CN101229223B - 补骨脂提取物在制备抗肿瘤药物中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了补骨脂提取物的一种新用途，特别涉及补骨脂提取物在制备抗肿瘤药物中的应用。所述提取物是用包括如下步骤的方法制备的：用水和/或有机溶剂作为提取剂，从补骨脂种子中提取得到补骨脂提取物。本发明所提供的补骨脂提取物的新用途，对制备抗肿瘤药物，尤其是抗肝癌药物具有重要的意义。

Description

补骨脂提取物在制备抗肿瘤药物中的应用
技术领域
本发明涉及补骨脂提取物在制备抗肿瘤药物中的应用。
背景技术
肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一，是我国位居第二的癌症“杀手”，常见于中年男性。因其恶性度高、病情进展快，病人早期一般没有什么不适，但一旦出现症状就诊，就已经属于中晚期。故肝癌的治疗难度大，一般患者发病后生存时间仅为6个月，人称“癌中之王”。
从植物中寻找高效低毒的抗癌药物，在国内外均为抗癌药物研究的重点。有效的抗癌化合物和中草药有效部位的抗癌复方制剂都具有重要的临床价值。
补骨脂Psoralea corylifolia linn.系豆科补骨脂属一年生直立草本植物，在我国分布广泛。据《中国植物志》记载，补骨脂以种子入药，有补肾壮阳、健脾健胃之功能，并可治牛皮癣等皮肤病，越南用其酒精浸出液治疗风湿病。对补骨脂的研究，国内外一般集中在治疗白癜风、银屑病等皮肤病，对心血管系统的影响，抗菌作用等。
发明内容
本发明的目的是提供补骨脂提取物的一种新用途。
本发明所提供的补骨脂提取物的新用途是补骨脂提取物在制备抗肿瘤药物中的应用；所述补骨脂提取物用包括如下步骤的方法制备：用水和/或有机溶剂作为提取剂，从补骨脂种子中提取得到补骨脂提取物。
其中，所述有机溶剂具体可为甲醇、乙醇、石油醚、氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、苯或甲苯；所述提取剂具体可为体积百分含量为95％的乙醇水溶液。
所述提取可为回流提取。
在所述提取中，提取温度可为60-100℃；可提取1次、2次或3次；每次提取的时间可为1-4小时。
所述补骨脂提取物的制备方法还包括如下步骤：将所得到的补骨脂提取物，用石油醚进行萃取，收集石油醚层，得到补骨脂提取物A部分。
所述补骨脂提取物的制备方法还包括如下步骤：将所述石油醚萃取得到的水相用氯仿进行萃取，收集氯仿层，得到补骨脂提取物B部分。
所述补骨脂提取物的制备方法还包括如下步骤：将所述氯仿萃取得到的水相用乙酸乙酯进行萃取，收集乙酸乙酯层，得到补骨脂提取物C部分。
在如上任一所述中，所述肿瘤具体可为肝癌。
根据如上应用方法所制备的预防和/或治疗肿瘤药物可通过注射、喷射、滴鼻、滴眼、渗透、吸收、物理或化学介导的方法导入机体如肌肉、皮内、皮下、静脉、粘膜组织；或是被其他物质混合或包裹后导入机体。
需要的时候，在上述药物中还可以加入一种或多种药学上可接受的载体。所述载体包括药学领域常规的稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂等。
如上制备的预防和/或治疗肿瘤药物可以制成注射液、片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、口服液、膏剂、霜剂等多种形式。上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。
上述预防和/或治疗肿瘤药物的用量一般为200-800mg补骨脂提取物/kg体重/天，疗程为12至15天。
本发明通过实验证明，补骨脂总提取物能够有效的抑制人肝癌细胞的生长，并且证明补骨脂总提取物的浓度为25ug/mL时抑制效果最好，抑制率可达96％，补骨脂总提取物在浓度低于25ug/mL时，随着其浓度的增大，抑制率逐渐增大；补骨脂总提取物在浓度高于25ug/mL时，随着其浓度的增大，抑制率逐渐降低。萃取得到的各部分补骨脂提取物的肝癌细胞生长抑制率依次是补骨脂A部分＞补骨脂C部分＞补骨脂B部分。因此本发明所提供的补骨脂提取物的新用途，对制备抗肿瘤药物，尤其是抗肝癌药物具有重要的意义。
具体实施方式
实施例1、补骨脂Psoralea corylifolia linn.提取物的制备及应用
一、补骨脂Psoralea corylifolia linn.提取物的制备
取补骨脂种子(北京同仁堂股份有限公司)200g，将其以1∶3(补骨脂种子∶95％乙醇)的重量份数比与95％乙醇(乙醇∶水＝95∶5，体积比)混合，60℃回流提取3次，每次回流提取时间为3h；将所得的提取液进行真空减压浓缩、真空干燥(去除乙醇和水)至恒重，得到13.5g补骨脂总提取物。
取上述制备的补骨脂总提取物10g，将其溶于200ml水，然后用200ml石油醚进行萃取，萃取三次，将三次收集的石油醚层合并，减压浓缩、真空干燥(去除石油醚)至恒重，即得到补骨脂A部分，收集剩余的水相，记作水相a；再将水相a用200ml氯仿进行萃取，萃取三次，将三次收集的氯仿层合并，减压浓缩、真空干燥(去除氯仿)至恒重，即得到补骨脂B部分，同时收集水相，记作水相b；将水相b用200ml乙酸乙酯进行萃取，萃取三次，将三次收集的乙酸乙酯层合并，减压浓缩、真空干燥(去除乙酸乙酯)至恒重，即得到补骨脂C部分，同时收集水相，记作水相c；将水相c用200ml正丁醇进行萃取，萃取三次，将三次收集的正丁醇层合并，减压浓缩、真空干燥(去除正丁醇)至恒重，即得到补骨脂D部分，同时收集水相，水相即为补骨脂E部分。
二、补骨脂提取物在抑制肝癌细胞生长中的应用
将对数生长的肝癌细胞HepG-2用0.25％的胰蛋白酶消化，然后用含10％(体积百分含量)胎牛血清的DMEM完全培养液制成细胞悬液，将肝癌细胞稀释至1.0×105个/mL，再将其接种至96孔培养板中，每孔200uL，于37℃，5％CO2的培养箱内培养24h；然后倾去各孔培养液。
将补骨脂总提取物和补骨脂A、B、C、D和E部分分别溶解于DMSO中，用DMEM完全培养液稀释成需要浓度，补骨脂总提取物浓度分别为12.5、25、50、100、200ug/mL和补骨脂A、B、C、D和E部分浓度均为50ug/mL，其中，DMSO含量为10％(体积百分含量)；将不同浓度的各提取物依次分别加入上述肝癌细胞的培养孔内，各自接种5个孔，每孔加入200ul；对照组为向上述肝癌细胞的培养孔内加入含10％(体积百分含量)DMSO的DMEM完全培养液至孔内体积200ul，也接种5个孔；空白组为向不含肝癌细胞的空培养孔内加入200ul的DMEM完全培养液；将其置于37℃，5％CO2的培养箱内培养2天。
2天后每孔加入20ul新鲜配制的5mg/ml四甲基偶氮唑盐(MTT)溶液，37℃，5％CO2继续培养4h。
小心弃上清，每孔加入200uL DMSO，室温放置15-20min，每5min振荡一次。
在酶标仪上测定波长490nm处的光密度值(OD值)，按公式计算肝癌细胞生长抑制率。抑制率(％)＝1-(OD实验-OD空白)/(OD对照-OD空白)×100％。
实验设三次重复。
不同浓度补骨脂总提取物对人肝癌细胞HepG-2的抑制作用的结果见表1。补骨脂A、B、C、D和E部分对人肝癌细胞HepG-2的抑制作用的结果见表2。
表1、不同浓度补骨脂总提取物对人肝癌细胞HepG-2的作用
  分组   浓度(ug/mL)   光密度(OD)   抑制率(％)
  对照组   0.254±0.071
  实验组   12.5   0.131±0.042   65.5
  25   0.073±0.002   96.2
  50   0.089±0.004   87.9
  100   0.140±0.021   60.6
  200   0.285±0.052   -16.5
  空白组   0.066±0.001
表2补骨脂A、B、C、D和E部分对人肝癌细胞HepG-2的作用
  分组   浓度(ug/mL)   光密度(OD)   抑制率(％)
  对照组   0.254±0.071
  补骨脂A部分   50   0.101±0.008   80.7
  补骨脂B部分   50   0.111±0.010   61.5
  补骨脂C部分   50   0.123±0.021   69.8
  补骨脂D部分   50   0.222±0.056   16.9
  补骨脂E部分   50   0.286±0.073   -16.9
  空白组   0.066±0.001
补骨脂总提取物的实验结果表明(表1)，补骨脂总提取物在浓度为25ug/mL时对人肝癌细胞HepG-2有最高的抑制作用，浓度低于25ug/mL或高于25ug/mL时对肝癌细胞HepG-2的抑制率都有所下降，且在浓度高达200ug/mL时，对肝癌细胞HepG-2不但没有抑制作用还有增加肝癌细胞生长的情况。因此，补骨脂总提取物在浓度低于25ug/mL时，随着其浓度的增大，抑制率逐渐增大；补骨脂总提取物在浓度高于25ug/mL时，随着其浓度的增大，抑制率逐渐降低。总结而言，在浓度低于25ug/mL时补骨脂总提取物对肝癌细胞HepG-2的抑制作用与其浓度呈正相关，在浓度高于25ug/mL时补骨脂总提取物对肝癌细胞HepG-2的抑制作用与其浓度呈负相关。实验得到了补骨脂总提取物对人肝癌细胞HepG-2抑制率达到最高时的浓度值为25ug/mL。
补骨脂A、B、C、D和E部分的抑制实验结果表明(表2)，石油醚萃取段(补骨脂A部分)、氯仿萃取段(补骨脂B部分)和乙酸乙酯萃取段(补骨脂C部分)对人肝癌细胞HepG-2均有显著的生长抑制作用，而正丁醇萃取段(补骨脂D部分)对人肝癌细胞HepG-2的抑制作用不明显，水段(补骨脂E部分)对人肝癌细胞HepG-2还有增加其生长作用。MTT实验结果表明，补骨脂中抑制肝癌细胞的活性成分主要集中在石油醚萃取段(补骨脂A部分)、氯仿萃取段(补骨脂B部分)和乙酸乙酯萃取段(补骨脂C部分)，即非极性部分(石油醚部分)和中等极性部分(氯仿、乙酸乙酯部分)，且非极性部分生物活性最高，而极性部分即正丁醇萃取段(补骨脂D部分)和水段(补骨脂E部分)活性很低甚至没有生物活性。
综上生物活性实验表明，补骨脂总提取物、石油醚萃取段(补骨脂A部分)、氯仿萃取段(补骨脂B部分)、乙酸乙酯萃取段(补骨脂C部分)对人的肝癌细胞均具有很好的抑制作用。

Claims (9)

1.补骨脂提取物在制备抗肿瘤药物中的应用；所述补骨脂提取物用包括如下步骤的方法制备：用水和/或有机溶剂作为提取剂，从补骨脂种子中提取得到补骨脂提取物；所述肿瘤为肝癌。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述有机溶剂为甲醇、乙醇、石油醚、氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、苯或甲苯；所述提取剂为体积百分含量为95％的乙醇水溶液。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述提取为回流提取。
4.根据权利要求1、2或3所述的应用，其特征在于：所述提取的温度为60-100℃。
5.根据权利要求1、2或3所述的应用，其特征在于：所述提取中，提取1次、2次或3次。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述提取中，每次提取的时间为1-4小时。
7.根据权利要求1、2或3所述的应用，其特征在于：所述补骨脂提取物的制备方法还包括如下步骤：将所得到的补骨脂提取物，用石油醚进行萃取，收集石油醚层，得到补骨脂提取物。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：所述补骨脂提取物的制备方法还包括如下步骤：将所述石油醚萃取得到的水相用氯仿进行萃取，收集氯仿层，得到补骨脂提取物。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：所述补骨脂提取物的制备方法还包括如下步骤：将所述氯仿萃取得到的水相用乙酸乙酯进行萃取，收集乙酸乙酯层，得到补骨脂提取物。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105920086A (zh) * 2013-10-30 2016-09-07 天津中医药大学 一种补骨脂提取物的制备方法及补骨脂提取物

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102228506A (zh) * 2011-06-16 2011-11-02 天津中医药大学 补骨脂提取物的组合物及其制备方法和用途
CN103408558B (zh) * 2013-07-18 2015-08-19 中国人民解放军第四军医大学 一种基于浊点萃取提取补骨脂素和异补骨脂素的方法
CN105315295A (zh) * 2015-04-16 2016-02-10 霍秀菊 一种从补骨脂中分离纯化补骨脂素和异补骨脂素的方法
CN105641188B (zh) * 2016-01-08 2019-10-08 浙江中医药大学附属第三医院 益骨口服液、益骨的化合物单体以及口服液的医药应用

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1255124C (zh) * 2002-11-21 2006-05-10 中国科学院上海药物研究所 补骨脂在制备抗幽门螺旋杆菌感染的药物中的应用

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1255124C (zh) * 2002-11-21 2006-05-10 中国科学院上海药物研究所 补骨脂在制备抗幽门螺旋杆菌感染的药物中的应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
罗艺晨等.中药补骨脂的研究进展.中兽医学杂志 5.2007,(5),49-53. *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105920086A (zh) * 2013-10-30 2016-09-07 天津中医药大学 一种补骨脂提取物的制备方法及补骨脂提取物

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