CN101233107A

CN101233107A - 作为趋化因子受体调节剂用于治疗呼吸系统疾病的新哌啶衍生物

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Publication number: CN101233107A
Application number: CNA2006800283273A
Authority: CN
Inventors: 朱利恩·乔范尼尼; 博-戈兰·约瑟夫森; 玛格丽特·门索尼德斯-哈斯马; 黑肯·舒尔茨
Original assignee: AstraZeneca AB
Current assignee: AstraZeneca AB
Priority date: 2005-08-01
Filing date: 2006-07-31
Publication date: 2008-07-30
Also published as: AU2006276342A1; IL188856A0; KR20080032135A; WO2007015664A1; US20080194632A1; NO20081082L; BRPI0613925A2; EP1912942A1; JP2009503063A; CA2617127A1; MX2008001067A

Abstract

本发明提供式(I)的化合物、其盐和多晶型物，式(I)中m、R¹、R²和R³如说明书中所定义，制备该化合物、盐和多晶型物的方法，含有这些化合物、盐和/或多晶型物的药物组合物，以及它们在治疗中的用途。

Description

作为趋化因子受体调节剂用于治疗呼吸系统疾病的新哌啶衍生物

本发明涉及新化合物、其盐和多晶型物，制备该化合物，盐和多晶型物的方法，含有这些化合物、盐或多晶型物的药物组合物，以及它们在治疗中的用途。

趋化因子(Chemokines)在各种疾病和失调的免疫和炎性反应中起着重要作用，这些疾病和失调包括哮喘(asthma)、变应性疾病(allergic disease)、类风湿性关节炎和动脉粥样硬化。这些被分泌出的小分子属于不断增加的8-14kDa蛋白超家族，该家族特征为保守的4个半胱氨酸基序。趋化因子超家族可分成显示出特征性结构基序的两类主要家族Cys-X-Cys(C-X-C)和Cys-Cys(C-C)。这两个家族是根据半胱氨酸残基NH-近端对之间的单个氨基酸插入和序列相似性来区分的。

趋化因子是单核细胞、淋巴细胞和嗜中性粒细胞的引诱物和活化剂。

C-C趋化因子包括强效化学引诱物，例如人单核细胞趋化蛋白1-3(MCP-1，MCP-2和MCP-3)，RANTES(调节活化、正常T表达和分泌)、嗜酸细胞活化趋化因子(eotaxin)以及巨噬细胞炎性蛋白1α和1β(MIP-1α和MIP-1β)。C-X-C趋化因子包括几种强效的化学引诱物和活化剂，如白介素-8(IL-8)和嗜中性粒细胞活化肽2(NAP-2)。

研究已经表明趋化因子的作用是通过G蛋白-偶联受体亚族介导的，其中这些受体称为CCR1、CCR2、CCR2A、CCR2B、CCR3、CCR4、CCR5、CCR6、CCR7、CCR8、CCR9、CCR10、CXCR1、CXCR2、CXCR3和CXCR4。由于调节这些受体的药物可用于治疗上述提及的那些疾病和障碍，因此这些受体表现了较好的药物开发目标。

国际公开文本WO01/98273和WO03/051839描述调节MIP-1α趋化因子受体活性的苄基-哌啶。

药物作用于CCR1受体的期望性质是例如当测定它抑制CCR1受体的活性能力时，它具有高效能。也期望的是，这种药物具有好的选择性和药物代谢动力学性质，以进一步提高药效。例如，这种药物具有好的代谢稳定性将会是有利的。

也期望的是，化合物对human ether-a-go-go-related-gene(hERG)-编码的钾通道显示出低活性。在这方面，对体外hERG结合的低活性表示体内的低活性。

本发明人已经确认了调节CCR1受体活性并且具有特别有利的效能、选择性和/或药物代谢动力学性质的新化合物。

活性成分的化学稳定性、固态稳定性和“贮存期限(shelf life)”是重要的因素。药品和含有它的组合物应该优选能够有效地贮存适当的时期，而不显示出活性组分的物理化学特性(例如它的化学组成、密度、吸湿性和溶解度)的显著变化。另外，能够提供尽可能化学纯形式的药物也是重要的。

本领域的技术人员应该理解，通常，如果药物能够容易地以稳定的形式(例如稳定的结晶形式)获得，那么可提供容易处理、容易制备合适的药物组合物和更可靠的溶解度性能(solubility profile)方面的优点。

附图说明：

图1.N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}乙酰胺苯甲酸盐(多晶型物A)的X射线粉末衍射峰。

图2.N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}乙酰胺苯甲酸盐(多晶型物B)的X射线粉末衍射峰。

图3.N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}乙酰胺糠酸盐(多晶型物A)的X射线粉末衍射峰。

图4.N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}乙酰胺糠酸盐(多晶型物B)的X射线粉末衍射峰。

本发明提供式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂化物，

其中

m为1或2；

每个R¹独立地表示卤素；

R²表示氢原子或甲基；和

R³表示C₁-C₄烷基。

尤其是，本发明人已经意想不到地发现，式(I)所示结构右侧的特定取代模式引起对CCR1受体活性的效能的提高。不受限于任何具体理论，这种利的性质被认为至少部分是由于存在式(I)分子右侧苯环上的取代基以及所述取代基的连接点。

在本发明的上下文中，烷基取代基可为直链或支化的。

R¹表示卤素原子，例如氟、氯、溴或碘原子，尤其是氯原子。

在本发明的一种实施方式中，m为1，R¹表示卤素原子，尤其是氯原子。

在另外的实施方式中，m为1，R¹表示卤素原子(例如氯)，其位于苯环上相对于CH₂连接基团所连接的碳原子的4-位。

在本发明的另一实施方式中，R²表示甲基。

R³表示C₁-C₄烷基(例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基)。

通常，R³是甲基或乙基。

在本发明的另一实施方式中，m为1，R¹表示卤素原子，其位于苯环上相对于CH₂连接基团所连接的碳原子的4-位，R²表示氢或甲基，和R³表示C₁-C₄烷基。

在本发明另外的实施方式中，m为1，R¹表示卤素原子，其位于苯环上相对于CH₂连接基团所连接的碳原子的4-位，R²表示氢或甲基，和R³表示甲基或乙基。

在本发明另外的实施方式中，m为1，R¹表示氯原子，其位于苯环上相对于CH₂连接基团所连接的碳原子的4-位，R²表示甲基，和R³表示甲基或乙基。

在另一实施方式中，本发明的化合物包括以下化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂化物：

N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟丙基)氧基]-4-羟苯基}乙酰胺，

N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}乙酰胺，

N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟丙基)氧基]-4-羟苯基}丙酰胺，或

N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}丙酰胺。

本发明还提供制备以上所定义的式(I)化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂化物的方法，其包括

(a)使式(II)的化合物与式(III)的化合物反应，

式(II)中m和R¹如式(I)中所定义，

式(III)中R²和R³如式(I)中所定义，并且R⁴表示氢原子或合适的保护基；或者

(b)使式(IV)的化合物与式(V)的化合物反应，

式(IV)中m、R¹和R²如式(I)中所定义，

式(V)中R³如式(I)中所定义，以及R⁵表示氢原子或合适的保护基；或者

(c)使式(VI)的化合物与式(VII)的化合物反应，

式(VI)中m和R¹如式(I)中所定义，

式(VII)中R²和R³如式(I)中所定义，以及R⁶表示氢原子或合适的保护基；

并且任选地在(a)、(b)或(c)之后，形成式(I)的化合物的药学上可接受的盐或溶剂化物。

本发明的方法可便利地进行，在例如15℃以上的温度，例如20至120℃的温度，在溶剂，例如有机溶剂如醇(例如甲醇或乙醇)、烃(例如甲苯)、THF或乙腈中进行。

式(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)和(VII)的化合物或者是可商购的，文献中熟知的，或者可使用已知的技术容易地制备。

本领域的技术人员应该理解，在本发明的方法中，可能需要用保护基保护初始试剂或中间体化合物中的某些官能团例如羟基或氨基基团。因此，式(I)的化合物的制备可能涉及在合适的阶段除去一个或多个保护基。

官能团的保护和脱保护描述于J.W.F.McOmie编辑的′Protective Groupsin Organic Chemistry′，Plenum Press(1973)和′Protective Groups in OrganicSynthesis′，3rd edition，T.W.Greene and P.G.M.Wuts，Wiley-Interscience(1999)中。

可将以上式(I)的化合物转化成其药学上可接受的盐或溶剂化物，优选为酸加成盐例如盐酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐、硫酸盐、醋酸盐、抗坏血酸盐、苯甲酸盐、富马酸盐、半富马酸盐(hemifumarate)、糠酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、草酸盐、昔奈酸盐(xinafoate)、甲磺酸盐或对甲苯磺酸盐。药学上可接受的盐也包括内盐(两性离子的)形式。

本发明的一种实施方式涉及式(I)化合物的苯甲酸盐和式(I)化合物的糠酸盐。另一实施方式涉及N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}乙酰胺苯甲酸盐。另外的实施方式涉及N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}乙酰胺糠酸盐。

式(I)的化合物能够以立体异构的形式存在。应该理解，本发明包括式(I)化合物的所有的几何和光学异构体及其混合物(包括外消旋物)的使用或用途。互变异构体及其混合物的使用或用途也构成本发明的一方面。优选的光学异构体是(S)-对映体(即在R²和OH连接的立构中心具有S构型的化合物)。

本发明的一种实施方式涉及N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}乙酰胺苯甲酸盐(多晶型物A)，其在以下的d值处显示出至少以下的特征X射线粉末衍射(XRPD)峰：

6.0、16.3和19.1或

6.0、9.5、15.4、16.3和19.1或

6.0、14.9、19.1和24.2或

6.0、9.5、12.0、15.4、16.3和24.2或

6.0、12.0、14.9、15.4、16.3、19.1和24.2。

本发明涉及如图1中所示的XRPD峰。

本发明的另一实施方式涉及N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}乙酰胺苯甲酸盐(多晶型物B)，其在以下的d值处显示出至少以下的特征X射线粉末衍射(XRPD)峰：

5.6、10.4和14.3或

9.2、12.9、16.9、19.5和25.4或

5.6、9.2、11.3、14.3、16.9、20.0和23.0或

5.6、11.3、12.9、18.0、19.5和20.0、23.0、25.4或，

5.6、9.2、10.4、12.9、14.3、16.9、18.0、19.5、20.0和25.4或

5.6、9.2、1 0.4、11.3、12.9、14.3、16.9、18.0、19.5、23.0和25.4或

5.6、9.2、10.4、11.3、14.3、16.9、18.0、19.5、20.0、23.0和25.4或

5.6、9.2、10.4、11.3、12.9、14.3、16.9、18.0、19.5、20.0、23.0和25.4。

本发明涉及如图2中所示的XRPD峰。

本发明的另一实施方式涉及N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}乙酰胺糠酸盐(多晶型物A)，其在以下的d值处显示出至少以下的特征X射线粉末衍射(XRPD)峰：

6.4、16.8和18.1或

6.4、10.8、15.8、16.8、18.1和19.2或

6.4、9.8、10.8、15.5、15.8、16.8、17.4、18.1和25.7或

6.4、10.8、15.5、15.8、16.8、18.1、19.2、19.6和21.9或

6.4、10.8、15.5、15.8、16.8、18.1、19.2、19.6、21.9和25.7

6.4、9.8、10.8、15.5、15.8、16.8、18.1、19.2、19.6、21.9和25.7或

6.4、9.8、10.8、15.5、15.8、16.8、17.4、18.1、19.2、19.6、21.9和25.7。

本发明涉及如图3中所示的XRPD峰。

本发明的又一实施方式涉及N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}乙酰胺糠酸盐(多晶型物B)，其在以下的d值处显示出至少以下的特征X射线粉末衍射(XRPD)峰：

6.7、17.9和20.9或

12.2、13.3、17.9和18.6或

6.7、12.2、16.0、17.3和27.0或

6.7、8.7、12.2、13.3、16.0、17.9和18.6或

6.7、12.2、13.3、16.0、17.3、17.9、18.6、20.9和27.0或

6.7、12.2、133、13.6、15.5、16.0、17.3、17.9、18.6、19.4、20.9和27.3或

6.7、12.2、133、13.6、15.5、16.0、17.3、17.9、18.6、19.4、20.9、23.4和23.6或

6.7、12.2、13.3、13.6、15.5、16.0、17.3、17.9、18.6、19.4、20.9、23.4、23.6、27.0和27.3.

本发明涉及如图4中所示的XRPD峰。

所述盐的制备方法是可改变的。N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}乙酰胺的盐形式的制备包括：

(i)将合适纯度的N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}乙酰胺的游离碱或所述游离碱在合适溶剂中的溶液与纯形式的酸或所述酸在合适溶剂中的溶液(通常为0.5至1当量的酸)中的任何一种混合，

(iia)必要时冷却得到的盐溶液，使沉淀发生，或者

(iib)添加合适的抗溶剂，以使沉淀发生，或者

(iic)蒸发所述第一溶剂并加入新溶剂，并重复步骤(iia)或步骤(iib)，和

(iii)过滤和收集该盐。

所采用的化学计量、溶剂混合物、溶质浓度和温度是可以改变。可用于制备和/或结晶该盐形式的代表性溶剂包括但不限于乙醇、甲醇、糠酸、丁醇、异丙醇、二氯甲烷、丙酮、乙酸乙酯和乙腈。

本发明的另一实施方式提供基本上结晶(substantially crystalline)形式的本发明的苯甲酸盐和糠酸盐。

所制备的本发明的苯甲酸盐和糠酸盐可以为大于80％的结晶形式，“基本上结晶”是指包括大于20％，优选大于30％，还更优选大于40％(例如大于50、60、70、80或90％中的任何之一)结晶。一种实施方式涉及70％至90％，优选75％至85％的结晶形式的本发明的苯甲酸盐和糠酸盐。

本发明另一方面还提供部分结晶(partially crystalline)形式的本发明的苯甲酸盐和糠酸盐。“部分结晶”是指包括5％或5％至20％的结晶。

本领域的技术人员可利用X射线粉末衍射(XRPD)来测定结晶度(％)。也可使用其它技术，例如固态NMR、FT-IR、拉曼光谱、差示扫描量热(DSC)和微量热法(microcalorimetry)。

应该理解，式(I)的化合物及其盐可作为两性离子存在。因此，当以羟基形式表示和提及该化合物时，它们也可以内盐(两性离子的)形式存在。式(I)的代表性实例和本发明实例包括羟基和两性离子的形式及其它们的各种比例的混合物。

式(1)的化合物、其盐和多晶型物具有作为药物的活性，并且出乎意料地是趋化因子受体(尤其是CCR1受体)活性的强效调节剂，并且可用于治疗自身免疫性疾病、炎性疾病、增生性疾病和过度增生性疾病(hyperproliferative disease)，以及免疫介导的疾病(immunologically-mediateddiseases)。

本发明的化合物或其药学上可接受的盐可用于治疗：

1.呼吸道：气道阻塞性疾病，包括哮喘，包括支气管、过敏性、内源性、外源性、运动诱发性、药物诱发性(包括阿司匹林和NSAID诱发的)和粉尘诱发性哮喘，间歇性哮喘和持续性哮喘以及各种严重度的哮喘，及其它原因引起的气道高反应性；慢性阻塞性肺病(COPD)；支气管炎，包括传染性和嗜酸性支气管炎；肺气肿；支气管扩张；囊性纤维化；结节病；农民肺及相关疾病；超敏感性肺炎；肺纤维化，包括隐原性纤维化肺泡炎、特发性间质性肺炎、抗肿瘤治疗和慢性感染(包括结核病和曲霉病及其它真菌感染)并发的纤维化；肺移植的并发症；肺血管的血管炎和血栓形成疾病及肺动脉高压；镇咳活性，包括治疗与气道炎症和分泌情况相关的慢性咳嗽及医源性咳嗽；急性和慢性鼻炎，包括药物性鼻炎和血管运动性鼻炎；常年性(perennial)和季节性过敏性鼻炎，包括神经性鼻炎(花粉症)；鼻息肉病；急性病毒感染，包括普通感冒和由呼吸道合胞病毒、流行性感冒、冠状病毒(包括SARS)和腺病毒引起的感染；

2.骨和关节：与骨关节炎/骨关节病相关或包括骨关节炎/骨关节病的关节炎，包括原发性和继发性关节炎，例如先天性髋关节发育不良；颈和腰脊椎炎及腰背痛和颈部疼痛；类风湿性关节炎和斯蒂尔病(Still’s disease)；血清阴性脊柱关节病，包括强直性脊柱炎、牛皮癣性关节炎、反应性关节炎和未分化脊柱关节病；脓毒性关节炎和其它感染相关的关节病和骨疾病，例如结核病，包括波特病(Potts’disease)和蓬塞综合征(Poncet’s syndrome)；急性和慢性晶体性滑膜炎，包括尿酸盐沉积病、焦磷酸钙沉积病和钙磷灰石相关的腱、粘液囊和滑膜炎症；贝切特病(Behcet’s disease)；原发性和继发性斯耶格伦综合征(Sjogren’s syndrome)；全身性硬化和局限性硬皮病；系统性红斑狼疮、混合性结缔组织病和未分化结缔组织病；炎性肌病，包括皮肌炎和多肌炎；风湿性多肌痛；幼年型关节炎，包括分布在任何关节的特发性炎性关节炎及相关综合征和风湿热及其全身性并发症；血管炎(vasculitis)，包括巨细胞性动脉炎、高安动脉炎(Takayasu’s arteritis)、丘-施综合征(Churg-Strauss syndrome)、结节性多动脉炎、显微镜性多动脉炎和与病毒感染、超敏反应、冷球蛋白和异蛋白相关的血管炎；背下部疼痛；家族性地中海热、穆-韦综合征(Muckle-Wells syndrome)和家族性爱尔兰热(Familial Hibernian Fever)、菊池病(Kikuchi disease)；药物诱发性关节痛、腱炎和肌病；

3.由损伤(例如运动损伤)或疾病引起的疼痛和结缔组织再造的肌肉骨骼疾病：关节炎(例如类风湿性关节炎、骨关节炎、痛风或晶体性关节病)、其它关节疾病(例如椎间盘变性或颞下颌关节变性)、骨再造疾病(例如骨质疏松、佩吉特病(Paget’s disease)或骨坏死)、多软骨炎、硬皮病、混合性结缔组织病、脊椎关节病或牙周病(例如牙周炎)；

4.皮肤：牛皮癣、特应性皮炎、接触性皮炎或其它湿疹性皮肤病及迟发型超敏反应；植物性和光照性皮炎；脂溢性皮炎、疱疹样皮炎、扁平苔癣、萎缩性硬化性苔癣、坏疽性脓皮症、皮肤结节病、盘状红斑狼疮、天疱疮、类天疱疮、大疱性表皮松解、荨麻疹、血管性水肿、血管炎、中毒性红斑、皮肤嗜酸粒细胞增多、斑秃、男性型脱发、斯威特综合征(Sweet’ssyndrome)、韦-克综合征(Weber-Christian syndrome)、多形性红斑；蜂窝组织炎，包括传染性和非传染性蜂窝组织炎；脂膜炎；皮肤淋巴瘤、非黑素瘤皮肤癌和其它发育不良性损伤；药物诱发的疾病，包括固定性药疹；

5.眼：睑炎；结膜炎，包括常年性(perennial)或春季过敏性结膜炎；虹膜炎；前色素层炎和后色素层炎；脉络膜炎；自身免疫；影响视网膜的变性或炎性疾病；眼炎，包括交感性眼炎；结节病；感染，包括病毒、真菌和细菌感染；

6.胃肠道：舌炎、龈炎、牙周炎；食管炎，包括返流；嗜酸性胃肠炎、肥大细胞增多、克罗恩病(Crohn’s disease)、结肠炎包括溃疡性结肠炎、直肠炎、肛门瘙痒；腹部疾病、肠应激综合征，以及具有远离肠作用的食物相关的变态反应(例如偏头痛、鼻炎或湿疹)；

7.腹部：肝炎，包括自身免疫性、酒精性和病毒性肝炎；肝纤维化和硬化；胆囊炎；胰腺炎，包括急性和慢性胰腺炎；

8.生殖泌尿系统：肾炎，包括间质性和肾小球性肾炎；肾病综合征；膀胱炎，包括急性和慢性(间质性)膀胱炎和杭纳溃疡(Hunner’s ulcer)；急性和慢性尿道炎、前列腺炎、附睾炎、卵巢炎和输卵管炎；女阴阴道炎；佩伦涅病(Peyronie’s disease)；勃起机能障碍(男性和女性)；

9.同种异体移植物排斥：在例如肾脏、心脏、肝脏、肺脏、骨髓、皮肤或角膜移植后或在输血后出现的急性和慢性同种异体移植物排斥；或慢性移植物抗宿主病；

10.CNS：阿耳茨海默病(Alzheimer’s disease)和其它痴呆疾病包括CJD和nvCJD；淀粉样变性病；多发性硬化和其它脱髓鞘综合征；脑动脉粥样硬化和血管炎；颞动脉炎；重症肌无力；急性和慢性疼痛(急性、间歇性或持续性疼痛，无论是中枢源性的还是外周源性的)，包括内脏痛、头痛、偏头痛、三叉神经痛、不典型面痛、关节和骨痛、由癌症和肿瘤侵入引起的疼痛、神经性疼痛综合征包括糖尿病性、疱疹后和HIV相关的神经病；神经性肉样瘤病；恶性、感染性或自身免疫性过程的中枢和外周神经系统并发症；

11.其它自身免疫性和变态反应性疾病，包括桥本甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis)、格雷夫斯病(Graves’disease)、阿狄森病(Addison’sdisease)、糖尿病、特发性血小板减少性紫癜、嗜酸性筋膜炎、高IgE综合征、抗磷脂综合征；

12.其它带有炎性或免疫性组成的疾病，包括获得性免疫缺陷综合征(AIDS)、麻风病、塞扎里综合征(Sezary syndrome)和瘤外综合征；

13.心血管：影响冠脉和外周循环的动脉粥样硬化；心包炎；心肌炎；炎性和自身免疫性心肌病，包括心肌结节病；缺血性再灌注损伤；心内膜炎、心瓣炎和主动脉炎，包括传染性(例如梅毒性)的；血管炎；近端和外周静脉的疾病，包括静脉炎和血栓形成包括深静脉血栓形成及静脉曲张的并发症；

14.肿瘤：对一般癌症的治疗，包括前列腺、乳腺、肺、卵巢、胰腺、肠和结肠、胃、皮肤和脑肿瘤及影响骨髓(包括白血病)和淋巴增生系统(例如何杰金(Hodgkin’s)和非何杰金淋巴瘤)的恶性肿瘤；包括对转移性疾病和肿瘤复发及瘤外综合征的预防和治疗；和

15.胃肠道：腹部疾病、直肠炎、嗜酸性胃肠炎、肥大细胞增生、克罗恩病、溃疡性结肠炎、显微镜性结肠炎、不确定性结肠炎、肠应激病、肠应激综合征、非炎性腹泻、具有远离肠作用的食物相关的变态反应(例如偏头痛、鼻炎或湿疹)。

因此，另一方面，本发明提供上文所定义的式(I)的化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物或其多晶型物在治疗中的用途。

另一方面，本发明提供治疗患有呼吸系统疾病的患者或面临所述疾病危险的患者中所述疾病的方法，其包括对该患者给予治疗有效量的上文所定义的式(I)化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂化物、或其多晶型物。

另一方面，本发明提供上文所定义的式(I)化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂化物、或其多晶型物在制备用于治疗呼吸系统疾病的药物中的用途。

另一方面，本发明提供治疗患有气道疾病(airways disease)的患者或面临所述疾病危险的患者中所述疾病的方法，其包括对该患者给予治疗有效量的上文所定义的式(I)化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂化物、或其多晶型物。

另一方面，本发明提供治疗患有炎性疾病的患者或面临所述疾病危险的患者中所述疾病的方法，其包括对该患者给予治疗有效量的上文所定义的式(I)化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂化物、或其多晶型物。

另一方面，本发明提供上文所定义的式(I)化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂化物、或其多晶型物在制备用于治疗炎性疾病的药物中的用途。

另一方面，本发明提供上文所定义的式(I)化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂化物、或其多晶型物在制备用于治疗气道疾病的药物中的用途。

另一方面，本发明提供治疗患有呼吸系统疾病和/或哮喘的患者或面临所述疾病危险的患者中所述疾病的方法，其包括对该患者给予治疗有效量的上文所定义的式(I)化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂化物、或其多晶型物。

一种用于治疗炎性疾病、呼吸系统疾病和/或哮喘的药剂(agent)，其包括作为活性成分的式(I)化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂化物、或其多晶型物。

另一方面，本发明提供上文所定义的式(I)化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂化物、或其多晶型物在制备用于治疗哮喘或慢性阻塞性肺病的药物中的用途。

另一方面，本发明提供上文所定义的式(I)化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂化物、或其多晶型物在制备用于治疗对CCR1活性的调节是有利的人类疾病或病症的药物中的用途。

在本说明书上下文中，除非另有相反的明确说明，术语“治疗”还包括“预防”。因此术语“治疗的”和“治疗地”应该相应地解释。

对于上述治疗用途，给药剂量当然是随所采用的化合物、给药模式、所需给药方案以及适应症状而变化的。式(I)化合物的日剂量可为0.001mg/kg至30mg/kg。

式(I)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物可以单独使用，但是通常以药物组合物的形式给药，在所述药物组合物中式(I)化合物/盐/溶剂化物(活性成分)与药学上可接受的辅料、稀释剂或载体混合在一起。根据给药模式，药物组合物优选含有0.05-99重量％(重量百分比)、更优选0.05-80重量％、还更优选0.10-70重量％，尤其优选0.10-50重量％的活性成分，所有的重量百分比是基于整个组合物计算的。

本发明还提供一种药物组合物，其包括如上文所述的式(I)化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂化物，以及混合有药学上可接受的辅料、稀释剂或载体。

本发明进一步提供了制备本发明药物组合物的方法，所述方法包括将如上文所述的式(I)化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂化物与药学上可接受的辅料、稀释剂或载体混合。

该药物组合物可以局部给药(例如给药至肺和/或气道或至皮肤)，例如以溶液剂、混悬剂、七氟烷烃气雾剂和干粉制剂的形式局部给药；或者全身给药，例如以片剂、胶囊剂、糖浆剂、粉剂或颗粒剂的形式口服给药，或者以溶液剂或混悬剂的形式胃肠外给药；或者皮下给药；或者以栓剂的形式直肠给药；或者经皮给药。在本发明优选的实施方式中，本发明的化合物可通过吸入局部给药。

本申请中所定义的术语“稳定性”包括化学稳定性和固态稳定性。

“化学稳定性”是指包括：可在正常的贮存条件(normal storagecondition)，贮存分离形式(isolated form)的本发明盐或制剂形式的本发明盐，而没有显著程度的化学降解或分解，所述制剂形式混合有本发明的盐与药学上可接受的载体、稀释剂或辅料。

“固态稳定性”是指包括：可在正常的贮存条件，贮存分离形式的本发明盐或制剂形式的本发明盐，而没有显著程度的固态转化(solid statetransformation)(例如结晶、重结晶、固态相变、水合作用(hydration)、脱水作用(dehydration)、溶剂化(solvatisation)或去溶剂化(desolvatisation))，所述制剂形式混合有本发明的盐与药学上可接受的载体、稀释剂或辅料。

“正常的贮存条件”的实例包括-80℃至+50℃(优选为0至40℃，更优选为室温，例如15至30℃)的温度，0.1至2bar(巴)的压力(优选为大气压力)，5至95％(优选10至60％)的相对湿度，和/或暴露于460lux(勒克斯)的紫外/可见光，长时间(即多于或等于六个月)。可发现本发明的盐在这些条件下适当地有小于15％，更优选小于10％，尤其是小于5％的化学降解/分解，或固态转化。本领域的技术人员应该理解，上述温度、压力和相对湿度的上限和下限代表正常的贮存条件的极限，并且在正常贮存期间将不会经历这些极限的某些组合(例如50℃的温度和0.1bar的压力)。

将通过参考以下说明性实施例进一步说明本发明。

在Varian Unity Inova 400或Varian Mercury VX 300上记录¹H NMR光谱，以相对于内标四甲基硅烷(TMS)的δ值形式引用数据，单位为百万分率(ppm)。

氯仿-d(δ_H 7.27ppm)、丙酮-d₆(δH 2.05ppm)或DMSO-d₆(δ_H 2.50ppm)的中心溶剂峰(central solvent peak)用作内标。

在配备有APCI/ESI电离室的Agilent MSD 1100 LC-MS系统上记录低分辨率质谱和精确质量测定。

所有的溶剂和商购试剂都是实验室等级，并且按原样使用。

根据标准方法对所制备的样品进行X射线粉末衍射(XRPD)分析(参见Giacovazzo et al.eds.Fundamentals of Crystallography，Oxford UniversityPress(1992)；Jenkins & Snyder，eds.Introduction to X-Ray PowderDiffractometry，John Wiley & Sons，New York(1996)；Bunn，ed.ChemicalCrystallography，Clarendon Press，London(1948)；和Klug & Alexander eds.X-ray Diffraction Procedures，John Wiley & Sons，New York(1974))，并且如下所述获得：

将使用单色CuKα辐射(45kV和40mA)的Bragg-Brentano仲聚焦粉末X射线衍射仪用于该分析。第一光学器件包含Soller狭缝和自动发散狭缝(automatic divergence slit)。在测量期间旋转的零背景板(zero background plate)上制备扁平的样品。第二光学器件包含Soller狭缝、自动防散射狭缝、接收狭缝和单色器。衍射信号用成比例的氙气填充检测器检测。以连续的扫描模式，采集2°≤2θ≤40°之间的衍射图，扫描步幅为0.016°2θ，扫描速率为4°2θ/分钟。贮存电子形式的原始数据。对原始或平滑处理过的衍射图进行评价。

将反射模式的Panalytical X’pert PRO MPD θ-θ衍射仪用于上述测量。本领域的技术人员可设置粉末X射线衍射仪的仪器参数，从而使得能够采集与所提供的数据相当的衍射数据。

所使用化合物的命名由利用ACD/Name 8.00，Release Product Version8.05产生。

使用以下缩写：

DMSO 二甲基亚砜；

DMF N-二甲基甲酰胺；

THF 四氢呋喃；

TFA 三氟乙酸；

XRPD X射线粉末衍射

实施例1

N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}丙酰胺二-三氟乙酸盐

(i)N-(2-羟基-4-甲氧基苯基)丙酰胺

向2-羟基-4-甲氧基苯胺·HCl(600mg，3.4mmol)和三乙胺(3当量)在二氯甲烷(25mL)中的冰冷却溶液，逐滴加入丙酸酐(propionic anhydride)(1.1当量)。将该溶液在环境温度放置5h。用水淬灭该反应，分离各层，并用1NNaOH(水溶液)(3×25mL)提取有机相。用浓HCl将水相的pH调节至5，并用二氯甲烷(3×25mL)提取。将该有机相经无水硫酸钠干燥，过滤并真空除去溶剂，得到副标题的化合物，为褐色固体(555mg，83％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃-d₆)δ7.04(b)，6.83(d，J＝8.4，1H)，6.58(d，J＝2.8，1H)，6.43(dd，J₁＝8.4，J₂＝2.8，1H)，3.77(s，3H)，2.49(q，J＝7.6，2H)，1.29(t，J＝7.5，3H)；APCI-MS：m/z 196[MH⁺].

(ii)N-(5-氯-2-羟基-4-甲氧基苯基)丙酰胺

向N-(2-羟基-4-甲氧基苯基)丙酰胺(500mg，2.6mmol)和二甲基甲酰胺盐酸盐(1当量)在DMF(5mL)中的冰冷却溶液，分小份加入间氯过苯甲酸(MCPBA)(70％，1当量)。将该反应混合物再搅拌5分钟，然后用1M NaHCO₃(水溶液)(50mL)使其淬灭。用乙酸乙酯(50mL)洗涤水相。用水(3×25mL)洗涤有机相，过滤并真空除去溶剂，得到副标题的化合物，为紫色固体(408mg，71％)。

¹H NMR(300MHz，丙酮-d₆)δ9.68(b，1H)，9.12(b，1H)，7.37(s，1H)，6.62(s，1H)，3.83(s，3H)，2.49(q，J＝7.7，2H)，1.18(t，J＝7.5，3H)；APCI-MS：m/z 229[M⁺].

(iii)N-(5-氯-4-甲氧基-2-{[(2S)-甲基环氧乙烷-2-基]甲氧基}苯基)丙酰胺

将N-(5-氯-2-羟基-4-甲氧基苯基)丙酰胺(202mg，0.88mmol)，3-硝基苯磺酸[(2S)-2-甲基环氧乙烷-2-基]甲基酯(1当量)和碳酸铯(1.2当量)在DMF(4mL)中的悬浮液在室温搅拌4 h。将该混合物经水(50mL)和乙酸乙酯(50mL)分离。用水(2×30mL)洗涤有机相，过滤并真空除去溶剂，得到副标题化合物，为米黄色固体(249mg，95％)。

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ8.43(s，1H)，7.80(b，1H)，6.61(s，1H)，4.14(m，1H)，3.98(m，1H)，3.85(s，3H)，2.94(m，1H)，2.79(m，1H)，2.42(q，J＝7.6，2H)，1.47(s，3H)，1.25(t，J＝7.5，3H)；APCI-MS：m/z 299[MH⁺].

(iv)N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}丙酰胺二-三氟乙酸盐

向1-(4-氯苄基)-哌啶-4-基胺(50mg，0.2mmol)和N-(5-氯-4-甲氧基-2-{[(2S)-甲基环氧乙烷-2-基]甲氧基}苯基)丙酰胺(1当量)在乙腈(5mL)中的溶液中，加入高氯酸锂(10当量)。将该反应混合物回流18h。将该反应混合物倒到MEGA BE-SCX柱(Bond Elut，5g，20mL)上。首先用甲醇(3×10mL)洗涤该柱，接着用氨水/甲醇(1/20，3×10mL)的混合物洗涤。汇聚碱性层(basic layer)，并真空除去溶剂，得到N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟丙基)氧基]-4-甲氧基苯基}丙酰胺，为浅褐色油(100mg，86％)，将其再溶于二氯甲烷(4mL)中。将该溶液冷却至0℃，并逐滴加入1M BBr3的二氯甲烷溶液(1mL)。搅拌该反应18h，然后用甲醇将其淬灭。真空除去溶剂，并通过使用含有0.1％TFA的乙腈和水作为流动相梯度洗脱的反相制备型HPLC纯化残余物。冻干汇聚的部分，得到标题产品，为无定形白色固体(38mg，39％)。

¹H NMR(300MHz，丙酮-d₆)δ 8.66(宽峰)，8.09(3，1H)，7.60(d，J＝8.4，4H)，7.47(d，J＝8.4，4H)，6.78(s，1H)，4.41(s，2H)，4.10-3.93(m，2H)，3.70-3.65(m，4H)，3.44-2.39(m，1H)，3.20(m，2H)，2.52-2.37(m，6H)，1.38(s，3H)，1.10(t，J＝7.5，3H)；APCI-MS：m/z 510[MH⁺].

实施例2

N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}乙酰胺二-三氟乙酸盐

根据实施例1(i)中所述的方法，使2-羟基-4-甲氧基苯胺·HCl与乙酸酐(1.1当量)反应而制备。

¹H NMR(300MHz，丙酮-d₆)δ8.77(s，1H)，8.06(s，1H)，7.61(d，J＝8.2Hz，2H)，7.47(d，J＝8.6Hz，2H)，6.79(s，1H)，4.43(s，2H)，4.08(d，J＝9.9Hz，1H)，3.94(d，J＝9.9Hz，1H)，3.79-3.61(m，3H)，3.68(d，J＝12.5Hz，1H)，3.42(d，J＝12.7Hz，1H)，3.32-3.13(m，2H)，2.63-2.48(m，2H)，2.49-2.29(m，2H)，2.08(s，3H)，138(s，3H)；APCI-MS：m/z 496[MH⁺].

实施例3

N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}乙酰胺

将N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}乙酰胺二-三氟乙酸盐(2.77g)和氢氧化铵(28％的水溶液)(2当量)溶于乙腈(20mL)中。将该混合物在水(100mL)和二氯甲烷(150mL)之间萃取。用水(100mL)洗涤有机相三次，干燥并真空除去溶剂，得到N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}乙酰胺(1.56g，63％)，为所述化合物的游离碱。

¹H NMR(300MHz，丙酮-d₆)δ8.48(s，1H)，8.15(s，1H)，7.32(s，4H)，6.71(s，1H)，3.89(m，2H)，3.59(s，2H)，3.43(s，2H)，2.83-2.67(m，4H)，2.45-2.40(m，1H)，2.07(s，3H)，2.03-1.97(m，2H)，1.85-1.82(m，2H)，1.39-1.19(m，2H)，1.25(s，3H)；APCI-MS：m/z 496[MH⁺].

实施例4

N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}乙酰胺苯甲酸盐(多晶型物B)

将N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}乙酰胺(50mg)在乙腈(1mL)中的溶液温热至60℃。加入苯甲酸(2当量)在乙腈(1mL；40-70℃)中的溶液。将该混合物冷却至30℃，并用N-[2-[(2S)-3-[[1-[(4-氯苯基)甲基]-4-哌啶基]氨基]-2-羟基-2-甲基丙氧基]-4-羟苯基]-乙酰胺苯甲酸盐对该混合物进行种晶，然后使其冷却至室温，收集沉淀(多晶型物B)(30mg，48％)。

¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ9.02(s，1H)，7.94-7.92(m，2H)，7.76(s，1H)，7.57-7.54(m，2H)，7.47-7.43(m，2H)，7.37-7.35(m，2H)，7.30-7.27(m，2H)，6.63(s，1H)，3.80-3.74(m，2H)，3.40(s，2H)，2.80-2.72(m，4H)，2.00(s，3H)，1.95-1.89(m，2H)，1.82-1.80(m，2H)，1.34-1.31(m，2H)，1.20(s，3H)；APCI-MS：m/z 496[MH⁺]；mp(未校正的)111℃.

多晶型物B显示出至少图2中所示的特征X射线粉末衍射(XRPD)峰，(以2θ表示)(误差界限与以下文献一致：United States Pharmacopeia，25th ed.Rockville，MD：United States Pharmacopeial Convention；2002：2088-2089)。

实施例5

N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}乙酰胺苯甲酸盐(多晶型物A)

将N-{5-氯-2-[((2s)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}乙酰胺苯甲酸盐(24mg，多晶型物B，实施例4)悬浮于乙酸乙酯(4.2mL)和环己烷(7.8mL)的混合物中。从该混合物中取出1ml，并在40℃蒸发溶剂，然后收集固体(多晶型物A)并表征。

mp(未校正的)107℃.

多晶型物A显示出至少图1中所示的特征X射线粉末衍射(XRPD)峰，(以2θ表示)(误差界限与以下文献一致：United States Pharmacopeia，25th ed.Rockville，MD：United States Pharmacopeial Convention；2002：2088-2089)。

实施例6

N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}乙酰胺糠酸盐(多晶型物A)

将N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}乙酰胺(50mg)在乙腈(1mL)中的溶液加热至60℃。加入2-糠酸(2当量)在乙腈(1mL；40-70℃)中的溶液。使该混合物冷却至室温，并收集沉淀(多晶型物A)(49mg，78％)。

¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ9.04(s，1H)，7.76(s，1H)，7.74(s，1H)，7.38-7.28(m，4H)，6.96(m，1H)，6.64(s，1H)，6.54(m，1H)，3.81-3.76(m，2H)，3.42(s，2H)，2.94-2.63(m，5H)，2.01(s，3H)，1.96-1.86(m，4H)，1.43-1.41(m，2H)，1.23(s，3H)；APCI-MS：m/z 496[MH⁺]；mp(未校正的)143℃.

多晶型物A显示出至少图3中所示的特征X射线粉末衍射(XRPD)峰，(以°2θ表示)(误差界限与以下文献一致：United States Pharmacopeia，25th ed.Rockville，MD：United States Pharmacopeial Convention；2002：2088-2089)。

实施例7

N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}乙酰胺糠酸盐(多晶型物B)

向N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}乙酰胺(2.44g)在2-丁醇(50mL)中的溶液中，加入2-糠酸(2当量)在2-丁醇(25mL)中的溶液。使该混合物浆化15h，并收集沉淀(多晶型物B)(2.32g，78％)。

¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ9.04(s，1H)，7.76(s，1H)，7.74(s，1H)，7.38-7.28(m，4H)，6.96(m，1H)，6.64(s，1H)，6.54(m，1H)，3.81-3.76(m，2H)，3.42(s，2H)，2.94-2.63(m，5H)，2.01(s，3H)，1.96-1.86(m，4H)，1.43-1.41(m，2H)，1.23(s，3H)；APCI-MS：m/z 496[MH⁺]；mp(未校正的)167℃.

多晶型物B显示出至少图4中所示的特征X射线粉末衍射(XRPD)峰，(以2θ表示)(误差界限与以下文献一致：United States Pharmacopeia，25th ed.Rockville，MD：United States Pharmacopeial Convention；2002：2088-2089)。

实施例8

N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟丙基)氧基]-4-羟苯基}乙酰胺二-三氟乙酸盐

根据实施例1(iii)中所述的方法，使N-(5-氯-2-羟基-4-甲氧基苯基)乙酰胺与硝基苯磺酸S-(+)-缩水甘油基酯(S-(+)-glycidyl nosylate)(1当量)反应而制备。

¹H NMR(300MHz，丙酮-d₆)δ8.64(宽峰，NH)，8.21(s，1H)，7.59(d，J＝9.0Hz，2H)，7.47(d，J＝9.0Hz，2H)，6.74(s，1H)，4.41-4.35(m，3H)，4.13-4.01(m，2H)，3.69-3.40(m，5H)，3.14(m，2H)，2.55-2.47(m，2H)，2.31(m，2H)，2.09(s，3H)；APCI-MS：m/z 482[MH⁺].

实施例9

N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基丙基)氧基]-4-羟苯基}丙酰胺二-三氟乙酸盐

根据实施例1(iii)中所述的方法，使N-(5-氯-2-羟基-4-甲氧基苯基)丙酰胺与硝基苯磺酸S-(+)-缩水甘油基酯(1当量)反应而制备。

¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ10.05(宽峰)，9.78(宽峰)，9.79(宽峰)，9.00(宽峰)，8.88(宽峰)，7.79(m，1H)，7.62-7.50(m，4H)，6.63(s，1H)，5.98(宽峰)，4.29(m，2H)，4.16(m，1H)，3.95-3.88(m，2H)，341-2.97(m，7H)，2.35-2.22(m，4H)，1.82-1.75(m，2H)，1.07(m，3H)；APCI-MS：m/z 496[MH⁺].

人CCR1结合测定

膜

使用稳定表达重组人CCR1的HEK293细胞(HEK-CCR1)(获自ECACC)，制备包含CCR1的细胞膜。将膜贮存在-70℃。将每批次的膜浓度调整为10％特异性结合的33pM[¹²⁵I]MIP-1α。

结合测定

将HEK-CCR1膜稀释在添加有17500单位/L杆菌肽(Sigma，Cat NoB1025)的测定缓冲液pH 7.4(137mM NaCl(Merck，Cat No 1.06404)、5.7mM葡萄糖(Sigma，Cat No G5400)、2.7mM KCl(Sigma，Cat No P-9333)、0.36mMNaH₂PO₄×H₂O(Merck，Cat No 1.06346)、10mM HEPES(Sigma，Cat NoH3375)、0.1％(w/v)明胶(Sigma，Cat No G2625))中，将100μL此稀释液加至96孔过滤板(0.45μm不透明的Millipore cat no MHVB N4550)的每个孔中。添加12μL化合物的测定缓冲液(包含10％DMSO)，使最终化合物浓度为1×10^-5.5至1×10^-9.5M。某些孔(没有化合物)中包含12μl冷的人重组MIP-1α(270-LD-050，R&D Systems，Oxford，UK)(在补充有10％DMSO的测定缓冲液中的最终浓度为10nM)，作为非特异性结合对照(NSB)。将12μl具有10％DMSO的测定缓冲液加至某些孔(没有化合物)，以检测最大结合(B0)。

将[¹²⁵I]MIP-1α加至所有孔中，使其在测定缓冲液中稀释至各孔中的最终浓度为33pM。然后，在室温将带有盖的板孵育1.5小时。孵育之后，真空过滤(MultiScreen Resist Vacuum Manifold System，Millipore)清空各孔，用200μl测定缓冲液洗涤一次。洗涤之后，所有孔接受额外的50μL闪烁液(OptiPhase“Supermix”，Wallac Oy，Turko，Finland)。使用Wallac Trilux 1450MicroBeta计数器，测量结合的[¹²⁵I]MIP-1α。窗设置(windows setting)：低5-高1020，1分钟计数/孔。

计算置换百分比和IC₅₀

将以下方程式用于计算置换百分比。

置换百分比＝1-((cpm test-cpm NSB)/(cpm B0-cpm NSB))

其中

cpm test＝含有膜和化合物及[¹²⁵I]MIP-1α的一式两份孔中的平均cpm(每分钟的计数)；

NSB＝含有膜和MIP-1α及[¹²⁵I]MIP-1α(非特异性结合)的孔中的平均cpm；

B0＝含有膜和测定缓冲液及[¹²⁵I]MIP-1α(最大结合)的孔中的平均cpm。

使用基于Excel的程序XLfit(2.0.9版)，将数据拟合成4-参数logistics函数，推导出产生50％置换的化合物摩尔浓度(IC50)。

缩写

MIP 巨噬细胞炎性蛋白

HEK 人胚肾细胞

ECACC European Collection of Cell Cultures

HEPES N-(2-羟基乙基)哌嗪-N′-(2-乙磺酸，钠)

CCR1 趋化因子受体1

表1.本发明的实施例化合物与对应的对比例得到的结果

Claims

1.式(I)化合物，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，

其中

m为1或2；

每个R¹独立地表示卤素；

R²表示氢原子或甲基；和

R³表示C₁-C₄烷基。

2.权利要求1的化合物，其中m是1和R¹表示氯原子。

3.权利要求2的化合物，其中R¹是氯，其位于苯环上相对于CH₂连接基团所连接的碳原子的4-位。

4.前述权利要求中任一项的化合物，其中R²表示甲基。

5.前述权利要求中任一项的化合物，其中R³表示甲基。

6.权利要求1至4中任一项的化合物，其中R³表示乙基。

7.权利要求1至3中任一项的化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂化物，所述化合物为

8.N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}乙酰胺苯甲酸盐。

9.N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}乙酰胺糠酸盐。

10.N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}乙酰胺苯甲酸盐(多晶型物A)，其在d-值为6.0、16.3和19.1处显示出X射线粉末衍射峰。

11.N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}乙酰胺苯甲酸盐(多晶型物B)，其在d-值为5.6、10.4和14.3处显示出X射线粉末衍射峰。

12.N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}乙酰胺糠酸盐(多晶型物A)，其在d-值为6.4、16.8和18.1处显示出X射线粉末衍射峰。

13.N-{5-氯-2-[((2S)-3-{[1-(4-氯苄基)哌啶-4-基]氨基}-2-羟基-2-甲基丙基)氧基]-4-羟苯基}乙酰胺糠酸盐(多晶型物B)，其在d-值为6.7、17.9和20.9处显示出X射线粉末衍射峰。

14.制备权利要求1所定义的式(I)化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂化物的方法，其包括

(a)使式(II)的化合物与式(III)的化合物反应，

式(II)中m和R¹如式(I)中所定义，

(b)使式(IV)的化合物与式(V)的化合物反应，

式(IV)中m、R¹和R²如式(I)中所定义，

(c)使式(VI)的化合物与式(VII)的化合物反应，

式(VI)中m和R¹如式(I)中所定义，

15.药物组合物，其包括权利要求1-7中任一项所要求的式(I)化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂化物，或者权利要求8-13中任一项的化合物，以及混合有药学上可接受的辅料、稀释剂和/或载体。

16.制备权利要求15中所要求的药物组合物的方法，其包括将权利要求1-7中任一项所要求的式(I)化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂化物，或者权利要求8-13中任一项的化合物，与药学上可接受的辅料、稀释剂或载体混合。

17.权利要求1-7中任一项所要求的式(I)化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂化物，或者权利要求8-13中任一项的化合物，其用于治疗。

18.权利要求1-7中任一项所要求的式(I)化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂化物，或者权利要求8-13中任一项的化合物在制备用于治疗呼吸系统疾病的药物中的用途。

19.权利要求1-7中任一项所要求的式(I)化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂化物，或者权利要求8-13中任一项的化合物在制备用于治疗慢性呼吸系统疾病的药物中的用途。

20.权利要求1-7中任一项所要求的式(I)化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂化物，或者权利要求8-13中任一项的化合物在制备用于治疗哮喘的药物中的用途。

21.权利要求1-7中任一项所要求的式(I)化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂化物，或者权利要求8-13中任一项的化合物在制备用于治疗对CCR1的调节是有利的人类疾病或病症的药物中的用途。

22.治疗患有炎性疾病、呼吸系统疾病和/或哮喘的患者或面临所述疾病危险的患者中所述疾病的方法，其包括对该患者给予治疗有效量的权利要求1-7中任一项所要求的式(I)化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂化物，或者权利要求8-13中任一项的化合物。

23.一种治疗炎性疾病、呼吸系统疾病和/或哮喘的试剂，其包括权利要求1-7中任一项所要求的式(1)化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂化物，或者权利要求8-13中任一项的化合物作为活性成分。