独立地包括氢或C1-C6-烷基或芳基或杂芳基或“芳基C1-C6-烷基”或“杂芳基C1-C6-烷基”，包括N-苯基甲酰胺。
“氨基羰基C1-C6-烷基”指具有氨基羰基取代基的C1-C6-烷基基团，包括2-(二甲基氨基羰基)乙基、N-乙基乙酰胺、N，N-二乙基-乙酰胺等。
“酰基氨基”指基团-NRC(O)R’，其中各个R、R’独立地是氢、“C1-C6-烷基”、“C2-C6-烯基”、“C2-C6-炔基”、“C3-C8-环烷基”、“杂环烷基”、“芳基”、“杂芳基”、“芳基C1-C6-烷基”或“杂芳基C1-C6-烷基”、“芳基C2-C6-烯基”、“杂芳基C2-C6-烯基”、“芳基C2-C6-炔基”、“杂芳基C2-C6-炔基”、“环烷基C1-C6-烷基”、“杂环烷基C1-C6-烷基”。
“酰基氨基C1-C6-烷基”指具有酰基氨基取代基的C1-C6-烷基基团，包括2-(丙酰基氨基)乙基等。
“脲基”指基团-NRC(O)NR’R”，其中各个R、R’、R”独立地是氢、“C1-C6-烷基”、“C2-C6-烯基”、“C2-C6-炔基”、“C3-C8-环烷基”、“杂环烷基”、“芳基”、“杂芳基”、“芳基C1-C6-烷基”或“杂芳基C1-C6-烷基”、“芳基C2-C6-烯基”、“杂芳基C2-C6-烯基”、“芳基C2-C6-炔基”、“杂芳基C2-C6-炔基”、“环烷基C1-C6-烷基”、“杂环烷基C1-C6-烷基”，以及其中R’和R”与它们连接的氮原子一起可任选地形成3-8元杂环烷基环。
“脲基C1-C6-烷基”指具有脲基取代基的C1-C6-烷基基团，包括2-(N’-甲基脲基)乙基等。
“氨基甲酸酯”指基团-NRC(O)OR’，其中各个R、R’独立地是氢、“C1-C6-烷基”、“C2-C6-烯基”、“C2-C6-炔基”、“C3-C8-环烷基”、“杂环烷基”、“芳基”、“杂芳基”、“C1-C6-烷基芳基”或“杂芳基C1-C6-烷基”、“芳基C2-C6-烯基”、“杂芳基C2-C6-烯基”、“芳基C2-C6-炔基”、“杂芳基C2-C6-炔基”、“环烷基C1-C6-烷基”、“杂环烷基C1-C6-烷基”。
“氨基”指基团-NRR’，其中各个R、R’独立地是氢或“C1-C6-烷基”或“芳基”或“杂芳基”或“C1-C6-烷基芳基”或“C1-C6-烷基杂芳基”或“环烷基”或“杂环烷基”，以及其中R和R’与它们连接的氮原子一起可任选地形成3-8元杂环烷基环。
“氨基C1-C6-烷基”指具有氨基取代基的C1-C5-烷基基团，包括2-(1-吡咯烷基)乙基等。
“铵”指正电荷基团-N+RR’R”，其中各个R、R’、R”独立地是“C1-C6-烷基”或“C1-C6-烷基芳基”或“C1-C6-烷基杂芳基”或“环烷基”或“杂环烷基”，以及其中R和R’与它们连接的氮原子一起可任选地形成3-8元杂环烷基环。
“铵C1-C6-烷基”指具有铵取代基的C1-C6-烷基基团，包括1-乙基吡咯烷鎓等。
“卤素”指氟、氯、溴和碘原子。
“磺酰氧基”指基团-OSO2-R，其中R选自H、“C1-C6-烷基”、被卤素取代的“C1-C6-烷基”，如-OSO2-CF3基团、“C2-C6-烯基”、“C2-C6-炔基”、“C3-C8-环烷基”、“杂环烷基”、“芳基”、“杂芳基”、“芳基C1-C6-烷基”或“杂芳基C1-C6-烷基”、“芳基C2-C6-烯基”、“杂芳基C2-C6-烯基”、“芳基C2-C6-炔基”、“杂芳基C2-C6-炔基”、“环烷基C1-C6-烷基”、“杂环烷基C1-C6-烷基”。
“磺酰氧基C1-C6-烷基”指具有磺酰氧基取代基的C1-C6-烷基基团，包括2-(甲基磺酰氧基)乙基等。
“磺酰基”指基团“-SO2-R”，其中R选自H、“芳基”、“杂芳基”、“C1-C6-烷基”、被卤素取代的“C1-C6-烷基”，如-SO2-CF3基团、“C2-C6-烯基”、“C2-C6-炔基”、“C3-C8-环烷基”、“杂环烷基”、“芳基”、“杂芳基”、“芳基C1-C6-烷基”或“杂芳基C1-C6-烷基”、“芳基C2-C6-烯基”、“杂芳基C2-C6-烯基”、“芳基C2-C6-炔基”、“杂芳基C2-C6-炔基”、“环烷基C1-C6-烷基”、“杂环烷基C1-C6-烷基”。
“磺酰基C1-C6-烷基”指具有磺酰基取代基的C1-C5-烷基基团，包括2-(甲基磺酰基)乙基等。
“亚磺酰基”指基团“-S(O)R”，其中R选自H、“C1-C6-烷基”、被卤素取代的“C1-C6-烷基”，如-SO-CF3基团、“C2-C6-烯基”、“C2-C6-炔基”、“C3-C8-环烷基”、“杂环烷基”、“芳基”、“杂芳基”、“芳基C1-C6-烷基”或“杂芳基C1-C6-烷基”、“芳基C2-C6-烯基”、“杂芳基C2-C6-烯基”、“芳基C2-C6-炔基”、“杂芳基C2-C6-炔基”、“环烷基C1-C6-烷基”、“杂环烷基C1-C6-烷基”。
“亚磺酰基C1-C6-烷基”指具有亚磺酰基取代基的C1-C6-烷基基团，包括2-(甲基亚磺酰基)乙基等。
“硫烷基”指基团-S-R，其中R包括H、“C1-C6-烷基”、被卤素取代的“C1-C6-烷基”，如-SO-CF3基团、“C2-C6-烯基”、“C2-C6-炔基”、“C3-C8-环烷基”、“杂环烷基”、“芳基”、“杂芳基”、“芳基C1-C6-烷基”或“杂芳基C1-C6-烷基”、“芳基C2-C6-烯基”、“杂芳基C2-C6-烯基”、“芳基C2-C6-炔基”、“炔基杂芳基C2-C6”、“环烷基C1-C6-烷基”、“杂环烷基C1-C6-烷基”。优选的硫烷基包括甲基硫烷基、乙基硫烷基等。
“硫烷基C1-C6-烷基”指具有硫烷基取代基的C1-C5-烷基基团，包括2-(乙基硫烷基)乙基等。
“磺酰基氨基”指基团-NRSO2-R’，其中各个R、R’独立包括氢、“C1-C6-烷基”、“C2-C6-烯基”、“C2-C6-炔基”、“C3-C8-环烷基”、“杂环烷基”、“芳基”、“杂芳基”、“芳基C1-C6-烷基”或“杂芳基C1-C6-烷基”、“芳基C2-C6-烯基”、“杂芳基C2-C6-烯基”、“芳基C2-C6-炔基”、“杂芳基C2-C6-炔基”、“环烷基C1-C6-烷基”、“杂环烷基C1-C6-烷基”。
“磺酰基氨基C1-C6-烷基”指具有磺酰基氨基取代基的C1-C6-烷基基团，包括2-(乙基磺酰基氨基)乙基等。
“氨基磺酰基”指基团-SO2-NRR’，其中各个R、R’独立包括氢、“C1-C6-烷基”、“C2-C6-烯基”、“C2-C6-炔基”、“C3-C8-环烷基”、“杂环烷基”、“芳基”、“杂芳基”、“芳基C1-C6-烷基”或“杂芳基C1-C6-烷基”、“芳基C2-C6-烯基”、“杂芳基C2-C6-烯基”、“芳基C2-C6-炔基”、“杂芳基C2-C6-炔基”、“环烷基C1-C6-烷基”、“杂环烷基C1-C6-烷基”。
“氨基磺酰基C1-C6-烷基”指具有氨基磺酰基取代基的C1-C6-烷基基团，包括2-(环己基氨基磺酰基)乙基等。
“取代的或未取代的”：除非用各个取代基的定义另行限定，上面所述的基团，如“烯基”、“炔基”、“芳基”、“杂芳基”、“环烷基”、“杂环烷基”等基团可任选地被1-5个选自以下基团的取代基取代：“C1-C6-烷基”、“C2-C6-烯基”、“C2-C6-炔基”、“环烷基”、“杂环烷基”、“C1-C6-烷基芳基”、“C1-C6-烷基杂芳基”、“C1-C6-烷基环烷基”、“C1-C6-烷基杂环烷基”、“氨基”、“铵”、“酰基”、“酰氧基”、“酰基氨基”、“氨基羰基”、“烷氧基羰基”、“脲基”、“芳基”、“氨基甲酸酯”、“杂芳基”、“亚磺酰基”、“磺酰基”、“烷氧基”、“硫烷基”、“卤素”、“羧基”、三卤甲基、氰基、羟基、巯基、硝基等。
“取代”指基团被1-5个选自以下基团的取代基取代：“C1-C6-烷基”、“C2-C6-烯基”、“C2-C6-炔基”、“环烷基”、“杂环烷基”、“C1-C6-烷基芳基”、“C1-C6-烷基杂芳基”、“C1-C6-烷基环烷基”、“C1-C6-烷基杂环烷基”、“氨基”、“氨基磺酰基”、“铵”、“酰基氨基”、“氨基羰基”、“芳基”、“杂芳基”、“亚磺酰基”、“磺酰基”、“烷氧基”、“烷氧基羰基”、“氨基甲酸酯”、“硫烷基”、“卤素”、三卤甲基、氰基、羟基、巯基、硝基等。
“药学上可接受的盐或复合物”指如下定义的式(I)化合物的盐或复合物，它们保留了所需的生物学活性。这些盐的例子包括但不限于与无机酸(如盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、硝酸等)形成的酸加成盐；与有机酸(如乙酸、草酸、酒石酸、琥珀酸、苹果酸、富马酸、马来酸、抗坏血酸、苯甲酸、单宁酸、4，4’-亚甲基双(3-羟基-2-萘甲酸)、海藻酸、聚谷氨酸、萘磺酸、萘二磺酸和聚半乳糖醛酸)形成的酸加成盐。所述的化合物也可以本领域人员己知的药学上可接受的季盐给药，特别包括式-NR，R’，R”+Z-所示季铵盐，其中R、R’、R”独立地是氢、烷基或苄基、C1-C6-烷基、C2-C6-烯基、C2-C6-炔基、C1-C6-烷基芳基、C1-C6-烷基杂芳基、环烷基、杂环烷基，Z是抗衡离子，包括氯离子、溴离子、碘离子、-O-烷基、甲苯磺酸盐、甲基磺酸盐、磺酸盐、磷酸盐或羧酸盐(如苯甲酸盐、琥珀酸盐、乙酸盐、乙醇酸盐、马来酸盐、苹果酸盐、富马酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、抗坏血酸盐、肉桂酸盐、扁桃酸盐和二苯基乙酸盐)。
“药学活性衍生物”指任何化合物，当它们被给予接受者时能够直接或间接地提供本说明书揭示的活性。术语“间接”也包括可通过内源性酶或代谢转化成药物活性形式的前药。
现已发现，本发明化合物是包括PI3Kα和γ在内的磷酸肌醇-3-激酶(PI3Ks)的调节剂。当磷酸肌醇-3-激酶(PI3Ks)被本发明化合物抑制时，PI3K就不能发挥其酶的、生物学的和/或药理学的活性。
因此，本发明化合物可用于自身免疫性疾病和/或炎症性疾病、心血管疾病、神经退行性疾病、细菌或病毒感染、变态反应、哮喘、胰腺炎、多器官衰竭、肾脏疾病、血小板聚集、癌症、移植、精子运动、红细胞缺乏症、移植排斥反应或肺损伤的治疗和预防。
本发明所示通式(I)化合物还包括其互变异构体、几何异构体、其光学活性形式，如对映体、非对映体和外消旋形式，以及其药学上可接受的盐。式(I)化合物优选的药学上可接受的盐是与药学上可接受的酸形成的酸加成盐，如盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐或硫酸氢盐、磷酸盐或磷酸氢盐、乙酸盐、苯甲酸盐、琥珀酸盐、富马酸盐、马来酸盐、乳酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、葡糖酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐和对甲苯磺酸盐。
式(I)所示化合物适合用于调节、尤其是抑制磷酸肌醇-3-激酶(PI3K)的活性。因此，本发明化合物被认为也尤其可用于治疗和/或预防由PI3Ks(特别是PI3Kα和/或PI3Kγ)介导的疾病。所述治疗涉及磷酸肌醇-3-激酶的调节，尤其是抑制或向下调节。
式(I)所示化合物适合用作药物。
本发明的一个具体实施方式提供了式(I)所示噻唑衍生物，其几何异构体、其光学活性形式，如对映体、非对映体和外消旋形式、以及其药学上可接受的盐：
Figure S2006800267463D00161
其中R1选自-C(O)R5；任选取代的C1-C6-烷基、包括氰基甲基、羟基甲基；任选取代的C2-C6-烯基；任选取代的C2-C6-炔基；任选取代的芳基C1-C6-烷基；任选取代的杂芳基C1-C6-烷基、包括四唑基甲基(如2H-四唑-5基-甲基)；任选取代的C3-C8环烷基C1-C6-烷基和任选取代的杂环烷基C1-C6-烷基；
R2选自H；卤素；任选取代的C1-C6-烷基；任选取代的C2-C6-烯基和任选取代的C2-C6-炔基；
R3选自H；卤素；任选取代的C1-C6-烷基、包括甲基；任选取代的C2-C6-烯基和任选取代的C2-C6-炔基；
R4选自-C(O)R6；任选取代的芳基，包括；任选取代的杂芳基，包括吡嗪基(如吡嗪-2-基)和吡唑基(如吡唑-3-基)；任选取代的杂环烷基和任选取代的C3-C8环烷基；
R5选自H；羟基；任选取代的烷氧基，包括乙氧基；任选取代的氨基，包括烯丙胺、甲氧基乙基胺(如2-甲氧基-乙基胺)、甲氧基丙基胺(如3-甲氧基-丙基胺)、羟基乙基胺(如2-羟基乙基胺)、羟基丙基胺(如2，3-二羟基丙基胺)、氰基乙基胺(如2-氰基乙基胺)、丙基胺(如正-丙基胺)、丙-2-炔基胺、四氢呋喃甲基胺(如四氢呋喃-2-基-甲基胺)、二甲基氨基乙基胺(如2-(二甲基氨基)乙基胺)、二甲基氨基丙基胺(如3-(二甲基氨基)丙基胺)、四唑基胺(如1H-四唑-5-基胺、1H-四唑-3-基胺)、氨基-苯甲酸(如4-氨基-苯甲酸、3-氨基-苯甲酸、3-氨基-2-羟基-苯甲酸、4-氨基-2-羟基-苯甲酸、4-氨基-2-氟苯甲酸、5-氨基-2-羟基-苯甲酸)、四唑基苯基胺(如3-(1H-四唑-5-基)苯基胺、3-(1H-四唑-3-基)苯基胺、4-(1H-四唑-5-基)苯基胺、4-(1H-四唑-3-基)苯基胺)、噻二唑基苯基胺(如3-(5-氨基-1，3，4-噻二唑-2-基)苯基胺)、噁二唑基苯基胺(如3-(5-羟基-1，3，4-噁二唑-2-基)苯基胺、4-(5-羟基-1，3，4-噁二唑-2-基)苯基胺)、苄基胺(如N-苄基胺)、1H-1，2，3，苯并三唑-5-基胺；
任选取代的芳基；任选取代的杂芳基；任选取代的C3-C8环烷基；
任选取代的杂环烷基，包括吗啉基(如吗啉-4-基)、哌嗪基(如4-甲基哌嗪-1-基、4-乙酰基哌嗪-1-基、3-氧哌嗪-1-基、哌啶基(如3-羧酸哌啶-1-基、4-羧酸哌啶-1-基、4-(羟基甲基)哌啶-1-基、3-羟基哌啶-1-基、4-羟基哌啶-1-基、4-(2-羟基乙基)哌啶-1-基、4-氟哌啶-1-基、4-氧哌啶-1-基)、1，4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基、7-(羟基甲基)-6，8-二氧杂-3-氮杂双环[3，2，1]辛-3-基、吡咯烷基(如3-羟基吡咯烷-1-基)；
R6选自H；任选取代的C1-C6-烷基，包括甲基；任选取代的C2-C6-烯基；任选取代的C2-C6-炔基；任选取代的芳基C1-C6-烷基；任选取代的杂芳基C1-C6-烷基和任选取代的氨基，包括任选取代的C1-C6烷基胺，如甲氧基乙基胺(如2-甲氧基-乙基胺)、2-氨基-N，N-二甲基-乙酰胺、3-氨基-丙酸和3-氨基-丙酸烷基酯(如3-氨基-丙酸乙酯、3-氨基-丙酸叔丁酯)；
X选自S和O。
本发明的另一个具体实施方式提供了式(I)所示噻唑衍生物，其中R1是-C(O)R5
本发明的另一个具体实施方式提供了式(I)所示噻唑衍生物，其中R1选自任选取代的C1-C6-烷基；任选取代的C2-C6-烯基；任选取代的C2-C6-炔基；任选取代的芳基C1-C6-烷基；任选取代的杂芳基C1-C6-烷基；任选取代的C3-C8环烷基C1-C6-烷基和任选取代的杂环烷基C1-C6-烷基；
本发明的另一个具体实施方式提供了式(I)所示噻唑衍生物，其中R2是H。
本发明的另一个具体实施方式提供了式(I)所示噻唑衍生物，其中R3是甲基。
本发明的另一个具体实施方式提供了式(I)所示噻唑衍生物，其中R4选自任选取代的芳基，包括；任选取代的杂芳基、包括吡嗪基(如吡嗪-2-基)和吡唑基(如吡唑-3-基)；任选取代的杂环烷基和任选取代的C3-C8环烷基。
本发明的另一个具体实施方式提供了式(I)所示噻唑衍生物，其中R4选自-C(O)R6。
本发明的另一个具体实施方式提供了式(I)所示噻唑衍生物，其中R5选自羟基和任选取代的烷氧基。
本发明的另一个具体实施方式提供了式(I)所示噻唑衍生物，其中R5是任选取代的氨基。
本发明的另一个具体实施方式提供了式(I)所示噻唑衍生物，其中R5选自任选取代的芳基；任选取代的杂芳基；任选取代的C3-C8环烷基和任选取代的杂环烷基。
本发明的另一个具体实施方式提供了式(I)所示噻唑衍生物，其中R6选自任选取代的C1-C6-烷基、任选取代的C2-C6-烯基、任选取代的C2-C6-炔基、任选取代的芳基C1-C6-烷基和任选取代的杂芳基C1-C6-烷基。
本发明的另一个具体实施方式提供了式(I)所示噻唑衍生物，其中R6是任选取代的氨基。
本发明的另一个具体实施方式提供了式(I)所示噻唑衍生物，其中X是S。
本发明化合物特别包括以下化合物：
  实施例编号  命名
    1  2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-羧酸乙酯；
    2  2’-(乙酰氨基)-N-烯丙基-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
    3  N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]乙酰胺；
    4  2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-羧酸；
    5  2’-(乙酰氨基)-N-(2-甲氧基乙基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
6  2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-N-(四氢呋喃-2-基甲基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
7  2’-(乙酰氨基)-N-[2-(二甲基氨基)乙基]-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
    8  N-[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]乙酰胺；
9  N-{4’-甲基-2-[(4-甲基哌嗪-1-基)羰基]-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基}乙酰胺；
10  2’-(乙酰氨基)-N-[3-(二甲基氨基)丙基]-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
    11  2’-(乙酰氨基)-N-(2-羟基乙基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
    12  2’-(乙酰氨基)-N-(2-氰基乙基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
    1 3  2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-N-1H-四唑-5-基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
14  4-({[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]羰基}氨基)苯甲酸；
15  3-({[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]羰基}氨基)苯甲酸；
16  2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-N-[3-(1H-四唑-5-基)苯基]-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
    17  2’-(乙酰氨基)-N-苄基-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
    18  2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-N-丙基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
19  2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-N-[4-(1H-四唑-5-基)苯基]-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
20  3-({[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]羰基}氨基)-2-羟基苯甲酸；
    21  1-{[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]羰基}哌啶-3-羧酸；
22  5-({[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]羰基}氨基)-2-羟基苯甲酸；
    23  N-[4’-甲基-2-(2H-四唑-5-基甲基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]乙酰胺；
    24  1-{[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]羰基}哌啶-4-羧酸；
25  2’-(乙酰氨基)-N-[3-(5-氨基-1，3，4-噻二唑-2-基)苯基]-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
26  N-{2-[(3-羟基哌啶-1-基)羰基]-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基}乙酰胺；
27  N-(2-{[4-(羟基甲基)哌啶-1-基]羰基}-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基)乙酰胺；
28  N-(2-{[4-(2-羟基乙基)哌啶-1-基]羰基}-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基)乙酰胺；
29  N-{2-[(4-羟基哌啶-1-基)羰基]-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基}乙酰胺；
30  2’-(乙酰氨基)-N-1H-1，2，3-苯并三唑-5-基-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
31  4-({[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]羰基}氨基)-2-羟基苯甲酸；
32  4-({[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]羰基}氨基)-2-氟苯甲酸；
33  2’-(乙酰氨基)-N-[3-(5-羟基-1，3，4-噁二唑-2-基)苯基]-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
34  2’-(乙酰氨基)-N-[4-(5-羟基-1，3，4-噁二唑-2-基)苯基]-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
    35  N-[2-(羟基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]乙酰胺；
36  N-(2-甲氧基乙基)-N’-[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]脲；
37  N-({[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰基)-β-丙氨酸乙酯；
38  N-[2-(1，4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基羰基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]乙酰胺；
39  2’-(乙酰氨基)-N-(2，3-二羟基丙基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
    40  N-[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]脲；
    41  N-{4’-甲基-2-[(3-氧哌嗪-1-基)羰基]-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基}乙酰胺；
    42  N-{4’-甲基-2-[(4-氧哌啶-1-基)羰基]-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基}乙酰胺；
43  N-{2-[(3-羟基吡咯烷-1-基)羰基]-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基}乙酰胺；
    44  2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-N-丙-2-炔-1-基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
45  N-{2-[(4-乙酰基哌嗪-1-基)羰基]-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基}乙酰胺；
46  N～1～，N～1～-二甲基-N～2～-({[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰基)甘氨酰胺；
47  N-({[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰基)-β-丙氨酸；
    48  N-{2-[(4-氟哌啶-1-基)羰基]-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基}乙酰胺；
49  N-(2-{[(1S，5S，7S)-7-(羟基甲基)-6，8-二氧杂-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]羰基}-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基)乙酰胺；
50  N-({[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰基)-β-丙氨酸乙酯；
51  N-(2-{[(1R，5R，7R)-7-(羟基甲基)-6，8-二氧杂-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]羰基}-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基)乙酰胺；
52  N-({[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰基)-β-丙氨酸叔丁酯；
    53  [4’-甲基-2’-(吡嗪-2-基氨基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]乙腈；
    54  4’-甲基-2’-(吡嗪-2-基氨基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2-羧酸乙酯；
    55  [4’-甲基-2’-(1H-吡唑-3-基氨基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]乙腈；
    56  N-[4’-甲基-2-(2-吗啉-4-基-2-氧乙基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]乙酰胺；
    57  2-[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]乙酰胺；
58  4-{[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}-4-氧丁酸叔丁酯；
59  5-{[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}-5-氧戊酸甲酯；
60  6-{[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}-6-氧己酸甲酯；
    61  2’-(乙酰氨基)-N，N，4’-三甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
    62  2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
    63  4-{[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}-4-氧丁酸；
    64  5-{[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}-5-氧戊酸；
65  N-({[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰基)甘氨酸叔丁酯；
66  4-[({[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰基)氨基]丁酸叔丁酯；
67  N～2～-({[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰基)-N～1～，N～1～-二甲基甘氨酰胺；
68  N-({[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰基)-β-丙氨酸叔丁酯；
69  N-[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-N-(2-吗啉-4-基-2-氧乙基)脲；
70  N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-N-(2-吗啉-4-基-2-氧乙基)脲；
71  N-({[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰基)-β-丙氨酸甲酯；
72  N～3～-({[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰基)-N～1，N～1-二异丙基-β-丙氨酰胺；
73  N-3-({[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰基)-N-1-(2-羟基-1，1-二甲基乙基)-β-丙氨酰胺；
74  N～1～-(叔丁基)-N～3～-({[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰基)-β-丙氨酰胺；
75  N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-N-[3-(2，2-二甲基-1，3-噻唑烷-3-基)-3-氧丙基]脲；
76  N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-N-[3-(4，4-二甲基-1，3-噁唑烷-3-基)-3-氧丙基]脲；
77  N～2～-({[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰基)-N～1～-(2，2-二甲基丙基)甘氨酰胺；
    78  N-(3-氮杂环辛烷-1-基-3-氧丙基)-N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联
 -1，3-噻唑-2’-基]脲；
79  N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-N’-[2-(1-异丙基-1H-咪唑-4-基)乙基]脲；
80  N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-N’-[2-(1-乙基-1H-咪唑-4-基)乙基]脲；
81  N-[2-(5-叔丁基-1，2，4-噁二唑-3-基)乙基]-N’-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]脲；
82  N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-N’-[2-(5-异丙基-1，2，4-噁二唑-3-基)乙基]脲；
83  N-(4’-甲基-2-{[5-(1-甲基哌啶-4-基)-1，2，4-噁二唑-3-基]甲基}-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基)乙酰胺。
本发明的化合物可用作药物。它们可用于制备用于预防和/或治疗自身免疫性疾病和/或炎症性疾病、心血管疾病、神经退行性疾病、细菌或病毒感染、变态反应、哮喘、胰腺炎、多器官衰竭、肾脏疾病、血小板聚集、癌症、移植、精子运动、红细胞缺乏症、移植排斥反应或肺损伤的药物。
一个具体实施方式中，式(I)化合物可用于治疗和/或预防自身免疫性疾病或炎症性疾病，如多发性硬化症、银屑病、类风湿性关节炎、全身性红斑狼疮、炎性肠病、肺部炎症、血栓形成或脑感染/炎症，如脑膜炎或脑炎。
另一个具体实施方式中，式(I)化合物可用于治疗和/或预防神经退行性疾病，包括阿尔茨海默尔病、亨廷顿氏病、CNS损伤、中风或局部缺血症状。
根据本发明的另一个具体实施方式中，式(I)化合物可用于治疗和/或预防心血管疾病，如动脉粥样硬化、心脏肥大、心肌细胞功能障碍、血压升高或血管收缩。
根据本发明的另一个具体实施方式中，式(I)化合物可用于治疗和/或预防红细胞缺乏症，如贫血，包括溶血性贫血、再生障碍性贫血和纯红细胞贫血。
根据本发明的另一个具体实施方式中，式(I)化合物可用于治疗和/或预防慢性阻塞性肺疾病、过敏性休克、纤维症、银屑病、变态反应性疾病、哮喘、中风或局部缺血症状、局部缺血-再灌注、血小板聚集/激活、骨骼肌萎缩/肥大、癌组织中白细胞募集、血管生成、入侵转移(特别是黑色素瘤、Karposi肉瘤)、急性和慢性细菌和病毒感染、败血症、移植、移植排斥反应、肾小球硬化症、肾小球肾炎、进行性肾纤维化、肺或者全肺气道炎症中的内皮和上皮损伤。
根据本发明的另一个具体实施方式中，提供了式(I)所示噻唑衍生物的制备方法，包括在碱(如吡啶、DEA、TEA等)存在条件下，将式(Ia)所示胺和式ClC(O)R6基团的衍生物反应的步骤。
Figure S2006800267463D00241
其中R1、R2、R3、R6和X在说明书中定义。
根据本发明的另一个具体实施方式中，提供了式(I)所示噻唑衍生物的制备方法，包括在甲酸或任何甲酸烷基酯中加热式(Ia)的胺(可任选地加入共溶剂)的步骤。
根据本发明的另一个具体实施方式中，提供了式(I)所示噻唑衍生物的制备方法，包括在碱(如DIEA、TEA等)存在的条件下，将式(Ia)所示胺和式R7R8NC(O)所示衍生物反应的步骤，式中R7和R8选自H；任选取代的C1-C6-烷基，如甲氧基乙基(如2-甲氧基乙基)、羧酸烷基(如3-羧酸乙基)、3-羧酸烷基酯乙基(如3-羧酸乙基酯乙基、3-羧酸叔丁基酯乙基)、氨基羰基甲基(如N，N-二甲基氨基羰基甲基)。
根据本发明的另一个具体实施方式中，提供了式(I)所示噻唑衍生物的制备方法，包括将式(Ia)所示胺和CDI反应、然后加入式R7R8NH所示胺的步骤，式中R7和R8选自H；任选取代的C1-C6-烷基，如甲氧基乙基(如2-甲氧基乙基)、羧酸烷基(如3-羧酸乙基)、3-羧酸烷基酯乙基(如3-羧酸乙基酯乙基、3-羧酸叔丁酯乙基)、氨基羰基甲基(如N，N-二甲基氨基羰基甲基)。
根据本发明的另一个具体实施方式中，提供了式(I)所示噻唑衍生物的制备方法，包括在碱(如吡啶、DEA、TEA等)存在条件下，将式(P3)所示衍生物和式HNR9R10所示胺反应的步骤。
Figure S2006800267463D00251
其中R1、R2、R3、R4和X在说明书中定义，以及R9和R10选自H；任选取代的C1-C6-烷基，如烯丙基、甲氧基乙基(如2-甲氧基-乙基)、甲氧基丙基(如3-甲氧基-丙基)、羟基乙基(如2-羟基乙基)、羟基丙基(如2，3-二羟基丙基)、氰基乙基(如2-氰基乙基)、丙基(如正-丙基)、丙-2-炔基、四氢呋喃甲基(如四氢呋喃-2-基-甲基)、二甲基氨基乙基(如2-(二甲基氨基)乙基)、二甲基氨基丙基(如3-(二甲基氨基)丙基)、四唑基(如1H-四唑-5-基、1H-四唑-3-基)、苯甲酸(如4-苯甲酸、3-苯甲酸、2-羟基-3-苯甲酸、3-羟基-4-苯甲酸、3-氟-4-苯甲酸、4-羟基-3-苯甲酸)、四唑基苯基(如3-(1H-四唑-5-基)苯基、3-(1H-四唑-3-基)苯基、4-(1H-四唑-5-基)苯基、4-(1H-四唑-3-基)苯基)、噻二唑基苯基(如3-(5-氨基-1，3，4-噻二唑-2-基)苯基)、噁二唑基苯基(如3-(5-羟基-1，3，4-噁二唑-2-基)苯基、4-(5-羟基-1，3，4-噁二唑-2-基)苯基)、苄基(如苄基，1H-1，2，3，苯并三唑-5-基；任选取代的芳基；任选取代的杂芳基；任选取代的C3-C8-环烷基；
-NR9R10可任意地成环，可选自取代的杂环烷基，包括吗啉基(如吗啉-4-基)、哌嗪基(如4-甲基哌嗪-1-基、4-乙酰基哌嗪-1-基、3-氧哌嗪-1-基)、哌啶基(如3-羧酸哌啶-1-基、4-羧酸哌啶-1-基、4-(羟基甲基)哌啶-1-基、3-羟基哌啶-1-基、4-羟基哌啶-1-基、4-(2-羟基乙基)哌啶-1-基、4-氟哌啶-1-基、4-氧哌啶-1-基)、1，4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基、7-(羟基甲基)-6，8-二氧杂-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、吡咯烷基(如3-羟基吡咯烷-1-基)；
根据本发明的另一个具体实施方式中，提供了式(I)所示噻唑衍生物的制备方法，包括加入氢化物(如三叔丁氧基氢化锂铝((tBuO)3AlHLi))还原式(P3)所示衍生物的步骤。
根据本发明的另一个具体实施方式中，提供了式(Ia)所示化合物：
Figure S2006800267463D00261
其中R1、R2、R3和X的定义同说明书，但式Ia化合物不是以下化合物：
2’-氨基-4’-甲基-[4，5’-联噻唑]-2-乙腈，(登录号：299171-15-6)；
2’-氨基-4’-甲基-(苯基亚肼基)-[4，5’-联噻唑]-2-乙腈，(登录号：299171-18-9)；
2’-氨基-[(4-氯苯基)亚肼基]-4’-甲基-[4，5’-联噻唑]-2-乙腈，(登录号：299171-19-0)；或
2’-氨基-2-甲基-[4，5’-联噻唑]-4’-羧酸乙酯，(登录号：94273-53-7)。
根据本发明的另一个具体实施方式中，提供了选自以下组的式(Ia)化合物：
2’-氨基-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-羧酸乙酯；和
4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-胺。
根据本发明的另一个具体实施方式中，提供了选自以下组的式(P3)化合物：
Figure S2006800267463D00262
其中R2、R3和R4在说明书中定义。
根据本发明的另一个具体实施方式中，提供了一种式(P3)化合物：
2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-酰氯。
本发明中示例的噻唑衍生物可以采用下面的一般方法和步骤从容易获得的起始原料加以制备。应该认识到，虽然其中给出了典型的或优选的实验条件(即反应温度、时间、试剂的摩尔数、溶剂等)，但其它的实验条件也是可以使用的，除非另有说明。最佳反应条件因所用具体试剂或溶剂而异，但这样的条件可被本领域技术人员用常规的优化程序加以确定。
当用作药物时，本发明化合物通常以药物组合物的形式给药。因此，包含式(I)化合物和药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物也在本发明的范围之内。本领域的技术人员知晓所有这些适合配制药物组合物的载体、稀释剂或赋形剂化合物。
本发明化合物可与常规使用的助剂、载体、稀释剂或赋形剂一起放入药物组合物的剂型及其单位剂量中，其剂型可为口服用的固体(如片剂或充填的胶囊)或液体(如溶液、悬浮液、乳液、酏剂或充填了这些物质的胶囊)；或者是用于肠胃外给药(包括皮下给药)的可注射灭菌溶液。这样的药物组合物和其单位剂型可以常规的比例包含各成分，可含有或不含有其它活性化合物或成分，而且这样的单位剂型可含有与所要使用的日剂量范围相当的适当有效量的任何活性成分。
包含本发明噻唑衍生物的药物组合物可用制药行业熟知的方法制备，它包含至少一种活性化合物。通常，本发明化合物以药学有效量给药。实际给予的化合物的量一般由医生根据相关的情况决定，包括要治疗的疾病、选择的给药途径、实际给予的化合物、每个病人的年龄、体重和反应、病人症状的严重程度等。
本发明药物组合物可通过多种途径给予，包括口服、直肠、透皮、皮下、静脉内、肌肉内和鼻内。口服给药的组合物可采用大液体溶液或悬浮液的形式，或大粉剂(bulk powders)的形式。但是更为通常地，组合物以单位剂量的形式呈现，以利于精确给药。术语“单位剂型”指物理上分离的单位，适合为人或其它哺乳动物作为单一剂量使用，每单位含有计算好的能产生所需治疗效果的预定量的活性物质，以及合适的药物赋形剂。典型的单位剂型包括液体组合物的预充填的、预计量的安瓿或注射器，或固体组合物的丸剂、片剂、胶囊等。在这样的组合物中，噻唑衍生物通常是小量组分(约0.1-50％重量或优选约1-40％重量)，其余的是各种赋形剂或载体以及有助于形成所需剂型的加工助剂。
适合于口服的液体形式可包括合适的水性或非水性赋形剂，含有缓冲剂、悬浮和分散剂、色料、调味剂等。固体形式可包括例如任何以下的成分或类似性质的化合物：粘合剂(如微晶纤维素、黄芪胶或明胶)、赋形剂(如淀粉或乳糖)、崩解剂(如海藻酸、Primogel或玉米淀粉)、润滑剂(如硬脂酸镁)、助流剂(如胶体二氧化硅)、甜味剂(如蔗糖或糖精)、或调味剂(如薄荷、水杨酸甲酯或橙味剂)。
可注射组合物通常基于灭菌的可注射盐水或磷酸盐缓冲的盐水或本领域己知的其它可注射的载体。如上所述，式(I)所示噻唑衍生物在这样的组合物中通常是小量成分，常常是在0.05-10％重量的范围，其余的是可注射的载体等。
上述用于口服或可注射组合物的成分只是代表性的。其它材料和加工技术等可参见雷明顿药物科学(Remington’s Pharmaceutical Sciences)(第20版，2000，Marck出版公司，美国宾夕法尼亚)的第5部分，其结合在此引为参考。
本发明化合物也可以持续释放的形式给药或从持续释放药物输送系统给药。代表性的持续释放材料的叙述也可见上述Remington’s PharmaceuticalSciences。
本发明化合物的合成：
采用液相和固相化学方案，可以通过多种合成方法从容易获得的起始原料制备新型的式(I)所示噻唑衍生物。下面将叙述合成路线的实例。
下列缩写所指的定义分别如下：
(埃)、eq(当量)、h(小时)、g(克)、M(摩尔浓度)、MHz(兆赫兹)、l(微升)、min(分钟)、mg(毫克)、ml(毫升)、mm(毫米)、mmol(毫摩尔)、mM(毫摩尔浓度)、nm(纳米)、rt(室温)、BSA(牛血清白蛋白)、CDI(N，N’-羰基二咪唑)、DCC(二环己基碳二亚胺)、DCM(二氯甲烷)、DIEA(二异丙基乙基胺)、DMEM(Dulbecco’s改良Eagle培养基)、DMF(二甲基甲酰胺)、EDC(1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基-碳二亚胺盐酸盐)、HPLC(高效液相色谱)、HOBt(1-羟基苯并三唑)、IHC(免疫组织化学)、Ins1P(D-myo-肌醇-1-磷酸酯)、LC(液相色谱)、MS(质谱)、NBS(N-溴代琥珀酰亚胺)、NIS(N-碘代琥珀酰亚胺)、NMR(核磁共振)、PBS(磷酸盐缓冲液)、PIs(磷肌醇类)、PI3Ks(磷酸肌醇3-激酶)、PI(3)P(磷脂酰肌醇3-单磷酸酯)、PI(3，4)P2(磷脂酰肌醇3，4-二磷酸酯)、PI(3，4，5)P3(磷脂酰肌醇3，4，5-三磷酸酯)、PI(4)P(磷脂酰肌醇-4-磷酸酯)、PI(4，5)P2)(磷脂酰肌醇-4，5-二磷酸酯)、PtdIns(磷脂酰肌醇)、TEA(三乙胺)、TFA(三氟乙酸)、TFAA(三氟乙酸酐)、THF(四氢呋喃)、UV(紫外)。
本发明中示例的噻唑衍生物可以采用下面的一般方法和步骤从容易获得的起始原料制备。应该认识到，虽然其中给出了典型的或优选的实验条件(即反应温度、时间、试剂的摩尔数、溶剂等)，但其它的实验条件也是可以使用的，除非另有说明。最佳反应条件因所用具体试剂或溶剂而异，但这样的条件可被本领域技术人员用常规的优化程序加以确定。
下面流程所示方法中的R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10和X的定义与前面说明书中的定义相同。
通常，可采用液相和固相化学方案(考多马里(Kodomari)等，2002；裴伦(Pirrung)等，2001，同上)通过多种合成方法获得通式(I)所示噻唑衍生物，可采用传统的方法或微波辅助技术。
本发明化合物药学上可接受的阳离子盐可通过使其酸形式与合适的碱(通常是等当量)在共溶剂中反应而容易地制备。典型的碱有氢氧化钠、甲醇钠、乙醇钠、氢化钠、氢氧化钾、甲醇钾、氢氧化镁、氢氧化钙、苄星青霉素(benzathine)、胆碱、二乙醇胺、乙二胺、葡甲胺、苯乙苄胺、二乙胺、哌嗪和氨丁三醇。通过浓缩至干或加入非溶剂(non-solvent)分离到盐。有些情况下，使用可使预期的阳离子盐析出的溶剂将酸的溶液和阳离子的溶液(乙基己酸钠、油酸镁)混合，可制得盐，或者通过浓缩和加入非溶剂分离到盐。
式(I)化合物中间体的制备方法。
根据R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10和X的性质，可选用不同的合成策略合成式(I)化合物。
一种合成方法(下面流程1)是在溶剂中，优选极性溶剂(如醇)中，使大约等摩尔量的α-溴代酮反应物(P1)和硫代草氨酸烷基酯(如硫代草氨酸乙酯)或硫代酰胺(如2-氰基硫代乙酰胺)(P2)反应，获得式(I)化合物。反应温度取决于(P1)和(P2)的性质，范围在-20℃-回流之间。可选使用碱(如DIEA或TEA)，捕获游离出的HBr。
流程1
Figure S2006800267463D00301
当R4是如前面定义的-C(O)R6时，也可采用一种不同的方法制备式(I)化合物，如下面流程2所示。即，使胺衍生物(P1a)和硫代草氨酸烷基酯(如硫代草氨酸乙酯)或硫代酰胺(如2-氰基硫代乙酰胺)(P2)反应，获得相应的式(Ia)所示联-噻唑或噁唑-噻唑。
流程2
Figure S2006800267463D00302
然后可使用本领域技术人员所知的条件，采用如说明书前面定义的-C(O)R6对伯胺(Ia)进行功能化，获得式(I)化合物。
当-C(O)R6基团是酰基时，可在碱(如吡啶、DIEA、TEA等)存在下，加入相应的酰氯或酸酐于中间体(Ia)中。也可在活化试剂(如DCC、EDC等)存在下，加入相应的羧酸。
甲酰基(即-C(O)R6＝-C(O)H)的引入可通过在甲酸或任何甲酸烷基酯中加热中间体(Ia)而完成，可以使用或不使用共溶剂。
在碱(如DIEA、TEA等)存在条件下，加入异氰酸酯R7R8NC(O)(其中R7和R8已在前面定义)于中间体(Ia)中，可制得取代的脲。然后加入CDI和取代的伯或仲胺HNR7R8于中间体(Ia)中，也可获得-C(O)R6＝-C(O)NR7R8的式(I)化合物(其中R7和R8已在前面定义)。
采用本领域技术人员熟知的合适的转化技术，通过将-NHC(O)NR7R8基团转化为其它的脲-NHC(O)NR7R8，可把如前面定义的-C(O)R6＝-C(O)NR7R8的式(I)化合物，转化成其它的式(I)化合物。
根据R1的性质，对如前面定义的基团R1进行修饰，式(I)化合物可转化为其它的式(I)化合物。
当R1是酯(R1＝-C(O)R5，其中R5是烷氧基-OAlk，如乙氧基)时，式(Ib)化合物可转化为如前面定义的R5＝-NR9R10的式(Ic)酰胺。根据胺HNR9R10的性质(其中R9和R10已在前面定义)，这种转化可通过1或2步反应完成(下面流程3)。
流程3
对于低沸点的胺，可通过在微波条件下加热式(Ib)的酯和用作溶剂的胺HNR9R10(其中R9和R10已在前面定义)获得酰胺(Ic)。微波80℃加热10-30min后通常能获得酰胺(Ic)。
另一种方法是在碱性条件下制备相应的R5＝OH的羧酸(Id)，然后和如前面定义的胺HNR9R10生成酰胺。对于第二步，可使用不同的活化试剂(如DCC、EDC、HOBt等)。根据偶联试剂的性质，可能需要加入碱(如TEA或DIEA)。溶剂可在DCM、DMF、MeCN或任何其它可适用于这种转化的溶剂中选择。
使用合适的试剂(如草酰氯或氯化亚砜)，羧酸(Id)可先转化为相应的酰氯(P3)。在碱(如吡啶、DIEA、TEA等)存在下，所得酰氯和胺HNR9R10反应，可获得如前面定义的式(Ic)(其中R1＝-C(O)R5＝-C(O)NR9R10)化合物。
胺HNR9R10可通过多种渠道商购获得，或者使用本领域技术人员所知的条件合成获得，下面的实施例中将有详细内容。
加入氢化物(如三叔丁氧基氢化锂铝((tBuO)3AlHLi))还原中间体(P3)可制得式(Ie)所示醇(R1＝CH2OH)。使用本领域技术人员所知的条件(如Swem或Dess Martin氧化)氧化醇(Ie)，可获得相应的R1＝C(O)R5＝C(O)H的式(If)所示醛。
根据R1的性质，可使用不同的试剂(P2)制备式(I)化合物。
当R1是-C(O)R5(其中R5是取代的烷氧基(如乙氧基))时，将大约等摩尔量的α-溴代酮(P1)和硫代草氨酸烷基酯(如硫代草氨酸乙酯)(P2a)反应，可获得式(Ib)化合物(见下面流程4)。
流程4
当R1是取代的C1-C6-烷基(如氰基甲基)时，将大约等摩尔量的α-溴代酮反应物(P1)和烷基硫代酰胺R1C(S)NH2(P2b)(如2-氰基硫代乙酰胺)反应，可获得式(I)化合物(见下面流程5)。
流程5
式(I)化合物可转化为其它的式(I)化合物。例如，当R1＝CH2CN时，使用本领域技术人员所知的条件，式(Ig)化合物可转化为四唑基甲基衍生物(如2H-四唑-5-基-甲基)(Ih)(下面流程6)。
例如，(Ig)在Bu3SnCl(4eq.)存在下，和叠氮化物(如叠氮化钠)反应，或者在催化量Bu2SnO存在下，和TMSN3反应，可获得式(I)化合物(其中R1是-CH2-四唑基，即式(Ih)化合物)(威腾伯格(Wittenberger)等，1993，有机化学杂志(J.Org.Chem.)，58，4139)。
流程6
Figure S2006800267463D00341
酮(P4)进行α-溴化，可获得α-溴代酮(P1)(下面流程7)。可使用不同的溴化试剂(如Br2，任选在HBr或NBS存在条件下)。
根据R4的性质，进行溴化之前可先对游离NH进行保护(下面流程7)。然后使用本领域技术人员所知的条件除去，获得中间体(P1)。PG可以是任何易于除去的保护基(如乙酰基)。
流程7
Figure S2006800267463D00342
当R4是-C(O)R6时，α-溴代酮(PIc)可以从取代的5-酰基-2-氨基噻唑(P5)开始，通过2步制得，如下面流程8所示。
流程8
可先用如说明书前面定义的-C(O)R6对(P5)中的伯胺进行功能化，获得(P4a)。
当-C(O)R6基团是酰基时，可在碱(如吡啶、DIEA、TEA等)存在下，加入相应的酰氯或酸酐于中间体(P5)中。也可在活化试剂(如DCC、EDC等)存在下，加入相应的羧酸。
甲酰基(即-C(O)R6＝-C(O)H)的引入可通过在甲酸或任何甲酸烷基酯中加热中间体(P5)而完成，可以使用或不使用共溶剂。
在碱(如DIEA、TEA等)存在条件下，加入异氰酸酯R7R8NC(O)(其中R7和R8的已在前面定义)于中间体(P5)中，可制得取代的脲。然后加入CDI和取代的伯胺或仲胺HNR7R8于中间体(P5)中，也可获得如前面定义的-C(O)R6＝-C(O)NR7R8的中间体(P4a)。采用本领域技术人员熟知的合适的转化技术，通过将-NHC(O)NR7R8基团转化为其它的脲-NHC(O)NR7R8(其中R7和R8已在前面定义)，可将-C(O)R6＝-C(O)NR7R8的式(P4a)化合物转化成其它的式(P4a)化合物。
第1步酰化后可进行5-酰基的α-溴化，获得中间体(P1c)(上面流程8)。
这2步也可以相反的顺序进行(上面流程8)。先进行中间体(P5)的溴化，获得中间体(P1a)。然后采用上述的条件，引入如说明书前面定义的-C(O)R6基团后可获得中间体(P1c)。
2种不同的合成路线均可使用不同的溴化试剂(如Br2，任选在HBr或NBS存在条件下)。
式(P4)和(P5)所示中间体可以从多种途径商购获得，也可以采用液相和固相化学方案，通过不同的合成方法获得。
下面流程9给出了中间体(P4)和(P5)合成实例的建议。
流程9
Figure S2006800267463D00361
使用例如Br2进行溴化或亚硫酰氯进行α-氯化可以使取代的二酮(P6)卤化，获得中间体(P7)。中间体(P7)中的″Hal″也可以是甲苯磺酰基氧基，其可通过合适的试剂(如羟基(甲苯磺酰基氧基)碘苯)引入。然后可将中间体(P7)加入硫脲或脲在合适溶剂(优选极性溶剂，如EtOH)中的溶液中，生成中间体(P5)。
根据文献，具体的反应条件、温度、时间等取决于X和取代基R2和R3的性质，下面实施例中会进行详细描述(赛德(Sayed)等，1999，杂原子化学(Heteroatom Chemistry)，10，385-390)。
(P7)与合适的如说明书前面定义的-R4基团取代的硫脲或脲(P8)反应，可直接获得中间体(P4)。硫脲或脲(P8)可商购获得，或者使用本领域技术人员所知的条件获得。
有些条件在下面的实施例中描述，有些则在荷(Herr)等，2000，合成(Synthesis)，2000，1569-1574和威尔森(Wilson)等，2001，生物有机药物化学(J.Bioorg.Med.Chem.Lett)，11，915-918中描述。
当R3＝H时，甲基酮和甲酸乙酯缩合可1步制得(P6a)的钠盐，如下面流程10所示。然后，根据文献直接进行溴化，获得中间体(P7a)，下面的实施例中会进行详细描述。
流程10
Figure S2006800267463D00371
根据另一个一般方法，使用本领域技术人员熟知的合适的转化技术，式(I)化合物可转化为其它的式(I)化合物。
如果上述的一般合成方法还不能用来获得式(I)所示化合物和/或合成式(I)化合物所需要的中间体，应使用本领域技术人员所知的合适的制备方法。通常，各个具体的式(I)化合物的合成路线取决于每个分子的具体取代基以及所需的中间体是否容易得到；同样，这些因素是本领域技术人员所熟知的。所有保护和脱保护的方法，参见菲利普J.考辛斯基(Philip J.Kocienski)的“保护基团(Protecting Groups)”(Georg Thieme Verlag Stuttgart，美国纽约，1994)和Theodora W.Greene和Peter G.M.Wuts的“有机合成中的保护基团(Protective Groups in Organic Synthesis)”(Wiley Interscience，第3版1999)。
通过从合适溶剂的蒸发结晶可分离得到与溶剂分子缔合的本发明化合物。含有碱中心的式(I)化合物的药学上可接受的酸加成盐可用常规的方法加以制备。例如，可用合适的酸(纯净的酸或溶解在合适溶剂中的酸)处理游离碱的溶液，通过过滤或真空蒸发反应溶剂来分离生成的盐。同样地可通过用合适的碱处理式(I)化合物的溶液而得到药学上可接受的碱加成盐。两种类型的盐可用离子交换树脂形成或互相转化。
下面本发明将通过一些实施例加以说明，但这些实施例不应该被看成是限制本发明的范围。
以下起始原料通过商购获得：
5-乙酰基-2-氨基-4-甲基噻唑(Flrochem)、3-氯-2，4-戊二酮(Fluka)、2-氨基吡嗪(Aldrich)、3-氨基吡唑(Aldrich)、2-羟基-5-硝基-苯甲酸(Aldrich)、3-氨基苄腈(Aldrich)、4-氨基水杨酸(Aldrich)、3-硝基苯甲酸(Aldrich)、4-硝基苯甲酸(Aldrich)、硫代草氨酸乙酯(Aldrich)、烯丙胺(Fluka)、2-氰基硫代乙酰胺(Aldrich)、2-甲氧基乙基胺(Fluka)、四氢糠基胺(Fluka)、2-二甲基氨基乙基胺(Fluka)、吗啉(Fluka)、1-甲基哌嗪(Fluka)、N，N-二甲基-1，3-丙二胺(Fluka)、乙醇胺(Fluka)、N-(2-氰基乙基)胺(Lancaster)、5-氨基四唑(Aldrich)、4-氨基苯甲酸(Aldrich)、3-氨基苯甲酸(Emkachem)、5-(3-氨基苯基)四唑(Avocado)、苄胺(Fluka)、N-丙胺(Fluka)、4-(2H-四唑-3-基)苯胺盐酸盐(Asimex)、3-氨基水杨酸(TCI-US)、3-哌啶甲酸(Emkachem)、4-哌啶甲酸(Fluka)、3-羟基哌啶(Fluka)、4-(羟基甲基)哌啶(Maybridge)、4-哌啶乙醇(Aldrich)、4-羟基哌啶(Fluka)、5-氨基苯并三唑(Aldrich)、4-氨基-2-氟苯甲酸(Apollo)、三叔丁氧基氢化锂铝(Aldrich)、2-异氰酰丙酸乙酯(Aldrich)、1，4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(Aldrich)、2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-甲胺(Aldrich)、哌嗪-2-酮(Aldrich)、4-哌啶酮盐酸盐一水合物(Aldrich)、3-吡咯烷醇(Fluka)、炔丙胺(Fluka)、1-乙酰基哌嗪(Aldrich)、甘氨酸二甲基酰胺乙酸盐(Chem-Impex)、β-丙氨酸(Aldrich)、4-氟哌啶(Flrochem)、β-丙氨酸叔丁酯盐酸盐(Bachem)。
(1S，5S，7S)-6，8-二氧杂-3-氮杂双环[3.2.1]辛-7-基甲醇和(1R，5R，7R)-6，8-二氧杂-3-氮杂双环[3.2.1]辛-7-基甲醇按照公开的方法合成(参见瓜纳(Guama)等，1999，有机化学杂志(J.Org.Chem.，)64，7347)。
下述实施例中的HPLC、NMR和MS数据是这样得到的：HPLC：方法A：柱Waters Symmetry C8 50×4.6mm，条件MeCN 0.05％TFA/H2O 0.1％TFA，5-100％(8min)，最大图标230-400nm；方法B：柱C18 BDS 250×4.6mm，SC\243，条件：MeCN/H2O 0.1％TFA，5-100％(15min)，最大图标230-400nm；质谱：PE-SCIEX API 150 EX(APCI和ESI)；LC/MS谱：Waters ZMD(ES)；1H-NMR：Bruker DPX-300MHz。
制备性HPLC纯化在装备柱Prep Nova-PakHR C186 μm 60、40×30mm(最高上柱量100mg)或XTerraPrep MS C8、10μm、50×300mm(最高上柱量1g)的HPLC Waters Prep LC 4000系统上进行。所有纯化都以梯度MeCN/H2O 0.09％TFA完成。半制备反相HPLC在装备柱SupelcosilTMABZ+Plus(25cm×21.2mm，12μm)的Biotage Parallex Flex系统上进行；紫外检测波长254nm和220nm；流速20ml/min(最高上柱量50mg)。TLC分析在Merck预制60 F254板上进行。快速层析纯化在SiO2载体上进行，以环己烷/EtOAc或DCM/MeOH混合液为洗脱剂。
微波化学在购自Personal Chemistry的单一模式的微波反应器EmrysTMOptimiser上进行。
中间体1：N-[5-(溴乙酰基)-4-甲基-1，3-噻唑-2-基]乙酰胺氢溴酸盐的制 备(中间体(P1)，其中R2是H，R3和R6是甲基，以及X是S)
Figure S2006800267463D00391
中间体1
步骤I：N-(5-乙酰基-4-甲基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺(中间体(P6)，其中R2是H，R3和R4是甲基，以及X是S)
将5-乙酰基-2-氨基-4-甲基噻唑(P5)(Flrochem)(12.4g，79mmol)悬浮于THF/DCM 3∶2混合物(150ml)中。混合物冷却至0℃，加入吡啶(16ml)，然后滴加乙酰氯(8.43ml，119mmol，1.5eq.)。混合物于0℃搅拌2小时。乙酰化完成后，反应加水(70ml)淬灭，并用EtOAc(100ml)稀释。分离两相，有机相用10％柠檬酸溶液洗涤一次，有机层经MgSO4干燥后，过滤及浓缩。所得粗品在EtOAc/环己烷混合液中结晶纯化，得N-(5-乙酰基-4-甲基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺(P6)，呈无色粉末(13.1g，83.6％产率)。1HNMR(DMSO-d6)δ：2.17(s，3H)，2.47(s，3H)，2.56(s，3H)，12.44(br s，1H).M-(ESI)：197.3；M+(ESI)：199.3.HPLC(方法A)，Rt：1.7min(纯度：99.7％)。
步骤II：N-[5-(溴乙酰基)-4-甲基-1，3-噻唑-2-基]乙酰胺氢溴酸盐(中间体1)
将Br2(3.35ml，65.6mmol)的75ml二噁烷溶液滴加到如上述步骤I获得的N-(5-乙酰基-4-甲基-1，3-噻唑-2-基)乙酰胺(P6)(10.40g，52.5mmol)的200ml二噁烷溶液中。所得混合物50℃加热19小时。溶液从黑红色转变为浅褐色，呈非均相混合物。通过HPLC分析，只检测到2.8％的起始原料。悬浮液过滤，用1∶2 EtOAc/己烷混合液(50ml)洗涤，空气干燥15min后，得中间体1，呈浅褐色固体(11.2g，60％)。其HBr盐或者经Amberlyst A21于DCM/MeOH混合液中处理5min所得母体用于联-噻唑的合成。
1HNMR(DMSO-d6)δ：2.04(s，3H)，2.44(s，3H)，4.52(s，2H)，12.44(br s，1H).M-(ESI)：276；M+(ESI)：278.HPLC(方法A)，Rt：2.2min(纯度：97.4％)。
中间体2：1-(2-氨基-4-甲基-1，3-噻唑-5-基)-2-溴乙酮氢溴酸盐的制备(中间体(P1a)，其中R2是H，R3是甲基，以及X是S)
中间体2
将5-乙酰基-2-氨基-4-甲基噻唑(P5)(Flrochem)(1.0g，6.4mmol)悬浮于48％HBr水溶液(20ml，6.4mmol)中。混合物加热至60℃，滴加Br2(0.262ml，5.12mmol，0.8eq.)的二噁烷(20ml)溶液。混合物于60℃搅拌3小时。反应进程用LC/MS跟踪。反应完成后，蒸去溶剂，用甲苯共沸蒸馏去水。所得固体在异丙醇/Et2O混合液中重结晶，获得中间体2，呈无色固体(890mg，74％产率)。其HBr盐或者经Amberlyst A21于DCM/MeOH混合液中处理5min所得母体用于联-噻唑的合成。
1HNMR(DMSO-d6)δ：2.46(s，3H)，4.50(s，3H)，6.90(br s，1H)，9.18(br s，2H).M-(ESI)：234.1；M+(ESI)：236.1。
中间体3：2-溴-1-[4-甲基-2-(吡嗪-2-基氨基)-1，3-噻唑-5-基]乙酮，氢溴酸 盐(中间体(P1)，其中R4是2-吡嗪基，R2是H，R3是甲基，以及X是S)
Figure S2006800267463D00402
中间体3
步骤I：N-吡嗪-2-基硫脲的制备
0℃，氮气氛围下，将苯甲酰氯(30g，0.213mol)缓慢加入到硫氰酸铵(17.8g，0.234mol)的无水丙酮(200ml)溶液中，15min完成。反应混合物室温下搅拌30min后过滤。将2-氨基吡嗪(16.2g，0.17mol)滴加到滤液中，室温下搅拌3小时(h)。真空除去溶剂，残留物加水稀释。滤出析出的固体，干燥后获得N-[(吡嗪-2-基氨基)硫代羰基]苯甲酰胺，呈固体(33g；76％)。TLC-氯仿/甲醇(9/1)：Rf-0.5。
将N-[(吡嗪-2-基氨基)硫代羰基]苯甲酰胺(25g，0.096mol)的10％NaOH溶液(200ml)于80℃加热20min。冷却反应混合物，真空除去溶剂。残留物用2M HCl酸化至pH＝1，然后用氢氧化铵碱化。滤出析出的固体，真空干燥后获得N-吡嗪-2-基硫脲，呈固体(12g；80％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)：δ8.24(br s，2H)，8.54(s，1H)，9.10(m，1H)，9.95(m，1H)，10.66(br s，1H).M+(ESI)：154.9.HPLC(方法B)，Rt：3.47min(纯度：98.23％).TLC：氯仿/甲醇(9/1)：Rf-0.25.Mp：234℃-235℃。
步骤II：1-[4-甲基-2-(吡嗪-2-基氨基)-1，3-噻唑-5-基]乙酮盐酸盐的制备
将3-氯-2，4-戊二酮(4.4g，0.032mol)加入到N-吡嗪-2-基硫脲(5g，0.032mol)的无水乙醇(50ml)溶液中。混合物于氮气氛围下回流20h。反应混合物冷却至室温(rt)，滤出生成的沉淀，用乙醇(25ml)洗涤，真空干燥后，获得1-[4-甲基-2-(吡嗪-2-基氨基)-1，3-噻唑-5-基]乙酮，盐酸盐，呈灰白色固体(7g；92％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)：δ2.47(s，3H)，2.57(s，3H)，8.21(s，1H)，8.41(s，1H)，8.48(s，1H)，12.2(br s，1H).M+(ESI)：234.9.HPLC(方法B)，Rt：1.56min(纯度：97.75％).TLC：氯仿/甲醇(9/1)：Rf-0.25.Mp：224℃-229℃。
步骤III：N-(5-乙酰基-4-甲基-1，3-噻唑-2-基)-N-吡嗪-2-基乙酰胺的制备
在一个管子中，将1-[4-甲基-2-(吡嗪-2-基氨基)-1，3-噻唑-5-基]乙酮盐酸盐(500mg；1.85mmol；1eq.)与乙酸酐(2.16ml；22.90mmol；12.40eq.)混合。管子密封后，用油浴150℃加热。15min后，混合物变黄，反应完成。除去溶剂后，N-(5-乙酰基-4-甲基-1，3-噻唑-2-基)-N-吡嗪-2-基乙酰胺未经进一步纯化直接使用(510.3mg；定量)。
步骤IV：2-溴-1-[4-甲基-2-(吡嗪-2-基氨基)-1，3-噻唑-5-基]乙酮氢溴酸盐(中间体3)
将N-(5-乙酰基-4-甲基-1，3-噻唑-2-基)-N-吡嗪-2-基乙酰胺(511.2mg；1.85mmol；1eq.)溶于AcOH(10ml)中。加入氢溴酸(32μl；0.19mmol；0.10eq.)，然后加入溴(95μl；1.85mmol；1eq.)的AcOH(2ml)溶液。混合物室温搅拌3h，60℃搅拌2h。为使反应完全，加入溴(95μl；1.85mmol；1eq.)的AcOH(2ml)溶液，混合物于60℃搅拌4h。蒸去溶剂，所得黑棕色固体悬浮于THF，过滤，用环己烷洗涤，获得中间体3，呈黄色固体(467.7mg；64％)。其HBr盐或者经Amberlyst A21于DCM/MeOH混合液中处理5min所得母体用于联-噻唑的合成。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.60(s，3H)，4.64(s，2H)，8.24(d，J＝2.6Hz，1H)，8.43(dd，J＝1.5Hz，J＝2.6Hz，1H)，8.50(d，J＝1.5Hz，1H).M+(ESI)：312.9.HPLC(方法A)，Rt：2.80min(纯度：97％)。
中间体4：1-{2-[(1-乙酰基-1H-吡唑-3-基)氨基]-4-甲基-1，3-噻唑-5-基}-2- 溴乙酮，氢溴酸盐的制备(中间体(P1)，其中R4是1-乙酰基-1H-吡唑-3-基，R2是H，R3是甲基，以及X是S)
Figure S2006800267463D00421
中间体4
步骤I：N-1H-吡唑-3-基硫脲的制备
0℃，氮气氛围下，将苯甲酰氯(30g，0.213mol)加入到硫氰酸铵(17.8g，0.234mol)的无水丙酮(200ml)溶液中，15min完成。反应混合物室温下搅拌30min后过滤。将3-氨基吡唑(14.1g，0.17mol)滴加到滤液中，室温下搅拌3h。真空除去溶剂，残留物以氯仿/甲醇(9/1)为洗脱剂进行快速层析纯化。分离到N-[(1H-吡唑-3-基氨基)硫代羰基]苯甲酰胺，呈固体(22g；52％).M+(ESI)：246.9.TLC-氯仿/甲醇(9/1)：Rf-0.45。
将N-[(1H-吡唑-3-基氨基)硫代羰基]苯甲酰胺(22g，0.089mol)的10％NaOH溶液(200ml)于80℃搅拌45min。反应混合物冷却至室温，然后真空除去溶剂。残留物用2M HCl酸化至pH＝1，再用氢氧化铵碱化。用二氯甲烷(4×100ml)提取产品。合并提取液后干燥，浓缩。固体残留物以氯仿/甲醇(9/1)为洗脱剂进行快速层析纯化。分离到N-1H-吡唑-3-基硫脲，呈固体(9g；75％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)：δ5.88(br s，1H)，7.64(s，1H)，8.44(brs，1H)，9.02(br s，1H)，10.30(br s，1H)，12.47(br s，1H).HPLC(方法B)，Rt：3.88min(纯度：99.4％).TLC：氯仿/甲醇(9/1)：Rf-0.2.Mp：130-132℃。
步骤II：1-[4-甲基-2-(1H-吡唑-3-基氨基)-1，3-噻唑-5-基]乙酮的制备
将3-氯-2，4-戊二酮(4.78g，0.0352mol)加入到N-1H-吡唑-3-基硫脲(5g，0.0352mol)的无水乙醇(50ml)溶液中，混合物于氮气氛围下回流20h。反应混合物冷却至室温，滤出生成的沉淀，用乙醇(25ml)洗涤。真空干燥后，获得预期化合物的盐酸盐。用10％碳酸氢钠溶液中和，过滤，干燥后获得1-[4-甲基-2-(1H-吡唑-3-基氨基)-1，3-噻唑-5-基]乙酮，呈浅棕色固体(5g，64％)。1HNMR(CD3OD，300MHz)：δ2.49(s，3H)，2.61(s，3H)，6.14(br s，1H)，7.62(br s，1H).HPLC(方法B)，Rt：4.31min(纯度：98.07％).TLC-氯仿/甲醇(8/2)：Rf＝0.4.Mp：224-227℃。
步骤III：N-(5-乙酰基4-甲基-1，3-噻唑-2-基)-N-(1-乙酰基-1H-吡唑-3-基)乙酰胺
在一个管子中，将1-[4-甲基-2-(1H-吡唑-3-基氨基)-1，3-噻唑-5-基]乙酮(500mg；2.25mmol；1eq.)与乙酸酐(2.64ml；27.89mmol；12.40eq.)混合。管子密封后，用油浴150℃加热。10min后，反应完成。蒸去溶剂，获得N-(5-乙酰基-4-甲基-1，3-噻唑-2-基)-N-(1-乙酰基-1H-吡唑-3-基)乙酰胺，未经进一步纯化直接用于下一步(689.1mg；定量)。
步骤IV：1-{2-[(1-乙酰基-1H-吡唑-3-基)氨基]-4-甲基-1，3-噻唑-5-基}-2-溴乙酮，氢溴酸盐(中间体4)
将N-(5-乙酰基-4-甲基-1，3-噻唑-2-基)-N-(1-乙酰基-1H-吡唑-3-基)乙酰胺(689.3mg；2.25mmol；1eq.)溶于AcOH(10ml)和氢溴酸(39μl；0.22mmol；0.10eq.)中。滴加溴(115μl；2.25mmol；1eq.)的AcOH(2ml)溶液。混合物室温搅拌3h，60℃搅拌2h。为使反应完全，加入溴(58μl；1.12mmol；0.50eq.)的AcOH(2ml)溶液，混合物于60℃搅拌4h。混合物冷却至室温，滤出生成的沉淀，用环己烷洗涤，减压干燥后获得中间体4(695.7mg；73％)。其HBr盐或者经Amberlyst A21于DCM/MeOH混合液中处理5min所得母体用于联-噻唑的合成。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.57(s，3H)，2.64(s，3H)，4.63(s，2H)，6.36(d，J＝6Hz，1H)，8.35(d，J＝6Hz，1H).M-(ESI)：342.96；M+(ESI)：344.94.HPLC(方法A)，Rt：3.08min(纯度：91.91％)。
中间体5：(2-氨基-4-甲基-[4，5]联噻唑基-2-基)乙腈的制备
中间体5
将2-氰基硫代乙酰胺(1692.2mg；16.9mmol；1eq)加入到1-(2-氨基-4-甲基-1，3-噻唑-5-基)-2-溴-乙酮，氢溴酸盐，中间体2(5340mg；16.9mmol；1eq)的乙醇(150ml)溶液中。反应混合物室温搅拌20h。滤出生成的沉淀，获得中间体5，呈橙色固体(4400mg；定量产率)。未经进一步纯化直接用于下一步。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.40(s，3H)，4.61(s，2H)，7.83(s，1H)，9.05(s，2H)，M-(ESI)：235.13；M+(ESI)：237.06.HPLC(方法A)，Rt：1.30min(纯度：97.79％)。
中间体6：N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-1H-咪唑-1- 甲酰胺的制备
Figure S2006800267463D00451
中间体6
Ar氛围下，250ml烧瓶中，边搅拌边将三乙胺(0.65ml；4.69mmol；1.49eq.)加入到中间体5(1000mg；3.15mmol；1eq.)和CDI(1 372mg；8.46mmol；2.68eq.)的无水DCM(65ml)悬浮液中。加入DMF(4ml)以便于溶解。混合物于45℃搅拌过夜。HPLC未能检测到起始原料。反应混合物冷却至室温。滤出生成的沉淀，用乙醚洗涤，真空干燥，获得中间体6(822.8mg；79％)。未经进一步纯化直接用于下一步。
中间体7：N-[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-1H-咪 唑-1-甲酰胺的制备
中间体7
步骤I：2’-氨基-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-羧酸乙酯
在20ml微波管中，将中间体2(400mg；1.27mmol；1eq.)悬浮于EtOH(7ml)中。加入硫代草氨酸乙酯(168.6mg；1.27mmol；1eq.)，混合物于120℃微波照射加热15min。过滤反应混合物获得标题化合物的HBr盐(201mg；45％)。该化合物悬浮于2∶1 DCM/EtOH(9ml)中，加入Amberlyst A-21(200mg；4.54mmol；3.58eq.)。室温下振摇2小时30分钟后，过滤混合物，树脂用DCM和EtOH淋洗，获得2’-氨基-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-羧酸乙酯，未经进一步纯化直接用于下一步(146.2mg；43％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.30(t，J＝9Hz，3H)，2.32(s，3H)，4.38(q，J＝9Hz，2H)，7.17(br s，2H)，7.82(s，1H).M-(ESI)：268.17；M+(ESI)：270.16.HPLC(方法A)，Rt：1.83min(纯度：99.31％)。
步骤II：4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-胺
在5-10ml微波管中，将吗啉(6ml)加入到上述步骤I获得的2’-氨基-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-羧酸乙酯(188mg；0.70mmol；1eq.)中。所得溶液于130℃微波照射加热60min。减压除去吗啉，粗产品用制备HPLC纯化，获得4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-胺的TFA盐(171.7mg；58％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.36(s，3H)，3.67(m，6H)，4.28(m，2H)，7.94(s，1H)，8.27(br s，2H).M-(ESI)：309.04；M+(ESI)：311.09.HPLC(方法A)，Rt：1.54min(纯度：99.57％)。
步骤III：N-[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-1H-咪唑-1-甲酰胺(中间体7).
Ar氛围下，20ml管子中，边搅拌边将三乙胺(51μl；0.37mmol；1.10eq.)加入到上述步骤II获得的4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-胺(142.4mg；0.34mmol；1eq.)和CDI(54.4mg；0.34mmol；1eq.)的无水DCM(5ml)悬浮液中。加入DMF(0.30ml)以便于溶解。混合物于45℃搅拌过夜。HPLC未能检测到起始原料。反应混合物冷却至室温。滤出生成的沉淀，用乙醚洗涤，真空干燥，获得中间体7(107.1mg；79％)。未经进一步纯化直接用于下一步。
胺1：6-氨基-2，2-二甲基-苯并[1，3]二氧杂环己烯-4-酮的制备
Figure S2006800267463D00461
胺1
步骤I：6-[羟基(氧)氨基]-2，2-二甲基-4H-1，3-苯并二氧杂环己烯-4-酮
2-羟基-5-硝基-苯甲酸(Aldrich)悬浮于TFA(900ml)和三氟乙酸酐(300ml)中。分批加入丙酮(300ml)，15min完成。混合物于45min时间缓慢加热至100℃。蒸去溶剂，所得粗产品溶解于AcOEt，用饱和NaHCO3溶液(250ml)和盐水洗涤，MgSO4干燥。蒸去溶剂后，预期产品在AcOEt/Et2O/庚烷中结晶。过滤，用庚烷洗涤，真空干燥后，获得6-[羟基(氧)氨基]-2，2-二甲基-4H-1，3-苯并二氧杂环己烯-4-酮，呈浅褐色固体(152.2g；82％)。HPLC(方法A)，Rt：2.94min(纯度：99.86％)。
步骤II：6-氨基-2，2-二甲基-4H-1，3-苯并二氧杂环己烯-4-酮(6-氨基-2，2-二甲基-4H-1，3-苯并二氧杂环己烯-4-酮(胺1)
在一个高压釜中，将6-[羟基(氧)氨基]-2，2-二甲基-4H-1，3-苯并二氧杂环己烯-4-酮(75.0g)溶解于AcOEt(250ml)和MeOH(80ml)中。氩气氛围下，加入Pd/C 10％(2.8g)。反应混合物置于氢气氛围中(10巴)。由于反应放热，反应器用冰浴降温。30min后，还原反应完成。溶液用硅藻土过滤并浓缩。滤出生成的固体，用戊烷洗涤，真空干燥。获得胺1，呈黄色固体(58.2g；90％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.61(s，6H)，5.15(br s，2H)，6.80(d，J＝9Hz，1H)，6.88(dd，J＝9Hz，J＝3Hz，1H)，7.01(d，J＝3Hz，1H)。M+(ESI)：194.HPLC(方法A)，Rt：1.93min(纯度：99.52％)。
胺2：5-(3-氨基苯基)-1，3，4-噻二唑-2-胺的制备.
Figure S2006800267463D00471
胺2
将氨基硫脲(455.7mg；5mmol；1eq.)和3-氨基苄腈(Aldrich)(590.7mg；5mmol；1eq.)在TFA(2.50ml)中于60℃加热4小时。混合物变成稠的微黄色溶液。反应混合物倒入冰-水(15ml)中，用饱和NaHCO3水溶液中和。滤出生成的沉淀，获得5-(3-氨基苯基)-1，3，4-噻二唑-2-胺，胺2，呈灰白色固体(291mg；30％)。
胺3：7-氨基-2，2-二甲基-4H-1，3-苯并二氧杂环己烯-4-酮的制备
Figure S2006800267463D00481
胺3
步骤I：4-{[(苄氧基)羰基]氨基}-2-羟基苯甲酸
0℃下，将50％wt的氯甲酸苄酯溶液(670g，1.96mol于甲苯中)加入到对氨基水杨酸钠(Aldrich)(100g，0.65mol)的10％NaOH水溶液(1000ml)中。所得混合物室温下搅拌48h。反应进程用NMR跟踪。反应混合物冷却至0℃，用10％HCl溶液酸化。滤出生成的固体，用冷水洗涤，干燥。然后再用石油醚处理，过滤后得4-{[(苄氧基)羰基]氨基}-2-羟基苯甲酸粗品(128g，68％)。
步骤II：7-N-Cbz-氨基-2，2-二甲基-4H-1，3-苯并二氧杂环己烯-4-酮
室温，搅拌下，将三氟乙酸酐(TFAA，35ml，0.249mol)加入到4-{[(苄氧基)羰基]氨基}-2-羟基苯甲酸(25g，0.087mol)的TFA(108ml)悬浮液中。分批加入无水丙酮(60ml)，间隔4h。反应混合物于60℃加热24h。真空除去过量的TFA和TFAA，所得粗产品用硅胶(三乙胺处理)进行快速层析纯化，CH2Cl2为洗脱剂。分离出2种产品，7-N-Cbz-氨基-2，2-二甲基-4H-1，3-苯并二氧杂环己烯-4-酮(3.5g)和7-氨基-2，2-二甲基-4H-1，3-苯并二氧杂环己烯-4-酮(1.6g)。
步骤III：7-氨基-2，2-二甲基-4H-1，3-苯并二氧杂环己烯-4-酮(胺3)
在一个高压釜中，将Pd/C(350mg)加入到7-N-Cbz-氨基-2，2-二甲基-4H-1，3-苯并二氧杂环己烯-4-酮(3.5g)的甲醇(250ml)溶液中。反应混合物置于氢气氛围(10巴)中，室温下搅拌24h。反应混合物经硅藻土过滤后浓缩，获得7-氨基-2，2-二甲基-4H-1，3-苯并二氧杂环己烯-4-酮(1.6g)，这三步总收率20％。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.60(s，6H)，6.03(d，J＝2Hz，1H)，6.30(dd，J＝8Hz，J＝2Hz，1H)，6.36(br s，2H)，7.45(d，J＝8Hz，1H).M-(ESI)：192；M+(ESI)：194.HPLC(方法A)，Rt：0.95min(纯度：100％)。
胺4：5-(3-氨基苯基)-1，3，4-噁二唑-2-醇的制备
Figure S2006800267463D00491
胺4
步骤I：3-硝基苯甲酸甲酯
将3-硝基苯甲酸(Aldrich)(1g；5.98mmol；1eq.)溶解于甲苯(15ml)中。滴加溶于甲苯和MeOH(1/1)中的三甲基甲硅烷基重氮甲烷(9.0ml；2M；17.95mmol；3eq.)。溶液室温下搅拌1.5h。除去溶剂后获得3-硝基苯甲酸甲酯，呈黄色粉末(940.7mg；87％)。
1HNMR(DMSO-d6)δ：3.92(s，3H)，7.84(m，1H)，8.35(m，1H)，8.50(m，1H)，8.62(m，1H).HPLC(方法A)，Rt：1.8min(纯度：99.1％)。
步骤II：3-硝基苯甲酰肼
将3-硝基苯甲酸甲酯(940.7mg；5.19mmol；1eq.)溶解于EtOH(24ml)中。加入水合肼(4.04ml；83.09mmol；16eq.)，混合物室温下搅拌1小时。60℃搅拌6小时，然后室温下过夜。滤出生成的沉淀，真空干燥。获得3-硝基苯甲酰肼，呈灰白色固体(815.9mg；87％)。
1HNMR(DMSO-d6)δ：4.62(s，2H)，7.76(m，1H)，8.24(m，1H)，8.36(m，1H)，8.63(s，1H)，10.15(s，1H)。
步骤III：5-(3-硝基苯基)-1，3，4-噁二唑-2-醇
0℃下，1，1’-羰基二咪唑(641.2mg；3.95mmol；1eq.)加入到3-硝基苯甲酰肼(715.9mg；3.95mmol；1eq.)和三乙胺(822μl；5.93mmol；1.50eq.)的DMF(30ml)溶液中。反应混合物在0℃-室温间搅拌4小时。真空除去溶剂后得橙色油状物，溶解于DCM中，用HCl 0.1M洗涤。浓缩有机相，滤出生成的沉淀，获得5-(3-硝基苯基)-1，3，4-噁二唑-2-醇，呈白色固体(469.9mg；58％)。1HNMR(DMSO-d6)δ：7.84(s，1H)，8.19(m，1H)，8.41(m，2H)，12.91(s，1H)。HPLC(方法A)，Rt：2.06min(纯度：97.5％)。
步骤IV：5-(3-氨基苯基)-1，3，4-噁二唑-2-醇(胺4)
惰性气体氛围下，在一个烧瓶中，将5-(3-硝基苯基)-1，3，4-噁二唑-2-醇(369.9mg；1.79mmol；1eq.)溶解于MeOH(20ml)中。加入10％钯炭(190mg；0.18mmol；0.10eq.)，反应混合物室温下搅拌5分钟。然后置于常压氢气氛围中。2小时后反应完成。混合物用硅藻土过滤，MeOH淋洗。真空蒸去溶剂，获得胺4，呈白色粉末(283.3mg；90％)。
1HNMR(DMSO-d6)δ：5.43(s，2H)，6.70(m，1H)，6.89(m，1H)，7.08(s，1H)，7.14(m，1H)，12.44(s，1H)。
胺5：5-(4-氨基苯基)-1，3，4-噁二唑-2-醇的制备
Figure S2006800267463D00501
胺5
步骤I：4-硝基苯甲酸甲酯
将4-硝基苯甲酸(5g；29.92mmol；1eq.)溶解于甲苯(37.5ml)中。滴加甲苯和MeOH(1/1)中的三甲基甲硅烷基重氮甲烷(45ml；2M；89.76mmol；3eq.)。溶液室温下搅拌2h。除去溶剂后获得4-硝基苯甲酸甲酯，呈黄色粉末(5.42g；100％)。
1HNMR(DMSO-d6)δ：3.90(s，3H)，8.19(d，J＝9Hz，2H)，8.34(d，J＝9Hz，2H).HPLC，(方法A)，Rt：2.66min(纯度：98.7％)。
步骤II：3-硝基苯甲酰肼(benzohydrazide)
将4-硝基苯甲酸甲酯(5.42g；29.92mmol；1eq.)溶解于EtOH(120ml)中。加入水合肼(7.27ml；149.60mmol；5eq.)，混合物室温下搅拌1小时。60℃搅拌6小时，然后室温下过夜。滤出生成的沉淀，真空干燥。获得4-硝基苯甲酰肼，呈灰白色固体(4.31g；79％)。1HNMR(DMSO-d6)δ：4.63(s，2H)，8.03(d，J＝9Hz，2H)，8.23(d，J＝9Hz，2H)，10.12(s，1H).HPLC(方法A)，Rt：0.78min(纯度：100.0％)。
步骤III：5-(4-硝基苯基)-1，3，4-噁二唑-2-醇
0℃下，1，1’-羰基二咪唑(3.86g；23.81mmol；1eq.)加入到4-硝基苯甲酰肼(4.31g；23.81mmol；1eq.)和三乙胺(4.95ml；35.71mmol；1.50eq.)的DMF(150ml)溶液中。反应混合物在0℃-室温间搅拌3.5小时。真空除去溶剂后得橙色油状物，溶解于DCM中，用HCl 0.1M洗涤。浓缩有机相，滤出生成的沉淀，获得5-(4-硝基苯基)-1，3，4-噁二唑-2-醇，呈白色固体(4.50g；91％)。
1HNMR(DMSO-d6)δ：8.02(d，J＝9Hz，2H)，8.34(d，J＝9Hz，2H)，12.92(s，1H).M-(ESI)：206.3.HPLC(方法A)，Rt：2.09min(纯度：98.2％)。
步骤IV：5-(4-氨基苯基)-1，3，4-噁二唑-2-醇(胺5)
惰性气体氛围下，在一个烧瓶中，将5-(4-硝基苯基)-1，3，4-噁二唑-2-醇(4.50g；21.72mmol；1eq.)溶解于MeOH(150ml)中。加入10％钯炭(2.31g；2.17mmol；0.10eq.)，反应混合物室温下搅拌5分钟。然后置于常压氢气氛围中。2小时后反应完成。混合物用硅藻土过滤，MeOH淋洗。真空蒸去溶剂，获得5-(4-氨基苯基)-1，3，4-噁二唑-2-醇，呈白色粉末(2.34g；61％)。
1HNMR(DMSO-d6)δ：5.84(s，2H)，6.62(d，J＝9Hz，1H)，7.62(d，J＝P Hz，1H)，12.15(s，1H)。
胺6：N，N-二异丙基-β-丙氨酰胺的制备
Figure S2006800267463D00511
胺6
步骤I：N～3～-(叔丁氧羰基)-N，N-二异丙基-β-丙氨酰胺
将三乙胺(829μl；5.98mmol；3eq)和碘化2-氯-1-甲基吡啶鎓(1 527mg；5.98mmol；3eq)加入到二异丙基胺(280μl；1.99mmol；1eq)和boc-β-丙氨酸(414.7mg；2.19mmol；1.10eq)于DCM(30ml)的混合物中。室温下搅拌2日。反应用TLC(环己烷/EtOAc 1∶1)跟踪。反应混合物然后用饱和NH4Cl溶液洗涤两次，饱和NaHCO3溶液洗涤两次。有机层用Na2SO4干燥，过滤及浓缩，得760mg橙色油状物，用快速层析纯化(环己烷/EtOAc从9/1-1/1梯度，30min)。分离到标题化合物，呈微黄色固体(511.2mg；94％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.16(d，J＝6Hz，6H)，1.35(d，J＝9Hz，6H)，1.40(s，9H)，2.44(t，J＝6Hz，2H)，3.37(t，J＝6Hz，2H)，3.47(m，1H)，3.89(sept，J＝6Hz，1H)，5.05(br s，1H)1M+(ESI)：273.33。
步骤II：N，N-二异丙基-β-丙氨酰胺(胺6)
将上述步骤I获得的N-3-(叔丁氧羰基)-N，N-二异丙基-β-丙氨酰胺(100mg；0.37mmol；1eq)溶解于DCM(3.20ml)中。室温下加入三氟乙酸(0.80ml)。20min后反应完成(反应用TLC跟踪：环己烷/乙酸乙酯1∶1)。蒸去溶剂，加入DCM(5ml)，浓缩两次，获得胺6，呈无色油状物(105mg，定量产率)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.21(d，J＝6Hz，6H)，1.34(d，J＝6Hz，6H)，2.75(m，2H)，3.32(m，2H)，3.53(m，1H)，3.87(sept.，1H)，7.70(br s，3H)。
胺7：N-(2-羟基-1，1-二甲基乙基)-β-丙氨酰胺的制备
Figure S2006800267463D00521
胺7
步骤I：N～3～-(叔丁氧羰基)-N-(2-羟基-1，1-二甲基乙基)-β-丙氨酰胺
将三乙胺(0.83ml；5.97mmol；3eq)和碘化2-氯-1-甲基吡啶鎓(1525mg；5.97mmol；3eq)加入到2-氨基-2-甲基-1-丙醇(177.4mg；1.99mmol；1eq)和boc-β-丙氨酸(338.9mg；1.79mmol；0.9eq)于DCM(30ml)的混合物中。室温下搅拌2日。反应用TLC(环己烷/EtOAc 1∶1)跟踪。反应混合物然后用饱和NH4Cl溶液洗涤两次，饱和NaHCO3溶液洗涤两次。有机层用Na2SO4干燥，过滤及浓缩，得592mg橙色油状物，用快速层析纯化(环己烷/EtOAc从9/1-1/1梯度，30min)。分离到标题化合物，呈微黄色固体(331.1mg；64％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.28(s，6H)，1.42(s，9H)，2.41(m，2H)，3.37(m，2H)，3.57(s，2H)，5.99(br s，1H)。
步骤II：N-(2-羟基-1，1-二甲基乙基)-β-丙氨酰胺(胺7)
将上述步骤I获得的N～3～-(叔丁氧羰基)-N-(2-羟基-1，1-二甲基乙基)-β-丙氨酰胺(100mg；0.38mmol；1eq)溶解于DCM(3.2ml)中。室温下加入三氟乙酸(0.80ml)。20min后反应完成(TLC：环己烷/乙酸乙酯1∶1)。除去溶剂，加入DCM(5ml)，浓缩两次，获得胺7，呈无色油状物(105mg，定量产率)。
胺8：N-(叔丁基)-β-丙氨酰胺的制备
Figure S2006800267463D00531
胺8
步骤I：N～3～-(叔丁氧羰基)-N-(叔丁基)-β-丙氨酰胺
将三乙胺(832μl；6mmol；3eq)和碘化2-氯-1-甲基吡啶鎓(1 533mg；6mmol；3eq)加入到叔丁基胺(210μl；2mmol；1eq)和boc-β-丙氨酸(416.3mg；2.20mmol；1.10eq)于DCM(30ml)的混合物中。室温下搅拌过夜。反应用TLC(环己烷/EtOAc 1∶1)跟踪。反应混合物然后用饱和NH4Cl溶液洗涤两次，饱和NaHCO3溶液洗涤两次。有机层用Na2SO4干燥，过滤及浓缩，得639mg橙色油状物，用快速层析纯化(环己烷/EtOAc从9/1-1/1梯度，30min)。分离到标题化合物，呈微黄色固体(467.7mg；96％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.32(s，9H)，1.41(s，9H)，2.30(t，J＝6Hz，2H)，3.35(t，J＝6Hz，2H)，5.13(br s，1H)，5.44(br s，1H).M+(ESI)：245.3。
步骤II：N-(叔丁基)-β-丙氨酰胺(胺8)
将上述步骤I获得的N-3-(叔丁氧羰基)-N-(叔丁基)-β-丙氨酰胺(100mg；0.41mmol；1eq)溶解于DCM(3.2ml)中。室温下加入三氟乙酸(0.80ml)。20min后反应完成(TLC：环己烷/乙酸乙酯1∶1)。蒸去溶剂，加入DCM，浓缩两次，获得胺8，呈无色油状物(105mg，定量产率)。
胺9：3-(2，2-二甲基-1，3-噻唑烷-3-基)-3-氧丙烷-1-胺的制备
Figure S2006800267463D00541
胺9
步骤I：[3-(2，2-二甲基-1，3-噻唑烷-3-基)-3-氧丙基]氨基甲酸叔丁酯
将三乙胺(832μl；6mmol；3eq)和碘化2-氯-1-甲基吡啶鎓(1533mg；6mmol；3eq)加入到2，2-二甲基噻唑烷(234.4mg；2mmol；1eq)和boc-β-丙氨酸(416.3mg；2.20mmol；1.10eq)于DCM(30ml)的混合物中。室温下搅拌2日。反应用TLC(环己烷/EtOAc 1∶1)跟踪。反应混合物然后用饱和NH4Cl溶液洗涤两次，饱和NaHCO3溶液洗涤两次。有机层用Na2SO4干燥，过滤及浓缩，得497mg橙色油状物，用快速层析纯化(环己烷/EtOAc从9/1-1/1梯度，30min)。分离到标题化合物，呈灰白色固体(45.5mg；8％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.42(s，9H)，1.81(s，6H)，2.45(t，J＝6Hz，2H)，2.97(t，J＝6Hz，2H)，3.38(m，2H)，3.82(t，J＝6Hz，2H)，5.21(br s，1H).M+(ESI)：289.2。
步骤II：3-(2，2-二甲基-1，3-噻唑烷-3-基)-3-氧丙烷-1-胺(胺9)
将上述步骤I获得的[3-(2，2-二甲基-1，3-噻唑烷-3-基)-3-氧丙基]氨基甲酸叔丁酯(43.3mg；0.15mmol；1eq)溶解于DCM(1.60ml)中。室温下加入三氟乙酸(0.40ml)。20min后反应完成(TLC：环己烷/乙酸乙酯)。蒸去溶剂，加入DCM(5ml)，浓缩两次，获得胺9，呈无色油状物(45mg，定量产率)。
胺10：3-(4，4-二甲基-1，3-噁唑烷-3-基)-3-氧丙烷-1-胺的制备
胺10
步骤I：[3-(4，4-二甲基-1，3-噁唑烷-3-基)-3-氧丙基]氨基甲酸叔丁酯
将三乙胺(832μl；6mmol；3eq)和碘化2-氯-1-甲基吡啶鎓(1533mg；6mmol；3eq)加入到4，4-二甲基噁唑烷(287μl；2mmol；1eq)和boc-β-丙氨酸(416.3mg；2.20mmol；1.10eq)于DCM(30ml)的混合物中。室温下搅拌2日。反应用TLC(环己烷/EtOAc 1∶1)跟踪。反应混合物然后用饱和NH4Cl溶液洗涤两次，饱和NaHCO3溶液洗涤两次。有机层用Na2SO4干燥，过滤及浓缩，得760mg橙色油状物，用快速层析纯化(环己烷/EtOAc从9/1-1/1梯度，30min)。分离到标题化合物，呈灰白色固体(420.5mg；77％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.41(s，9H)，1.46(s，6H)，2.29(t，J＝6Hz，2H)，3.38(t，J＝6Hz，2H)，3.72(s，2H)，4.90(s，2H)，5.17(br s，1H).M+(ESI)：273.23。
步骤II：3-(4，4-二甲基-1，3-噁唑烷-3-基)-3-氧丙烷-1-胺(胺10)
将上述步骤I获得的[3-(4，4-二甲基-1，3-噁唑烷-3-基)-3-氧丙基]氨基甲酸叔丁酯(100mg；0.37mmol；1eq)溶解于DCM(3.20ml)中。室温下加入三氟乙酸(0.80ml)。20min后反应完成(TLC：环己烷/乙酸乙酯1∶1)。蒸去溶剂，加入DCM(5ml)，浓缩两次，获得胺10，呈无色油状物(105mg，定量产率)。
胺11：N-(2，2-二甲基丙基)甘氨酰胺的制备
Figure S2006800267463D00552
胺11
步骤I：{2-[(2，2-二甲基丙基)氨基]-2-氧乙基}氨基甲酸叔丁酯
将三乙胺(832μl；6mmol；3eq)和碘化2-氯-1-甲基吡啶鎓(1533mg；6mmol；3eq)加入到新戊基胺(174.3mg；2mmol；1eq)和boc-甘氨酸(385.4mg；2.20mmol；1.10eq)于DCM(30ml)的混合物中。室温下搅拌过夜。反应用TLC(环己烷/EtOAc 1∶1)跟踪。反应混合物然后用饱和NH4Cl溶液洗涤两次，饱和NaHCO3溶液洗涤两次。有机层用Na2SO4干燥，过滤及浓缩，得946mg橙色油状物，用快速层析纯化(环己烷/EtOAc从9/1-1/1梯度，30min)。分离到标题化合物，呈微黄色固体(96.7mg；20％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ0.89(s，9H)，1.44(s，9H)，3.06(d，J＝6Hz，2H)，3.76(m，2H)，5.11(br s，1H)，6.22(br s，1H).M-(ESI)：243.5；M+(ESI)：245.3。
步骤II：N-(2，2-二甲基丙基)甘氨酰胺(胺11)
将上述步骤I获得的{2-[(2，2-二甲基丙基)氨基]-2-氧乙基}氨基甲酸叔丁酯(96.7mg；0.40mmol；1 eq)溶解于DCM(3.20ml)中。室温下加入三氟乙酸(0.80ml)。20min后反应完成(TLC：环己烷/乙酸乙酯1∶1)。蒸去溶剂，加入DCM，浓缩两次，获得胺11，呈无色油状物(102.2mg，定量产率)。
胺12：3-氮杂环辛烷(azocan)-1-基-3-氧丙烷-1-胺的制备
Figure S2006800267463D00561
胺12
步骤I：(3-氮杂环辛烷-1-基-3-氧丙基)氨基甲酸叔丁酯
将三乙胺(832μl；6mmol；3eq)和碘化2-氯-1-甲基吡啶鎓(1533mg；6mmol；3eq)加入到七亚甲基亚胺(254μl；2mmol；1eq)和boc-β-丙氨酸(416.3mg；2.20mmol；1.10eq)于DCM(30ml)的混合物中。室温下搅拌过夜。反应用TLC(环己烷/EtOAc 1∶1)跟踪。反应混合物然后用饱和NH4Cl溶液洗涤两次，饱和NaHCO3溶液洗涤两次。有机层用Na2SO4干燥，过滤及浓缩，得1.066g橙色油状物，用快速层析纯化(环己烷/EtOAc从9/1-1/1梯度，30min)。分离到标题化合物，呈微黄色固体(477mg；84％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.40(s，9H)，1.53(m，6H)，1.70(m，4H)，2.49(t，J＝6Hz，2H)，3.35(t，J＝6Hz，2H)，3.42(quint，J＝6Hz，4H)，5.32(br s，1H).M+(ESI)：285.4。
步骤II：3-氮杂环辛烷-1-基-3-氧丙烷-1-胺(胺12)
将上述步骤I获得的(3-氮杂环辛烷-1-基-3-氧丙基)氨基甲酸叔丁酯(113.8mg；0.40mmol；1eq)溶解于DCM(3.20ml)中。室温下加入三氟乙酸(0.80ml)。20min后反应完成(TLC：环己烷/乙酸乙酯)。蒸去溶剂，加入DCM，浓缩两次，获得胺12，呈无色油状物(119mg，定量产率)。
胺13：2-(1-异丙基-1H-咪唑-4-基)乙胺的制备
Figure S2006800267463D00571
胺13
步骤I：7，8-二氢咪唑并[1，5-c]嘧啶-5(6H)-酮：
将2-(1H-咪唑-4-基)乙胺(26.8g；240.9mmol；1eq)和CDI(39.1g；240.9mmol；1eq)于DMF(401.7ml)中的混合物，于50℃搅拌2日。混合物浓缩至100ml，加入乙腈(200ml)。滤出生成的沉淀，用乙腈(2×50ml)洗涤，真空干燥，获得标题化合物，未经进一步纯化直接用于下一步(28.3g；85％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.87(m，2H)，3.34(m，2H)，6.78(d，J＝1Hz，1H)，8.04(d，J＝1Hz，1H)，8.19(br s，1H)。
步骤II：碘化2-异丙基-5-氧-5，6，7，8-四氢咪唑并[1，5-c]嘧啶-2-鎓
将2-碘丙烷(61.5ml；616.4mmol；3eq)加入到上述步骤I获得的7，8-二氢咪唑[1，5-c]嘧啶-5(6H)-酮(28.18g；205.5mmol；1eq)的DMF(140.9ml)悬浮液中。室温下搅拌反应，直至获得红色悬浮液。反应混合物浓缩，加入乙腈(200ml)。滤出生成的沉淀，用乙腈(2×50ml)洗涤，真空干燥，获得标题化合物，未经进一步纯化直接用于下一步(45.95g，73％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.49(d，J＝6.5Hz，6H)，3.02(t，J＝6.5Hz，2H)，3.48(td，J＝2.8Hz，J＝6.5Hz，2H)，4.72(sept，J＝6.5Hz，1H)，7.83(d，J＝1.5Hz，1H)，9.01(br s，1H)，9.76(d，J＝1.5Hz，1H).
步骤III：2-(1-异丙基-1H-咪唑-4-基)乙胺(胺13)
上述步骤II获得的碘化2-异丙基-5-氧-5，6，7，8-四氢咪唑[1，5-c]嘧啶-2-鎓(41.12g；133.9mmol；1eq.)的盐酸水溶液(411.2ml；6M)于100℃搅拌3日。蒸去溶剂，加入乙腈(200ml)。滤出生成的沉淀，用乙腈(2×50ml)洗涤，真空干燥，获得胺13，未经进一步纯化直接用于下一步(18.6g，61％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.46(d，J＝6.5Hz，6H)，3.00(t，J＝6.5Hz，2H)，3.14(m，2H)，4.60(sept，J＝6.5Hz，1H)，7.76(d，J＝1.5Hz，1H)，8.23(br s，3H)，9.18(d，J＝1.5Hz，1H)，14.85(br s，1H).M+(ESI)：154.5。
胺14：2-(1-乙基-1H-咪唑-4-基)乙胺的制备
Figure S2006800267463D00581
胺14
步骤I：7，8-二氢咪唑并[1，5-c]嘧啶-5(6H)-酮
将2-(1H-咪唑-4-基)乙胺(26.8g；240.9mmol；1eq)和CDI(39.1g；240.9mmol；1eq)于DMF(402ml)中的混合物在50℃下搅拌2日。溶剂浓缩至100ml，加入乙腈(200ml)。滤出生成的沉淀，用乙腈(2×50ml)洗涤，真空干燥，获得标题化合物，未经进一步纯化直接用于下一步(28.18g；85％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.87(m，2H)，3.34(m，2H)，6.78(d，J＝1Hz，1H)，8.04(d，J＝1Hz，1H)，8.19(br s，1H)。
步骤II：溴化2-乙基-5-氧-5，6，7，8-四氢咪唑并[1，5-c]嘧啶-2-鎓
上述步骤I获得的7，8-二氢咪唑并[1，5-c]嘧啶-5(6H)-酮(500mg；3.65mmol；1eq)和溴乙烷(816μl；10.94mmol；3eq)的DMF(7ml)悬浮液等分为2份。180℃微波照射加热20min。合并反应混合物，加入乙腈(15ml)。滤出生成的沉淀，用乙腈洗涤，真空干燥，获得标题化合物，未经进一步纯化直接用于下一步(118.3mg；13％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.43(t，J＝6Hz，3H)，3.01(t，J＝6Hz，2H)，3.47(td，J＝3Hz，J＝6Hz，2H)，4.24(q，J＝6Hz，2H)，7.70(d，J＝3Hz，1H)，9.02(br s，1H)，9.73(d，J＝3Hz，1H)。
步骤III：2-(1-异丙基-1H-咪唑-4-基)乙胺(胺14)
上述步骤II获得的溴化2-乙基-5-氧-5，6，7，8-四氢咪唑并[1，5-c]嘧啶-2-鎓(118.6mg；0.48mmol；1eq)的盐酸水溶液(5ml；5M；25mmol；52eq)于100℃搅拌2日。蒸去溶剂，加入乙腈(10ml)。滤出生成的沉淀，用乙腈洗涤，真空干燥，获得胺14，未经进一步纯化直接用于下一步(115.7mg，定量产率)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.40(t，J＝6Hz，3H)，2.98(m，2H)，3.11(m，2H)，4.15(q，J＝6Hz，2H)，7.65(s，1H)，8.13(br s，3H)，9.11(s，1H)。
胺15：2-(5-叔丁基-1，2，4-噁二唑-3-基)乙胺的制备
Figure S2006800267463D00591
胺15
步骤I：[(3E)-3-氨基-3-(羟亚氨基(hydroxyimino))丙基]氨基甲酸叔丁酯
将N-(2-氰基乙基)氨基甲酸叔丁酯(40g；235mmol；1eq.)和羟胺(41.6ml；705mmol；3eq.)溶解于EtOH(800ml)中。所得溶液加热回流2小时。反应用NMR跟踪。反应混合物然后冷却至室温，真空浓缩，获得标题化合物，呈白色固体(47.5g，99％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.36(s，9H)，2.08(t，J＝6Hz，2H)，3.08(m，2H)。
步骤II：((3Z)-3-氨基-3-{[(2，2-二甲基丙酰基)氧基]亚胺基}丙基)氨基甲酸叔丁酯
0℃下，将N，N-二异丙基乙基胺(80.6ml；467.42mmol；2eq.)加入到上述步骤I获得的[(3E)-3-氨基-3-(肟基)丙基]氨基甲酸叔丁酯(47.50g；233.7mmol；1eq.)的DCM(950ml)溶液中。然后滴加三甲基乙酰氯(37.4ml；303.8mmol；1.30eq.)的DCM(200ml)溶液。反应混合物于0℃搅拌1h，然后暖至室温过夜。真空浓缩反应混合物至600ml，然后用EtOAc(2.5l)稀释。所得有机相用水(1l)和盐水(1l)洗涤，MgSO4干燥。过滤及蒸去溶剂后，获得浅褐色固体。用EtOAc(500ml)重结晶，得标题化合物，呈白色固体(27.82g，41％)。水相生成白色沉淀。滤出，溶解于DCM(2l)，用水(600ml)和盐水(600ml)洗涤，MgSO4干燥。过滤及蒸去溶剂后，分离到第2部分标题化合物，呈白色固体(23.3g，35％)。分离到的标题化合物总收率76％(51.1g)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.19(s，9H)，1.38(s，9H)，2.19(t，J＝8Hz，2H)，3.15(m，2H)，6.17(br s，2H)，6.78(m，1H)。
步骤III：[2-(5-叔丁基-1，2，4-噁二唑-3-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯
室温，N2氛围下，边搅拌边将四丁基氟化铵(177.5ml；1M；177.5mmol；1eq.)的无水THF(400ml)溶液滴加到上述步骤II获得的((3Z)-3-氨基-3-{[(2，2-二甲基丙酰基)氧基]亚胺基}丙基)氨基甲酸叔丁酯(51g；177mmol；1eq.)的无水THF(1000ml)悬浮液中。滴加完毕后，最初的白色悬浮液变成黄色溶液。反应用NMR跟踪。2h后反应完成。反应混合物倒入EtOAc(11)中，用水(3×700ml)和盐水(3×700ml)洗涤。有机层用MgSO4干燥，过滤及浓缩。获得标题化合物，呈浅褐色固体(46.6g，98％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.36(s，18H)，2.77(t，J＝7Hz，2H)，3.25(m，2H)，6.91(m，1H)。
步骤IV：2-(5-叔丁基-1，2，4-噁二唑-3-基)乙胺(胺15)
将上述步骤III获得的[2-(5-叔丁基-1，2，4-噁二唑-3-基)乙基]氨基甲酸叔丁酯(46.60g；173.0mmol；1eq.)的无水DCM(932ml)溶液冷却至0℃，滴加三氟乙酸(256ml；3460mmol；20eq.)，10min完成。反应用NMR跟踪。0℃下30min后，真空浓缩溶液。加入DCM，浓缩4次后再高真空浓缩，获得棕色油状物。该油状物溶解于DCM(600ml)中，用饱和NaHCO3(150ml)洗涤，MgSO4干燥。过滤及蒸去溶剂后，分离到胺15，呈棕色油状物(20.8g，71％)。TFA/碱＝0.018。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.37(s，9H)，2.87(t，J＝7Hz，2H)，3.03(t，J＝7Hz，2H)，5.17(br s，2H)。
胺16：2-(5-异丙基-1，2，4-噁二唑-3-基)乙胺的制备
Figure S2006800267463D00611
胺16
步骤I：[(3E)-3-氨基-3-(羟亚氨基)丙基]氨基甲酸叔丁酯
将N-(2-氰基乙基)氨基甲酸叔丁酯(40g；235mmol；1eq.)和羟胺(41.6ml；705mmol；3eq.)溶解于EtOH(800ml)中。所得溶液加热回流2小时。反应进程用1HNMR跟踪。2小时后反应混合物冷却至室温，高真空浓缩，获得标题化合物，呈白色固体(47.5g，99％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.36(s，9H)，2.08(t，J＝6Hz，2H)，3.08(m，2H)。
步骤II：[2-(5-异丙基-1，2，4-噁二唑-3-基)乙基]氨基甲酸叔丁酯
将异丁酸酐(2.0ml；12.0mmol；24.4eq)加入到上述步骤I获得的[(3E)-3-氨基-3-(羟亚氨基)丙基]氨基甲酸叔丁酯(100mg；0.49mmol；1eq)中。所得混合物于180℃微波照射加热20min。白色沉淀变成黄色溶液。加入乙醚，有机层用饱和NaHCO3溶液洗涤两次，饱和NH4Cl溶液洗涤两次。有机层用MgSO4干燥，过滤及浓缩，获得标题化合物，未经进一步纯化直接用于下一步(88.9mg；71％)。
步骤III：2-(5-异丙基-1，2，4-噁二唑-3-基)乙胺(胺16)
将上述步骤II获得的[2-(5-异丙基-1，2，4-噁二唑-3-基)乙基]氨基甲酸叔丁酯(125.1mg；0.49mmol；1eq)溶解于DCM(3.20ml)中。室温下加入三氟乙酸(0.80ml)。20min后反应完成，蒸去溶剂。加入DCM，浓缩两次，获得胺16，呈无色油状物(132mg，定量产率)。
实施例1：2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-羧酸乙酯(1)
Figure S2006800267463D00621
将N-[5-(溴乙酰基)-4-甲基-1，3-噻唑-2-基]乙酰胺(中间体1)(138.6mg；0.50mmol；1eq.)溶解于二噁烷(5ml)中。加入硫代草氨酸乙酯(Aldrich)(66.6mg；0.50mmol；1eq.)，混合物于65℃搅拌过夜。反应混合物冷却至室温。预期产物析出。过滤，用二噁烷洗涤。为除去痕量的HBr，再溶解于DCM，加入过量的PS-DIEA(Argonaut)。15min后，滤去树脂，蒸去溶剂，获得化合物(1)，呈灰白色固体(72.1mg；46％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.37(m，3H)，2.17(s，3H)，2.52(m，4H)，4.44(m，2H)，8.14(s，1H)，12.20(s，1H).M-(ESI)：310；M+(ESI)：312.HPLC(方法A)，Rt：2.79min(纯度：97.9％)。
实施例2：2’-(乙酰氨基)-N-烯丙基-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺(2)
Figure S2006800267463D00622
在一个微波管中，将2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-羧酸乙酯，化合物(1)(1.0g，3.21mmol，1eq.)溶解于烯丙胺(Fluka)(6ml)中。反应混合物于80℃微波照射加热20min。反应完成，但观察到部分脱去了乙酰基。蒸去溶剂，粗产品于MeOH中重结晶。分离到化合物(2)，呈浅黄色固体(492.9mg；47％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.15(s，3H)，2.50(s，3H)，3.91(m，2H)，5.10(d，J＝12Hz，1H)，5.17(d，J＝18Hz，1H)，5.88(m，1H)，7.99(s，1H)，8.94(t，J＝5Hz，1H)，12.14(br s，1H).M-(ESI)：321.17；M+(ESI)：323.18.HPLC(方法A)，Rt：2.84min(纯度：99.6％)。
实施例3：N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]乙酰胺(3)
Figure S2006800267463D00631
将N-[5-(溴乙酰基)-4-甲基-1，3-噻唑-2-基]乙酰胺(中间体1)(1.0g；2.79mmol；1eq.)溶解于EtOH(25ml)中。加入三乙胺(980μl；6.98mmol；2.50eq.)和2-氰基硫代乙酰胺(Aldrich)(279.7mg；2.79mmol；1eq.)。混合物室温下搅拌2小时30分钟。蒸去溶剂，粗产品用快速层析纯化，以环己烷/EtOAc为洗脱剂梯度洗脱。分离到化合物(3)，呈灰白色粉末(680.3mg；88％)。HPLC(方法A)，Rt 2.30min(纯度：92.79％)。化合物(3)再于EtOAc中结晶，获得无色针状结晶(412.60mg；52.75％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.13(s，3H)，2.47(s，3H)，4.61(s，2H)，7.71(s，1H)，12.12(br s，1H).M-(ESI)：277；M+(ESI)：279.HPLC(方法A)，Rt：2.28min(纯度：99.5％)。
实施例4：2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-羧酸(4)
Figure S2006800267463D00632
将2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-羧酸乙酯，化合物(1)(200mg；0.64mmol；1eq.)的THF(6ml)溶液冷却至0℃。滴加氢氧化钠(1.60ml；5M；8.03mmol；12.50eq.)。1h后，已检测不到起始原料。混合物0℃下用HCl 5M溶液(1.607ml；5M；8.03mmol；12.50eq.)中和。滤出所得沉淀，用水和Et2O洗涤，获得化合物(4)，呈灰白色粉末(137.5mg；76％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.12(s，3H)，2.44(s，3H)，7.48(s，1H)，12.01(s，1H).M-(ESI)：282；M+(ESI)：284.HPLC(方法A)，Rt：1.90min(纯度：99.50％).C10H9N3O3S2 2.0 H2O计算值：C37.61；H4.10；N13.16；实验值：C37.73；H3.79；N13.14。
2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-羧酸，化合物(4)钾盐的制备：将母体分子(90.6mg；0.32mmol；1eq.)悬浮于THF(3ml)和水(3ml)中。加入氢氧化钾(640μl；0.50M；0.32mmol；1eq.)。溶液用水稀释，棉花过滤后冻干。分离到化合物(4)的钾盐，呈灰白色固体(104.1mg；定量)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.12(s，3H)，2.44(s，3H)，7.48(s，1H)，12.01(br s，1H).M-(ESI)：282；M+(ESI)：284.HPLC(方法A)，Rt：1.87min(纯度：99.4％)。
实施例5：2’-(乙酰氨基)-N-(2-甲氧基乙基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2- 甲酰胺(5)
Figure S2006800267463D00641
在一个微波管中，将2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-羧酸乙酯，化合物(1)(43.8mg；0.14mmol；1eq.)悬浮于2-甲氧基乙基胺(Fluka)(0.5ml)中。反应混合物于80℃微波照射加热10min。反应完成。蒸去溶剂，粗产品于MeOH中重结晶。分离到化合物(5)，呈浅黄色固体(18.5mg；39％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.14(s，3H)，2.49(s，3H)，3.26(s，3H)，3.47(m，4H)，7.98(s，1H)，8.68(sl，1H)，12.10(sl，1H).M-(ESI)：339.07；M+(ESI)：341.09.HPLC(方法A)，Rt：2.49min(纯度：99.6％)。
实施例6：2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-N-(四氢呋喃-2-基甲基)-4，5’-联-1，3-噻 唑-2-甲酰胺(6)
Figure S2006800267463D00642
在一个微波管中，将2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-羧酸乙酯，化合物(1)(200mg；0.64mmol；1eq.)溶解于氢糠基胺(Fluka)(2.0ml)中。反应混合物于80℃微波照射加热20min。反应完成，有7％脱去了乙酰基。蒸去溶剂，粗产品于MeOH中重结晶。分离到化合物(6)，呈黄色固体(130.5mg；56％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.56(m，1H)，1.78(m，3H)，2.14(s，3H)，2.49(s，3H，CH3CO)，3.32(m，2H)，3.64(m，1H)，3.78(m，1H)，4.02(m，1H)，7.98(s，1H)，8.64(s，1H，NH)，12.14(s，1H，NH).M-(ESI)：365；M+(ESI)：367.HPLC(方法A)，Rt：2.75min(纯度：98.5％)。
实施例7：2’-(乙酰氨基)-N-[2-(二甲基氨基)乙基]-4’甲基-4，5’-联-1，3-噻 唑-2-甲酰胺(7)
Figure S2006800267463D00651
在一个微波管中，将2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-羧酸乙酯，化合物(1)(150mg；0.48mmol；1eq.)溶解于2-二甲基氨基乙基胺(Fluka)(2.0ml)中。反应混合物于80℃微波照射加热20min。反应完成，有3％脱去了乙酰基。蒸去溶剂，粗产品于MeOH中重结晶。分离到化合物(7)，呈灰白色固体(112mg；66％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.20(m，9H)，2.57(s，4H)，3.46(m，3H)，8.05(s，1H)，8.64(s，1H)，11.35(s，1H).M-(ESI)：352；M+(ESI)：354.HPLC(方法A)，Rt：1.68min(纯度：99.6％)。
实施例8：N-[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]乙酰胺(8)
Figure S2006800267463D00652
在一个微波管中，将2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-羧酸乙酯，化合物(1)(1000mg；3.21mmol；1eq.)溶解于吗啉(Fluka)(7.0ml)中。反应混合物于80℃微波照射加热30min。反应完成。蒸去溶剂，粗产品于MeOH中重结晶。分离到化合物(8)，呈浅黄色固体(1.320g；46％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.13(s，3H)，2.52(s，3H)，3.68(s，6H)，4.32(s，2H)，8(s，1H)，12.06(s，1H).M-(ESI)：351；M+(ESI)：353.HPLC(方法A)，Rt：2.48min(纯度：98.7％)。
实施例9：N-{4’-甲基-2-[(4-甲基哌嗪-1-基)羰基]-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基} 乙酰胺三氟乙酸盐(9)
Figure S2006800267463D00661
在一个微波管中，将2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-羧酸乙酯，化合物(1)(150mg；0.48mmol；1eq.)溶解于1-甲基哌嗪(Fluka)(2.0ml)中。反应混合物于80℃微波照射加热20+5min。反应完成。蒸去溶剂，粗产品用制备HPLC纯化。分离到化合物(9)的三氟乙酸盐，呈浅黄色固体(140mg；60％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.14(s，3H)，2.45(s，3H)，2.83(s，3H)，3.20(m，3H)，3.54(m，3H)，4.52(m，2H)，8.07(s，1H)，12.26(s，1H).M-(ESI)：364；M+(ESI)：366.HPLC(方法A)，Rt：1.70min(纯度：99.7％)。
实施例10：2’-(乙酰氨基)-N-[3-(二甲基氨基)丙基]-4’-甲基-4，5’-联-1，3- 噻唑-2-甲酰胺，三氟乙酸盐(10)
在一个微波管中，将2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-羧酸乙酯，化合物(1)(150mg；0.48mmol；1eq.)溶解于N，N-二甲基-1，3-丙二胺(Fluka)(2.0ml)中。反应混合物于80℃微波照射加热20min。反应完成。蒸去溶剂，粗产品用制备HPLC纯化。分离到化合物(10)的三氟乙酸盐，呈浅黄色固体(108mg；47％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.90(m，2H)，2.14(s，3H)，2.45(s，3H)，2.78(s，6H)，3.07(m，2H)，3.35(m，2H)，8(s，1H)，8.88(s，1H)，12.16(s，1H).M-(ESI)：366；M+(ESI)：368.HPLC(方法A)，Rt：1.76min(纯度：100％)。
实施例11：2’-(乙酰氨基)-N-(2-羟基乙基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲 酰胺(11)
Figure S2006800267463D00671
在一个微波管中，将2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-羧酸乙酯，化合物(1)(150mg；0.48mmol；1eq.)溶解于乙醇胺(Fluka)(2.0ml)中。反应混合物于80℃微波照射加热20min。反应完成。蒸去溶剂，粗产品用制备HPLC纯化。分离到化合物(11)，呈灰白色固体(15mg；7％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.14(s，3H)，2.45(s，3H)，3.37(m，2H)，3.52(m，2H)，7.98(s，1H)，8.59(m，1H)，12.14(s，1H).M-(ESI)：325；M+(ESI)：327.HPLC(方法A)，Rt：2.02min(纯度：98.9％)。
实施例12：2’-(乙酰氨基)-N-(2-氰基乙基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲 酰胺(12)
Figure S2006800267463D00672
在一个微波管中，将2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-羧酸乙酯，化合物(1)(150mg；0.48mmol；1eq.)溶解于N-(2-氰基乙基)胺(Lancaster)(2.0ml)中。反应混合物于80℃微波照射加热20min。反应完成。蒸去溶剂，粗产品于MeOH中重结晶。分离到化合物(12)，呈浅黄色固体(127.1mg；78％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.13(s，3H)，2.48(s，3H)，2.81(m，2H)，3.55(m，2H)，8.01(s，1H)，9.02(s，1H)。M-(ESI)：334；M+(ESI)：336.HPLC(方法A)，Rt：2.43min(纯度：98.5％)。
实施例13：2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-N-1H-四唑-5-基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲 酰胺，钾盐(13)
Figure S2006800267463D00681
步骤I：2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-酰氯
将2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-羧酸，化合物(4)(100mg；0.35mmol；1eq.)悬浮于DCM(6ml)中。加入草酰氯(92μl；1.06mmol；3eq.)，然后加入无水二甲基甲酰胺(5.5μl；0.07mmol；0.20eq.)。2小时后，取样，用MeOH淬灭，显示反应完成。蒸去溶剂，获得2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-酰氯，未经进一步纯化直接用于下一步。HPLC(方法A)，Rt：1.90min(纯度：92.0％)。
步骤II：2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-N-1H-四唑-5-基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺，钾盐(13)
将上述步骤I获得的2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-碳酰氯(106.51mg；0.35mmol；1eq.)溶解于THF(8ml)和DCM(4ml)中。加入5-氨基四唑(Aldrich)(30.0mg；0.35mmol；1eq.)和三乙胺(49μl；0.35mmol；1eq.)，混合物室温下搅拌2.5h。蒸去溶剂，粗产品悬浮于MeOH，过滤，获得化合物(13)，呈棕色固体。
2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-N-1H-四唑-5-基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺(化合物(13))钾盐的制备：将母体化合物溶解于THF(5ml)和水(5ml)中。加入氢氧化钾0.5N溶液(706μl)。混合物室温下搅拌10min。棉花过滤后冻干，分离到化合物(13)的钾盐，呈黄色粉末(81.9mg；60％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.91(s，3H)，2.45(s，3H)，3.32(s，2H)，7.57(s，1H)，9.97(s，1H).M-(ESI)：349.01；M+(ESI)：351.HPLC(方法A)，Rt：2.17min(纯度：92.7％)。
实施例14：4-({[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]羰基}氨基) 苯甲酸，钾盐(14)
Figure S2006800267463D00691
将上述实施例13步骤I制得的2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-碳酰氯(106.5mg；0.35mmol；1eq.)溶解于THF(8ml)和DCM(4ml)中。加入4-氨基苯甲酸(Aldrich)(48.4mg；0.35mmol；1eq.)和三乙胺(49μl；0.35mmol；1eq.)，混合物室温下搅拌2.5h。蒸去溶剂，粗产品悬浮于MeOH，过滤，获得化合物(14)，呈棕色固体。
4-({[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]羰基}氨基)苯甲酸(化合物(14))钾盐的制备：将母体化合物溶解于THF(5ml)和水(5ml)中。加入氢氧化钾0.5N溶液(706μl)。混合物室温下搅拌10min。棉花过滤后冻干，分离到化合物(14)的钾盐，呈棕色粉末(65.9mg；42％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.88(s，3H)，2.36(s，3H)，3.37(s，2H)，7.57(s，1H)，7.66(d，J＝8Hz，2H)，7.81(d，J＝8Hz，2H)，10.28(s，1H).M-(ESI)：401.07；M+(ESI)：403.02.HPLC(方法A)，Rt：3.19min(纯度：95.9％)。
实施例15：3-({[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]羰基}氨基) 苯甲酸，钾盐(15)
Figure S2006800267463D00701
将上述实施例13步骤I制得的2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-碳酰氯(106.5mg；0.35mmol；1eq.)溶解于THF(8ml)和DCM(2ml)中。加入3-氨基苯甲酸(Emkachem)(48.4mg；0.35mmol；1eq.)和三乙胺(49μl；0.35mmol；1eq.)，混合物室温下搅拌2.5h。生成橙色沉淀，过滤，再用MeOH结晶纯化，获得化合物(15)。
3-({[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]羰基}氨基)苯甲酸(化合物(15))钾盐的制备：将母体化合物溶解于THF(5ml)和水(5ml)中。加入氢氧化钾0.5N溶液(706μl)。混合物室温下搅拌10min。棉花过滤后冻干，分离到化合物(15)的钾盐，呈橙色粉末(53.8mg；35％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.90(s，3H)，2.38(s，3H)，3.34(s，2H)，7.21(t，J＝8Hz，1H)，7.58(m，2H)，7.69(m，1H)，8.14(s，1H)，10.22(s，1H).M-(ESI)：401.10；M+(ESI)：402.99.HPLC(方法A)，Rt：3.18min(纯度：94.0％)。
实施例16：2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-N-[3-(1H-四唑-5-基)苯基]-4，5’-联-1，3- 噻唑-2-甲酰胺钾盐(16)
将上述实施例13步骤I制得的2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-碳酰氯(106.5mg；0.35mmol；1eq.)溶解于THF(8ml)和DCM(4ml)中。加入5-(3-氨基苯基)四唑(Avocado)(56.9mg；0.35mmol；1eq.)和三乙胺(49μl；0.35mmol；1eq.)，混合物室温下搅拌2.5h。生成棕色沉淀，蒸去溶剂，粗产品于MeOH中结晶，获得化合物(16)，呈棕色固体。
2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-N-[3-(1H-四唑-5-基)苯基]-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺(化合物(16))钾盐的制备：将母体化合物溶解于THF(5ml)和水(5ml)中。加入氢氧化钾0.5N溶液(706μl)。混合物室温下搅拌10min。棉花过滤后冻干，分离到化合物(16)的钾盐，呈黑橙色粉末(66.4mg；40.5％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.02(s，3H)，2.5(s，3H)，3.32(s，2H)，7.35(t，J＝8Hz，1H)，7.73(m，2H)，7.83(s，1H)，8.41(t，J＝11Hz，1H)，10.5(s，1H).M-(ESI)：425.09；M+(ESI)：427.13.HPLC(方法A)，Rt：3.12min(纯度：89.7％)。
实施例17：2’-(乙酰氨基)-N-苄基-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺(17)
在一个微波管中，将2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-羧酸乙酯，化合物(1)(150mg；0.48mmol；1eq.)溶解于溶解于苄胺(Fluka)(2.0ml)中。反应混合物于80℃微波照射加热20min。反应完成。蒸去溶剂，粗产品用制备HPLC纯化。分离到化合物(17)，呈灰白色固体(45mg，25％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.09(s，3H)，2.16(s，3H)，4.50(d，J＝9Hz，2H)，7.30-7.45(m，5H)，8.02(s，1H)，9.37(t，J＝9Hz，1H).M-(ESI)：371.11；M+(ESI)：373.13.(方法A)，Rt：3.52min(纯度：96.2％)。
实施例18：2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-N-丙基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺(18)
Figure S2006800267463D00712
在一个微波管中，将2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-羧酸乙酯，化合物(1)(350mg；1.124mmol；1eq.)溶解于N-丙基胺(Fluka)(5.0ml)中。反应混合物于80℃微波照射加热20min。反应完成，有15％脱去了乙酰基。蒸去溶剂，粗产品于MeOH中结晶纯化。分离到化合物(18)，呈黄色固体(123mg；38％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ0.87(t，J＝6Hz，3H)，1.55(m，2H)，2.14(s，3H)，3.24(m，2H)，3.31(s，3H)，7.96(s，1H)，8.75(t，J＝6Hz，1H)，11.5(br s，1H).M-(ESI)：323.14；M+(ESI)：325.18.HPLC(方法A)，Rt：3min(纯度：97.6％)。
实施例19：2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-N-[4-(1H-四唑-5-基)苯基]-4，5’-联-1，3- 噻唑-2-甲酰胺，钾盐(19)
Figure S2006800267463D00721
将上述实施例13步骤I制得的2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-碳酰氯(106.5mg；0.35mmol；1eq.)溶解于THF(8ml)和DCM(4ml)中。加入4-(2H-四唑-3-基)苯胺盐酸盐(Asimex)(69.7mg；0.35mmol；1eq.)和三乙胺(49μl；0.35mmol；1eq.)，混合物室温下搅拌2.5h。蒸去溶剂，粗产品悬浮于MeOH/Et2O，过滤，获得化合物(19)，呈棕色固体(63.4mg，42％)。HPLC(方法A)，Rt 3.07min(纯度：86.1％)。
化合物(19)再用制备HPLC纯化(11.8mg；17％)。
2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-N-[4-(1H-四唑-5-基)苯基]-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺(化合物(19))钾盐的制备：将母体化合物(11.8mg；0.028mmol)溶解于THF(2ml)和水(2ml)中。加入氢氧化钾0.5N溶液(56.5μl；0.50M；0.03mmol；1eq.)。混合物室温下搅拌10min。棉花过滤后冻干，分离到化合物(19)的钾盐，呈黄色固体(11.8mg；92％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.16(s，3H)，2.53(s，3H)，7.82(d，J＝9Hz，2H)，7.95(d，J＝9Hz，2H)，8.07(s，1H)，10.57(s，1H).M-(ESI)：425；M+(ESI)：427.HPLC(方法A)，Rt：3.08min(纯度：95.5％)。
实施例20：3-({[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]羰基}氨 基)-2-羟基苯甲酸，钾盐(20)
将上述实施例13步骤I制得的2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-碳酰氯(106.5mg；0.35mmol；1eq.)溶解于THF(8ml)和DCM(4ml)中。加入3-氨基水杨酸(TCI-US)(54.05mg；0.35mmol；1eq.)和三乙胺(97μl；0.70mmol；2eq.)，混合物室温下搅拌过夜。蒸去溶剂，粗产品于MeOH中结晶，过滤，获得化合物(20)，呈黄色固体(61mg；42％)。
2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-N-[4-(1H-四唑-5-基)苯基]-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺(化合物(20))钾盐的制备：将母体化合物(58.3mg；0.14mmol；1eq.)溶解于THF(2ml)和水(2ml)中。加入氢氧化钾0.5N溶液(279μl；0.50M；0.14mmol；1eq.)。混合物室温下搅拌10min。棉花过滤后冻干，分离到化合物(20)的钾盐，呈黄色固体(58mg，91％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.16(s，3H)，2.55(s，3H)，6.47(t，J＝8Hz，1H)，7.39(dd，J＝8Hz，J＝2Hz，1H)，8.07(s，1H)，8.18(dd，J＝8，2Hz，1H)，9.97(s，1H)，12.19(s，1H).M-(ESI)：417.1；M+(ESI)：419.1.HPLC(方法A)，Rt：1.50min(纯度：92.3％)。
实施例21：1-{[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]羰基}哌啶 -3-羧酸(21)
将上述实施例13步骤I制得的2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-碳酰氯(106.5mg；0.35mmol；1eq.)溶解于THF(8ml)和DCM(4ml)中。加3-哌啶甲酸(Emkachem)(42.8mg；0.33mmol；1eq.)和三乙胺(97μl；0.70mmol；2eq.)，混合物室温下搅拌过夜。蒸去溶剂，粗产品于MeOH中结晶，过滤，获得化合物(21)，呈棕色固体(31mg；23％)。M-(ESI)：393；M+(ESI)：395.HPLC(方法A)，Rt：2.60min(纯度：95.4％)。
实施例22：5-({[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]羰基}氨 基)-2-羟基苯甲酸，钾盐(22)
步骤I：2’-(乙酰氨基)-N-(2，2-二甲基-4-氧-4H-1，3-苯并二氧杂环己烯-6-基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺
将上述实施例13步骤I制得的2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-碳酰氯(106.5mg；0.35mmol；1eq.)溶解于THF(8ml)和DCM(4ml)中。加入前面获得的6-氨基-2，2-二甲基-苯并[1，3]二氧杂环己烯-4-酮(胺1)(67.6mg；0.35mmol；1eq.)和三乙胺(49μl；0.35mmol；1eq.)，混合物室温下搅拌2.5h。蒸去溶剂，粗产品于MeOH中重结晶，过滤，获得2’-(乙酰氨基)-N-(2，2-二甲基-4-氧-4H-1，3-苯并二氧杂环己烯-6-基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺，呈橙色固体(68.9mg；43％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.70(s，6H)，2.15(s，3H)，2.52(s，3H)，7.16(d，J＝8Hz，1H)，8.09(s，1H)，8.10(dd，J＝8，3Hz，1H)，8.41(d，J＝3Hz，1H)，10.81(s，1H)，12.16(s，1H).M-(ESI)：457.04；M+(ESI)：459.12.HPLC(方法A)，Rt：3.78min(纯度：97.7％)。
步骤II：5-({[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]羰基}氨基)-2-羟基苯甲酸(22)
室温下，将氢氧化钠5N溶液(109μl；5M；0.55mmol；12.50eq.)加入到上述步骤I获得的2’-(乙酰氨基)-N-(2，2-二甲基-4-氧-4H-1，3-苯并二氧杂环己烯-6-基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺(20mg；0.04mmol；1eq.)的THF(1ml)溶液中。50min后，脱保护完成。加入氯化氢(109μl；5M；0.55mmol；12.50eq.)，然后加水(2ml)。过滤分离出生成的沉淀，水洗，真空干燥，分离到化合物(22)，呈黄色固体(14mg；77％)。
5-({[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]羰基}氨基)-2-羟基苯甲酸(化合物(22))钾盐的制备：将母体化合物(14mg；0.03mmol)溶解于THF(5ml)和水(5ml)中。加入氢氧化钾0.5N溶液(61μl；0.50M；0.03mmol；1eq.)。混合物室温下搅拌10min。棉花过滤后冻干，分离到化合物(22)的钾盐，呈黄色粉末(15.6mg；78％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.15(s，3H)，2.53(s，3H)，6.60(d，J＝9Hz，1H)，7.52(dd，J＝3，9Hz，1H)，7.98(d，J＝3Hz，1H)，8.01(s，1H)，10.26(s，1H)，12.14(s，1H).M-(ESI)：417.07；M+(ESI)：418.99.HPLC(方法A)，Rt：3.15min(纯度：86.4％)。
实施例23：N-[4’-甲基-2-(2H-四唑-5-基甲基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]乙 酰胺，钾盐(23)
Figure S2006800267463D00751
将前述获得的N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]乙酰胺，化合物(3)(100mg；0.36mmol)溶解于甲苯(5ml)中。加入三甲基甲硅基叠氮化物(0.33ml；2.51mmol；7eq.)和二丁基氧化锡(53.7mg；0.22mmol；0.60eq.)。混合物加热回流3小时。除去溶剂后，粗产品悬浮于MeOH中。过滤后分离到化合物(23)，呈棕色固体(54.6mg，47％)。
N-[4’-甲基-2-(2H-四唑-5-基甲基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]乙酰胺(化合物(23))钾盐的制备：将母体化合物(54.6mg，0.170mmol)溶解于THF(5ml)和水(5ml)中。加入氢氧化钾1N溶液(169μl；0.169mmol，1eq.)。混合物室温下搅拌10min。棉花过滤后冻干，分离到化合物(23)的钾盐，呈黄色粉末(65.5mg；定量)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.11(s，3H)，2.44(s，3H)，4.37(s，2H)，7.46(s，1H)，12.10(br s，1H).M-(ESI)：320；M+(ESI)：322.HPLC(方法A)，Rt：1.96min(纯度：99.3％)。
实施例24：1-{[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]羰基}哌啶 -4-羧酸，钾盐(24)
Figure S2006800267463D00761
将上述实施例13步骤I制得的2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-碳酰氯(106.5mg；0.35mmol；1eq.)溶解于THF(8ml)和DCM(4ml)中。加入4-哌啶甲酸(Fluka)(45.2mg；0.35mmol；1eq.)和三乙胺(49μl；0.35mmol；1eq.)，混合物室温下搅拌2.5h。蒸去溶剂，粗产品用制备HPLC纯化。为除去痕量的三氟乙酸，所得产物再溶解于THF，加入过量的PS-DIEA(Argonaut)。所得混合物室温下振摇3小时，过滤，浓缩，获得母体产品化合物(24)(70mg；51％)。
1-{[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]羰基}哌啶-4-羧酸(化合物(24))钾盐的制备：将母体化合物(70mg，0.177mmol)溶解于THF(5ml)和水(5ml)中。加入氢氧化钾1N溶液(177μl，1eq)。混合物室温下搅拌10min。棉花过滤后冻干，分离到化合物(24)的钾盐，呈黄色固体(61mg；80％).M-(ESI)：393.10；M+(ESI)：395.12.HPLC(方法A)，Rt：2.55min(纯度：98.2％)。
实施例25：2’-(乙酰氨基)-N-[3-(5-氨基-1，3，4-噻二唑-2-基)苯基]-4’-甲基 -4，5 ’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺(25)
Figure S2006800267463D00771
将上述实施例13步骤I制得的2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-碳酰氯(117.7mg；0.39mmol；1eq.)溶解于THF(8ml)和DCM(2ml)中。加入前面制得的5-(3-氨基苯基)-1，3，4-噻二唑-2-胺(胺2)(75mg；0.39mmol；1eq.)和三乙胺(108μl；0.78mmol；2eq.)，混合物室温下搅拌过夜。蒸去溶剂，粗产品悬浮于MeOH中，过滤，用MeOH和水洗涤(106.9mg；60％)。再经制备HPLC纯化，获得化合物(25)，呈浅黄色固体(22.2mg；10％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.15(s，3H)，2.52(s，3H)，7.52(m，4H)，7.91(m，1H)，8.10(s，1H)，8.29(m，1H)，10.77(br s，1H)，12.17(br s，1H).M-(ESI)：456；M+(ESI)：458.HPLC(方法A)，Rt：2.92min(纯度：94.2％)。
实施例26：N-{2-[(3-羟基哌啶-1-基)羰基]-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基} 乙酰胺(26)
Figure S2006800267463D00772
将上述实施例13步骤I制得的2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-碳酰氯(200mg，0.66mmol，1eq.)溶解于THF(8ml)和DCM(4ml)中。加入3-羟基哌啶(Fluka)(67.0mg；0.66mmol；1eq.)和三乙胺(0.19ml；1.33mmol；2eq.)，混合物室温下搅拌过夜。蒸去溶剂，粗产品于MeOH中结晶，获得化合物(26)，呈棕色固体(103mg；42％).M-(ESI)：365.20；M+(ESI)：367.16.HPLC(方法A)，Rt：2.35min(纯度：99.4％)。
实施例27：N-(2-{[4-(羟基甲基)哌啶-1-基]羰基}-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻 唑-2’-基)乙酰胺(27)
将上述实施例13步骤I制得的2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-碳酰氯(200mg，0.66mmol，1eq.)溶解于THF(8ml)和DCM(4ml)中。加入4-(羟基甲基)哌啶(Maybridge)(76.3mg；0.66mmol；1eq.)和三乙胺(0.19ml；1.33mmol；2eq.)，混合物室温下搅拌过夜。蒸去溶剂，粗产品于MeOH中结晶，获得化合物(27)，呈棕色固体(106.3mg；42％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.05-1.30(m，2H)，1.65-1.87(m，3H)，2.14(s，3H)，2.50(s，3H)，2.86(m，1H)，3.20(m，1H)，3.28(m，2H)，4.48(m，1H)，4.52(t，J＝4.5Hz，1H)，5.16(m，1H)，7.97(s，1H)，12.16(s，1H).M-(ESI)：379.20；M+(ESI)：381.19.HPLC(方法A)，Rt：2.47min(纯度：99％)。
实施例28：N-(2-{[4-(2-羟基乙基)哌啶-1-基]羰基}-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻 唑-2’-基)乙酰胺(28)
Figure S2006800267463D00782
将上述实施例13步骤I制得的2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-碳酰氯(200mg，0.66mmol，1eq.)溶解于THF(8ml)和DCM(4ml)中。加入4-哌啶乙醇(Aldrich)(85.6mg；0.66mmol；1eq.)和三乙胺(0.19ml；1.33mmol；2eq.)，混合物室温下搅拌过夜。蒸去溶剂，粗产品于MeOH中结晶，获得化合物(28)，呈棕色固体(117.2mg；43％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.05-1.30(m，2H)，1.38(m，2H)，1.75(m，2H)，2.13(s，3H)，2.48(s，3H)，2.85(m，1H)，3.22(m，1H)，3.45(m，2H)，4.38(t，J＝6Hz，1H)，4.42(m，1H)，5.15(m，1H)，7.97(s，1H)，12.16(s，1H).M-(ESI)：393.21；M+(ESI)：395.20.HPLC(方法A)，Rt：2.69min(纯度：95.7％)。
实施例29：N-{2-[(4-羟基哌啶-1-基)羰基]-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基} 乙酰胺(29)
Figure S2006800267463D00791
将上述实施例13步骤I制得的2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-碳酰氯(166.6mg，0.55mmol，1eq.)溶解于THF(8ml)和DCM(4ml)中。加入4-羟基哌啶(Fluka)(55.8mg；0.55mmol；1eq.)和三乙胺(0.15ml；1.10mmol；2eq.)，混合物室温下搅拌过夜。蒸去溶剂，粗产品于MeOH中结晶，获得化合物(29)，呈棕色固体(80.3mg；40％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.44(m，2H)，1.82(m，2H)，2.14(s，3H)，2.50(s，3H)，3.35(m，2H)，3.80(m，2H)，4(m，1H)，4.60(m，1H)，7.98(s，1H)，12.16(br s，1H).M-(ESI)：365；M+(ESI)：367.HPLC(方法A)，Rt：2.31min(纯度：91.1％)。
实施例30：2’-(乙酰氨基)-N-1H-1，2，3-苯并三唑-5-基-4’-甲基-4，5’-联 -1，3-噻唑-2-甲酰胺，钾盐(30)
将上述实施例13步骤I制得的2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-碳酰氯(200mg，0.66mmol，1eq.)溶解于THF(8ml)和DCM(4ml)中。加入5-氨基苯并三唑(Aldrich)(88.9mg；0.66mmol；1eq.)和三乙胺(0.19ml；1.33mmol；2eq.)，混合物室温下搅拌过夜。蒸去溶剂，粗产品用制备HPLC纯化。为除去痕量的三氟乙酸，所得产物再溶解于DCM，加入过量的PS-DIEA(Argonaut)。所得混合物室温下振摇3小时，过滤，浓缩，获得母体产品化合物(30)(57mg；22％)。
2’-(乙酰氨基)-N-1H-1，2，3-苯并三唑-5-基-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺(化合物(30))钾盐的制备：将母体化合物(57mg，0.143mmol)溶解于THF(2ml)和水(2ml)中。加入氢氧化钾0.5N溶液(285μl，1eq)。混合物室温下搅拌10min。棉花过滤后冻干，分离到化合物(30)的钾盐，呈黄色固体(42mg；67％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.04(s，3H)，2.50(s，3H)，7.20(d，J＝9Hz，1H)，7.54(d，J＝9Hz，1H)，7.83(s，1H)，8.06(s，1H)，10.17(s，1H).M-(ESI)：398.10；M+(ESI)：400.09.HPLC(方法A)，Rt：2.85min(纯度：90.2％)。
实施例31：4-({[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]羰基}氨 基)-2-羟基苯甲酸，钾盐(31)
Figure S2006800267463D00801
步骤I：2’-(乙酰氨基)-N-(2，2-二甲基-4-氧-4H-1，3-苯并二氧杂环己烯-7-基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺
将上述实施例13步骤I制得的2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-碳酰氯(200mg，0.66mmol，1eq.)溶解于THF(8ml)和DCM(4ml)中。加入前面获得的7-氨基-2，2-二甲基-4H-1，3-苯并二氧杂环己烯-4-酮(胺3)(128.0mg；0.66mmol；1eq.)和三乙胺(0.19ml；1.33mmol；2eq.)，混合物室温下搅拌过夜。蒸去溶剂，粗产品于MeOH中结晶纯化，所得产品用MeOH和NaHCO3(饱和)洗涤。获得2’-(乙酰氨基)-N-(2，2-二甲基-4-氧-4H-1，3-苯并二氧杂环己烯-7-基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2甲酰胺，呈浅褐色固体(200mg；65％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.67(s，6H)，2.13(s，3H)，2.49(s，3H)，7.28(m，1H)，7.56(s，1H)，7.64(br d，J＝9Hz，1H)，7.75(s，1H)，11.65(br s，1H).M-(ESI)：457.08；M+(ESI)：459.13.HPLC(方法A)，Rt：3.86min(纯度：97.7％)。
步骤II：4-({[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]羰基}氨基)-2-羟基苯甲酸(31)
将2’-(乙酰氨基)-N-(2，2-二甲基-4-氧-4H-1，3-苯并二氧杂环己烯-7-基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺(150mg；0.33mmol；1eq.)溶解于THF(6ml)中。加入氢氧化钠(0.82ml；5M；4.09mmol；12.50eq.)，混合物室温下搅拌10日。加入盐酸(0.82ml；5M；4.09mmol；12.50eq.)，蒸去溶剂。所得粗产品用制备HPLC纯化。为除去TFA，化合物溶解于THF，加入过量POL-三胺(Trisamine)(Argonault)。溶液过滤，浓缩，获得化合物(31)(54mg；39％)。
4-({[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]羰基}氨基)-2-羟基苯甲酸(化合物(31))钾盐的制备：将母体化合物(54mg，0.129mmol)溶解于THF(2ml)和水(2ml)中。加入氢氧化钾0.5N溶液(285μl，1eq)。混合物室温下搅拌10min。棉花过滤后冻干，分离到化合物(31)的钾盐，呈黄色固体(21.6mg；36％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.93(s，3H)，2.48(s，3H)，6.70-7.75(br m，4H)，10.15(br s，1H).M-(ESI)：417.05；M+(ESI)：419.10.HPLC(方法A)，Rt：3.29min(纯度：97.7％)。
实施例32：4-({[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]羰基}氨 基)-2-氟苯甲酸钾盐(32)
Figure S2006800267463D00811
将上述实施例13步骤I制得的2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-碳酰氯(166.6mg，0.55mmol，1eq.)溶解于THF(8ml)和DCM(4ml)中。加入4-氨基-2-氟苯甲酸(Apollo)(85.7mg；0.55mmol；1eq.)和三乙胺(0.15ml；1.10mmol；2eq.)，混合物室温下搅拌过夜。蒸去溶剂，粗产品用制备HPLC纯化。再用MeOH洗涤，获得化合物(32)，呈黄色固体(8.9mg；3.3％)。
4-({[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]羰基}氨基)-2-氟苯甲酸(化合物(32))钾盐的制备：将母体化合物(8.9mg；0.021mmol)溶解于THF(2ml)和水(2ml)中。加入氢氧化钾0.5N溶液(42μl，1eq.)。混合物室温下搅拌10min。棉花过滤后冻干，分离到化合物(32)的钾盐，呈黄色固体(9.7mg；定量)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.05(s，3H)，2.49(s，3H)，7.40-7.60(m，3H)，7.89(s，1H)，10.65(br s，1H).M-(ESI)：418.99；M+(ESI)：421.10.HPLC(方法A)，Rt：3.18min(纯度：93％)。
实施例33：2’-(乙酰氨基)-N-[3-(5-羟基-1，3，4-噁二唑-2-基)苯基]-4’-甲基 -4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺，钾盐(33)
Figure S2006800267463D00821
将上述实施例13步骤I制得的2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-碳酰氯(170.5mg；0.56mmol；1eq.)溶解于THF(8ml)和DCM(4ml)中。加入前述获得的5-(3-氨基苯基)-1，3，4-噁二唑-2-醇(胺4，100.0mg；0.56mmol；1eq.)和三乙胺(79μl；0.56mmol；1eq.)，混合物室温下搅拌过夜。蒸去溶剂，粗产品用制备HPLC纯化。为除去痕量的三氟乙酸，所得产物再溶解于DCM，加入过量的PS-DIEA(Argonaut)。所得混合物室温下振摇3小时，过滤，浓缩，获得母体产品化合物(33)(34.8mg，14％)。HPLC(方法A)，Rt：3.30min(纯度：92.0％)。
2’-(乙酰氨基)-N-[3-(5-羟基-1，3，4-噁二唑-2-基)苯基]-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺(化合物(33))钾盐的制备：将母体化合物(24mg；0.05mmol；1eq.)溶解于THF(3ml)和水(3ml)中。加入氢氧化钾0.5N溶液(106μl；0.50M；0.05mmol；0.98eq.)。混合物室温下搅拌10min。棉花过滤后冻干，分离到化合物(33)的钾盐，呈浅黄色固体(19.3mg，74.0％)。1HNMR(DMSO-d6，30 MHz)δ2.15(s，3H)，2.53(s，3H)，7.37(m，2H)，7.72(m，1H)，8.07(s，1H)，8.14(s，1H)，10.65(s，1H)，10.99(s，1H).M-(ESI)：440.93；M+(ESI)：442.73.HPLC(方法A)，Rt：3.30min(纯度：96.6％)。
实施例34：2’-(乙酰氨基)-N-[4-(5-羟基-1，3，4-噁二唑-2-基)苯基]-4’-甲基 -4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺，钾盐(34)
Figure S2006800267463D00831
将上述实施例13步骤I制得的2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-碳酰氯(170.5mg；0.56mmol；1eq.)溶解于THF(8ml)和DCM(4ml)中。加入前述获得的5-(4-氨基苯基)-1，3，4-噁二唑-2-醇(胺5)(100.1mg；0.56mmol；1eq.)和三乙胺(79μl；0.56mmol；1eq.)，混合物室温下搅拌过夜。蒸去溶剂，粗产品用制备HPLC纯化。为除去痕量的三氟乙酸，所得产物再溶解于DCM，加入过量的PS-DIEA(Argonaut)。所得混合物室温下振摇3小时，过滤，浓缩，获得母体产品化合物(34)(72.5mg，29％)。HPLC(方法A)，Rt：3.30min(纯度：93.7％)。
2’-(乙酰氨基)-N-[3-(5-羟基-1，3，4-噁二唑-2-基)苯基]-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺(化合物(34))钾盐的制备：将母体化合物(72.5mg；0.16mmol；1eq.)溶解于THF(3ml)和水(3ml)中。加入氢氧化钾0.5N溶液(321μl；0.50M；0.16mmol；0.98eq.)。混合物室温下搅拌10min。棉花过滤后冻干，分离到化合物(34)的钾盐，呈黄色固体(24.3mg，30.9％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.75(s，3H)，2.26(s，3H)，3.05(s，2H)，6.89(s，1H)，7.24(m，2H)，7.38(m，2H).M-(ESI)：441.01；M+(ESI)：443.09.HPLC(方法A)，Rt：3.30min(纯度：99.2％)。
实施例35：N-[2-(羟基甲基)-4’-甲基-45’-联-1，3-噻唑-2’-基]乙酰胺(35)
将上述实施例13步骤I制得的2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-碳酰氯(200.5mg；0.66mmol；1eq.)溶解于DME(7ml)中，冷却至-78℃。滴加三叔丁氧基氢化锂铝(Aldrich)(2.65ml；0.50M；1.33mmol；2eq.)。1小时后还原完成。反应混合物倾入冰中。分为两层，有机相用MgSO4干燥，浓缩。所得产品用制备HPLC纯化，获得化合物(35)，呈灰白色固体(10.5mg；6％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.12(s，3H)，2.45(s，3H)，4.75(s，2H)，7.61(s，1H)，12.08(s，1H).M-(ESI)：268.11；M+(ESI)：270.16.HPLC(方法A)，Rt：1.74min(纯度：100％)。
实施例36：N-(2-甲氧基乙基)-N’-[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联 -1，3-噻唑-2’-基]脲(36)
Figure S2006800267463D00842
步骤I：2’-氨基-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-羧酸乙酯
在一个微波管中，将1-(2-氨基-4-甲基-1，3-噻唑-5-基)-2-溴乙酮氢溴酸盐(中间体2)(400mg；1.27mmol；1eq.)悬浮于EtOH(7ml)中。加入硫代草氨酸乙酯(168.6mg；1.27mmol；1eq.)，混合物于120℃微波照射加热15min。反应完成，生成沉淀。过滤，用EtOH洗涤，获得2’-氨基-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-羧酸乙酯的氢溴酸盐(201mg；45.3％)。将其悬浮于DCM/EtOH 2∶1混合液(9ml)中，加入Amberlyst A-21(200mg；4.54mmol；3.58eq.)。混合物振摇2小时30分钟后，过滤，蒸去溶剂，获得2’-氨基-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-羧酸乙酯，呈黄色粉末(146.2mg；43％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.33(t，J＝6Hz，3H)，2.32(s，3H)，4.38(q，J＝6Hz，2H)，7.17(br s，2H)，7.82(s，1H).M-(ESI)：268.17；M+(ESI)：270.16.HPLC(方法A)，Rt：1.54min(纯度：99.6％)。
步骤II：4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-胺，三氟乙酸盐.
在一个微波管中，将上述步骤I制得的2’-氨基-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-羧酸乙酯(188mg；0.70mmol；1eq.)溶解于吗啉(6ml)中。混合物于130℃微波照射加热25min。蒸去溶剂，粗混合物用制备HPLC纯化，获得4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-胺的三氟乙酸盐，呈浅褐色粉末(171.7mg；58％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.36(s，3H)，3.67(m，4H)，4.28(m，4H)，7.94(s，1H)，8.27(br s，2H).M-(ESI)：309.04；M+(ESI)：311.09.HPLC，Rt：1.54min(纯度：99.6％)。
步骤III：N-[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-1H-咪唑-1-甲酰胺
将上述步骤II制得的4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-胺的三氟乙酸盐(142.4mg；0.34mmol；1eq.)悬浮于无水DCM(5ml)中。加入CDI(108.8mg；0.68mmol；2eq.)和三乙胺(51μl；0.37mmol；1.10eq.)。加入DMF(0.30ml)以改善起始原料的溶解。混合物于40℃搅拌过夜。有沉淀生成。过滤，用乙醚洗涤，获得N-[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-1H-咪唑-1-甲酰胺(107.1mg；79％)，未经进一步纯化直接用于下一步。
步骤IV：N-(2-甲氧基乙基)-N’-[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]脲(36)
将DMF(2ml)和2-甲氧基乙基胺(Fluka)(16μl；0.19mmol；1.10eq.)加入到上述步骤III制得的N-[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-1H-咪唑-1-甲酰胺(50mg；0.17mmol；1eq.)中。混合物室温下搅拌10min。蒸去溶剂，粗产品于MeOH中结晶，获得化合物(36)，呈灰白色固体(42.1mg；60％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.41(s，3H)，3.30(m，5H)，3.39(m，2H)，3.68(m，6H)，4.33(m，2H)，6.67(m，1H)，7.91(s，1H)，10.41(br s，1H).M-(ESI)：410.09；M+(ESI)：412.12.HPLC(方法A)，Rt：2.41min(纯度：99.7％)。
实施例37：N-({[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基} 羰基)-β-丙氨酸乙酯(37)
Figure S2006800267463D00861
将上述实施例36步骤II制得的4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-胺的三氟乙酸盐(150mg；0.35mmol；1eq.)悬浮于DCM(5ml)中。加入N，N-二异丙基乙基胺(133μl；0.78mmol；2.20eq.)。加入2-异氰酰丙酸乙酯(Aldrich)(50.6mg；0.35mmol；1eq.)的DCM(3ml)溶液。所得混合物于50℃加热过夜。加入EtOAc(10ml)，混合物用水洗涤。有机相用MgSO4干燥，浓缩。粗混合物再置于相同的反应条件。50℃1晚后，转化完成，进行类似处理。粗产品于MeOH中重结晶，获得化合物(37)，呈灰白色粉末(92.2mg；58％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.18(t，J＝6Hz，3H)，2.41(s，3H)，2.50(m，2H)，3.36(m，2H)，3.68(m，6H)，4.07(q，J＝6Hz，2H)，4.33(m，2H)，6.70(br s，1H)，7.90(s，1H)，10.52(br s，1H).M-(ESI)：452.14；M+(ESI)：454.11.HPLC(方法A)，Rt：2.89min(纯度：98.9％)。
实施例38：N-[2-(1，4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基羰基)-4’-甲基-4，5’-联 -1，3-噻唑-2’-基]乙酰胺(38)
Figure S2006800267463D00862
将上述实施例13步骤I制得的2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-碳酰氯(160mg；0.53mmol；1eq.)溶解于THF(8ml)和DCM(4ml)中。加入1，4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(Aldrich)(0.06ml；0.53mmol；1eq.)和三乙胺(0.15ml；1.06mmol；2eq.)，混合物室温下搅拌过夜。蒸去溶剂，粗产品在MeOH析出纯化，获得化合物(38)，呈浅褐色固体(64.9mg，30％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.73(m，4H)，2.13(s，3H)，2.48(s，3H)，3.72(m，2H)，3.93(m，4H)，4.28(m，2H)，7.99(s，1H)，12.16(s，1H).M-(ESI)：407.10；M+(ESI)：409.21.HPLC(方法A)，Rt：2.86min(纯度：94％)。
实施例39：2’-(乙酰氨基)-N-(2，3-二羟基丙基-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑- 2-甲酰胺(39)
Figure S2006800267463D00871
将上述实施例13步骤I制得的2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-碳酰氯(160mg；0.53mmol；1eq.)溶解于THF(8ml)和DCM(4ml)中。加入2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-甲胺(Aldrich)(0.07ml；0.53mmol；1eq.)和三乙胺(0.15ml；1.06mmol；2eq.)，混合物室温下搅拌过夜。蒸去溶剂，粗产品用制备HPLC纯化。由于制备HPLC的流动相中用到了TFA，色谱流分(fractions)的浓缩过程中同时除去了二醇保护基，直接获得化合物(39)，呈灰白色固体(26.6mg；14％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.15(s，3H)，2.49(s，3H)，3.17-3.52(m，4H)，3.67(m，1H)，4.65(br s，1H)，4.93(br s，1H)，7.99(s，1H)，8.46(t，J＝4.5Hz，1H)，12.15(s，1H).M-(ESI)：355.04；M+(ESI)：356.99.HPLC(方法A)，Rt：1.87min(纯度：100％)。
实施例40：N-[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]脲(40)
将DMF(20ml)和氨的0.5M二噁烷溶液(3.20ml；0.50M；1.60mmol；1.10eq.)加入到上述实施例36步骤III制得的N-[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-1H-咪唑-1-甲酰胺(535mg；1.33mmol)中。混合物于室温下搅拌过夜。加入氨的0.5M二噁烷溶液(1.46ml；0.50M；0.73mmol；0.50eq.)，混合物于室温下再搅拌5小时。反应完成，蒸去溶剂。所得黄色粗产品用制备HPLC纯化，获得化合物(40)，呈灰白色粉末(177mg；26％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.41(s，3H)，3.68(m，6H)，4.32(m，2H)，6.42(br s，2H)，7.91(s，1H)，10.45(br s，1H).M-(ESI)：352.12；M+(ESI)：354.11.HPLC(方法A)，Rt：2.03min(纯度：99.7％)。
实施例41：N-{4’-甲基-2-[(3-氧哌嗪-1-基)羰基]-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基} 乙酰胺(41)
Figure S2006800267463D00881
将上述实施例13步骤I制得的2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-碳酰氯(160mg；0.53mmol；1eq.)溶解于THF(8ml)和DCM(4ml)中。加入哌嗪-2-酮(Aldrich)(63.7mg；0.64mmol；1.20eq.)和三乙胺(0.22ml；1.59mmol；3eq.)，混合物室温下搅拌过夜。蒸去溶剂，粗产品用制备HPLC纯化，获得化合物(41)，呈黄色粉末(47.7mg；25％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.14(s，3H)，2.48(s，3H)，3.25-3.40(m，2H)，3.82(m，1H)，4.15(m，1H)，4.45(m，1H)，4.86(m，1H)，8.03(s，1H)，8.19(br s，1H)，12.17(s，1H).M-(ESI)：364.05；M+(ESI)：365.97.HPLC(方法A)，Rt：2.14min(纯度：99.5％)。
实施例42：N-{4’-甲基-2-[(4-氧哌啶-1-基)羰基]-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基} 乙酰胺(42)
Figure S2006800267463D00891
将上述实施例13步骤I制得的2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-碳酰氯(160mg；0.53mmol；1eq.)溶解于THF(8ml)和DCM(4ml)中。加入4-哌啶酮盐酸盐一水合物(Aldrich)(97.7mg；0.64mmol；1.20eq.)和三乙胺(0.22ml；1.59mmol；3eq.)，混合物室温下搅拌过夜。蒸去溶剂，粗产品用制备HPLC纯化，获得化合物(42)，呈浅黄色粉末(39.2mg；20％)。1H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.14(s，3H)，2.49(s，3H)，2.53(m，4H)，3.94(m，2H)，4.53(m，2H)，8.03(s，1H)，12.17(s，1H).M-(ESI)：363.09；M+(ESI)：365.04.HPLC(方法A)，Rt：2.44min(纯度：95.3％)。
实施例43：N-{2-[(3-羟基吡咯烷-1-基)羰基]-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑- 2’-基}乙酰胺(43)
Figure S2006800267463D00892
将上述实施例13步骤I制得的2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-碳酰氯(160mg；0.53mmol；1eq.)溶解于TH F(8ml)和DCM(4ml)中。加入3-吡咯烷醇(Fluka)(55.4mg；0.64mmol；1.20eq.)和三乙胺(0.22ml；1.59mmol；3eq.)，混合物室温下搅拌过夜。蒸去溶剂，粗产品用制备HPLC纯化，获得化合物(43)，呈灰白色粉末(40.1mg；21.5％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.75-2.12(m，3H)，2.12(s，3H)，2.48(s，3H)，3.45-3.70(m，2H)，3.90-4.25(m，2H)，4.31-4.40(m，1H)，7.97(s，1H)，12.13(s，1H).M-(ESI)：353.07；M+(ESI)：351.09.HPLC(方法A)，Rt：2.21min(纯度：99.3％)。
实施例44：2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-N-丙-2-炔-1-基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲 酰胺(44)
将上述实施例13步骤I制得的2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-碳酰氯(160mg；0.53mmol；1eq.)溶解于THF(8ml)和DCM(4ml)中。加入炔丙胺(Fluka)(35.0mg；0.64mmol；1.20eq.)和三乙胺(0.22ml；1.59mmol；3eq.)，混合物室温下搅拌过夜。蒸去溶剂，粗产品用制备HPLC纯化，获得化合物(44)，呈浅黄色粉末(83.3mg；49％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.14(s，3H)，2.49(s，3H)，3.14(s，1H，C≡CH)，4.04(m，2H)，8.01(s，1H)，9.20(t，J＝4.5Hz，1H)，12.15(s，1H).M-(ESI)：319.05；M+(ESI)：321.05.HPLC(方法A)，Rt：2.71min(纯度：100％)。
实施例45：N-{2-[(4-乙酰基哌嗪-1-基)羰基]-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’- 基}乙酰胺(45)
将上述实施例13步骤I制得的2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-碳酰氯(160mg；0.53mmol；1eq.)溶解于THF(8ml)和DCM(4ml)中。加入1-乙酰基哌嗪(Aldrich)(81.5mg；0.64mmol；1.20eq.)和三乙胺(0.22ml；1.59mmol；3eq.)，混合物室温下搅拌过夜。蒸去溶剂，粗产品用制备HPLC纯化，获得化合物(45)，呈浅黄色粉末(127.9mg；61％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.04(s，3H)，2.13(s，3H)，2.49(s，3H)，3.57(m，4H)，3.65(m，1H)，3.70(m，1H)，4.25(m，1H)，4.35(m，1H)，8.01(s，1H)，12.16(s，1H).M-(ESI)：392.14；M+(ESI)：394.15.HPLC(方法A)，Rt：2.41min(纯度：100％)。
实施例46：N，N-二甲基-N～2～-({[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3- 噻唑-2’-基]氨基}羰基)甘氨酰胺(46)
Figure S2006800267463D00911
将DMF(3ml)、甘氨酸二甲基酰胺乙酸盐(Chem-Impex)(30.1mg；0.19mmol；1eq.)和三乙胺(57μl；0.41mmol；2.20eq.)加入到上述实施例36步骤3制得的N-[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-1H-咪唑-1-甲酰胺(75mg；0.19mmol；1eq.)中。混合物室温下搅拌3小时。蒸去溶剂，粗产品于MeOH中结晶，获得化合物(46)，呈浅黄色固体(49mg；60％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.44(s，3H)，2.86(s，3H)，2.94(s，3H)，3.68(m，6H)，4.01(m，2H)，4.33(m，2H)，6.83(m，1H)，7.91(s，1H)，10.70(br s，1H).M-(ESI)：437.15；M+(ESI)：439.09.HPLC(方法A)，Rt：2.30min(纯度：99％)。
实施例47：N-({[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基} 羰基)-β-丙氨酸(47)
Figure S2006800267463D00912
将DMF(3ml)、β-丙氨酸(Aldrich)(18.2mg；0.20mmol；1.10eq.)和三乙胺(57μl；0.41mmol；2.20eq.)加入到上述实施例36步骤3制得的N-[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-1H-咪唑-1-甲酰胺(75mg；0.19mmol；1eq.)中。混合物室温下搅拌3日。蒸去溶剂，粗产品于MeOH中结晶，获得化合物(47)，呈浅黄色固体(17mg；22％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.41(s，3H)，2.49(m，4H)，3.31(m，6H)，4.33(m，2H)，6.71(br s，1H)，7.90(s，1H)，10.47(br s，1H)，12.34(br s，1H).M-(ESI)：424.03；M+(ESI)：426.08.HPLC(方法A)，Rt：2.20min(纯度：98％)。
实施例48：N-{2-[(4-氟哌啶-1-基)羰基]-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基} 乙酰胺(48)
Figure S2006800267463D00921
将上述实施例13步骤I制得的2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-碳酰氯(200mg，0.66mmol，1eq.)溶解于THF(8ml)和DCM(4ml)中。加入4-氟哌啶(Flrochem)(95.7mg；0.92mmol；1.40eq.)和三乙胺(0.37ml；2.65mmol；4eq.)，混合物室温下搅拌过夜。蒸去溶剂，粗产品用制备HPLC纯化，获得化合物(48)，呈灰白色粉末(36mg；13％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.71-2.12(m，4H)，2.16(s，3H)，2.50(s，3H)，3.75(m，2H)，4.33(m，2H)，4.97(ttd，J＝3，6，51Hz，1H，-CFH)，8.02(s，1H)，12.19(s，1H).M-(ESI)：367.13；M+(ESI)：369.12.HPLC(方法A)，Rt：3.04min(纯度：95.8％)。
实施例49：N-(2-{[(1S，5S，7S)-7-(羟基甲基)-6，8-二氧杂-3-氮杂双环[3.2.1] 辛-3-基]羰基}-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基)乙酰胺(49)
Figure S2006800267463D00922
将上述实施例13步骤I制得的2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-碳酰氯(200mg，0.66mmol，1eq.)溶解于THF(8ml)和DCM(4ml)中。加入(1S，5S，7S)-6，8-二氧杂-3-氮杂双环[3.2.1]辛-7-基甲醇(按照文献瓜纳(Guama)等，有机化学杂志(J.Org.Chem.)1999，64，7347合成)(96.2mg；0.66mmol；1eq.)和三乙胺(0.37ml；2.65mmol；4eq.)，混合物室温下搅拌1小时。蒸去溶剂，粗产品用制备HPLC纯化，获得化合物(49)，呈灰白色粉末(73mg；26％)。M-(ESI)：409.16；M+(ESI)：411.07.HPLC(方法A)，Rt：2.16min(纯度：95.46％)。
实施例50：N-({[2-(氰基甲基)-4’-甲基-45’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰 基)-β-丙氨酸乙酯(50)
步骤I：(2’-氨基-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基)乙腈
将1-(2-氨基-4-甲基-1，3-噻唑-5-基)-2-溴乙酮氢溴酸盐(中间体2)(116.97mg；0.50mmol；1eq.)和2-氰基硫代乙酰胺(Aldrich)(50.1mg；0.50mmol；1eq.)溶于EtOH(5ml)中。混合物室温下搅拌过夜。蒸去溶剂，获得黄-橙色固体，进行快速层析纯化(CHCl3/EtOH 50∶1-10∶1梯度)。分离到(2’-氨基-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基)乙腈，呈橙色固体(71.6mg；61％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.41(s，3H)，4.62(s，2H)，7.87(s，1H)，9.23(br s，2H)。M-(ESI)：235.04；M+(ESI)：237.06.HPLC(方法A)，Rt：1.16min(纯度：98.3％)。
步骤II：N-({[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰基)-β-丙氨酸乙酯(50)
将上述步骤I制得的(2’-氨基-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基)乙腈(236.3mg；1mmol；1eq.)悬浮于DCM(5ml)中。加入N，N-二异丙基乙基胺(377μl；2.20mmol；2.20eq.)，然后加入3-异氰酰丙酸乙酯(143.1mg；1mmol；1eq.)的DCM(3ml)溶液。反应混合物于50℃加热过夜。由于反应未完成，第二次加入3-异氰酰丙酸乙酯(isocyanatopropionate)(Aldrich)(143.1mg；1mmol；1eq.)。36小时后反应完成。蒸去溶剂。加入EtOAc，混合物用盐水洗涤，MgSO4干燥，浓缩。所得粗产品用制备HPLC纯化，获得化合物(50)，呈灰白色固体(76.6mg；20％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.21(t，J＝7.5Hz，3H)，2.44(s，3H)，2.58(m，2H)，3.39(q，J＝6Hz，2H)，4.10(q，J＝7.5Hz，2H)，4.62(s，2H)，6.72(t，J＝6Hz，1H)，7.64(s，1H)，10.49(br s，1H).M-(ESI)：378.17；M+(ESI)：380.10.HPLC(方法A)，Rt：2.60min(纯度：100％)。
实施例51：N-(2-{[(1R，5R，7R)-7-(羟基甲基)-6，8-二氧杂-3-氮杂双 [3.2.1]辛-3-基]羰基}-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基)乙酰胺(51)
Figure S2006800267463D00941
将上述实施例13步骤I制得的2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-碳酰氯(200mg，0.66mmol，1eq.)溶解于THF(8ml)和DCM(4ml)中。加入(1R，5R，7R)-6，8-二氧杂-3-氮杂双环[3.2.1]辛-7-基甲醇(按照文献Guarna等，1999，J.Org.Chem.，64，7347合成)(96.2mg；0.66mmol；1eq.)和三乙胺(0.37ml；2.65mmol；4eq.)，混合物室温下搅拌1小时。蒸去溶剂，粗产品用制备HPLC纯化，获得化合物(51)，呈灰白色粉末(110mg；40％).M-(ESI)：408.99；M+(ESI)：410.89.HPLC(方法A)，Rt：2.15min(纯度：99.8％)。
实施例52：N-({[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰 基)-β-丙氨酸叔丁酯(52)
Figure S2006800267463D00942
步骤I：N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-1H-咪唑-1-甲酰胺
将三乙胺(0.65ml；4.69mmol；1.49eq.)加入到(2’-氨基-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基)乙腈(1000mg；3.15mmol；1eq.)和CDI(1372.3mg；8.46mmol；2.68eq.)的无水DCM(65ml)悬浮液中。加入DMF(4ml)，混合物于45℃加热一夜。反应冷却至室温。滤出生成的沉淀，用Et2O洗涤，获得N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-1H-咪唑-1-甲酰胺，未经进一步纯化直接用于下一步(822.8mg；79％)。
步骤II：N-({[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰基)-β-丙氨酸叔丁酯(52)
将DMF(8ml)、-丙氨酸叔丁酯盐酸盐(Bachem)(87.9mg；0.48mmol；1eq.)和三乙胺(148μl；1.07mmol；2.20eq.)加入到上述步骤I获得的N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-1H-咪唑-1-甲酰胺(160mg；0.48mmol；1eq.)中。室温下15min后，蒸去溶剂，所得粗产品用制备HPLC纯化。饱和NaHCO3溶液(250ml)加入到纯化后的流分中，用DCM(3×100ml)提取预期产品。有机相用MgSO4干燥，蒸去溶剂。获得化合物(52)，呈浅褐色固体(92.8mg；47％)。1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.40(s，9H)，2.41(m，5H)，3.33(m，2H)，4.59(s，2H)，6.63(t，J＝6Hz，1H)，7.61(s，1H)，10.48(br s，1H).M-(ESI)：406.23；M+(ESI)：407.94.HPLC(方法A)，Rt：3.17min(纯度：99.8％)。
实施例53：[4’-甲基-2’-(吡嗪-2-基氨基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]乙腈(53)
将三乙胺(66μl；0.48mmol；2.50eq.)和2-氰基硫代乙酰胺(19.0mg；0.19mmol；1eq.)加入到2-溴-1-[4-甲基-2-(吡嗪-2-基氨基)-1，3-噻唑-5-基]乙酮，(中间体3)(75mg；0.19mmol；1eq.)的EtOH(2ml)溶液中。混合物室温下搅拌过夜。过滤反应混合物，用乙醇淋洗，获得化合物(53)，呈棕色固体(35.4mg；59％)。1HNMR(DMSO-d6)δ2.49(s，3H)，4.62(s，2H)，7.67(s，1H)，8.13(m，1H)，8.36(m，1H)，8.44(m，1H)，11.79(br s，1H).M-(ESI)：312.88；M+(ESI)：314.95.HPLC(方法A)，Rt：2.47min(纯度：93.5％)。
实施例54：4’-甲基-2’-(吡噻-2-基氨基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2-羧酸乙酯(54)
Figure S2006800267463D00961
将硫代草氨酸乙酯(25.3mg；0.19mmol；1eq.)加入到2-溴-1-[4-甲基-2-(吡嗪-2-基氨基)-1，3-噻唑-5-基]乙酮，(中间体3)(75mg；0.19mmol；1eq.)的EtOH(2ml)溶液中。混合物于100℃加热10min。蒸去溶剂，粗产品悬浮于EtOH，过滤，真空干燥。将其溶解于THF(1ml)和DCM(1ml)混合液中，加入PS-DIEA(Argonaut)(27.3mg；0.10mmol；0.75eq.)，室温下振摇15min后，混合物过滤，蒸去溶剂，获得化合物(54)，呈棕色固体(45.6mg；69％)。1HNMR(DMSO-d6)δ1.17(t，J＝6Hz，3H)，2.51(s，3H)，4.42(q，J＝6Hz，2H)，8.07(s，1H)，8.15(d，J＝2.6Hz，1H)，8.38(dd，J＝1.1，2.6Hz，1H)，8.45(d，J＝1.1Hz，1H)，11.88(br s，1H).M-(ESI)：346.13；M+(ESI)：348.10.HPLC(方法A)，Rt：3.03min(纯度：94.0％)。
实施例55：[4’-甲基-2’-(1H-吡唑-3-基氨基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]乙腈(55)
Figure S2006800267463D00962
将2-氰基硫代乙酰胺(35.4mg；0.35mmol；1eq.)加入到1-{2-[(1-乙酰基-1H-吡唑-3-基)氨基]-4-甲基-1，3-噻唑-5-基}-2-溴乙酮，(中间体4)(150mg；0.35mmol；1eq.)的EtOH(5ml)溶液中。所得混合物用微波于60℃加热10min，70℃加热10min，80℃加热10min。反应完成，加入Et2O。滤出生成的沉淀，用Et2O洗涤，获得化合物(55)，呈浅褐色固体(84.1mg；62％)。1HNMR(DMSO-d6)δ2.46(s，3H)，4.61(s，2H)，6.01(d，J＝2Hz，1H)，7.65(s，1H)，7.72(d，J＝2Hz，1H)，11.26(br s，1H).M-(ESI)：301.13；M+(ESI)：303.14.HPLC(方法A)，Rt：1.84min(纯度：92.7％)。
实施例56：N-[4’-甲基-2-(2-吗啉-4-基-2-氧乙基)-4，5’-联-13-噻唑-2’-基] 乙酰胺(56)
将N-[5-(溴乙酰基)-4-甲基-1，3-噻唑-2-基]乙酰胺，氢溴酸盐(中间体1)(300mg；0.84mmol；1eq)和3-吗啉-4-基-3-硫代-丙酰胺(157.7mg；0.84mmol；1eq)溶解于EtOH(10ml)中。加入三乙胺(0.29ml；2.09mmol；2.5eq)。混合物室温下搅拌过夜。蒸去溶剂，粗产品溶解于EtOAc，并用水、盐水洗涤，MgSO4干燥。过滤及蒸去溶剂后，所得黄色固体溶解于DCM、Et2O和EtOH混合液。浓缩该溶液，化合物(56)析出，呈黄色固体(126.2mg；41％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.35(s，3H)，2.69(s，3H)，3.7-3.81(m，8H)，4.47(s，2H)，7.83(s，1H)，12.29(br s，1H).M-(ESI)：365.3；M+(ESI)：367.3.HPLC(方法A)，Rt：2.21min(纯度：93.8％)。
实施例57：N’，2-(4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2，2’-二基)二乙酰胺(57)
Figure S2006800267463D00981
将N-[5-(溴乙酰基)-4-甲基-1，3-噻唑-2-基]乙酰胺，氢溴酸盐(中间体1)(300mg；0.84mmol；1eq)和2-氨基硫羰基(thiocarbamoyl)-乙酰胺(99mg；0.84mmol；1eq)溶解于EtOH(10ml)中。加入三乙胺(0.29ml；2.09mmol；2.5eq)。混合物室温下搅拌过夜。蒸去溶剂，粗产品溶解于EtOAc，并用水、盐水洗涤，MgSO4干燥。过滤及蒸去溶剂后，所得粗产品用快速层析纯化(DCM/MeOH 20/1)，获得化合物(57)，呈橙色固体(6.1mg；3％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.22(s，3H)，2.55(s，3H)，3.99(s，2H)，7.27(br s，1H)，7.67(s，1H)，7.80(br s，1H)，12.15(br s，1H).M-(ESI)：295.2；M+(ESI)：297.2.HPLC(方法A)，Rt：1.67min(纯度：95.9％)。
实施例58：4-{[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}-4-氧丁 酸叔丁酯(58)
Figure S2006800267463D00982
将2-氨基-4-甲基-[4，5]联噻唑基-2-基)-乙腈(中间体5)(100mg；0.42mmol；1eq.)溶解于无水THF(10ml)中。溶液置于氮气氛围中。依次加入TBTU(203.8mg；0.63mmol；1.5eq)、琥珀酸单叔丁酯(184.3mg；1.06mmol；2.5eq)和DIEA(144μl；0.85mmol；2eq)。反应混合物室温下搅拌2日。蒸去溶剂，粗混合物溶解于DCM。有机层用饱和NH4Cl(2次)和盐水洗涤。MgSO4干燥，真空除去溶剂，粗产品用制备HPLC纯化，获得化合物(58)，呈白色固体(85.6mg；51％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.36(s，9H)，2.26(s，3H)，2.55(t，2H)，2.63(t，2H)，4.60(s，2H)，7.71(s，1H)，12.16(s，1H).M-(ESI)：391.29；M+(ESI)：393.33.HPLC(方法A)，Rt：3.55min(纯度：100％)。
实施例59：5-{[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}-5-氧 戊酸甲酯(59)
Figure S2006800267463D00991
将2-氨基-4-甲基-[4，5]联噻唑基-2-基)-乙腈(中间体5)(100mg；0.42mmol；1eq.)溶解于无水THF(10ml)中。所得溶液置于氮气氛围中。依次加入TBTU(203.8mg；0.63mmol；1.5eq)、戊二酸单甲酯(154.6mg；1.06mmol；2.5eq)和DIEA(144μl；0.85mmol；2eq)。反应混合物室温下搅拌2日。蒸去溶剂，粗产物溶解于DCM。有机层用饱和NH4Cl(2次)和盐水洗涤。MgSO4干燥，真空除去溶剂，粗产品再用制备HPLC纯化，获得化合物(59)，呈白色固体(78.8mg；51％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.81(q，2H)，2.35(t，2H)，2.48(s，3H)，2.48(t，2H)，4.61(s，2H)，7.71(s，1H)，12.12(s，1H).M-(ESI)：363.3；M+(ESI)：365.2.HPLC(方法A)，Rt：2.89min(纯度：99.07％)。
实施例60：6-{[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}-6-氧 己酸甲酯(60)
Figure S2006800267463D01001
将2-氨基-4-甲基-[4，5]联噻唑基-2-基)-乙腈(中间体5)(100mg；0.42mmol；1eq.)溶解于无水THF(10ml)中。所得溶液置于氮气氛围中。依次加入TBTU(203.8mg；0.63mmol；1.5eq)、己二酸单甲酯(169.4mg；1.06mmol；2.5eq)和DIEA(144μl；0.85mmol；2eq)。反应混合物室温下搅拌2日。蒸去溶剂，粗产物溶解于DCM。有机层用饱和NH4Cl(2次)和盐水洗涤。MgSO4干燥，真空除去溶剂，粗产品再用制备HPLC纯化，获得化合物(60)，呈浅褐色固体(76.5mg；48％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.32(m，4H)，2.08(t，2H)，2.20(t，2H)，2.26(s，3H)，3.35(s，3H)，4.38(s，2H)，7.48(s，1H)，11.88(s，1H)M-(ESI)：377.3；M+(ESI)：379.3.HPLC(方法A)，Rt：3.12min(纯度：99.47％)。
实施例61：2’-(乙酰氨基)-N，N，4’-三甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰
Figure S2006800267463D01002
将上述实施例13步骤I制得的2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-碳酰氯(110mg；0.36mmol；1eq.)溶解于无水THF(10ml)中。氮气氛围下，加入二甲基胺(0.27ml；0.55mmol；1.5eq)和三乙胺(0.08ml；0.55mmol；1.5eq)。反应混合物室温下搅拌1小时。蒸去溶剂，粗产品直接用制备HPLC纯化，获得化合物(61)，呈灰白色固体(65.0mg；57％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.13(s，3H)，2.49(s，3H)，3.06(s，3H)，3.54(s，3H)，7.97(s，1H)，12.14(s，1H).M-(ESI)：309.2；M+(ESI)：311.2.HPLC(方法A)，Rt：2.49min(纯度：99.52％)。
实施例62：2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺(62)
Figure S2006800267463D01011
将上述实施例13步骤I制得的2’-乙酰氨基-4’-甲基-[4，5’]联噻唑基-2-碳酰氯(110mg；0.36mmol；1eq.)溶解于无水THF(10ml)中。氮气氛围下，加入三乙胺(0.08ml；0.55mmol；1.5eq)。通氨(气)鼓泡10分钟。将烧瓶密封，反应混合物于室温下再搅拌20分钟。除去溶剂，粗产品直接用制备HPLC纯化，获得化合物(62)，呈灰白色固体(25.6mg；22％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.13(s，3H)，2.49(s，3H)，7.95(d，2H)，8.06(s，1H)，12.12(s，1H).M-(ESI)：281.1；M+(ESI)：283.1.HPLC(方法A)，Rt：2.10min(纯度：88.54％)。
实施例63：4-{[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}-4-氧 丁酸(63)
Figure S2006800267463D01012
将4-{[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}-4-氧丁酸叔丁酯，化合物(58)(63mg；0.16mmol；1eq.)溶解于DCM(3ml)中。滴加三氟乙酸(0.16ml；2.09mmol；13eq)，反应混合物于室温下搅拌。蒸去溶剂，粗产品用制备HPLC纯化，获得化合物(63)，呈灰白色固体(54mg；29％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.55(s，2H)，2.66(m，2H)，4.60(s，2H)，7.70(s，1H)，12.15(s，2H).M-(ESI)：335.17；M+(ESI)：337.2.HPLC(方法A)，Rt：2.11min(纯度：99.89％)。
实施例64：5-{[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}-5-氧 戊酸(64)
Figure S2006800267463D01021
将5-{[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}-5-氧戊酸甲酯，化合物(59)(78mg；0.21mmol；1eq.)溶解于THF(12ml)和水(3ml)中。加入一水合氢氧化锂(18mg；0.43mmol，2eq)，反应混合物于室温下搅拌20分钟。然后用HCl 1N酸化。蒸去溶剂后，所得粗产品用制备HPLC纯化，获得化合物(64)，呈灰白色固体(5.5mg；8％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.78(t，2H)，2.26(t，2H)，2.46(t，2H)，4.61(s，2H)，7.70(s，1H)，12.10(s，2H).M-(ESI)：349.20；M+(ESI)：351.18.HPLC(方法A)，Rt：2.28min(纯度：100％)。
实施例65：N-({[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰基) 甘氨酸叔丁酯(65)
Figure S2006800267463D01022
将N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-1H-咪唑-1-甲酰胺(中间体6)(160mg；0.48mmol；1eq)溶解于DMF(8ml)中。加入甘氨酸叔丁酯(63.5mg；0.48mmol；1eq)的DMF(1ml)溶液和三乙胺(74μl；0.53mmol；1.10eq)。不到1min后，混合物呈均相。45min后反应完成。减压除去DMF，获得235.8mg黑棕色固体，用制备HPLC纯化。纯化后的流分用饱和NaHCO3中溶液和，用DCM提取预期产品。合并有机层，用MgSO4干燥，过滤，浓缩。获得化合物(65)，呈棕色固体(27.30mg；14％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.48(s，9H)，2.55(s，3H)，4.03(d，J＝6Hz，2H)，4.12(s，2H)，7.19(s，1H).HPLC(方法A)，Rt 3.05min(纯度：100％).M-(ESI)：392.2。
实施例66：4-[({[2-(氰基甲基t)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰基) 氨基]丁酸叔丁酯(66)
Figure S2006800267463D01031
将N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-1H-咪唑-1-甲酰胺(中间体6)(160mg；0.48mmol；1eq)溶解于DMF(8ml)中。加入4-氨基丁酸叔丁酯盐酸盐(94.8mg；0.48mmol；1eq)和三乙胺(148μl；1.07mmol；2.20eq)。不到1min后，混合物呈均相。30min后反应完成。减压除去DMF，所得粗品油溶解于DCM，用饱和NH4Cl溶液洗涤2次，用饱和NaHCO3溶液洗涤2次。有机层用Na2SO4干燥，过滤，浓缩。所得粗产品用制备HPLC纯化。纯化后的流分用饱和NaHCO3溶液中和，用DCM提取预期产品。合并有机层，用MgSO4干燥，过滤，浓缩。获得化合物(66)，呈浅柿色粉末(84.1mg；41％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.39(s，9H)，1.66(m，2H)，2.21(t，J＝7.5Hz，2H)，2.41(s，3H)，3.13(m，2H)，4.59(s，2H)，6.59(m，1H)，7.61(s，1H)，10.36(br s，1H).HPLC(方法A)，Rt 3.41min(纯度：100％).M-(ESI)：420.3。
实施例67：N～2～({[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰 基)-N，N-二甲基甘氨酰胺
Figure S2006800267463D01041
将N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-1H-咪唑-1-甲酰胺(中间体6)(160mg；0.48mmol；1eq)溶解于DMF(7ml)中。加入N，N-二甲基甘氨酰胺乙酸盐(78.5mg；0.48mmol；1eq)的DMF(0.5ml)溶液和三乙胺(148μl；1.07mmol；2.20eq)。不到1min后，混合物呈均相。1h后反应完成。减压除去DMF，获得黑棕色油状物，用制备HPLC纯化。纯化后的流分用饱和NaHCO3溶液中和，用DCM提取预期产品。合并有机层，用MgSO4干燥，过滤，浓缩。获得化合物(67)，呈浅褐色固体(67.6mg；37％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.42(s，3H)，2.86(s，3H)，2.94(s，3H)，4.01(d，J＝6Hz，2H)，4.59(s，2H)，6.84(m，1H)，7.61(s，1H)，10.66(br s，1H).HPLC(方法A)，Rt 2.16min(纯度：97.32％).M-(ESI)：363.23；M+(ESI)：365.21。
实施例68：N-({[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基} 羰基)-β-丙氨酸叔丁酯
Figure S2006800267463D01042
(68)
将N-[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-1H-咪唑-1-甲酰胺(中间体7)(160mg；0.40mmol；1eq)溶解于DMF(8ml)中。加入β-丙氨酸叔丁酯盐酸盐(71.9mg；0.40mmol；1eq)和三乙胺(121μl；0.87mmol；2.20eq)。不到1min后，混合物呈均相。45min后反应完成。减压除去DMF，获得黄色油状物。MeOH中重结晶，获得化合物(68)，呈黄色固体(159.1mg；83％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.40(s，9H)，2.41(m，5H)，3.33(m，2H)，3.68(m，6H)，4.33(m，2H)，6.64(m，1H)，7.90(s，1H)，10.52(br s，1H).HPLC(方法A)，Rt 3.45min(纯度：99.84％).M-(ESI)：480.37；M+(ESI)：482.42。
实施例69：N-[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-N-(2- 吗啉-4-基-2-氧乙基)脲
Figure S2006800267463D01051
将N-[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-1H-咪唑-1-甲酰胺(中间体7)(160mg；0.40mmol；1eq)溶解于DMF(7ml)中。加入2-氨基-1-吗啉-4-基-乙酮(57.0mg；0.40mmol；1eq)的DMF(0.50ml)溶液和三乙胺(60μl；0.44mmol；1.10eq)。1小时15分钟后反应完成。减压除去DMF，获得白色固体，用制备HPLC纯化。纯化后的流分用饱和NaHCO3溶液中和，用DCM提取预期产品。合并有机层，用MgSO4干燥，过滤，浓缩。获得化合物(69)，呈灰白色固体(103.7mg；55％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.36(s，3H)，3.43(m，4H)，3.57(m，4H)，3.68(m，6H)，4(d，J＝3Hz，2H)，4.36(m，2H)，6.95(br s，1H)，7.68(s，1H).HPLC(方法A)，Rt 2.36min(纯度：97.41％).M-(ESI)：479.31；M+(ESI)：481.29。
实施例70：N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-N-(2-吗啉 -4-基-2-氧乙基)脲
Figure S2006800267463D01061
将N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-1H-咪唑-1-甲酰胺(中间体6)(100mg；0.30mmol；1eq)溶解于DMF(5ml)中。加入2-氨基-1-吗啉-4-基-乙酮(43.6mg；0.30mmol；1eq)和三乙胺(46μl；0.33mmol；1.10eq)。20min后反应完成。减压下除去DMF，获得棕色油状物。MeOH中重结晶，获得化合物(70)，呈浅褐色粉末(54.5mg；44％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.42(s，3H)，3.41(m，2H)，3.46(m，2H)，3.57(m，4H)，4.05(d，J＝3Hz，2H)，4.59(s，2H)，6.85(m，1H)，7.61(s，1H)，10.67(br s，1H).HPLC(方法A)，Rt 2.07min(纯度：93.78％).M-(ESI)：405.22；M+(ESI)：407.16。
实施例71：N-({[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰 基)-β-丙氨酸甲酯
Figure S2006800267463D01062
将N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-1H-咪唑-1-甲酰胺(中间体6)(330mg；1mmol；1eq)溶解于DMF(15ml)中。加入β-丙氨酸甲酯盐酸盐(139.4mg；1mmol；1eq)和三乙胺(305μl；2.20mmol；2.20eq)。不到15min后，混合物呈均相。20min后反应完成。减压除去DMF，获得棕色油状物。将其溶解于DCM，用饱和NH4Cl溶液洗涤2次。合并有机层，用Na2SO4干燥，过滤，浓缩。获得化合物(71)，呈棕色固体(296.2mg；81％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.41(s，3H)，2.53(m，2H)，3.36(m，2H)，3.61(s，3H)，4.59(s，2H)，6.70(m，1H)，7.61(s，1H)，10.44(br s，1H).HPLC(方法A)，Rt 2.4 min(纯度：94.04％).M-(ESI)：364.21；M+(ESI)：366.19。
实施例72：N～3～-({[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基} 羰基)-N，N-二异丙基-β-丙氨酰胺
Figure S2006800267463D01071
将N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-1H-咪唑-1-甲酰胺(中间体6)(100mg；0.30mmol；1eq)溶解于DMF(5ml)中。加入N，N-二异丙基-β-丙氨酰胺(胺6)(86.7mg；0.30mmol；1eq)和三乙胺(92μl；0.67mmol；2.20eq)。20min后反应完成。减压除去DMF，获得无色油状物，用制备HPLC纯化。纯化后的流分用饱和NaHCO3溶液中和，用DCM提取预期产品。合并有机层，用MgSO4干燥，过滤，浓缩。获得化合物(72)，呈白色固体(79.8mg；61％)
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.18(d，J＝6Hz，6H)，1.36(d，J＝6Hz，6H)，2.50(s，3H)，2.58(t，J＝6Hz，2H)，3.49(m，1H)，3.63(m，2H)，3.93(m，1H)，4.12(s，2H)，7.14(s，1H)，7.35(br s，1H).HPLC(方法A)，Rt 3.16min(纯度：99.68％).M-(ESI)：433.30；M+(ESI)：435.35。
实施例73：N～3～-({[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基} 羰基)-N-(2-羟基-1，1-二甲基乙基-β-丙氨酰胺
将N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-1H-咪唑-1-甲酰胺(中间体6)(100mg；0.30mmol；1eq)溶解于DMF(5ml)中。加入N-(2-羟基-1，1-二甲基乙基)-β-丙氨酰胺(胺7)(91.3mg；0.33mmol；1.10eq)和三乙胺(92μl；0.67mmol；2.20eq)。20min后反应完成。减压除去DMF，获得橙色油状物，用制备HPLC纯化。纯化后的流分用饱和NaHCO3溶液中和，用DCM提取预期产品。合并有机层，用MgSO4干燥，过滤，浓缩。获得化合物(73)，呈白色固体(74.8mg；58％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.17(s，6H)，2.28(t，J＝6Hz，2H)，2.41(s，3H)，3.28(m，2H)，3.38(d，J＝6Hz，2H)，4.59(s，2H)，4.81(m，1H)，6.64(m，1H)，7.36(br s，1H)，7.60(s，1H)，10.42(br s，1H).HPLC(方法A)，Rt 2.20min(纯度：100％)。
实施例74：N-(叔丁基)-N～3～-({[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑 -2’-基]氨基}羰基)-β-丙氨酰胺
Figure S2006800267463D01081
将N-(叔丁基)-β-丙氨酰胺(胺8)(93.8mg；0.36mmol；1.20eq)溶解于DMF(5ml)中。加入三乙胺(126μl；0.91mmol；3eq)和N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-1H-咪唑-1-甲酰胺(中间体6)(100mg；0.30mmol；1eq)。不到1min后混合物呈均相。45min后反应完成。蒸去溶剂，所得粗产品用制备HPLC纯化。纯化后的流分用饱和NaHCO3溶液中和，用DCM提取预期产品。合并有机层，用MgSO4干燥，过滤，浓缩。获得化合物(74)，呈白色固体(53mg；43％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.31(s，9H)，1.71(br s，1H)，2.46(t，J＝6Hz，2H)，2.50(s，3H)，3.61(m，2H)，4.12(s，2H)，5.74(br s，1H)，7.16(s，1H)，7.56(br s，1H).HPLC(方法A)，Rt 2.62min(纯度：99.77％).M-(ESI)：405.31；M+(ESI)：407.34。
实施例75：N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-N-[3-(2，2-二 甲基-1，3-噻唑烷-3-基)-3-氧丙基]脲
Figure S2006800267463D01091
将3-(2，2-二甲基-1，3-噻唑烷-3-基)-3-氧丙烷-1-胺(胺9)(43.9mg；0.15mmol；1.20eq)溶解于DMF(3ml)中。加入三乙胺(50μl；0.36mmol；3eq)和N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-1H-咪唑-1-甲酰胺(中间体6)(40mg；0.12mmol；1eq)。20min后反应完成。蒸去溶剂，所得无色油状物用制备HPLC纯化。纯化后的流分用饱和NaHCO3溶液中和，用DCM提取预期产品。合并有机层，用MgSO4干燥，过滤，浓缩。获得化合物(75)，呈浅褐色固体(31.9mg；58％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.81(s，6H)，2.51(s，3H)，2.57(m，2H)，2.97(t，J＝6Hz，2H)，3.62(m，2H)，3.84(t，J＝6Hz，2H)，4.12(s，2H)，7.16(s，1H)，7.47(br s，1H).HPLC(方法A)，Rt 2.96min(纯度：91.70％).M-(ESI)：449.27；M+(ESI)：451.35。
实施例76：N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-N-[3-(4，4-二 甲基-1，3-噁唑烷-3-基)-3-氧丙基]脲
Figure S2006800267463D01092
将3-(4，4-二甲基-1，3-噁唑烷-3-基)-3-氧丙烷-1-胺(胺10)(104mg；0.36mmol；1.20eq)溶解于DMF(5ml)中。加入三乙胺(126μl；0.91mmol；3eq)和N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-1H-咪唑-1-甲酰胺(中间体6)(100mg；0.30mmol；1eq)。20min后反应完成。减压下除去DMF，得无色油状物，用制备HPLC纯化。纯化后的流分用饱和NaHCO3溶液中和，用DCM提取预期产品。合并有机层，用MgSO4干燥，过滤，浓缩。获得化合物(76)，呈浅褐色固体(71.3mg；54％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.43(s，6H，少量旋转异构体)，1.47(s，6H，大量旋转异构体)，2.43(t，J＝6Hz，2H，大量旋转异构体)，2.51(s，3H)，2.70(t，J＝6Hz，2H，少量旋转异构体)，3.64(m，2H)，3.72(s，2H，大量旋转异构体)，3.79(s，2H，少量旋转异构体)，4.12(s，2H)，4.94(s，2H，大量旋转异构体)，5.13(s，2H，少量旋转异构体)，7.16(s，1H)，7.51(br s，1H).HPLC(方法A)，Rt 2.51min(纯度：99.82％).M-(ESI)：433.29；M+(ESI)：435.33。
实施例77：N～2～({[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰 基)-N-(2，2-二甲基丙基)甘氨酰胺
Figure S2006800267463D01101
将N-(2，2-二甲基丙基)甘氨酰胺(胺11)(93.8mg；0.36mmol；1.20eq)溶解于DMF(5ml)中。加入三乙胺(126μl；0.91mmol；3eq)和N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-1H-咪唑-1-甲酰胺(中间体6)(100mg；0.30mmol；1eq)。不到15min后混合物呈均相。20min后反应完成。蒸去溶剂，所得粗产品用制备HPLC纯化。纯化后的流分用饱和NaHCO3溶液中和，用DCM提取预期产品。合并有机层，用MgSO4干燥，过滤，浓缩。获得化合物(77)，呈微紫色粉末(83.8mg；68％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ0.83(s，9H)，2.42(s，3H)，2.92(d，J＝6Hz，2H)，3.82(d，J＝6Hz，2H)，4.59(s，2H)，6.81(t，J＝6Hz，1H)，7.61(s，1H)，7.89(t，J＝6Hz，1H)，10.58(br s，1H).HPLC(方法A)，Rt 2.81min(纯度：100％).M-(ESI)：405.30；M+(ESI)：407.32。
实施例78：N-(3-氮杂环辛烷-1-基-3-氧丙基)-N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联 -1，3-噻唑-2’-基]脲
将3-氮杂环辛烷-1-基-3-氧丙烷-1-胺(胺12)(108.3mg；0.36mmol；1.20eq)溶解于DMF(5ml)中。加入三乙胺(126μl；0.91mmol；3eq)和N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-1H-咪唑-1-甲酰胺(中间体6)(100mg；0.30mmol；1eq)。不到15min后混合物呈均相。20min后反应完成。蒸去溶剂，所得粗产品用制备HPLC纯化。纯化后的流分用饱和NaHCO3溶液中和，用DCM提取预期产品。合并有机层，用MgSO4干燥，过滤，浓缩。获得化合物(78)，呈微绿色固体(106.3mg；79％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.45(m，6H)，1.62(m，4H)，2.40(s，3H)，2.52(m，2H)，3.36(m，6H)，4.59(s，2H)，6.72(m，1H)，7.60(s，1H)，10.44(br s，1H).HPLC(方法A)，Rt 3.13min(纯度：100％)M-(ESI)：445.35；M+(ESI)：447.40。
实施例79：N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-N’-[2-(1-异 丙基-1H-咪唑-4-基)乙基]脲
Figure S2006800267463D01112
将2-(1-异丙基-1H-咪唑-4-基)乙胺(胺13)(57mg；0.25mmol；1.20eq)溶解于DMF(5ml)中。加入三乙胺(116μl；0.84mmol；4eq)和N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-1H-咪唑-1-甲酰胺(中间体6)(69.4mg；0.21mmol；1eq)。不到15min后混合物呈均相。45min后反应完成。减压下除去DMF，获得棕色油状物，用快速层析纯化(DCM/MeOH 10/0-9/1梯度，25min)。分离到化合物(79)，呈浅褐色固体(12.3mg；14％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.36(d，J＝6Hz，6H)，2.41(s，3H)，2.61(t，J＝6Hz，2H)，3.37(m，2H)，4.32(sept，J＝6Hz，1H)，4.59(s，2H)，6.62(m，1H)，7.01(m，1H)，7.58(m，1H)，7.60(s，1H)，10.46(br s，1H).HPLC(方法A)，Rt 2.02min(纯度：99.26％).M-(ESI)：414.36；M+(ESI)：416.40。
实施例80：N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-N’-[2-(1-乙 基-1H-咪唑-4-基)乙基]脲
Figure S2006800267463D01121
将2-(1-乙基-1H-咪唑-4-基)乙胺(胺14)(77mg；0.36mmol；1.20eq)溶解于DMF(5ml)中。加入三乙胺(168μl；1.21mmol；4eq)和N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-1H-咪唑-1-甲酰胺(中间体6)(100mg；0.30mmol；1eq)。不到15min后混合物呈均相。45min后反应完成。减压下除去DMF，获得棕色油状物，用快速层析纯化(DCM/MeOH 10/0-9/1梯度，25min)。分离到化合物(80)，呈浅褐色固体(23.5mg；19％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.31(t，J＝6Hz，3H)，2.41(s，3H)，2.61(t，J＝6Hz，2H)，3.37(m，2H)，3.92(q，J＝6Hz，2H)，4.59(s，2H)，6.62(m，1H)，6.95(m，1H)，7.54(d，J＝3Hz，1H)，7.60(s，1H)，10.44(br s，1H).HPLC(方法A)，Rt 1.87min(纯度：98.07％)。
实施例81：N-[2-(5-叔丁基-1，2，4-噁二唑-3-基)乙基]-N’-[2-(氰基甲 基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]脲
Figure S2006800267463D01131
将2-(5-叔丁基-1，2，4-噁二唑-3-基)乙胺(胺15)(136mg；0.48mmol；2eq)溶解于DMF(4ml)中。加入三乙胺(133μl；0.96mmol；4eq)和N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-1H-咪唑-1-甲酰胺(中间体6)(79.3mg；0.24mmol；1eq)。不到1min后混合物呈均相。30min后反应完成。蒸去溶剂，所得粗产品用制备HPLC纯化。纯化后的流分用饱和NaHCO3溶液中和，用DCM提取预期产品。合并有机层，用MgSO4干燥，过滤，浓缩。获得化合物(81)，呈浅褐色粉末(32.5mg；31％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.36(s，9H)，2.41(s，3H)，2.88(T，J＝6Hz，2H)，3.49(m，2H)，4.59(s，2H)，6.71(m，1H)，7.61(s，1H)，10.53(br s，1 H).HPLC(方法A)，Rt 3.15min(纯度：99.4％).M-(ESI)：430.35；M+(ESI)：432.40。
实施例82：N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-N’-[2-(5-异 丙基-1，2，4-噁二唑-3-基)乙基]脲
将2-(5-异丙基-1，2，4-噁二唑-3-基)乙胺(胺16)(129.2mg；0.48mmol；2eq)溶解于DMF(4ml)中。加入三乙胺(133μl；0.96mmol；4eq)和N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-1H-咪唑-1-甲酰胺(中间体6)(79.3mg；0.24mmol；1eq)。不到1min后混合物呈均相。30min后反应完成。蒸去溶剂，所得粗产品用制备HPLC纯化。纯化后的流分用饱和NaHCO3溶液中和，用DCM提取预期产品。合并有机层，用MgSO4干燥，过滤，浓缩。获得化合物(82)，呈白色粉末(29.6mg；30％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.30(d，J＝6Hz，6H)，2.41(s，3H)，2.88(t，J＝6Hz，2H)，3.24(m，1H)，3.49(m，2H)，4.59(s，2H)，6.71(br s，1H)，7.61(s，1H)，10.52(br s，1H).HPLC(方法A)，Rt 2.94min(纯度：91.6％).M-(ESI)：416.33；M+(ESI)：418.36。
实施例83：N-(4’-甲基-2-{[5-(1-甲基哌啶-4-基)-1，2，4-噁二唑-3-基]甲 基}-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基)乙酰胺(83)
Figure S2006800267463D01141
步骤I：N-{2-[(2E)-2-氨基-2-(羟亚氨基)乙基]-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基}乙酰胺
将N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]乙酰胺，化合物(3)(50mg；0.18mmol；1eq.)溶解于二噁烷(10ml)中。加入盐酸羟胺(15mg；0.22mmol；1.20eq.)和N，N-二乙基乙胺(0.03ml；0.22mmol；1.20eq.)，反应混合物于80℃加热过夜。冷却，蒸去二噁烷。残留物加入EtOAc，用水(3×10mL)洗涤数次。有机相用MgSO4干燥，过滤，浓缩。粗产物用硅胶快速层析纯化(环己烷/乙酸乙酯，50/50)，获得标题化合物，呈油状物(50mg；95％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ2.10(s，3H)，2.45(s，3H)，3.72(m，1H)，5.62(m，2H)，7.51(s，1H)，9.10(m，1H).M-(ESI)：310.2；M+(ESI)：312.2.HPLC(方法A)，Rt：1.38min(纯度：81.1％)。
步骤II：N-(4’-甲基-2-{[5-(1-甲基哌啶-4-基)-1，2，4-噁二唑-3-基]甲基}-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基)乙酰胺(83)
室温下，将上述步骤I获得的N-{2-[(2E)-2-氨基-2-(羟亚氨基)乙基]-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基}乙酰胺(45mg；0.14mmol；1eq.)溶解于DMF(3ml)中。将预先用1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(138.5mg；0.72mmol；5eq.)于DCM(3ml)中活化的N-甲基-4-哌啶羧酸(102mg；0.72mmol；5eq.)加入到反应混合物中。室温下搅拌3小时。反应完成后，加水(1ml)，浓缩溶剂至干。残留物加入EtOAc，用水(3×5mL)洗涤数次。有机相用MgSO4干燥，过滤，浓缩。残留物直接加入吡啶(3mL)，于90℃加热12小时。冷却反应混合物，浓缩吡啶至干。粗产物用硅胶快速层析纯化(环己烷/乙酸乙酯，10/90)，获得化合物(83)，呈油状物(30mg；66％)。
1HNMR(DMSO-d6，300MHz)δ1.90(m，2H)，2.10(s，3H)，2.30(m，2H)，2.40(s，3H)，2.75(s，3H)，3.10(m，2H)，3.40(m，1H)，3.50(m，2H)，4.60(s，2H)，7.66(s，1H)，9.50(m，1H)，12.10(m，1H).M-(ESI)：417.5；M+(ESI)：419.5.HPLC(方法A)，Rt：1.96min(纯度：86.9％)。
实施例56：生物实验
本发明的化合物可以进行下列实验：
a)高通量PI3K脂激酶实验(结合测定)：
本发明化合物抑制PI3K诱导酶的脂磷酸化的作用可以由以下结合测定试验测得。
本测定法结合了闪烁迫近分析(scintillation proximity assay)技术(SPA，Amersham)和新霉素(聚阳离子抗生素)以高度亲和力和特异性结合磷脂的能力。闪烁迫近分析法基于弱放射性同位素(例如3H，125I，33P)的性质。用新霉素包覆的SPA珠与PI3K重组体和放射性ATP在同一个孔中培养后，通过放射性磷脂与新霉素的特异性结合，将放射性磷脂捕获在SPA珠上，从而检测磷酸化磷脂底物。
向含5μl式(I)受试化合物(溶解于6％的DMSO(二甲亚砜)中，得到浓度为100、30、10、3、1、，0.3、0.1、0.03、0.01、01μM的检测化合物)的384孔MTP中，添加下列实验成分：1)5μl(58ng)人重组GST-PI3Kγ(在Hepes中，40mM，pH7.4，二硫苏糖醇1mM和5％乙二醇)；2)10μ1类脂微泡和3)10μl激酶缓冲液([33P]γ-APT 45μM/60nCi，MgCl2 30mM，DTT二硫苏糖醇1mM，β-磷酸甘油1mM，Na3VO4 100μM，胆酸钠0.3％，在Hepes中40mM，pH7.4)。在室温下轻柔搅拌，孵化180分钟，加入含有100μg用新霉素包覆的PVT SPA珠的PBS溶液60μl(其中含有ATP10mM和EDTA 5mM)终止反应。继续在室温下轻柔搅拌60分钟使磷脂与新霉素-SPA珠结合。将用新霉素包覆的PVT SPA珠在1500xg条件下沉淀5分钟，然后用Wallac MicroetaTM平板计数器作闪烁计数对所得的放射性PtdIns(3)P进行定量分析。
下表I中所列数值是对于PI3Kγ的IC50(nM)，也即，要达到对所述靶标50％抑制所需的量。所述数值显示了噻唑化合物对PI3Kγ具有相当大的抑制效能。
下表I中列出了本发明化合物的抑制活性的实例。
表I：噻唑衍生物对PI3Kγ的IC50值
实施例序号.     PI3KγIC50(μM)
    1     0.870
    4     0.494
    6     0.355
    8     0.186
    9     0.601
    10     2.201
    13     0.013
    23     0.328
    25     1.54
    36     0.795
    54     1.420
b)细胞酶联免疫吸附测定对PI3K抑制的监测：
本发明化合物抑制PI3K诱导的Akt/PKB磷酸化作用的效能可通过以下基于细胞的实验加以测定。
补体5a刺激后巨嗜细胞中Akt/PKB磷酸化的测定：在细胞刺激前24小时，将Raw 264：Raw 264-7巨嗜细胞(培养于含10％胎牛血清和抗生素的DMEM-F12培养基中)以20000个细胞/孔置于96孔MTP中。使细胞处于血清饥饿状态下2小后，用50mM的补体5a刺激细胞5分钟，再用抑制剂进行20分钟的预处理。将活化的细胞固定在4％的甲醛中，20分钟后以含1％Troton X-100的PBS洗涤3次。然后在含0.6％H2O2和0.1％叠氮化钠的PBS/Triton中培养20分钟将内源性过氧化物酶阻断，并用PBS/Triton洗涤3次。再用10％胎牛血清的PBS/Triton液培养60分钟后将细胞封闭起来。之后，用含5％牛血清白蛋白(BSA)、以PBS/Triton稀释800倍的初级抗体(抗磷酸丝氨酸473Akt IHC，细胞传导(Cell Signaling))于4℃培养过夜，检测磷酸化Akt/PKB。以PBS/Triton洗涤3次后，用连接山羊抗家兔次级抗体的过氧化物酶(在PBS/Triton中，稀释度为1/400，包含5％牛血清蛋白BSA)培养细胞60分钟，再以PBS/Triton洗涤3次，以PBS中洗涤2次，之后在100μl发光底物试剂溶液(Pierce)中培养2分钟，记录读数(1s/孔)。
下表II中显示的数值反映了与基础水平相比对AKT磷酸化抑制的百分率。所述的数值显示了在巨嗜细胞中噻唑化合物对AKT磷酸化激活作用的明显效应。
下表II中给出了本发明化合物抑制活性的实例。
表II：噻唑衍生物在细胞实验中的IC50值
实施例序号.     细胞实验(P-Akt，Elisa)IC50[nM]
    2     710
    8     910
实施例57：硫胶质诱导的腹膜腔细胞募集模型
采用以下试验检测本发明化合物体内抑制硫胶质腹腔内攻击后白细胞迁移的作用。
实验方案
8-10周龄雌性C3H小白鼠禁食18小时。腹腔内注射硫胶质)(1.5％，40ml/kg)前15分钟，小鼠用式(I)噻唑化合物口服处理。对照小鼠接受作为赋形剂的CMC/Tween(10ml/kg)。然后采用CO2吸入处死小鼠，用5ml冰冷的PBS/1mM EDTA洗涤腹腔两次。分别取硫胶质攻击后4小时和48小时的灌洗液评估中性粒细胞或巨噬细胞各自的募集情况。用BeckmanCoulterACT 5diffTM白细胞计数仪作白细胞(中性粒细胞或巨噬细胞)计数。以地塞米松为参照药物。
实施例58：药物制剂的制备
制剂1-片剂
将式(I)化合物干粉与干燥的明胶粘合剂以约1∶2重量比混合。加入少量硬脂酸镁作为润滑剂。将混合物用压片机压成240-270mg片剂，每片含活性噻唑化合物80-90mg。
制剂2-胶囊剂
将式(I)化合物干粉与淀粉稀释剂以约1∶1重量比混合。将混合物充填成250mg胶囊(每个胶囊含125mg活性噻唑化合物)。
制剂3-液体剂
将式(I)化合物(1250mg)、蔗糖(1.75g)和黄原胶(4mg)混合，压过第10号US筛，然后与先前制备的微晶纤维素和羧甲基纤维素(11∶89，50mg)的水溶液混合。将苯甲酸钠(10mg)、矫味剂和着色剂用水稀释，并在搅拌下加入。然后加入足量水，使总体积为5ml。
制剂4-片剂
将式(I)化合物干粉与干燥的明胶粘合剂以约1∶2重量比混合。加入少量硬脂酸镁作为润滑剂。将混合物用压片机压成450-900mg片剂(活性噻唑化合物150-300mg)。
制剂5-注射剂
将式(I)化合物溶于缓冲灭菌盐水可注射水性介质，浓度约为5mg/ml。

Claims (30)

1.式(I)所示噻唑衍生物，其几何异构体、其光学活性形式，如对映体、非对映体和外消旋形式、以及其药学上可接受的盐：
Figure S2006800267463C00011
其中R1选自-C(O)R5、C1-C6-烷基、C2-C6-烯基、C2-C6-炔基、芳基C1-C6-烷基、杂芳基C1-C6-烷基、C3-C8环烷基C1-C6-烷基和杂环烷基C1-C6-烷基；
R2选自H、卤素、C1-C6-烷基、C2-C6-烯基和C2-C6-炔基；
R3选自H、卤素、C1-C6-烷基、C2-C6-烯基和C2-C6-炔基；
R4选自-C(O)R6、芳基、杂芳基、杂环烷基和C3-C8环烷基；
R5选自H、羟基、烷氧基、氨基、芳基、杂芳基、C3-C8环烷基和杂环烷基；
R6选自H、C1-C6-烷基、C2-C6-烯基、C2-C6-炔基、芳基C1-C6-烷基、杂芳基C1-C6-烷基和氨基；
X选自S和O。
2.如权利要求1所述的噻唑衍生物，其中R1是-C(O)R5。
3.如权利要求1所述的噻唑衍生物，其中R1选自C1-C6-烷基、C2-C6-烯基、C2-C6-炔基、芳基C1-C6-烷基、杂芳基C1-C6-烷基、C3-C8环烷基C1-C6-烷基和杂环烷基C1-C6-烷基。
4.如前面任一权利要求所述的噻唑衍生物，其中R2是H。
5.如前面任一权利要求所述的噻唑衍生物，其中R3是甲基。
6.如前面任一权利要求所述的噻唑衍生物，其中R4选自芳基、杂芳基和C3-C8环烷基。
7.权利要求1-5之一所述的噻唑衍生物，其中R4选自-C(O)R6。
8.如前面任一权利要求所述的噻唑衍生物，其中R5选自羟基和烷氧基。
9.如权利要求1-7之一所述的噻唑衍生物，其中R5是氨基。
10.如权利要求1-7之一所述的噻唑衍生物，其中R5选自芳基、杂芳基、C3-C8环烷基和杂环烷基。
11.如前面任一权利要求所述的噻唑衍生物，其中R6选自C1-C6-烷基、C2-C6-烯基、C2-C6-炔基、芳基C1-C6-烷基和C1-C6-烷基。
12.如权利要求1-10之一所述的噻唑衍生物，其中R6是任选取代的氨基。
13.如前面任一权利要求所述的噻唑衍生物，其中X是S。
14.如前面任一权利要求所述的噻唑衍生物，其中R1是-C(O)R5、R2是H及R3是甲基。
15.如前面任一权利要求所述的噻唑衍生物，其中R1选自C1-C6-烷基、C2-C6-烯基、C2-C6-炔基、芳基C1-C6-烷基和杂芳基C1-C6-烷基；R2是H及R3是甲基。
16.如前面任一权利要求所述的噻唑衍生物，选自以下组：
2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-羧酸乙酯；
2’-(乙酰氨基)-N-烯丙基-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]乙酰胺；
2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-羧酸；
2’-(乙酰氨基)-N-(2-甲氧基乙基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-N-(四氢呋喃-2-基甲基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
2’-(乙酰氨基)-N-[2-(二甲基氨基)乙基]-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
N-[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]乙酰胺；
N-{4’-甲基-2-[(4-甲基哌嗪-1-基)羰基]-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基}乙酰胺；
2’-(乙酰氨基)-N-[3-(二甲基氨基)丙基]-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
2’-(乙酰氨基)-N-(2-羟基乙基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
2’-(乙酰氨基)-N-(2-氰基乙基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-N-1H-四唑-5-基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
4-({[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]羰基}氨基)苯甲酸；
3-({[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]羰基}氨基)苯甲酸；
2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-N-[3-(1H-四唑-5-基)苯基]-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
2’-(乙酰氨基)-N-苄基-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-N-丙基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-N-[4-(1H-四唑-5-基)苯基]-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
3-({[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]羰基}氨基)-2-羟基苯甲酸；
1-{[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]羰基}哌啶-3-羧酸；
5-({[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]羰基}氨基)-2-羟基苯甲酸；
N-[4’-甲基-2-(2H-四唑-5-基甲基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]乙酰胺；
1-{[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]羰基}哌啶-4-羧酸；
2’-(乙酰氨基)-N-[3-(5-氨基-1，3，4-噻二唑-2-基)苯基]-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
N-{2-[(3-羟基哌啶-1-基)羰基]-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基}乙酰胺；
N-(2-{[4-(羟基甲基)哌啶-1-基]羰基}-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基)乙酰胺；
N-(2-{[4-(2-羟基乙基)哌啶-1-基]羰基}-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基)乙酰胺；
N-{2-[(4-羟基哌啶-1-基)羰基]-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基}乙酰胺；
2’-(乙酰氨基)-N-1H-1，2，3-苯并三唑-5-基-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
4-({[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]羰基}氨基)-2-羟基苯甲酸；
4-({[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]羰基}氨基)-2-氟苯甲酸；
2’-(乙酰氨基)-N-[3-(5-羟基-1，3，4-噁二唑-2-基)苯基]-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
2’-(乙酰氨基)-N-[4-(5-羟基-1，3，4-噁二唑-2-基)苯基]-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
N-[2-(羟基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]乙酰胺；
N-(2-甲氧基乙基)-N’-[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]脲；
N-({[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰基)-β-丙氨酸乙酯；
N-[2-(1，4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基羰基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]乙酰胺；
2’-(乙酰氨基)-N-(2，3-二羟基丙基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
N-[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]脲；
N-{4’-甲基-2-[(3-氧哌嗪-1-基)羰基]-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基}乙酰胺；
N-{4’-甲基-2-[(4-氧哌啶-1-基)羰基]-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基}乙酰胺；
N-{2-[(3-羟基吡咯烷-1-基)羰基]-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基}乙酰胺；
2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-N-丙-2-炔-1-基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
N-{2-[(4-乙酰基哌嗪-1-基)羰基]-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基}乙酰胺；
N～1～，N～1～-二甲基-N～2～-({[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰基)甘氨酰胺；
N-({[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰基)-β-丙氨酸；
N-{2-[(4-氟哌啶-1-基)羰基]-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基}乙酰胺；
N-(2-{[(1S，5S，7S)-7-(羟基甲基)-6，8-二氧杂-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]羰基}-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基)乙酰胺；
N-({[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰基)-β-丙氨酸乙酯；
N-(2-{[(1R，5R，7R)-7-(羟基甲基)-6，8-二氧杂-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]羰基}-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基)乙酰胺；
N-({[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰基)-β-丙氨酸叔丁酯；
[4’-甲基-2’-(吡嗪-2-基氨基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]乙腈；
4’-甲基-2’-(吡嗪-2-基氨基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2-羧酸乙酯；
[4’-甲基-2’-(1H-吡唑-3-基氨基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]乙腈；
N-[4’-甲基-2-(2-吗啉-4-基-2-氧乙基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]乙酰胺；
2-[2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-基]乙酰胺；
4-{[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}-4-氧丁酸叔丁酯；
5-{[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}-5-氧戊酸甲酯；
6-{[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}-6-氧己酸甲酯；
2’-(乙酰氨基)-N，N，4’-三甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
2’-(乙酰氨基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2-甲酰胺；
4-{[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}-4-氧丁酸；
5-{[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}-5-氧戊酸；
N-({[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰基)甘氨酸叔丁酯；
4-[({[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰基)氨基]丁酸叔丁酯；
N～2～-({[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰基)-N～1～，N～1～-二甲基甘氨酰胺；
N-({[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰基)-β-丙氨酸叔丁酯；
N-[4’-甲基-2-(吗啉-4-基羰基)-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-N-(2-吗啉-4-基-2-氧乙基)脲；
N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-N-(2-吗啉-4-基-2-氧乙基)脲；
N-({[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰基)-β-丙氨酸甲酯；
N～3～-({[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰基)-N～1，N～1-二异丙基-β-丙氨酰胺；
N-3-({[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰基)-N-1-(2-羟基-1，1-二甲基乙基)-β-丙氨酰胺；
N～1～-(叔丁基)-N～3～-({[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰基)-β-丙氨酰胺；
N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-N-[3-(2，2-二甲基-1，3-噻唑烷-3-基)-3-氧丙基]脲；
N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-N-[3-(4，4-二甲基-1，3-噁唑烷-3-基)-3-氧丙基]脲；
N-2-({[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]氨基}羰基)-N-1-(2，2-二甲基丙基)甘氨酰胺；
N-(3-氮杂环辛烷-1-基-3-氧丙基)-N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]脲；
N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-N’-[2-(1-异丙基-1H-咪唑-4-基)乙基]脲；
N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-N’-[2-(1-乙基-1H-咪唑-4-基)乙基]脲；
N-[2-(5-叔丁基-1，2，4-噁二唑-3-基)乙基]-N’-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]脲；
N-[2-(氰基甲基)-4’-甲基-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基]-N’-[2-(5-异丙基-1，2，4-噁二唑-3-基)乙基]脲；
N-(4’-甲基-2-{[5-(1-甲基哌啶-4-基)-1，2，4-噁二唑-3-基]甲基}-4，5’-联-1，3-噻唑-2’-基)乙酰胺。
17.式(Ia)所示噻唑衍生物，其几何异构体、其光学活性形式，如对映体、非对映体和外消旋形式、以及其药学上可接受的盐：
Figure S2006800267463C00071
其中R1选自-C(O)R5、C1-C6-烷基、C2-C6-烯基、C2-C6-炔基、芳基C1-C6-烷基、杂芳基C1-C6-烷基、C3-C8环烷基C1-C6-烷基和杂环烷基C1-C6-烷基；
R2选自H、卤素、C1-C6-烷基、C2-C6-烯基和C2-C6-炔基；
R3选自H、卤素、C1-C6-烷基、C2-C3-烯基和C2-C6-炔基；
R5选自H、羟基、烷氧基、氨基、芳基、杂芳基、C3-C8环烷基和杂环烷基；
X选自S和O；
但是，式Ia化合物不是以下化合物：
2’-氨基-4’-甲基-[4，5’-联噻唑]-2-乙腈；
2’-氨基-4’-甲基-(苯基亚肼基)-[4，5’-联噻唑]-2-乙腈；
2’-氨基-[(4-氯苯基)亚肼基]-4’-甲基-[4，5’-联噻唑]-2-乙腈；或
2’-氨基-2-甲基-[4，5’-联噻唑]-4’-羧酸乙酯。
18.如权利要求17所述的噻唑衍生物，其中R1是-C(O)R5。
19.如权利要求17所述的噻唑衍生物，其中R1选自C1-C6-烷基、C2-C6-烯基、C2-C6-炔基、芳基C1-C6-烷基、杂芳基C1-C6-烷基、C3-C8环烷基C1-C6-烷基和杂环烷基C1-C6-烷基。
20.如权利要求17所述的噻唑衍生物，其中R1是H。
21.如权利要求17所述的噻唑衍生物，其中R3是甲基。
22.如权利要求1-21所述的噻唑衍生物，所述衍生物用作药物。
23.权利要求1-21所述噻唑衍生物、其异构体及它们的混合物在制备预防和/或治疗如下疾病的药物上的应用，所述疾病选自自身免疫和/或炎症性疾病、心血管疾病、神经退行性疾病、细菌和病毒感染、肾脏疾病、血小板聚集、癌症、移植、红细胞缺乏症、移植排斥反应和肺损伤。
24.如权利要求23所述的应用，其中所述疾病选自多发性硬化症、银屑病、类风湿性关节炎、全身性红斑狼疮、炎性肠病、肺部炎症、血栓形成或脑感染/炎症，如脑膜炎或脑炎。
25.如权利要求24所述的应用，其中所述疾病选自阿尔茨海默尔病、亨廷顿氏病、CNS损伤、中风或局部缺血症状。
26.如权利要求25所述的应用，其中所述疾病选自动脉粥样硬化、心脏肥大、心肌细胞功能障碍、血压升高或血管收缩。
27.如权利要求23所述的应用，其中所述疾病选自慢性阻塞性肺疾病、过敏性休克、纤维症、银屑病、变态反应性疾病、哮喘、中风或局部缺血症状、局部缺血-再灌注、血小板聚集/激活、骨骼肌萎缩/肥大、癌组织中白细胞募集、血管生成、入侵转移、黑色素瘤、Karposi肉瘤、急性和慢性细菌和病毒感染、败血症、移植排斥反应、肾小球硬化症、肾小球肾炎、进行性肾纤维化、肺部或者全肺气道炎症中内皮和上皮损伤。
28.如权利要求23-27之一所述的应用，其中通过调节、特别是抑制PI3激酶的活性来治疗疾病。
29.如权利要求28所述的应用，其中所述PI3激酶是PI3激酶-γ。
30.药物组合物，包含至少一种权利要求1-21之一所述的噻唑衍生物，及其药学上可接收的载体、稀释剂或赋形剂。
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2013056684A2 (zh) * 2011-10-18 2013-04-25 华东理工大学 做为dhodh抑制剂的噻唑衍生物及其应用
CN103772311A (zh) * 2012-10-26 2014-05-07 中国医学科学院放射医学研究所 取代的2,2-二甲基噻唑烷类化合物及其制法和用途
CN103772311B (zh) * 2012-10-26 2018-06-01 中国医学科学院放射医学研究所 取代的2，2-二甲基噻唑烷类化合物及其制法和用途
CN111675706A (zh) * 2020-04-21 2020-09-18 南开大学 一类异噻唑联噻唑酰胺衍生物及其制备方法和用途

Families Citing this family (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AR044519A1 (es) 2003-05-02 2005-09-14 Novartis Ag Derivados de piridin-tiazol amina y de pirimidin-tiazol amina
US7879888B2 (en) * 2005-05-24 2011-02-01 Merck Serono Sa Thiazole derivatives and use thereof
UA96964C2 (ru) * 2006-12-04 2011-12-26 Астразенека Аб Соединения полициклической мочевины с антибактериальными свойствами
US9370508B2 (en) * 2007-02-20 2016-06-21 Novartis Ag Imidazoquinolines as dual lipid kinase and mTOR inhibitors
CN101939319A (zh) * 2007-12-20 2011-01-05 诺瓦提斯公司 联噻唑衍生物、它们的制备方法以及它们作为药物的用途
PA8809001A1 (es) 2007-12-20 2009-07-23 Novartis Ag Compuestos organicos
UA104147C2 (uk) 2008-09-10 2014-01-10 Новартис Аг Похідна піролідиндикарбонової кислоти та її застосування у лікуванні проліферативних захворювань
AU2010268058A1 (en) 2009-07-02 2012-01-19 Novartis Ag 2-carboxamide cycloamino ureas useful as PI3K inhibitors
EP2492269A4 (en) 2009-10-19 2013-08-07 Taisho Pharmaceutical Co Ltd aminothiazole
DE102013204081A1 (de) * 2013-03-11 2014-09-11 Beiersdorf Ag Wirkstoffkombinationen aus Alkylamidothiazolen und einen oder mehreren kosmetisch oder dermatologisch unbedenklichen Konservierungsmitteln
DE102013204097A1 (de) * 2013-03-11 2014-10-30 Beiersdorf Ag Wirkstoffkombinationen aus Alkylamidothiazolen und einer oder mehreren kosmetisch oder dermatologisch unbedenklichen UV-Filtersubstanzen
DE102013204088A1 (de) * 2013-03-11 2014-09-11 Beiersdorf Ag Wirkstoffkombinationen aus Alkylamidothiazolen und einen oder mehreren kosmetisch oder dermatologisch relevanten Duftstoffen
CA2996281C (en) * 2015-08-31 2022-03-08 Regents Of The University Of Minnesota Opioid receptor modulators and use thereof
RU2696203C1 (ru) * 2018-09-10 2019-07-31 Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Белгородский государственный национальный исследовательский университет" (НИУ "БелГУ") Способ профилактики церебральной ишемии
EP3811940B1 (en) * 2019-10-22 2023-05-10 Kemijski Institut Substituted 4,5'-bithiazoles as inhibitors of the human dna topoisomerase ii

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4649146A (en) * 1983-01-31 1987-03-10 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Thiazole derivatives and pharmaceutical composition comprising the same
GB8302591D0 (en) * 1983-01-31 1983-03-02 Fujisawa Pharmaceutical Co Thiazole derivatives
EP1816127A1 (en) * 1999-04-22 2007-08-08 H. Lundbeck A/S Triazine derivatives for use as selective npy (y5) antagonists
UA71971C2 (en) * 1999-06-04 2005-01-17 Agoron Pharmaceuticals Inc Diaminothiazoles, composition based thereon, a method for modulation of protein kinases activity, a method for the treatment of diseases mediated by protein kinases
JP2002053566A (ja) * 2000-08-11 2002-02-19 Japan Tobacco Inc チアゾール化合物及びその医薬用途
US7163952B2 (en) * 2001-12-03 2007-01-16 Japan Tobacco Inc. Azole compound and medicinal use thereof
CA2474322A1 (en) * 2002-01-25 2003-07-31 Kylix Pharmaceuticals B.V. 4(hetero-) aryl substituted (thia-/oxa-/pyra) zoles for inhibition of tie-2
US20030158199A1 (en) * 2002-01-25 2003-08-21 Kylix, B.V. Novel compounds for inhibition of Tie-2
MY156407A (en) * 2002-02-28 2016-02-26 Novartis Ag 5-phenylthiazole derivatives and use as p13 kinase inhibitors
GB0305152D0 (en) * 2003-03-06 2003-04-09 Novartis Ag Organic compounds
AR044519A1 (es) 2003-05-02 2005-09-14 Novartis Ag Derivados de piridin-tiazol amina y de pirimidin-tiazol amina
GB0320197D0 (en) 2003-08-28 2003-10-01 Novartis Ag Organic compounds
US7879888B2 (en) 2005-05-24 2011-02-01 Merck Serono Sa Thiazole derivatives and use thereof

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2013056684A2 (zh) * 2011-10-18 2013-04-25 华东理工大学 做为dhodh抑制剂的噻唑衍生物及其应用
WO2013056684A3 (zh) * 2011-10-18 2013-06-13 华东理工大学 作为dhodh抑制剂的噻唑衍生物及其应用
CN103998434A (zh) * 2011-10-18 2014-08-20 华东理工大学 作为dhodh抑制剂的噻唑衍生物及其应用
CN103998434B (zh) * 2011-10-18 2016-10-12 华东理工大学 作为dhodh抑制剂的噻唑衍生物及其应用
CN103772311A (zh) * 2012-10-26 2014-05-07 中国医学科学院放射医学研究所 取代的2,2-二甲基噻唑烷类化合物及其制法和用途
CN103772311B (zh) * 2012-10-26 2018-06-01 中国医学科学院放射医学研究所 取代的2，2-二甲基噻唑烷类化合物及其制法和用途
CN111675706A (zh) * 2020-04-21 2020-09-18 南开大学 一类异噻唑联噻唑酰胺衍生物及其制备方法和用途

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