CN101411789B - 白木香果实及其提取物在制备抗肿瘤药物中的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及中药、天然药物领域，具体涉及白木香果实及其提取物，本发明还公开了它在制备抗肿瘤药物中的新用途。
Description
技术领域
本发明涉及中药、天然药物领域，具体涉及白木香果实及其提取物在制备抗肿瘤药物中的用途，本发明公开了它的制备方法和用于医药的用途。
背景技术
白木香[Aquilaria sinensis(Lour.)Gilg]为瑞香科(Thymelaeaceae)沉香属植物，是一种热带、亚热带常绿乔木，为我国特有的珍贵药用植物，现已被列为国家二级濒危保护树种。沉香属植物全世界约有15种，分布于印度、马来西亚以及亚洲东南部。我国仅产2种，分别是海南的白木香[Aquilaria sinensis(Lour.)Gilg]和云南沉香[Aquilaria yunnanensis S.C.Huang]。白木香含树脂的木材，称为国产沉香。国产沉香用途广泛，为我国传统中药，其味辛、苦，性微温，具行气止痛、温中止呕、纳气平喘的功效，用于胸腹胀闷疼痛、胃寒呕吐呃逆、肾虚气逆喘急。传统中医学及现有报道中用的无论是国产沉香还是进口沉香，都是白木香的木质部。然而不论是天然结香还是人工结香都比较困难，且耗费时间较长，很大程度限制沉香药材的应用。白木香为常绿乔木，其果实资源非常丰富，但国内外有关白木香果实药理活性均未见报道。
发明内容
本发明的目的是提供白木香果实新的医疗用途，即白木香果实及其提取物在制备抗肿瘤药物中的新用途。
本发明的内容是白木香果实提取物在制备抗癌药物中的新用途，所述用途特征在于：1、白木香果实提取物可通过下述步骤获得：白木香果实经冷浸、或渗漉、回流提取，将提取液减压回收即得，其中用于渗漉或回流提取的溶剂选自：水、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮中的一种或几种。即所用溶剂即可以是上述溶剂中的任何一种，也可以上上述任意几种的混合溶剂。优选的提取溶剂是水或乙醇。用乙醇提取时乙醇的浓度优选10～95％，进一步优选75％，均为重量百分比。2、白木香果实经冷浸或渗漉、回流提取后，溶液可进一步浓缩得浸膏，浸膏可添加适当的药用辅料，按常规的制剂工艺，即可制各种制剂；也可将浸膏进一步干燥后再制备成各种制剂。
本发明的白木香果实提取物经体外活性筛选，统计处理结果显示均有较好的抗肿瘤的活性。由白木香果实提取物的体外活性筛选结果和初步临床疗效观察可以推导白木香果实提取 物可用于制备抗癌药物，即白木香果实提取物在制备抗癌药物方面的新用途。
本发明的有益效果是提供了白木香在通常用于产香以外的新用途，即白木香果实提取物在制备抗肿瘤药物方面的新用途，对提取物添加适当的药用辅料，按常规的制剂工艺，即可制成口服和注射药物制剂。
一、体外活性筛选
下面是白木香果实提取物的体外活性筛选试验及其结果。
1.抗癌活性测试。采用MTT法对人胃癌细胞SGC-7901、慢性骨髓性白血病细胞K562、人口腔表皮癌细胞KB、骨纤维肉瘤HT-1080、肝癌细胞SMMC-7721等细胞株的体外抑瘤活性。MTT法即四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法。其原理为：MTT化学名3-(4，5-二甲基-2-噻唑)-2，5-二苯基溴化四唑，水溶液为黄色化合物，是一种接受氢离子的染料，作用于活细胞线粒体中的呼吸链，在琥珀酸脱氢酶和细胞色素C的作用下tetrazolium环开裂，生成蓝色的甲臜结晶(formazane)，formazane结晶的生成量仅与活细胞数目成正比(死细胞中琥珀酸脱氢酶消失，不能将MTT还原)。
2.活性测试方法为：实验设阴性对照组(水)、DMSO溶剂对照组、阳性对照组(丝裂霉素C)和8个不同浓度(0.1，0.2，0.4，0.8，1.6，3.2，6.3，12.5)的待测样品，每个浓度设3个平行。收集对数生长期细胞，血球计数板计数，按每孔4500个癌细胞量接种于96孔平底细胞培养板中，置于5％CO2、湿度90％以上、37℃温箱中培养。24h后取出加入一定量的待测样品，继续培养3d后取出置于显微镜下观察每孔细胞形态，记录细胞形态变化情况，接着每孔加入5mg/mL的MTT溶液(溶于平衡盐溶液PBS)50μL，37℃反应4h后，将细胞培养液吸出，每孔加入100μL DMSO将formazane充分溶解，将细胞培养板置于MK3酶标仪上，用570nm波长测各孔的吸光度(A)，按下列公式求生长抑制率。
以样品浓度为横坐标，以抑制率为纵坐标，作图并求出抑制率为50％时样品的浓度(IC50)，样品活性结果即以半数抑制浓度(IC50)表示。
3.活性测试结果为：
样品对K562S、GC-7901等肿瘤细胞株的毒性作用
注：毒性值IC50，即药物对细胞杀灭50％时的浓度值。IC50值越大则毒性越小。
二、初步临床疗效观察
下面是白木香果实提取物制剂治疗100例胃癌的临床疗效情况统计：
1.病例选择：
100例病人，均经各大医院确诊为胃癌晚期患者，其中男47例，女53例，年龄最小者35岁，最大者57岁。
2.治疗方法：
对确诊为胃癌晚期患者，给予本发明成药(约含0.01g白木香果实提取物胶囊)服用，一日二次，每次一粒，开水冲服。每40天为一个疗程，连续两个疗程后停药休息一周，详细观察病情变化进行检查。然后进行第三个疗程治疗，在服药期间停服其它药品。
3.疗效标准：
临床治愈：症状及客观检查阳性征象消失，连续半年无复发者。
临床显著：症状基本消失，癌灶缩小一半以上，其它客观检查有明显好转，观察半年以上不再发展者。
临床有效：症状有所改善，病灶基本稳定，观察在一个月以上者。
临床无效：症状及客观检查无改善，或仅有短期改善，而又迅速恶化者。
4.疗效观察结果：
本发明的优点是：
1、本发明无须煎煮，治疗方便，有效率达91％。
2、本发明能够控制癌细胞增生，防止癌细胞扩散，使癌细胞枯萎脱落消失。
具体实施方式
实施例1
取白木香果实500g，自然晾干粉碎后，用10倍量95％乙醇浸泡1小时，加热回流提取2次，每次1小时，收集合并滤液，回收乙醇，浓缩后干燥得提取物91.8克。将其打成细粉，混匀，装入胶囊。
实施例2
取白木香果实300g，自然晾干粉碎后，用10倍量75％乙醇，浸渍提取3次，每次1小时，收集合并滤液，回收乙醇，浓缩后干燥得提取物63.4克。加适量辅料，混匀，装入胶囊。
实施例3
取白木香果实400g，自然晾干粉碎后，用10倍量50％乙醇浸泡1小时，加热回流提取2次，每次1小时，收集合并滤液，回收乙醇，浓缩后干燥得提取物79.7克。将其打成细粉，混匀，过筛，分包制成散剂。
实施例4
取白木香果实300g，自然晾干粉碎后，用10倍量30％乙醇，渗漉提取2次，每次1小时，收集合并滤液，回收乙醇，浓缩后干燥得提取物70.5克。加适量辅料，混匀，装入胶囊。
实施例5
取白木香果实500g，自然晾干粉碎后，用10倍量10％乙醇浸泡1小时，反复提取3次，每次1小时，收集合并滤液，回收乙醇，浓缩后干燥得提取物89.7克。将其打成细粉，混匀，过筛，分包制成散剂。
Claims (3)
1.白木香果实提取物在制备抗肿瘤药物中的用途，其特征在于所述白木香为瑞香科沉香属(Aquilaria)植物白木香[Aquilaria sinensis(Lour.)Gilg]，白木香果实提取物通过如下步骤获得：白木香果实经多次渗漉或回流提取，再浓缩干燥即得，其中用于渗漉或回流提取的溶剂是10～95％的乙醇，为重量百分比。
2.根据权利要求1所述的用途，其中乙醇浓度为75％。
3.根据权利要求1或2所述用途，其特征在于：将白木香果实提取物，添加适当的药用辅料，按常规的制剂工艺，制成片剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸剂、口服液、冻干粉针、水针。
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